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SF/HGF-c-Met autocrine and paracrine promote metastasis of hepatocellular carcinoma 被引量:24
1
作者 Qian Xie Kang-Da Liu Mei-Yu Hu Kang Zhou Experimental Research Center of Zhongshan Hospital,Fudan University,Shanghai,200032,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2001年第6期816-820,共5页
AIM: To explore the role of SF/HGF-Met autocrine and paracrine in metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: SF/HGF and c-met transcription and protein expression in HCC were examined by RT-PCR and Western... AIM: To explore the role of SF/HGF-Met autocrine and paracrine in metastasis of hepatocellular carcinoma (HCC). METHODS: SF/HGF and c-met transcription and protein expression in HCC were examined by RT-PCR and Western Blot in 4 HCC cell lines, including HepG2, Hep3B, SMMC7721 and MHCC-1, the last cell line had a higher potential of metastasis. sf/hgf cDNA was transfected by the method of Lipofectin into SMMC7721. SF/HGF and c-met antibody were used to stimulate and block SF/HGF-c-met signal transduction. Cell morphology, mobility, and proliferation were respectively compared by microscopic observation, wound healing assay and cell growth curve. RESULTS: HCC malignancy appeared to be relative to its met-SF/HGF expression. In MHCC-1, c-met expression was much stronger than that in other cell lines with lower potential of metastasis and only SF/HGF autocrine existed in MHCC-1. After sf/hgf cDNA transfection or conditioned medium of MHCC-1 stimulation, SMMC7721 changed into elongated morphology, and the abilities of proliferation (P 【 0.05) and mobility increased. Such bio-activity could be blocked by c-met antibody (P 【 0.05). CONCLUSION: The system of SF/HGF-c-met autocrine and paracrine played an important role in development and metastasis potential of HCC. Inhibition of SF/HGF-c-met signal transduction system may reduce the growth and metastasis of HCC. 展开更多
关键词 Autocrine Communication Carcinoma Hepatocellular Hepatocyte Growth factor Humans Liver Neoplasms paracrine Communication Proto-Oncogene Proteins c-met Research Support Non-U.S. Gov't Tumor Cells Cultured
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Regulation of spermatogenesis by paracrine/autocrine testicular factors 被引量:22
2
作者 Mahmoud Huleihel Eitan Lunenfeld 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期259-268,共10页
Spermatogenesis is a complex process regulated by endocrine and testicular paracrine/autocrine factors. Gonadotropins are involved in the regulation of several testicular paracrine factors, mainly of the IL-1 family a... Spermatogenesis is a complex process regulated by endocrine and testicular paracrine/autocrine factors. Gonadotropins are involved in the regulation of several testicular paracrine factors, mainly of the IL-1 family and testicular hormones. Testicular cytokines and growth factors (such as IL-1, IL-6, TNF, IFN-γ, LIF and SCF) were shown to affect both the germ cell proliferation and the Leydig and Sertoli cells functions and secretion. Cytokines and growth factors are produced by immune cells and in the interstitial and seminiferous tubular compartments by various testicular cells, including Sertoli, Leydig, peritubular cells, spermatogonia, differentiated spermatogonia and even spermatozoa. Corresponding cytokine and growth factor receptors were demonstrated on some of the testicular cells. These cytokines also control the secretion of the gonadotropins and testosterone in the testis. Under pathological conditions the levels of pro-inflammatory cytokines are increased and negatively affected spermatogenesis. Thus, the expression levels and the mechanisms involved in the regulation of testicular paracrine/autocrine factors should be considered in future therapeutic strategies for male infertility. 展开更多
关键词 SPERMATOGENESIS paracrine AUTOCRINE CYTOKINE growth factor
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肿瘤环境下脂肪间充质干细胞旁分泌因子促进结肠癌细胞侵袭 被引量:7
3
作者 陈冬梅 刘淑丹 +3 位作者 马会明 刘晓明 梁雪云 魏军 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第1期36-41,共6页
目的确定肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞(h AMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系。方法体外分离培养AMSCs,收集培养上清液制备条件培养基,用于培养HCT116细胞。利用Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞。通过检测穿透人工... 目的确定肿瘤环境下人类脂肪间充质干细胞(h AMSCs)的旁分泌特征变化与肿瘤细胞侵袭的关系。方法体外分离培养AMSCs,收集培养上清液制备条件培养基,用于培养HCT116细胞。利用Transwell培养板共培养AMSCs与HCT116细胞。通过检测穿透人工基底胶(Matrigel胶)的能力比较两种培养条件下HCT116细胞侵袭能力的差异。实时荧光定量PCR检测HCT116细胞上皮间质转化(EMT)相关基因的表达变化。ELISA法检测共培养后AMSCs基因表达和旁分泌因子表达变化。结果结肠癌细胞系HCT116与AMSCs的Transwell共培养系统中,HCT116细胞的侵袭能力较AMSCs条件培养液培养显著增强。同时结肠癌细胞系HCT116构成的肿瘤微环境也影响了AMSCs旁分泌因子表达的变化,其中成纤维生长因子10(FGF10)、血管内皮生长因子C(VEGFC)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素10(IL-10)的表达较正常培养条件下显著上调。结论肿瘤微环境影响下的AMSCs旁分泌因子表达改变,这些变化能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 转移性 旁分泌因子 脂肪间充质干细胞 结肠癌
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生长板相关的儿童原发性生长障碍 被引量:1
4
作者 朱高慧 朱岷 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2023年第11期823-828,共6页
生长板是位于骨骺和骨干之间的软骨组织,主要由软骨细胞和细胞外基质组成,是软骨内成骨和骨纵向生长的关键区域。近年来的研究发现生长激素(GH)-胰岛素样生长因子(IGF)-1轴只是生长板中软骨生成的众多调节系统之一,因此,儿童的正常生长... 生长板是位于骨骺和骨干之间的软骨组织,主要由软骨细胞和细胞外基质组成,是软骨内成骨和骨纵向生长的关键区域。近年来的研究发现生长激素(GH)-胰岛素样生长因子(IGF)-1轴只是生长板中软骨生成的众多调节系统之一,因此,儿童的正常生长不仅取决于GH和IGF-1,还取决于多种激素、旁分泌因子、细胞外基质分子和调节生长板软骨细胞的细胞内蛋白。生长板的线性增长是软骨细胞增殖、肥大和细胞外基质分泌共同作用的结果,并由机械载荷、年龄等宏观调控和局部旁分泌、内分泌因子、细胞外基质等微观调控组成的复杂网络完美协调,调控异常所致的生长板结构和功能受损与儿童生长障碍直接相关。 展开更多
关键词 生长障碍 生长板 生长激素-胰岛素样生长因子轴 细胞内信号 旁分泌因子
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间充质干细胞治疗糖尿病肾病 被引量:2
5
作者 张颖超 米焱(综述) +1 位作者 王彩丽 李礼(审校) 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期460-464,共5页
糖尿病肾病是糖尿病的主要微血管并发症,也是许多终末期肾病的重要病因,伴随严重肾损害的同时增加了心血管疾病的危险。其发病机制相当复杂,主要病理改变为细胞外基质沉积,肾小球基膜增厚、肾小球硬化和系膜扩张以及纤维化。间充质干细... 糖尿病肾病是糖尿病的主要微血管并发症,也是许多终末期肾病的重要病因,伴随严重肾损害的同时增加了心血管疾病的危险。其发病机制相当复杂,主要病理改变为细胞外基质沉积,肾小球基膜增厚、肾小球硬化和系膜扩张以及纤维化。间充质干细胞疗法作为治疗糖尿病肾病十分有前景的治疗方案,除了具有多分化潜能和自我更新能力外,旁分泌功能十分重要。本文综述了间充质干细胞治疗糖尿病肾病的潜力,主要为间充质干细胞旁分泌营养因子和细胞外囊泡的机制。对间充质干细胞治疗糖尿病肾病机制的探讨可为该病的临床治疗提供新的治疗策略。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 间充质干细胞 旁分泌 营养因子 细胞外囊泡
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MAD2B与TCF4相互作用及其对毛乳头细胞功能的影响 被引量:1
6
作者 张可洲 熊亚 +3 位作者 杨希川 宋志强 钟白玉 郝飞 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1071-1075,共5页
目的探讨MAD2B基因过表达对毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)生物学功能的影响。方法构建真核表达载体pIRES2-MAD2B和pIRES2-TCF4质粒,在LipofectamineTM2000脂质体的介导下转染毛乳头细胞,荧光显微镜下观察转染效率,使用Western ... 目的探讨MAD2B基因过表达对毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)生物学功能的影响。方法构建真核表达载体pIRES2-MAD2B和pIRES2-TCF4质粒,在LipofectamineTM2000脂质体的介导下转染毛乳头细胞,荧光显微镜下观察转染效率,使用Western blot检测目的蛋白的表达,并验证两种蛋白的相互作用,比较细胞增殖状况,Wnt通路信号强度,毛乳头分泌胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)、肝细胞生长因子(hepatocyte growth-promoting factors,HGF)的变化情况。结果成功构建pIRES2-MAD2B和pIRES2-TCF4重组质粒,且转染后发现MAD2B和TCF4蛋白过表达于毛乳头细胞。免疫共沉淀实验结果提示在凝集生长的毛乳头细胞中存在相互作用的MAD2B和TCF4蛋白质复合物。在MAD2B过表达于毛乳头细胞之后,发现Wnt途径信号通路强度下调。CCK-8实验结果提示MAD2B过表达后细胞增殖活性下降,与对照组比较有统计学差异(P<0.05);同时实时荧光定量PCR检测结果显示,与对照组相比,IGF-1、VEGF、HGF mRNA的表达有所下降(P<0.05)。结论免疫共沉淀提示MAD2B与TCF4在毛乳头细胞中存在相互作用,MAD2B过表达后可能通过抑制Wnt信号通路而对毛乳头细胞增殖和其旁分泌因子IGF-1、VEGF、HGF产生抑制作用。 展开更多
关键词 MAD2B TCF4 毛乳头细胞 旁分泌因子 WNT
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间充质干细胞旁分泌作用治疗阿尔茨海默病的临床前研究进展 被引量:1
7
作者 冯培培 陈宇 +6 位作者 陈语湛 韩舒宁 蒋悦 冯佳婷 鲁承皓 候瑞霞 竺亚斌 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第8期1428-1436,共9页
阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常见的神经退行性疾病之一,严重损害患者的记忆和认知能力。研究者经过多年探索仍无法找到治愈AD的有效药物。源于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌的生长因子、细胞因子、... 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常见的神经退行性疾病之一,严重损害患者的记忆和认知能力。研究者经过多年探索仍无法找到治愈AD的有效药物。源于间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌的生长因子、细胞因子、趋化因子等生物因子及外泌体具有抗炎、清除β-淀粉样蛋白(β-amyloid peptide,Aβ)、促进神经生长以及抑制细胞凋亡等作用,MSCs的旁分泌作用被认为是治疗AD最有前途的临床疗法之一。该文首先总结了AD的发病机制,然后根据MSCs所具有的特征和优势,综述了利用MSCs的旁分泌作用治疗AD的临床前研究,期望为将来临床上治疗AD提供有价值的信息。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 间充质干细胞 旁分泌因子 外泌体 临床前研究
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胶质瘤细胞的自分泌或旁分泌因子对肿瘤增殖的调控作用 被引量:1
8
作者 牛万祥 牛朝诗 《中华解剖与临床杂志》 2017年第4期337-340,共4页
目的 探讨胶质瘤微环境中的多种肿瘤自分泌/旁分泌因子对肿瘤细胞增殖的调控作用.方法 应用PubMed、CNKI及谷歌学术数据库以"胶质瘤""自分泌/旁分泌""肿瘤增殖"为关鍵词,查阅2004年1月-2016年5月国内外文献,就胶质瘤自分泌/旁分... 目的 探讨胶质瘤微环境中的多种肿瘤自分泌/旁分泌因子对肿瘤细胞增殖的调控作用.方法 应用PubMed、CNKI及谷歌学术数据库以"胶质瘤""自分泌/旁分泌""肿瘤增殖"为关鍵词,查阅2004年1月-2016年5月国内外文献,就胶质瘤自分泌/旁分泌中的多种因子与胶质瘤细胞增殖之间的关系进行归纳总结.结果 胶质瘤微环境中,生长因子、细胞因子、趋化因子、非肽类因子、甾体激素等多种因子参与了肿瘤自分泌/旁分泌的信号环路,调控胶质瘤细胞增殖、侵袭、扩散等多种生物学活动.结论 对胶质瘤微环境中的自分泌/旁分泌的机制研究,为胶质瘤的发病机制研究以及临床诊断和治疗提供了新的途径. 展开更多
关键词 胶质瘤 自分泌因子 旁分泌因子 生长因子 细胞因子 趋化因子 甾体激素 肿瘤增殖
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年轻Sca-1骨髓干细胞对年老小鼠心外膜细胞衰老的调控作用及机制研究
9
作者 董珺 吕饶 +6 位作者 高芳 于佳迪 李柳蓁 湛楚蓝 李月亮 刘慰华 黎佼 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第23期2914-2918,共5页
目的探讨年轻Sca-1骨髓干细胞对年老小鼠心外膜细胞衰老的调控作用及机制。方法将年轻和年老小鼠Sca-1骨髓干细胞分别与年老小鼠心外膜细胞共培养(分为Y Sca-1细胞组与O Sca-1细胞组)。通过细胞染色、基因及蛋白检测,探讨Sca-1骨髓干细... 目的探讨年轻Sca-1骨髓干细胞对年老小鼠心外膜细胞衰老的调控作用及机制。方法将年轻和年老小鼠Sca-1骨髓干细胞分别与年老小鼠心外膜细胞共培养(分为Y Sca-1细胞组与O Sca-1细胞组)。通过细胞染色、基因及蛋白检测,探讨Sca-1骨髓干细胞对年老小鼠心外膜细胞衰老的影响。结果与O Sca-1细胞组相比,Y Sca-1细胞组可明显减少心外膜细胞衰老:P16免疫荧光染色阳性细胞比例下降;P27基因及蛋白表达减少;Sirt 1基因及蛋白表达增加(P<0.05)。分子机制研究发现,与O Sca-1细胞相比,Y Sca-1细胞可旁分泌更多的GDNF(P<0.05)。中和GDNF后,使Y Sca-1细胞失去减少年老心外膜细胞衰老的作用。结论年轻Sca1骨髓干细胞可通过旁分泌GDNF减少年老心外膜细胞衰老。 展开更多
关键词 干细胞 心外膜细胞 衰老 旁分泌 生长因子
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从异位子宫内膜分离获得的内膜干细胞的生物学特点 被引量:1
10
作者 梁盛英 王红梅 +4 位作者 杨芬 孙钰椋 刘彦礼 杨君 林俊堂 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期438-444,共7页
目的建立子宫内膜异位症(内异症)患者异位病灶来源子宫内膜干细胞(En SCs)的分离培养及鉴定方法,并对所分离细胞的生物学特性进行检测,为研究En SCs在内异症发病机制中的潜在作用提供支持。方法收集临床内异症患者异位病灶内膜组织样本... 目的建立子宫内膜异位症(内异症)患者异位病灶来源子宫内膜干细胞(En SCs)的分离培养及鉴定方法,并对所分离细胞的生物学特性进行检测,为研究En SCs在内异症发病机制中的潜在作用提供支持。方法收集临床内异症患者异位病灶内膜组织样本,机械剪碎后Ⅰ型胶原酶消化,分离获得异位En SCs,常规培养传代(n=10);免疫荧光检测细胞波形蛋白(vimentin)的表达(n=3);MTT法检测细胞增殖活性(n=5);成脂成骨诱导检测细胞多向分化潜能(n=3),流式细胞仪检测细胞表面标志物(n=3);蛋白芯片检测细胞条件培养基中促血管再生因子及相关炎症因子的分泌(n=6),同时检测细胞表面相关黏附分子的表达(n=7)。结果成功从异位病灶中分离获得异位En SCs,所分离细胞强阳性表达骨架蛋白vimentin,且细胞阳性表达间充质干细胞表面标志物CD29、CD73、CD90及CD105,阴性表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45;经成脂诱导分化后油红O染色可见明显脂滴,成骨诱导分化后茜素红染色可见明显钙结节;蛋白芯片检测结果表明,异位En SCs能够分泌高浓度的促血管再生因子血管内皮生长因子(VEGF)、血管紧张素(ANG)及血小板衍生生长因子(PDGF)-AA,以及与促血管再生密切相关的炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),且细胞表面高表达活化白细胞黏附分子(ACLAM)和细胞间黏附分子-1(ICAM-1)。结论本研究成功建立内异症患者异位病灶来源En SCs的分离培养及鉴定方法;对其活性因子分泌的研究表明,异位En SCs具有明显的促血管再生作用。上述实验结果肯定了内异症患者异位病灶中干细胞的存在,在支持内异症发病机制中"干细胞学说"的同时,为进一步围绕异位En SCs开发潜在的内异症治疗靶点提供可能。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 旁分泌作用 黏附因子 免疫荧光 流式细胞术 异位子宫内膜干细胞
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心脏干细胞治疗心肌梗死的优化策略 被引量:1
11
作者 曹瑞 谭妙欣 +1 位作者 孙勇 吴健 《心脏杂志》 CAS 2015年第5期624-628,共5页
近20年来,急性心肌梗死(AMI)的诊断和治疗取得了长足进展。干细胞移植作为一种新的治疗手段,能够改善AMI后心衰患者的心脏功能。而心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)作为一类来源于心脏的干细胞,具有自我更新、无性繁殖和多向分化的... 近20年来,急性心肌梗死(AMI)的诊断和治疗取得了长足进展。干细胞移植作为一种新的治疗手段,能够改善AMI后心衰患者的心脏功能。而心脏干细胞(cardiac stem cells,CSCs)作为一类来源于心脏的干细胞,具有自我更新、无性繁殖和多向分化的能力,移植到受损心脏后,能改善心脏重构、减小梗死面积、改善心功能,通过改善旁分泌功能、基因修饰、组织工程及联合干细胞移植等手段,能进一步提高心脏干细胞的疗效,为我们提供了新的治疗策略。 展开更多
关键词 心脏干细胞 心肌梗死 旁分泌因子 基因修饰 组织工程
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旁分泌因子促进家畜卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的研究 被引量:1
12
作者 梁成光 韩哲 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2019年第4期427-434,共8页
1984年,旭日干先生在日本成功培育出世界首例试管山羊,开创了体外受精技术引领的家畜品种改良新时代.之后,旭日干先生带领内蒙古大学科研团队,在1989年培育出了中国首例首批试管牛和试管羊.在此基础上,人们不断优化体外卵母细胞成熟、... 1984年,旭日干先生在日本成功培育出世界首例试管山羊,开创了体外受精技术引领的家畜品种改良新时代.之后,旭日干先生带领内蒙古大学科研团队,在1989年培育出了中国首例首批试管牛和试管羊.在此基础上,人们不断优化体外卵母细胞成熟、受精和胚胎发育的技术路线,摸索出更高效的试管动物制备方法.卵母细胞体外成熟技术是制备试管动物的关键技术之一.在生理条件下,卵巢内的卵母细胞成熟过程受到众多激素和旁分泌因子的调控.人们通过在体外培养体系中添加相应的激素和旁分泌因子,以期提高卵母细胞体外成熟效率.最近,我们发现,旁分泌因子GDNF可以提高牛卵母细胞体外成熟和早期胚胎体外发育效率;CTGF,SDF-1,HGF,NGF四种因子的组合使用可以提高绵羊卵母细胞体外成熟和早期胚胎体外发育效率.本文将综述这些旁分泌因子对卵母细胞成熟和胚胎发育的促进作用,并提出相关领域未来的研究和应用方向. 展开更多
关键词 旁分泌因子 家畜 卵母细胞体外成熟 早期胚胎发育
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低氧条件下人脂肪间充质干细胞旁分泌因子对缺血性脑卒中动物模型有效性研究 被引量:1
13
作者 赵成 王肇光 +4 位作者 刘丽瑜 陶云龙 潘超 刘鹏 姚建国 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2020年第5期5-12,共8页
目的探究人脂肪间充质干细胞旁分泌因子(adipose-derived stem cell paracrine factor,ASCF)对缺血性脑卒中动物模型治疗有效性的影响,为缺血性脑卒中寻找具有前景的治疗方法。方法从人脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞(adipose-derived ... 目的探究人脂肪间充质干细胞旁分泌因子(adipose-derived stem cell paracrine factor,ASCF)对缺血性脑卒中动物模型治疗有效性的影响,为缺血性脑卒中寻找具有前景的治疗方法。方法从人脂肪组织中提取脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells ADSCs),超滤浓缩获得ASCF并进行鉴定。将32只成年雄性SD大鼠分成4组[空白组8只、模型组(脑部注射生理盐水)8只、低剂量组(脑部注射因子:3μg·只-1)8只、高剂量组(脑部注射因子:6μg·只-1)8只],造模成功后对各组别动物模型进行不同浓度因子注射,检测动物行为学运动功能变化(转棒实验、吊绳、爬网格、水迷宫实验),对动物脑部进行解剖并进行HE染色,比较两半脑球面积及查看脑部细胞状态,比较不同组别实验鼠脑卒中恢复情况。结果各造模组行为学表现均有一定程度恢复,给药组(高剂量组、低剂量组)表现总体优于模型组,其中给药后3 d的网格检测,给药组中高剂量组大鼠运动能力恢复情况显著高于模型组(P<0.05);给药后的3、7、28 d的网格检测实验及给药后14 d的转棒实验,给药组中低剂量组大鼠运动能力恢复情况显著高于模型组(P<0.05)。病理切片HE染色结果发现:两给药组动物模型脑部细胞恢复速度均优于模型组;脑部缺失面积分析发现:给药组(低剂量组、高剂量组)大鼠脑缺失情况较模型组偏低(其中高剂量组P<0.05,低剂量组P>0.05)。结论ASCF对SD大鼠缺血性脑卒中具有一定的治疗作用。 展开更多
关键词 脂肪间充质干细胞 旁分泌因子 缺血性脑卒中 动物 实验 大鼠
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肿瘤间质细胞分泌成纤维生长因子10促进结肠癌细胞侵袭
14
作者 刘淑丹 陈冬梅 +3 位作者 马会明 荣诗阔 刘晓明 梁雪云 《医学研究杂志》 2018年第6期52-57,共6页
目的确定结肠肿瘤间质细胞的旁分泌因子FGF10对肿瘤细胞侵袭的影响。方法体外分离培养结肠肿瘤间质细胞,ELISA检测其FGF10的表达,并与结肠癌细胞系HCT116和SW480共培养。同时设添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系作为试验对照组。Real-tim... 目的确定结肠肿瘤间质细胞的旁分泌因子FGF10对肿瘤细胞侵袭的影响。方法体外分离培养结肠肿瘤间质细胞,ELISA检测其FGF10的表达,并与结肠癌细胞系HCT116和SW480共培养。同时设添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系作为试验对照组。Real-time-PCR检测HCT116细胞侵袭相关基因的表达变化。Western blot法检测共培养后结肠癌细胞系中上皮-间质蛋白表达变化。显微镜下计数透过Matrigel包被Transwell膜的细胞数量检测细胞的侵袭能力。结果结肠肿瘤间质细胞高表达FGF10生长因子。结肠癌细胞系HCT116和SW480与TAFs共培养系统中,HCT116和SW480细胞中Twist、Snail、Slug、ZEB1基因的表达上调,Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下降,侵袭能力较正常培养细胞显著增强。同时添加人重组FGF10培养结肠癌细胞系表现出同样的表型变化。结论肿瘤微环境中肿瘤相关间质细胞分泌的FGF10能够增强结肠肿瘤细胞的侵袭能力。 展开更多
关键词 转移性 成纤维生长因子10 旁分泌因子 肿瘤相关成纤维细胞 结肠癌
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芍药苷对UVB诱导的小鼠色素沉着的改善与调控机制研究 被引量:2
15
作者 刘晓英 韩萍 +2 位作者 太美灵 吴诗颖 杜志云 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期479-485,共7页
为探讨芍药苷对皮肤色素沉着的改善作用及调控机制,采用UVB反复诱导方法建立C57小鼠皮肤色素沉着模型,评价芍药苷抑制皮肤色素沉着的作用及对酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)、转运蛋白RAB27A (RAB27A)、前阿黑皮素(POMC)、... 为探讨芍药苷对皮肤色素沉着的改善作用及调控机制,采用UVB反复诱导方法建立C57小鼠皮肤色素沉着模型,评价芍药苷抑制皮肤色素沉着的作用及对酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)、转运蛋白RAB27A (RAB27A)、前阿黑皮素(POMC)、碱性成纤维细胞生长因子(FGF2)、干细胞因子(SCF)、白介素-1α(IL-1α)的表达水平的调控作用,同时利用分子对接法分析芍药苷与靶点之间的结合活性。结果表明:外用芍药苷降低了UVB诱导的C57小鼠的经皮失水率,皮肤组织切片中的表皮厚度和黑色素含量显著降低,皮肤组织中色素沉着相关的TYR、MITF、RAB27A蛋白的表达均极显著降低(P<0.01),黑色素细胞受体结合的旁分泌因子POMC、SCF、FGF2和炎症因子IL-1α的蛋白表达均极显著降低(P<0.01);分子对接结果显示,芍药苷对角质细胞分泌的POMC和SCF有极高的结合活性(活性总分值>7)。表明芍药苷可通过抑制旁分泌因子来抑制黑色素合成,发挥抑制皮肤色素沉着的作用。 展开更多
关键词 芍药苷 皮肤色素沉着 旁分泌因子 干细胞因子 前阿黑皮素
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低氧预处理脐带间充质干细胞的旁分泌对成骨细胞功能的影响 被引量:3
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作者 徐晓丽 高诗雪 +2 位作者 刘莹 周立冬 杨德圣 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期289-293,共5页
目的研究低氧预处理人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC)旁分泌作用对人成骨细胞(MG-63)增殖、迁移及成骨的影响。方法分别于低氧及常氧条件下培养UCMSC,获取两种UCMSC条件培养基。实验分为3组:低氧培养... 目的研究低氧预处理人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSC)旁分泌作用对人成骨细胞(MG-63)增殖、迁移及成骨的影响。方法分别于低氧及常氧条件下培养UCMSC,获取两种UCMSC条件培养基。实验分为3组:低氧培养基组、常氧培养基组、DMEM对照组,分别用3种不同的培养基常温培养MG-63。于培养1、3、5 d后用四氮唑盐(mosmann tetrazoline colorimetry,MTT)比色法检测细胞增殖情况,记录各组的光密度值进行统计学分析;用划痕法检测细胞在不同培养条件下的迁移能力;于培养21 d后进行茜素红染色检测各组成骨钙结节的形成。酶联免疫吸附法(ELISA)检测低氧及常氧条件培养基中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量。结果 MTT法检测结果表明,低氧及常氧培养基组的MG-63细胞在培养1、3、5 d后的增殖能力均大于DMEM对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且低氧组大于常氧组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕法结果为此两组细胞迁移能力大于DMEM对照组,且低氧组细胞迁移能力大于常氧组;钙结节染色结果显示低氧组成骨钙结节形成最多,常氧组次之,DMEM对照组最少。ELISA法检测低氧组VEGF含量高于常氧组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论低氧预处理UCMSC可增强其旁分泌功能,促进成骨细胞MG-63的增殖、迁移及成骨。 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 低氧 旁分泌 成骨细胞 血管内皮生长因子
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MSCs旁分泌对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响 被引量:1
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作者 刘玲玲 赵龙 +4 位作者 李晓丽 张赢予 王好 周艳芳 张国辉 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2014年第3期221-225,共5页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌因子肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响及其机制。方法:将SD大鼠MSCs传代至第3代后分为未转染组、转染HGF-siRNA组及转... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌因子肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响及其机制。方法:将SD大鼠MSCs传代至第3代后分为未转染组、转染HGF-siRNA组及转染阴性对照(NC)-siRNA组,分别进行相应处理。通过ELISA、蛋白质印迹法检测各组MSCs细胞上清中及细胞中HGF、转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)含量和蛋白表达量。用浓度为1μmol/L的多柔比星处理H9C2细胞4 h后分为4组:单独培养组、MSCs共培养组、与HGF-siRNA-MSCs共培养组及与NC-siRNA-MSCs共培养组。培养24 h后通过流式细胞术AnnexinⅤ/PI双染法检测H9C2细胞凋亡率。结果:HGF-siRNA组MSCs上清中TGF-β1浓度为(519.23±24.34)pg/mL,明显高于未转染组[(459.65±11.78)pg/mL]及NC-siRNA组[(459.33±11.78)pg/mL](P均<0.05);转染HGF-siRNA组MSCs中TGF-β1表达量亦明显高于其他两组。HGF-siRNA-MSCs与H9C2细胞共培养组中H9C2细胞凋亡率为(18.54±0.64)%,较MSCs共培养组[(6.65±0.49)%]及NC-siRNA-MSCs共培养组[(9.70±1.62)%]明显增加(P均<0.05)。结论:MSCs旁分泌因子HGF通过抑制TGF-β1的表达对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡起保护作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 旁分泌 肝细胞生长因子 转化生长因子-β1 细胞凋亡 多柔比星
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脐带间充质干细胞通过旁分泌机制维持原代小鼠肝细胞的体外生长 被引量:1
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作者 吴源泉 吴建华 +1 位作者 王梁 林洋 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4031-4036,共6页
背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞... 背景:肝细胞移植对于晚期肝功能衰竭患者是一种非常有效的替代治疗方法,体外条件下扩增培养肝细胞具有非常重要的临床意义。目的:体外实验探讨人脐带间充质干细胞对原代小鼠肝细胞功能的调控作用。方法:实验分3组:①人脐带间充质干细胞与原代小鼠肝细胞非接触共培养(非接触共培养组);②人脐带间充质干细胞培养液上清与原代小鼠肝细胞共培养(上清组);③原代小鼠肝细胞用含体积分数为10%胎牛血清的低糖DMEM培养(常规培养组)。培养48,72,96 h,采用MTT法检测3组肝细胞增殖情况,吲哚菁绿检测肝细胞相关功能,ELISA法检测白蛋白及尿素分泌情况,RT-PCR检测肝细胞相关基因表达。该研究的实施符合喀什地区第一人民医院的相关伦理要求(伦理批件号:01号)。结果与结论:①与常规培养组相比,培养48,72,96 h时非接触共培养组和上清组都可以显著促进小鼠肝细胞增殖,差异有显著性意义(P <0.05);②与常规培养组相比,培养96 h时非接触共培养组和上清组都可以维持小鼠肝细胞的摄取功能活性,差异有显著性意义(P <0.05);③与常规培养组相比,在48 h和96 h时非接触共培养组和上清组小鼠肝细胞分泌白蛋白及尿素水平显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);④与常规培养组相比,非接触共培养组和上清组HGF、b FGF以及ALB mRNA表达显著升高,差异有显著性意义(P <0.05);但细胞色素基因CYP2B9的表达在3组细胞内差异无显著性意义(P> 0.05);⑤结果表明,脐带间充质干细胞可通过旁分泌机制在体外维持原代小鼠肝细胞功能,并促进其增殖,是体外条件下人工扩增肝细胞的一种新的应用策略。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 肝细胞 共培养 旁分泌 肝细胞生长因子 肝功能 新疆维吾尔自治区自然科学基金
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利用SPR生物传感器实时监测干细胞促血管新生旁分泌因素的变化
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作者 王晖 高斌 +1 位作者 潘杰 程志俭 《徐州医科大学学报》 CAS 2018年第8期535-539,共5页
目的探讨用表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)技术生物传感器实时定量和定性监测干细胞分化中旁分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的时相性变化及灵敏度。方法通过样品与SPR传感器... 目的探讨用表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)技术生物传感器实时定量和定性监测干细胞分化中旁分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的时相性变化及灵敏度。方法通过样品与SPR传感器芯片表面修饰的VEGF单抗特异性识别引起金膜表面折射率变化,进而导致SPR角的变化,实现实时监测体外促骨髓间充质干细胞定向分化内皮细胞体系中VEGF的变化。结果SPR传感器可以监测MSC旁分泌的微量VEGF,在分化培养第5天明显增高,第6天达到峰值,检测下限可达2nmol/L。结合速率常数为4.68×10-5/ms,解离速率常数为1.73×10-4/s,解离速率平衡常数为3.71×10-10mol/L。结论SPR传感器能定性、定量检测干细胞在定向分化过程的旁分泌细胞因子,与传统方法相比,SPR技术具有较高的灵敏度、准确性且操作简便。 展开更多
关键词 生物传感器 干细胞 旁分泌 血管内皮生长因子
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内皮祖细胞移植对大鼠短暂性大脑中动脉栓塞的治疗作用
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作者 廖少华 范沁林 +3 位作者 吴娅 王皓香 陈康宁 周振华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期613-617,共5页
目的观察内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植在治疗大鼠短暂性大脑中动脉栓塞(transientmiddle cerebral artery occlusion,tMCAO)中的作用,探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在其中的可... 目的观察内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)移植在治疗大鼠短暂性大脑中动脉栓塞(transientmiddle cerebral artery occlusion,tMCAO)中的作用,探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在其中的可能作用机制。方法培养、鉴定大鼠骨髓来源EPCs,通过颈内动脉移植到大鼠tMCAO模型。实验动物分为2组:PBS对照组、EPCs移植组,分别观察第1、3、5、7天各项指标。采用HE染色,观察大鼠缺血部位病理变化,采用TUNEL法检测嗅周皮质神经元凋亡情况、免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达情况、Western blot检测缺血局部脑组织VEGF表达。结果 EPCs移植后第5天,大鼠缺血嗅周皮质TUNEL阳性细胞数逐渐减少到最低值(54.68±3.12),Caspase-3蛋白表达也逐渐降低最低值(31.24±2.73),对应的局部脑组织VEGF表达则逐渐升高到最高值(0.99±0.03),EPCs移植组各时相点与PBS对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EPCs移植tMCAO大鼠可抑制神经元凋亡,减轻缺血导致的神经损伤,部分作用机制可能是通过旁分泌VEGF降低Caspase-3活性这一途径实现的。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 旁分泌 血管内皮生长因子 神经元凋亡
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