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阿魏酸钠对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用的探讨 被引量：10
1
作者 曲喜英 祝其锋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期553-556,共4页
目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par ... 目的　探讨阿魏酸钠 (sodiumferulate ,SF)对H2 O2 引起的PC12细胞凋亡保护作用的可能机制。方法　在H2 O2诱导PC12细胞凋亡模型的基础上 ,采用MTT比色分析测细胞存活率 ,RT PCR检测 par 4和caspase 3基因mRNA表达 ,Westernblot检测Par 4蛋白表达和Caspase 3P2 0活性片段 ,用比色法检测Caspase 3相对活性。 结果　不同剂量SF预处理 1h可提高PC12细胞的存活率 ,降低 par 4和cas pase 3的mRNA表达以及Par 4的蛋白表达 ,Caspase 3P2 0活性片段和Caspase 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论　SF可剂量依赖性地对抗H2 O2 的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par 4表达有关 ,与Caspase 展开更多
关键词 阿魏酸钠 H2O2 PCI2细胞 凋亡 par-4 CASPASE-3
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葱白提取物对创伤性兔下肢深静脉血栓形成过程中血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4的影响 被引量：6
2
作者 张晨 熊伟 +2 位作者 郝建军 张介眉 熊昌源 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2011年第3期6-8,共3页
目的:通过检测血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4的变化,探讨葱白提取物防治深静脉血栓形成的疗效和机制。方法:随机将新西兰白兔24只分为空白模型组、葱白防治组和葱白治疗组。按照赵学凌的方法构建兔下肢创伤性深静脉血栓模型,... 目的:通过检测血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4的变化,探讨葱白提取物防治深静脉血栓形成的疗效和机制。方法:随机将新西兰白兔24只分为空白模型组、葱白防治组和葱白治疗组。按照赵学凌的方法构建兔下肢创伤性深静脉血栓模型,造模成功后,空白模型组给予生理盐水,葱白治疗组给予葱白提取物1周,葱白防治组造模前持续给予葱白提取物1周,造模后同葱白治疗组。检测造模前后血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4的变化,对实验数据进行统计分析。结果:造模后,各组兔血清中GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4含量明显升高(P<0.05),葱白防治组上升幅度较小(P<0.05),空白模型组和葱白治疗组上升幅度较大(P<0.01),葱白防治组和治疗组均可以降低模型组兔血清中GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4含量(P<0.05);与葱白治疗组比较,葱白防治组降低PAR-1、PAR-4水平较明显,差异有统计学意义(P<0.05),而对GPⅡb/Ⅲa的影响无统计学意义(P>0.05)。结论:葱白提取物可能通过调节血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa及PAR-1、PAR-4的表达以防治创伤性下肢深静脉血栓形成。 展开更多
关键词 创伤性下肢深静脉血栓形成 葱白提取物 GPⅡb/Ⅲa par-1 par-4
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GLP-1通过Par-4/NF-κB途径改善2型糖尿病胰岛β细胞凋亡 被引量：6
3
作者 雷小添 郑焱玲 +4 位作者 甘霞光 冷蔚玲 张玲 陈兵 吴绮楠 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期319-323,共5页
目的:观察GLP-1对糖尿病小鼠中Par-4/NF-κB的表达和胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将小鼠随机分成正常对照组(8只,C组)、Par-4敲除组(8只,CP组)、糖尿病组(8只,D组)、糖尿病Par-4敲除组(8只,DP组)、GLP-1+糖尿病组(8只,GD组)、GLP-1+糖尿... 目的:观察GLP-1对糖尿病小鼠中Par-4/NF-κB的表达和胰岛β细胞凋亡的影响。方法:将小鼠随机分成正常对照组(8只,C组)、Par-4敲除组(8只,CP组)、糖尿病组(8只,D组)、糖尿病Par-4敲除组(8只,DP组)、GLP-1+糖尿病组(8只,GD组)、GLP-1+糖尿病Par-4敲除组(8只,GDP组),TUNEL法检测各组细胞凋亡,Western blot检测各组细胞Par-4和NF-κB蛋白表达水平,ELISA检测各组胰岛素分泌。结果:C组凋亡率(P=0.965)和NF-κB(P=0.754)与CP组比较无统计学差异,胰岛素分泌无统计学差异(P=0.797);与C组和CP组比较,D组凋亡率(P=0.000)、Par-4(P=0.000)和NF-κB(P=0.000)表达明显升高,胰岛素分泌下降(P=0.000);与D组相比,DP组和GD组细胞凋亡率(P=0.000,P=0.000)、Par-4(P=0.000,P=0.000)和NF-κB(P=0.000,P=0.002)表达明显下降,胰岛素分泌有所改善(P=0.000,P=0.026);与GD组比较,GDP组凋亡率(P=0.000)、Par-4(P=0.000)和NF-κB(P=0.015)表达明显下降,胰岛素分泌有所改善(P=0.026),DP组和GDP组在凋亡率(P=0.930)、Par-4(P=0.965)和NF-κB(P=0.875)表达及胰岛素分泌(P=0.797)方面无统计学差异。结论:GLP-1干预通过抑制Par-4/NF-κB表达,改善2型糖尿病胰岛β细胞凋亡和胰岛素分泌功能。 展开更多
关键词 胰岛Β细胞 凋亡 糖尿病 par-4 NF-ΚB
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Par-4诱导细胞凋亡发生机制的研究进展 被引量：4
4
作者 秦天洁 马巍 +1 位作者 刘陕西 杨广笑 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第12期2216-2219,共4页
Par-4基因(prostate apoptosis response-4gene,前列腺凋亡反应基因-4)是从凋亡的前列腺癌细胞中分离出来的一种促凋亡基因。Par-4是该基因编码的产物,是一个广泛表达的蛋白,可以通过多种途径诱导癌细胞凋亡及促进肿瘤消退,其SAC区可以... Par-4基因(prostate apoptosis response-4gene,前列腺凋亡反应基因-4)是从凋亡的前列腺癌细胞中分离出来的一种促凋亡基因。Par-4是该基因编码的产物,是一个广泛表达的蛋白,可以通过多种途径诱导癌细胞凋亡及促进肿瘤消退,其SAC区可以选择性的针对肿瘤细胞诱导其凋亡而正常细胞不受影响。随着Par-4研究的深入将对进一步了解肿瘤的发病机制及肿瘤治疗具有重要意义。 展开更多
关键词 par-4 凋亡 前列腺癌 靶向治疗
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远志总皂苷干预β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞Caspase-3及Par-4的表达 被引量：6
5
作者 张晓梅 孙光涛 +3 位作者 黄作义 吴成吉 戚询中 朱晓峰 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期4282-4286,共5页
背景:远志总皂苷具有良好的神经保护作用。目的:分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制。方法:自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培... 背景:远志总皂苷具有良好的神经保护作用。目的:分析远志总皂苷对β-淀粉样蛋白致伤海马神经干细胞的保护作用及机制。方法:自昆明小鼠海马分离培养神经干细胞,取第3代神经干细胞,用含不同质量浓度远志总皂苷与β-淀粉样蛋白致伤体外培养的神经干细胞共孵育。结果:应用免疫组织化学法检测Caspase-3阳性神经干细胞,与对照组相比,远志总皂苷组Caspase-3阳性细胞率及Par-4的表达明显降低,差异具有显著性意义(P<0.05)。提示远志总皂苷能够降低β-淀粉样蛋白致伤神经干细胞中Caspase-3及Par-4的表达。 展开更多
关键词 远志总皂苷 神经干细胞 CASPASE-3 par-4 Β-淀粉样蛋白
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原花青素对β-淀粉样肽25-35诱导PC12细胞par-4和bcl-2基因表达的影响 被引量：4
6
作者 梅寒芳 谢朝阳 +1 位作者 杨红 祝其锋 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期405-408,共4页
目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,W... 目的探讨原花青素(PC)对β-淀粉样肽(Aβ25-35)诱导凋亡PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA和蛋白表达的影响。方法采用MTT比色法分析细胞存活率,Hoechst33258-PI荧光染色法检测细胞凋亡,RT-PCR方法检测PC12细胞par-4和bcl-2基因mRNA的表达,Westernblotting检测PC12细胞Par-4和Bcl-2蛋白表达。结果不同剂量(5、10、20、30mg/L)PC预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的细胞凋亡,提高PC12细胞的存活率,减少Aβ25-35引起的PC12细胞核固缩、凝聚和碎裂,降低par-4基因mRNA表达及蛋白表达,增加bcl-2基因mRNA表达及蛋白表达。结论PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用,其机制可能与下调凋亡基因par-4和上调抗凋亡基因bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 原花青素(PC) (Aβ(25-35)) PC12细胞 细胞凋亡 par-4 BCL-2
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Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶3酶活性的影响及其抗凋亡作用 被引量：4
7
作者 陆超 陈吉庆 +6 位作者 周国平 吴升华 管亚飞 袁传顺 黄松明 郭锡熔 陈荣华 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期411-415,共5页
目的研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞（hBMSC）中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰（siRNA）... 目的研究Par-4基因沉默对人骨髓间充质干细胞（hBMSC）中Smac基因表达和半胱氨酸蛋白水解酶（Caspase）3酶活性的影响及其抗凋亡作用。方法原代培养hBMSC。谷氨酸诱导hBMSC凋亡。设计和合成两对针对Par-4基因mRNA的小RNA干扰（siRNA）序列（Par-4-SiRNA-1、2），构建真核细胞表达载体，用脂质体介导转染hBMSC，利用G418筛选稳定表达细胞株。实时荧光定量PCR法检测Par-4 mRNA表达水平。流式细胞术测定细胞凋亡百分率。Western印迹测定Smac蛋白表达量。比色法测定Caspase-3酶的活性。结果设计的Par-4-SiRNA-1、2可显著诱导hBMSC中Par-4基因沉默，Par-4 mRNA水平分别被降低88％、67％，谷氨酸诱导hBMSC凋亡，凋亡百分率为（58．9±8．9）％。Par-4-SiRNA-1可显著拈抗谷氨酸的诱导凋亡作用，凋亡百分率降为（37．2±6．3）％（F=58．26，P〈0．01）。Par-4-SiRNA-1对谷氨酸诱导的hBMSC中Smac蛋白表达上凋（P〈0．01）和Caspase-3酶活性上调（P〈0．01）有显著的抑制作用（P〈0．01）。结论Par-4基因沉默能拈抗谷氨酸对hBMSC凋亡的诱导作用。其机制可能与Smac基因表达和Caspase-3酶活性被抑制有关。 展开更多
关键词 RNA 干细胞 脱噬作用 基因 par-4
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Par-4对胰岛β细胞凋亡的影响 被引量：3
8
作者 甘霞光 吴绮楠 +2 位作者 邓武权 张玲 陈兵 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期6-11,共6页
目的:通过抑制前列腺凋亡反应因子-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)的表达,观察并探讨Par-4对高糖高脂干预的胰岛细胞凋亡的影响及其机制。方法:将小鼠胰岛β细胞株NIT-1随机分成正常对照组、Par-4阻断组、高糖高脂干预组、高... 目的:通过抑制前列腺凋亡反应因子-4(prostate apoptosis response-4,Par-4)的表达,观察并探讨Par-4对高糖高脂干预的胰岛细胞凋亡的影响及其机制。方法:将小鼠胰岛β细胞株NIT-1随机分成正常对照组、Par-4阻断组、高糖高脂干预组、高糖高脂+Par-4阻断组,TUNEL法检测各组细胞凋亡,Western印迹检测各组细胞Par-4和葡萄糖调节蛋白(glucose regulated protein 78,GRP78)的表达水平。结果:与正常对照组[凋亡率为(3.14±1.08)%]比较,高糖高脂干预组胰岛β细胞凋亡率[(33.82±3.15)%]明显增加,Par-4和GRP78表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05);与高糖高脂干预组比较,高糖高脂+Par-4抑制组细胞凋亡率[(18.34±2.11)%]明显下降,Par-4和GRP78表达明显下降,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:抑制Par-4表达可改善高糖高脂诱导的大鼠胰岛β细胞凋亡,其机制可能与降低了β细胞内质网应激水平有关。 展开更多
关键词 胰岛Β细胞 凋亡 par-4 糖尿病 内质网应激
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H_2O_2对PC12细胞par-4和NF-κBP65基因表达的影响 被引量：2
9
作者 曲喜英 梅寒芳 祝其锋 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期335-337,共3页
目的　探讨 H2 O2 对 PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白 - 4 ( prostate apoptosis response- 4 ,par- 4 )和核转录因子 - κBP6 5 ( NF- κBP6 5 )基因表达的影响。方法　用不同终浓度 H2 O2 ( 0～ 4 0 0 nm ol/ L)处理 PC12细胞 8h,或... 目的　探讨 H2 O2 对 PC12细胞前列腺细胞应答凋亡蛋白 - 4 ( prostate apoptosis response- 4 ,par- 4 )和核转录因子 - κBP6 5 ( NF- κBP6 5 )基因表达的影响。方法　用不同终浓度 H2 O2 ( 0～ 4 0 0 nm ol/ L)处理 PC12细胞 8h,或终浓度 2 0 0 nm ol/ L H2 O2 处理 PC12细胞不同时间 ( 0～ 8h) ,采用 RT- PCR检测 par- 4、NF- κBP6 5 m RNA表达变化 ,Western blot检测 Par- 4和 NF-κBP6 5蛋白表达的变化。结果　随 H2 O2 浓度从 10 0～ 4 0 0 nmol/ L增加 ,par- 4、NF-κBP6 5 m RNA表达和 Par- 4、NF-κBP6 5蛋白表达水平逐渐增加 ;2 0 0 nm ol/ L H2 O2 作用 PC12细胞 0～ 8h,par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ,在 2～ 8h随时间延长表达增加 ;在 0～ 8h NF- κB P6 5 m RNA表达和 NF- κBP6 5蛋白表达无明显变化。结论　 H2 O2 可时间、剂量依赖性的增加 par- 4 m RNA表达和 Par- 4蛋白表达 ;H2 O2 可剂量依赖性的增加NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6 5蛋白表达 ;NF-κBP6 5 m RNA表达和 NF-κBP6 展开更多
关键词 H2O2 PC12细胞 par-4 NF-ΚBP65 基因表达 前列腺细胞应答凋亡蛋白-4 核转录因子-KB 阿尔茨海默病
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蛋白酶激活受体拮抗剂在抗血小板领域的研究进展 被引量：2
10
作者 李杉杉 朱雄 《药学研究》 CAS 2019年第9期543-549,共7页
蛋白酶激活受体(protease activated receptors,PARs)是G蛋白偶联受体的家族成员之一。研究发现蛋白酶激活受体可经凝血酶激活诱导血小板的聚集,参与血栓形成过程。人类血小板主要表达蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4两种受体,因此... 蛋白酶激活受体(protease activated receptors,PARs)是G蛋白偶联受体的家族成员之一。研究发现蛋白酶激活受体可经凝血酶激活诱导血小板的聚集,参与血栓形成过程。人类血小板主要表达蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4两种受体,因此蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4可作为抗血小板药物的新靶点。本文介绍了凝血酶诱导蛋白酶激活受体-1、蛋白酶激活受体-4活化的作用机制,并对近年来蛋白酶激活受体-1和蛋白酶激活受体-4小分子拮抗剂的结构、药理活性的研究进展进行总结。 展开更多
关键词 蛋白酶激活受体 凝血酶 抗血小板药物 蛋白酶激活受体-1 蛋白酶激活受体-4 拮抗剂
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H_2O_2对分化的PC12细胞par-4基因表达的影响 被引量：2
11
作者 曲喜英 祝其锋 刘勇军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第4期403-407,共5页
为观察H2 O2 对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响 ,采用终浓度分别为 0、10 0、2 0 0和 4 0 0nmol L的H2 O2处理PC12细胞 8h ,用RT PCR检测par 4基因mRNA表达变化 ,Westernblot检测蛋白表达的变化。结果表明 ,随着H2 O2 剂量的增加 ,P... 为观察H2 O2 对分化的PC12细胞par 4基因表达的影响 ,采用终浓度分别为 0、10 0、2 0 0和 4 0 0nmol L的H2 O2处理PC12细胞 8h ,用RT PCR检测par 4基因mRNA表达变化 ,Westernblot检测蛋白表达的变化。结果表明 ,随着H2 O2 剂量的增加 ,PC12细胞存活率降低 ,凋亡明显增加 ,且par 4mRNA表达及蛋白表达亦增加 ,提示在H2 O2 诱导PC12细胞凋亡过程中Par 4可能起重要作用。 展开更多
关键词 PC12细胞 par-4 基因表达 凋亡 蛋白表达 分化 H2O2 变化 MRNA表达
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阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元NF-κB、par-4基因表达的影响 被引量：1
12
作者 张海风 李月百 +3 位作者 安玉会 邢路伟 王俊萍 单杰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第14期1361-1364,共4页
目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用5... 目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用50μmol/L的SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest33258荧光染色检测凋亡,Westernblot及RT-PCR检测NF-κBP65、par-4基因表达。结果不同剂量SF(10～160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;降低NF-κBP65、par-4mRNA及蛋白的表达。结论SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与降低促凋亡基因NF-κBP65、par-4表达有关。 展开更多
关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡 NF-KB P65 par-4
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PAR-4选择性诱导肿瘤细胞凋亡机制的研究进展 被引量：2
13
作者 郭雅馨 孔庆宏 王冠林 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第12期1605-1611,共7页
在肿瘤治疗中,寻找选择性作用于肿瘤细胞的药物是人们所期待和向往的。前列腺凋亡反应蛋白-4(prostate apoptosis response protein-4,Par-4)作为肿瘤抑制因子,能选择性诱导肿瘤细胞凋亡,且在细胞质和细胞核中均可行使其功能。然而有研... 在肿瘤治疗中,寻找选择性作用于肿瘤细胞的药物是人们所期待和向往的。前列腺凋亡反应蛋白-4(prostate apoptosis response protein-4,Par-4)作为肿瘤抑制因子,能选择性诱导肿瘤细胞凋亡,且在细胞质和细胞核中均可行使其功能。然而有研究发现,Par-4还可以被分泌到细胞外与细胞表面的GRP78相互作用,引起内质网应激,激活FADD/caspase-8/caspase-3通路导致肿瘤细胞凋亡。Par-4在行使其功能的过程中与其他的蛋白质和抗癌药物相互作用,可以协同诱导肿瘤细胞凋亡,为肿瘤治疗提供新的方法和思路。该文就Par-4如何在细胞内外选择性诱导肿瘤细胞凋亡及其与相关基因和其他抗肿瘤药物相互作用的调控机制进行综述。 展开更多
关键词 par-4 GRP78 G6PD TRIM21 芳基喹啉 顺铂
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Par-4与阿尔茨海默病神经元凋亡 被引量：3
14
作者 梅寒芳 祝其锋 《国外医学（分子生物学分册）》 CSCD 2003年第5期318-320,共3页
前列腺凋亡反应蛋白 4 (prostateapoptosisresponse 4 ,Par 4 )是一种小分子蛋白质 ,其生理功能尚不清楚 ,但能够促进多种细胞包括神经元的凋亡已得到证实。Par 4参与阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease,AD)神经元凋亡过程复杂 。
关键词 par-4 阿尔茨海默病 神经元 细胞凋亡 小分子蛋白质
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Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中蛋白激酶Akt_1磷酸化的下调作用及其抗凋亡意义 被引量：3
15
作者 陆超 陈吉庆 +8 位作者 吴升华 赵非 池霞 潘晓勤 费莉 郭梅 黄松明 郭锡熔 陈荣华 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期205-206,共2页
关键词 par-4 反义寡核苷酸 蛋白激酶A 抗凋亡 PC12细胞 磷酸化 拮抗 发现 神经细胞
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复方丹参注射液对H_2O_2诱导的PC12细胞凋亡的保护作用 被引量：1
16
作者 曲喜英 祝其锋 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期245-249,共5页
目的　探讨复方丹参注射液 (ISM)对 H2 O2 诱导的 PC1 2细胞凋亡的保护作用机制。方法　在 H2 O2 诱导 PC1 2细胞凋亡模型的基础上 ,采用 MTT比色分析测定细胞存活率 ,Hoechst- PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况 ,RT- PCR检... 目的　探讨复方丹参注射液 (ISM)对 H2 O2 诱导的 PC1 2细胞凋亡的保护作用机制。方法　在 H2 O2 诱导 PC1 2细胞凋亡模型的基础上 ,采用 MTT比色分析测定细胞存活率 ,Hoechst- PI荧光染色和流式细胞仪检测分析细胞凋亡情况 ,RT- PCR检测 par- 4和 caspase- 3基因 m RNA表达 ,Western blot检测 par- 4蛋白表达和 caspase- 3P2 0活性片段 ,比色法检测 caspase- 3相对活性。结果　不同剂量 ISM预处理 1 h可提高 PC1 2细胞存活率 ,降低 par- 4和 caspase- 3的 m RNA表达以及 Par- 4的蛋白表达 ,caspase- 3 P2 0活性片段和 caspase- 3相对活性减少 ,但变化不明显。结论　 ISM可剂量依赖性地对抗 H2 O2的神经毒性作用 ,其机制可能与凋亡基因 par- 4表达有关 ,与 caspase- 3的关系尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 复方丹参注射液 H2O2 细胞凋亡 PC12细胞 半胱天冬酶3 神经保护
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Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK_(1/2)的下调作用及其抗凋亡作用 被引量：2
17
作者 陆超 陈吉庆 +8 位作者 吴升华 赵非 池霞 潘晓勤 费莉 郭梅 黄松明 郭锡熔 陈荣华 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期777-780,共4页
目的研究par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2活性的下调作用及其抗凋亡作用。方法利用脂质体将par4反义寡核苷酸转染入PC12细胞。谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。利用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色观察PC12细胞形态,流式细胞分析评价... 目的研究par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸对PC12细胞中ERK1/2活性的下调作用及其抗凋亡作用。方法利用脂质体将par4反义寡核苷酸转染入PC12细胞。谷氨酸诱导PC12细胞凋亡。利用吖啶橙/溴化乙锭荧光染色观察PC12细胞形态,流式细胞分析评价凋亡百分率。Western印迹测定par4的蛋白质表达量和磷酸化的ERK1/2的蛋白表达量。结果(1)谷氨酸诱导PC12细胞中par-4蛋白表达上调,Par4反义寡核苷酸呈剂量依赖性地拮抗其上调(组间比较,P<0.01)。(2)谷氨酸诱导PC12细胞中磷酸化(Thr202/Tyr204)的ERK1/2蛋白水平下调,par-4反义寡核苷酸拮抗其上调(组间比较,P<0.01)。(3)Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,如予ERK1/2阻断PD98059预处理,则其拮抗作用被下调(组间比较,P<0.05)。结论Par-4反义寡核苷酸拮抗谷氨酸诱导的PC12细胞凋亡,其机制可能与ERK的活化有关。 展开更多
关键词 par-4 反义寡核苷酸 ERK1/2 PC12细胞 拮抗 谷氨酸 诱导 抗凋亡作用 磷酸化 溴化乙锭
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三氧化二砷诱导K562细胞凋亡过程中Par-4及WT1基因表达的变化 被引量：1
18
作者 秦洁 王宏伟 +2 位作者 杨涛 朱镭 徐永群 《白血病．淋巴瘤》 CAS 2009年第5期261-263,共3页
目的探讨三氧化二砷（As2O3）诱导K562细胞凋亡过程中前列腺凋亡反应因子-4（Par-4）和WT1基因表达的变化。方法用不同浓度As2O3（2～10μmol／L）处理K562细胞24～72h，MTT法测定细胞增生活力，流式细胞术检测细胞凋亡，采用荧光定量RT... 目的探讨三氧化二砷（As2O3）诱导K562细胞凋亡过程中前列腺凋亡反应因子-4（Par-4）和WT1基因表达的变化。方法用不同浓度As2O3（2～10μmol／L）处理K562细胞24～72h，MTT法测定细胞增生活力，流式细胞术检测细胞凋亡，采用荧光定量RT—PCR检测Par-4和WT1基因mRNA表达变化，Western blotting检测Par-4和WT1蛋白表达的变化。结果不同浓度As2O3作用于K562细胞，随浓度增加能明显抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。同时Par-4基因mRNA和蛋白表达逐渐增加；而WT1基因mRNA及蛋白表达逐渐下降。结论As2O3可抑制K562细胞生长，诱导细胞凋亡，Par-4与WT1基因可能参与As2O3诱导K562细胞凋亡的调控。 展开更多
关键词 砷剂 K562细胞 细胞凋亡 基因 par-4 基因 肾母细胞瘤
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癌症相关促凋亡蛋白Par-4的信号转导途径预测研究 被引量：1
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作者 赵艳超 张淑波 +1 位作者 陈维田 何淼 《中山大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期83-88,共6页
利用支持向量机(SVM)技术构建Par-4关联的蛋白质相互作用网络,预测出与Par-4有相互作用的蛋白质82个;这些蛋白质按照功能划分为8大类,主要包括:蛋白激酶、泛素化蛋白酶、死亡受体相关因子、与细胞周期或DNA复制相关蛋白质、调节蛋白质... 利用支持向量机(SVM)技术构建Par-4关联的蛋白质相互作用网络,预测出与Par-4有相互作用的蛋白质82个;这些蛋白质按照功能划分为8大类,主要包括:蛋白激酶、泛素化蛋白酶、死亡受体相关因子、与细胞周期或DNA复制相关蛋白质、调节蛋白质、与疾病相关蛋白质、具有特定结构域结合蛋白质和其他蛋白质等。结合文献挖掘和数据库检索信息,推断出了Par-4的2条可能新的信号转导途径。首次预测到Par-4与一大类泛素化蛋白有密切的关系。研究发现,Par-4与多种蛋白质具有复杂的相互作用,并且,在多个细胞凋亡途径中扮演了重要角色。 展开更多
关键词 par-4 SVM 蛋白质相互作用 细胞凋亡 信号转导
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NT_4-SAC-HA_2-TAT融合基因表达载体的构建及鉴定 被引量：1
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作者 张士宝 刘庆勇 +5 位作者 阮喜云 陈杰 张建军 李宗武 杨广笑 王全颖 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第6期15-19,共5页
目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段。将所得SAC和已有HA2-TAT片段... 目的构建NT4-SAC-HA2-TAT融合肽cDNA克隆,探讨前列腺凋亡反应基因-4(Par-4)核心区凋亡肽(SAC)作为目的基因对前列腺癌的治疗作用。方法应用互为引物模板法合成两端具有NaeI和KpnI酶识别位点的SACcDNA片段。将所得SAC和已有HA2-TAT片段克隆到具有相应酶切位点的pBV220-NT4质粒,得到pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT重组质粒。PCR扩增NT4-SAC-HA2-TATcDNA片段,并将其克隆到pGEM-T easy中,转化细菌筛选阳性克隆,酶切鉴定,序列测定分析。结果经DNA测序、限制性内切酶酶切等证实,PCR获得了编码NaeI和KpnI酶切位点的SAC cDNA片段,并将NT4、SAC、HA2-TAT亚克隆于pBV220内。结论成功构建了NT4-SAC-HA2-TAT融合基因的原核表达载体pBV220-NT4-SAC-HA2-TAT。 展开更多
关键词 前列腺凋亡反应基因-4 融合肽 前列腺肿瘤 基因疗法
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