[目的]探讨植物雌激素(phytoestrogen)鹰嘴豆芽素A(biochanin-A,BA)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡及其调控丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-altivated protein kinase,MAPK)/凋亡信号通路的作用机制。[方法]用不同浓度的鹰嘴豆芽素A处理MG-6...[目的]探讨植物雌激素(phytoestrogen)鹰嘴豆芽素A(biochanin-A,BA)诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡及其调控丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-altivated protein kinase,MAPK)/凋亡信号通路的作用机制。[方法]用不同浓度的鹰嘴豆芽素A处理MG-63细胞,以MTT法检测细胞活性的抑制情况;以DAPI染色法和Annexin-V/PI流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;应用Western blot法检测MG-63细胞中MAPK信号通路相关蛋白磷酸化和主要凋亡通路Bcl-2家族和caspase家族相关蛋白的表达情况。[结果]BA有效抑制MG-63细胞的细胞活性,并呈时间和剂量依赖效应,且可以诱导细胞凋亡。40μmol/L和80μmol/L的BA作用于MG-63细胞48 h,细胞凋亡率分别为(45.28±3.79)%和(82.51±5.23)%,高于正常组(5.31±3.14)%(P<0.05)。Western blot结果显示,BA可促进caspase-9、caspase-3和PARP发生剪切(P<0.05),并促进p-p38、p-JNK、Bax的表达(P<0.05),抑制Bcl-2的表达(P<0.05),并呈剂量依赖效应。[结论]鹰嘴豆芽素A可有效抑制人成骨肉瘤MG-63细胞的细胞活性,促进细胞凋亡,作用机制可能是通过激活MAPK/凋亡信号通路来实现。展开更多
目的:探讨脉冲磁场(pulsed magnetic fields,PMF)对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及其可能的分子机制。方法:生长曲线法检测PMF的细胞毒性;MTT法测定HL60、HL60/ADR的IC50及经不同参数PMF作用后HL60/ADR的IC50,计算耐药倍数和...目的:探讨脉冲磁场(pulsed magnetic fields,PMF)对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及其可能的分子机制。方法:生长曲线法检测PMF的细胞毒性;MTT法测定HL60、HL60/ADR的IC50及经不同参数PMF作用后HL60/ADR的IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;流式细胞术检测PMF作用前后HL60/ADR细胞内药物蓄积变化及多药耐药相关蛋白(Multidrug Resis-tance Related Protein1 MRP1)阳性表达率的变化;RT-PCR法检测MRP1基因表达的变化。结果:单独PMF对HL60/ADR细胞的生长没有明显抑制作用,不同参数(频率为150Hz和250Hz,场强均为40mT,照射时间30min和1h)的PMF均能有效逆转HL60/ADR的多药耐药,150Hz/1h作用最为明显,逆转倍数为5.891倍。PMF作用后Rh123在HL60/ADR细胞内的蓄积增加了近8.0%,而MRP1基因表达下调了68.3%,蛋白阳性表达率下调23.6%。结论:PMF能够通过下调MRP1基因和蛋白的表达,进而增加Rh123在细胞内的蓄积,功能性部分逆转白血病细胞的多药耐药。展开更多
文摘目的:探讨脉冲磁场(pulsed magnetic fields,PMF)对白血病细胞HL60/ADR多药耐药的逆转效果及其可能的分子机制。方法:生长曲线法检测PMF的细胞毒性;MTT法测定HL60、HL60/ADR的IC50及经不同参数PMF作用后HL60/ADR的IC50,计算耐药倍数和逆转倍数;流式细胞术检测PMF作用前后HL60/ADR细胞内药物蓄积变化及多药耐药相关蛋白(Multidrug Resis-tance Related Protein1 MRP1)阳性表达率的变化;RT-PCR法检测MRP1基因表达的变化。结果:单独PMF对HL60/ADR细胞的生长没有明显抑制作用,不同参数(频率为150Hz和250Hz,场强均为40mT,照射时间30min和1h)的PMF均能有效逆转HL60/ADR的多药耐药,150Hz/1h作用最为明显,逆转倍数为5.891倍。PMF作用后Rh123在HL60/ADR细胞内的蓄积增加了近8.0%,而MRP1基因表达下调了68.3%,蛋白阳性表达率下调23.6%。结论:PMF能够通过下调MRP1基因和蛋白的表达,进而增加Rh123在细胞内的蓄积,功能性部分逆转白血病细胞的多药耐药。
