野艾蒿总黄酮的提取及其对HepG2细胞脂代谢影响的药效学研究 被引量：7

1

作者 李洋 周成江 《包头医学院学报》 CAS 2018年第6期76-79,82,共5页

目的:研究野艾蒿总黄酮的提取方法及其对人肝癌细胞(HepG2)细胞脂代谢的影响。方法:采用乙醇洗脱大孔树脂吸附柱的方式提取野艾蒿中的总黄酮,通过紫外分光光度法检测样品中总黄酮的含量。以HepG2细胞作为研究对象,MTT法检测野艾蒿总黄酮... 目的:研究野艾蒿总黄酮的提取方法及其对人肝癌细胞(HepG2)细胞脂代谢的影响。方法:采用乙醇洗脱大孔树脂吸附柱的方式提取野艾蒿中的总黄酮,通过紫外分光光度法检测样品中总黄酮的含量。以HepG2细胞作为研究对象,MTT法检测野艾蒿总黄酮对HepG2细胞增殖的影响。制备HepG2细胞脂质堆积模型,油红0染色OD值法和试剂盒法观察并检测野艾蒿总黄酮对该模型中脂质代谢的影响,以及总胆固醇、甘油三酯含量的影响是否通过腺苷酸蛋白活化激酶(AMPK)得以实现。结果:野艾蒿中总黄酮的含量为44.56 mg/g,且可不同程度地抑制HepG2细胞增殖(P<0.05),药物浓度为0.010 g/L且用药24 h为最适实验条件;野艾蒿总黄酮可显著改善HepG2细胞中的脂质堆积情况,并下调总胆固醇和甘油三酯的含量(P<0.05),但此种作用可被AMPK抑制剂所阻断。结论:野艾蒿总黄酮可通过调节AMPK这一靶点起到调节HepG2细胞内脂质代谢的作用。 展开更多

关键词 野艾蒿总黄酮 HEPG2细胞 AMPK 油红0染色法

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2011年秋季实验用鼠健康状况的病理学调查和分析 被引量：6

2

作者 王敏 刘进 +10 位作者 林竹 潘博 王运盛 康静静 唐娜 张嘉嘉 胡凤娇 杨利峰 尹晓敏 赵德明 周向梅 《实验动物科学》 2012年第3期20-23,共4页

2011年10月本实验室对14家实验动物单位的实验用鼠进行了病理学抽检。主要内容是对实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行取材,通过甲醛固定,石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对实验用鼠的健康状况进行鉴定。... 2011年10月本实验室对14家实验动物单位的实验用鼠进行了病理学抽检。主要内容是对实验动物的心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠进行取材,通过甲醛固定,石蜡切片HE染色、冰冻切片油红O染色、PAS染色等方法对实验用鼠的健康状况进行鉴定。结果显示,绝大多数实验用鼠为健康状态,而非健康动物主要以肝脏脂肪变性和轻度肺脏病变为主。这可能与饲养环境和饲料有关,通过加强饲养管理可以使这种情况得到改善。 展开更多

关键词 实验用鼠 病理学诊断 脂肪变性 油红O染色 PAS染色

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雌激素影响冻存肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞的成脂分化 被引量：2

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作者 张慧 郑红光 +1 位作者 张德伟 梅煜明 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第27期4998-5004,共7页

背景: 雌激素对脂肪干细胞向脂肪细胞诱导分化会有负向调节作用,但对长期深低温保存的肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞向脂肪细胞分化的效果尚未见报道。目的: 探讨雌激素对长期深低温保存的及新鲜提取的肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞成... 背景: 雌激素对脂肪干细胞向脂肪细胞诱导分化会有负向调节作用,但对长期深低温保存的肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞向脂肪细胞分化的效果尚未见报道。目的: 探讨雌激素对长期深低温保存的及新鲜提取的肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞成脂分化能力的影响。方法: 将长期深低温保存后复苏的及新鲜提取的第3代肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞分为4组进行成脂诱导分化,新鲜+雌激素组和冻存+雌激素组诱导时添加10-7mol/L雌激素,新鲜组和冻存组不添加。成脂诱导分化14d进行油红O染色及成脂量定量检测。结果与结论: 长期深低温保存后复苏的第3代肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞与新鲜提取的细胞形态和排列无差异;长期深低温保存后复苏的与新鲜提取的第3代肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞表面抗原分子CD29、CD44均呈阳性,CD31均呈阴性表达。成脂诱导后可观察到细胞内有脂滴形成,油红O染色呈阳性。在成脂诱导分化14d对各组进行成脂量比较,新鲜组与新鲜+雌激素组,冻存组与冻存+雌激素组的吸光度之间比较,差异有显著性意义,但新鲜组与冻存组之间差异无显著性意义。结果表明:小剂量雌激素可抑制长期深度低温保存后复苏的肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞的成脂分化;长期深低温保存后复苏的与新鲜提取的第3代肾脂肪囊来源脂肪间充质干细胞在成脂诱导方面无显著性差异。 展开更多

关键词 干细胞 脂肪干细胞 肾脂肪囊 脂肪间充质干细胞 长期深低温保存 复苏 成脂分化 雌激素 油红O染色 省级基金 干细胞图片文章

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泽泻汤对油酸诱导HepG2细胞脂肪堆积的抑制作用 被引量：9

4

作者 李甜 廖茂梁 +1 位作者 郑雅楠 王阳 《现代药物与临床》 CAS 2017年第5期772-775,共4页

目的评价泽泻汤95%乙醇、50%乙醇和水提取物抑制HepG2肝细胞脂肪累积能力。方法采用油酸诱导HepG2细胞脂肪累积建立模型,以噻唑兰染色和油红O染色法吸光度值为指标,结合细胞内脂滴形态,评价泽泻汤对油酸诱导HepG2细胞脂肪累积的干预作... 目的评价泽泻汤95%乙醇、50%乙醇和水提取物抑制HepG2肝细胞脂肪累积能力。方法采用油酸诱导HepG2细胞脂肪累积建立模型,以噻唑兰染色和油红O染色法吸光度值为指标,结合细胞内脂滴形态,评价泽泻汤对油酸诱导HepG2细胞脂肪累积的干预作用。结果泽泻汤提取物作用HepG2细胞后,经染色后均发现细胞内脂滴明显减少,且质量浓度越高脂类含量越少,50%乙醇提取物和水提物在终质量浓度160、320μg/m L时,细胞内脂滴与模型组相比明显降低(P<0.01),95%乙醇提物80μg/m L作用细胞24 h后,细胞内脂滴较模型组有减少(P<0.05)。结论 3种泽泻汤提取物均能够减少细胞内脂肪的堆积,其中以50%乙醇提取物对HepG2细胞脂肪堆积抑制能力最强。 展开更多

关键词 泽泻汤 HEPG2细胞 油酸 细胞脂肪累积 油红O染色

原文传递

脂肪组织冰冻切片油红O滴染法的建立 被引量：9

5

作者 王肖燕 王金泉 +1 位作者 姚刚 张继红 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第8期58-60,96,共4页

为了提高脂肪组织冰冻切片的染色效果和效率,将传统的脂肪组织石蜡切片油红O染色法改进为冰冻切片油红O滴染法,以用于冰冻脂肪组织脂肪细胞增殖、分化的研究和脂肪相关疾病快速病理诊断。新鲜脂肪组织液氮冷冻后转入-20℃冰箱缓冲30min,... 为了提高脂肪组织冰冻切片的染色效果和效率,将传统的脂肪组织石蜡切片油红O染色法改进为冰冻切片油红O滴染法,以用于冰冻脂肪组织脂肪细胞增殖、分化的研究和脂肪相关疾病快速病理诊断。新鲜脂肪组织液氮冷冻后转入-20℃冰箱缓冲30min,在-33℃或-34℃时进行冰冻切片,组织染色采用油红O微量滴染法。本改良的油红O滴染法能应用于冰冻脂肪组织切片染色,清楚地显示脂肪细胞的形态和脂滴的分布,有助于脂肪组织增值分化的研究和相关疾病病理切片分析。该方法快速高效、染色清晰、不易脱片,效果良好,可明显缩短实验周期和减少试剂成本,可使脂肪组织冰冻切片和油红O染色技术更广泛的应用于脂肪组织相关的科学研究和病理诊断。 展开更多

关键词 脂肪组织 冰冻切片 滴染 油红O染色法

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基于网络药理学探讨山楂叶抗高脂血症的作用机制及初步验证 被引量：7

6

作者 刘学贵 李知明 +4 位作者 刘长风 周静瑶 王瑶瑶 高品一 李丹琦 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第12期36-45,共10页

目的:利用网络药理学预测山楂叶中治疗高脂血症的潜在化合物、靶点及作用通路,采用靶酶和细胞实验对网络药理学的预测结果进行初步验证,为深入探讨山楂叶抗高脂血症的物质基础及其作用机制提供了依据。方法:通过中药系统药理学数据库分... 目的:利用网络药理学预测山楂叶中治疗高脂血症的潜在化合物、靶点及作用通路,采用靶酶和细胞实验对网络药理学的预测结果进行初步验证,为深入探讨山楂叶抗高脂血症的物质基础及其作用机制提供了依据。方法:通过中药系统药理学数据库分析平台和文献挖掘获得山楂叶的化学成分,利用相关数据库获得潜在靶点,对其进行GO和KEGG分析,构建“成分-靶点-通路”网络。通过ERK2激酶、油红O染色以及甘油三酯实验,对网络药理学预测的有效成分及潜在靶点进行了验证。结果:基于网络药理学方法,得到山楂叶的活性成分93个,相互作用的靶点蛋白40个,山楂叶化学成分对高脂血症的治疗作用主要是通过如下信号通路:代谢通路、AMPK信号通路、HIF-1信号通路、胰岛素抵抗、甲状腺激素信号通路;根据网络药理学预测结果,结合课题组分离得到的山楂叶代表性化合物,对牡荆素等6个化合物进行ERK2激酶活性测试,结果显示牡荆素对ERK2激酶的抑制率最高达到84%;通过构建高脂HepG2细胞模型,进行了油红O染色及定量实验,测定了TG含量,发现经牡荆素干预后,细胞内脂滴数量随牡荆素浓度增加而逐渐减少,且TG含量有所下降,说明牡荆素能降低细胞中的脂质积累及TG含量,进而验证了网络药理学预测山楂叶中化合物牡荆素抗高脂血症的结果。结论:本文运用网络药理学预测了山楂叶中化合物抗高血脂症的物质基础和作用机制,靶酶、油红O染色和TG定量实验初步证实了网络药理学的预测结果,同时提示牡荆素有望作为一种降低细胞内血脂含量的潜在治疗化合物。 展开更多

关键词 网络药理学 山楂叶 高脂血症 分子对接 油红O染色

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草鱼食用鱼不同颜色肝脏脂肪肝程度的判断 被引量：8

7

作者 田娟 文华 +3 位作者 曾令兵 吴凡 蒋明 刘伟 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期557-564,共8页

通过测定草鱼（Ctenopharyngodon idella）食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量,并运用冰冻组织切片油红O染色技术对肝细胞进行染色,观察肝细胞脂肪滴的变化,利用Image-pro plus 6.0软件测定其阳性面积率,判断不同颜色肝脏的草鱼食用... 通过测定草鱼（Ctenopharyngodon idella）食用鱼不同颜色肝脏的水分和粗脂肪含量,并运用冰冻组织切片油红O染色技术对肝细胞进行染色,观察肝细胞脂肪滴的变化,利用Image-pro plus 6.0软件测定其阳性面积率,判断不同颜色肝脏的草鱼食用鱼脂肪肝程度.结果表明：与草鱼正常肝相比,花肝、发白肝和发黄肝的水分含量分别降低6.30%、10.01%和14.17%（P〈0.05）,粗脂肪含量分别升高198.25%、331.00%和485.59%（P〈0.05）;参照人肝细胞脂肪变性级别的判断标准,正常肝、花肝、发白肝和发黄肝的级别分别评为1.10±0.30、2.30±0.20、3.40±0.50和4.00±0.20;经Image-pro plus6.0软件分析,花肝、发白肝和发黄肝阳性面积率分别是正常肝的3.92、6.31和7.32倍;以上指标经回归分析得到的回归方程为：肝脏粗脂肪含量（Y）与水分（X）：Y=-1.089 9X＋82.035 7,R2=0.989（P〈0.01）;阳性面积率（Y）与粗脂肪含量（X）：Y=0.970 2X-0.209 0,R2=0.973（P〈0.05）;粗脂肪含量（Y）与肝细胞脂肪变性级别（X）：Y=3.662 4X-1.788 6,R2=0.985（P〈0.01）;阳性面积率（Y）与肝细胞脂肪变性级别（X）：Y=3.622 4X-2.130 6,R2=0.996（P〈0.01）.结果证实,冰冻组织切片油红O染色技术对鱼类脂肪肝的判断具有较好的参考价值,结合阳性面积率与肝脏粗脂肪含量、肝细胞脂肪变性级别具有显著的正相关,本试验建议将草鱼肝细胞阳性面积率〉2%定义为脂肪肝,其级别评定标准：2%~7%为轻度脂肪肝,7%~12%为中度脂肪肝,〉12%为重度脂肪肝. 展开更多

关键词 脂肪肝 油红O染色法 阳性面积率 草鱼

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大柴胡汤及其拆方对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠模型“肝-肠轴”影响的形态学 被引量：7

8

作者 高誉珊 张鑫蕾 +7 位作者 吴梦瑶 周璐 张淑静 陈琳 王敏 孙燕 郑丰杰 李宇航 《世界中医药》 CAS 2020年第21期3260-3265,共6页

目的:观察大柴胡汤及其拆方(方剂要素)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠模型“肝-肠轴”肝、肠形态学的影响。方法:采用随机数字表法将大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸吡格列酮组、大柴胡汤组、疏肝利胆组、健脾化痰组、通腑泄浊组。采... 目的:观察大柴胡汤及其拆方(方剂要素)对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠模型“肝-肠轴”肝、肠形态学的影响。方法:采用随机数字表法将大鼠随机分为正常组、模型组、盐酸吡格列酮组、大柴胡汤组、疏肝利胆组、健脾化痰组、通腑泄浊组。采用高脂高糖饲料喂养16周建立NAFLD模型,并于第13~16周分别给予大柴胡汤及拆方。造模结束后,取小肠组织,电镜观察细胞间紧密连接情况,采用HE染色、油红O染色、Masson染色观察各组大鼠肝组织。结果:模型组肠细胞间隙明显增大,紧密连接程度降低,各给药组细胞间隙均有不同程度地减小,以全方组最为显著;正常组大鼠肝细胞结构正常,模型组大鼠部分肝细胞呈气球样变性,见不同程度脂滴形成,各给药组较模型组脂滴情况均有不同程度减轻。结论:大柴胡汤及其拆方均能不同程度地改善NAFLD模型大鼠肝细胞脂肪变及肠细胞紧密连接情况,并以全方共用效果尤著,疏肝利胆、健脾化痰、通腑泄浊等治法联合运用对改善NAFLD具有较好的疗效。 展开更多

关键词 大柴胡汤 方剂要素 拆方研究 非酒精性脂肪性肝病 肝-肠轴 形态学 电镜 油红O染色

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雷公藤红素抑制前体脂肪细胞成脂分化的作用及机制研究

9

作者 岳兰昕 沈磐 +3 位作者 周磊 黄从书 周维 高月 《中国药物警戒》 2024年第1期65-73,共9页

目的研究雷公藤红素(celastrol,Cela)对前体脂肪细胞(3T3-L1)成脂分化的抑制作用及其具体机制。方法采用CCK-8法确定雷公藤红素处理3T3-L1细胞的最佳浓度;油红O染色及免疫荧光法(脂肪细胞标志蛋白Perilipin1,Adiponectin)检测雷公藤红素... 目的研究雷公藤红素(celastrol,Cela)对前体脂肪细胞(3T3-L1)成脂分化的抑制作用及其具体机制。方法采用CCK-8法确定雷公藤红素处理3T3-L1细胞的最佳浓度;油红O染色及免疫荧光法(脂肪细胞标志蛋白Perilipin1,Adiponectin)检测雷公藤红素对3T3-L1成脂分化不同时期的抑制作用;Western Blot(WB)检测不同浓度雷公藤红素处理后3T3-L1细胞中调控脂代谢以及分化相关蛋白的表达;对未分化(Con)、分化第1天(MDI)、分化第1天同时给药250 nmol·L^(-1)雷公藤红素(MCT)的3T3-L1细胞进行WB检测以及microRNA(miRNA)测序,qPCR验证筛选得到的miRNA,进行KEGG与GO富集分析;过表达mmu-miR-5121 mimics和inhibitor,WB检测相关蛋白的变化,油红O染色检测分化结果。结果Cela处理3T3-L1细胞的最佳浓度为250 nmol·L^(-1)和500 nmol·L^(-1);油红O染色及免疫荧光结果表明250 nmol·L^(-1)与500 nmol·L^(-1)Cela对3T3-L1成脂分化均有显著抑制作用,250 nmol·L^(-1)在3T3-L1成脂分化早期(第1天)便能显著抑制3T3-L1成脂分化;250 nmol·L^(-1)Cela处理3T3-L124 h后,能显著抑制3T3-L1中DFCP1、FAS、ACC、PPARγ等蛋白的表达;分化第1天FAS与ACC表达升高,采用250 nmol·L^(-1)Cela处理后,ACC、FAS蛋白表达显著降低;miRNA测序筛选后q PCR验证结果表明mmumiR-5121在分化第1天减少,但Cela处理后含量增加。转染5121 inhibitor提高了FAS与ACC的含量,5121 mimics则呈现相反作用。单独转染5121 inhibitor可使得3T3-L1分化成熟,而分化同时添加5121 mimics可以有效抑制分化。并且250nmol·L^(-1)Cela可以抑制5121 inhibitor引起的分化。结论250 nmol·L^(-1)雷公藤红素作用于3T3-L1成脂分化早期可显著抑制3T3-L1分化,其可能通过上调mmu-miR-5121的含量,抑制FAS与ACC的表达发挥作用。 展开更多

关键词 雷公藤红素 前体脂肪细胞 成脂分化 脂代谢 油红O染色 mmu-miR-5121

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油红O染色在斑马鱼体内脂质染色中的应用 被引量：6

10

作者 陈侃 王长谦 +4 位作者 范虞琪 韩志华 汪月 高霖 曾华甦 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期358-360,共3页

目的探索油红O在斑马鱼体内脂质染色中的技术方法。方法取受精后4d的斑马鱼幼鱼,4%多聚甲醛固定12h后,用油红0工作液对整鱼进行染色,比较不同的染色时间及不同的染料浓度对油红O染色效果的影响。结果斑马鱼脑组织、卵黄囊、鱼鳔及血管... 目的探索油红O在斑马鱼体内脂质染色中的技术方法。方法取受精后4d的斑马鱼幼鱼,4%多聚甲醛固定12h后,用油红0工作液对整鱼进行染色,比较不同的染色时间及不同的染料浓度对油红O染色效果的影响。结果斑马鱼脑组织、卵黄囊、鱼鳔及血管内的脂质被油红O染色。油红0液浓度0.3%、染色时间3h时斑马鱼整鱼油红O染色效果较好。结论油红O可对斑马鱼体内的脂质进行染色,可用于斑马鱼脂代谢研究。 展开更多

关键词 斑马鱼 脂质 油红O染色

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亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢及因子调控的作用

11

作者 田侦丽 张小旭 +1 位作者 方兴艳 谢婷婷 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第23期4956-4964,共9页

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学... 背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活性,单试剂COD-PAP法、单试剂GPO-PAP法及酶微板法检测细胞上清总胆固醇、三酰甘油及总胆汁酸水平,油红O染色法检测细胞内脂质含量,Edu-488渗入法检测细胞增殖,PI染色法及Annexin V-FITC/PI双标记法结合流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶及法尼醇X受体的m RNA及蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组(0μmol/L亚砷酸钠)相比,随着亚砷酸钠浓度的增加:MIHA细胞活性逐渐降低;细胞上清中总胆固醇、三酰甘油水平逐渐增高,总胆汁酸水平逐渐降低;细胞内脂质含量逐渐增多;细胞停滞于S期及G_2/M期细胞比例逐渐增多;细胞凋亡率逐渐升高;肝细胞核因子4α mRNA表达水平未见明显变化,胆固醇7α-羟化酶与法尼醇X受体mRNA表达水平下降;肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体蛋白表达水平逐渐下降;(2)亚砷酸钠具有细胞毒性,显著降低MIHA细胞活性,诱导细胞脂肪变性,阻滞细胞增殖,诱发细胞凋亡等损伤;亚砷酸钠可下调肝细胞核因子4α蛋白表达以及胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体的转录和蛋白表达,进一步引起肝细胞的脂质代谢紊乱。 展开更多

关键词 亚砷酸钠 MIHA细胞 胆固醇7Α-羟化酶 法尼醇X受体 细胞周期 细胞凋亡 油红O染色 脂质代谢

不同种类脂肪酸对延边黄牛骨骼肌卫星细胞成脂转分化的影响 被引量：5

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作者 张军芳 闫研 +6 位作者 崔岩 孙斌 王英 孙建富 金鑫 严昌国 李香子 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第4期992-999,共8页

试验旨在探究用同一浓度不同种类的脂肪酸单体(油酸、硬脂酸、棕榈油酸及棕榈酸)处理延边黄牛骨骼肌卫星细胞(BSC),研究其对脂肪生成相关基因表达及脂滴形成的影响。从18月龄延边黄牛半膜肌中分离提取骨骼肌卫星细胞进行体外培养,在分... 试验旨在探究用同一浓度不同种类的脂肪酸单体(油酸、硬脂酸、棕榈油酸及棕榈酸)处理延边黄牛骨骼肌卫星细胞(BSC),研究其对脂肪生成相关基因表达及脂滴形成的影响。从18月龄延边黄牛半膜肌中分离提取骨骼肌卫星细胞进行体外培养,在分化培养基中分别添加100μmol/L油酸(OA)、硬脂酸(SA)、棕榈油酸(POA)和棕榈酸(PA)培养96 h,油红O染色观察脂滴生成情况,并利用实时荧光定量PCR法检测与脂肪生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、固醇调节原件结合蛋白1(SREBP1)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)的表达。油红O染色结果显示,与对照组相比,所有的脂肪酸处理组细胞均有脂滴形成,油酸和棕榈油酸处理组相对于棕榈酸和硬脂酸处理组在肌管内形成的脂滴数量更多,且脂滴的形态较大。实时荧光定量PCR结果显示,在延边黄牛骨骼肌卫星细胞中添加油酸和棕榈油酸等不饱和脂肪酸增加了与脂肪合成相关基因PPARγ、SREBP 1、C/EBPα的表达,抑制了SCD基因的表达;添加饱和脂肪酸(硬脂酸和棕榈酸)则在促进PPARγ、SREBP 1、C/EBPα基因表达的同时也显著增加了SCD基因的表达(P<0.05)。结果表明,添加脂肪酸可以诱导延边黄牛骨骼肌卫星细胞向脂肪细胞转分化。 展开更多

关键词 延边黄牛 骨骼肌卫星细胞 脂肪酸 脂滴 油红O染色

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斑马鱼血管内脂代谢研究方法的构建 被引量：5

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作者 陈侃 王长谦 +4 位作者 范虞琪 韩志华 汪月 高霖 曾华盨 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期398-403,共6页

目的构建系统的斑马鱼血管内脂代谢的研究方法。方法利用油红O染色、荧光探针标记、直接血脂检测等方法研究斑马鱼胚胎、幼鱼、成鱼等不同发育时期血管内的脂质代谢,以及不同饮食对斑马鱼血脂的影响。结果油红可将斑马鱼胚胎血管内的脂... 目的构建系统的斑马鱼血管内脂代谢的研究方法。方法利用油红O染色、荧光探针标记、直接血脂检测等方法研究斑马鱼胚胎、幼鱼、成鱼等不同发育时期血管内的脂质代谢,以及不同饮食对斑马鱼血脂的影响。结果油红可将斑马鱼胚胎血管内的脂质染色,荧光探针可荧光标记斑马鱼胚胎血管内的胆固醇。喂食蛋黄液可升高斑马鱼幼鱼的血脂水平,油红O染色可反映这种血脂的变化。高胆固醇饮食可升高斑马鱼幼鱼血管内胆固醇水平,荧光探针可标记幼鱼血管内胆固醇的变化。血脂检测显示高脂饮食的斑马鱼血清总胆固醇和甘油三酯均高于普通饮食的斑马鱼。结论本研究利用油红O染色、荧光探针标记及血脂检测等技术构建了斑马鱼不同发育阶段血管内脂代谢的研究方法。 展开更多

关键词 斑马鱼 脂代谢 油红O染色 荧光探针标记

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TNF-α促进HepG2肝细胞脂质积聚及其机制的初步研究 被引量：2

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作者 陈书梅 杨淑敏 +6 位作者 张文龙 吕琼 叶鹏 高茹菲 梅玫 汪志红 李启富 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1088-1092,共5页

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是否能够促进肝细胞脂质积聚,并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组(TNF-α2ng/mL或20ng/mL)、软脂酸组(软脂酸0.08mmol/L或0.2mmol/L)及... 目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)是否能够促进肝细胞脂质积聚,并对其机制进行初步探讨。方法将HepG2肝细胞分为空白对照组、单纯TNF-α组(TNF-α2ng/mL或20ng/mL)、软脂酸组(软脂酸0.08mmol/L或0.2mmol/L)及联合组(TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L),处理24h,应用化学酶促-比色法定量检测细胞内TG含量。进一步选取TNF-α20ng/mL和软脂酸0.08mmol/L,通过油红O染色观察HepG2细胞内脂质积聚情况;实时荧光定量PCR和Western blot检测HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平。结果①单纯TNF-α组TG含量[TNF-α2ng/mL组(0.344±0.093)μg/μg、TNF-α20ng/mL组(0.329±0.068)μg/μg]分别较空白对照组[(0.192±0.048)μg/μg]显著升高(P<0.05);联合组[TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(0.451±0.096)μg/μg、TNF-α2ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(0.821±0.257)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.08mmol/L组(1.032±0.286)μg/μg、TNF-α20ng/mL联合软脂酸0.2mmol/L组(2.134±1.049)μg/μg]分别较软脂酸组[软脂酸0.08mmol/L组(0.247±0.069)μg/μg、软脂酸0.2mmol/L组(0.341±0.031)μg/μg]显著升高(P<0.05);②油红O染色进一步显示,TNF-α促进肝细胞内脂质积聚。③实时荧光定量PCR和Western blot检测结果显示单纯TNF-α组与空白对照组相比,HepG2细胞SREBP-1、FAS、ACCα的表达均增加(P<0.05);联合组与软脂酸组相比,肝细胞内SREBP-1、FAS、ACCα的表达水平明显上调(P<0.05)。结论TNF-α促进HepG2肝细胞内脂质积聚,增加SREBP-1、FAS、ACCα的表达。 展开更多

关键词 TNF-Α 软脂酸 SREBP-1 HepG-2肝细胞 脂质积聚

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两种髓鞘染色方法在Cuprizone诱导脱髓鞘小鼠模型中的比较 被引量：4

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作者 张丽 尹琳琳 李林 《首都医科大学学报》 CAS 2012年第6期762-765,共4页

目的比较2种神经髓鞘染色方法在Cuprizone小鼠模型脑组织中脱髓鞘的形态学变化,为实验诊断提供病理依据。方法将Cuprizone掺入饲料中喂食小鼠4周,造成神经脱髓鞘模型。取脑后切片,分别用牢固蓝(Luxol Fast Blue)和油红O两种染色方法观... 目的比较2种神经髓鞘染色方法在Cuprizone小鼠模型脑组织中脱髓鞘的形态学变化,为实验诊断提供病理依据。方法将Cuprizone掺入饲料中喂食小鼠4周,造成神经脱髓鞘模型。取脑后切片,分别用牢固蓝(Luxol Fast Blue)和油红O两种染色方法观察脑纹状体和海马两个切面胼胝体髓鞘脱失变化。结果牢固蓝和油红O两种染色方法均可显示Cuprizone模型小鼠脑内胼胝体部位有脱髓鞘发生,但在纹状体切面油红O染色法能清晰显示髓鞘脱失和炎性细胞浸润,而牢固蓝染色法显示髓鞘脱失与周围组织结构界限不明显。结论与牢固蓝染色法相比,油红O染色法能更清晰显示脱髓鞘,颜色对比明显,是一种简单易行的神经髓鞘染色方法。 展开更多

关键词 CUPRIZONE 脱髓鞘 油红O染色 牢固蓝染色

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染色法构建对超临界CO 2 提取沙棘籽油的过程分析

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作者 周雅 周雪华 +3 位作者 谢雨波 严晓阳 王芳 邓刚 《中国粮油学报》 CSCD 北大核心 2023年第8期184-189,共6页

在沙棘籽油提取过程中,经粉碎干燥后的籽料颗粒是一种开放体系,脂滴以游离形式存在,采用油红O(Oil Red O,ORO)对其进行染色时,常规方法一次性滴加染液的方式以及后续的洗脱步骤均会导致脂滴迁移、过染等问题出现。研究构建了逐级染色法... 在沙棘籽油提取过程中,经粉碎干燥后的籽料颗粒是一种开放体系,脂滴以游离形式存在,采用油红O(Oil Red O,ORO)对其进行染色时,常规方法一次性滴加染液的方式以及后续的洗脱步骤均会导致脂滴迁移、过染等问题出现。研究构建了逐级染色法,采用少量多次滴加染液的方式,并优化了染色间隔时间为1.5 min,染色级数和染液浓度可根据样品的实际油含量进行调整,因而能够客观地显影脂滴在籽料颗粒内的分布状态。以此构建的面积占比法可用于精确测定籽料中的油脂含量,其准确度与萃取质量法相当,两者的相关系数为0.998,并具有较高重现性,相对标准偏差约为2.49%。 展开更多

关键词 油红O染色 超临界CO 2提取 沙棘籽油 可视化 微观显影

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VEGFB基因敲除对动脉粥样硬化的作用研究

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作者 王珍珍 许艳薇 +3 位作者 杨帅 童凌琳 陈阳 陈仁金 《徐州医科大学学报》 CAS 2023年第11期795-799,共5页

目的为探究血管内皮生长因子B(VEGFB)基因在动脉粥样硬化中的作用,构建ApoE-/-/VEGFB-/-双敲小鼠模型进行研究。方法实验共分为4组:高脂饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(WD-ApoE-/-/VEGFB-/-)、普通饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(Chow-ApoE-/-/VEGFB-... 目的为探究血管内皮生长因子B(VEGFB)基因在动脉粥样硬化中的作用,构建ApoE-/-/VEGFB-/-双敲小鼠模型进行研究。方法实验共分为4组:高脂饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(WD-ApoE-/-/VEGFB-/-)、普通饮食ApoE-/-/VEGFB-/-组(Chow-ApoE-/-/VEGFB-/-)、高脂饮食ApoE-/-组(WD-ApoE-/-)和普通饮食ApoE-/-组(Chow-ApoE-/-)。每周测定小鼠体重和血脂变化,对主动脉进行油红O染色,取心脏进行冰冻切片油红O及H-E染色,分析小鼠主动脉斑块沉积变化。结果WD-ApoE-/-/VEGFB-/-组体重、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白显著高于WD-ApoE-/-组;主动脉大体油红O染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉脂质斑块面积显著增加。冰冻切片油红O染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉根部脂质斑块面积显著增加。冰冻切片H-E染色结果显示:相较于ApoE-/-小鼠,ApoE-/-/VEGFB-/-小鼠主动脉根部斑块坏死面积显著增加。结论VEGFB-/-可以通过增加主动脉脂质斑块沉积,增加斑块坏死面积,促进动脉粥样硬化的进展。 展开更多

关键词 血管内皮生长因子B 基因敲除 动脉粥样硬化 APOE-/-小鼠 油红O染色

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泽泻醇B对脂肪细胞分化的影响实验研究

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作者 林欣欣 张鸿燕 +6 位作者 吴伟铭 曾境昱 曾敏洁 蔡增宏 吴艺锦 秦家乐 张伟云 《亚太传统医药》 2023年第9期35-39,共5页

目的:观察泽泻醇B对3T3-L1前脂肪细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)成脂分化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以含有10%热灭活胎牛血清和5%青霉素-链霉素溶液的DMEM培养基处理3T3-L1前脂肪细胞,将其作为对照组;采用CCK-8试剂(Cell Counting... 目的:观察泽泻醇B对3T3-L1前脂肪细胞(小鼠胚胎成纤维细胞)成脂分化的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:以含有10%热灭活胎牛血清和5%青霉素-链霉素溶液的DMEM培养基处理3T3-L1前脂肪细胞,将其作为对照组;采用CCK-8试剂(Cell Counting Kit-8)于450 nm波长处,经酶标仪检测1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L的泽泻醇B对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响。通过诱导3T3-L1前脂肪细胞分化为脂肪细胞,利用油红O染色法观察细胞内生成的脂滴,并对分化细胞进行脂含量测定。以胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(3-isobutyl-1-methylxanthine,IBMX)和地塞米松(Dexamethasone,DXMS)处理的细胞作为对照组,经1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L罗格列酮处理的细胞作为阳性对照组,观察1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L泽泻醇B对脂肪细胞内脂滴的影响,并于510 nm波长下,测定不同浓度泽泻醇B对脂肪细胞中脂含量的影响。结果:1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L的泽泻醇B对3T3-L1前脂肪细胞的增殖无明显影响,但会抑制脂肪细胞内脂滴的形成,且呈浓度依赖性地抑制细胞内的脂质积累。结论:1μmol/L、5μmol/L和10μmol/L泽泻醇B对3T3-L1前脂肪细胞分化起抑制作用,可能为泽泻降血脂的活性成分之一。 展开更多

关键词 泽泻醇B 脂肪细胞 油红O染色 3T3-L1前脂肪细胞 脂质含量 实验研究

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斑马鱼肝脏组织油红O染色方法比较优化 被引量：2

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作者 赵方新 李怡 +4 位作者 张烜 陆景坤 牛燕 丁枫 武建强 《医学信息》 2022年第17期27-30,36,共5页

目的通过设置不同染色步骤、条件,探索适合处理斑马鱼肝脏的冷冻切片油红O染色方法。方法取3月龄斑马鱼肝脏OCT样品,设置6、8、10、12μm四种不同厚度切片各两片,其他各组切片厚度均为8μm,采用不同的处理方法处理两张切片。染色后置于... 目的通过设置不同染色步骤、条件,探索适合处理斑马鱼肝脏的冷冻切片油红O染色方法。方法取3月龄斑马鱼肝脏OCT样品,设置6、8、10、12μm四种不同厚度切片各两片,其他各组切片厚度均为8μm,采用不同的处理方法处理两张切片。染色后置于显微镜下观察视野内组织完整度、背景情况、橘红色脂滴的染色面积、位置以及深染的细胞和位置形态。结果以4%多聚甲醛固定、10%~30%蔗糖梯度脱水,切片厚度设置8~10μm,室温晾干1 h,甲醛(4%)固定10 min,油红O染色10 min,60%异丙醇分化2 s,ddH_(2)O浸洗浸泡5 s后,苏木素染色3 min,ddH_(2)O浸泡30 s去浮色,1%盐酸酒精分化2 s,流水冲洗2 min返蓝,甘油明胶封片为条件进行油红O染色的效果较好,斑马鱼肝组织组织完整、背景清晰,脂滴染色效果较好。结论优化的斑马鱼油红O染色方法可以较为清晰地显示肝脏脂滴,可辨别细胞核轮廓位置,进而对斑马鱼肝病模型中的脂肪变性情况进行定位与半定量的分析。 展开更多

关键词 斑马鱼 油红O染色 肝脏 冷冻切片

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阿尔茨海默病合并2型糖尿病模型小鼠海马血管损伤与认知改变 被引量：2

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作者 陈小平 邢彦伟 +3 位作者 闫朝霞 常红叶 陈贝贝 范文娟 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期863-869,共7页

目的探讨2型糖尿病(T2DM)对阿尔茨海默病(AD)脑血管发育的影响,及其对AD病理发生的影响机制。方法 40只6月龄APP/PS1转基因小鼠及同窝野生型小鼠采用高糖高脂饲料喂养6个月后,即各组小鼠12月龄时,连续4 d腹腔注射1%链脲佐菌素溶液,建立A... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)对阿尔茨海默病(AD)脑血管发育的影响,及其对AD病理发生的影响机制。方法 40只6月龄APP/PS1转基因小鼠及同窝野生型小鼠采用高糖高脂饲料喂养6个月后,即各组小鼠12月龄时,连续4 d腹腔注射1%链脲佐菌素溶液,建立AD合并T2DM模型小鼠及单纯T2DM模型小鼠。设立4个组别:正常对照组、AD组、T2DM组、AD合并T2DM组,每组小鼠各10只。通过小鼠跳台实验检测小鼠学习记忆能力,墨汁灌注观察小鼠海马区血管形态,油红O染色、免疫荧光实验检测小鼠海马区各病理指标变化。结果与正常对照组相比,AD合并T2DM模型小鼠学习与记忆能力明显下降(P<0.05),海马区血管变细、密度明显减低(P<0.05),脂质沉积增多并出现小血管渗漏,且其海马区β-淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE-1)、核因子(NF)-κB与基质金属蛋白酶(MMP)-9表达增多(P<0.05)。结论 T2DM对小鼠学习记忆功能起负作用,通过促进AD病理变化加速AD模型小鼠脑血管病变,MMP-9的异常表达也可能是引起AD血管病变的原因之一。 展开更多

关键词 阿尔茨海默病 2型糖尿病 血管病变 墨汁灌注 油红O染色 小鼠

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