葡萄糖浓度变化对乳鼠心肌细胞的影响及其机制的探讨 被引量：9

1

作者 王敏 张文斌 +1 位作者 周斌全 傅国胜 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1027-1031,共5页

目的观察不同浓度的葡萄糖培养对乳鼠心肌细胞形态及功能的影响，并初步探讨其机制。方法建立乳鼠心肌细胞培养模型，随机分成低糖（5．5mmol／L）组、高糖（25．5mmol／L）组、间歇性高糖（5．5mmol／L和25．5mmol／L交替培养）组以及... 目的观察不同浓度的葡萄糖培养对乳鼠心肌细胞形态及功能的影响，并初步探讨其机制。方法建立乳鼠心肌细胞培养模型，随机分成低糖（5．5mmol／L）组、高糖（25．5mmol／L）组、间歇性高糖（5．5mmol／L和25．5mmol／L交替培养）组以及高糖（25．5mmol／L）＋蛋白激酶C（PKC）抑制剂Ro-3l-8220（50nmol／L）组，培养5d后，观察心肌细胞搏动情况，测定心肌细胞直径，并应用Westernblot检测心肌细胞PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、核因子（NF）-κB和c-fos的蛋白表达水平。结果不同浓度葡萄糖培养的心肌细胞在搏动频率、细胞直径以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF—κB和c-fos的蛋白表达水平存在差异，其中高糖组心肌细胞搏动频率、细胞直径以及PKC-α、PKC-β2、p-PKC-α、p-PKC-β2、NF—κB和c-fos的蛋白表达水平显著高于低糖组[高糖组比低糖组：搏动频率（64．15±1．55）次／min比（57．22±1．91）次／min，细胞直径（20．1l±0．91）Ixm比（17．18±0．82）／xm，P均〈0．01]，间歇性高糖组的上述指标则显著高于高糖[间歇性高糖组比高糖组：搏动频率（66．60±2．02）次／min比（64．15±1．55）次／min，细胞直径（22．39±0．92）μm比（20．11±0．91）μm，P均〈0．01]和低糖组[间歇性高糖组比低糖组：搏动频率（66．60±2．02）次／min比（57．22±1．91）次／min，细胞直径（22．39±0．92）μm比（17．18±0．82）μm，P均〈0．01]，而PKC抑制剂Ro-31—8220则能逆转高糖所诱导的上述变化[高糖＋PKC抑制剂Ro-31-8220组比高糖组：搏动频率（62．17±1．58）次／min比（64．15±1．55）次／min，细胞直径（18．41±0．78）μm比（20．11±0．91）μm，P均〈0．01]。结论高糖或间歇性高糖的环境能够导致心肌细胞肥大，搏动频率增加，同时影响心肌细胞PKC-α、PKC-β2、NF—κB和c—fos的表达和活性，而PKC 展开更多

关键词 心肌疾病 糖尿病 肌细胞 心脏 蛋白激酶C NF-ΚB 基因 fos

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改良细胞灌流分离装置提高心肌细胞分离效率 被引量：6

2

作者 张琳 纵静 张庆涛 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第51期8300-8304,共5页

背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循。目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法。方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型... 背景:成熟心肌细胞分离过程复杂,获得数量稳定、高质量的心肌细胞迄今仍无统一、高效、活性好、简便的方法可循。目的:通过改良Langendorff细胞灌流分离装置,探讨一种更高效的成熟心肌细胞分离方法。方法:采用细胞灌流分离装置,用Ⅱ型胶原酶经主动脉逆行灌流法分离成年SD大鼠心肌细胞。对照组采用传统Langendorff细胞灌流分离装置;实验组采用改良Langendorff细胞灌流分离装置。消化结束即刻在显微镜下观察细胞形态、杆状细胞比率并计算活细胞产量;通过锥虫蓝染色评价心肌细胞活性。结果与结论:实验组活细胞产量为(3.7±0.5)×107,显著高于对照组(2.1±0.4)×107,差异有显著性意义(P<0.05)。实验组锥虫蓝染色阴性的杆状细胞比率(85.6±5.5)%,显著高于对照组(71.8±5.7)%,差异有显著性意义(P<0.05)。提示采用改良Langendorff离体心脏灌流系统可获得高产量、高活性的心肌细胞,提高了成熟心肌细胞的分离效率,为成熟心肌细胞培养及研究奠定了基础。 展开更多

关键词 肌细胞 心脏 细胞分离 组织构建 组织工程 心肌细胞 大鼠 分离装置 细胞活性 国家自然科学基金

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鼠骨髓间充质干细胞对缺氧/复氧心肌细胞的影响 被引量：5

3

作者 章培军 张丽红 郭敏芳 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2010年第1期27-29,共3页

目的:观察在体外培养条件下骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞的保护作用。方法:无菌条件下分离、培养、传代Wistar大鼠MSC,细胞融合达90%时更换培养基培养24h,收集细胞培养液作为MSC条件培养基... 目的:观察在体外培养条件下骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞的保护作用。方法:无菌条件下分离、培养、传代Wistar大鼠MSC,细胞融合达90%时更换培养基培养24h,收集细胞培养液作为MSC条件培养基;原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,先用5%CO2、10%H2、85%N2混合气造成细胞缺氧24h,再给予95%O2和5%CO2混合气复氧2h,建立缺氧/复氧模型。MSC处理组于复氧时加入MSC条件培养基,正常细胞作为对照组,分别于复氧后用MTT法、乳酸脱氢酶(lactated dehydrogenase)法测定各组心肌细胞活性的改变;RT-PCR观察细胞凋亡蛋白Bcl-2和Bax的表达。结果:与对照组比较,缺氧/复氧组细胞活力显著降低(P<0.01)。与缺氧/复氧组比较,MSC处理组细胞活力明显增加(P<0.01)。缺氧/复氧组抗凋亡基因Bcl-2的表达明显降低,促凋亡基因Bax的表达明显增加,而MSC条件培养基可以减少Bax基因的表达,提高Bcl-2/Bax值,与缺氧/复氧组比较差异具有显著性(P<0.01)。结论:MSC对体外缺氧-复氧诱导的心肌细胞的凋亡有保护作用。 展开更多

关键词 肌细胞 心脏 干细胞 细胞凋亡 缺氧

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辛伐他汀对高糖诱导乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用 被引量：3

4

作者 尉希清 张洪生 +3 位作者 张金国 谭洪勇 马玲 刘志华 《中国心血管病研究》 CAS 2011年第7期516-519,共4页

目的探讨辛伐他汀对高糖所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离SD乳鼠心肌细胞原代培养72h后，随机分为5组并加入相应的处理药物，即对照组（control组）；高浓度葡萄糖刺激组（GS组）；不同浓度的辛伐他汀干预组，分别为GS... 目的探讨辛伐他汀对高糖所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离SD乳鼠心肌细胞原代培养72h后，随机分为5组并加入相应的处理药物，即对照组（control组）；高浓度葡萄糖刺激组（GS组）；不同浓度的辛伐他汀干预组，分别为GS＋10^-7MSim组、GS＋10^-6MSim组和GS＋10^-5MSim组。测定各组心肌细胞活力及心肌细胞培养基中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力及细胞内总谷胱甘肽（GSH）含量。结果辛伐他汀呈剂量依赖性地提高高糖损伤乳鼠心肌细胞的细胞活力（P〈O．01）；培养基中MDA的生成减少（P〈0．05），而SOD活力及GSH含量明显增高（P〈0．05）。结论辛伐他汀可能通过稳定细胞膜、抗脂质过氧化反应及提高清除氧自由基，对高糖所致的心肌细胞过氧化损伤发挥剂量依赖性的保护作用。 展开更多

关键词 辛伐他汀 氧化应激 心肌细胞 葡萄糖

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拉西地平抑制心肌细胞收缩、舒张机制的研究 被引量：1

5

作者 朱肖星 朱萧玲 +6 位作者 田锐锋 陈定章 朱妙章 王文清 周晓东 陈绍洋 徐云霞 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期997-999,1004,共4页

目的研究拉西地平对异丙肾上腺素(Iso)、佛司可林和美兰(MB)增强心肌细胞收缩、舒张功能的影响。方法采用IonOptix单细胞动缘检测系统,测定心肌细胞收缩幅度和收缩、舒张速度等,指标均由计算机自动实时采集并记录。结果Iso、Fors-kolin... 目的研究拉西地平对异丙肾上腺素(Iso)、佛司可林和美兰(MB)增强心肌细胞收缩、舒张功能的影响。方法采用IonOptix单细胞动缘检测系统,测定心肌细胞收缩幅度和收缩、舒张速度等,指标均由计算机自动实时采集并记录。结果Iso、Fors-kolin和MB增强单个心肌细胞收缩幅度(ph)和单个心肌细胞收缩幅度/单个心肌细胞长度百分比(ph/bl),最大缩短速率(+dL/dt)和最大复长速率(-dL/dt),上述指标的增强均有显著性差异(P<0.01)。与对照组比较,Iso(10.0nmol/L)能使ph、ph/bl、+dL/dt和-dL/dt分别增加40%、41%、60%和50%。Forskolin(1.0μmol/L)能使ph、ph/bl、+dL/dt和-dL/dt分别增加89%、120%、106%、86%;用MB(10μmol/L)后,ph、ph/bl、+dL/dt和-dL/dt分别为0.15±0.03μm、12%±4%、2.3±0.4μm/s和2.4±0.5μm/s,用药前后差异有统计学意义(P<0.01)。3.0μmol/L的Larcidipine能抑制Iso引起ph、ph/bl、+dL/dt和-dL/dt的升高(P均<0.05),Lar-cidipine能同时降低Forskolin和MB引起ph、ph/bl、+dL/dt和-dL/dt的增加。结论Iso、Forskolin和MB使心肌细胞收缩和舒张功能均增强;Larcidipine可抑制Iso、Forskolin和MB的作用。 展开更多

关键词 拉西地平 肌细胞 心脏 心缩期 心舒期

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生理剂量睾酮通过非雄激素受体依赖的机制延缓心肌细胞衰老

6

作者 张莉 吴赛珠 雷达 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期788-791,共4页

目的 探讨睾酮治疗是否通过其经典的雄激素受体（AR）途径影响心肌细胞衰老的发生. 方法 雄性C57BL/6J鼠和睾丸女性化鼠（Tfm）分为正常组（8只）、去势组（8只）、Tfm组（7只）、去势＋睾酮（T）组（8只）、Tfm＋T组（8只）.分离左心... 目的 探讨睾酮治疗是否通过其经典的雄激素受体（AR）途径影响心肌细胞衰老的发生. 方法 雄性C57BL/6J鼠和睾丸女性化鼠（Tfm）分为正常组（8只）、去势组（8只）、Tfm组（7只）、去势＋睾酮（T）组（8只）、Tfm＋T组（8只）.分离左心室心肌细胞测定超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量及测定p16 INK4a和去磷酸化Rb蛋白表达量. 结果 与正常组比较,去势组和Tfm组SOD活性减弱[（16.55±1.18） U/ml、（17.30±1.32） U/ml比（21.57±2.21）U/ml,P＜0.05];MDA含量增加[（7.78±1.27） μmol/L、（6.52±0.82） μmol/L比（3.48±0.70） μmol/L,P＜0.01];p16INK4a（0.37±0.08、0.45±0.06比0.14±0.02）和去磷酸化Rb（0.74±0.05、0.79±0.08比0.40±0.05）蛋白表达水平上调（P＜0.05）.与去势组比较,去势＋T组SOD活性[（23.00±0.58）U/mD增加（P＜0.01）;MDA含量[（2.63±0.90）μmol/L]、p16INK4a（0.13±0.03）和去磷酸化Rb（0.45±0.05）蛋白表达水平均下降（P＜0.05）.与Tfm组比较,Tfm＋T组SOD活性增加,MDA含量、p16INK4a和去磷酸化Rb蛋白表达水平下降（P＜0.05）.去势＋T组与Tfm＋T组比较差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 生理剂量睾酮治疗通过非AR依赖的机制延缓心肌细胞衰老. 展开更多

关键词 衰老 肌细胞 心脏 睾酮 受体 雄激素

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罗格列酮对四氧嘧啶介导的糖尿病家兔心室肌细胞L型钙通道电流的影响

7

作者 陈妮娜 李广平 +1 位作者 柳青 李健 《中国心血管杂志》 2009年第4期301-303,共3页

目的探讨罗格列酮对家兔心室肌细胞L型钙通道电流(I_(CaL))的影响。方法四氧嘧啶建立糖尿病家兔模型后,利用酶解法急性分离心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术观测糖尿病和罗格列酮对心肌细胞I_(CaL)的影响,并与正常家兔进行比较。结果 (1)... 目的探讨罗格列酮对家兔心室肌细胞L型钙通道电流(I_(CaL))的影响。方法四氧嘧啶建立糖尿病家兔模型后,利用酶解法急性分离心室肌细胞,用全细胞膜片钳技术观测糖尿病和罗格列酮对心肌细胞I_(CaL)的影响,并与正常家兔进行比较。结果 (1)正常组家兔心室肌细胞I_(CaL)电流密度[(-8.83±2.31)pA/pF]大于糖尿病组[(-8.84±1.98)pA/pF],但差异不具有统计学意义。(2)给予罗格列酮后正常和糖尿病家兔组心室肌细胞I_(CaL)[正常组:基线电流密度(-8.83±2.31 pA/pF)大于5 min电流密度(-4.17±1.89 pA/pF)和10 min电流密度(-5.54±1.63)pA/pF,糖尿病组:基线电流密度(-8.84±1.98)pA/pF大于5 ml‘n电流密度(-4.97±1.15)pA/pF和10 min电流密度(-3.89±1.06)pA/pF],各时段差异均有统计学意义(各组P<0.05)。(3)空腹血糖[(7.65±1.60)mmol/L]小于建模48 h[(17.72±9.15)mmol/L]及1周后空腹血糖[(20.84±9.48)mmol/L]。各时段胰岛素水平[空腹(23.45±9.22)mmol/L,48 h后(22.69±8.94)mmol/L,1周后(21.65±11.91)mmol/L]差异均无统计学意义(各组P>0.05)。结论正常家兔组I_(CaL)电流密度与糖尿病家兔组相似,提示糖尿病对心肌细胞I_(CaL)无明显影响;罗格列酮对心脏的作用不依赖于高血糖存在与否,提示罗格列酮可能通过某些与胰岛素水平有关的特定机制作用于心肌细胞;四氧嘧啶所致糖尿病模型是一种不完全等同于1型及2型糖尿病的独特模型,但去除了胰岛素抵抗的影响。该模型可以用来作为高血糖对心肌细胞离子通道影响的研究载体。 展开更多

关键词 四氧嘧啶 糖尿病 肌细胞 心脏

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心肌1号对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的骨髓干细胞修复作用研究 被引量：4

8

作者 汪丽芳 马元 屈百鸣 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2012年第6期70-73,共4页

目的探讨临床治疗扩张型心肌病的中药经验复方心肌1号对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的骨髓干细胞修复作用。方法采用Wister大鼠30只,随机分为3组,健康对照组10只,每天同一时间皮下注射生理盐水6ml,连续18d;异丙肾上腺素模型组10只,连续3d... 目的探讨临床治疗扩张型心肌病的中药经验复方心肌1号对大鼠异丙肾上腺素心肌损伤的骨髓干细胞修复作用。方法采用Wister大鼠30只,随机分为3组,健康对照组10只,每天同一时间皮下注射生理盐水6ml,连续18d;异丙肾上腺素模型组10只,连续3d腹部皮下注射异丙肾上腺素15mg/kg,后每天同一时间皮下注射生理盐水6ml,连续15d;心肌1号干预组10只,连续3d腹部皮下注射异丙肾上腺素15mg/kg,后予心肌1号20.4g·kg-1·d-1灌胃,连续15d。3组大鼠在第4天尾静脉取血1ml,心肌1号干预组在心肌1号灌胃第12天再次尾静脉取血1ml,分别加入CD34和CD44单克隆抗体,用流式细胞仪检测外周血CD34和CD44细胞占单个核细胞的比例。同时3组大鼠均在取血完成后腹腔注射Brdu(50mg/kg)2次,间隔2h。第18天之后再观察2周,在第32天用戊巴比妥麻醉处死3组大鼠,取出大鼠心脏,分别行HE染色与Brdu免疫组化染色,在Brdu染色阳性的基础上再行Brdu、TNI免疫组化双标染色,Brdu染色阴性的不再行双标染色。结果心肌1号干预组外周血CD34和CD44细胞占单个核细胞的比例显著高于健康对照组和异丙模型组及用药前,同时心肌组织免疫组化显示心肌1号干预组有新生细胞生成,并且新生细胞表达心肌特异性蛋白肌钙蛋白I(TnI)。结论 (1)心肌1号能提高实验大鼠外周血CD34、CD44细胞占单个核细胞的比例;(2)心肌1号有促进实验大鼠新生细胞生成的作用;(3)新生细胞有心肌特异性蛋白TnI表达。心肌1号可能有动员骨髓干细胞的增殖并释放入外周血中的作用,且动员的骨髓干细胞有归巢至受损心肌并定向分化为心肌细胞可能。 展开更多

关键词 骨髓祖代细胞 肌细胞 心脏 异丙肾上腺素 复方合剂 大鼠

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KATP通道介导高碳酸酸化预处理的心肌保护效应

9

作者 罗和国 常业恬 +2 位作者 邹望远 邹定全 王德明 《天津医药》 CAS 北大核心 2010年第1期40-42,共3页

目的:研究KATP通道激活在高碳酸酸化预处理对兔心肌细胞保护效应中的作用。方法:将32只新西兰白兔(雌雄不限)随机分成缺血再灌注组(IR组)、高碳酸酸化预处理组(H组)、假手术组(P组)和优降糖+高碳酸酸化预处理组(H+G组),每组各8只。在IR... 目的:研究KATP通道激活在高碳酸酸化预处理对兔心肌细胞保护效应中的作用。方法:将32只新西兰白兔(雌雄不限)随机分成缺血再灌注组(IR组)、高碳酸酸化预处理组(H组)、假手术组(P组)和优降糖+高碳酸酸化预处理组(H+G组),每组各8只。在IR组和P组,呼吸频率设置为35次/min,潮气量为15mL/kg,控制呼气末二氧化碳分压[p(CO2)]在40～50mmHg(1mmHg=0.133kPa),持续30min。在H组呼吸频率为25次/min,潮气量为10mL/kg,呼气末p(CO2)的目标值为75～85mmHg,维持在目标值5min后,恢复正常通气,使呼气末p(CO2)恢复到40～50mmHg。H+G组在进行低频率、低潮气量造成CO2蓄积前10min静脉注射溶解优降糖的溶质0.3mg/kg。除P组外,各组动物接受冠状动脉左前分支30min阻断和3h再灌注。然后称体质量,测量并计算出心肌缺血面积、梗死面积和心肌梗死面积与心肌缺血面积之比。结果:H组心肌梗死面积占缺血面积的百分比低于IR组和H+G组(P<0.05或P<0.01),H+G组与IR组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高碳酸酸化预处理可保护心肌免受缺血再灌注的损伤,KATP通道介导了高碳酸酸化预处理的心肌保护通路。 展开更多

关键词 肌细胞 心脏 碳酸 钾通道 再灌注损伤 兔

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苦参汤对豚鼠心室肌细胞电生理效应的影响 被引量：2

10

作者 王雪芳 刘艳明 温晓竞 《河北北方学院学报（医学版）》 2009年第2期27-28,共2页

目的:探讨苦参汤对豚鼠心室肌细胞电生理效应的影响。方法:应用常规玻璃微电极细胞内记录技术,观察苦参汤对豚鼠心室肌细胞动作电位0相幅值(APA),动作电位时程(APD),50%复极化时间(APD50),90%复极化时间(APD90)的影响作用。结果:(1)用20... 目的:探讨苦参汤对豚鼠心室肌细胞电生理效应的影响。方法:应用常规玻璃微电极细胞内记录技术,观察苦参汤对豚鼠心室肌细胞动作电位0相幅值(APA),动作电位时程(APD),50%复极化时间(APD50),90%复极化时间(APD90)的影响作用。结果:(1)用20mg/mL的苦参汤灌流后与正常对照组相比动作电位0相幅值(APA)下降(P<0.05),(2)用40mg/mL的苦参汤灌流后与正常对照组相比动作电位0幅值(APA)下降(P<0.05),50%复极化时间(APD50)下降(P<0.05),(3)用80mg/mL的苦参汤灌流后与正常对照组相比动作电位0幅值(APA)下降(P<0.01),50%复极化时间(APD50)下降(P<0.01),90%复极化时间(APD90)下降(P<0.05),10min左右达到最大效应。结论:苦参汤能抑制豚鼠心室肌细胞动作电位0幅值,缩短动作电位时程。 展开更多

关键词 苦参 肌细胞/心脏 电生理学技术/心脏

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H_2S对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响(英文) 被引量：2

11

作者 陈立锋 马淑红 +5 位作者 范凌 赵兰平 温晓竞 马建伟 张晓云 王新满 《河北北方学院学报（医学版）》 2009年第2期7-11,共5页

目的:探讨硫化氢(H2S)对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响。方法:用标准微电极细胞内记录技术,观测硫化氢对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响。观测指标:静息电位(resting potential,RP)、超射值(over-shoot,OS)、动作电位幅值(amplit... 目的:探讨硫化氢(H2S)对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响。方法:用标准微电极细胞内记录技术,观测硫化氢对兔左心室心肌细胞电生理特性的影响。观测指标:静息电位(resting potential,RP)、超射值(over-shoot,OS)、动作电位幅值(amplitude of action po-tential,APA)、0相最大除极速率(maxi mal rate ofdepolarization,Vmax)、复极20%、50%和90%时间(20%、50%and90%of duration of action potential,APD20、APD50and APD90)及复极化平均速度(average rate of repolarization)。结果:(1)用50μmol/L NaHS灌流时,和正常对照组相比,APD50、APD90缩短(P<0.01),复极化平均速度增快(P<0.05)。(2)100μmol/L NaHS与对照组比较,APD50、APD90缩短(P<0.01),复极化平均速度增快(P<0.05)。和50μmol/L NaHS相比APD50缩短(P<0.01)、APD90缩短(P<0.05)、复极化平均速度增快(P<0.05)。(3)200μmol/L NaHS、400μmol/L、1000μmol/L NaHS可浓度依赖性的使APA、RP、OS减小(P<0.01),APD20、APD50、APD90缩短(P<0.01),复极化平均速度增快(P<0.01)。结论:H2S可浓度依赖性的影响兔左心室心肌细胞电生理特性。 展开更多

关键词 电生理学 硫化氢 肌细胞/心脏

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