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山奈酚通过调控miR21抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖的研究 被引量:28
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作者 杨生辉 黄琰菁 +8 位作者 莫安薇 邱纯 孙达统 李向璐 盛莉 李赛 陈邓林 邢雪花 王琳 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第13期1557-1562,共6页
目的研究山奈酚(kaempferol,KA)对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法运用CCK-8细胞活力检测法和集落形成实验研究不同浓度的KA对非小细胞肺癌A549细胞存活率的影响,确定给药浓度;将A549细胞分为对照组及KA各剂量组... 目的研究山奈酚(kaempferol,KA)对非小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用及其作用机制。方法运用CCK-8细胞活力检测法和集落形成实验研究不同浓度的KA对非小细胞肺癌A549细胞存活率的影响,确定给药浓度;将A549细胞分为对照组及KA各剂量组,采用qPCR检测不同浓度KA对A549细胞中miR21表达的影响;运用miR21 mimc转染A549细胞过表达miR21,采用qPCR和Western blotting检测miR21和不同浓度KA给药作用后对PTEN/AKT信号通路的影响。结果CCK-8和集落形成实验证实KA可抑制非小细胞肺癌A549细胞的增殖;30,90μmol·L^-1 KA处理24 h均可降低A549细胞中miR21水平和p-AKT、c-Myc、Cyclin D1的表达水平,升高PTEN水平,而miR21 mimc转染后p-AKT、c-Myc、Cyclin D1的表达水平均升高,而PTEN水平降低,并经rescue实验证实miR21 mimc转染后可阻断KA抑制A549细胞增殖的作用。结论KA能够通过调控miR21/PTEN/AKT信号通路抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 mir21 非小细胞肺癌 增殖
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miR-93及miR-21在糖尿病视网膜病变患者中的表达及其临床价值 被引量:11
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作者 符春艳 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2017年第12期1161-1164,共4页
目的探讨血浆微小核糖核酸(micro RNA,mi R)-93及mi R-21在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者中的表达及其临床价值。方法采用实时荧光定量PCR检测98例DR患者、40例2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,DM)患者和40名健康... 目的探讨血浆微小核糖核酸(micro RNA,mi R)-93及mi R-21在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)患者中的表达及其临床价值。方法采用实时荧光定量PCR检测98例DR患者、40例2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,DM)患者和40名健康体检者(对照组)血浆中mi R-93及mi R-21的表达水平。应用ROC曲线评价血浆mi R-93、mi R-21及两项联合对DR的诊断价值,多因素logistic回归分析DR发生的危险因素。Pearson相关分析DR患者血浆mi R-93、mi R-21与各生化指标的相关性。结果 DR组和DM组的尿白蛋白/肌酐、糖化血红蛋白及空腹血糖均明显高于对照组(均为P<0.05),且DR组均明显高于DM组(均为P<0.05)。DR组血浆miR-93及miR-21表达水平(1.84±0.27、1.95±0.34)均明显高于DM组(1.09±0.13、1.13±0.18)和对照组(1.02±0.08、1.08±0.16),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。PDR组血浆miR-93及miR-21表达水平(2.31±0.57、2.28±0.61)均明显高于NPDR组(1.40±0.21、1.52±0.24),差异均有统计学意义(均为P<0.05)。血浆miR-93、miR-21及两项联合诊断DR的曲线下面积(95%CI)分别为0.892(0.824~0.961)、0.836(0.770~0.905)、0.937(0.868~0.992)。尿白蛋白/肌酐、糖化血红蛋白、空腹血糖、miR-93及miR-21是DR发生的的独立危险因素。DR患者血浆miR-93、miR-21与尿白蛋白/肌酐、糖化血红蛋白、空腹血糖均呈正相关(均为P<0.01),且miR-93与miR-21呈正相关(P<0.01)。结论血浆miR-93和miR-21与DR的发生发展密切相关,可作为DR诊断的生物学标志物。 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变 mir-93 mir-21 临床价值
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CEA、NSE、SCCA联合miR-21检测与肺癌患者临床病理特征、疗效及预后的相关性研究 被引量:12
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作者 汤乔雅 宫郡茗 马艳凌 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第6期508-512,共5页
目的研究癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状上皮癌细胞抗原(SCCA)联合miR 21检测与肺癌患者临床病理特征、疗效及预后的相关性。方法选择87例肺癌患者作为实验组和同期体检的健康人作为对照组,采用电化学发光免疫法检测... 目的研究癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状上皮癌细胞抗原(SCCA)联合miR 21检测与肺癌患者临床病理特征、疗效及预后的相关性。方法选择87例肺癌患者作为实验组和同期体检的健康人作为对照组,采用电化学发光免疫法检测各组患者血清中CEA、NSE、SCCA的表达,实时定量PCR检测血清中miR 21的表达,治疗前分析肿瘤标志物CEA、NSE、SCCA及miR 21与肺癌患者中的性别、年龄、病理类型及TNM分期临床病理特征的相关性,治疗后分析与疗效及预后的相关性。结果①与对照组相比,实验组患者CEA、NSE、SCCA及miR 21的表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);②CEA、SCCA、miR 21的表达水平与肺癌患者临床病理特征无关,差异无统计学意义(P>0.05),NSE与肺癌的TNM分期相关,差异有统计学意义(P<0.05);③CEA、NSE、SCCA及miR 21的表达水平与疗效相关,差异有统计学意义(P<0.05);④生存曲线显示,CEA、NSE、SCCA及miR 21的表达水平与患者生存预后相关,差异有统计学意义(P<0.05);⑤4种指标联合诊断肺癌的灵敏度显著优于单项指标,差异有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌患者血清中CEA、NSE、SCCA和miR 21的表达水平显著高于正常人,可作为肺癌的诊断、疗效及预后的指标。 展开更多
关键词 癌胚抗原 神经元特异性烯醇化酶 鳞状上皮癌细胞抗原 mir 21 肺癌
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肾癌患者血清微小RNA-21手术前后表达变化及临床意义分析 被引量:10
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作者 管金 哈木拉提.吐送 +3 位作者 王玉杰 王文光 拜合提亚.阿扎提 木拉提.热夏提 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第7期441-445,共5页
目的微小RNA(microRNA,miRNA)-21在肾癌组织中高表达,充当癌基因,而大量研究发现血清中特异miRNA与相应的癌组织中表达量趋向一致,而血清标本安全易取。本研究旨在验证血清中miR一21在肾透明细胞癌(renalclear cell carcinoma,c... 目的微小RNA(microRNA,miRNA)-21在肾癌组织中高表达,充当癌基因,而大量研究发现血清中特异miRNA与相应的癌组织中表达量趋向一致,而血清标本安全易取。本研究旨在验证血清中miR一21在肾透明细胞癌(renalclear cell carcinoma,cRCC)血清中的表达,术后的变化并探讨其临床应用价值。方法新疆医科大学第一附属医院2013—02—01—2014—07—30收集30例cRCC患者术前血清作为肾癌术前组,平均年龄(52士11)岁。肿瘤直径≤4cm17例,〉4cm13例。Fuhrman分级:Ⅰ~Ⅱ级18例,Ⅲ级12例。对应术后1个月血清作为肾癌术后组。另收集同期该院30例健康体检者血清作为对照组,平均年龄(47±9)岁。利用Real~timePCR技术检测miR-21在肾癌术前组、术后组、对照组血清中的表达量,并分析其临床应用价值。结果对照组血清中miR-21相对表达量为0.70(0.52~3.60),肾癌术前组表达量为8.34(3.66~17.27),肾癌术后组表达量为0.68(0.47~1.07)。与对照组比较,肾癌术前组miR-21表达量显著上调,差异有统计学意义,Z=-4.778,P=0.001;肾癌术后组表达量差异无统计学意义,z=-1.135,P=0.256。与术前组比较,术后组表达量明显下调,差异有统计学意义,z=-3.124,P=0.002。依据miR-21在eRCC患者与健康人血清中表达量不同,利用受试者工作特征受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线法分析,曲线下面积(area under the curve,AUC)=0.865(95%CI:0.766~0.965,P=0.001),敏感性为77.3%,特异性为96.4%。结论在cRCC患者血清中miR-21呈现高表达,根据R0c分析结果已达到临床应用价值,是cRCC可选的诊断分子标志物。miR-21在切除肿瘤组织后表达量下降,有望用于疗效评估。 展开更多
关键词 肾肿瘤 微小RNA-21 透明细胞癌 分子标志物
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白花丹素对胶质瘤细胞生长侵袭的影响及机制研究 被引量:3
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作者 柴昌 韩双印 宋来君 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期654-658,共5页
目的分析中药提纯制剂白花丹素对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响及其作用机制。方法体外常规培养SWO-38和U251细胞,应用0~50μmol/L白花丹素作用48h后,MTT检测细胞存活率的变化,计算半数抑制浓度fIC如;应用0、2.5、5、10... 目的分析中药提纯制剂白花丹素对胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响及其作用机制。方法体外常规培养SWO-38和U251细胞,应用0~50μmol/L白花丹素作用48h后,MTT检测细胞存活率的变化,计算半数抑制浓度fIC如;应用0、2.5、5、10μmol/L白花丹素处理细胞48h后。流式细胞仪检测细胞凋亡;划痕实验检测细胞侵袭迁移能力;Western blotting检测细胞中SOX2蛋白的表达:实时荧光定量PCR检测细胞miR200b、miR200c、miR-203和miR-21表达的变化。结果MTT显示O~50μmol/L白花丹素处理SWO-38、U251细胞后细胞存活率逐渐下降,IC50分别为6.8μmol/L和7.4μmol/L;0、2.5、5、10μmol/L白花丹素作用SWO-38、U251细胞48h后凋亡细胞的比例逐渐增加,细胞中miR200b、miR200c和miR-203的表达逐渐增加,差异有统计学意义(P〈0.051;划痕实验显示白花丹素作用后两株细胞的侵袭能力下降;Western blotting结果显示SOX2蛋白的表达降低。结论白花丹素抑制胶质瘤细胞的增殖和侵袭迁移,促进其凋亡,可能与其升高miR200b、miR200c和miR-203的表达,降低SOX2蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 白花丹素 SOX-2 mir200b mir200c mir-203 mir-21
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基于miR21的宫颈癌细胞顺铂敏感性机制研究 被引量:6
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作者 岳晓雪 苗劲蔚 路攀 《中国医药导报》 CAS 2018年第6期13-18,共6页
目的探讨miR21影响宫颈癌细胞株Hela及顺铂耐药细胞株Hela/DDP顺铂敏感性的分子机制。方法利用riboFECT^(TM)CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic及其阴性对照试剂NC转染至Hela细胞,miR21 inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela/DDP细胞,... 目的探讨miR21影响宫颈癌细胞株Hela及顺铂耐药细胞株Hela/DDP顺铂敏感性的分子机制。方法利用riboFECT^(TM)CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic及其阴性对照试剂NC转染至Hela细胞,miR21 inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela/DDP细胞,并将细胞分为mimic组、inhibitor组、相应NC组及Blank组。Realtime PCR检测PTEN mRNA的表达水平;流式细胞仪检测细胞周期(PI法)及经顺铂处理后的凋亡率(Annexin Ⅴ/PI法)。结果 Real-time PCR法检测PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,为Hela的(0.410±0.046)倍(P<0.01);转染mimic后,Hela中PTEN mRNA表达明显低于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后,Hela/DDP中miR21表达明显高于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05)。Annexin Ⅴ/PI检测结果显示,mimic组凋亡率与NC组、Blank组比较明显减少(P<0.05),inhibitor组凋亡率与NC组、Blank组比较显著提高(P<0.05)。PI法检测结果显示,mimic组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显增加(P<0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05);inhibitor组S期所占比例与NC组、Blank组比较明显减少(P<0.05),NC组与Blank组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN mRNA在Hela/DDP中低表达,在Hela中高表达。上调miR21在Hela中的表达能明显降低PTEN mRNA的表达,减少凋亡,增加细胞周期中S期所占比例,导致细胞耐药;下调miR21在Hela/DDP中的表达能明显增加PTEN mRNA的表达,增加凋亡率,降低细胞周期中S期所占比例,从而达到增加化疗敏感性的效果。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 宫颈癌顺铂耐药细胞 MI R21 PTEN 顺铂 化疗敏感性
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miR93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变进展的预测价值 被引量:3
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作者 马宇 周利晓 +1 位作者 刘意 武卫 《国际眼科杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期1550-1553,共4页
目的:分析血浆微小核糖核酸(miR)-93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变(DR)进展的预测价值。方法:选取本院2013-06/2014-06收治的2型DR患者76例,根据随访结果,将患者分成DR非进展组(34例)和DR进展组(42例),另选取45例健康体检者为... 目的:分析血浆微小核糖核酸(miR)-93和miR21联合检测对2型糖尿病视网膜病变(DR)进展的预测价值。方法:选取本院2013-06/2014-06收治的2型DR患者76例,根据随访结果,将患者分成DR非进展组(34例)和DR进展组(42例),另选取45例健康体检者为对照组。检测三组血清中miR93和miR21水平的变化;分析DR患者预后的独立危险因素;分析其对患者预后的预测价值。结果:DR进展组患者血清中miR93和miR21水平明显高于DR非进展组和对照组(均P<0.01);二者可作为影响DR患者病情进展的独立危险因素;两者联合检测曲线下面积、特异度与敏感度均高于单独检测(P<0.05)。结论:miR93和miR21在DR患者血清中增高,影响DR患者病情进展。 展开更多
关键词 mir93 mir21 2型糖尿病 视网膜病变 预后
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急性髓细胞白血病患者外周血单核细胞IL-9、STAT3和miR-21的表达及意义 被引量:4
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作者 阳梅 严晓琴 +1 位作者 冷亚美 贾永前 《河北医药》 CAS 2020年第23期3538-3542,共5页
目的探讨急性髓细胞白血病(Aml)患者外周血单核细胞(PBMCs)中白介素-9(IL-9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)和miR-21的表达及临床意义。方法选取2011年2月至2014年6月住院治疗的120例Aml患者为研究对象(Aml组),以同时期的健康体检者... 目的探讨急性髓细胞白血病(Aml)患者外周血单核细胞(PBMCs)中白介素-9(IL-9)、信号转导与转录活化因子3(STAT3)和miR-21的表达及临床意义。方法选取2011年2月至2014年6月住院治疗的120例Aml患者为研究对象(Aml组),以同时期的健康体检者100例为对照组,采用RT-PCR检测所有受试者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA的表达水平,Western blot法检测IL-9和磷酸化STAT3(pSTAT3)蛋白表达,Spearman分析IL-9、STAT3和miR-21表达之间相关性,ROC曲线分析IL-9、STAT3、miR-21及三者联合检测对Aml的诊断价值,Kaplan-Meier法分析IL-9、STAT3和miR-21表达对Aml患者生存期影响。结果与对照组相比,Aml组患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21mRNA表达水平均上调(P<0.05),IL-9和pSTAT3蛋白表达显著增加(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21mRNA水平与患者年龄、性别、血红蛋白均不相关(P>0.05),与FBA分型、白细胞计数和骨髓原始细胞相关(P<0.05),IL-9与血小板计数相关(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,IL-9与miR-21、IL-9与STAT3以及miR-21与STAT3表达均呈正相关(r=0.467,P<0.05;r=0.527,P<0.05;r=0.483,P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21三者联合诊断ALM的灵敏度、特异度以及ROC曲线下面积均较单独诊断时显著提高(P<0.05)。IL-9、STAT3和miR-21高表达患者生存期均较低表达患者显著降低(P<0.05)。结论Aml患者PBMCs中IL-9、STAT3和miR-21均表达升高,IL-9可能通过STAT3信号通路诱导miR-21表达上调参与Aml疾病的发生发展过程。 展开更多
关键词 急性髓细胞白血病 外周血单核细胞 IL-9 STAT3 mir-21 临床意义
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血清miR21在宫颈癌患者手术前后中的表达及临床意义 被引量:5
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作者 何少仪 孙小丽 +3 位作者 黎玉涵 洪小山 布俏雯 罗喜平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2018年第S1期10-11,13,共3页
目的本实验通过检测miR21在宫颈癌患者血清中表达情况,探讨宫颈癌患者手术前后血清miR21的变化对评估宫颈癌预后的临床意义。方法采用qRT-PCR方法,检测miR21在无宫颈病变对照组和宫颈癌患者血清中的表达水平。结果与对照组相比,miR21在... 目的本实验通过检测miR21在宫颈癌患者血清中表达情况,探讨宫颈癌患者手术前后血清miR21的变化对评估宫颈癌预后的临床意义。方法采用qRT-PCR方法,检测miR21在无宫颈病变对照组和宫颈癌患者血清中的表达水平。结果与对照组相比,miR21在宫颈癌患者术前血清中高表达(P<0.05)。有淋巴结转移宫颈癌患者的血清miR21表达水平显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。血清miR21在宫颈癌患者中表达水平在术后1个月和3个月呈显著下降(均P<0.05)。结论血清miR21在宫颈癌患者术后呈持续下降趋势,说明血清miR21在一定程度上反映体内肿瘤负荷情况。 展开更多
关键词 血清 mir21 宫颈癌 术后变化
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miR21对宫颈癌Hela细胞及顺铂耐药Hela/DDP细胞顺铂敏感性的影响 被引量:4
10
作者 岳晓雪 苗劲蔚 路攀 《中国医药导报》 CAS 2017年第36期25-28,共4页
目的探讨miR21基因表达水平对宫颈癌Hela细胞及其顺铂耐药Hela/DDP细胞顺铂敏感性的影响。方法利用ribo FECT^(TM) CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic、inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela与Hela/DDP细胞,并将Hela细胞分为mimic组、... 目的探讨miR21基因表达水平对宫颈癌Hela细胞及其顺铂耐药Hela/DDP细胞顺铂敏感性的影响。方法利用ribo FECT^(TM) CP转染试剂分别将成熟miR21 mimic、inhibitor及其阴性对照试剂NC转染至Hela与Hela/DDP细胞,并将Hela细胞分为mimic组、阴性对照(NC)组和空白对照(Blank)组,将Hela/DDP细胞分为inhibitor组、阴性对照NC组和空白对照(Blank)组。Real-time PCR检测各组细胞中miR21的表达水平;MTT检测各组细胞对顺铂的半数抑制率浓度(IC_(50)值)。结果(1)Real-time PCR检测miR21在Hela/DDP中高表达,是Hela的(5.452±0.074)倍(P<0.01);转染mimic后,Hela中miR21表达高于明显NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后,Hela/DDP中miR21表达明显低于NC组及Blank组(P<0.01),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。(2)MTT结果显示,转染mimic后Hela细胞对顺铂敏感性下降,与NC组及Blank组相比,差异有统计学意义(P<0.05),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05);转染inhibitor后Hela/DDP细胞对顺铂敏感性增加,与NC组及Blank组相比,差异有统计学意义(P<0.05),NC组与Blank组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论(1)miR21在Hela/DDP中高表达,在Hela中低表达。(2)上调miR21在Hela中的表达能明显降低其对顺铂的敏感性,下调miR21在Hela/DDP中的表达能明显增加其对顺铂的敏感性。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞 顺铂耐药细胞 mi R21 顺铂 化疗敏感性
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晚期胃癌患者血清miR-21和let-7i水平变化与奥沙利铂化疗疗效的关系 被引量:3
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作者 罗丽华 幸茂辉 +1 位作者 冉瑞智 罗流芳 《实用临床医药杂志》 CAS 2016年第9期60-63,共4页
目的探讨晚期胃癌患者血清miR21、let7i的水平变化与奥沙利铂化疗疗效的关系。方法选取本院肿瘤科收治的79例晚期胃癌患者作为病例组,同期60例健康体检者作为对照组。测定2组外周血血清中miR21、let7i的水平,病例组采用奥沙利铂方案(... 目的探讨晚期胃癌患者血清miR21、let7i的水平变化与奥沙利铂化疗疗效的关系。方法选取本院肿瘤科收治的79例晚期胃癌患者作为病例组,同期60例健康体检者作为对照组。测定2组外周血血清中miR21、let7i的水平,病例组采用奥沙利铂方案(奥沙利铂+卡培他滨或者5氟尿嘧啶+亚叶酸钙+奥沙利铂)进行化疗,分析miR21、let7i与患者临床病理特征、化疗效果的关系。结果化疗前,病例组患者的血清miR21测定值显著高于对照组(P〈0.05);化疗前,ECOG(0-1)级、高+中分化程度晚期胃癌患者的血清miR21测定值显著低于ECOG 2级、低分化患者(P〈0.05);化疗后,CR+PR组患者的血清miR21水平显著低于SD+PD组患者(P〈0.05)。CR+PR组(低水平miR21)患者的中位生存时间显著长于SD+PD组(高水平miR21)(P〈0.05)。结论晚期胃癌患者血清miR21的水平与ECOG分级、组织分化程度、疗效及预后有关。 展开更多
关键词 胃癌 mir21 let7i 奥沙利铂
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宫颈癌Siha细胞miR21基因表达与顺铂敏感相关性研究 被引量:3
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作者 李娟 周艳清 +6 位作者 谭琳玉 赵琴 李剑琦 徐霞英 吕华兵 温启荣 生秀杰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2015年第14期1104-1108,1114,共6页
目的探讨miR21基因表达改变对宫颈癌Siha细胞顺铂敏感性的影响。方法采用脂质体介导法分别以micrOFFTMmiR21inhibitor、micrONTMmiR21mimic、miR21阴性对照试剂转染Siha细胞,实验分为miR21下调组、miR21上调组、阴性对照组及空白对照组... 目的探讨miR21基因表达改变对宫颈癌Siha细胞顺铂敏感性的影响。方法采用脂质体介导法分别以micrOFFTMmiR21inhibitor、micrONTMmiR21mimic、miR21阴性对照试剂转染Siha细胞,实验分为miR21下调组、miR21上调组、阴性对照组及空白对照组。实时荧光定量PCR检测转染后各组细胞中miR21基因的表达水平;CCK-8比色法检测各组细胞对顺铂的半抑制率浓度(50%inhibitory concentration,IC50值);AnnexinⅤ/PI法检测顺铂处理后各组细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法,分别从mRNA和蛋白水平检测顺铂对各组细胞中PTEN、PDCD4基因表达的影响。结果实时荧光定量PCR检测miR21基因的表达结果显示,miR21下调组的表达明显低于阴性对照组,miR21上调组的表达明显高于阴性对照组,F=255.525,P<0.001。CCK-8比色法检测结果显示,顺铂对miR21下调组的IC50值为(2.44±0.69)μg/mL,阴性对照组为(3.96±0.07)μg/mL;miR21上调组为(6.93±0.07)μg/mL,空白对照组为(4.05±0.03)μg/mL,F=870.118,P<0.001。AnnexinⅤ/PI检测结果显示,5μg/mL顺铂诱导miR21下调组的凋亡率为(64.36±2.47)%,阴性对照组为(4.2±0.17)%;miR21上调组为(0.06±0.03)%,空白对照组为(4.14±0.25)%,χ2=10.385,P=0.016。实时荧光定量PCR检测PTEN和PDCD4结果显示,miR21下调组PTEN的mRNA表达相较于阴性对照组显著增加,miR21上调组PTEN的mRNA表达相较于阴性对照组降低,F=174.057,P<0.001;miR21下调组PDCD4的mRNA表达相较于阴性对照组显著增加,miR21上调组PDCD4的mRNA表达相较于阴性对照组降低,F=491.283,P<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,miR21下调组PTEN蛋白表达量为8.845±0.062,阴性对照组7.695±0.056;miR21上调组为6.908±0.058,空白对照组为1,F=16.036,P<0.01。miR21下调组PDCD4蛋白表达量为9.936±0.036,阴性对照组为8.728±0.019;miR21上调组为7.838±0.066,空白对照组为1,F=55.323,P<0.001。结论下调miR21基因可能增加宫颈癌Siha细胞对顺铂的敏感性,上 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 mir21 抗肿瘤药物 化疗敏感性 印迹法 蛋白质
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miR21介导Ang(1-7)对肺成纤维细胞AngⅡ诱导的NLR3炎性体激活的抑制作用
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作者 申光富 杜培 +2 位作者 余蕊 谢召峰 罗长琴 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 CAS 2019年第5期596-600,共5页
目的探讨miR21对肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制。方法将miR21 NC、inhibitor和mimic转染至原代肺成纤维细胞,按照细胞处理方式分为空白对照组、miR21 NC组、inhibitor组和mimic组。利用CCK-8细胞增殖法检测miR21对... 目的探讨miR21对肺成纤维细胞增殖和凋亡的影响,及其可能的作用机制。方法将miR21 NC、inhibitor和mimic转染至原代肺成纤维细胞,按照细胞处理方式分为空白对照组、miR21 NC组、inhibitor组和mimic组。利用CCK-8细胞增殖法检测miR21对肺成纤维细胞增殖的影响;流式细胞仪检测miR21对肺成纤维细胞凋亡的影响;通过RT-PCR法检测转染前后肺成纤维细胞miR21、Ang(1-7)基因水平的表达;应用免疫印迹Western blot检测转染前后miR21、NLRP3蛋白表达水平变化。结果CCK8及流式细胞仪检测显示,miR21具有显著促进肺成纤维细胞增殖、抑制肺成纤维细胞凋亡的作用;RT-PCR分析显示,细胞转染成功后,miR21 mimic/inhibitor组分别抑制/促进了Ang(1-7)表达,促进/抑制了AngⅡ表达(P<0.05),即miR21具有抑制Ang(1-7),促进AngⅡ表达的效果。Western Blot分析表明,miR21 mimic/inhibitor具有上调/下调AngⅡ、NLRP3蛋白表达水平的作用,与NC对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 miR21具有促进肺成纤维细胞增殖、抑制肺成纤维细胞凋亡的作用,其机制可能与miR21介导Ang(1-7)对肺成纤维细胞AngⅡ诱导的NLR3炎性体激活相关。 展开更多
关键词 mir21 肺纤维化 增殖 细胞凋亡 作用机制
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miR21在不同分期直肠癌中的表达及意义
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作者 杨韵 彭伟 +4 位作者 汪晓东 唐恬 段宝凤 夏霖 舒晔 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2014年第8期971-975,共5页
目的检测miR21在不同分期直肠癌中的表达量并讨论其临床意义。方法通过Taq Man探针实时荧光定量检测2012年8~10月期间在我院胃肠外科中心经病理检查新确诊的40例直肠癌患者的癌组织及相应癌旁正常组织中miR21的表达量。结果 40例直肠癌... 目的检测miR21在不同分期直肠癌中的表达量并讨论其临床意义。方法通过Taq Man探针实时荧光定量检测2012年8~10月期间在我院胃肠外科中心经病理检查新确诊的40例直肠癌患者的癌组织及相应癌旁正常组织中miR21的表达量。结果 40例直肠癌组织中miR21表达量明显高于相对应癌旁正常组织(4.122±1.973比1.825±0.661,P=0.000)。N1~N2期直肠癌组织中miR21表达量明显高于N0期(4.852±2.344比3.391±1.171,P=0.019),Dukes C^D期直肠癌组织中miR21表达量明显高于A^B期(4.787±2.304比3.386±1.203,P=0.021)。miR21在N0、N1、N2分期中的表达量呈递增关系,且N2分期中的表达明显高于N0分期,差异有统计学意义(5.556±1.500比3.391±1.171,P=0.010)。ROC曲线分析显示,miR21在预测淋巴结转移时(即N1~N2期),其AUC值为0.698(95%CI为0.530~0.865),敏感度为50.0%,特异性为90.0%;在预测中晚期肿瘤时(即Dukes C^D期),其AUC值为0.689(95%CI为0.524~0.855),敏感度为42.9%,特异性为94.7%。结论 miR21的高表达与直肠癌N分期和Dukes分期有潜在联系,提示miR21可能是潜在的术前预测直肠癌N分期和Dukes分期的指标。 展开更多
关键词 微小RNA mir21 直肠癌 N分期 DUKES分期
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血清miR21在高级别宫颈上皮内瘤变和宫颈癌患者中的表达及其临床意义
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作者 何少仪 孙小丽 +3 位作者 黎玉涵 洪小山 布俏雯 罗喜平 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第A01期9-11,共3页
目的 检测血清miR21在宫颈HSIL、宫颈癌患者中表达情况,探讨血清miR21在宫颈癌诊断中的意义;方法 采用qRT-PCR方法,以miR39为外参,以无宫颈病患者为对照组,检测miR21在宫颈HSIL、宫颈癌组织和血清中的表达水平;结果 在组织中,miR21在宫... 目的 检测血清miR21在宫颈HSIL、宫颈癌患者中表达情况,探讨血清miR21在宫颈癌诊断中的意义;方法 采用qRT-PCR方法,以miR39为外参,以无宫颈病患者为对照组,检测miR21在宫颈HSIL、宫颈癌组织和血清中的表达水平;结果 在组织中,miR21在宫颈癌组中表达水平明显高于对照组和宫颈HSIL组(均P<0.05);在血清中,miR21在宫颈癌组中表达水平明显高于正常对照组(P<0.05),但与宫颈HSIL组对比无明显差异(P>0.05);miR21在宫颈癌患者组织和血清中的表达水平呈正相关,相关系数为(r =0.808,P<0.05);miR21在宫颈癌组织中ROC曲线下面积AUC为0.942,最大约登指数0.509,灵敏度为96.4%,特异度为54.5%;而在宫颈癌患者血清中ROC曲线下面积ACU为0.699,最大约登指数0.95,灵敏度为97.7%,特异度为97.3%;结论 miR21在宫颈癌组织和血清中均呈高表达,它们在宫颈癌组织和血清中表达水平均呈正相关,可能与宫颈癌发生发展有关;血清miR21可能是诊断宫颈癌的一个理想的肿瘤标志物. 展开更多
关键词 血清 mir21 宫颈HSIL 宫颈癌
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多囊卵巢综合征患者血清miR-21表达与肥胖和糖脂代谢的关系 被引量:8
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作者 白爱红 滕少侠 +3 位作者 谢文燕 李荣香 胥博 付秀虹 《中国计划生育学杂志》 2018年第11期1094-1097,共4页
目的:探讨多囊卵巢综合征患者血清miR-21表达特点及与肥胖、糖脂代谢关系。方法:连续性选取2016年2月-2017年12月本院生殖医学与遗传中心就医的PCOS患者96例为研究对象(观察组),并选择60例基础体温双相的不孕症患者为对照组。采用实时定... 目的:探讨多囊卵巢综合征患者血清miR-21表达特点及与肥胖、糖脂代谢关系。方法:连续性选取2016年2月-2017年12月本院生殖医学与遗传中心就医的PCOS患者96例为研究对象(观察组),并选择60例基础体温双相的不孕症患者为对照组。采用实时定量PCR技术检测两组血清miR-21表达,以BMI≥25kg/m2为肥胖,将PCOS患者分为PCOS合并肥胖组、PCOS正常体重组;依据血脂血糖水平将患者分为PCOS合并糖脂代谢异常组、PCOS糖脂代谢正常组,分析各组血清miR-21的表达差异,Pearson相关性分析miR-21与肥胖、糖脂代谢异常的相关性。结果:血清miR-21观察组(2.71±0.69)高于对照组(1.10±0.26),PCOS合并肥胖患者(2.91±0.82)高于PCOS正常体重患者(1.80±0.36),PCOS合并糖脂代谢异常组患者(2.81±0.72)高于PCOS糖脂代谢正常组(1.50±0.16)(均P<0.05);观察组miR-21与LDL-C、HOMA-IR、BMI均呈正相关(r=0.430、0.516、0.356,P<0.05),与对照组无相关性。结论:PCOS患者血清miR-21表达明显上调,且与PCOS患者肥胖程度和糖脂代谢异常有关。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 血清mir-21 肥胖 糖脂代谢
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miR-21-5p对川崎病内皮细胞焦亡的作用及其机制研究
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作者 徐秀娟 俞益萍 《浙江医学》 CAS 2024年第7期688-695,共8页
目的探究miR-21-5p对川崎病(KD)内皮细胞焦亡的作用及其机制。方法采用随机数字表法将16只C57BL/6小鼠分为KD组和PBS组,每组8只。利用干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)腹腔注射小鼠,构建KD模型。利用LCWE处理小鼠冠状动脉内皮细胞(MCAECs)... 目的探究miR-21-5p对川崎病(KD)内皮细胞焦亡的作用及其机制。方法采用随机数字表法将16只C57BL/6小鼠分为KD组和PBS组,每组8只。利用干酪乳杆菌细胞壁提取物(LCWE)腹腔注射小鼠,构建KD模型。利用LCWE处理小鼠冠状动脉内皮细胞(MCAECs),构建KD体外细胞模型。在使用LCWE处理的基础上,根据转染miR-21-5p抑制剂(miR-21-5p inhibitor)或inhibitor阴性对照物(inhibitor-NC)、miR-21-5p模拟物(miR-21-5p mimics)或mimics阴性对照物(miR-NC)、用或不用含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)抑制剂MCC950,将MCAECs分组为:(1)LCWE组和对照组;(2)LCWE+inhibitor-NC组和LCWE+miR-21-5p inhibitor组;(3)LCWE组、LCWE+MCC950组、LCWE+MCC950+miR-NC组和LCWE+MCC950+miR-21-5p mimics组。采用HE染色观察小鼠冠状动脉组织病理学变化;采用qRT-PCR法检测miR-21-5p表达变化;采用Western blot检测焦亡相关蛋白NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)、caspase-1前体(pro-caspase-1)、消皮素D蛋白(GSDMD)p30、IL-1β、IL-18的蛋白表达;采用细胞计数盒法检测细胞活力;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测LDH活性。结果与PBS组相比,KD组小鼠冠状动脉组织病变明显,冠状动脉组织中NLRP3介导的细胞焦亡、miR-21-5p表达水平均升高(均P<0.01)。与对照组相比,LCWE组MCAECs细胞活力明显降低并且miR-21-5p表达水平明显升高(均P<0.01)。与LCWE+inhibitor-NC组相比,LCWE+miR-21-5p inhibitor组细胞miR-21-5p表达水平、NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD p30、IL-1β、IL-18的蛋白表达以及LDH活性均明显降低(均P<0.01),而细胞活力明显升高(P<0.05)。与LCWE组相比,LCWE+MCC950组NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD p30、IL-1β、IL-18的蛋白表达以及LDH活性均明显降低(均P<0.01),且细胞活力明显升高(P<0.01),而进一步转染miR-21-5p mimics明显逆转了以上变化(均P<0.01)。结论在KD中,miR-21-5p通过激活NLRP3炎症小体调节血管内皮细胞焦亡,� 展开更多
关键词 川崎病 炎症小体 细胞焦亡 mir-21-5p 含NLR家族Pyrin域蛋白3
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基于miR21/PI3K-Akt/SREBP通路研究泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制
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作者 鞠爱霞 孙爽 +5 位作者 王瑞楠 韩宇博 周育生 陈晶 刘莉 李秋红 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期917-931,共15页
目的 探索经典名方泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制。方法 采用ELISA法检测血清中血脂四项、肝功能指标及胆固醇脂酰转移酶(LCAT)水平。采用HE和油红O染色法判断肝组织病理情况。采用网络药理学预测泽泻汤降脂相关靶点,实现对... 目的 探索经典名方泽泻汤对高脂血症模型小鼠的调脂作用机制。方法 采用ELISA法检测血清中血脂四项、肝功能指标及胆固醇脂酰转移酶(LCAT)水平。采用HE和油红O染色法判断肝组织病理情况。采用网络药理学预测泽泻汤降脂相关靶点,实现对交集靶点GO功能和KEGG通路富集分析。采用PCR芯片技术检测网络药理学筛选的目的基因,应用qPCR和Western blot检测基因和蛋白表达量。结果 泽泻汤可显著调节高脂血症模型小鼠的血脂四项水平,改善因高脂引起的肝损伤指标升高,对肝脏组织中脂质代谢关键酶HMGR、CYP7A1及脂质转运体ABCA1、Apo-A1具有反向调节作用。HE和油红O染色显示,泽泻汤可改善肝组织病理形态,减轻肝组织的脂质沉积情况,阳性面积比率显著下降(P<0.01)。PCR芯片获取反向调节基因44个,GO功能富集分析获取了266个条目,KEGG通路富集分析筛选得到99条信号通路。qPCR及Western blot结果显示,泽泻汤组显著下调PIK3CG、AKT1、IL-6基因表达量(P<0.05,P<0.01),上调ABCG1基因表达量(P<0.05),下调PI3 Kinase p110β、p-AKT(Ser473)及SREBP-1c蛋白表达水平(P<0.01);泽泻汤能够反向调节miR21-5p(P<0.01)。结论 泽泻汤对高脂血症模型小鼠脂代谢具有显著的调节作用,能改善高脂血症引起的肝损伤,其调脂作用可能与调节胆固醇在体内代谢、转运有关,与miR21/PI3K-Akt/SREBP通路密切相关,且泽泻汤全方调脂效果优于单味药。 展开更多
关键词 泽泻汤 mir21/PI3K-Akt/SREBP通路 高脂血症
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大鼠肝癌细胞与胚胎肝细胞microRNA差异表达谱的研究 被引量:3
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作者 吴印涛 李韧 +2 位作者 刘卫辉 张福琴 窦科峰 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期917-920,共4页
目的建立大鼠肝癌细胞与大鼠胚胎肝细胞microRNA(miRNA)表达的差异谱,为研究miRNA在肝细胞癌变发生机制中的作用提供新线索。方法化学致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)建立近交系F334大鼠肝癌模型,体外原代培养大鼠肝癌细胞和正常F334大... 目的建立大鼠肝癌细胞与大鼠胚胎肝细胞microRNA(miRNA)表达的差异谱,为研究miRNA在肝细胞癌变发生机制中的作用提供新线索。方法化学致癌剂二乙基亚硝胺(DEN)建立近交系F334大鼠肝癌模型,体外原代培养大鼠肝癌细胞和正常F334大鼠胚胎肝细胞,TRIzol法抽提细胞总RNA,进一步制备Hy3荧光标记的miRNA;利用ExiqonmiRNA基因芯片技术,采用含2056条探针的哺乳动物miRNA表达谱芯片对两组之间差异表达的miRNA进行分析,其实验数据用SAM3.0软件进行差异显著性分析。结果原代培养可获得稳定传代的肝癌细胞及胎肝细胞,两者在形态上无明显差异;miRNA芯片共获得78个差异表达的miRNAs,其中68个表达E调(foldchange〉2),10个表达下调(foldchanged 0.5).部分miRNAs与肿瘤关系密切,其中hsa-miR-21为肝癌癌变相关miRNA。结论正常肝细胞中存在着与肝细胞癌变及侵袭、转移相关的miRNAs,miRNAs的表达具有明显的时序性,其表达特征的改变可能导致了肝癌的发生。 展开更多
关键词 肝细胞 mirNA芯片 胎肝细胞 mircoRNAs
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miR21抑制剂对肺腺癌细胞A-549的抑制效果
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作者 姜学东 王琼 +1 位作者 刘长浩 王国柱 《武警医学》 CAS 2014年第5期500-502,506,共4页
目的探讨miR21抑制剂转染人肺腺癌细胞A-549对其体外侵袭及血管形成能力的影响。方法 miR21抑制剂转染A-549细胞,同时设置未转染的A-549细胞作为对照组,转染24、48、72及96 h后,四甲基偶唑氮法(MTT)法检测两组细胞增殖抑制率;Transwell... 目的探讨miR21抑制剂转染人肺腺癌细胞A-549对其体外侵袭及血管形成能力的影响。方法 miR21抑制剂转染A-549细胞,同时设置未转染的A-549细胞作为对照组,转染24、48、72及96 h后,四甲基偶唑氮法(MTT)法检测两组细胞增殖抑制率;Transwell方法检测miR21抑制剂对A-549细胞侵袭的影响;小管形成实验检测miR21抑制剂对血管形成的影响。结果转染24 h,两组抑制率比较,差别无统计学意义;转染48 h及以后,抑制剂组抑制率均高于对照组,差别有统计学意义(P<0.05)。Transwell检测结果显示miR21抑制剂组每个视野细胞数(11.60±5.32)个远少于对照组(107.60±3.21)个,两组差别有统计学意义(P<0.01)。抑制剂组每视野小管计数平均(159.30±0.51)个,远少于对照组(508.80±1.30)个,两组差别有统计学意义(P<0.01)。结论 miR21抑制剂能够明显抑制A-549的侵袭能力,并能明显抑制血管内皮细胞血管生成,提示miR21抑制剂可以作为潜在的肺癌基因治疗的新方法。 展开更多
关键词 mir21抑制剂 细胞侵袭 血管形成 肺腺癌
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