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MiR-126通过MAPK信号通路抑制oxLDL处理的血管平滑肌细胞增殖和迁移 被引量:27
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作者 郑茜 张勇 杨东伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期192-198,共7页
目的:探索miR-126对ox LDL处理的血管平滑肌细胞(VSMC)生物学功能的影响及其分子机制。方法:采用ox LDL处理人主动脉血管平滑肌细胞建立模型。实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-126表达。CCK-8实验检测细胞增殖。Transwell实验分析细胞迁移... 目的:探索miR-126对ox LDL处理的血管平滑肌细胞(VSMC)生物学功能的影响及其分子机制。方法:采用ox LDL处理人主动脉血管平滑肌细胞建立模型。实时定量PCR(qRT-PCR)检测miR-126表达。CCK-8实验检测细胞增殖。Transwell实验分析细胞迁移。免疫印迹分析增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)、增殖细胞核抗原(PCNA)、迁移标记蛋白基质金属蛋白酶9(MMP-9)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白ERK1/2、p-ERK1/2、p38、p-p38、JNK和p-JNK的表达。结果:模型组的miR-126表达显著低于对照组(P<0.01)。与模型组相比,miR-126 mimic组miR-126表达极显著升高(P<0.001)。模型组和mimic control组细胞增殖倍数明显高于对照组(P<0.05)。与模型组相比,miR-126 mimic组细胞增殖倍数明显降低(P<0.05)。与对照组相比,模型组和mimic control组细胞迁移能力大大提高(P<0.001)。miR-126 mimic组细胞迁移显著低于模型组(P<0.01)。模型组和mimic control组细胞增殖标记蛋白Ki-67和PCNA,迁移标记蛋白MMP-9和VEFG表达显著高于对照组(P<0.01)。与模型组相比,miR-126 mimic组增殖标记蛋白Ki-67和PCNA及迁移标记蛋白MMP-9和VEFG表达明显减弱(P<0.05)。而且,与对照组相比,模型组和mimic control组中pERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38、p-JNK/JNK的相对蛋白表达量的比值显著升高(P<0.01)。miR-126 mimic组p-ERK1/2/ERK1/2、p-p38/p38、p-JNK/JNK的相对蛋白表达量的比值则明显低于模型组(P<0.05)。与对照组相比,模型组Ki-67、PCNA、MMP-9、VEGF表达明显升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-126 mimic组Ki-67、PCNA、MMP-9、VEGF表达明显降低(P<0.05);Anisomycin组Ki-67、PCNA、MMP-9、VEGF表达明显升高(P<0.05)。miR-mimic+Anisomycin组Ki-67、PCNA、MMP-9和VEGF表达与模型组无明显差异。结论:MiR-126通过MAPK信号通路抑制ox 展开更多
关键词 mir-126 MAPK 动脉粥样硬化 增殖 迁移
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Plasma miR-216a as a potential marker of pancreatic injury in a rat model of acute pancreatitis 被引量:19
2
作者 Xiang-Yu Kong,Yi-Qi Du,Lei Li,Xiao-Hua Man,Yan-Fang Gong,Li-Ning Xiao,Yong-Zhi Zheng,Shang-Xin Deng,Jun-Jun Gu,Zhao-Shen Li,Department of Gastroenterology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shang-hai 200433,China Jian-Qiang Liu,Department of Gastroenterology,Fuzhou General Hospital of Nanjing Military Command,Fuzhou 350025,Fujian Province,China Guo-Kun Wang,Jia-Qi Zhu,Department of Cardiology,Changhai Hospital,Second Military Medical University,Shang-hai 200433,China 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2010年第36期4599-4604,共6页
AIM:To study the potential value and specificity of plasma miR-216a as a marker for pancreatic injury.METHODS:Two rat models were applied in this article:L-arginine-induced acute pancreatitis was used as one model to ... AIM:To study the potential value and specificity of plasma miR-216a as a marker for pancreatic injury.METHODS:Two rat models were applied in this article:L-arginine-induced acute pancreatitis was used as one model to explore the potential value of plasma miR-216a for detection of pancreatic injury;nonlethal sepsis induced in rats by single puncture cecal ligation and puncture(CLP)was used as the other model to evaluate the specificity of plasma miR-216a compared with twocommonly used markers(amylase and lipase)for acute pancreatitis.Plasmas were sampled from rats at indicated time points and total RNA was isolated.Real-Time Quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction was used to quantify miR-216a in plasmas.RESULTS:In the acute pancreatitis model,among five time points at which plasmas were sampled,miR-216a concentrations were significantly elevated 24 h after arginine administration and remained significantly increased until 48 h after operation(compared with 0 h time point,P<0.01,Kruskal-Wallis Test).In the CLP model,plasma amylase and lipase,two commonly used biomarkers for acute pancreatitis,were significantly elevated 24 h after operation(compared with 0 h time point,P<0.01 and 0.05 respectively,Pairwise Bonferroni corrected ttests),while miR-216a remained undetectable among four tested time points.CONCLUSION:Our article showed for the first time that plasma miR-216a might serve as a candidate marker of pancreatic injury with novel specificity. 展开更多
关键词 mir-216a PLASMA mirNA PANCREATIC INJURY Acute PANCREATITIS BIOMARKER
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miR-216a在急性胰腺炎患者外周血的表达及临床意义 被引量:12
3
作者 王春全 陈景祥 +2 位作者 杨进军 唐小卿 简华刚 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期47-49,共3页
目的探讨急性胰腺炎患者外周血细胞微小RNA-216a(miR-216a)的表达及其临床意义。方法对60例患者急性胰腺炎患者、20例伴有血淀粉酶升高的非急性胰腺炎病例及60例正常对照的血标本进行血浆RNA抽提,并通过RT-PCR进行miR-216a的检测分析,... 目的探讨急性胰腺炎患者外周血细胞微小RNA-216a(miR-216a)的表达及其临床意义。方法对60例患者急性胰腺炎患者、20例伴有血淀粉酶升高的非急性胰腺炎病例及60例正常对照的血标本进行血浆RNA抽提,并通过RT-PCR进行miR-216a的检测分析,评估血浆miR-216a对急性胰腺炎的诊断效能。结果胰腺炎患者的外周血细胞miR-216a表达显著高于健康对照者,差异有统计学意义(P<0.01)。而血淀粉酶的升高的非急性胰腺炎病例miR-216a与正常对照比,没有显著性差异(P>0.05)。结论性胰腺炎患者外周血细胞miR-216a表达水平增高,作为重要生物标志物有可能为急性胰腺炎的断提供一定的依据。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 mir-216a 生物标志物
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miR-216a在胰腺癌组织中的表达及临床意义 被引量:10
4
作者 侯宝华 简志祥 +4 位作者 崔鹏 陈斯聪 区应亮 李少杰 区金锐 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1628-1631,共4页
目的分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在应用价值。方法收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent人microRNA寡核苷酸基因芯片(V1... 目的分析20例胰腺癌及胰腺良性病变组织中miR-216a的表达差异,探讨miR-216a在胰腺癌中表达的临床意义及潜在应用价值。方法收集14例胰腺癌患者手术标本的癌组织,6例胰腺良性病变组织作为对照。采用Agilent人microRNA寡核苷酸基因芯片(V12.0)在基因组范围内检测20例组织标本的miR-216a表达,并分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。结果胰腺癌组织中miR-216a的表达显著低于胰腺良性病变组织(P=0.000),miR-216a在胰腺癌组织中的表达与患者年龄、性别、吸烟、临床分期、局部淋巴结转移,远处转移、CA19-9浓度、肿瘤分化程度、神经束膜侵犯、脉管侵犯均无相关性(P>0.05),而与肿瘤T分期具有显著统计学意义(P=0.002)。结论 miR-216a在胰腺癌的发生、发展过程可能发挥重要作用,检测miR-216a有望成为胰腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。 展开更多
关键词 胰腺癌 mir-216a 临床病理特征
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血清miR-216a检测在急性胰腺炎诊断及预后监测中的价值 被引量:9
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作者 陆攀 宋佳希 +3 位作者 王锋 闫静 万淑君 汪俊军 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2017年第8期579-582,共4页
目的检测急性胰腺炎(AP)患者血清miR-216a的表达水平,探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例轻症急性胰腺炎(MAP)、80例重症急性胰腺炎(SAP)患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水... 目的检测急性胰腺炎(AP)患者血清miR-216a的表达水平,探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测80例轻症急性胰腺炎(MAP)、80例重症急性胰腺炎(SAP)患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水平。全自动生化免疫分析仪检测各组淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、Ca2+、葡萄糖(Glu)、红细胞比容(HCT)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和C反应蛋白(CRP)等指标。ROC曲线及相关性分析评估miR-216a对AP患者的临床应用价值。结果与健康人对照组[(11.12×10^(-5)(5.83×10^(-5),19.12×10^(-5))]相比,AP患者血清miR-216a的水平[38.49×10^(-5)(24.05×10^(-5),62.02×10^(-5))]明显升高(U=-9.10,P<0.01)。但MAP与SAP患者血清miR-216a水平[分别为36.46×10^(-5)(22.29×10^(-5),55.80×10^(-5)),40.44×10^(-5)(25.84×10^(-5),65.48×10^(-5))]差异无统计学意义(U=-0.96,P>0.05)。miR-216a用于鉴别对照组和AP患者的ROC曲线下面积(AUCROC)为0.870(95%CI:0.825~0.915),cut-off值为0.61;用于鉴别对照组和MAP患者的AUCROC为0.865(95%CI:0.808~0.921),cut-off值为0.59;用于鉴别对照组与SAP患者的AUCROC为0.876(95%CI:0.822~0.930),cut-off值为0.66。AP患者治疗好转后,其血清miR-216a的表达水平由[41.88×10^(-5)(24.24×10^(-5),64.44×10^(-5))]下降至[20.58×10^(-5)(11.01×10^(-5),41.91×10^(-5))],差异有统计学意义(U=5.24,P<0.01)。相关性分析结果显示,AP患者血清miR-216a的表达水平与CRP呈正相关(r=0.215 P=0.006)。结论 AP患者血清miR-216a水平明显升高,可用于AP辅助诊断及预后监测。 展开更多
关键词 急性胰腺炎 mir-216a 生物学标志物 预后监测
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LncRNA DANCR调控食管癌细胞增殖、转移及其miR-216a表达的研究
6
作者 周爱国 郑梦利 +1 位作者 张书新 周鹏宇 《循证医学》 2024年第4期227-233,共7页
目的探讨长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码(long non-coding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,lncRNA DANCR)调控食管癌细胞增殖、转移及miR-216a表达的影响。方法本研究通过慢病毒转染技术构建了过表达及敲低l... 目的探讨长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码(long non-coding RNA differentiation antagonizing nonprotein coding RNA,lncRNA DANCR)调控食管癌细胞增殖、转移及miR-216a表达的影响。方法本研究通过慢病毒转染技术构建了过表达及敲低lncRNADANCR的食管癌细胞株,随后通过CCK-8实验、划痕实验和Transwell实验来验证lncRNADANCR对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。荧光素酶报告基因实验检测食管癌细胞中lncRNADANCR对miR-216a表达的抑制作用。结果LncRNADANCR过表达促进了食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭作用,而敲低则削弱了其增殖和转移作用。逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)实验结果显示lncRNA DANCR抑制了miR-216a的表达,荧光素酶报告基因实验的结果也证实了这一结果。结论LncRNA DANCR能够正向调控食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,但与miR-216a表达呈负相关性。 展开更多
关键词 lncRNADANCR 食管癌 mir-216a 增殖 转移 侵袭
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胃癌中miR-216a表达的变化及其对胃癌细胞侵袭的靶向调控作用 被引量:6
7
作者 苟兰琼 何平 +4 位作者 郑连喜 陈宗万 屈敏 杨科 弓达秀 《川北医学院学报》 CAS 2019年第4期347-350,共4页
目的:研究胃癌中微小RNA-216a(miR-216a)表达的变化及其对胃癌细胞侵袭的靶向调控作用。方法:收集胃癌组织及癌旁组织,检测miR-216a的表达量;培养SGC7901细胞株并分为转染阴性对照(NC)模拟物的NC组、转染miR-216a模拟物的miR-216a组,检... 目的:研究胃癌中微小RNA-216a(miR-216a)表达的变化及其对胃癌细胞侵袭的靶向调控作用。方法:收集胃癌组织及癌旁组织,检测miR-216a的表达量;培养SGC7901细胞株并分为转染阴性对照(NC)模拟物的NC组、转染miR-216a模拟物的miR-216a组,检测穿膜细胞数、侵袭基因基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及信号通路分子Janus相关激酶2(JAK2)、信号传导及转录激活因子3(STAT3)的表达量。结果:胃癌组织中miR-216a的表达量明显低于癌旁组织(P<0.05),且TNM分期、低未分化Ⅲ期、有淋巴结转移的胃癌中miR-216a的表达量明显低于TNM分期Ⅰ-Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移的胃癌(P<0.05);miR-216a组SGC7901细胞的穿膜数目明显少于NC组,细胞中MMP2、MMP9、N-cadherin、p-JAK2、p-STAT3的蛋白表达量及MMP2、MMP9、N-cadherin、JAK2、STAT3的mRNA表达量均明显低于NC组(P<0.05)。结论:胃癌中miR-216a的低表达能够靶向促进胃癌细胞的侵袭,且与JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 胃癌 mir-216a 侵袭 JAK2/STAT3信号通路
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地黄多糖上调miR-216a表达对缺氧/复氧诱导的肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响 被引量:2
8
作者 其其格 夏丽华 任睿 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1466-1472,1576,共8页
目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h)... 目的探讨地黄多糖对缺氧/复氧(H/R)诱导的人肾小管上皮细胞氧化应激和细胞凋亡的影响及可能机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,用不同剂量(10、20、40μg·mL^(-1))地黄多糖干预HK-2细胞24 h后,建立H/R模型(缺氧6 h,复氧12 h),试剂盒检测细胞中MDA含量及GSH-PX和SOD活性,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3和cleaved-caspase9蛋白表达,qRT-PCR检测细胞中miR-216a表达。转染miR-216a模拟物或抑制剂至HK-2细胞后,建立H/R模型,上述相同方法检测细胞氧化应激水平和凋亡情况。结果与H/R组比较,地黄多糖降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase3、cleaved-caspase9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。同时,地黄多糖促进了H/R诱导的HK-2细胞中miR-216a的表达(P<0.05)。上调miR-216a降低H/R诱导的HK-2细胞中MDA含量、凋亡率、蛋白(cleaved-caspase 3、cleaved-caspase 9)表达(P<0.05),而提高GSH-PX和SOD活性(P<0.05)。下调miR-216a逆转地黄多糖对H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡的影响。结论地黄多糖可能通过上调miR-216a抑制H/R诱导的HK-2细胞氧化应激和凋亡。 展开更多
关键词 地黄多糖 肾小管上皮细胞 mir-216a 氧化应激 凋亡
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LncRNA DANCR通过负调控miR-216a表达参与牙周膜干细胞成骨分化和迁移
9
作者 任燕 张雪 +1 位作者 白静 李月辉 《临床口腔医学杂志》 2024年第1期3-7,共5页
目的:探究长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码RNA(lncRNA DANCR)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化和迁移的影响及其潜在机制。方法:采用Western blot方法检测成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phos... 目的:探究长链非编码RNA分化拮抗非蛋白编码RNA(lncRNA DANCR)对人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,hPDLSCs)成骨分化和迁移的影响及其潜在机制。方法:采用Western blot方法检测成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OCN)和Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)的蛋白表达。qRT-PCR检测miR-216a-5p和DANCR的相对表达水平。miR-216a-5p和DANCR之间的关系通过荧光素酶报告基因、RNA免疫沉淀进行评估。Transwell实验检测细胞迁移能力。结果:hPDLSCs被成骨分化诱导培养基刺激后,DANCR表达降低而miR-216a-5p表达升高。DANCR过表达或者miR-216a-5p敲低均降低了hPDLSCs中ALP、OCN和RUNX2的蛋白表达,并且抑制了ALP活性和细胞迁移能力。DANCR与miR-216a-5p存在靶向关系。结论:DANCR可通过调控miR-216a表达参与hPDLSCs成骨分化和迁移。 展开更多
关键词 牙周炎 LncRNA DANCR mir-216a 牙周膜细胞
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miR-216a抑制Kruppel样转录因子9调控核因子-κB信号通路对肾小管上皮细胞急性肾损伤的影响 被引量:6
10
作者 万笑笑 《安徽医药》 CAS 2020年第9期1791-1795,共5页
目的探讨miR-216a对Kruppel样转录因子9(KLF9)的调控作用,及其对缺氧-复氧(H/R)诱导的肾小管上皮细胞急性肾损伤的影响。方法将293T细胞(人肾上皮细胞系)分为KLF9野生型载体、miR-216a mimics(类似物)+KLF9野生型载体、miR-216a NC(阴... 目的探讨miR-216a对Kruppel样转录因子9(KLF9)的调控作用,及其对缺氧-复氧(H/R)诱导的肾小管上皮细胞急性肾损伤的影响。方法将293T细胞(人肾上皮细胞系)分为KLF9野生型载体、miR-216a mimics(类似物)+KLF9野生型载体、miR-216a NC(阴性对照)+KLF9野生型载体,利用荧光素酶报告基因验证miR-216a与KLF9的结合关系。H/R诱导大鼠肾脏近端肾小管上皮细胞,并转染miR-216a mimics,将大鼠肾脏近端肾小管上皮细胞系RPTC分为对照组,H/R组,H/R+miR-216a NC组,H/R+miR-216a mimics组。检测miR-216a、KLF9、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、血管生长因子A(VEGF-A)、尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)mRNA表达。结果 miR-216a mimics+KLF9野生型共转染组的荧光素酶活性显著低于KLF9野生型组、miR-216a NC+KLF9野生型共转染组的荧光素酶活性(P<0.05)。与对照组比较,H/R组和H/R+miR-216a NC组miR-216a[(0.56±0.11)及(0.48±0.06)比(1.00±0.00)]表达量下调(P<0.05),KLF9[(2.77±0.19)及(2.79±0.10)比(1.00±0.00)]、NF-κB p65[(2.35±0.02)及(2.42±0.27)比(1.00±0.00)]、TNF-α[(2.40±0.21)及(2.44±0.11)比(1.00±0.00)]、VEGF-A[(4.17±0.07)及(4.19±0.11)比(1.00±0.00)]、uPA[(2.28±0.05)及(2.38±0.13)比(1.00±0.00)]mRNA表达量上调(P<0.05);与H/R组和H/R+miR-216a NC组比较,H/R+miR-216a mimics组中miR-216a[(31.75±2.40),F=45.87,P=0.000]表达量上调,KLF9[(1.96±0.04),F=13.98,P=0.005]、NF-κB p65[(2.15±0.15),F=14.89,P=0.001]、TNF-α[(1.79±0.10),F=18.90,P=0.000]、VEGF-A[(3.65±0.04),F=15.94,P=0.000]、uPA[(2.06±0.11),F=14.22,P=0.001]mRNA表达量下调(P<0.05)。结论 miR-216a过表达通过靶向下调KLF9表达进而抑制NF-κB信号通路,降低肾小管上皮细胞急性肾损伤。 展开更多
关键词 急性肾损伤 肾小管 上皮细胞 mir-216a Kruppel样转录因子9 核因子-ΚB
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miR-216a通过靶向调控蛋白激酶Cα抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭 被引量:6
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作者 赵文健 杨亮 唐伟军 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期420-424,共5页
背景与目的:MicroRNAs是一类19~25bp内源非编码的小分子RNA,其通过靶向抑制基因的转录和翻译水平。本研究旨在明确miR-216a是否通过靶向调控蛋白激酶Ca(PRKCA)表达而抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭能力,从而进一步揭示miR-216a的抑瘤... 背景与目的:MicroRNAs是一类19~25bp内源非编码的小分子RNA,其通过靶向抑制基因的转录和翻译水平。本研究旨在明确miR-216a是否通过靶向调控蛋白激酶Ca(PRKCA)表达而抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭能力,从而进一步揭示miR-216a的抑瘤分子机制。方法:首先构建PRKCA3’UTR-荧光素酶报告载体,通过双荧光素酶报告检测观察miR-216a对PRKCA3’UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-216amimics转染胶质瘤细胞U251,采用Westernblot检测PRKCA蛋白表达水平;将PRKCAsiRNA转染U251细胞,通过MTS细胞增殖活性检测和transwell侵袭实验观察PRKCA下调对U251细胞增殖和侵袭的影响。结果:双荧光素酶报告检测显示,miR-216a能特异性地与PRKCAmRNA的3’UTR结合,抑制其荧光素酶活性,下调41%。过表达miR-216a的U251细胞PRKCA蛋白表达水平降低。siRNA干扰PRKCA表达能抑制U251细胞的增殖和侵袭,它能部分模拟miR-216a的抑瘤功能。结论:miR-216a通过靶向PRKCAmRNA3’UTR而抑制胶质瘤细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 胶质瘤 mir-216a 蛋白激酶CΑ 细胞增殖 侵袭
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微小RNA-216a在急性胰腺炎并发肺损伤患者中的表达水平及其对内皮细胞通透性的影响 被引量:6
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作者 朱惠云 宋英晓 +1 位作者 孔祥毓 杜奕奇 《中华胰腺病杂志》 CAS 2020年第4期250-253,共4页
目的:探讨微小RNA-216a(miR-216a)在AP并发肺损伤患者中的表达水平及其对内皮细胞通透性的影响。方法:收集2015年12月至2016年3月间海军军医大学第一附属医院消化内科收治的40例AP患者,根据患者是否并发急性肺损伤(ALI),分为AP伴ALI组(A... 目的:探讨微小RNA-216a(miR-216a)在AP并发肺损伤患者中的表达水平及其对内皮细胞通透性的影响。方法:收集2015年12月至2016年3月间海军军医大学第一附属医院消化内科收治的40例AP患者,根据患者是否并发急性肺损伤(ALI),分为AP伴ALI组(AP-ALI组,13例)和AP不伴ALI组(AP组,27例)。以8名健康志愿者为对照组。抽血分离血浆并抽提RNA,采用RT-PCR法检测3组血浆miR-216a水平。使用外泌体抽提试剂盒提取血浆中的外泌体,并通过电镜观察进行外泌体鉴定。抽提外泌体RNA,检测外泌体中miR-216a的水平。将AP-ALI组患者血浆外泌体分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC,AP-ALI-HUVEC组)、转染anti-miR-216a的HUVEC(AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组)共培养24 h,以未做任何处理的HUVEC作为对照组,用Millicell ERS-2上皮伏特欧姆计测量3组跨内皮细胞电阻,以表示其通透性。结果:AP-ALI组血浆miR-216a水平为14.45±1.64,显著高于AP组的11.08±1.60和对照组的5.37±1.54,差异有统计学意义(P值均<0.01)。电镜下可见血浆外泌体呈杯状膜泡样,大小50~90 nm。AP-ALI组血浆外泌体miR-216a水平为14.03±1.58,显著高于AP组的10.86±1.31和对照组的5.01±0.79,差异有统计学意义(P值均<0.01)。以对照组HUVEC细胞的电阻值为1,AP-ALI-HUVEC组跨内皮细胞的电阻比值显著低于AP-ALI-anti-miR-216a HUVEC组(0.74±0.04比1.02±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-216a水平在AP并发ALI患者血浆外泌体中显著增加。miR-216a可增加HUVEC细胞的通透性,可能与AP时肺损伤的发生相关。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 肺损伤 mir-216a 细胞通透性
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miR-216a调控NF-κB信号通路参与脓毒症急性肾损伤的机制 被引量:5
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作者 邓林林 张啸 +2 位作者 高仪 龚园其 蓝海兵 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第17期2133-2137,共5页
目的探讨miR-216a通过NF-κB信号通路对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用机制。方法选取SD大鼠40只,采用盲肠结扎穿孔法进行造模,随机分为假手术组、模型组、miR-NC组、miR-216a组,各组10只。观察肾脏病理形态学变化;采用RT-PCR检测各组大鼠... 目的探讨miR-216a通过NF-κB信号通路对脓毒症大鼠急性肾损伤的作用机制。方法选取SD大鼠40只,采用盲肠结扎穿孔法进行造模,随机分为假手术组、模型组、miR-NC组、miR-216a组,各组10只。观察肾脏病理形态学变化;采用RT-PCR检测各组大鼠肾组织中miR-216a表达情况;采用全自动生化分析仪检测大鼠血清中生化指标水平;采用ELISA法检测各组大鼠炎症因子水平;采用Western blot检测鼠NF-κB通路相关蛋白表达。结果假手术组大鼠肾组织结构无异常;模型组和miR-NC组肾组织伴有炎性浸润、肾间质加宽;miR-216a组炎性浸润现象以及肾小球病变情况有所缓解;与假手术组相比,模型组、miR-NC组肾组织miR-216a表达水平较低,与miR-NC组相比,miR-216a组肾组织的miR-216a表达水平较高(P<0.05);与假手术组相比,模型组、miR-NC组大鼠血清Scr、BUN、KIM-1水平较高,与miR-NC组相比miR-216a组大鼠血清Scr、BUN、KIM-1水平较低(P<0.05);与假手术组相比,模型组、miR-NC组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平较高,与miR-NC组相比miR-216a组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平较低(P<0.05);与假手术组相比,模型组、miR-NC组大鼠肾组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65表达较高,与miR-NC组相比miR-216a组大鼠肾组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65表达较低(P<0.05)。结论miR-216a过表达可以降低脓毒症大鼠炎症水平,改善肾损伤,可能是通过调控NF-κB信号通路实现的。 展开更多
关键词 mir-216a NF-ΚB信号通路 脓毒症 急性肾损伤
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血清miR-216a水平与急性胰腺炎严重程度的相关性研究 被引量:5
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作者 王剑彬 吴彩月 +1 位作者 王丽斯 吴恺明 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第23期3228-3230,共3页
目的探讨血清miR-216a水平与急性胰腺炎(AP)严重程度的相关性。方法选择广州医科大学附属乐从医院2015年6月至2016年6月收治的轻型急性胰腺炎(MAP组)17例,重型急性胰腺炎(SAP组)23例和经检查无异常的健康成人(对照组)30例,采集血液标本... 目的探讨血清miR-216a水平与急性胰腺炎(AP)严重程度的相关性。方法选择广州医科大学附属乐从医院2015年6月至2016年6月收治的轻型急性胰腺炎(MAP组)17例,重型急性胰腺炎(SAP组)23例和经检查无异常的健康成人(对照组)30例,采集血液标本检测淀粉酶活性(AMYA)和血清miR-216a的表达水平,采用Ranson评分、急性生理学及慢性健康状况评分系统(APACHEⅡ)和改良的CT严重(MCTSI)指数来评价AP的严重程度,分析上述指标与血清miR-216a表达水平的相关性。结果急性期MAP组与SAP组患者血液淀粉酶活性均高于本组恢复期及对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且急性期SAP组高于MAP组,差异有统计学意义(P<0.05);急性期MAP组和SAP组血清miR-216a均显著高于该组恢复期及对照组,差异有统计学意义(均P<0.05),且SAP组高于MAP组,差异有统计学意义(P<0.05);miRNA-216a表达水平与Ranson评分、APACHEⅡ评分和MCTSI指数呈正相关(r=0.667,P<0.05;r=0.396,P<0.05;r=0.648,P<0.05)。结论急性胰腺炎患者血清miR-216a表达水平显著高于健康者,表达水平与急性胰腺炎的严重程度呈正相关,对于SAP的诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 血清 急性胰腺炎 mir-216a 相关性
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ω-3鱼油脂肪乳剂和乌司他丁对重症急性胰腺炎合并腹腔高压患者免疫功能的影响 被引量:5
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作者 汪易岚 许春阳 +1 位作者 叶宏伟 郑峰 《中国实用医刊》 2018年第12期14-17,共4页
目的探讨应用ω--3鱼油脂肪乳剂及乌司他丁对重症急性胰腺炎(SAP)患者腹内压的影响及对炎症反应作用、免疫调节功能及预后的影响。方法选取医院入住ICU的符合SAP诊断标准且合并腹腔高压(IAH)或腹腔间隔室综合征(ACS)的患者62例,... 目的探讨应用ω--3鱼油脂肪乳剂及乌司他丁对重症急性胰腺炎(SAP)患者腹内压的影响及对炎症反应作用、免疫调节功能及预后的影响。方法选取医院入住ICU的符合SAP诊断标准且合并腹腔高压(IAH)或腹腔间隔室综合征(ACS)的患者62例,随机分为对照组、鱼油组、乌司他丁组。在治疗前及第6天,分别监测三组患者血清CD4+/CD8+、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及微小RNA-216(miR-216)和微小RNA-92(miR-92),并进行急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHⅡ)评分。同时在治疗前及治疗第48小时监测三组患者的腹内压水平。结果在治疗第48小时,鱼油组和乌司他丁组的IAP较治疗前均有明显下降(P〈0.05)。与同组治疗前相比及与同期对照组相比,鱼油组CD4+/CD8+值治疗第6天显著下降(P〈0.05);鱼油组及乌司他丁组IL-6、TNF—α在治疗第6天明显降低(P〈0.05)。与同组治疗前相比,三组血清miR-216和miR-92水平治疗第6天明显下降(P〈0.05),鱼油组和乌司他丁组的APACHEⅡ评分有显著下降(P〈0.05)。组间比较可见治疗第6天鱼油组血清miR-216和miR-92水平明显低于乌司他丁组(P〈0,05)。结论乌司他丁与ω-3鱼油脂肪乳剂对重症急性胰腺炎合并腹内高压的患者均有较好的免疫调节作用,ω-3鱼油脂肪乳剂相对于乌司他丁,有更强的抑制炎症基因表达、增强细胞免疫的作用。 展开更多
关键词 鱼油 乌司他丁 重症急性胰腺炎 腹内压 微小RNA-216 微小RNA-92
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miR-216a通过下调CAPN6抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 张贤雨 马欢 +1 位作者 宋凤丽 张志林 《中国妇幼健康研究》 2023年第1期75-84,共10页
目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法收集2019年5月至2021年5月于河北北方学院附属第一医院行手术治疗的82例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)法检测组织中mi... 目的探讨微小RNA-216a(miR-216a)对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法收集2019年5月至2021年5月于河北北方学院附属第一医院行手术治疗的82例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织,用实时荧光定量PCR(qRT-RCR)法检测组织中miR-216a和钙激活中性蛋白酶6(CAPN6)表达。转染miR-216a模拟物(miR-216a mimic)、CAPN6小干扰RNA(si-CAPN6)或共转染miR-216a mimic与CAPN6过表达质粒(pcDNA-CAPN6)至宫颈癌HeLa细胞。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测CAPN6、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)的蛋白表达情况,并进行统计分析。结果宫颈癌组织中miR-216a mRNA相对表达量明显低于癌旁正常组织(t=52.968,P<0.05),而CAPN6 mRNA和CAPN6蛋白相对表达量均明显高于癌旁正常组织(t值分别为26.622、45.036,P<0.05)。过表达miR-216a降低了HeLa细胞24、48、72h的增殖活力及Bcl-2蛋白相对表达量,提高了细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Bax蛋白相对表达量(F=11.885~90.813,P<0.05)。过表达miR-216a降低了HeLa细胞中CAPN6 mRNA和CAPN6蛋白相对表达量(F值分别为58.990、156.82,P<0.05)。下调CAPN6降低了HeLa细胞24、48、72h的增殖活力及Bcl-2蛋白相对表达量,提高了细胞凋亡率及Cleaved Caspase-3、Bax蛋白相对表达量(F=42.390~241.912,P<0.05)。过表达CAPN6可逆转过表达miR-216a对HeLa细胞增殖、凋亡及凋亡蛋白的影响。结论miR-216a在宫颈癌组织中低表达,过表达miR-216a可抑制宫颈癌细胞增殖并促进细胞凋亡,其可能是通过靶向下调CAPN6表达发挥作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 微小RNA-216a 钙激活中性蛋白酶6 增殖 凋亡
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miR-216a通过靶向调控PKCα促进胃癌细胞凋亡的研究 被引量:4
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作者 张雪梅 兰辉 +2 位作者 刘方 邓敏 梁晓秋 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第33期4051-4052,4055,共3页
目的本文旨在明确miR-216a是否通过靶向调控PKCα表达而抑制胃癌细胞增殖和促进其凋亡,从而进一步揭示miR-216a的抑瘤分子机制。方法首先构建PKCα3′UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-216a对PKCα3′UTR-荧光素酶活... 目的本文旨在明确miR-216a是否通过靶向调控PKCα表达而抑制胃癌细胞增殖和促进其凋亡,从而进一步揭示miR-216a的抑瘤分子机制。方法首先构建PKCα3′UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-216a对PKCα3′UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-216a模拟物转染胃癌细胞MGC-803,采用Western blot检测PKCα蛋白表达水平;将PKCαsiRNA转染MGC-803,通过MTS细胞增殖活性检测和Annexin V-FITC/PI凋亡实验考察PKCα下调对MGC-803增殖和凋亡的影响。结果荧光素酶报告检测显示,miR-216a能特异性地与PKCα3′UTR结合,抑制其荧光素酶活性,下调36%。过表达miR-216a的MGC-803PKCα蛋白表达水平降低。siRNA干扰PKCα表达能抑制MGC-803的增殖和侵袭能力,它能部分模拟miR-216a的抑瘤功能。结论 miR-216a通过靶向PKCαmRNA 3′UTR而抑制胃癌细胞增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞凋亡 mir-216a PKCΑ
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miR-216a在胃癌组织和患者血浆中的表达变化及临床意义 被引量:4
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作者 张同 李庆 +8 位作者 舒若 徐玉 施承民 曾玉剑 孙亮 田衍 肖博凯 王昆华 罗华友 《重庆医学》 CAS 2019年第7期1155-1158,共4页
目的检测胃癌患者肿瘤组织及血浆miR-216a的表达水平,探讨其与临床病理特征和手术治疗预后的关系。方法选取2012年1月至2014年12月在该院接受手术治疗的胃癌患者120例,收集肿瘤和癌旁组织标本,采集手术前后患者血浆和健康志愿者(120例)... 目的检测胃癌患者肿瘤组织及血浆miR-216a的表达水平,探讨其与临床病理特征和手术治疗预后的关系。方法选取2012年1月至2014年12月在该院接受手术治疗的胃癌患者120例,收集肿瘤和癌旁组织标本,采集手术前后患者血浆和健康志愿者(120例)血浆。采用实时荧光定量PCR法检测miR-216a在组织和血浆标本中的表达情况,统计分析miR-216a表达水平与胃癌患者临床病理特征和手术预后的关系。结果 miR-216a在胃癌组织中的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。手术前,胃癌患者血浆miR-216a表达水平高于健康人群(P<0.01);术后,患者血浆miR-216a表达水平较手术前明显降低(P<0.05)。胃癌组织中miR-216a相对表达水平与肿瘤分化程度和TNM分期相关(P<0.05)。患者血浆miR-216a相对表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移和肿瘤大小均相关(P<0.05)。胃癌组织miR-216a高表达患者术后复发率和生存率优于胃癌组织miR-216a低表达患者,差异无统计学意义(P>0.05);血浆miR-216a低表达患者的复发率和生存率优于血浆miR-216a高表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胃癌患者肿瘤组织和血浆中miR-216a的表达变化差异明显,与肿瘤分化和分期等相关,且在血浆中的表达与手术预后相关,在胃癌早期诊治和预后判断中有潜在价值。 展开更多
关键词 胃肿瘤 mir-216a 癌组织 血浆 预后
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miR-216a对重症急性胰腺炎腺泡损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1 通路的影响
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作者 薛冰 赵春艳 +1 位作者 郭中霞 王志兵 《肝胆外科杂志》 2023年第1期57-61,共5页
目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Co... 目的探索miR-216a对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)腺泡细胞损伤及P2X7-NLRP3/caspase-1通路的影响.方法将大鼠胰腺腺泡细胞AR42J分为Con组、SAP组、anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组.Con组不做任何处理,其余各组采用雨蛙肽(10 nmol/L)联合脂多糖(lipo poly saccharide,LPS)(10 mg/L)处理大鼠胰腺腺泡细胞株AR42J构建SAP细胞模型,anti-miR-NC组、anti-miR-216a组、Sch+miR-NC组、Sch+miR-216a组分别转染anti-miR-NC、anti-miR-216a、miR-NC、miR-216a mimics.酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定各组细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测各组细胞中miR-216a及P2X7、NLRP3、caspase-1 mRNA相对表达量;Western blot法检测各组细胞中P2X7、NLRP3、Caspase-1、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(B-cellymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved cysteinyl aspartate specific protease-3,Cleaved caspase-3)蛋白表达情况.结果各组细胞中IL-6、TNF-α含量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞凋亡率和Bax蛋白、Cleaved caspase-3蛋白相对表达量比较,Con组<Sch+miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<anti-miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞Bcl-2蛋白相对表达量比较,anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组<Con组,差异有统计学意义(P<0.05).各组细胞中miR-216a和P2X7、NLRP3、Caspase-1 mRNA及其蛋白相对表达量比较,Con组<anti-miR-216a组<SAP组/anti-miR-NC组/Sch+miR-NC组<Sch+miR-216a组,差异有统计学意义(P<0.05).结论miR-216a可通过抑制P2X7-NL 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎(SAP) 腺泡细胞损伤 mir-216a P2X7-NLRP3/caspase-1通路
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替莫唑胺通过调控miR-216a/PRKCA抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭作用的研究 被引量:4
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作者 韩刚 杨扬 胡胜利 《现代肿瘤医学》 CAS 2019年第10期1713-1717,共5页
目的:探讨替莫唑胺抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的作用,推测其作用机制是通过微小RNA-216a(microRNA-216a,miR-216a)/蛋白激酶Cα(protein kinase C-alpha,PRKCA)进行调控。方法:体外培养胶质瘤细胞U251,用不同剂量替莫唑胺染毒48 h后... 目的:探讨替莫唑胺抑制胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的作用,推测其作用机制是通过微小RNA-216a(microRNA-216a,miR-216a)/蛋白激酶Cα(protein kinase C-alpha,PRKCA)进行调控。方法:体外培养胶质瘤细胞U251,用不同剂量替莫唑胺染毒48 h后,构建野生型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体及检测荧光素酶活性,检测替莫唑胺对胶质瘤细胞U251增殖和侵袭的影响及miR-216a和PRKCA表达的影响。结果:miR-216a mimics使野生型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体的活性下降了47.52%,差异具有统计学意义(P<0.05);miR-216a mimics使突变型PRKCA 3'UTR-荧光素酶报告载体的活性下降不显著,差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,低、中、高剂量组胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量均降低,miR-216a mRNA相对表达量均增高,差异具有统计学意义(P<0.05);随着替莫唑胺剂量的增加,胶质瘤细胞U251增殖率、侵袭细胞数、PRKCA mRNA相对表达量和PRKCA蛋白表达量随之降低,miR-216a mRNA相对表达量随之增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:替莫唑胺可以通过促进miR-216a的表达而抑制PRKCA的表达,降低胶质瘤细胞U251增殖和侵袭。 展开更多
关键词 替莫唑胺 mir-216a PRKCA 胶质瘤细胞U251 增殖 侵袭
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