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银鲫种内的遗传标记及其在选种中的应用 被引量:34
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作者 朱蓝菲 蒋一珪 《水生生物学报》 CAS 1987年第2期105-111,i001-i002,共9页
用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析了银鲫和异育银鲫的血清蛋白和肝脏酯酶,发现这两种鱼的血清蛋白和肝脏酯酶各具有4种不同的表型。由同一母本银鲫繁殖的子代——银鲫或异育银鲫,具有与母本相同的表型,只是在异育银鲫的肝脏酯酶谱型中另有... 用聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳分析了银鲫和异育银鲫的血清蛋白和肝脏酯酶,发现这两种鱼的血清蛋白和肝脏酯酶各具有4种不同的表型。由同一母本银鲫繁殖的子代——银鲫或异育银鲫,具有与母本相同的表型,只是在异育银鲫的肝脏酯酶谱型中另有一些无规律的变化,显然这是异源精子的作用所致。此外,这4种不同表型的鱼具有不同的生长能力,其差距最大可达50%。这些结果表明,天然雌核发育的银鲫种内含有若干个不同的雌核发育系,这对于开展银鲫的选育研究具有重要的实践意义。 展开更多
关键词 异育银鲫 母本 酯酶 选种 种鱼 遗传标记 选育 表型 肝脏 血清蛋白
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氰氟草酯、杀虫安亚致死剂量对金鱼Carrasius auratus和麦穗鱼Pseudorasbora parva肝脏酯酶及谷胱甘肽-S-转移酶活性的影响(英文) 被引量:2
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作者 朱国念 吴慧明 +1 位作者 Jilisa K.Mwalilino 李少南 《农药学学报》 CAS CSCD 2002年第3期35-42,共8页
研究了 10 %千金乳油 (有效成分 :氰氟草酯 )和 78%杀虫安可溶性粉剂对金鱼和麦穗鱼肝脏酯酶及谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)活性的亚致死剂量效应。发现杀虫安 (0 .2 34mg· L-1)对两种鱼的 GST活性均具诱导作用 ,而氰氟草酯 (1,2 mg&... 研究了 10 %千金乳油 (有效成分 :氰氟草酯 )和 78%杀虫安可溶性粉剂对金鱼和麦穗鱼肝脏酯酶及谷胱甘肽 - S-转移酶 (GST)活性的亚致死剂量效应。发现杀虫安 (0 .2 34mg· L-1)对两种鱼的 GST活性均具诱导作用 ,而氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)仅诱导了麦穗鱼的 GST活性 ;当杀虫安与氰氟草酯混合处理时 ,对麦穗鱼 GST活性的诱导效应最为明显。在一定的浓度范围内 ,氰氟草酯 (1,2 mg· L-1)和杀虫安 (0 .117,0 .2 34mg· L-1)均可诱导金鱼肝脏酯酶活性 ;对麦穗鱼肝脏酯酶而言 ,杀虫安为诱导作用 ,氰氟草酯则抑制其活性。研究结果表明 :两种酶的活性直接或间接地受供试药剂的影响 。 展开更多
关键词 金鱼 Carrasiusauratus 麦穗鱼 Pseudorasboraparva 酶活性 氰氟草酯 杀虫安 肝脏酯酶 谷胱甘肽-S-转移酶 亚致死剂量效应 农药 环境毒理
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牛肝酯酶催化紫杉醇侧链手性合成的研究 被引量:2
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作者 阎家麒 《药物生物技术》 CAS CSCD 2005年第2期90-92,共3页
采用牛肝酯酶拆分紫杉醇侧链合成中生成的对映异构体化合物的新方法。牛肝酯酶催化拆分顺-3-乙酰氧基-4-苯基氮杂环丁酮,得到(S)-(-)-醇和标的产物(R)-(+)-乙酸酯。所得(R)-(+)-乙酸酯反应产率≥97%,光学纯度≥99.6%。结论:牛肝酯酶可... 采用牛肝酯酶拆分紫杉醇侧链合成中生成的对映异构体化合物的新方法。牛肝酯酶催化拆分顺-3-乙酰氧基-4-苯基氮杂环丁酮,得到(S)-(-)-醇和标的产物(R)-(+)-乙酸酯。所得(R)-(+)-乙酸酯反应产率≥97%,光学纯度≥99.6%。结论:牛肝酯酶可以作为手性合成的催化剂。 展开更多
关键词 紫杉醇 侧链 Β-内酰胺 肝酯酶 脂肪酶 手性合成
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竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究
4
作者 Nguyen Van-luc 于劲松 +1 位作者 徐斐 华泽钊 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期25-29,共5页
以量热式农残生物传感器为研究对象,借鉴免疫分析方法,进行竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究。结果表明,在甲胺磷浓度为0~0.004 mg.kg-1范围内,甲胺磷含量和放热量之间的线性较好,竞争性抑制酶联反应分析法测农药... 以量热式农残生物传感器为研究对象,借鉴免疫分析方法,进行竞争性抑制酶联反应在量热式农残生物传感器中的试验研究。结果表明,在甲胺磷浓度为0~0.004 mg.kg-1范围内,甲胺磷含量和放热量之间的线性较好,竞争性抑制酶联反应分析法测农药残留的最低检测限为0.0011 mg.kg-1,每次测定时间为20 min。 展开更多
关键词 酶标农药 鸡肝酯酶 量热式酶传感器 竞争性抑制酶联反应
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用于农药残留快速检测的两种酶的比较 被引量:22
5
作者 张慧君 许学勤 +1 位作者 徐斐 华泽钊 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1517-1520,共4页
以商品乙酰胆碱酯酶 (C3389,VI S ,从电鳗中提取 )和自制鸡肝酶为农药检测用酶 ,比较了不同浓度的敌敌畏、敌百虫、马拉硫磷和西维因对这两种酶的乙酰胆碱酯酶活力和总酯酶活力的抑制情况。结果表明 ,鸡肝酶的乙酰胆碱酯酶活力较低 ,而... 以商品乙酰胆碱酯酶 (C3389,VI S ,从电鳗中提取 )和自制鸡肝酶为农药检测用酶 ,比较了不同浓度的敌敌畏、敌百虫、马拉硫磷和西维因对这两种酶的乙酰胆碱酯酶活力和总酯酶活力的抑制情况。结果表明 ,鸡肝酶的乙酰胆碱酯酶活力较低 ,而其总酯酶活力对 4种农药的灵敏度与商品乙酰胆碱酯酶活力的灵敏度相近 ,且总酯酶活力对除马拉硫磷外的其余 3种农药的检出限都较乙酰胆碱酯酶低。同时对总酯酶活力测定的pH进行了优化 ,发现pH 6 .5 (40mmol/L柠檬酸盐缓冲液 )时总酯酶活力较高。 展开更多
关键词 乙酰胆碱酯酶 鸡肝酶 农药残留 活力 酶抑制法
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固定化对动植物酯酶性质的影响 被引量:21
6
作者 许学勤 徐斐 +2 位作者 吴燕雯 吴瑛 华泽钊 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期38-42,共5页
比较了离子交换法得到的固定化小麦酯酶和固定化鸡肝酯酶的主要性质与相应的游离酶的性质。结果表明 ,固定化小麦酯酶的最适pH在 5 5附近 ,比游离小麦酶的最适 pH增加了0 8个 pH单位 ;固定化鸡肝酯酶的最适pH在 8 0附近 ,比游离鸡肝... 比较了离子交换法得到的固定化小麦酯酶和固定化鸡肝酯酶的主要性质与相应的游离酶的性质。结果表明 ,固定化小麦酯酶的最适pH在 5 5附近 ,比游离小麦酶的最适 pH增加了0 8个 pH单位 ;固定化鸡肝酯酶的最适pH在 8 0附近 ,比游离鸡肝酯酶的最适 pH增加了 0 5个pH单位 ;固定化小麦酯酶的最适温度与游离酶的相当 ,但酶活力 温度曲线的峰形变小 ;固定化鸡肝酯酶的最适温度比游离鸡肝酯酶的下降了 5℃ ,酶活力 温度曲线的峰形也略变陡峭。这 2种固定化酯酶对有机磷类农药 (敌敌畏 ) 展开更多
关键词 固定化小麦酯酶 固定化鸡肝酯酶 性质 游离酶 酶活力 农药抑制
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猪肝酯酶农药敏感性及其与胆碱酯酶的对比研究 被引量:9
7
作者 杨莉 王羚佳 +4 位作者 开拓 黄玉坤 黄瑛 杨潇 陈祥贵 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2018年第7期1536-1542,共7页
【目的】探讨猪肝酯酶(PLE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。【方法】以乙酸-1-萘酯为底物,考察PLE酶促反应的最适温度、p H及几种农药的最佳作用时间,同时比较了PLE对几种特异性酶抑制剂的敏感性;以电鳗乙酰胆碱酯... 【目的】探讨猪肝酯酶(PLE)对农药的敏感性,为农药残留快速检测提供新的敏感酶源。【方法】以乙酸-1-萘酯为底物,考察PLE酶促反应的最适温度、p H及几种农药的最佳作用时间,同时比较了PLE对几种特异性酶抑制剂的敏感性;以电鳗乙酰胆碱酯酶(ACh E-ee)、马血清丁酰胆碱酯酶(BCh E-hs)为对照酶源,采用酶抑制法,绘制5种有机磷农药(敌百虫、敌敌畏、甲胺磷、辛硫磷、毒死蜱)和5种氨甲酸酯类农药(灭多威、克百威、丁硫克百威、残杀威、涕灭威)的抑制曲线,并计算相关半抑制率(IC50),比较各种酶的农药敏感性。【结果】猪肝酯酶酶活测定方法的最佳温度、时间、p H分别为35℃、15 min、7.0;农药最适作用时间为15min;猪肝酯酶对双(4-硝基苯基)磷酸酯敏感性最高,毒扁豆碱次之,盐酸多奈哌齐最低;与胆碱酯酶相比,猪肝酯酶对供试的多数有机磷农药和氨甲酸酯类农药的IC50更低,,敏感性更好。【结论】猪肝酯酶具有良好的农药敏感性,可以作为酶抑制法农药残留快速检测的候选酶源。 展开更多
关键词 猪肝酯酶 胆碱酯酶 酶抑制法 农药 敏感性
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现代媒体在体育舞蹈律动教学中的运用 被引量:5
8
作者 齐光辉 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2003年第1期97-99,共3页
将录音、录像、摄像及网络等现代媒体与传统教学方式结合起来 ,可使教学过程最优化 .该文结合作者的体育舞蹈律动教学实践 ,论述了现代媒体在体育舞蹈律动教学各环节中的作用 ,并阐明了其具体的教学过程 .
关键词 律动教学 体育舞蹈 现代媒体 教学方法 教学方式 高校 教学改革
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鸡肝酯酶在有机磷和氨基甲酸酯类农药检测中的应用研究 被引量:7
9
作者 徐斐 许学勤 +2 位作者 张慧君 姜觅 华泽钊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期237-240,共4页
利用农药对酯酶活力的抑制反应,分别采用游离的和固定化的鸡肝酯酶,对不同浓度的敌敌畏、敌百虫、马拉硫磷和西维因进行了测定。结果发现,在低浓度时,农药浓度的对数值与其对应的酶活抑制率之间具有较好的线性关系;并且与游离鸡肝酯酶相... 利用农药对酯酶活力的抑制反应,分别采用游离的和固定化的鸡肝酯酶,对不同浓度的敌敌畏、敌百虫、马拉硫磷和西维因进行了测定。结果发现,在低浓度时,农药浓度的对数值与其对应的酶活抑制率之间具有较好的线性关系;并且与游离鸡肝酯酶相比,固定化酶不同程度地降低了对农药检测的下限值。敌敌畏、马拉硫磷和西维因的检测下限值依次从游离酶检测时的0.001、4.34和2.52mg/L,降低到了用固定化酶检测时的0.00004、0.0004和0.78mg/L。固定化的鸡肝酯酶对敌百虫的检测下限改善不大。 展开更多
关键词 鸡肝酯酶 农药检测 检测限 固定化
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猪肝酯酶杂化“纳米花”的制备及其对菊酯类农药的水解性能研究 被引量:6
10
作者 彭开敏 叶泰 +3 位作者 曹慧 袁敏 于劲松 徐斐 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1412-1417,共6页
采用生物矿化策略,在磷酸盐缓冲液中制备了猪肝酯酶(Porcine liver esterase,PLE)杂化"纳米花"(Ca3(PO4)2-PLE)。利用扫描电镜、元素能谱分析及红外光谱对所制备的杂化"纳米花"进行了形貌和成分分析。对杂化"... 采用生物矿化策略,在磷酸盐缓冲液中制备了猪肝酯酶(Porcine liver esterase,PLE)杂化"纳米花"(Ca3(PO4)2-PLE)。利用扫描电镜、元素能谱分析及红外光谱对所制备的杂化"纳米花"进行了形貌和成分分析。对杂化"纳米花"制备过程中的参数进行优化,结果表明:在10 mmol/L磷酸盐缓冲液(p H 7. 4)中,猪肝酯酶质量浓度为0. 3 g/L,钙离子浓度为500 mmol/L,制备温度为20℃时,所制备的Ca3(PO4)2-PLE具有最高酶活,其酶活为同等酶浓度下液酶酶活的169%。将制备的Ca3(PO4)2-PLE用于4种菊酯类农药的酶解性能研究,发现相同条件下,Ca3(PO4)2-PLE的酶解率均优于液酶。此外,制备的Ca3(PO4)2-PLE用于菊酯农药酶解循环2次后仍保持70%以上的活力。 展开更多
关键词 杂化纳米花 猪肝酯酶(PLE) 菊酯类农药 酶活力 酶解
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猪肝酯酶研究进展 被引量:5
11
作者 程婕 赵晓瑜 《生物技术通讯》 CAS 2003年第3期222-224,共3页
猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,对它的生化特性研究较早。近几年猪肝酯酶的基因克隆研究也取得了较大进展。重组酶具有选择特异性更高的特点,与生化提取方法相比成本较低廉。基因工程技术的开展使猪肝酯酶在化学工业、生物制药及相... 猪肝酯酶是手性合成中重要的水解酶,对它的生化特性研究较早。近几年猪肝酯酶的基因克隆研究也取得了较大进展。重组酶具有选择特异性更高的特点,与生化提取方法相比成本较低廉。基因工程技术的开展使猪肝酯酶在化学工业、生物制药及相关领域中有了更加广泛的应用前景. 展开更多
关键词 猪肝酯酶 生化提取 分子克隆 手性催化 立体选择
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鸡肝酯酶快速检测氰戊菊酯农药的试验研究 被引量:4
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作者 李思超 徐斐 +1 位作者 赵洁 曹慧 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期10-15,共6页
采用鸡肝酯酶对不同浓度的氰戊菊酯农药进行了催化水解,并通过pH-stat法优化了水解条件。结果表明,在pH8.0,温度55℃的条件下,酶催化反应速度较大。在该反应条件下,分析了农药浓度(1/x)与酶解反应初速度(1/y)之间的关系,发现在0.05~2.0... 采用鸡肝酯酶对不同浓度的氰戊菊酯农药进行了催化水解,并通过pH-stat法优化了水解条件。结果表明,在pH8.0,温度55℃的条件下,酶催化反应速度较大。在该反应条件下,分析了农药浓度(1/x)与酶解反应初速度(1/y)之间的关系,发现在0.05~2.00mg·L-1农药浓度范围内,两者的关系曲线为y=0.0723x+0.1393(R2=0.998),可作为该速测法计算氰戊菊酯农药含量的标准曲线。最后采用该法对购置的农药标品稀释液进行了确认检测,测量结果经t-检验显示,与气相色谱标定的浓度之间无显著性差异。该法简单快速,一次检测完成大约需要10min,和国标的气相色谱法相比,大大缩短了检测时间。 展开更多
关键词 鸡肝酯酶 氰戊菊酯农药 pH-stat法 快速检测
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三相法提取猪肝酯酶及其在制备D -7-ACA中的应用
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作者 张呈彦 程瑶纳 +2 位作者 王雨轩 王堃宁 魏胜华 《安徽工程大学学报》 CAS 2024年第1期8-14,共7页
酯酶广泛存在于动物、植物和微生物中,具有作用范围广、底物特异性高等特点。该酶能够催化许多含有酯、酰胺、硫酯或乙酰基的化合物的水解与合成,在生物催化领域具有重要的用途。对来源于猪肝中的酯酶采用三相分离的方法进行了提取,并... 酯酶广泛存在于动物、植物和微生物中,具有作用范围广、底物特异性高等特点。该酶能够催化许多含有酯、酰胺、硫酯或乙酰基的化合物的水解与合成,在生物催化领域具有重要的用途。对来源于猪肝中的酯酶采用三相分离的方法进行了提取,并利用猪肝酯酶的水解特性,研究了其催化7-氨基头孢烷酸(7-ACA)脱乙酰基制备去乙酰基-7-氨基头孢烷酸(D-7-ACA)的过程。主要研究结果:确立了三相法分离提取猪肝酯酶的方法,考察了有机溶剂种类、有机溶剂用量、硫酸铵浓度以及体系的pH和提取温度等条件对三相法分离提取猪肝酯酶的影响。实验结果表明在硫酸铵质量分数为45%、异丁醇与水相之比为1∶1、pH7.0、温度为30℃的条件下,酶活回收率为54.84%,纯化倍数为6.32倍。以猪肝酯酶为催化剂,研究了猪肝酯酶催化7-ACA脱乙酰基制备D-7-ACA,在pH7.5、温度35℃、底物浓度2%、酶添加量30 U/mL的反应条件下,7-ACA转化率达到94.33%。 展开更多
关键词 猪肝酯酶 三相法 7-氨基头孢烷酸 去乙酰基-7-氨基头孢烷酸
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猪肝羧酸酯酶研究进展
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作者 付岳林 周琼琼 +3 位作者 朱慧文 肖启玲 陈琦 石德时 《动物医学进展》 北大核心 2024年第3期111-115,共5页
羧酸酯酶(carboxylesterases,CES,E.C.3.1.1.1)属于丝氨酸水解酶类,该酯酶在哺乳动物各种器官和组织中存在,在肝脏组织和小肠组织中含量丰富,可催化水解多种内外源性物质,发挥重要的药理学和生理学作用。20世纪初就有猪肝羧酸酯酶的研... 羧酸酯酶(carboxylesterases,CES,E.C.3.1.1.1)属于丝氨酸水解酶类,该酯酶在哺乳动物各种器官和组织中存在,在肝脏组织和小肠组织中含量丰富,可催化水解多种内外源性物质,发挥重要的药理学和生理学作用。20世纪初就有猪肝羧酸酯酶的研究报道,但大部分研究是围绕其在有机化学合成中的应用,而对该酶的生理功能研究较少。猪肝羧酸酯酶家族成员数量多,水解特性互补,在重要组织器官内以高丰度存在,该酶家族在维持机体内环境稳态中发挥着重要的作用。有关猪肝羧酸酯酶基因家族及生理、药理、免疫等功能的报道很多,论文对猪肝羧酸酯酶的基因与同工酶、空间结构、催化水解特性及功能进行系统综述,以期为相关研究提供参考。 展开更多
关键词 猪肝酯酶 结构 炎症 药物代谢
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水溶性有机溶剂对鸡肝酯酶酶活力的影响 被引量:4
15
作者 赵洁 徐斐 +1 位作者 曹慧 于劲松 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第15期216-219,共4页
从新鲜鸡肝中提取出鸡肝酯酶,并研究水溶性有机溶剂对鸡肝酯酶酶活力的影响。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、乙二醇-甲醚、乙二醇-乙醚在低体积分数时对鸡肝酯酶酶活力有激活作用,高体积分数使其失活。乙二醇-甲醚能够较好的保持鸡肝酯... 从新鲜鸡肝中提取出鸡肝酯酶,并研究水溶性有机溶剂对鸡肝酯酶酶活力的影响。结果表明:甲醇、乙醇、正丙醇、乙二醇-甲醚、乙二醇-乙醚在低体积分数时对鸡肝酯酶酶活力有激活作用,高体积分数使其失活。乙二醇-甲醚能够较好的保持鸡肝酯酶活力,当体积分数达到50%时,相对酶活力仍保持93%。丙酮和1,4-二氧六环对鸡肝酯酶主要表现为失活作用,当体积分数达到10%时,相对酶活力低于80%。 展开更多
关键词 鸡肝酯酶 酶活力 水溶性有机溶剂
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快速检测食品中有机磷及氨基甲酸酯类农药的流动注射式酶传感器 被引量:2
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作者 吴瑛 吴燕雯 +1 位作者 徐斐 华泽钊 《食品科技》 CAS 北大核心 2005年第8期78-81,共4页
介绍一种快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药的流动注射式酶传感器,该系统由蠕动泵、流动注射进样阀、酶柱、比色反应盘管、恒温水浴、吸光度检测器和数据采集的计算机构成。通过对流动注射的流出曲线分析,对底物浓度、反应温度进行优化... 介绍一种快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药的流动注射式酶传感器,该系统由蠕动泵、流动注射进样阀、酶柱、比色反应盘管、恒温水浴、吸光度检测器和数据采集的计算机构成。通过对流动注射的流出曲线分析,对底物浓度、反应温度进行优化,并对黄瓜和鸡毛菜中的农药进行检测。结果发现,160mmol/L的底物浓度和40℃为最佳反应参数。该系统检测具有较好的重现性,可检出0.5mg有机磷/kg果蔬和0.5mg氨基甲酸酯类农药/kg果蔬,整个检测过程仅需12min。 展开更多
关键词 流动注射 农药 鸡肝酯酶 反应酶柱
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分离纯化提高鸡肝酯酶对农药抑制响应的研究 被引量:3
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作者 于晓航 朱念辛 +3 位作者 徐斐 曹慧 于劲松 袁敏 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2015年第6期230-235,共6页
本文对鸡肝酯酶粗酶液分别进行了硫酸铵分级盐析、硫酸铵分级盐析+透析和硫酸铵分级盐析+排阻色谱三种分离纯化操作,并采用四种结构不同的有机磷、氨基甲酸酯类农药,考察了不同的分离纯化操作对鸡肝酯酶对农药抑制响应的影响。发现经过... 本文对鸡肝酯酶粗酶液分别进行了硫酸铵分级盐析、硫酸铵分级盐析+透析和硫酸铵分级盐析+排阻色谱三种分离纯化操作,并采用四种结构不同的有机磷、氨基甲酸酯类农药,考察了不同的分离纯化操作对鸡肝酯酶对农药抑制响应的影响。发现经过这三种分离操作后,酯酶对农药抑制的响应程度显著提高,其被四种农药抑制的程度分别提高了6.49~11.30%、14.30~26.26%和10.95~39.87%,而敏感酯酶回收率分别为86.07~89.96%、66.60~73.57%和33.01~41.62%。由于分级盐析+排阻色谱的回收率过低,分级盐析+透析操作对于大规模的检测用酶制备更为实用。此外,研究还发现对这四种农药较敏感的酯酶均集中地分布在相同的分离部分,因此推测鸡肝酯酶粗酶液中对农药抑制敏感的酯酶可能是一种酶或几种溶解性质及分子量都比较接近的酶的混合。 展开更多
关键词 鸡肝酯酶 硫酸铵分级盐析 透析 排阻色谱 农药抑制响应
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Pig Liver Esterase-catalyzed Hydrolysis of Three Diesters of meso-Bicyclic Dicarboxylic Acid and Three Tetraesters of Tetrahydrofuran -2,3,4,5-tetracarboxylic Acid
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作者 MA Guang-En and Tamm Ch. (National Institutes of Pharmaceutical Research & Development, Beijing 102206, P. R. China Institut fur Organishe Chemie der Universitat Basel, CH-4056 Basel Switzerland) 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2000年第4期369-374,共6页
Three diesters of exo- syn-meso-oxabicyclo (2, 2, 1 ) -hept- 5- ene- 2, 3- dicarboxylic acid and three tetraesters of tetrahydrofuran-2, 3, 4, 5-tetracarboxylic acid were synthesized and tested with enantioselective h... Three diesters of exo- syn-meso-oxabicyclo (2, 2, 1 ) -hept- 5- ene- 2, 3- dicarboxylic acid and three tetraesters of tetrahydrofuran-2, 3, 4, 5-tetracarboxylic acid were synthesized and tested with enantioselective hydrolysis catalyzed by pig liver esterase(PLE). The results of the PLEcatalyzed hydrolysis were discussed. 展开更多
关键词 Oxabicyclo(2 2 1 )-hept-5-ene-2 3-dicarboxylic acid Tetrahydrofuran-2 3 4 5- tetracarboxylic acid ESTERIFICATION Hydrolysis Pig liver esterase(PLE)
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巯基微球协助重组γ-猪肝酯酶包涵体体外复性 被引量:2
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作者 黄寿锟 关怡新 +1 位作者 于洪巍 姚善泾 《化工学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期305-312,共8页
猪肝酯酶(PLE)是一种广泛应用于光学活性醇或羧酸合成的水解酶。大肠杆菌异体表达为大规模生产猪肝酯酶γ同工酶提供了可能,但表达过程中会形成包涵体,需经体外重折叠恢复其生物活性。针对γ-PLE含二硫键的特点,制备了三种不同巯基负载... 猪肝酯酶(PLE)是一种广泛应用于光学活性醇或羧酸合成的水解酶。大肠杆菌异体表达为大规模生产猪肝酯酶γ同工酶提供了可能,但表达过程中会形成包涵体,需经体外重折叠恢复其生物活性。针对γ-PLE含二硫键的特点,制备了三种不同巯基负载量的功能聚合物微球SG-DTT(6.1μmol·g-1、25.2μmol·g-1和143.4μmol·g-1),将其应用于协助γ-PLE包涵体体外复性,并考察了微球浓度、pH、温度和尿素浓度对复性效果的影响。复性过程需要适宜的氧化还原环境,较高的巯基负载量微球协助复性效果较好,当γ-PLE浓度为1000μg·ml-1时,微球协助复性后γ-PLE的活性可达到1885 U·L-1,比对照组提高了72%。研究表明,巯基微球能有效促进二硫键的正确配对,阻止蛋白分子间的聚集,是一种新型高效的复性添加剂。 展开更多
关键词 生物分离 蛋白质复性 聚集(作用) 二硫键 巯基微球 重组γ-猪肝酯酶
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脑靶向脂质体构建及其靶分子Ac_4MAN体外结构稳定性研究 被引量:1
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作者 李茹冰 王娜 +3 位作者 刘肖莹 唐淑坤 彭海生 陶海泉 《中国医药导报》 CAS 2019年第11期4-8,共5页
目的构建修饰的Ac_4MAN(p-羧基苯-α-D-乙酰甘露糖)脑靶向脂质体,并探讨Ac_4MAN结构稳定性。方法将Ac_4MAN与猪肝酯酶(PLE)于37℃、pH 7.4条件下孵育,于不同时间点取样;采用高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术... 目的构建修饰的Ac_4MAN(p-羧基苯-α-D-乙酰甘露糖)脑靶向脂质体,并探讨Ac_4MAN结构稳定性。方法将Ac_4MAN与猪肝酯酶(PLE)于37℃、pH 7.4条件下孵育,于不同时间点取样;采用高效液相色谱(HPLC)和超高效液相色谱-质谱(UPLC-MS)联用技术对其进行分析。制备Ac_4MAN脂质体并对其进行表征,用流式细胞仪检测脑胶质瘤细胞U87摄取Ac_4MAN脂质体和Ac_4MAN脂质体加PLE的情况。结果 HPLC结果显示,孵育0~3 h,Ac_4MAN峰面积从578.4减少到37.9;孵育4~7 h,Ac_4MAN峰面积接近于0;孵育0~7 h,生成的MAN(p-氨基苯-α-D-吡喃甘露糖苷)的峰面积从0增长到363.0,表明随孵育时间延长,Ac_4MAN逐渐减少,MAN逐渐增多。结论本研究制备的Ac_4MAN脂质体粒径约为(120.3±2.0)nm,电位约为(-15.76±1.23)mV。Ac_4MAN脂质体中加入酶后,U87细胞对其摄取能力有一定的增强。 展开更多
关键词 靶向脂质体 p-羧基苯-α-D-乙酰甘露糖 p-氨基苯-α-D-吡喃甘露糖苷 猪肝酯酶 稳定性 摄取
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