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牛磺酸和茵陈素对顺铂引起的原代培养肾小管上皮细胞内游离Ca^(2+)浓度变化的影响 被引量：8
1
作者 周世文 刘世杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期84-85,共2页
目的　研究牛磺酸、茵陈素对顺铂引起的原代培养肾小管上皮细胞 (PTC)内游离Ca2 +浓度变化的影响。方法　在体外培养PTC、顺铂与PTC共同保温 2 4h ,牛磺酸、茵陈素分别提前与PTC作用 2 4h ,然后再加入顺铂 ( 2 6 μmol·L- 1 )共同... 目的　研究牛磺酸、茵陈素对顺铂引起的原代培养肾小管上皮细胞 (PTC)内游离Ca2 +浓度变化的影响。方法　在体外培养PTC、顺铂与PTC共同保温 2 4h ,牛磺酸、茵陈素分别提前与PTC作用 2 4h ,然后再加入顺铂 ( 2 6 μmol·L- 1 )共同保温 2 4h。采用Fura 2 AM测细胞内游离Ca2 +浓度。结果　顺铂 ( 13,2 6 ,5 2 μmol·L- 1 )升高PTC细胞内游离Ca2 +浓度 ,牛磺酸 ( 1,10g·L- 1 )和茵陈素 ( 4 ,8mg·L- 1 ) ,可拮抗顺铂导致的PTC细胞内游离Ca2 +浓度超载。结论　顺铂可引起原代培养肾小管上皮细胞内Ca2 +超载 ,牛磺酸、茵陈素能拮抗顺铂导致的细胞内Ca2 +超载 ,起到细胞保护作用。 展开更多
关键词 顺铂 牛碘酸 茵陈素 肾小管上皮细胞 细胞内游离Ca^2+浓度 副作用
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RIP1介导的坏死性凋亡通过NF-κB通路调节肾小管上皮细胞炎症反应 被引量：5
2
作者 方晓旭 杜春阳 +3 位作者 宋珊 史永红 任韫卓 段惠军 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1104-1109,共6页
目的:探讨受体相互作用蛋白1(RIP1)介导的坏死性凋亡对肾小管上皮细胞炎症的影响及其机制。方法:体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,应用肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合Z-VAD-FMK刺激24 h。乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性实验检测细胞坏死百分比,West... 目的:探讨受体相互作用蛋白1(RIP1)介导的坏死性凋亡对肾小管上皮细胞炎症的影响及其机制。方法:体外培养人肾小管上皮HK-2细胞,应用肿瘤坏死因子α(TNF-α)联合Z-VAD-FMK刺激24 h。乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性实验检测细胞坏死百分比,Western blot检测观察RIP1、IKK-α和NF-κB p65的表达,Western blot和ELISA测定白细胞介素1β(IL-1β)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平,real-time PCR检测NF-κB p65的mRNA表达水平。进一步应用RIP1抑制剂necrostatin-1(Nec-1)和NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)进行干预,检测上述指标。结果:与对照组比较,TNF-α联合Z-VAD-FMK刺激组(T/Z组)的HK-2细胞中cleaved RIP1蛋白水平明显升高,IKK-α和NF-κB p65的蛋白水平明显增高,LDH释放明显增多(P<0. 01)。Western blot和ELISA检测炎症相关指标IL-1β和MCP-1的水平均有明显升高,real-time PCR检测NF-κB p65的mRNA表达水平也有明显增高。给予Nec-1或PDTC刺激后(T/Z+N组或T/Z+P组),LDH释放及炎症相关指标IL-1β和MCP-1的蛋白水平明显降低,同时给予以上2种刺激后(T/Z+P/N组)IL-1β和MCP-1的蛋白水平进一步降低(P<0. 05)。结论:T/Z条件下,RIP1介导的坏死性凋亡在肾小管上皮细胞炎症反应中发挥重要作用。这一作用可能是部分通过调节NF-κB信号通路活化实现的。 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白1 坏死性凋亡 炎症 NF-ΚB信号通路 肾小管上皮细胞
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牛磺酸对顺铂导致培养的原代兔肾小管细胞损伤的保护作用 被引量：1
3
作者 周世文 刘世杰 段前碧 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期91-92,共2页
目的 :研究牛磺酸对顺铂导致培养的原代兔肾近端小管细胞 (PTC)损伤的保护作用。方法 :在体外建立原代兔肾近端小管细胞培养。采用溴乙锭荧光法测量DNA链间交联和Fur-2 /AM测量细胞内游离钙离子浓度。首先将牛磺酸 ( 0 .1,1,10g .L 1 )... 目的 :研究牛磺酸对顺铂导致培养的原代兔肾近端小管细胞 (PTC)损伤的保护作用。方法 :在体外建立原代兔肾近端小管细胞培养。采用溴乙锭荧光法测量DNA链间交联和Fur-2 /AM测量细胞内游离钙离子浓度。首先将牛磺酸 ( 0 .1,1,10g .L 1 )与PTC保温 2 4小时 ,然后 ,加入顺铂使其终浓度达到 2 6μmo1.L 1 ,再继续保温 2 4小时。顺铂损伤组同样培养 48小时 ,前 2 4小时不加入牛磺酸和顺铂 ,后 2 4小时加入顺铂使其终浓度为 2 6μmo1.L 1 。对照组不加入牛磺酸和顺铂 ,同样培养 48小时。结果 :顺铂导致损伤组形成DNA链间交联和细胞内游离钙离子浓度升高 ,牛磺酸 1,10g.L 1 可明显降低DNA链间交联和细胞内游离钙离子浓度。结论 展开更多
关键词 牛磺酸 顺铂 兔肾小管细胞 抗肿瘤药物 溴乙锭荧光法 DNA链间交联 细胞内游离钙离子浓度 PTC
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人脐带间充质干细胞对低氧环境下的肾小管上皮细胞中肝细胞生长因子(HGF)表达的影响 被引量：1
4
作者 邹翔宇 杜涛 +4 位作者 程中良 琚官群 苗帅 朱英坚 刘国华 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第32期6219-6222,共4页
目的:肾脏的急性缺血缺氧性损伤是泌尿外科常见病,以肾小管间质纤维化为主要病理特点,成体干细胞在急性肾脏损伤动物模型中可以促进肾脏结构修复、改善肾脏功能,肝细胞生长因子作为抗纤维化的主要生长因子,在成体干细胞干预的急性肾脏... 目的:肾脏的急性缺血缺氧性损伤是泌尿外科常见病,以肾小管间质纤维化为主要病理特点,成体干细胞在急性肾脏损伤动物模型中可以促进肾脏结构修复、改善肾脏功能,肝细胞生长因子作为抗纤维化的主要生长因子,在成体干细胞干预的急性肾脏损伤动物模型实验中起重要作用,然而以往的研究对象主要以动物模型为主,成体干细胞对肝细胞生长因子的具体调节机制尚不清。本实验通过体外分离、培养人的脐带间充质干细胞,来干预离体低氧预处理后的大鼠近端肾小管上皮细胞,探讨在体外培养条件下人脐带间充质干细胞对低氧预处理大鼠近端肾小管上皮细胞肝细胞生长因子表达的影响,为今后研究间充质干细胞治疗肾功能损害提供可靠的理论依据。方法:采用贴壁培养的方法无菌条件下分离、培养、传代人脐带间充质干细胞,细胞融合达90%时更换无血清培养基(serum-free medium,SFM)培养24 h,收集细胞上清液即为人脐带间充质干细胞条件培养基(condition medium,CM);大鼠近端肾小管上皮细胞(tubular epithelial cells,TECs)于低氧环境处理1 h后,随机分为对照组与CM干预组,分别培养24 h和48 h后检测TECs中大鼠肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)的mRNA水平、收集上清液测定大鼠HGF蛋白的含量,同时收集CM干预组中0h,12h、24h、48h的上清液,测定其中人来源HGF蛋白的含量,并对TECs在CM干预24 h和48 h后行免疫组化定性人的HGF蛋白的表达。结果:在低氧预处理的培养环境下,CM干预组中,TECs中大鼠来源的HGF mRNA表达水平在24 h和48 h时明显高于对照组(P<0.05);上清液中大鼠HGF蛋白的含量在24 h和48 h,CM干预组显著高于对照组(P<0.05);上清液中人的HGF蛋白的含量随时间进行性增高,免疫组化染色显示在24 h和48 h大鼠TECs中能检测人的HGF蛋白的表达。结论:在低氧预处理的体外培养环境下,脐带间充质� 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 近端肾小管上皮细胞低氧培养 肝细胞生长因子
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敲低Txnip抑制高糖诱导的人肾小管细胞系凋亡 被引量：1
5
作者 韦金英 史永红 +4 位作者 任韫卓 侯延娟 杜春阳 张连珊 段惠军 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2014年第1期16-21,共6页
目的观察敲低Txnip对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+质粒载体对照组及高糖+shRNA组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞ROS水平;Wes... 目的观察敲低Txnip对高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法将体外培养人肾小管上皮细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+质粒载体对照组及高糖+shRNA组。采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;流式细胞术检测细胞ROS水平;Western blot检测caspase-3、cleaved caspase-3、BAX、BCL-2、P38 MAPK、P-P38 MAPK及细胞色素c的表达。结果与正常糖组相比,高糖组肾小管上皮细胞ROS产生和细胞凋亡明显增加(P<0.01),cleaved caspase-3和P-P38 MAPK表达增高,BAX/BCL-2比率明显升高以及细胞色素c易位(P<0.05)。敲低Txnip能够显著抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡和ROS产生,下调cleaved caspase-3、和P-P38MAPK的表达,减少BAX/BCL-2比率和细胞色素c易位(P<0.05)。结论敲低Txnip能够抑制高糖诱导的人肾小管上皮细胞凋亡可能是通过减少ROS产生,保护线粒体功能,抑制P38MAPK信号通路激活而实现的。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 氧化应激 人肾小管上皮细胞 凋亡 线粒体
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转化生长因子β_1对人肾小管上皮细胞表达桩蛋白的影响 被引量：1
6
作者 韩敬 张璟 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期401-403,共3页
目的探讨重组人类转化生长因子β1(rhTGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞(HKC)桩蛋白(Pax)表达时相的影响。方法将体外培养的HKC随机分为4组。对照组(C组)无血清培养基(FSM)培养;rhTGF-β1培养组(T1、T2、T3组)分别用含10ng/mlTGF-β1的FS... 目的探讨重组人类转化生长因子β1(rhTGF-β1)对人近端肾小管上皮细胞(HKC)桩蛋白(Pax)表达时相的影响。方法将体外培养的HKC随机分为4组。对照组(C组)无血清培养基(FSM)培养;rhTGF-β1培养组(T1、T2、T3组)分别用含10ng/mlTGF-β1的FSM培养,取不同时相点(T1组24h,T2组48h,T3组72h)终止培养。MTT法检测rhTGF-β1诱导HKC增殖的时效关系,RT-PCR检测HKC的PaxmRNA表达,免疫组化和Westernblot检测Pax蛋白的表达。结果C组可检测到PaxmRNA和蛋白表达;PaxmRNA和蛋白表达T组明显高于C组,且T2、T3组明显高于T1组(P<0.01)。结论TGF-β1诱导HKC合成Pax具有时间依赖性。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 桩蛋白 转化生长因子Β
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TGFβ_1对人肾小管上皮细胞表达糖原合成酶激酶-3β的影响 被引量：8
7
作者 郑颖 张璟 +3 位作者 卓文磊 敖绪军 韩敬 张勇 《重庆医学》 CAS CSCD 2007年第5期414-416,共3页
目的研究转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞株(human kidney proximal tubular epithelial cell line,HKCs)表达糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响。方法将体外... 目的研究转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGFβ1)对人肾小管上皮细胞株(human kidney proximal tubular epithelial cell line,HKCs)表达糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响。方法将体外培养的的HKCs随机分为4组:正常对照组(C组):无血清培养基(free serum medium,FSM)培养;Ta组、Tb组和Tc组:用含不同浓度TGFβ1(Ta组:5ng/ml,Tb组:10ng/ml,Tc组:20ng/ml)的FSM培养。12h后,分别用RT-PCR、Western blot检测HKCs GSK-3β的mRNA、总蛋白表达量以及蛋白磷酸化水平。结果(1)GSK-3β mRNA和总蛋白在各组间表达量差异无统计学意义(P>0.05),和C组相比各T组GSK-3β蛋白磷酸化水平显著升高(P<0.01);(2)Tb组与Tc组相比,GSK-3β磷酸化水平更高(P<0.01);(3)Tb组与Tc组相比,GSK-3β磷酸化水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论TGFβ1虽不影响HKCs的GSK-3β mR-NA和总蛋白表达量,但能提高GSK-3β蛋白磷酸化水平,后者可能参与TGFβ1诱导的HKCs转分化过程。 展开更多
关键词 肾小管上皮细胞 转化生长因子Β1 糖原合成酶激酶3Β
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