钙荧光探剂的研究及其在生命科学中的应用 被引量：21

1

作者 张川里 吴本 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期37-42,共6页

钙荧光探剂测量活细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度的方法在钙研究中已成为一种越来越重要的技术。特别是由于新的一代荧光探剂的合成和激光共聚焦显微镜的发展，使其应用更加广泛。由于国内使用这种技术的实验室逐渐增多，本文将系统介绍钙荧... 钙荧光探剂测量活细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度的方法在钙研究中已成为一种越来越重要的技术。特别是由于新的一代荧光探剂的合成和激光共聚焦显微镜的发展，使其应用更加广泛。由于国内使用这种技术的实验室逐渐增多，本文将系统介绍钙荧光探剂的发展、测量原理和方法、新的常用钙荧光探剂的比较及其在生命科学中的应用。 展开更多

关键词 细胞 钙荧光探剂 钙离子浓度 细胞学技术

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镉致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的机理及N-乙酰半胱氨酸的保护作用 被引量：13

2

作者 袁燕 张英 +4 位作者 卞建春 刘学忠 李丹 孙娅 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1107-1110,共4页

对神经细胞用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒和N-乙酰半胱氨酸(NAC)(100μmol/L)进行保护,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡率、[Ca2+]i和活性氧(ROS)水平。结果表明,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平... 对神经细胞用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒和N-乙酰半胱氨酸(NAC)(100μmol/L)进行保护,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡率、[Ca2+]i和活性氧(ROS)水平。结果表明,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平明显升高,呈剂量-效应关系,除5μmol/L组ROS水平外,均差异极显著(P<0.01)。添加NAC组与相应染毒组比较,神经细胞凋亡率有降低趋势,但差异不显著(P>0.05);10、20μmol/L组细胞内[Ca2+]i和ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。表明镉可诱导神经细胞凋亡,其机理可能与细胞内Ca2+和ROS水平升高有关,NAC对其有一定的保护作用。 展开更多

关键词 镉 皮质神经元 细胞凋亡 细胞内ca2+浓度 活性氧 N-乙酰半胱氨酸

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黄芪甲苷对心肌细胞L型钙电流及细胞内钙的影响 被引量：6

3

作者 赵美眯 孙雪菲 +7 位作者 连雯雯 胡慧媛 王燕 曾本清 封瑞 高青华 赵金生 郝丽英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1373-1377,共5页

目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentrat... 目的研究黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对豚鼠心室肌细胞L型钙电流和细胞内钙的影响。方法分离单个豚鼠心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术测定钙电流,并采用荧光显微镜CCD成像系统动态观察细胞内钙(intracellular calcium concentration,[Ca2+]i)变化。结果 1×10-6mol·L-1AS-IV可明显抑制I Ca-L,使最大电流峰值降低32.6%。AS-IV对60 mmol·L-1KCl诱导的[Ca2+]i升高有抑制作用,最大荧光密度变化值从1.17±0.30(n=6)降低到0.26±0.16(n=5,P<0.05)。AS-IV可直接促进钙池内钙释放,使[Ca2+]i从0.08±0.02(n=10)升高到0.23±0.07(n=8,P<0.05)。结论 AS-IV抑制L型钙通道,可减少细胞外钙内流;同时它促进内钙释放,对心肌细胞内钙稳态表现为双向调节作用。 展开更多

关键词 黄芪甲苷 膜片钳技术 钙电流 细胞内钙 心肌细胞 Fluo-3

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钙的光释放技术及其在细胞研究中的应用 被引量：1

4

作者 徐建华 瞿安连 康华光 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第2期132-135,189,共5页

Ca2 +的光释放技术通过光解作用使预先引入细胞内的光敏感性螯合剂对Ca2 +的亲和性改变 ,从而实现对细胞内游离钙离子浓度的调控 ,有助于阐明Ca2 +作为第二信使对电兴奋性、肌肉收缩。

关键词 光释放 钙 细胞研究 生物物理学技术

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丁公藤碱对培养的人眼睫状肌细胞内Ca^(2+)运动的影响 被引量：2

5

作者 黄文勇 彭大伟 +1 位作者 曾淑君 李苏 《眼科学报》 1999年第4期212-214,共3页

目的:研究丁公藤碱(Erycibele Alkaloid)对人眼睫状肌细胞内Ca^(2+)运动的影响。方法:应用双波长荧光分光光度计检测细胞内[Ca^(2+)]_i浓度,研究M受体拮抗剂对丁公藤碱引起的细胞内[Ca^(2+)]_i升高的影响。结果:丁公藤碱无荧光干扰作用... 目的:研究丁公藤碱(Erycibele Alkaloid)对人眼睫状肌细胞内Ca^(2+)运动的影响。方法:应用双波长荧光分光光度计检测细胞内[Ca^(2+)]_i浓度,研究M受体拮抗剂对丁公藤碱引起的细胞内[Ca^(2+)]_i升高的影响。结果:丁公藤碱无荧光干扰作用。平均细胞内静息[Ca^(2+)]_i为79.3±28.7nmol/Lol/Lol/L(n=24)。丁公藤碱引起双相的[Ca^(2+)]_i升高。非选择性M受体拮抗剂Atropine(lnmol/L),可完全阻断1μmol/L丁公藤碱引起的[Ca^(2+)]_i升高;M_1受体拮抗剂Pirenzipine在低浓度(0.03nmol/L)时不能阻断1μmol/L丁公藤碱引起[Ca^(2+)]_i升高,而在高浓度(1μmol/L)时可完全阻断1μmol/L丁公藤碱引起的[Ca^(2+)]_i升高;M_3受体拮抗剂4-diphenyl acetoxy N-methy piperidine methiodide 在0.03μmol/L浓度时能够完全阻断(1μmol/L)丁公藤碱引起的[Ca^(2+)]_i升高。结论:丁公藤碱是通过细胞膜上M_3受体触发人眼睫状肌细胞内Ca^(2+)的升高。眼科学报1999;15:212—214。 展开更多

关键词 眼睫状肌细胞 细胞 钙 丁公藤碱 毒Zhuo碱受体

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齐墩果酸抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导凋亡的作用研究 被引量：2

6

作者 黄开顺 朱链链 +2 位作者 刘丹 邹黎 陈志琼 《世界科技研究与发展》 CSCD 2011年第2期318-321,共4页

目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i)关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24 h后,DAP1染色,以荧光显微镜观察细胞形态变化;以11组不同浓度齐墩果酸(5～400 μg/ml... 目的研究齐墩果酸对人肝癌细胞QGY增殖的作用及与细胞内钙离子浓度([Ca^(2+)]i)关系。方法将浓度分别为40、80、100μg/ml齐墩果酸作用肝癌H细胞QGY24 h后,DAP1染色,以荧光显微镜观察细胞形态变化;以11组不同浓度齐墩果酸(5～400 μg/ml)作用QGY细胞24 h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测QGY增殖情况;分别以不同浓度齐墩果酸(80、100、120 μg/ml)作用QGY细胞24 h后,流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和[Ca^(2+)]i。结果细胞增殖被抑制并发生凋亡;不同浓度齐墩果酸能够抑制QGY细胞株增殖,且在5～120μg/mL范围内呈剂量依赖性,药物作用细胞24 h、48的IC_(50)分别为76.27μg/mL和66.56μg/mL;处理组细胞周期在S期产生阻滞、细胞内[Ca^(2+)]i较对照组显著增加,细胞凋亡率和[Ca^(2+)]i与药物浓度存依赖关系。结论齐墩果酸能够抑制肝癌细胞QGY增殖和诱导其凋亡;诱导凋亡可能与细胞内[Ca^(2+)]i增加有关。 展开更多

关键词 齐墩果酸 肝癌细胞QGY 细胞周期 细胞凋亡 细胞内钙离子浓度

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细胞外钙受体调节人脐静脉内皮细胞游离钙离子浓度的研究 被引量：1

7

作者 陈雄英 王振焕 +3 位作者 胡清华 钟华 邓峰美 何芳 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第4期453-456,共4页

为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Westernblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺,负性变构调节剂Calhex231,通过钙荧光探针(Fura-2/AM)负载HUVEC检测细... 为探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)游离钙离子浓度是否受细胞外钙受体(CaR)的调节。采用Westernblot及RT-PCR技术检测CaR在HUVEC中蛋白及mRNA表达。使用CaR激动剂精胺,负性变构调节剂Calhex231,通过钙荧光探针(Fura-2/AM)负载HUVEC检测细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)。结果显示:(1)HUVEC中有CaR的表达。(2)在Fura-2/AM负载HUVEC中加入精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0.24±0.01,先加入Calhex231作用1min后再加入Calhex231+精胺刺激,[Ca2+]i为△ratio=0,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。由此可知,CaR调节HUVEC游离钙离子浓度。 展开更多

关键词 细胞外钙受体 calhex231 细胞内钙离子浓度

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一氧化氮合酶抑制剂对培养的人分泌中期子宫内膜细胞内钙的影响

8

作者 刘芸 邢福祺 +1 位作者 陈士岭 付志红 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第9期682-683,F002,共3页

目的 观察已受雌、孕激素影响的人子宫内膜细胞在一氧化氮（NO）作用下的细胞生理变化。方法 取人分泌中期子宫内膜，体外原代培养24-48h，用钙荧光探剂Fluo-3-AM负荷钙离子，采用激光扫描共聚焦显微镜测定加入一氧化氮合酶抑制剂（L-N... 目的 观察已受雌、孕激素影响的人子宫内膜细胞在一氧化氮（NO）作用下的细胞生理变化。方法 取人分泌中期子宫内膜，体外原代培养24-48h，用钙荧光探剂Fluo-3-AM负荷钙离子，采用激光扫描共聚焦显微镜测定加入一氧化氮合酶抑制剂（L-NAME）后，子宫内膜细胞内游离钙离子浓度（[Ca^2+]i）的动态变化。结果 加入L-NAME后，腺上皮细胞和间质细胞[（Ca^2+]i立即开始升高，400s后上升至高峰，900s时稍有下降，然后继续升高并保持在高水平，同时发现腺上皮细胞和基质细胞对L-NAME的反应不同。结论 在雌、孕激素作用的基础上，NO通过改变子宫内膜细胞[Ca^2+]i进行信号转导，实现其生理效应。 展开更多

关键词 一氧化氮合酶抑制剂 子宫内膜 细胞内钙离子浓度 激光扫描共聚焦显微镜

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钠钙交换体在支气管哮喘发病中的作用

9

作者 徐希 张畅 +2 位作者 商艳 李强 白冲 《国际呼吸杂志》 2015年第5期369-373,共5页

支气管哮喘（简称哮喘）是一种常见的慢性呼吸系统疾病，特征性表现为气道高反应性和气道重塑，其中气道平滑肌细胞作为主要的效应细胞，发挥了非常重要的作用。尽管相关调控机制尚不清楚，但大量研究表明平滑肌细胞胞浆钙稳态失衡能够... 支气管哮喘（简称哮喘）是一种常见的慢性呼吸系统疾病，特征性表现为气道高反应性和气道重塑，其中气道平滑肌细胞作为主要的效应细胞，发挥了非常重要的作用。尽管相关调控机制尚不清楚，但大量研究表明平滑肌细胞胞浆钙稳态失衡能够导致细胞收缩及舒张功能紊乱，与哮喘发病关系密切。钠钙交换体是一种存在于细胞膜上的Na-1Ca2＋转运蛋白，通过调控细胞内钙离子浓度对维持平滑肌细胞钙稳态以及细胞结构与功能具有重要作用。本文就钠钙交换体的结构、功能及其在哮喘发病中的病理生理学意义作一综述。 展开更多

关键词 钠钙交换体 支气管哮喘 气道平滑肌细胞 细胞内钙离子浓度

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17β-雌二醇对巨噬细胞内Ca^(2+)的影响

10

作者 洪敏 邵建华 +3 位作者 华永庆 孙小玉 李晓冬 朱荃 《现代中西医结合杂志》 CAS 2011年第14期1705-1707,共3页

目的观察17β-雌二醇(E2)对巨噬细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及可能的作用途径。方法小鼠腹腔巨噬细胞用F lou-3/AM负载,用激光共聚焦显微镜检测,[Ca2+]i以细胞内荧光强度表示。结果 100 nmol/L的17β-雌二醇能使小鼠腹腔巨... 目的观察17β-雌二醇(E2)对巨噬细胞胞浆游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响及可能的作用途径。方法小鼠腹腔巨噬细胞用F lou-3/AM负载,用激光共聚焦显微镜检测,[Ca2+]i以细胞内荧光强度表示。结果 100 nmol/L的17β-雌二醇能使小鼠腹腔巨噬细胞的[Ca2+]i明显提高(提高率39.8%)。巨噬细胞在无钙的条件下,加入E2后[Ca2+]i升高10.6%,在补充入Ca2+后,[Ca2+]i更有明显升高。用维拉帕米、肝素和普鲁卡因预先处理后,E2诱导的[Ca2+]i升高分别被抑制了52.8%,16.6%和36.7%。结论 E2诱导的腹腔巨噬细胞胞浆游离钙的升高是外钙内流和内钙释放共同作用的结果,并且这种作用与L-型钙通道、IP3受体和ryanod ine受体关系密切。 展开更多

关键词 17Β-雌二醇 巨噬细胞 胞浆游离钙离子浓度 钙通道

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慢性缺氧对大鼠肺静脉平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

11

作者 胡锦兴 彭德虎 +5 位作者 梁小朋 罗立全 林媛 蔡琼娣 罗炜 林兆原 《广州医科大学学报》 2015年第4期5-8,共4页

目的:探索原代培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞(PVSMCs)是否具有血管平滑肌功能及L型电压依赖性钙通道(VDCC)阻断剂硝苯地平对其细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制的研究提供理论依据。方法:用... 目的:探索原代培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞(PVSMCs)是否具有血管平滑肌功能及L型电压依赖性钙通道(VDCC)阻断剂硝苯地平对其细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,为慢性缺氧性肺动脉高压发病机制的研究提供理论依据。方法:用显微镜操作和胶原酶消化法分离、培养肺动脉高压模型大鼠肺静脉平滑肌细胞,鉴定培养的细胞及计算纯度,利用细胞内钙离子浓度检测系统观察慢性缺氧对PVSMCs静息[Ca2+]i的影响及硝苯地平的干预作用。结果:该方法培养的肺动脉高压模型造模的PVSMCs呈典型的平滑肌特性,表现为"峰-谷"状生长,免疫化学α-Actin鉴定显色,而且培养纯度达到98%;慢性缺氧能使PVSMCs的静息[Ca2+]i从(104.3±7.9)nmol/L提高到(197.9±11.8)nmol/L(P<0.05);5 mmol/L的硝苯地平能完全阻断慢性缺氧PVSMCs的[Ca2+]i对高钾溶液的反应。结论:慢性缺氧可使PVSMCs的静息[Ca2+]i升高,其机制可能与激活PVSMCs的VDCC导致细胞外Ca2+内流有关。 展开更多

关键词 肺静脉平滑肌细胞 慢性缺氧 硝苯地平 细胞内钙离子浓度

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rhlL-6影响巨噬细胞内钙离子浓度和空间分布 被引量：4

12

作者 范斌 沈坚 沈子威 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期617-622,共6页

使用重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）刺激小鼠腹腔巨噬细胞，应用荧光分光光度计和激光扫描共焦显微镜检测胞浆内游离钙离子的时空分布。静息状态巨噬细胞Ｃａ２＋浓度１０－８｀～１０－７ｍｏｏ／Ｌ，加入１００ｕ／ｍｌｒｈＩＬ... 使用重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）刺激小鼠腹腔巨噬细胞，应用荧光分光光度计和激光扫描共焦显微镜检测胞浆内游离钙离子的时空分布。静息状态巨噬细胞Ｃａ２＋浓度１０－８｀～１０－７ｍｏｏ／Ｌ，加入１００ｕ／ｍｌｒｈＩＬ－６后，未见作用。从２００ｕ／ｍｌ至４００ｕ／ｍｌ不同浓度的ｒｈＩＬ－６则使细胞内游离Ｃａ２＋浓度呈尖峰状迅速升高３００％左右，然后急剧下降至静息值。且各个浓度对Ｃａ２＋的升高幅度及峰形基本一致，但随浓度的升高，Ｃａ２＋浓度达到高峰所需的时间逐渐缩短。这说明，胞外ＩＬ－６浓度存在着一阈值，只有达到或超过这一阈值。 展开更多

关键词 RHIL-6 巨噬细胞 细胞内钙浓度 钙分布

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活细胞钙离子浓度荧光显微检测系统的研制和应用 被引量：1

13

作者 兰李 周云燕 +2 位作者 杨志勇 瞿安连 徐涛 《生物医学工程研究》 2004年第2期114-117,共4页

研制了活细胞钙离子浓度荧光显微检测系统。该系统的工作原理是 :氙灯发射的光线被椭球面镜聚焦后以衍射光栅分光 ,通过光纤、双路耦合聚光镜和物镜将单色光纤入样本平面以激发细胞中的钙离子荧光探针发出荧光 ,最后用光电倍增管检测荧... 研制了活细胞钙离子浓度荧光显微检测系统。该系统的工作原理是 :氙灯发射的光线被椭球面镜聚焦后以衍射光栅分光 ,通过光纤、双路耦合聚光镜和物镜将单色光纤入样本平面以激发细胞中的钙离子荧光探针发出荧光 ,最后用光电倍增管检测荧光信号。使用该系统 ,测定了高K+ 去极化刺激下PC12细胞 (大鼠嗜铬细胞瘤细胞 )内 [Ca2 + ]i 变化的动态特性曲线。结果表明 :静息状态下PC12细胞内 [Ca2 + ]i 为 80 .0±15 .0nmol/L ,高K+ 去极化刺激可使PC12细胞内 [Ca2 + ]i 增加到 1.9± 0 .2 μmol/L ,上升至峰值时间约为2 0 .1s。表明此系统可以满足检测活体细胞 [Ca2 + ]i 的需要。 展开更多

关键词 [ca^2+]I 显微 PC12细胞 钙离子浓度 刺激 瘤细胞 嗜铬细胞瘤 活细胞 活体细胞 荧光

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维生素D_3对三角帆蚌外套膜细胞内Ca^(2+)浓度的影响 被引量：2

14

作者 郝莹莹 施志仪 +1 位作者 李文娟 靳雨丽 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期98-103,共6页

采用胰酶消化法获得三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)外套膜细胞,用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)检测外套膜内外表皮细胞在静息状态下细胞的游离Ca2+浓度及不同浓度维生素D3(VD3... 采用胰酶消化法获得三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)外套膜细胞,用Fluo-3/AM荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)检测外套膜内外表皮细胞在静息状态下细胞的游离Ca2+浓度及不同浓度维生素D3(VD3)孵育后的外套膜细胞的Ca2+的动态情况。结果表明,未添加VD3(1.25 mmol/L Ca2+)时,外套膜外表皮细胞的Ca2+荧光强度显著高于内表皮细胞内的Ca2+(P<0.05)。在添加不同浓度VD3后,内表皮细胞与外表皮细胞内Ca2+浓度变化趋势一致,表现为细胞内Ca2+沉积量的变化是随着VD3浓度的增大而增大,其中,对照组与添加50 IU/L组差异不显著(P>0.05);当添加浓度为100 IU/L时,与对照组和50 IU/L组差异显著(P<0.05);当添加组浓度达到500IU/L时,与前3组有显著差异(P<0.05);当添加的浓度增大到1 000 IU/L后与500 IU/L组差异不显著(P>0.05),但与其他组均存在显著差异(P<0.05)。本实验为外套膜细胞的钙代谢机制研究提供了实验依据。 展开更多

关键词 三角帆蚌 外套膜细胞ca2+浓度 维生素D3(VD3) 激光共聚焦扫描显微镜

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第Ⅲ组代谢性谷氨酸受体抑制Aβ_(31～35)诱导的神经元胞内钙增高 被引量：1

15

作者 赵丽 崔爱玲 张策 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1561-1564,共4页

目的观察第Ⅲ组代谢型谷氨酸受体激动剂L-SOP和(R,S)-PPG对Aβ31～35所致培养神经元胞内Ca2+浓度升高的影响。方法原代培养的大鼠额叶皮层神经元,分别加入第Ⅲ组mG luR s激动剂L-SOP或(R,S)-PPG,利用实时Ca2+荧光成像技术观察对Aβ31～3... 目的观察第Ⅲ组代谢型谷氨酸受体激动剂L-SOP和(R,S)-PPG对Aβ31～35所致培养神经元胞内Ca2+浓度升高的影响。方法原代培养的大鼠额叶皮层神经元,分别加入第Ⅲ组mG luR s激动剂L-SOP或(R,S)-PPG,利用实时Ca2+荧光成像技术观察对Aβ31～35所致〔Ca2+〕i升高的影响。结果急性给予Aβ31～35可引起培养神经元的〔Ca2+〕i水平呈剂量依赖性的升高,即随着Aβ31～35浓度的增加,其〔Ca2+〕i升高的幅度逐渐增加,而潜伏期逐渐缩短;经L-SOP或(R,S)-PPG预处理后,使Aβ31～35所引起的〔Ca2+〕i的平均升高幅度降低,平均潜伏期明显延长。结论在离体培养的神经元第Ⅲ组mG luR s的激活可通过抑制Aβ31～35引起的Ca2+超载,对Aβ31-35诱导的神经毒发挥保护作用。 展开更多

关键词 β淀粉样肽31~35 胞内钙浓度 L型谷氨酸受体激动剂 (R S)-环氧乙烷聚合物

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茶多酚体外诱导人肺癌细胞凋亡的机理研究 被引量：26

16

作者 谢珏 陈清勇 +3 位作者 周建英 王彦刈 杨凌 江中勇 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期244-247,共4页

目的探讨茶多酚诱导人肺癌细胞的凋亡作用及其相关机理。方法采用MTT法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪技术 ,体外观察茶多酚对肺癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果不同浓度的茶多酚 (5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg/ml)对肺癌细胞均... 目的探讨茶多酚诱导人肺癌细胞的凋亡作用及其相关机理。方法采用MTT法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪技术 ,体外观察茶多酚对肺癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果不同浓度的茶多酚 (5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg/ml)对肺癌细胞均有抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,抑制率 (% )分别为 2 8.6 9± 1.2 7、4 6 .19± 1.79、6 4.6 1± 1.2 9、75 .90± 1.96。在细胞增殖受到明显抑制时 ,细胞被阻滞于G0 /G1期 ,不能进入S期及G2 /M期 ,同时诱导肺癌细胞凋亡 ,凋亡率 (% )分别为 4 .76± 0 .11、5 .78± 0 .38、10 .0 6± 0 6 7、2 4 .4 4± 0 .4 4。激光共聚焦显微镜双荧光标记可见细胞凋亡的形态学改变 ,与对照组比较 ,随着茶多酚浓度的增高 ,细胞内Ca2 +浓度、AnnexinV表达和蛋白酪氨酸磷酸酶基因 (PTEN)蛋白表达逐渐增高 ,细胞周期调控蛋白D1蛋白表达水平则呈逐渐下降。结论茶多酚可诱导人肺癌细胞的凋亡 ,其作用机制与改变细胞内Ca2 +浓度。 展开更多

关键词 茶多酚 体外诱导 肺癌 细胞凋亡

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慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ca^(2+)浓度及Ca^(2+)-ATP酶活性的影响 被引量：17

17

作者 刘素媛 孙黎光 +1 位作者 邢伟 万伯建 《卫生毒理学杂志》 CSCD 1999年第1期16-17,共2页

目的：观察慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法：用０．１５％醋酸铅饲养大鼠建立慢性染铅动物模型，参照Ｄｉｌｄｙ法和徐友涵法测定海马神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。... 目的：观察慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法：用０．１５％醋酸铅饲养大鼠建立慢性染铅动物模型，参照Ｄｉｌｄｙ法和徐友涵法测定海马神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。结果发现：细胞内Ｃａ２＋浓度，染铅组（２０３．８３±３０．５０）ｎｍｏｌ／Ｌ，对照组（９７．６２±１９．８３）ｎｍｏｌ／Ｌ，ｔ＝８．３１Ｐ＜０．００５；Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性，染铅组（３２６．４２±４０．０６）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１，对照组（２５３．０７±２５．４０）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１，ｔ＝３．５４，Ｐ＜０．０１。结论：慢性染铅可使大鼠海马区神经细胞内Ｃａ２＋浓度升高。 展开更多

关键词 铅中毒 ATP酶 钙 神经细胞 海马

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4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究 被引量：8

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作者 杨最素 罗莉 +2 位作者 朱利群 仇黎丽 徐昌芬 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1203-1206,共4页

目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对... 目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2+浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2+浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。 展开更多

关键词 4'甲醚-黄芩素(4-MS) JAR细胞 早期凋亡 细胞内ca^2+浓度 人端粒酶逆转录酶(hTERT)

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β_3-肾上腺素能受体对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca^(2+)浓度的调控及其转导途径 被引量：6

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作者 邓义军 伍卫 +2 位作者 方昶 黄至斌 王景峰 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1635-1637,1640,共4页

目的观察β3-肾上腺素能受体(β3-AR)对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控及其转导途径。方法通过结扎冠状动脉前降支制备大鼠实验性心力衰竭模型,经典酶分离法分离心肌细胞,Fluo-3/AM染色,激光共聚焦显微镜观察β3... 目的观察β3-肾上腺素能受体(β3-AR)对心力衰竭大鼠心室肌细胞内静息Ca2+浓度([Ca2+]i)的调控及其转导途径。方法通过结扎冠状动脉前降支制备大鼠实验性心力衰竭模型,经典酶分离法分离心肌细胞,Fluo-3/AM染色,激光共聚焦显微镜观察β3-AR兴奋剂BRL-37344以及合用PTX(Gi抑制剂)、L-NAME(NOS抑制剂)、Methylene blue(NO抑制剂)时对心室肌细胞内静息Ca2+浓度的影响及其转导途径。结果在心力衰竭和正常对照大鼠,β3-AR激动剂BRL37344(1μmol/L)分别使心室肌细胞内[Ca2+]i下调至用药前水平的59.4%、45.5%(P<0.05);在分别用L-NAME(10μmol/L)、Methylene blue(10μmol/L)、PTX(2μg/ml)阻断下,BRL37344(1μmol/L)使正常对照大鼠[Ca2+]i分别下降10.1%、16.9%、15.4%,而在心力衰竭大鼠[Ca2+]i分别下降16.9%、19.3%、11.7%。结论β3-AR激动剂可以使心室肌细胞内[Ca2+]i下调,心力衰竭心肌下调程度较轻,其作用是通过PTX-NOS-NO转导。 展开更多

关键词 Β3-肾上腺素能受体 心力衰竭 心室肌细胞 细胞内静息ca2+浓度

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钠钙交换体的生理和病理生理功能研究进展 被引量：7

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作者 宿俊杰 齐戈尧 +2 位作者 党晓智 杨念 张骏 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期241-251,共11页

钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)是一种广泛分布于膜性结构(细胞质膜、线粒体膜、内质网、分泌小泡膜等)上的阳离子转运蛋白,具有两种转运Ca2+和Na+的模式:介导Na+内流、Ca2+外排的前向模式(forward mode)和作用相反的反向模... 钠钙交换体(sodium calcium exchanger,NCX)是一种广泛分布于膜性结构(细胞质膜、线粒体膜、内质网、分泌小泡膜等)上的阳离子转运蛋白,具有两种转运Ca2+和Na+的模式:介导Na+内流、Ca2+外排的前向模式(forward mode)和作用相反的反向模式(reverse mode)。通过这种双向模式,NCX可以对胞质内Ca2+浓度进行快速精确的调节,继而影响细胞内信号转导、细胞生长发育、可兴奋细胞的兴奋及兴奋耦联的相关功能等一系列生理活动,如心肌和骨骼肌细胞的收缩、神经递质的释放、神经胶质细胞的迁移分化、免疫细胞的活化以及细胞因子与激素的分泌等。此外,在病理情况下,NCX反向模式的异常激活,被认为是NCX参与心血管系统、中枢神经系统、内分泌系统等多个系统病理生理过程的关键。在此,本文对NCX分子及其参与的生理、病理生理过程的研究进展作一综述,以提供关于NCX较为全面的认识。 展开更多

关键词 钠钙交换体 胞内钙浓度 前向模式 反向模式

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