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负性调控因子IRAKM在系统性红斑狼疮免疫调节异常中的作用 被引量:6
1
作者 武延格 邱劲军 +2 位作者 刘宏霞 张波 龚宇锋 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1858-1861,共4页
目的:研究白介素-1受体相关激酶-M(IRAKM)在系统性红斑狼疮(SLE)中的表达及其与免疫调节的关系。方法:将103例SLE患者根据其疾病活动度评分(SLEDAI)分为活动期组(55例)和稳定期组(48例),另选40名体检健康者作为对照组;采用实时荧光定量P... 目的:研究白介素-1受体相关激酶-M(IRAKM)在系统性红斑狼疮(SLE)中的表达及其与免疫调节的关系。方法:将103例SLE患者根据其疾病活动度评分(SLEDAI)分为活动期组(55例)和稳定期组(48例),另选40名体检健康者作为对照组;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测3组外周血单核细胞中IRAKM mRNA的表达量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体水平,免疫散射比浊法测定血清补体C3、C4水平;应用单因素方差分析法分析3组各观察指标的差异,Pearson或Spearman分析IRAKM与SLE自身抗体及补体的相关性。结果:活动期组和稳定期组SLE患者的IRAKM mRNA表达量均明显低于对照组(P<0.05),且活动期组比稳定期组更低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比,活动期组和稳定期组血清抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体水平均明显升高(P<0.05),补体C3、C4的水平均明显降低(P<0.05),且活动期组血清自身抗体和补体水平变化较稳定期组更显著(P<0.05);SLE患者的IRAKM mRNA表达量与抗ds-DNA抗体和抗Sm抗体水平呈负相关(P<0.05),与补体C3、C4水平呈正相关(P<0.05)。结论:IRAKM负性调控参与SLE的免疫调节过程,其表达水平与SLE病情活动程度密切相关。 展开更多
关键词 系统性红斑狼疮 白介素-1受体相关激酶-M 免疫调节
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白细胞介素-1受体相关激酶通过TLR-4/MyD88信号通路调控内毒素诱导的气道黏液高分泌 被引量:2
2
作者 何明欣 张华 +3 位作者 周向东 尤列·皮尔曼 维克多·科罗索夫 李琪 《中国呼吸与危重监护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期50-54,共5页
目的探讨白细胞介素-1受体相关激酶(interleukin-1 receptor associated kinase,IRAK)在细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的气道黏液高分泌中的作用及其机制。方法采用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染,下调Tol... 目的探讨白细胞介素-1受体相关激酶(interleukin-1 receptor associated kinase,IRAK)在细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的气道黏液高分泌中的作用及其机制。方法采用特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染,下调Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)-4、IRAK在人气道上皮细胞株BEAS-2B中的表达,采用逆转录–聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测细胞内黏蛋白5AC(mucin 5AC,MUC5AC)mRNA转录水平,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞上清液中MUC5AC分泌量。利用蛋白印迹法检测胞内信号蛋白IRAK磷酸化水平及核因子(nuclear factor,NF)-κB p65的核转位情况。结果经LPS刺激后BEAS-2B细胞内IRAK磷酸化水平显著增高,使用siRNA下调TLR-4表达,可部分降低IRAK磷酸化水平(P<0.05);经LPS刺激,NF-κB p65趋向核内分布,使用siRNA下调TLR-4或IRAK可部分削弱NF-κB p65核内分布(P<0.05);RT-PCR及ELISA结果也显示,经LPS刺激后TLR-4缺陷株MUC5AC mRNA转录水平(0.36±0.05)、分泌量[(0.33±0.04)μg/L],IRAK缺陷株MUC5AC mRNA转录水平(0.48±0.05)、分泌量[(0.42±0.05)μg/L],IRAK激酶抑制剂组MUC5AC mRNA转录水平(0.57±0.07)、分泌量[(0.51±0.06)μg/L]均分别低于野生型BEAS-2B组[0.82±0.09,(0.76±0.09)μg/L;均P<0.05]。结论IRAK作为TLR受体依赖信号通路上游的重要调控蛋白,参与LPS诱导的气道黏液高分泌。 展开更多
关键词 白细胞介素-1受体相关激酶 脂多糖 气道黏液高分泌
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IRAK-4在大鼠缺血性脑损伤早期的表达及意义 被引量:2
3
作者 杨云峰 李江涛 +4 位作者 陈志 冯华 胡军 魏林节 朱刚 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2011年第3期311-315,共5页
目的 探讨白细胞介素-1受体相关激酶-4(interleukin-1 receptor-associated kinases,IRAK-4)在大鼠大脑缺血性损伤早期的表达及意义.方法 应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶永久性脑梗死模型,随机分为正常对照组、假手术组、... 目的 探讨白细胞介素-1受体相关激酶-4(interleukin-1 receptor-associated kinases,IRAK-4)在大鼠大脑缺血性损伤早期的表达及意义.方法 应用大脑中动脉线栓法(MCAO)建立大鼠局灶永久性脑梗死模型,随机分为正常对照组、假手术组、缺血组、干预组.采用RT-PCR、Western blot、免疫荧光、神经功能5分评定及TTC染色等方法,检测大鼠额顶叶皮层组织IRAK-4在脑缺血性损伤早期的mRNA及蛋白表达变化、神经功能缺损程度及脑梗死体积变化,并统计各组死亡率.结果 大鼠大脑缺血性损伤早期额顶叶皮层组织IRAK-4 mRNA表达:3 h开始增加,12 h达到高峰,24 h仍维持在较高水平;IRAK-4蛋白表达:3 h开始增加,6 h达到高峰,12 h仍维持在较高水平,24 h下降与正常对照组无统计学意义;IRAK-4抑制能明显缩小脑梗死体积、改善神经功能、降低死亡率.结论 大鼠额顶叶皮层组织IRAK-4在脑缺血性损伤早期表达迅速上调,可能参与了脑缺血后炎性反应的调控,早期抑制其功能可以发挥显著脑保护作用. 展开更多
关键词 白细胞介素-1 受体相关激酶-4 先天免疫 缺血性脑梗死 继发性脑损伤
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IRAK-M短发夹RNA对RAW264.7细胞内毒素耐受性的抑制作用 被引量:1
4
作者 李旭宏 陈先锋 +3 位作者 游海波 刘海忠 刘作金 龚建平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期444-448,共5页
目的:观察白介素-1受体相关激酶-M(IRAK-M)基因沉寂后RAW264.7细胞内毒素耐受性的改变,进而探讨IRAK-M在内毒素耐受形成中的作用.方法:构建表达IRAK-M短发夹RNA(shRNA)的阳性重组质粒(pshIRAK-M-A)和阴性重组质粒(pshIRAK-M-B),转染RAW2... 目的:观察白介素-1受体相关激酶-M(IRAK-M)基因沉寂后RAW264.7细胞内毒素耐受性的改变,进而探讨IRAK-M在内毒素耐受形成中的作用.方法:构建表达IRAK-M短发夹RNA(shRNA)的阳性重组质粒(pshIRAK-M-A)和阴性重组质粒(pshIRAK-M-B),转染RAW264.7(小鼠单核巨噬细胞系)细胞;各组细胞经10μg/L脂多糖(LPS)预处理24h后(或直接)用100μg/LLPS刺激;3h后,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液中TNF-α水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中的TNF-α mRNA表达水平,蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞中IRAK-M蛋白的表达,凝胶电迁移率分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB的活性.结果:pshIRAK-M-A对IRAK-M蛋白表达抑制率为83%左右,pshIRAK-M-B对IRAK-M蛋白表达无明显抑制作用;两种转染细胞在用100μg/LLPS直接刺激后,其培养液中TNF-α水平、细胞内TNF-α mRNA表达及NF-κB活性无显著性差异;两种转染细胞对LPS的再次应答均明显弱于初次应答细胞(P<0.05),但pshIRAK-M-A转染组细胞对LPS的再次应答明显强于pshIR AK-M-B转染组细胞(P<0.05).结论:IRAK-M表达受抑导致细胞内毒素耐受性减弱,IRAK-M在内毒素耐受形成中起重要作用. 展开更多
关键词 RAW264.7细胞 内毒素耐受 白介素-1受体相关激酶-M 凝胶电迁移率分析法
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IL-1受体相关激酶1和2协同调控IL-1诱导的NF-κB活化
5
作者 郭甫坤 李亦蕾 吴曙光 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期340-343,共4页
目的 研究白细胞介素 1受体相关激酶 1(IRAK 1)和IRAK 2在白细胞介素 1(IL 1)诱导核因子 κB(NF κB)活化中的作用。方法 Lipofectin介导反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测IRAK 1mRNA和IRAK 2... 目的 研究白细胞介素 1受体相关激酶 1(IRAK 1)和IRAK 2在白细胞介素 1(IL 1)诱导核因子 κB(NF κB)活化中的作用。方法 Lipofectin介导反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸转染HepG2细胞。用逆转录PCR法检测IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达水平 ,以夹心ELISA法检测NF κB的活化。结果  (1)反义IRAK 1寡核苷酸和反义IRAK 2寡核苷酸分别抑制IRAK 1mRNA和IRAK 2mRNA表达。 (2 )反义IRAK 1寡核苷酸或反义IRAK 2寡核苷酸部分抑制NF κB活化 ,最高抑制率分别为 (34 6± 0 9) %和 (5 4 5± 0 2 ) %。 (3)反义IRAK 1寡核苷酸与反义IRAK 2寡核苷酸共转染HepG2细胞对NF κB的抑制作用明显增强 ,抑制率达 (77 5± 0 9) %。结论 IRAK 1或IRAK 2调控NF κB活化 ,但不能完全激活NF κB ;IRAK 1和IRAK 2协同调控IL 1诱导的NF κB活化。 展开更多
关键词 白细胞介素1 反义寡核苷酸 IL-1受体相关激酶
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白介素-1受体相关激酶-M在脂多糖预处理减轻慢性肝损伤机制中的作用
6
作者 郭建红 韩德五 +2 位作者 苗宇船 许瑞龄 赵元昌 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期174-176,共3页
目的:探讨脂多糖(LPS)预处理对四氯化碳(CCl4)诱导的慢性肝损伤的影响及肝组织中白介素-1受体相关激酶-M(I-RAK-M)表达的变化。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、肝损伤组和LPS预处理组。制备肝切片,计数浸润肝组织的淋巴细胞;... 目的:探讨脂多糖(LPS)预处理对四氯化碳(CCl4)诱导的慢性肝损伤的影响及肝组织中白介素-1受体相关激酶-M(I-RAK-M)表达的变化。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、肝损伤组和LPS预处理组。制备肝切片,计数浸润肝组织的淋巴细胞;测定血浆内毒素水平和丙氨酸转氨酶(ALT)活性、肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;免疫印迹法测定肝组织中p38丝裂原激活的蛋白激酶(p38MAPK)和IRAK-M表达。结果:LPS预处理可明显减轻CCl4所致的慢性肝损伤,经LPS预处理动物肝组织切片淋巴细胞计数、血浆ALT水平与肝损伤组比较均显著降低;肝匀浆的TNF-α测定结果表明,LPS预处理组TNF-α含量明显低于肝损伤组。LPS处理组pp38MAPK的表达比肝损伤组显著减弱,而IRAK-M表达显著增强。结论:LPS预处理可以减轻CCl4诱导的慢性肝损伤,其机制可能是IRAK-M负性调节LPS信号转导通路,致使致炎因子分泌减少。 展开更多
关键词 脂多糖 预处理 四氯化碳 肝损伤 信号转导 白介素-1 受体相关激酶-M
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TRAF-6、IRAK-1和NALP3炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用研究 被引量:11
7
作者 谢敏 范晓利 +1 位作者 赵一璟 王昆 《海南医学院学报》 CAS 2020年第12期925-931,937,共8页
目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓... 目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF-6)、白介素1受体关联激酶-1(IRAK-1)、嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3(NALP3)等3种炎症因子失调在痛风性关节炎患者体内的作用。方法:选取本院收治的105例痛风性关节炎患者(急性发作期患者47例,缓解期患者58例,即A、B组)进行回顾性实验,同时选健康志愿者61例进行对照,即C组,3组纳入时间均为2017年5月~2018年5月,所有受试者TRAF-6、IRAK-1和NALP3检测均采用实时荧光定量发法(RT-PCR)完成,并比较这3种炎性因子与痛风性关节炎的相关性。结果:(1)A、B组治疗后的ESR、BUA及总补体均高于C组,其中A组上述3项指标均高于B组(P<0.05),而CRP均低于C组,且A组上述两项指标均低于B组(P<0.05)。(2)A、B组治疗前TRAF-6 mRNA相对表达量比较无明显差异(P<0.05),且低于C组(P<0.05);A、B组治疗后的上述指标均有所提升,但A组依旧低于B组(P<0.05),且A组提升幅度同样低于C组(P<0.05),而B组提升幅度较C组无明显差异(P<0.05)。(3)A、B组治疗前的IRAK-1mRNA相对表达量相比无显著差异(P>0.05),但均低于C组(P<0.05),A、B组治疗后的IRAK-1mRNA相对表达量均有所提升,A组明显低于C组(P<0.05),B组较C组则无明显差异(P>0.05)。(4)A、B组治疗前的NALP-3 mRNA相对表达量相比无明显差异(P>0.05),且高于C组(P<0.05);A组治疗后的NALP-3 mRNA相对表达量下降均不明显(P<0.05),而B组治疗后则明显下降,与A、C组相比均有显著差异(P<0.05)。(5)TRAF-6与ESR、CRP及总补体均无相关性(P>0.05);IRAK-1与CRP、BUA及总补体呈负相关(P<0.05);NALP-3与ESR、CRP呈正相关(P<0.05)。结论:在痛风性关节炎患者的患病过程中,TRAF-6、IRAK-1及NALP-3均呈异常表达状态,是促进患者病情发生、发展和转归的重要参与者,应采取措施进行干预。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子受体相关因子-6 炎症因子失调 泛素连接酶 白介素1受体关联激酶-1 嗜中性白细胞碱性磷酸酶-3 痛风性关节炎
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反义IRAK-2寡核苷酸抑制白介素-1生物学效应 被引量:9
8
作者 郭甫坤 李亦蕾 吴曙光 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期52-55,共4页
目的 :研究白介素 1(IL 1)受体相关激酶 2 (IRAK 2 )的反义寡核苷酸对IL 1生物学效应的影响。方法 :Lipofectin介导反义IRAK 2寡核苷酸转染人脐静脉内皮细胞。用SandwichELISA法检测核因子 kappaB(NF kappaB)的活化 ,竞争ELISA法测定PG... 目的 :研究白介素 1(IL 1)受体相关激酶 2 (IRAK 2 )的反义寡核苷酸对IL 1生物学效应的影响。方法 :Lipofectin介导反义IRAK 2寡核苷酸转染人脐静脉内皮细胞。用SandwichELISA法检测核因子 kappaB(NF kappaB)的活化 ,竞争ELISA法测定PGI2 合成 ,细胞ELISA法检测细胞间粘附分子 1(ICAM 1)蛋白表达水平 ,以逆转录PCR法检测ICAM 1mRNA和I RAK 2mRNA表达水平。结果 :①反义IRAK 2寡核苷酸呈浓度 (1~ 4 μg·ml-1)和时间 (5~ 2 4h)依赖性地抑制NF kappaB活化、PGI2 合成和ICAM 1蛋白表达 ,反义IRAK 2寡核苷酸 3 μg·ml-1与细胞共孵育 8h时抑制效果最好。②反义IRAK 2寡核苷酸抑制ICAM 1mRNA表达。③反义IRAK 2寡核苷酸抑制IRAK 2mRNA表达。结论 :反义IRAK 2寡核苷酸通过抑制IRAK 2表达抑制IL 1生物活性 ,预示反义IRAK 2寡核苷酸是一种可供选择的抗炎新策略。 展开更多
关键词 反义寡核苷酸 白细胞介素1 IRAK-2
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橘皮苷对大鼠重症急性胰腺炎的治疗作用及机制 被引量:8
9
作者 李敏 郭志松 +1 位作者 邵换璋 秦秉玉 《中华危重病急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期921-925,共5页
目的 探讨橘皮苷对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)治疗作用的机制.方法 将60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAP模型组、地塞米松组(5 mg/kg)、低剂量橘皮苷组(10 mg/kg)和高剂量橘皮苷组(20 mg/kg),每组12只.经胰管逆行注... 目的 探讨橘皮苷对大鼠重症急性胰腺炎(SAP)治疗作用的机制.方法 将60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、SAP模型组、地塞米松组(5 mg/kg)、低剂量橘皮苷组(10 mg/kg)和高剂量橘皮苷组(20 mg/kg),每组12只.经胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠建立SAP大鼠模型,假手术组注射生理盐水;术后5 min经股静脉注射相应药物.术后24 h观察动物存活情况,测定血清淀粉酶水平、腹水量和胰腺相对比重;苏木素-伊红(HE)染色后镜下观察胰腺组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和胰腺组织白细胞介素(IL-1β、IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)检测Toll样受体4(TLR4)表达以及白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)、核转录因子-κB(NF-κB)磷酸化水平.结果 与SAP模型组比较,低、高剂量橘皮苷治疗后24 h动物存活率提高(83.3%、100%比58.3%),腹水量减少(mL:7.36±0.91、6.10±1.02比13.82±2.06),血清淀粉酶水平降低(U/L:1081.48±78.23、1048.58±49.97比1990.37±127.27),胰腺相对比重降低〔(7.52±1.02)%、(5.59±0.96)%比(11.22±0.96)%〕,胰腺组织病理损伤减轻;高剂量橘皮苷组血清和胰腺组织炎性因子水平明显降低〔血清IL-1β(ng/L):68.08±10.49比130.30±23.35,IL-6(ng/L):63.88±10.47比158.41±21.38,TNF-α(ng/L):10.42±1.49比18.16±2.01;胰腺IL-1β(pg/μg):13.87±1.84比20.08±1.66,IL-6(pg/μg):21.90±3.12比38.13±3.57,TNF-α(pg/μg):1.88±0.20比4.26±0.58〕;低、高剂量橘皮苷均可抑制TLR4表达及IRAK1、NF-κB磷酸化(以假手术组为100,TLR4/β-actin:91.9±15.6、83.7±11.2比168.5±9.0,p-IRAK1/IRAK1:117.4±7.6、104.7±11.5比173.5±15.8,p-NF-κB p65/NF-κB p65:119.9±9.3、105.8±12.6比174.1±13.0),差异均有统计学意义(均P〈0.05).地塞米松治疗SAP的作用与高剂量橘皮苷 展开更多
关键词 胰腺炎 急性 重症 橘皮苷 TOLL样受体4 白细胞介素-1受体相关激酶 核转录因 子-κB 细胞因子
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白细胞介素-1受体相关激酶1在脂多糖诱导的足细胞损伤中的作用及其机制 被引量:1
10
作者 陈慧敏 李霞 +2 位作者 郎娅婷 盛清浩 吕智美 《临床内科杂志》 CAS 2023年第2期122-126,共5页
目的探讨白细胞介素(IL)-1受体相关激酶1(IRAK1)在脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的永生化人足细胞分为5组:正常对照组(control组)、LPS组、LPS+空载转染组(LPS+si-NC组)、LPS+IRAK1干扰质粒转染组(LPS+s... 目的探讨白细胞介素(IL)-1受体相关激酶1(IRAK1)在脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的永生化人足细胞分为5组:正常对照组(control组)、LPS组、LPS+空载转染组(LPS+si-NC组)、LPS+IRAK1干扰质粒转染组(LPS+si-IRAK1组)、LPS+肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)干扰质粒转染组(LPS+si-TRAF6组)。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测5组足细胞IRAK1和TRAF6蛋白及其mRNA的相对表达水平;采用免疫荧光检测5组足细胞紧密连接蛋白(ZO)-1、结蛋白(Desmin)的定位及相对表达水平;采用Western Blot检测5组足细胞IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、人核因子(NF)-κB抑制蛋白(IKB)α、NF-κB(p65)、磷酸化NF-κB(p-p65)蛋白的相对表达水平;采用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测IRAK1和TRAF6结合情况。结果LPS组足细胞IRAK1、TRAF6蛋白及mRNA相对表达水平均高于control组,LPS+si-IRAK1组足细胞上述指标均低于LPS组(P<0.05)。LPS组、LPS+si-NC组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均高于control组,ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均低于control组;LPS+si-IRAK1组、LPS+si-TRAF6组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均低于LPS组、LPS+si-NC组,ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均高于LPS组、LPS+si-NC组(P<0.05)。Co-IP实验结果显示IRAK1与TRAF6存在结合。结论LPS诱导足细胞发生损伤并激活炎症反应,调控IRAK1通过靶向TRAF6/NF-κB通路减轻LPS导致的足细胞损伤。 展开更多
关键词 脂多糖 足细胞 白细胞介素-1受体相关激酶1 肿瘤坏死因子受体相关因子6
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缺氧增加小鼠小胶质细胞IRAK-4的表达 被引量:4
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作者 陈实 朱刚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1151-1153,共3页
目的观察缺氧后小鼠小胶质细胞株N9对白细胞介素-1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor associatedkinase-4,IRAK-4)表达的变化,探讨小胶质细胞内炎症反应的相关机制。方法将培养的N9细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下培养1、3、6... 目的观察缺氧后小鼠小胶质细胞株N9对白细胞介素-1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor associatedkinase-4,IRAK-4)表达的变化,探讨小胶质细胞内炎症反应的相关机制。方法将培养的N9细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下培养1、3、6、12、24 h,用Western blot检测蛋白表达的变化,用激光共聚焦技术观察IRAK-4在细胞内表达变化情况,用酶联免疫吸附法检测培养液上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果N9细胞IRAK-4的蛋白表达随缺氧时间延长而逐渐增高,1 h开始增加,3 h增加明显(P<0.01),6 h达高峰,12 h仍维持在较高水平(P<0.01),24 h下降与常氧无显著性差异(P>0.05)。激光共聚焦也显示随着缺氧时间的延长,荧光强度逐渐加强。培养液上清TNF-α含量的变化也符合相似的变化趋势。IRAK-4蛋白表达水平与培养液上清TNF-α含量的变化呈显著的正相关(r=0.863,P<0.05)。结论缺氧可以增加小鼠小胶质细胞内IRAK-4的蛋白表达,提示中枢神经系统内存在对免疫反应起着调控作用的TLR/IL-1R家族信号转导系统,调控下游炎症反应。 展开更多
关键词 缺氧 白细胞介素-1受体相关激酶-4 小胶质细胞 继发性脑损伤
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白细胞介素-1受体相关激酶1/4抑制剂对坏死性小肠结肠炎新生大鼠肠道的保护作用 被引量:4
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作者 尧杰 周伟 +3 位作者 杨丽 袁伟明 李雁彬 唐娟 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2017年第2期116-119,共4页
目的建立坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠模型,探讨白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)1/4抑制剂对NEC新生大鼠肠道的保护作用。方法36只新生SD大鼠分为正常对照组、NEC模型组和IRAK1/4抑制剂组,每组12只。正常对照组新生大鼠与母鼠... 目的建立坏死性小肠结肠炎(NEC)新生大鼠模型,探讨白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK)1/4抑制剂对NEC新生大鼠肠道的保护作用。方法36只新生SD大鼠分为正常对照组、NEC模型组和IRAK1/4抑制剂组,每组12只。正常对照组新生大鼠与母鼠同窝进行母乳喂养,不做任何干预;NEC模型组新生大鼠给予代鼠乳人工喂养,并进行缺氧及冷刺激;IRAK1/4抑制剂组新生大鼠给予IRAK1/4抑制剂干预,同时进行代鼠乳人工喂养+缺氧+冷刺激。3 d后处死大鼠取出肠道组织,苏木精-伊红染色后对回盲部肠道组织进行病理评分。酶联免疫吸附试验检测肠道组织中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果NEC模型组新生大鼠逐渐出现腹胀、腹泻(部分见黏液血便)、活动减少、反应差、嗜睡等表现,程度逐渐加重;IRAK1/4抑制剂组新生大鼠也逐渐出现腹胀、腹泻、活动减少、反应差等表现,但出现时间较晚,程度较轻。肠组织病理评分:正常对照组为(0.33±0.49)分,NEC模型组为(3.08±0.99)分,IRAK1/4抑制剂组为(1.75±0.96)分,NEC模型组及IRAK1/4抑制剂组均较正常对照组明显升高,差异均有统计学意义(均P〈0.01),IRAK1/4抑制剂组与NEC模型组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。各组大鼠肠道IL-1β、IL-6和TNF-α水平:正常对照组分别为(128.76±27.25) ng/L、(0.41±0.10) ng/L和(6.93±1.79) ng/L;NEC模型组分别为(410.99±44.16) ng/L、(1.79±0.18) ng/L和(44.39±6.00) ng/L;IRAK1/4抑制剂组分别为(256.23±41.29) ng/L、(1.05±0.19) ng/L和(21.45±6.36) ng/L。NEC模型组IL-1β、IL-6和TNF-α水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.01);IRAK1/4抑制剂组IL-1β、IL-6和TNF-α水平与正常对照组比较,差异均有统计学意义(均P〈0.01);IR 展开更多
关键词 坏死性小肠结肠炎 白细胞介素-1受体相关激酶1/4抑制剂 白细胞介素-6 白细胞介素-1Β 肿瘤坏死因子-Α
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白细胞介素-1受体相关激酶-4短发夹RNA阻断库普弗细胞激活效应的实验研究 被引量:4
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作者 刘作金 李生伟 +5 位作者 刘长安 游海波 彭勇 李旭宏 陈先锋 龚建平 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期819-822,共4页
目的探讨以白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)特异性短发夹RNA(shRNA)阻断内毒素诱导的库普弗细胞(KCs)激活效应的可行性。方法构建两对表达IRAK-4-shRNA的阳性载体质粒(pSⅡRAK-4-A,pSⅡRAK-4-B)及一对阴性载体质粒(pSⅡRAK-4-C)。... 目的探讨以白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)特异性短发夹RNA(shRNA)阻断内毒素诱导的库普弗细胞(KCs)激活效应的可行性。方法构建两对表达IRAK-4-shRNA的阳性载体质粒(pSⅡRAK-4-A,pSⅡRAK-4-B)及一对阴性载体质粒(pSⅡRAK-4-C)。分离培养小鼠KCs,分为正常对照组,RNA干扰(RNAi)对照组(转染pSⅡRAK一4 C)与RNAi抑制组(转染pSⅡRAK-4-A, pSⅡRAK-4-B)。质粒转染后24 h,加入0.1 μg/ml脂多糖(LPS)。6 h后,蛋白免疫印迹法及逆转录-聚合酶链反应测定IRAK-4蛋白和mRNA表达水平;酶联免疫吸附法检测0、1、3、6、12 h后KCs的核因子- κB(NF-κB)活性及培养上清液中肿瘤坏死因子α含量。结果RNAi抑制组IRAK-4表达水平,以及LPS刺激后NF-κB活性、肿瘤坏死因子α峰值均明显低于正常对照组和RNAi对照组,t值分别为22.50, 4.18及958.49,P<0.01;尤其是pSⅡRAK-4-A组,抑制效果明显优于pSⅡRAK-4-B,t值分别为12.60, 3.36及256.39,P<0.01。结论以IRAK-4为靶点的shRNA能有效的阻断内毒素诱导的KCs激活效应。 展开更多
关键词 库普弗细胞 内毒素类 白介素-1受体相关激酶-4 RNA干扰 白细胞介素-1受体 短发夹RNA 细胞激活 相关激酶 阻断 脂多糖(LPS)
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miR-485-5p通过靶向白介素-1受体关联激酶4调控巨噬细胞炎症反应
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作者 郑锡铭 徐雪勤 +3 位作者 张爱荣 杨喜永 赵小燕 陈仪 《中国卫生检验杂志》 CAS 2023年第22期2761-2765,共5页
目的探究miR-485-5p对白介素-1受体关联激酶4(IRAK-4)的靶向作用,研究其在巨噬细胞模型炎症反应中的调控作用。方法合成miR-485-5p模拟物(mimics)及其抑制剂(inhibitors),分别转染HEK-293T细胞,RT-PCR检测miR-485-5p的表达水平。根据mi... 目的探究miR-485-5p对白介素-1受体关联激酶4(IRAK-4)的靶向作用,研究其在巨噬细胞模型炎症反应中的调控作用。方法合成miR-485-5p模拟物(mimics)及其抑制剂(inhibitors),分别转染HEK-293T细胞,RT-PCR检测miR-485-5p的表达水平。根据miRNA靶向作用预测数据分析选定IRAK-4作为研究的靶基因,构建IRAK-43'UTR及其突变体萤火虫-海肾双荧光素酶报告基因系统,通过检测在细胞模型中过表达/抑制表达miR-485-5p后对荧光素酶活力的影响,验证miR-485-5p与IRAK-4之间的靶向关系,Westernblot检测IRAK-4蛋白质表达水平。构建巨噬细胞模型,将miR-485-5pmimics及inhibitors分别转染巨噬细胞,RT-PCR检测靶基因IRAK-4mRNA的表达水平,ELISA检测上清中下游致病因子IL-6、IL-17、IL-18的表达。结果通过实验证实miR-485-5p与IRAK-4存在靶向作用。细胞模型中,与对照组相比,转染miR-485-5pmimics后miR-485-5p表达水平升高了17.15倍(P<0.01),转染miR-485-5pinhibitors后miR-485-5p表达水平降低了79.80%(P<0.05)。过表达miR-485-5p后明显抑制IRAK-4的蛋白水平表达及mRNA相对含量,抑制下游炎性因子IL-6、IL-17、IL-18的表达(P<0.05);抑制表达miR-485-5p,则上调IRAK-4的蛋白水平及mRNA相对含量,可显著提高IL-6、IL-17、IL-18的释放(P<0.05)。结论证实miR-485-5p可以通过对靶向IRAK-4的特异性序列,调控下游炎性细胞因子的表达,进而调控细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 miR-485-5p 白介素-1受体关联激酶4 人单核细胞白血病细胞系
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库普弗细胞内毒素耐受时白细胞介素-1受体相关激酶-4的表达变化 被引量:3
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作者 李生伟 刘作金 +4 位作者 刘长安 李旭宏 游海波 陈先锋 龚建平 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期97-100,共4页
目的观察库普弗细胞(KCs)内毒素耐受形成后白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)表达的变化,探讨KCs内毒素耐受形成的相关机制。方法分离培养Balb/c小鼠KCs,分为非内毒素耐受组与内毒素耐受组[给予脂多糖(LPS)10ng/ml预处理24h]。用LPS... 目的观察库普弗细胞(KCs)内毒素耐受形成后白细胞介素-1受体相关激酶-4(IRAK-4)表达的变化,探讨KCs内毒素耐受形成的相关机制。方法分离培养Balb/c小鼠KCs,分为非内毒素耐受组与内毒素耐受组[给予脂多糖(LPS)10ng/ml预处理24h]。用LPS 100ng/ml刺激后,蛋白免疫印迹法及逆转录聚合酶链反应法测定两组细胞IRAK-4蛋白及mRNA的表达水平;酶联免疫吸附法检测两组细胞核因子-kB(NF-kB)活性及培养上清液肿瘤坏死因子α(TNFα)含量。结果 LPS刺激在两组细胞均引起IRAK-4 mRNA表达及NF-kB活性增强、TNFα释放增加,但内毒素耐受组3种指标的高峰值明显低于非内毒素耐受组(t值分别为12.4、17.4、138.9,P值均<0.01)。结论 LPS预处理可诱导KCs形成内毒素耐受状态,IRAK-4表达受到抑制可能是KCs内毒素耐受形成的机制之一。 展开更多
关键词 库普弗细胞 内毒素类 白细胞介素-1受体相关激酶-4
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Protective Effect of Diallyl Trisulfide on Liver in Rats with Sepsis and the Mechanism 被引量:1
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作者 陈华文 祝伟 +1 位作者 冯俊 李树生 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2012年第5期657-662,共6页
The protective effects of diallyl trisulfide on liver were examined in rats with sepsis. Sepsis was reproduced in rats by cecum ligation and puncture (CLP). Fifty-six male Wistar rats were randomly divided into sham-o... The protective effects of diallyl trisulfide on liver were examined in rats with sepsis. Sepsis was reproduced in rats by cecum ligation and puncture (CLP). Fifty-six male Wistar rats were randomly divided into sham-operated group (group S, n=8), sepsis model group (group C, n=24), diallyl trisulfide (DATS)-treated group (group D, n=24). Animals in groups C and D were further divided into three subgroups according to different observation time points, with 8 rats in each sub-group.Rats in group D and C were intravenously injected with normal saline or DATS respectively at a dose of 20 mg/kg after the establishment of sepsis model. Eight rats in groups C and D were sacrificed at 3, 6 and 24 h post-CLP and their livers were harvested for detection of interleukin (IL)-1 receptor associated kinase-4 (IRAK-4), nuclear factor-κB (NF-κB), c-fos, c-jun, malondialdehydethhe (MDA) and superoxide dismutase (SOD), tumor necrosis factor alpha (TNF-α) and for pathological examination. The results showed that the levels of serum IRAK-4, NF-κB and TNF-α in hepatic tissues were higher in group C than group S (control group) (P<0.05). After DATS treatment, the levels of IRAK-4 and NF-κB in the hepatic tissues and serum TNF-α in group D were lower than those in group C (P<0.05). The levels of c-fos and c-jun and MDA in the hepatic tissues were higher in group C than in group S (P<0.05). After DATS treatment, the levels of c-fos and c-jun and MDA in the hepatic tissues were significantly lower in group D than in group C (P<0.05). When compared with group S group, concentration of SOD in the hepatic tissues in group C was significantly lower (P<0.05). After DATS treatment, the concentration of SOD in the hepatic tissues was higher in group D than in group C (P<0.05). These findings suggested that treatment with DATS could ameliorate sepsis-induced liver injury in rats. The protective effect might be related to its ability to inhibit the signal pathway of IRAK-4 and NF-κB, thereby decreasing the production of oxygen free radic 展开更多
关键词 SEPSIS diallyl trisulfide liver injury interleukin-1 receptor associated kinase-4 nuclear factor-κB tumor necrosis factor alpha C-FOS C-JUN
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miR-146a-5p靶向IRAK-1调控DVT患者内皮祖细胞的增殖及炎症 被引量:2
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作者 杨柳 党永康 +3 位作者 乌兰 姜学超 仝向阳 彭战利 《重庆医学》 CAS 2021年第17期2906-2911,共6页
目的研究微RNA(miR)-146a-5p靶向白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)调控深静脉血栓(DVT)患者内皮祖细胞(EPCs)的增殖及炎症。方法选取2018年7月至2019年6月该院诊断为DVT的10例患者及10例体检的健康志愿者为研究对象,分离外周血EPCs,检... 目的研究微RNA(miR)-146a-5p靶向白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK-1)调控深静脉血栓(DVT)患者内皮祖细胞(EPCs)的增殖及炎症。方法选取2018年7月至2019年6月该院诊断为DVT的10例患者及10例体检的健康志愿者为研究对象,分离外周血EPCs,检测miR-146a-5p、IRAK-1的表达水平;DVT患者的EPCs分为miR-阴性对照(NC)组、miR-146a-5p组、miR-NC+NC质粒组、miR-146a-5p+NC质粒组、miR-146a-5p+IRAK-1质粒组,检测细胞增殖活力及吸光度(A490)值、miR-146a-5p、IRAK-1、核因子-κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平。结果DVT患者EPCs中miR-146-5p相对表达水平低于健康志愿者,IRAK-1相对表达水平高于健康志愿者(P<0.05);miR-146a-5p组A490值、miR-146a-5p相对表达水平高于miR-NC组,IRAK-1、NF-κB、TNF-α、IL-1β表达水平、野生型IRAK-1基因的荧光活力低于miR-NC组(P<0.05);miR-146a-5p+IRAK-1质粒组A490值低于miR-146a-5p+NC质粒组,IRAK-1、NF-κB、TNF-α、IL-1β水平高于miR-146a-5p+NC质粒组(P<0.05)。结论miR-146a-5p靶向IRAK-1促进DVT患者的EPCs增殖并抑制炎性反应。 展开更多
关键词 深静脉血栓 内皮祖细胞 miR-146a-5p 白细胞介素-1受体相关激酶1 增殖 炎性反应
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白介素-1受体相关激酶-2和磷脂酰肌醇3-激酶协同调控白介素-1诱导的NF-κB活化
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作者 郭甫坤 李亦蕾 吴曙光 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第2期113-116,共4页
目的研究白介素1受体相关激酶2(IRAK-2)和磷脂酰肌醇 3-激酶(PI 3-激酶)在白介素-1(IL-1)诱导核因子-κB(NF-κB)活化中的作用。方法 Lipofection介导反义IRAK-2寡核苷酸或反义P... 目的研究白介素1受体相关激酶2(IRAK-2)和磷脂酰肌醇 3-激酶(PI 3-激酶)在白介素-1(IL-1)诱导核因子-κB(NF-κB)活化中的作用。方法 Lipofection介导反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI3-激酶寡核苷酸转染HepG2细胞后;用逆转录 PCR法检测 IRAK-2 mRNA和PI3-激酶mRNA表达水平,以Sandwich ELISA法检测NF-κB的活化。结果(1)反义IRAK-2寡核苷酸和反义PI3-激酶寡核苷酸分别抑制IRAK-2 mRNA和PI-3激酶mRNA的表达:(2)反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI3-激酶寡核苷酸部分抑制NF-κB活化;(3)与反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI 3-激酶寡核苷酸单独转染HepG2细胞相比,反义IRAK-2寡核苷酸和反义PI 3-激酶寡核苷酸共转染HepG2细胞对NF-kB的抑制作用明显增强。结论在HepG2细胞中, IRAK-2和PI 3-激酶都调控 NF-κB活化但都不能完全激活 NF-κB,IRAK-2和 PI 3-激酶在调控 NF-κB活化时有协同作用。 展开更多
关键词 白细胞介素 NF-KappaкB IRAK-2 MRNA PI3-激酶
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伸筋草总生物碱改善大鼠类风湿性关节炎的机制研究 被引量:2
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作者 张妍妍 冯宇飞 肖洪彬 《西北药学杂志》 CAS 2021年第2期230-233,共4页
目的通过白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨伸筋草总生物碱治疗类风湿性关节炎(RA)的机制。方法注射弗氏佐剂建立RA模型。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳... 目的通过白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路探讨伸筋草总生物碱治疗类风湿性关节炎(RA)的机制。方法注射弗氏佐剂建立RA模型。将实验大鼠随机分为正常组、模型组、阳性对照组和伸筋草高、低剂量组,每组10只。给药21 d后,采用容积排水法测定各组大鼠右踝关节肿胀程度;Western Blot法测定大鼠踝关节滑膜组织IRAK1、TRAF6、NF-κB p65蛋白表达;Elisa法测定血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和γ干扰素(IFN-γ)的水平。结果与模型组比较,伸筋草高、低剂量组大鼠踝关节肿胀程度明显降低(P<0.05),滑膜组织IRAK1、TRAF6和NF-κB p65蛋白表达显著下调(P<0.05);伸筋草高剂量组大鼠血清中IL-1β和IFN-γ水平显著下降(P<0.05),伸筋草低剂量组IL-1β水平明显降低(P<0.05),IFN-γ水平可见下降趋势。结论伸筋草总生物碱可降低RA大鼠踝关节的肿胀,其作用机制与抑制IRAK1/TRAF6/NF-κB信号通路及其下游炎性因子的分泌密切相关。 展开更多
关键词 伸筋草 生物碱 类风湿性关节炎(RA) 白细胞介素-1受体相关激酶(IRAK1)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路
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缺氧大鼠神经元中IRAK-4的表达 被引量:1
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作者 李江涛 胡胜利 +5 位作者 胡军 杜鹏 冯华 杨云峰 魏林节 朱刚 《中华创伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期648-652,共5页
目的 探讨大鼠神经元缺氧后IL-1受体相关激酶-4(interleukin-1receptor-associated kinases-4,IRAK-4)的表达及其在调节炎症反应中的作用.方法 将培养的B35细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下分别培养1,3,6,12,24,48,72和96 h,用... 目的 探讨大鼠神经元缺氧后IL-1受体相关激酶-4(interleukin-1receptor-associated kinases-4,IRAK-4)的表达及其在调节炎症反应中的作用.方法 将培养的B35细胞置于低氧(3%O2,5%CO2,92%N2)条件下分别培养1,3,6,12,24,48,72和96 h,用RT-PCR及Western blot检测IBAK-4的mRNA及蛋白表达的变化,激光扫描共聚焦显微镜观察IRAK-4在细胞内的表达变化情况,酶联免疫吸附法检测培养液上清IL-6的含量.结果 B35细胞IRAK-4的mRNA和蛋白表达随缺氧时间延长而变化,1 h开始增加,6 h达到高峰(P〈0.05),12 h仍维持在较高水平(P〈0.05),自24 h下降至常氧水平(P〉0.05),48 h以后降低至常氧水平以下(P〈0.05).IRAK-4的免疫荧光结果显示,随着缺氧时间延长荧光强度逐渐增强.培养上清液中IL-6含量的变化与IRAK-4蛋白表达变化呈正相关(r=0.84,P〈0.05).结论 缺氧在一定时间内可以促使大鼠神经元IRAK-4在转录水平和翻译水平的表达增加,并可能参与调控下游炎症反应,使IL-6的表达增加. 展开更多
关键词 缺氧 白细胞介素-1 神经元 继发性脑损伤
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