引入基因修复技术的产品装配序列规划方法 被引量：4

1

作者 刘诚 付宜利 《哈尔滨工业大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期79-82,共4页

将基于遗传学原理的基因修复技术引入用于求解装配序列规划问题的遗传算法,该算法采用基因组描述装配过程中的零部件顺序信息,通过建立先序关系矩阵描述装配过程中零部件的装配优先关系及几何可行性约束.利用基因"修复"操作,... 将基于遗传学原理的基因修复技术引入用于求解装配序列规划问题的遗传算法,该算法采用基因组描述装配过程中的零部件顺序信息,通过建立先序关系矩阵描述装配过程中零部件的装配优先关系及几何可行性约束.利用基因"修复"操作,将子代个体中违反先序约束的基因"修复"为有效基因,从而保证了整个种群的基因多样性,避免了进化过早地收敛于局部最优解,使得最终结果的评价指标更优.某二级减速器的装配规划实例表明,该方法是一种具有工程实际意义的产品装配序列规划方法. 展开更多

关键词 基因修复 装配序列规划 遗传算法

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光感受器修复与再生研究的进展与挑战 被引量：1

2

作者 郭佃磊 汝佳丽 +1 位作者 徐淑娟 刘春巧 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2022年第7期1023-1040,共18页

视觉形成依赖于由光信号转化成电信号并沿视觉通路的级联传递.光子接收和信号转换是视觉形成的第一步,由视网膜一类特殊的神经细胞——光感受器(photoreceptor)完成.该类细胞的丢失将导致不可逆性视网膜退行变性并最终致盲,目前尚无有... 视觉形成依赖于由光信号转化成电信号并沿视觉通路的级联传递.光子接收和信号转换是视觉形成的第一步,由视网膜一类特殊的神经细胞——光感受器(photoreceptor)完成.该类细胞的丢失将导致不可逆性视网膜退行变性并最终致盲,目前尚无有效的治疗手段.基因治疗技术的发展有望助力部分遗传性视网膜变性疾病的治疗,以2017年美国FDA批准的首个用于治疗Leber氏先天黑蒙症(Leber congenital amaurosis,LCA)的基因药物LUXTURNA?为里程碑.然而该药物价格昂贵达85万美元/人,且治疗窗口狭窄,仅适用于早期RPE65基因突变导致的视网膜变性.近年来,干细胞、诱导多能干细胞分化及内源细胞转分化技术的发展为光感受器再生治疗提供了另一个有希望的途径.本文综述了当前视网膜退行性疾病的治疗策略,并重点讨论了光感受器基因和细胞治疗的研究进展与挑战. 展开更多

关键词 光感受器 基因修复 干细胞 诱导多能干细胞 再生 移植

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tk1基因敲除Vero细胞株的建立及其在单纯疱疹病毒tk基因修复中的应用

3

作者 卢锐涛 佘明敏 +1 位作者 雷志翔 陈晓湘 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期829-833,共5页

利用单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)标准株F细菌人工染色体(HSV-BAC)系统构建的HSV重组病毒由于存在tk基因缺陷,无法表达胸苷激酶,影响病毒潜伏/激活,故需对该基因进行修复。为此,本研究建立了tk1基因敲除的Vero... 利用单纯疱疹病毒I型(Herpes simplex virus type 1,HSV-1)标准株F细菌人工染色体(HSV-BAC)系统构建的HSV重组病毒由于存在tk基因缺陷,无法表达胸苷激酶,影响病毒潜伏/激活,故需对该基因进行修复。为此,本研究建立了tk1基因敲除的Vero细胞株(tk1-Vero),并利用该细胞株建立了次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸腺嘧啶脱氧核苷(Hypoxanthine-aminopurine-thymidine,HAT)选择性培养液筛选方法,对经同源重组方式完成tk基因修复的病毒进行筛选。首先,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除Vero细胞tk1基因,通过有限稀释法建立tk1-Vero细胞株,采用DNA测序和Western Blot对tk1-Vero细胞株进行鉴定;比较HSV(F)和tk-HSV(F)在tk1-Vero细胞和tk基因缺陷的人骨肉瘤143细胞中的增殖情况;在tk1-Vero细胞中,采用HAT选择性培养液筛选方法,对tk基因修复病毒进行筛选。结果显示,本研究成功建立了稳定的tk1-Vero细胞株;与143细胞相比,tk1-Vero细胞更适于病毒增殖及tk基因修复病毒的筛选;最后在tk1-Vero细胞中,利用HAT选择性培养液成功筛选出tk基因修复病毒。本研究表明,采用tk1-Vero细胞株建立的HAT选择性培养液筛选方法可以对tk基因修复病毒进行高效快速筛选。 展开更多

关键词 单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1) 胸苷激酶基因 VERO细胞 基因敲除 基因修复

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未分化型甲状腺癌治疗研究进展 被引量：1

4

作者 陈飞 杨云 俸瑞发 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第10期1784-1787,共4页

未分化型甲状腺癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)是恶性程度最高的甲状腺肿瘤类型,其起病隐匿、进展迅速、侵袭性强、预后极差,目前临床最常用的治疗方案为手术联合化疗,疗效不佳,针对此类型患者亟待探索新的治疗手段。随着医疗技... 未分化型甲状腺癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)是恶性程度最高的甲状腺肿瘤类型,其起病隐匿、进展迅速、侵袭性强、预后极差,目前临床最常用的治疗方案为手术联合化疗,疗效不佳,针对此类型患者亟待探索新的治疗手段。随着医疗技术发展、精准医疗概念的提出,关于ATC的分子机制研究逐步展开,靶向治疗、免疫治疗、基因修复、诱导分化等新的治疗措施逐步应用于临床,并初见疗效,为ATC患者的治疗开辟了新章程,本文就ATC的治疗进展进行系统的综述。 展开更多

关键词 未分化型甲状腺癌 免疫治疗 靶向治疗 基因治疗

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Chimeraplasty基因修复技术及其应用

5

作者 李中 曹明富 《杭州师范学院学报（自然科学版）》 CAS 2003年第2期57-59,66,共4页

基因治疗是目前生物学和医学领域里的一个研究热点 ,传统的基因替代方法有许多很难克服的缺点 ,与之相比 ,基因修复策略有着明显的优点 .在此 ,文章介绍了近年来发展起来的具有较好应用价值和医学前景的一种基因修复新技术——

关键词 基因治疗 基因修复 Chimeraplasty技术 RNA/DNA嵌合分子

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基因修复技术及其在机器人路径规划中的应用

6

作者 乔永兴 曹子建 《计算机测量与控制》 CSCD 2005年第11期1266-1267,1270,共3页

通过研究遗传算法，发现可以利用搜索其整个种群中的基因块来修复最好个体的基因缺陷；基因修复作为一种复制算子，它概括了经典交叉(如n点交叉或均匀交叉)和基因扫描，并且适用于任意(两个或更多)个父代，在机器人导航的路径规划中应... 通过研究遗传算法，发现可以利用搜索其整个种群中的基因块来修复最好个体的基因缺陷；基因修复作为一种复制算子，它概括了经典交叉(如n点交叉或均匀交叉)和基因扫描，并且适用于任意(两个或更多)个父代，在机器人导航的路径规划中应用了此种算子，并且得到良好的结果。 展开更多

关键词 基因修复 基因扫描 路径规划 遗传算法

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玉米细胞抽提物在寡核苷酸指导的基因修复中的作用

7

作者 唐忠辉 郑用琏 张方东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1531-1536,共6页

寡核苷酸指导的基因修复是近几年发展起来的改造生物体遗传物质的技术。为了深入研究玉米细胞抽提物在寡核苷酸指导基因修复的体外系统中的作用,本研究分别将玉米细胞抽提物介导修复的质粒分子和无细胞抽提物条件下通过变性复性方法形... 寡核苷酸指导的基因修复是近几年发展起来的改造生物体遗传物质的技术。为了深入研究玉米细胞抽提物在寡核苷酸指导基因修复的体外系统中的作用,本研究分别将玉米细胞抽提物介导修复的质粒分子和无细胞抽提物条件下通过变性复性方法形成的寡核苷酸、靶质粒的结合态分子,转入3种不同基因型的大肠杆菌菌株,研究基因修复的频率,探讨基因修复的机制。结果表明,玉米细胞抽提物可能仅促进了靶质粒分子和寡核苷酸分子的配对,其后的DNA修复过程由大肠杆菌的修复系统完成。 展开更多

关键词 寡核苷酸 基因修复 细胞抽提物

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用于选择性优产雄烯二酮的工业小金色分枝杆菌的基因改造

8

作者 余舒琪 瞿旭东 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期51-56,共6页

工业上用于生产4-雄烯-4-醇-3,17-二酮(4-雄烯二酮,4-AD)的小金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)在降解植物甾醇侧链的过程中同时产生部分1,4-雄烯-4-醇-3,17-二酮(1,4-雄烯二酮,ADD),而3-甾酮-Δ1-脱氢酶KstD催化了4-AD到ADD的转化... 工业上用于生产4-雄烯-4-醇-3,17-二酮(4-雄烯二酮,4-AD)的小金色分枝杆菌(Mycobacterium neoaurum)在降解植物甾醇侧链的过程中同时产生部分1,4-雄烯-4-醇-3,17-二酮(1,4-雄烯二酮,ADD),而3-甾酮-Δ1-脱氢酶KstD催化了4-AD到ADD的转化.克隆该工业菌株的kstD基因测序后发现,其与报道的标准分枝杆菌基因组中的kstD基因相比有3个氨基酸的突变(A6E,S138L,A193V).这些突变使得KstD的酶活受到影响,一定程度上阻碍4-AD向ADD的转变.为了实现从植物甾醇降解中选择性地得到4-AD或ADD,通过敲除kstD基因,阻断4-AD到ADD的转化,获得一株只产4-AD的突变菌株,代谢产物中4-AD达79.3%.通过修复kstD酶的氨基酸位点,使之恢复到文献报道的正常序列,并在敲除kstD基因菌株中,将修复后的kstD基因安置在强启动子pG13下,重新导回到突变菌株中进行回补强化表达,获得一株可以大量产生ADD的菌株.野生型分枝杆菌转化植物甾醇产生的产物中,ADD仅占27.0%,经回补强化表达后的基因工程菌株转化植物甾醇产生的产物中ADD占63.0%.结果表明,通过敲除或者在突变体菌株中过表达正常的kstD基因可以使该工业菌株选择性地优产4-AD或ADD. 展开更多

关键词 甾醇降解 1 4-雄烯二酮 4-雄烯二酮 3-甾酮-Δ1-脱氢酶 基因修复

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单链退火修复及其在疾病治疗和基因编辑中的作用

9

作者 黄溥婉 李莉萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1033-1040,共8页

DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)对细胞生存是致命的。细胞内经典非同源末端连接(classical non-homologous end joining,C-NHEJ)和选择性非同源末端连接(alternative non-homologous end joining,A-NHEJ)、重组修复(homology-d... DNA双链断裂(double strand breaks,DSBs)对细胞生存是致命的。细胞内经典非同源末端连接(classical non-homologous end joining,C-NHEJ)和选择性非同源末端连接(alternative non-homologous end joining,A-NHEJ)、重组修复(homology-directed repair,HDR)、单链退火修复(single-strand annealing,SSA)等通路可竞争性修复DNA双链断裂损伤。其中,SSA途径不使用同源染色体或姐妹染色单体,仅依赖于重复序列彼此退火配对,并涉及遗传信息的丢失,是容易出错的修复过程,具有诱变性。相比其他修复途径,在细胞周期S和G_2期中,末端切除暴露出更长的同源重复序列(>20 bp),有利于细胞选择SSA途径进行修复。在一些SSA活性升高的同源重组(homologous recombination,HR)缺陷癌症中,癌症细胞可利用SSA途径获得耐药性,也预示着疾病风险的提高。因此,靶向SSA途径的抑制剂具有抑制癌症进展,以及逆转肿瘤细胞对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)抑制剂耐药的作用,是一种新型的治疗策略,可能成为特定同源重组缺陷癌症风险评估的有力工具。检测SSA活性将有助于更好区分癌症的发生和进展。同时随着基因编辑技术的发展,基于SSA途径的荧光报告基因方法,用于检测规律成簇的间隔短回文重复序列(clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR-Cas9)系统中引导RNA(gRNA)的特异性和裂解活性被证明是有效、可靠的策略,同时结合CRISPR-Cas9靶向和SSA诱导的DNA编辑,可以特定模式表达多个gRNA并实现多种细胞类型特异性操作和组合遗传靶向。尽管对SSA途径的研究与基于SSA途径的技术应用已取得不错的进展,但仍有许多问题有待阐明。 展开更多

关键词 DNA双链断裂 单链退火 基因修复

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基因修复β-地中海贫血患者诱导多能干细胞可否成为治疗的希望? 被引量：11

10

作者 李玲丽 张风波 +1 位作者 李崎 马燕琳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1463-1469,共7页

背景:对于重型β-地中海贫血,目前惟一的根治方法就是造血干细胞移植,但由于合适供者来源受限及费用昂贵,大部分患者难以得到救治。体细胞重编程技术如今已日臻成熟,在患者诱导多能干细胞中进行基因修复成为了β-地中海贫血治疗的希望... 背景:对于重型β-地中海贫血,目前惟一的根治方法就是造血干细胞移植,但由于合适供者来源受限及费用昂贵,大部分患者难以得到救治。体细胞重编程技术如今已日臻成熟,在患者诱导多能干细胞中进行基因修复成为了β-地中海贫血治疗的希望。目的:通过论述ZFNs、TALENs、CRISPR/Cas 3种基因编辑技术体现CRISPR/Cas的优势,以及论述基因编辑技术在动物模型疾病治疗中的初步实验结果,从而展望基因编辑技术对β-地中海贫血进行基因治疗并且应用于临床的可能性。方法:以"beta thalassemia,genetic therapy,genome editing,homologous recombination,iPSCs"为英文检索词,以"β-地中海贫血,诱导多能干细胞"为中文检索词,由第一作者检索1989至2015年Pub Med数据库、中国期刊全文数据库,查阅近年β-地中海贫血的发生率和分布情况以及β-地中海贫血基因治疗的相关文献,最终保留67篇文献。结果与结论:随着基因编辑技术的发展,出现了3种定向基因编辑技术,包括ZFNs、TALENs、CRISPR/Cas技术。以地中海贫血患者来源的诱导多能干细胞为靶细胞,通过ZFNs、TALENs及CRISPR/Cas9技术对疾病基因进行纠正,完成对致病基因的治疗。CRISPR/Cas系统相对于其他基因编辑技术更加简单快捷、安全高效,应用也更加广泛,利用CRISPR/Cas9系统修复β-地中海贫血患者诱导多能干细胞、生殖细胞、受精卵、胚胎中β珠蛋白基因,将为今后临床的应用奠定基础。 展开更多

关键词 Β地中海贫血 诱导多功能干细胞 靶基因修复 组织工程 干细胞 移植 基因治疗 Β-地中海贫血 CRISPR/Cas9 诱导多能干细胞

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微小RNA-29a在肺结核患者血清中的表达及其生物学功能预测分析 被引量：8

11

作者 付玉荣 伊正君 +1 位作者 李建花 高昆山 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期186-190,共5页

目的分析微小RNA-29a（miR-29a）在肺结核患者血清中的表达，并对miR-29a的靶基因进行功能预测分析，为深入研究miR-29a与结核病感染调控机制的关系及其生物学功能奠定基础。方法病例组为未经治疗的活动性肺结核患者65例，对照组为健康... 目的分析微小RNA-29a（miR-29a）在肺结核患者血清中的表达，并对miR-29a的靶基因进行功能预测分析，为深入研究miR-29a与结核病感染调控机制的关系及其生物学功能奠定基础。方法病例组为未经治疗的活动性肺结核患者65例，对照组为健康志愿者45例，清晨空腹抽取静脉血，分离血清。用TRIzol试剂获取血清中总RNA，对RNA样本进一步纯化，通过紫外分光光度计和凝胶电泳检测RNA提取质量。用核酸杂交和荧光定量PCR检测miR-29a在血清中的表达。运用TargetScan与PicTar软件综合预测miR-29a的靶基因，取两者的交集作为靶基因。采用DAVID数据库对miR-29a预测的靶基因集合进行基因本体论（GO）注释描述分类，并分别提取GO的3类注释信息。采用网络调控分析软件Cytoscape中的插件BINGO进行GO注释的显著性分析。对靶基因集合进行生物通路富集分析。结果核酸杂交结果表明，病例组血清中miR-29a表达（854±93）显著高于对照组（80±22），差异有统计学意义（t=3．541，P〈0．05）。荧光定量PCR结果表明，病例组血清中miR-29a表达（1．35±0．62）显著高于对照组（0．18±0．07），差异有统计学意义（t=2．987，P〈0．05）。预测miR-29a的靶基因集合分别富集在转录调控等生物学过程、金属离子结合活性等分子功能及细胞外基质等细胞组分；miR-29a的靶基因集合显著富集于KEGG通路数据库中的黏附、细胞外基质受体相互作用等7个信号转导通路和Biocarta通路数据库中的整联蛋白信号通路、钙黏蛋白信号通路和Wnt信号通路等信号通路中。结论活动性肺结核患者血清中miR-29a表达显著上调，miR-29a的靶基因参与细胞黏附、转录调控等生物学过程。 展开更多

关键词 结核 肺 微RNAS 靶基因修复 计算生物学

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低温缺血再灌注心律失常大鼠心肌miRNA表达的变化及靶基因预测 被引量：5

12

作者 唐剑 刘艳秋 +4 位作者 高鸿 冯玉蓉 王贵龙 何幼芹 宋静 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期885-888,共4页

目的明确低温缺血再灌注心律失常大鼠心肌miRNA表达的变化及其靶基因。方法清洁级健康雄性SD大鼠,2~3月龄,体重300~400 g,麻醉后开胸取心脏,建立离体心脏灌注模型。成功建立离体心脏灌注模型6个,采用随机数字表法分为2组(n=3):对照组(C... 目的明确低温缺血再灌注心律失常大鼠心肌miRNA表达的变化及其靶基因。方法清洁级健康雄性SD大鼠,2~3月龄,体重300~400 g,麻醉后开胸取心脏,建立离体心脏灌注模型。成功建立离体心脏灌注模型6个,采用随机数字表法分为2组(n=3):对照组(C组)和心脏缺血再灌注组(IR组)。采用全心停灌60 min再灌注30 min的方法制备低温心脏缺血再灌注损伤模型。记录再灌注期间心律失常评分。通过高通量测序筛选出2组心肌表达有显著性差异的miRNA(DEmiRNAs)。利用RNAhybrid和miRanda数据库对DEmiRNAs调节的mRNA行靶基因预测,通过Gene Ontology和KEGG数据库对靶基因进行富集分析,选取与心律失常密切相关且表达水平较高的miRNA进行RT-PCR检测。结果高通量测序结果:与C组比较,IR组有7个miRNA表达有显著性差异(novel-miR-17、novel-miR-19、novel-miR-30、novel-miR-43、rno-miR-122-5p、novel-miR-16和rno-miR-429)。与心律失常关系密切且表达水平较高的miRNA有4个:与C组比较,IR组心肌novel-miR-17、novel-miR-30和rno-miR-122-5p表达上调,rno-miR-429表达下调(P<0.05)。通过miRNA-mRNA相关性分析结果:GJA1基因是novel-miR-17的靶点。结论心肌novel-miR-17可能作用于GJA1基因参与大鼠低温缺血再灌注心律失常的发生。 展开更多

关键词 微小RNAS 靶基因修复 心律失常 心性 再灌注损伤 低温

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广西人群DNA修复途径部分基因多态性与肝癌临床病理特征的关联研究 被引量：3

13

作者 潘冬香 仇小强 +2 位作者 刘顺 谭超 黄慧 《中华疾病控制杂志》 CAS 北大核心 2013年第3期200-203,共4页

目的探讨广西地区人群DNA修复途径基因XRCC1、APE1、hOGG1、XPC、XPD、XPG、XRCC3多态性与肝癌临床病理特征的关系。方法收集2007年2月～2008年10月在广西医科大学第一附属医院就诊和治疗的共257例广西肝癌新发病例临床病理资料、血液D... 目的探讨广西地区人群DNA修复途径基因XRCC1、APE1、hOGG1、XPC、XPD、XPG、XRCC3多态性与肝癌临床病理特征的关系。方法收集2007年2月～2008年10月在广西医科大学第一附属医院就诊和治疗的共257例广西肝癌新发病例临床病理资料、血液DNA,应用荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescent quantita-tive polymerase chain reaction,RT-PCR)技术对XPC499、XPC939、XPD312、XPG1104、XRCC1-194、XRCC1-280、XRCC1-399、APE1-148、hOGG1-326、XRCC3-241 10个位点进行基因分型。基因多态性与临床病理特征的关系采用2检验和非条件Logistic回归模型进行分析。结果 XRCC1-399多态与肝癌门静脉癌栓相关(P=0.036),hOOG1-326多态与包膜侵犯相关(P=0.036),XPC499多态与大体分型相关(P=0.047)。分层分析显示,在发病年龄<47岁组,XPD312基因多态与肿瘤个数有关(P=0.025)。在发病年龄≥47岁组,XPD312多态与肿瘤直径大小相关(P=0.009),XRCC1-280多态与门静脉癌栓(P=0.024)、病理分期(P=0.050)相关;不同修复途径基因多态联合作用基因型分布频率与肝癌子灶差异有统计学意义(P=0.037)。APE1-148、XPC939、XPG1104、XRCC3-241位点多态性与原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)临床病理特征差异均无统计学意义(均有P>0.05)。结论 XRCC1-280、XRCC1-399、hOGG1-326和XPC499、XPD312基因多态性可能与肝癌相关生物学行为相关。 展开更多

关键词 肝肿瘤 靶基因修复 广西

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miR-141-3p表达对人异位子宫内膜细胞增殖与凋亡影响及其机制 被引量：2

14

作者 刘文博 封全灵 《青岛大学学报（医学版）》 CAS 2020年第3期342-346,共5页

目的探讨微小RNA-141-3p(miR-141-3p)对人异位子宫内膜细胞(HEEC)增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测异位子宫内膜组织及正常子宫内膜组织中miR-141-3p的表达。体外原代培养HEEC,miR-141-3p mim... 目的探讨微小RNA-141-3p(miR-141-3p)对人异位子宫内膜细胞(HEEC)增殖和凋亡的影响及其机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测异位子宫内膜组织及正常子宫内膜组织中miR-141-3p的表达。体外原代培养HEEC,miR-141-3p mimics转染至HEEC后,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率。采用双荧光素酶报告实验验证miR-141-3p与高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的靶向调控作用。结果异位子宫内膜组织中miR-141-3p的表达水平明显低于正常子宫内膜组织(t=56.880,P<0.001);miR-141-3p过表达能显著降低HEEC增殖活力(t=10.972,P<0.001),升高细胞凋亡率(t=18.233,P<0.001);miR-141-3p可靶向结合HMGB1。结论miR-141-3p过表达可通过靶向调控HMGB1而抑制HEEC增殖,诱导其凋亡。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 微RNAS 靶基因修复 高迁移率族蛋白质类 细胞增殖 细胞凋亡

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反义寡核苷酸药物在精准治疗中的应用进展及其作用机制 被引量：2

15

作者 周海燕 《精准医学杂志》 2020年第4期283-286,291,共5页

反义寡核苷酸是一类新的基因靶向药物。随着基因组学与新一代基因测序技术的发展,以及各种新的核苷酸合成技术的出现,反义寡核苷酸药物在转化医学与精准医学中的应用取得了飞速的发展。该类药物为很多过去无法治疗的疾病提供了全新的治... 反义寡核苷酸是一类新的基因靶向药物。随着基因组学与新一代基因测序技术的发展,以及各种新的核苷酸合成技术的出现,反义寡核苷酸药物在转化医学与精准医学中的应用取得了飞速的发展。该类药物为很多过去无法治疗的疾病提供了全新的治疗策略。本文以目前上市的几种代表性药物为例,集中阐释反义寡核苷酸药物在相关疾病治疗中的主要应用进展及作用机制,同时对该类药物开发中亟待解决的问题进行了分析。 展开更多

关键词 寡核苷酸类 反义 遗传性疾病 先天性 基因治疗 靶基因修复 分子靶向治疗 精准医学

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分泌型卷曲相关蛋白家族在肿瘤中的研究进展 被引量：1

16

作者 孥力宏 白仲添 +1 位作者 胡进静 周文策 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2016年第6期448-451,共4页

分泌型卷曲相关蛋白（SFRP）可通过卷曲蛋白抑制Wnt信号通路的表达,SFRP基因启动子甲基化沉默与多种肿瘤的发生和转移相关,如结肠癌、胃癌、肝癌、肺癌、卵巢癌等.多项研究发现SFRP具有潜在的临床价值,有望成为癌症基因诊断与治疗的新靶点.

关键词 信号传导 靶基因修复 肿瘤 分泌型卷曲相关蛋白

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miRNA-142-5p在特应性皮炎中的表达及其靶基因预测 被引量：1

17

作者 肖能鑫 史丙俊 +3 位作者 刁庆春 王修勇 蒋有让 闫国富 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第15期1701-1702,1705,共3页

目的检测特应性皮炎(AD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miRNA-142-5p的表达情况,并对其进行潜在靶基因预测。方法选择2011年10月至2012年2月该院门诊皮肤科AD患者8例为观察组,与观察组年龄和性别相匹配的健康体检者6例为对照组。提取分... 目的检测特应性皮炎(AD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中miRNA-142-5p的表达情况,并对其进行潜在靶基因预测。方法选择2011年10月至2012年2月该院门诊皮肤科AD患者8例为观察组,与观察组年龄和性别相匹配的健康体检者6例为对照组。提取分离所有受试者PBMC中的miRNA,采用实时荧光定量PCR法,检测miRNA-142-5p的表达水平,运用miRanda、PicTar和TergetScan等靶基因预测分析软件等生物信息学方法,筛选其潜在靶基因。结果与对照组比较,miRNA-142-5p在观察组患者PBMC中的表达水平上调(P<0.05),预测到交集靶基因有39个,涉及到信号转导、细胞凋亡、细胞分化等。结论 miRNA-142-5p在AD患者PBMC中高表达,可能通过调控其下游靶基因在AD发病中起着重要作用。 展开更多

关键词 微RNAS 皮炎 特应性 聚合酶链反应 靶基因修复 预测

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携IgG单抗靶向超声造影剂的构建及其靶向效能的体外评价 被引量：1

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作者 李军华 吴爵非 +5 位作者 杨莉 刘俭 郑道文 纪丽景 燕翼 宾建平 《中华超声影像学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第9期813-816,共4页

目的构建携羊抗小鼠IgG单抗靶向超声造影剂（UCA-IgG）及体外评价其靶向黏附效能。方法采用“亲和素一生物素”桥接法构建UCAIgG，体外荧光法鉴定IgG单抗与生物素化造影剂特异结合。利用平行板流动腔在不同时间点、不同浓度小鼠IgG包被... 目的构建携羊抗小鼠IgG单抗靶向超声造影剂（UCA-IgG）及体外评价其靶向黏附效能。方法采用“亲和素一生物素”桥接法构建UCAIgG，体外荧光法鉴定IgG单抗与生物素化造影剂特异结合。利用平行板流动腔在不同时间点、不同浓度小鼠IgG包被和不同剪切应力下，测定相应的UCA-IgG的结合数目及达到半数解离时的剪切应力。设不同浓度小鼠包被的平行板流动腔为实验组，羊抗小鼠IgG封闭组和空白组为对照组。结果UCAIgG发出明亮的绿色荧光，而普通脂质造影剂无荧光显示。实验组UCA-IgG结合数量随包被浓度的增高而增加（P〈0．05），并与结合时间呈明显正相关（P〈0．05），然而与剪切应力呈现双向性（P〈0．05）。而两对照组均未见明显的UCAIgG结合。UCA-IgG达半数解离的剪切应力随包被浓度的增加而增大（P〈0．05）。结论在不同血流动力学条件下UCA-IgG可与小鼠IgG特异有效结合，携羊抗小鼠IgG单抗造影剂可为其他特异靶向超声造影剂的体外研究提供有力的支持。 展开更多

关键词 超声检查 微气泡 靶基因修复 免疫球蛋白G

原文传递

CORRECT介导的人HBB-28基因定点突变细胞株的建立及其应用

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作者 刘永祥 麦庆云 +5 位作者 黎允诗 梅珺琰 梁爱军 彭新良 周瑞鸿 周少虎 《广西科学》 CAS 北大核心 2022年第6期1125-1133,共9页

为利用CRISPR/Cas9系统建立一种新型、高效的定点突变和基因修复的新方法——引入阻断突变碱基的CORRECT(Consecutive re-Guide or re-Cas steps to Erase CRISPR/Cas blocked Targets)方法,本研究使用规律间隔成簇短回文重复序列(Clust... 为利用CRISPR/Cas9系统建立一种新型、高效的定点突变和基因修复的新方法——引入阻断突变碱基的CORRECT(Consecutive re-Guide or re-Cas steps to Erase CRISPR/Cas blocked Targets)方法,本研究使用规律间隔成簇短回文重复序列(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats, CRISPR)在线设计工具,针对人β-珠蛋白(HBB)基因设计小向导RNA (small guide RNA,sgRNA),构建PX459-sgRNA-Cas9共表达质粒,然后以含阻断突变碱基(G>T)的单链寡核苷酸(single-stranded Oligo DNA Nucleotides, ssODNs)为同源模板,通过脂质体转染HEK293T细胞,并通过Sanger测序和酶切(T7EⅠ和AatⅡ)检测编辑效率,最后通过Sanger测序分析敲除HBB单克隆细胞的基因型。结果表明,成功构建β-地中海贫血(简称β-地贫)HBB-28(A>G)基因纯合定点突变的HEK293T细胞株。阻断突变碱基优化的ssODNs减少Cas9蛋白对靶点的再次编辑,提高了整合效率。本研究建立的新型点突变技术可以高效获得纯合定点突变的HEK293T细胞株,既为单碱基突变疾病模型的建立提供实验依据,又为基因修复治疗提供高效的方法。 展开更多

关键词 Β-地中海贫血 HBB 阻断突变 定点突变 基因修复治疗

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乙型肝炎病毒基因突变后的修复及其肝细胞损伤变化 被引量：1

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作者 陈然峰 陈国军 +3 位作者 陈启荣 黄志勇 金晓东 杨勇 《武警医学》 CAS 2008年第6期519-521,共3页

目的观察有YMDD基因突变的乙型肝炎病毒携带者停用拉米夫定后YMDD突变的修复及其肝细胞损伤变化。方法分别采用速率法、放免法和流式细胞术监测38例乙型肝炎病毒携带者血清肝功能酶学指标(ALT、AST和CHE)、肝纤维化指标(HA、LN、PⅢ、Ⅳ... 目的观察有YMDD基因突变的乙型肝炎病毒携带者停用拉米夫定后YMDD突变的修复及其肝细胞损伤变化。方法分别采用速率法、放免法和流式细胞术监测38例乙型肝炎病毒携带者血清肝功能酶学指标(ALT、AST和CHE)、肝纤维化指标(HA、LN、PⅢ、Ⅳ.C)和细胞免疫活性指标(CD4/CD8),应用阵列技术(UniArray)和核酸杂交技术监测血清乙型肝炎病毒YMDD突变基因。结果停药1～2年后有6例(15.8%)YMDD变异得到修复;变异前、变异后与修复后肝功酶学指标、肝纤维化指标和细胞免疫活性指标分别对应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。YMDD变异时ALT活性与变异前和修复后比较有显著性差异(P<0.01)。结论停药后体内肝细胞内环境得到恢复,15.8%YMDD突变的乙型肝炎病毒携带者变异株被野生株替代,或乙型肝炎病毒DNA修复酶不断地对DNA进行扫描并替换或纠正变异核苷酸;YMDD变异可导致肝细胞早期轻微损伤。 展开更多

关键词 乙型肝炎病毒 基因突变 基因修复 肝细胞损伤

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