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夹心ELISA检测新冠病毒及其抗原方法的建立和验证
1
作者 周立娟 井申荣 +3 位作者 苑荣亮 简建升 陈伟 邵聪文 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期870-876,共7页
研究制备了快速检测新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)及其表面刺突糖蛋白受体结合域(receptor-binding domain,RBD)的ELISA试剂盒.该试剂盒由一对RBD单克隆抗体作为捕获抗体与检测抗体,其中检测... 研究制备了快速检测新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)及其表面刺突糖蛋白受体结合域(receptor-binding domain,RBD)的ELISA试剂盒.该试剂盒由一对RBD单克隆抗体作为捕获抗体与检测抗体,其中检测抗体进行辣根过氧化物酶(HRP)偶联,通过方阵滴定法确定双抗夹心ELISA的最适工作条件.另外,对检测试剂盒进行线性、特异性、准确度、精密度等进行了验证.结果表明,双抗夹心ELISA方法中捕获抗体和酶标检测抗体的效价分别为1∶160000和1∶320000,试剂盒的定量检测下限为31 ng/mL.经验证,组装的试剂盒精密度为0.71%~1.59%,平均准确度为96.53%,与其他的同种属灭活病毒无交叉反应.试剂盒各项参数均符合《中国药典》(三部)2020版标准,表明该试剂盒适用于新冠病毒以及RBD抗原的快速检测. 展开更多
关键词 抗体效价 双抗夹心法 新型冠状病毒 捕获抗体 检测抗体
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甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法的建立
2
作者 权娅茹 崔晓雨 +5 位作者 邵铭 刘书珍 易敏 李长贵 王军志 袁力勇 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1556-1561,共6页
目的：建立一种双抗体夹心ELISA检测方法,以检测流感疫苗中甲型流感病毒的核蛋白（NP）含量。方法：体外重组表达NP作为ELISA法测定蛋白含量参考品,筛选捕获抗体和检测抗体工作浓度、起始浓度和系列稀释倍数,建立ELISA法并对其进行优化... 目的：建立一种双抗体夹心ELISA检测方法,以检测流感疫苗中甲型流感病毒的核蛋白（NP）含量。方法：体外重组表达NP作为ELISA法测定蛋白含量参考品,筛选捕获抗体和检测抗体工作浓度、起始浓度和系列稀释倍数,建立ELISA法并对其进行优化和验证。结果：获得的重组NP纯度为99.0%以上。建立和优化后的ELISA参数：捕获抗体4μg·m L^-1,检测抗体1∶1 000。NP含量参考品起始浓度为300~600 ng·m L^-1,四参数拟合S型曲线的决定系数R^2大于0.95,对疫苗中的甲型流感病毒NP具有特异性,原液和成品的加标回收率为88.2%~95.3%,方法重复性（n=5）的RSD小于15%。结论：建立的流感疫苗中甲型流感病毒NP含量ELISA检测方法特异性好,准确性和精密性高,可用于疫苗样品中甲型流感病毒NP含量的检测。 展开更多
关键词 甲型流感病毒 核蛋白(NP) 重组NP 酶联免疫吸附测定(ELISA) 捕获抗体 检测抗体
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利用特异性抗体建立金黄色葡萄球菌肠毒素B快速检测方法
3
作者 周刘忠 胡乃静 +4 位作者 张丁木 王志宏 吴佳果 罗龙龙 石艳春 《生物技术通讯》 CAS 2020年第6期720-726,共7页
目的:利用特异性靶向金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的抗体建立2种体外快速检测SEB的方法。方法:通过间接ELISA法及生物膜干涉技术测定3株抗体(LXY8、LXY9和LXY10)与SEB的结合活性;通过竞争ELISA法鉴定3株抗体的表位交叉情况;利用配对抗体... 目的:利用特异性靶向金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的抗体建立2种体外快速检测SEB的方法。方法:通过间接ELISA法及生物膜干涉技术测定3株抗体(LXY8、LXY9和LXY10)与SEB的结合活性;通过竞争ELISA法鉴定3株抗体的表位交叉情况;利用配对抗体建立双夹心ELISA检测法和胶体金试纸条层析技术检测SEB。结果:3株抗体与SEB均具有较高的亲和力(LXY8:KD=5.25×10^-10 mol/L;LXY9:KD=5.18×10^-9 mol/L;LXY10:KD=8.93×10^-10 mol/L);经间接ELISA法获得生物素标记的抗体与SEB结合的最低饱和浓度为0.25μg/mL,以该浓度作为抗原表位竞争的浓度,竞争ELISA结果表明3株抗体与SEB结合的表位不交叉;根据双夹心配伍实验的结果,获得LXY8与LXY10的最佳配对,SEB的最低检测限为240 pg/mL,而基于LXY8与LXY10配对的胶体金检测试纸条能够在5~10 min内完成样品的检测,且检测灵敏度约为2 ng/mL。结论:基于双夹心酶联免疫吸附技术建立了一种特异、灵敏的体外检测SEB的方法,利用胶体金层析技术开发了SEB快速检测的胶体金检测试纸条,能够实现SEB现场快速高效检测。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌肠毒素B 检测抗体 双夹心酶联免疫吸附检测法 胶体金层析检测法
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手足口病肠道病毒核酸与血清学检测的临床诊断价值分析 被引量：8
4
作者 吴双双 陈东 +2 位作者 周俊 赵仕勇 吴亦栋 《浙江临床医学》 2018年第5期842-843,共2页
目的 分析手足口病患者手足口病肠道病毒核酸与血清学检测的诊断价值.方法 2016年6月至2017年5月手足口肠道病毒感染患者1127例,用PCR法进行手足口肠道病毒核酸检测：肠道通用型、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A16型（CA16）;用ELIS... 目的 分析手足口病患者手足口病肠道病毒核酸与血清学检测的诊断价值.方法 2016年6月至2017年5月手足口肠道病毒感染患者1127例,用PCR法进行手足口肠道病毒核酸检测：肠道通用型、肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A16型（CA16）;用ELISA法检测EV71型和CA16型IgM抗体,分析两者的相关性.结果 1127份标本中两种方法学检测出阳性标本976份,其中EV71核酸和抗体联合检测总阳性率为35.7％,CA16核酸和抗体联合检测总阳性率13.2％.1127份标本通过单病毒核酸检测出EV71型阳性标本22.4％,而通过血清学检测出EV71型28.3％,抗体检测敏感性高于核酸检测（P=0.000）.结论 对于EV71型核酸和血清学比较,发现一致性较好,EV71型血清学检测的敏感性高于核酸的检测.而对于CA16型核酸和抗体检测一致性较差,核酸检测还可以检出非EV71非CA16型其他肠道病毒型. 展开更多
关键词 手足口病 核酸检测 抗体检测 儿童
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不同荧光标记检测抗体组合及不同抗凝剂对流式测定食蟹猴T淋巴细胞亚群的影响 被引量：4
5
作者 姜华 刘丽 +8 位作者 李路路 苗玉发 文海若 孙立 王欣 张颖丽 李伟 霍艳 耿兴超 《中国医药生物技术》 2021年第5期391-399,共9页
目的比较不同荧光标记检测抗体组合与不同抗凝剂对检测食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群的影响,为相关检测提供方法参考。方法取肝素钠抗凝猴血50μl分别与两组荧光检测抗体PerCP-CD3/FITC-CD8/PE-CD4(检测抗体组合1)和PerCP-CD3/FITC-CD4/PE-... 目的比较不同荧光标记检测抗体组合与不同抗凝剂对检测食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群的影响,为相关检测提供方法参考。方法取肝素钠抗凝猴血50μl分别与两组荧光检测抗体PerCP-CD3/FITC-CD8/PE-CD4(检测抗体组合1)和PerCP-CD3/FITC-CD4/PE-CD8(检测抗体组合2)孵育,流式细胞仪测定CD3^(+)CD4^(+)和CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞百分比和平均荧光强度(MFI),并计算CD3^(+)CD4^(+)和CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞比值,比较不同荧光标记抗体组合检测食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群的结果。取肝素钠和乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝猴血各50μl分别与上述两组荧光检测抗体组合进行孵育,测定CD3^(+)CD4^(+)和CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞百分比和MFI,计算这两种淋巴细胞亚群比值,比较不同抗凝剂对食蟹猴外周血T淋巴细胞亚群检测结果的影响。结果⑴肝素钠抗凝猴血荧光检测抗体测定T淋巴细胞亚群的结果显示,FITC标记抗CD4抗体检测到的CD4^(+)T淋巴细胞百分比和MFI均显著低于PE标记抗CD4抗体检测到的CD4^(+)T淋巴细胞百分比和MFI,同样,FITC标记抗体检测到的CD8^(+)T淋巴细胞百分比和MFI均显著低于PE标记抗体检测到的相应结果,应用检测抗体组合2的CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞比值显著低于应用检测抗体组合1的,雌、雄动物均出现前述结果,雌性动物的变化更为显著。⑵应用抗体组合1检测时,与肝素钠抗凝组相比,EDTA-K2抗凝剂组CD3^(+)CD4^(+)淋巴细胞百分比显著增加、CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞百分比和CD8^(+)MFI显著降低,CD3^(+)CD4^(+)/CD3^(+)CD8^(+)淋巴细胞比值显著增加;应用抗体组合2检测时,仅发现EDTA-K2抗凝组比肝素钠组CD8^(+)MFI显著降低,未见其他有意义的变化。结论FITC标记抗CD4抗体和抗CD8抗体检测相应细胞百分比和荧光强度均小于PE标记的抗体,在应用这两种荧光标记抗体进行T淋巴细胞亚群检测时应注意对试验结果的影响和合理� 展开更多
关键词 外周血T淋巴细胞亚群 流式细胞测定法 食蟹猴 荧光标记检测抗体 抗凝剂
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不同包被液对ELISA检测五号病病毒抗体的比较试验
6
作者 杨傲冰 杜伟贤 《广东畜牧兽医科技》 1995年第2期7-9,共3页
０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液和０．０５ＭｐＨ１３ＮａｏＨ溶液作为包被液，分别用于间接ＥＬＩＳＡ检测乙型五号病病毒抗体。结果表明，用０．０５ＭｐＨ１３ＮａｏＨ溶液包被可完全灭活五号病病毒抗原，而用０．０５ＭｐＨ９．... ０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液和０．０５ＭｐＨ１３ＮａｏＨ溶液作为包被液，分别用于间接ＥＬＩＳＡ检测乙型五号病病毒抗体。结果表明，用０．０５ＭｐＨ１３ＮａｏＨ溶液包被可完全灭活五号病病毒抗原，而用０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液却有８７％的五号病病毒抗原未被杀灭；用于检测时，以０．０５ＭｐＨ１３ＮａＯＨ溶液为包被液在敏感性及检测结果的梯度方面都优于用０．０５ＭｐＨ９．６碳酸盐缓冲液。 展开更多
关键词 包被液 ELISA 检测 抗体
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O型口蹄疫疫苗免疫牛抗体消长动态的LPB-ELISA检测 被引量：25
7
作者 魏孔福 祁淑芸 +3 位作者 林密 冯霞 张峰 马军武 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期787-790,共4页
分别按一次免疫、首免后第15 d加强免疫和首免后第60 d加强免疫程序,对3组试验牛(每组牛20头)用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果,首免后第15 d加强免疫牛和第... 分别按一次免疫、首免后第15 d加强免疫和首免后第60 d加强免疫程序,对3组试验牛(每组牛20头)用O型口蹄疫疫苗进行了免疫。免疫后不同时间点用液相阻断ELISA(LPB-ELISA)测定了免疫牛O型口蹄疫抗体效价。结果,首免后第15 d加强免疫牛和第60 d加强免疫牛抗体水平较高,50%保护牛所占比例分别为56.3%和63.1%,完全受保护的牛所占比例分别为34.3%和29.5%。第60 d加强免疫牛的保护率要高于第15 d加强免疫牛和一次免疫牛的保护率。结果表明,首免后第60 d加强免疫是最理想的免疫程序。 展开更多
关键词 O型口蹄疫 液相阻断ELISA 抗体检测 抗体消长
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2015年陕西省猪群中4种重要病毒病抗体和病原的检测与分析 被引量：9
8
作者 赵紫印 李春燕 +3 位作者 郭抗抗 张振仓 周宏超 张彦明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期846-852,共7页
从陕西省陕南、关中和陕北地区的规模化养猪场及屠宰场共采集猪血清696份，其中陕南262份、关中324份、陕北110份。分别采用RT—PCR和PCR方法检测血清样品中CSFV、PRRSV、PCV2、PRV的核酸；用ELISA方法检测血清中4种病毒的抗体。病原检... 从陕西省陕南、关中和陕北地区的规模化养猪场及屠宰场共采集猪血清696份，其中陕南262份、关中324份、陕北110份。分别采用RT—PCR和PCR方法检测血清样品中CSFV、PRRSV、PCV2、PRV的核酸；用ELISA方法检测血清中4种病毒的抗体。病原检测结果显示：所有样品中CSFV阳性率为14％、PRRSV为9％、PCV2为23％、PRV为20％，PCV2的感染率最高；陕南地区的样品中PRV检出率最高，为36％。陕北地区和关中地区的样品中PCV2检出率均最高，分别为40％和20％；来自散养户样品中PRRSV检出率最高，为74％。来自规模化猪场样品中PCV2检出率最高，为20％。抗体检测结果显示：所有样品中CSFV抗体阳性率为81％，PRRSV为70％，PCV2为83％，PRV—gI为16％，PRV—gB为38％，PCV2的抗体水平最高；陕南地区的样品中CSFV抗体阳性率最高，为87％。陕北地区和关中地区的样品中PCV2抗体阳性率均最高，分别为87％和82％；来自散养户和规模化猪场的样品中PCV2抗体阳性率均最高，分别为80％和85％。结果表明：这4种主要疫病在陕西省三大地区都普遍存在，本试验结果为养猪业防治猪病提供了参考资料，也为猪场的有效防控提供调查依据。 展开更多
关键词 病毒病 病原检测 抗体检测
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H3N8亚型马流感病毒间接ELISA抗体检测方法建立及应用 被引量：8
9
作者 郭巍 王英原 +4 位作者 王宇 张馨心 赵立平 王立群 相文华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期190-193,共4页
为建立马流感血清学ELISA诊断方法,本研究以马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)通过SPF鸡胚培养和增殖,收取含病毒尿囊液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为ELISA包被抗原,首次在我国建立了检测H3N8亚型马流感抗体的间接ELISA诊断方法... 为建立马流感血清学ELISA诊断方法,本研究以马流感病毒中国分离株A/马/新疆/07(H3N8)通过SPF鸡胚培养和增殖,收取含病毒尿囊液经蔗糖密度梯度离心纯化后作为ELISA包被抗原,首次在我国建立了检测H3N8亚型马流感抗体的间接ELISA诊断方法。试验的最佳反应条件为:最佳抗原稀释度7μg/mL,封闭液5%脱脂乳,血清稀释度1∶100,二抗稀释度1∶10000,稀释液PBS(pH7.4),血清反应时间1.5h,二抗反应时间1h。通过本方法对555份临床样品进行检测并与血凝抑制(HI)试验检测结果比较,证明本方法特异、敏感,具有良好的稳定性和可重复性,适于马流感的流行病学调查和监测工作。 展开更多
关键词 马流感 间接ELISA 抗体检测
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2016—2017年山东省济南市犬布鲁氏菌病血清流行病学调查 被引量：7
10
作者 黄迪海 郭卉 +6 位作者 仉伟 秦春芝 盛晓丹 徐怀英 刘霞 张伟 秦卓明 《中国动物检疫》 CAS 2019年第7期15-19,共5页
为初步了解山东省济南市犬布鲁氏菌病流行情况,2016—2017年,在济南市5个辖区采集502份犬血样,利用竞争ELISA抗体试剂盒、虎红平板凝集试验,分别检测光滑型(猪、牛、羊种)和粗糙型(犬种)布鲁氏菌抗体。结果显示,济南市犬布鲁氏菌光滑型... 为初步了解山东省济南市犬布鲁氏菌病流行情况,2016—2017年,在济南市5个辖区采集502份犬血样,利用竞争ELISA抗体试剂盒、虎红平板凝集试验,分别检测光滑型(猪、牛、羊种)和粗糙型(犬种)布鲁氏菌抗体。结果显示,济南市犬布鲁氏菌光滑型、粗糙型抗体阳性率分别为8.76%、1.99%。结果表明,济南市宠物犬中的光滑型布鲁氏菌感染率较高,潜在传播风险较大,应引起高度重视。 展开更多
关键词 犬布鲁氏菌病 血清学调查 抗体检测 济南
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猪O型口蹄疫疫苗免疫抗体消长动态研究 被引量：6
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作者 项朝荣 王儒磊 +3 位作者 赵建东 卫陆梅 卫一新 惠永华 《安徽农业科学》 CAS 2015年第8期109-111,共3页
[目的]掌握猪O型口蹄疫疫苗免疫后的抗体消长规律。[方法]应用猪O型口蹄疫灭活疫苗1、灭活疫苗2和合成肽疫苗对198头试验猪进行至少2次免疫,定期采血后用液相阻断ELISA检测方法测定免疫前后抗体效价。[结果]在首次免疫时,疫苗免疫效果... [目的]掌握猪O型口蹄疫疫苗免疫后的抗体消长规律。[方法]应用猪O型口蹄疫灭活疫苗1、灭活疫苗2和合成肽疫苗对198头试验猪进行至少2次免疫,定期采血后用液相阻断ELISA检测方法测定免疫前后抗体效价。[结果]在首次免疫时,疫苗免疫效果受母源抗体的干扰较大;仔猪首免后抗体很难达到完全保护(大于6log2)水平,应适当缩短首免与二免的间隔时间,尽量减少免疫空白期;合成肽疫苗的首免效果较灭活疫苗好,首次免疫推荐使用合成肽疫苗;如果生猪饲养周期过长,免疫2次的生猪出栏时抗体不能达到完全保护水平;规模场试验猪的母源抗体水平低于散养户,随着试验猪日龄的增加和免疫的加强,规模场试验猪的免疫抗体滴度逐渐高于散养户。[结论]该研究可为研究猪O型口蹄疫抗体变化和制定猪O型口蹄疫疫苗的免疫程序提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 猪O型口蹄疫 疫苗免疫 抗体检测 抗体消长 分析
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越西县某羊场口蹄疫抗体消长规律研究与探讨
12
作者 杨富贵 王娟红 +6 位作者 张桥桥 常卫华 陈彬龙 吉能伍各 舒豪 唐馨怡 蒲彬 《饲料工业》 CAS 北大核心 2024年第7期134-138,共5页
研究旨在了解越西县某羊场羊口蹄疫免疫前后抗体变化规律,为该场口蹄疫免疫程序优化提供参考。通过酶联免疫吸附试验对越西县某羊场未接种口蹄疫疫苗与接种口蹄疫疫苗后的羔羊体内口蹄疫抗体进行动态监测。结果显示:羔羊14日龄时口蹄疫A... 研究旨在了解越西县某羊场羊口蹄疫免疫前后抗体变化规律,为该场口蹄疫免疫程序优化提供参考。通过酶联免疫吸附试验对越西县某羊场未接种口蹄疫疫苗与接种口蹄疫疫苗后的羔羊体内口蹄疫抗体进行动态监测。结果显示:羔羊14日龄时口蹄疫A、O型母源抗体合格率分别为79.16%和87.50%,30日龄时均已降至70.00%以下,60日龄时口蹄疫A、O型母源抗体合格率分别降至37.50%和45.83%。接种口蹄疫疫苗7 d后,羔羊口蹄疫A、O型抗体合格率分别为16.67%和25.00%,接种21 d时分别增长至70.83%和75.00%,达到国家标准;A型口蹄疫抗体合格率在接种42 d达到峰值91.67%,O型口蹄疫抗体合格率在接种56 d达到峰值91.67%。结果表明,羔羊体内母源抗体在出生近1个月时降至国家标准以下,并持续下降。疫苗接种21 d抗体合格率升至国家标准,两个月左右达峰值。 展开更多
关键词 羊 口蹄疫 疫苗免疫 抗体检测 消长规律
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临夏州羊包虫病流行现状调查及防控对策
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作者 马成贤 马继光 王娟 《西北民族大学学报（自然科学版）》 2024年第3期32-37,共6页
羊包虫病是一种较常见的人畜共患的疾病,临夏州是羊包虫病的高流行区.2017年对临夏州羊包虫病感染进行抽样解剖检查、血清学抗体检测以及犬类粪便抗原检查,结果显示,临夏州八县(市)定点屠宰场绵羊(或藏羊)的肝脏、肺脏各4430份进行解剖... 羊包虫病是一种较常见的人畜共患的疾病,临夏州是羊包虫病的高流行区.2017年对临夏州羊包虫病感染进行抽样解剖检查、血清学抗体检测以及犬类粪便抗原检查,结果显示,临夏州八县(市)定点屠宰场绵羊(或藏羊)的肝脏、肺脏各4430份进行解剖观察,肝脏感染数为199,肺脏感染数为48;血清学抗体检测5340份,阳性数为312;犬类粪便抗原检测1440份,感染数为94.建议采取家畜定期免疫和犬只定期驱虫的“双灭源”方法,全面防控包虫病的感染. 展开更多
关键词 包虫病 抗体检测 感染率 免疫
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血液病患者弓形虫感染情况调查 被引量：6
14
作者 向选东 段少君 欧阳颗 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第21期55-56,58,共3页
目的 :探讨血液病与弓形虫感染的关系。方法 :采用间接血凝试验 (IHA)与酶联免疫吸附试验 (ELISA)对 6 2例各种血液病患者血清中的弓形虫抗体进行检测 ,并用IHA检测对照组中 85例医院职工、118例献血员、5 8例急性感染性疾病患者及 84... 目的 :探讨血液病与弓形虫感染的关系。方法 :采用间接血凝试验 (IHA)与酶联免疫吸附试验 (ELISA)对 6 2例各种血液病患者血清中的弓形虫抗体进行检测 ,并用IHA检测对照组中 85例医院职工、118例献血员、5 8例急性感染性疾病患者及 84例慢性肝病患者血清中的弓形虫抗体。结果 :各种血液病患者IHA阳性率为 2 5 .81% ,ELISA阳性率为 2 9.0 3%。IHA检测医院职工的阳性率为 2 .35 % ,献血员为 2 .5 4 % ,急性感染性疾病为 1.72 % ,慢性肝病为 3.5 7% ,均明显低于血液病患者的阳性率。结论 :血液病患者容易并发弓形虫感染 ,临床上应对此引起高度重视。 展开更多
关键词 弓形虫感染 血液病 抗体检测 间接血凝试验 酶联免疫吸附试验 合并症
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桂东南地区三种常见鸡病毒性免疫抑制病的血清抗体检测与分析 被引量：4
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作者 吕其壮 李佩伦 +2 位作者 张成成 覃婷 陈旭健 《福建农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期506-511,共6页
【目的】了解3种常见病毒性免疫抑制病在桂东南地区鸡群中的发病情况和流行趋势。【方法】采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对2018年3月至2019年4月来自玉林、北流、兴业、博白、容县、陆川、贵港、桂平、平南等9个县市农村散养户送检... 【目的】了解3种常见病毒性免疫抑制病在桂东南地区鸡群中的发病情况和流行趋势。【方法】采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对2018年3月至2019年4月来自玉林、北流、兴业、博白、容县、陆川、贵港、桂平、平南等9个县市农村散养户送检的637份病鸡血清样品进行病毒抗体的检测并分析地区、季节、品种和年龄段等因素对鸡群感染病毒性免疫抑制病的影响。【结果】以上地区的农户散养鸡群中存在3种常见病毒性免疫抑制病的抗体,且不同病毒的抗体情况受地区、季节、品种和年龄段等因素的影响。鸡传染性贫血病毒(CIAV)、禽网状内皮组织增生症病毒(REV)和禽呼肠孤病毒(ARV)的抗体总阳性率分别为23.86%、13.97%、7.06%,提示CIAV在以上地区鸡群中的感染率相对较高,应该作为今后该地区鸡群疫病防控的重点。此外,在所有阳性样品中混合感染率为24.65%,说明目前以上地区农户散养鸡群中的病毒性免疫抑制病存在混合感染,尤其以CIAV与其他病原组成的混合感染类型为主,占98.11%。【结论】针对桂东南地区农户散养鸡群进行血清学调查,为防控该地区鸡群中的3种常见病毒性免疫抑制病提供了重要参考。 展开更多
关键词 鸡 病毒性免疫抑制病 抗体检测 ELISA
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粤西地区部分猪场CSFV、PRRSV、PRV 3种主要病原的血清抗体检测与分析 被引量：4
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作者 明月月 牛金利 +2 位作者 彭金菊 吴群 马驿 《中兽医医药杂志》 2020年第2期12-14,共3页
为了解粤西地区猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)以及猪伪狂犬病(PR)的免疫状况,采用ELISA法对25个猪场的424份血清样品进行抗体检测。结果显示,424份血清样品中,2018年3种病原血清抗体阳性总检出率平均值为73.11%,比2017年提高2.4... 为了解粤西地区猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)以及猪伪狂犬病(PR)的免疫状况,采用ELISA法对25个猪场的424份血清样品进行抗体检测。结果显示,424份血清样品中,2018年3种病原血清抗体阳性总检出率平均值为73.11%,比2017年提高2.45%,血清抗体阳性检出率最高的是PRV-gB (92.69%),CSF和PRRS的血清抗体阳性检出率分别为81.13%、73.58%,伪狂犬野毒抗体PRV-gE最低(38.92%)。2018年粤西地区猪场CSF、PRRS、PRV-gB免疫抗体水平及保护率比2017年均提高,但伪狂犬野毒感染率也在升高,说明CSF、PRRS、PR免疫效果好,同时应加强对伪狂犬野毒的抗体检测与监测。该结果可为了解猪场的实时免疫情况及疾病的防控提供参考依据。 展开更多
关键词 猪瘟 猪繁殖与呼吸综合征 猪伪狂犬 抗体检测
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联合检测幽门螺杆菌CagA、VacA、Ure、Hsp60及RdxA的临床价值 被引量：4
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作者 陈海潮 单平囡 许德顺 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期2268-2270,共3页
目的探讨联合检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)、空泡毒素相关蛋白(VacA)、尿素酶(Ure)、热休克蛋白60(Hsp60)和氮素还原酶(RdxA)在胃、十二指肠疾病中的临床价值。方法对486例患者以免疫斑点试验(蛋白芯片)检测幽门螺杆菌CagA、V... 目的探讨联合检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)、空泡毒素相关蛋白(VacA)、尿素酶(Ure)、热休克蛋白60(Hsp60)和氮素还原酶(RdxA)在胃、十二指肠疾病中的临床价值。方法对486例患者以免疫斑点试验(蛋白芯片)检测幽门螺杆菌CagA、VacA、Ure、Hsp60及RdxA抗体,对照组106例为健康体检人员。结果患者组中CagA、VacA、Ure、Hsp60的总阳性率分别为65.02%、52.67%、71.40%、11.74%,均明显高于对照组(P<0.01);CagA、VacA和Ure检测对萎缩性胃炎、胃癌的阳性率为80.00%～90.00%,对胃、十二指肠溃疡的阳性率为70.00%～78.00%,其余的阳性率均<74.00%,但VacA、Ure、Hsp60检测对胃癌的阳性率均为89.47%。结论 5种Hp抗体检测对表浅性胃炎、萎缩性胃炎、胃、十二指肠溃疡及胃癌诊治有较高参考价值。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 抗体检测 免疫斑点试验 胃、十二指肠疾病
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EB病毒壳抗原gp125的表达和初步应用 被引量：4
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作者 谷淑燕 王轶龙 +2 位作者 李燕 朱秋屏 H.Wolf 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期62-66,共5页
以痘苗病毒为载体克隆了 Epstein-Barr 病毒(EBV)壳抗原(VCA)的基因,重组痘苗病毒在感染细胞表达蛋白产物。用间接免疫荧光、免疫印迹技术和免疫电镜确定反应的特异性,表达产物位于细胞浆内和核内,胞浆内大量集聚,致使核偏向一侧,分子... 以痘苗病毒为载体克隆了 Epstein-Barr 病毒(EBV)壳抗原(VCA)的基因,重组痘苗病毒在感染细胞表达蛋白产物。用间接免疫荧光、免疫印迹技术和免疫电镜确定反应的特异性,表达产物位于细胞浆内和核内,胞浆内大量集聚,致使核偏向一侧,分子量约为100000。重组痘苗病毒免疫血清能特异性地与 B95-8细胞浆内的抗原反应。用重组病毒感染的细胞为靶细胞,并以 B95-8细胞和天坛株痘苗病毒感染的细胞分别为阳性和阴性对照,用免疫荧光方法平行检查不同人群血清中的VCA/IgG 和 VCA/IgA 抗体。结果表明,基因工程表达产物的特异性和在检查人血清抗体中的意义,为 ELISA 的建立和应用提供可靠的依据和抗原来源。 展开更多
关键词 EB病毒 抗原 基因表达 免疫诊断
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免疫印迹法检测梅毒抗体及评价 被引量：3
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作者 曹谊 金一鸣 +2 位作者 董丽 江妮娜 厦伟凤 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第24期5329-5330,共2页
目的建立梅毒抗体免疫印迹法(TP-WB)检测梅毒(TP),并对其效果进行评价。方法对第1组(13份)用甲苯胺红不加热试验与酶联免疫吸附试验法检测和第2组(28份)对双酶联免疫吸附试验法筛检的可疑样本进行明胶颗粒凝集试验与TP-WB方法确证检测... 目的建立梅毒抗体免疫印迹法(TP-WB)检测梅毒(TP),并对其效果进行评价。方法对第1组(13份)用甲苯胺红不加热试验与酶联免疫吸附试验法检测和第2组(28份)对双酶联免疫吸附试验法筛检的可疑样本进行明胶颗粒凝集试验与TP-WB方法确证检测并比较。结果两组用明胶颗粒凝集试验确证分别为6例阳性、2例可疑、5例阴性和12例阳性、2例可疑、14例阴性,阳性率为46.2%、42.9%;而用TP-WB法检测分别为11例阳性、2例可凝和18例阳性、2例可凝、8例阴性阳性率为84.6%、64.3%。结论 TP-WB法操作简便,结果易观察,无需特殊设备,灵敏度特异性好,更适宜各级实验室梅毒确证检测。 展开更多
关键词 梅毒 抗体检测 评价
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胞内劳森氏菌间接ELISA抗体检测方法的建立及应用 被引量：2
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作者 王丹丹 周俊明 +4 位作者 倪艳秀 祝昊丹 朱雪蛟 周金柱 李彬 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期396-401,444,共7页
为建立胞内劳森氏菌(LI)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了含有LI外膜蛋白基因的重组质粒pET32-LI1022并进行原核表达。结果显示LI1022基因在BL21(DE3)宿主菌内以可溶性表达重组LI1022蛋白(rLI1022),western blot结果显示rLI1022具... 为建立胞内劳森氏菌(LI)抗体的间接ELISA检测方法,本研究构建了含有LI外膜蛋白基因的重组质粒pET32-LI1022并进行原核表达。结果显示LI1022基因在BL21(DE3)宿主菌内以可溶性表达重组LI1022蛋白(rLI1022),western blot结果显示rLI1022具有较好的反应原性,可作为建立间接ELISA检测方法的包被抗原。进一步经Ni柱纯化获得纯化r LI1102,以其为包被抗原,对ELISA条件进行优化,结果显示纯化的rLI1022以4.69 ng/孔4℃过夜包被最佳;血清最佳反应条件为1:100稀释,37℃作用1 h;羊抗猪IgG-HRP最佳反应条件为1:10000稀释,37℃作用1 h;25℃TMB底物显色15 min。对建立的间接ELISA方法的特异性、敏感性、重复性进行分析,结果显示包被抗原与PRRSV、PRV、FMDV、PEDV等阳性血清均无交叉反应,仅可特异性检测LI抗体;当LI阳性血清稀释倍数为1:400时仍为阳性,表明该方法敏感性较好;批内、批间重复性试验变异系数均小于10%。与国外商品化ELISA检测试剂盒对比,二者的符合率达94.44%;利用所建立的间接ELISA方法对江苏部分地区319份临床猪血清样品进行检测,其中LI阳性检出率为87.77%,表明LI在江苏猪群中普遍存在。本研究首次建立了检测LI的间接ELISA方法,为临床LI血清流行病学调查提供了可行技术手段。 展开更多
关键词 胞内劳森氏菌 间接ELISA 抗体检测 LI1022重组蛋白
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