二苯乙烯苷对高糖诱导系膜细胞衰老相关信号的调节作用 被引量：6

1

作者 李彩蓉 蔡飞 +2 位作者 黎荣 赵辛元 杨颖乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期272-273,共2页

关键词 二苯乙烯苷 糖尿病 氧化应激 沉默信息调节因子2 叉头转录因子 周期素激酶抑制剂p27kip

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细胞周期调节负控蛋白P27在肾小球系膜细胞增殖中的调控作用 被引量：4

2

作者 章道恒 李富荣 +2 位作者 齐晖 任莉莉 肖克峰 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第10期98-101,共4页

目的探讨IL-13,ET-1,甲基强的松龙及肝素钠对肾小球系膜细胞膜表达细胞周期负控p27的变化。方法不同浓度IL-13(10ng/ml,100ng/ml),ET-1(10-7mol/L),甲基强的松龙0.5μg/ml,肝素钠100mg/L和200mg/L,作用于培养的系膜细胞。流式细胞仪检测... 目的探讨IL-13,ET-1,甲基强的松龙及肝素钠对肾小球系膜细胞膜表达细胞周期负控p27的变化。方法不同浓度IL-13(10ng/ml,100ng/ml),ET-1(10-7mol/L),甲基强的松龙0.5μg/ml,肝素钠100mg/L和200mg/L,作用于培养的系膜细胞。流式细胞仪检测p27表达水平。结果IL-1310ng/ml组和100ng/ml浓度组p27表达为(46.74±3.25)和(23.8±2.56),与对照组比较有明显差异(P<0.001,P<0.05),两浓度组之间有显著差异(P<0.01)。ET-1刺激14h和18h后p27的表达分别为(14.76±1.49)和(12.18±1.30),与对照组比较均有明显差异(P<0.05,P<0.05)。甲基强的松龙48h及72hp27表达为(9.9±1.01)和(9.12±0.93),与对照组比较明显降低,P<0.001。肝素钠100mg/L和200mg/L浓度p27的表达分别为(26.94±1.23)和(28.04±0.99),较对照组明显升高(P<0.05),不同浓度组间比较无明显差异。结论肾小球系膜细胞受不同因素作用后细胞周期调节负控蛋白p27表达水平不同。p27在调节系膜细胞增殖过程中起重要作用。 展开更多

关键词 系膜细胞 细胞周期负控蛋白p27 白细胞介素-13 甲基强的松龙 肝素钠

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表没食子儿茶素没食子酸酯对糖尿病大鼠肾脏细胞外调节蛋白激酶活性的影响 被引量：3

3

作者 杨晓 李彩蓉 +2 位作者 蔡飞 朱忠华 卢远航 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期184-188,共5页

目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对糖尿病大鼠肾脏细胞外调节蛋白激酶（ERK）活性的影响。方法 采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，实验分3组：正常对照组、糖尿病模型组和EGCG干预组。EGCG干预组于模型成功后1周给... 目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对糖尿病大鼠肾脏细胞外调节蛋白激酶（ERK）活性的影响。方法 采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病大鼠模型，实验分3组：正常对照组、糖尿病模型组和EGCG干预组。EGCG干预组于模型成功后1周给予EGCG5mg·kg^-1·d^-1腹腔注射。以免疫组织化学方法检测肾组织磷酸化ERK（p-ERK）的表达。大鼠肾系膜细胞株分组：正常对照组（NG，葡萄糖5mmol／L），高糖组（HG，葡萄糖30mmol／L），HG＋EGCG1组（100μg／L），HG＋EGCG2组（200μg／L），HG＋EGCG4组（400μg／L），甘露醇组（5mmol／L葡萄糖＋25mmol／L甘露醇）。用四甲基偶氮唑蓝比色（MTT）法检测细胞增殖活性；常规生化分析系膜细胞氧化应激状态；Western印迹检测ERK、p-ERK和p27蛋白表达水平。结果 EGCG呈剂量和时间依赖方式抑制高糖时系膜细胞的增殖活性及抗氧化作用。EGCG干预后糖尿病大鼠肾脏p-ERK蛋白免疫组化染色明显减弱。高糖时系膜细胞p-ERK及p27蛋白表达上调，EGCG呈剂量和时间依赖方式下调高糖时p-ERK蛋白的表达；呈剂量依赖方式下调p27蛋白的表达。结论 EGCG能有效改善糖尿病肾损伤程度，其作用机制可能是通过调节ERK活性，抑制p27蛋白表达而减少糖尿病肾病损害。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 糖尿病肾病 氧化性应激 细胞外调节蛋白激酶 周期素激酶抑制剂p27

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EGCG对高糖培养的系膜细胞增殖及周期素激酶抑制剂P27的作用 被引量：2

4

作者 李彩蓉 蔡飞 +1 位作者 杨晓 朱忠华 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期307-310,共4页

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对高糖培养的系膜细胞(GMCs)增殖及周期素激酶抑制剂p27蛋白表达的作用。方法:以大鼠肾系膜细胞为实验对象,将GMCs分成6组,分别刺激48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定GMCs增殖情况,Westernblot... 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸脂(EGCG)对高糖培养的系膜细胞(GMCs)增殖及周期素激酶抑制剂p27蛋白表达的作用。方法:以大鼠肾系膜细胞为实验对象,将GMCs分成6组,分别刺激48h后,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)测定GMCs增殖情况,Westernblot法测定p27蛋白表达。结果:作用48h后,高糖明显诱导GMCs增殖并上调p27蛋白表达,不同浓度的EGCG能抑制高糖诱导的细胞增生,并抑制p27蛋白表达。结论:EGCG能抑制高糖诱导的GMCs增殖,并下调p27蛋白表达,提示EGCG可通过抑制p27表达而减少细胞外基质的积聚,延缓糖尿病肾小球肥大和肾小球硬化。 展开更多

关键词 EGCG 周期素激酶抑制剂 系膜细胞 糖尿病肾病

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高糖培养的系膜细胞肥大与周期素激酶抑制剂p27的关系 被引量：6

5

作者 梅小斌 崔若兰 +2 位作者 袁伟杰 叶志斌 易万强 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2001年第4期241-244,共4页

目的　研究周期素激酶抑制剂ｐ２７在高糖培养系膜细胞（ＭＣ）肥大中的作用。方法　蛋白印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ杂交）方法测定ＭＣ裂解液ｐ２７ 蛋白水平，［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（３Ｈ］ＴｄＲ）及［３Ｈ］亮氨酸（［３Ｈ］ｌｅｕ）掺... 目的　研究周期素激酶抑制剂ｐ２７在高糖培养系膜细胞（ＭＣ）肥大中的作用。方法　蛋白印迹（ｗｅｓｔｅｒｎ杂交）方法测定ＭＣ裂解液ｐ２７ 蛋白水平，［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（３Ｈ］ＴｄＲ）及［３Ｈ］亮氨酸（［３Ｈ］ｌｅｕ）掺入方法测定ＭＣ细胞的肥大情况，观察ｐ２７反义寡核苷酸（ＯＤＮ）转染对高糖培养ＭＣ肥大的影响。结果　高糖（４５０ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的ＭＣ同正常糖（１００ ｍｇ／ｄｌ）无血清培养的 ＭＣ相比，ｐ２７水平增高，［３Ｈ］ ｌｅｕ掺入增加，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入减少；ｐ２７反义 ＯＤＮ转染后高糖无血清培养 ＭＣ［３Ｈ］ ｌｅｎ掺入减少，［３Ｈ］ ＴｄＲ掺入增加；用甘露醇提高正常糖培养液渗透压并不增加 ＭＣ中Ｐ２７水平。结论　高糖培养的ＭＣ中ｐ２７水平明显增高，增高的ｐ２７在高糖培养ＭＣ细胞肥大中起重要作用。 展开更多

关键词 细胞周期调节蛋白 周期素激酶抑制剂 p27 糖尿病肾病 系膜细胞肥大

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子宫内膜癌抑癌基因研究进展 被引量：9

6

作者 张佳 王永红 《国际妇产科学杂志》 CAS 2011年第5期428-431,共4页

子宫内膜癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,发病率有逐年上升的趋势。随着分子生物学和免疫学的发展,关于子宫内膜癌分子水平的致癌机制研究日益深入,如癌基因、抑癌基因、DNA错配修复基因、雌激素代谢酶相关基因、甾体激素受体基因和细胞周... 子宫内膜癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,发病率有逐年上升的趋势。随着分子生物学和免疫学的发展,关于子宫内膜癌分子水平的致癌机制研究日益深入,如癌基因、抑癌基因、DNA错配修复基因、雌激素代谢酶相关基因、甾体激素受体基因和细胞周期调控蛋白等。综述目前研究热点——抑癌基因的进展,为进一步探讨子宫内膜癌的发生发展、临床治疗及预后的判断提供重要依据。 展开更多

关键词 子宫内膜肿瘤 基因 肿瘤抑制 pTEN磷酸水解酶 肿瘤抑制蛋白质p53 基因 p16 周期素依赖激酶抑制剂p27 人类RUNT相关转录因子3 CHFR基因

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粗毛豚草素对人肺癌细胞A-549的抑制作用研究 被引量：6

7

作者 张成军 邓雁如 《天津医药》 CAS 北大核心 2013年第5期430-433,共4页

目的探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制。方法粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期蛋白cyclin D1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞... 目的探讨粗毛豚草素体外对人肺癌细胞A-549增殖的抑制作用及其作用机制。方法粗毛豚草素作用人肺癌细胞A-549后,应用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;Western blot检测周期蛋白cyclin D1,细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4,细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21和p27的表达;免疫细胞化学技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)的阳性表达。结果 A-549细胞经不同浓度(15、30、60、120μmol/L)粗毛豚草素作用72h后,细胞存活率分别为(57.30±3.92)%、(43.91±4.32)%、(17.82±2.73)%和(13.20±2.46)%,均低于对照组(96.30±2.08)%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。粗毛豚草素(15、30μmol/L)作用A-549细胞24h,可使细胞发生G1/S期阻滞。3种浓度(15、30、60μmol/L)的粗毛豚草素作用24h,可抑制A-549细胞周期蛋白cyclinD1、CDK4的表达,使p21蛋白表达增高,但对p27蛋白表达无明显影响。粗毛豚草素(15、30、60μmol/L)可显著抑制PCNA表达,其表达强度分别为(35.7±2.3)%、(26.6±2.1)%和(14.1±2.2)%,均低于对照组(45.2±3.3)%(P﹤0.01)。结论粗毛豚草素可抑制肺癌细胞A-549增殖,其机制可能与改变细胞周期分布,下调cyclinD1、CDK4表达,上调p21的表达等有关。 展开更多

关键词 肺肿瘤 细胞系 肿瘤 细胞增殖 细胞周期 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖激酶4 周期素依赖 激酶抑制剂p21 周期素依赖激酶抑制剂p27 增殖细胞核抗原 粗毛豚草素

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Jab1和p27kip1蛋白在喉鳞状细胞癌中的表达 被引量：6

8

作者 曹华 张锋 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2007年第9期523-526,共4页

目的探讨Jun激活区域-连接蛋白1(c-Jun activation domain-binding protein1,Jab1)和p27kip1的表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)发生、发展的关系及两种蛋白之间的相关性。方法免疫组织化学SP法检测23例正... 目的探讨Jun激活区域-连接蛋白1(c-Jun activation domain-binding protein1,Jab1)和p27kip1的表达与喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinomas,LSCC)发生、发展的关系及两种蛋白之间的相关性。方法免疫组织化学SP法检测23例正常喉黏膜(normal laryngeal tissues,NLT)和68例LSCC组织中Jab1和p27kip1的表达。结果NLT和LSCC组织中,Jab1和p27kip1蛋白阳性表达率差异均有显著性(P<0.01)。LSCC中Jab1的过表达与临床分期及颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),p27kip1的表达与颈淋巴结转移显著相关(P<0.05),Jab1的表达与p27kip1的表达呈负相关(P<0.05)。生存率分析表明,Jab1的过表达与患者的总生存率呈负相关(P<0.05)。结论Jab1可能通过对周期素依赖性蛋白激酶抑制因子(cell cycle inhibitory protein,CKI)p27kip1蛋白的降解而参与LSCC的发生、发展,联合检测Jab1及p27kip1蛋白的表达有助于综合评估LSCC的生物学行为及预后。 展开更多

关键词 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 连接蛋白类 周期素依赖激酶抑制剂p27 免疫组织化学 预后

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p21和p27在肿瘤发生机制中的作用与耐药性 被引量：4

9

作者 郑丽华 赵亚恒 刘运江 《国际外科学杂志》 2014年第7期494-498,共5页

人类肿瘤的发生是由于细胞生长和死亡的不平衡导致的.控制这个平衡的关键是调节细胞周期的蛋白.目前发现的与密切调节细胞周期特定阶段效应分子包括细胞周期蛋白,细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases CDKs）和CDK抑制因子... 人类肿瘤的发生是由于细胞生长和死亡的不平衡导致的.控制这个平衡的关键是调节细胞周期的蛋白.目前发现的与密切调节细胞周期特定阶段效应分子包括细胞周期蛋白,细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin-dependent kinases CDKs）和CDK抑制因子.G1期检测点的CDK抑制因子-p21（CDKN1 A）和p27（CDKN1 B）影响许多恶性肿瘤的发生发展.越来越多的证据表明p21或p27功能的缺失可以促进耐药.而另外一些实验证明p21和p27能促进肿瘤的发生发展.在本文中,我们将讨论这两个CDK抑制因子的功能,在肿瘤发生机制以及在耐药性中的作用. 展开更多

关键词 周期素依赖激酶抑制剂p21 周期素依赖激酶抑制剂p27 抗药性 肿瘤

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乳腺癌组织中Skp2和p27 Kip1表达与临床病理因素的关系 被引量：5

10

作者 帅萍 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1583-1586,共4页

目的:探讨乳腺癌组织中Skp2与p27Kip1的表达及其意义。方法:采用免疫组化法两步检测法检测正常乳腺组织、导管上皮不典型增生组织(ADH)以及浸润性导管癌(IDC)组织中的Skp2与p27Kip1的表达,并分析两者表达与乳腺癌淋巴结转移及组织学分... 目的:探讨乳腺癌组织中Skp2与p27Kip1的表达及其意义。方法:采用免疫组化法两步检测法检测正常乳腺组织、导管上皮不典型增生组织(ADH)以及浸润性导管癌(IDC)组织中的Skp2与p27Kip1的表达,并分析两者表达与乳腺癌淋巴结转移及组织学分级的关系。结果:Skp2阳性表达率在正常乳腺组织、ADH组织、IDC组织依次升高,伴腋窝淋巴结转移的IDC组织中Skp2阳性表达率明显高于无淋巴结转移的IDC组织,而p27Kip1的表达则与Skp2的表达呈反向变化(均P<0.05);不同组织学分级IDC组织间Skp2阳性率、p27Kip1阳性率差异均有统计学意义(均P<0.05),且Skp2阳性表达与IDC组织学分级呈正相关(r=0.492,P<0.05),而p27Kip1的阳性表达与IDC组织学分级呈负相关(r=-0.327,P<0.05)。结论:乳腺癌组织中Skp2表达上调而p27Kip1表达下调,两者的变化程度与乳腺癌的恶性生物学特征密切相关。 展开更多

关键词 乳腺肿瘤 S期激酶相关蛋白质类 周期素依赖激酶抑制剂p27

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Skp2、p27、PTEN在眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤中的表达和意义 被引量：4

11

作者 张静静 赵桂秋 +2 位作者 林红 杨先 林静 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1107-1112,共6页

目的探讨眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤中S期激酶相关蛋白2（skp2）、p27和PTEN蛋白的表达及其相关性。方法实验研究。收集1995年1月至2011年12月青岛大学附属医院眼科手术切除的眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤病理标本30例；以同期眼部反... 目的探讨眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤中S期激酶相关蛋白2（skp2）、p27和PTEN蛋白的表达及其相关性。方法实验研究。收集1995年1月至2011年12月青岛大学附属医院眼科手术切除的眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤病理标本30例；以同期眼部反应性淋巴组织增生标本（n=10）作为对照组。采用免疫组织化学法分别检测眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤标本和对照组标本中skp2、p27和PTEN的表达情况，以病理分级作为眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤的独立因素进行分析。各组间skp2、p27及PTEN表达情况的比较采用）（2检验，3种蛋白相互关系的分析采用Spearman等级相关分析。结果Skp2、p27、PTEN的阳性表达率与年龄、性别、发病部位无关（P〉0．05），而与肿瘤的病理类型有关（P〈0．05）。与对照组（Skp2：0／10；p27：10／10；PTEN：10／10）相比，眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤中Skp2的表达率（76．7％，23／30）显著增高（χ2=19．79，P=0．001），而p27（73．3％，22／30）和PTEN（56．7％，17／30）的表达率显著降低（χ2=8．37，P=0．039；χ2=13．48，P=0．004）。随着眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤病理分级的提高，skp2的表达率显著增高，p27和PTEN的表达显著降低。其中在黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤中，skp2的表达分别与p27、PTEN呈负相关（r=-0．134，P〈0．05；r=-0．883，P〈0．05），p27与PTEN呈正相关（r=0．828，P〈0．05）。结论p27和PTEN蛋白表达的缺失及skp2的表达水平升高可能与眼附属器B细胞非霍奇金淋巴瘤的发生有关，并可根据3种蛋白的表达区分肿瘤的不同类型；其中在黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞非霍奇金淋巴瘤中，3种蛋白存在相关性。 展开更多

关键词 眼肿瘤 淋巴瘤 非霍奇金 S期激酶相关蛋白质类 周期素依赖激酶抑制剂 p27 pTEN磷酸水解酶

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出核因子CRM1及p27在胶质瘤中的表达 被引量：4

12

作者 王东林 王熵婵 +2 位作者 陆鹏 鄂群 施公胜 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期454-457,共4页

目的探讨出核因子CRM1、p2710位丝氨酸（Ser10）磷酸化及p27蛋白在胶质瘤中的表达、相互关系及意义。方法免疫组织化学sP法检测70例胶质瘤和10例非肿瘤对照脑组织标本中CRM1、p27Ser10磷酸化形式及p27蛋白的表达，Westernblot检测6例新... 目的探讨出核因子CRM1、p2710位丝氨酸（Ser10）磷酸化及p27蛋白在胶质瘤中的表达、相互关系及意义。方法免疫组织化学sP法检测70例胶质瘤和10例非肿瘤对照脑组织标本中CRM1、p27Ser10磷酸化形式及p27蛋白的表达，Westernblot检测6例新鲜胶质瘤标本中相应蛋白的表达。结果CRM1及p27Ser10磷酸化形式在对照脑组织中表达不明显，在低级别胶质瘤中表达较少，在高级别胶质瘤中表达较多，两两比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。p27在对照脑组织中表达明显，其表达水平随肿瘤级别增高而降低，差异有统计学意义（P〈0．01）。Westernblot结果显示CRM1、p27Ser10磷酸化形式在胶质瘤中的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度相关。相关分析显示：胶质瘤中CRM1蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关（r=-0．727，P〈0．01），与p27Ser10磷酸化形式呈正相关（rs=0．954，P〈0．01），与增殖指标Ki-67表达呈正相关（rs=0．799，P〈0．01）；p27Ser10磷酸化形式与p27蛋白表达呈负相关（rs=-0．744，P〈0．01），与Ki-67表达呈正相关（rs=0．785，P〈0．01）。结论在胶质瘤中高表达的CRM1可能通过识别并结合高表达的p27Ser10磷酸化形式，促进p27的出核降解，使p27表达降低，失去对细胞周期的调控，从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖。 展开更多

关键词 神经胶质瘤 周期素依赖激酶抑制剂p27 出核因子

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胃癌细胞中miR-455-3p的表达及其对增殖和凋亡的影响 被引量：4

13

作者 夏茜 李晖 吴杰 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1272-1278,共7页

目的:探讨mi R-455-3p在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:用q RT-PCR检测mi R-455-3p在正常胃黏膜上皮细胞RGM-1及5种胃癌细胞系(AGS、Hs746T、MGC-803、SGC-7901及BSG-823)中的表达。将胃癌细胞mi R-455-3p模拟物... 目的:探讨mi R-455-3p在胃癌细胞中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:用q RT-PCR检测mi R-455-3p在正常胃黏膜上皮细胞RGM-1及5种胃癌细胞系(AGS、Hs746T、MGC-803、SGC-7901及BSG-823)中的表达。将胃癌细胞mi R-455-3p模拟物后,分别用CCK8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞p27 kip1、p21的蛋白表达,分光光度法检测细胞caspase酶活性。结果:mi R-455-3p在5种胃癌细胞系中的表达水平明显低于RGM-1细胞系,其中在AGS细胞中降低最为明显(均P<0.05)。AGS细胞转染mi R-455-3p模拟物后,增殖能力明显降低而胞凋亡率明显升高,p27 kip1蛋白表达量明显升高,caspase-3与caspase-9相对活性明显升高(均P<0.05),但p21蛋白表达量与caspase-8相对活性无明显改变(均P>0.05)。结论:mi R-455-3p在胃癌细胞表达下调,增加其表达可抑制胃癌细胞增殖并促进凋亡,其机制可能与其上调p27 kip1表达及增强caspase-3、caspase-9活性有关。 展开更多

关键词 胃肿瘤 微RNAS 周期素依赖激酶抑制剂p27 细胞凋亡

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黄芩苷通过调控c-Myc介导的细胞周期抑制胆管癌细胞增殖 被引量：3

14

作者 徐杨 肖斌 +2 位作者 魏嵋 代荣阳 向远彩 《天津医药》 CAS 北大核心 2020年第8期705-710,共6页

目的探究黄芩苷(BC)对人胆管癌(CCA)细胞QBC939和RBE增殖的影响及其潜在机制。方法取对数生长期QBC939和RBE细胞,不同浓度的BC处理细胞24 h后,采用CCK-8法分别检测BC对CCA细胞增殖及敲低原癌基因蛋白质(c-Myc)后对BC引起细胞增殖活性改... 目的探究黄芩苷(BC)对人胆管癌(CCA)细胞QBC939和RBE增殖的影响及其潜在机制。方法取对数生长期QBC939和RBE细胞,不同浓度的BC处理细胞24 h后,采用CCK-8法分别检测BC对CCA细胞增殖及敲低原癌基因蛋白质(c-Myc)后对BC引起细胞增殖活性改变的影响;高倍显微镜观察BC对细胞生长状态的影响;流式细胞术检测BC对CCA细胞周期的影响;蛋白免疫印迹(Western blot)实验分别检测BC及小干扰RNA(siRNA)敲低CCA细胞中c-Myc后对周期相关蛋白周期素依赖激酶抑制剂(p27)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)及c-Myc表达的影响。结果与0μmol/L组相比,BC明显抑制QBC939和RBE细胞的增殖活性(P<0.01),且高倍显微镜下观察到细胞生长减缓;BC可将QBC939细胞周期阻滞于S期(P<0.05);随着BC浓度的增加,p27的蛋白水平明显上调,而Cyclin D1则显著降低(P<0.01);BC可下调c-Myc的蛋白表达,且敲低c-Myc后p27和Cyclin D1蛋白表达的变化趋势与BC处理时一致(P<0.05);单独敲低c-Myc后可明显抑制QBC939和RBE细胞的存活率(P<0.01),并能进一步增强BC的抑制作用。结论BC通过抑制c-Myc信号通路阻滞细胞周期,进而抑制CCA细胞的增殖。 展开更多

关键词 黄芩甙 细胞增殖 细胞周期 周期素依赖激酶抑制剂p27 细胞周期蛋白D1 原癌基因蛋白质C-MYC 胆管肿瘤 RNA 小分子干扰

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细胞周期调控基因p21和p27单核苷酸多态性与卵巢上皮性癌的关系 被引量：2

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作者 金霞 康山 +2 位作者 王娜 邢艳萍 李琰 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期209-212,共4页

目的探讨细胞周期调控基因p21和p27的单核苷酸多态性（SNP）与卵巢上皮性癌（卵巢癌）发病风险的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测234例卵巢癌患者（卵巢癌组）和284例健康妇女（对照组）p21基因C... 目的探讨细胞周期调控基因p21和p27的单核苷酸多态性（SNP）与卵巢上皮性癌（卵巢癌）发病风险的关系。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测234例卵巢癌患者（卵巢癌组）和284例健康妇女（对照组）p21基因C／T和p27基因V／G SNP位点基因型和等位基因的频率分布。结果（1）对照组妇女p21基因的C／C、C／T和T／T基因型频率分别为34．2％、49．6％和16．2％，C和T等位基因频率分别为59．0％和41．0％；卵巢癌组患者3种基因型频率分别为28．2％、53．0％和18．8％，C和T等位基因频率分别为54．7％和45．3％。两组基因型频率和等位基因频率分别比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。3种基因型频率在4种病理类型的卵巢癌中的分布有明显差异（P=0．02），C／C基因型降低子宫内膜样癌的发病风险（OR为0．56，95％CI为0．32—0．98）。（2）对照组妇女p27基因、V/V、V／G和G／G基因型频率分别为88．4％、10．9％和0．7％，V和G等位基因频率分别为93．8％和6．2％；卵巢癌组患者的基因型频率分别为93．6％、5．1％和1．3％，V和G等位基因频率分别为96．2％和3．8％。两组基因型频率分布比较，差异有统计学意义（P=0．04），等位基因频率分布比较，差异则无统计学意义（P=0．09）。与V／G和G／G基因型比较，V/V基因型增加卵巢癌的发病风险（OR为1．92，95％C1为1．02-3．63）。结论021基因C／T多态性的C／C基因型可能降低子宫内膜样癌的发病风险，p27基因的V／V基因型可能是卵巢癌发病的潜在危险因素。 展开更多

关键词 卵巢肿瘤 细胞周期蛋白质依赖激酶抑制剂p21 细胞周期蛋白质依赖激酶抑制剂p27 多态性 单核苷酸 疾病遗传易感性

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胃癌组织中CyclinD1与P27蛋白表达及其意义 被引量：3

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作者 高涵 于建宪 《齐鲁医学杂志》 2008年第3期231-232,235,共3页

目的 探讨细胞周期蛋白（CyclinD1）、细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白（P27）在胃癌组织表达及其意义。方法 应用组织微阵列技术结合免疫组织化学方法 （PV-9000法）检测CyclinD1、P27在正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达。结果 ... 目的 探讨细胞周期蛋白（CyclinD1）、细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白（P27）在胃癌组织表达及其意义。方法 应用组织微阵列技术结合免疫组织化学方法 （PV-9000法）检测CyclinD1、P27在正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中的表达。结果 正常胃黏膜、癌旁组织及胃癌组织中CyclinD1的表达率分别为17.6%、32.7%、65.5%,P27的表达率分别为61.9%、23.9%、13.3%,三组间CyclinD1、P27的表达率比较差异有显著性（H=54.35、46.92,P〈0.01）。CyclinD1、P27在肿瘤中的表达呈负相关（r=-0.209,P〈0.05）。CyclinD1过表达和P27表达下降与胃癌浸润程度和淋巴结转移有关（χ^2=4.86～9.04,P〈0.05）。结论 CyclinD1过表达和P27表达下降在胃癌的发展过程中起重要作用,对早期预测癌细胞的转移潜能、判断胃癌预后有重要的临床意义。 展开更多

关键词 胃肿瘤 细胞周期蛋白D1 细胞周期素依赖性激酶抑制蛋白 芯片分析技术 免疫组织化学

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增殖细胞核抗原和p27在鼻内翻性乳头状瘤中的表达 被引量：2

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作者 胡廷保 文卫平 +2 位作者 孙德重 陈慧敏 许庚 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 北大核心 2007年第9期543-546,共4页

目的检测鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和p27蛋白表达,从细胞增殖状况和细胞周期调控方面探讨NIP发生、生长机制。方法应用免疫组织化学LSAB法检测47... 目的检测鼻内翻性乳头状瘤(nasal inverted papilloma,NIP)组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)和p27蛋白表达,从细胞增殖状况和细胞周期调控方面探讨NIP发生、生长机制。方法应用免疫组织化学LSAB法检测47例NIP、49例鼻息肉、43例鼻鳞状细胞癌、11例正常鼻黏膜组织中PCNA和p27蛋白的表达。结果NIP组PCNA标记指数(labelling index,LI)高于鼻息肉组及正常鼻黏膜组(P<0.001),与鼻鳞状细胞癌组差异无统计学意义(P>0.05),NIP中初发组与复发组之间差异无统计学意义(P>0.05);p27蛋白在各实验组中均有部分表达,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论PCNA指数可以反映NIP的增殖状况,但其与NIP的复发无明显关系;而p27在NIP发展过程中的作用尚需进一步探讨。 展开更多

关键词 乳头状瘤 内翻 鼻 鼻窦 增殖细胞核抗原 周期素依赖激酶抑制剂p27 免疫组织化学

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针对p27Kip1基因的小发夹RNA对牛角膜内皮细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 黄渝侃 张明昌 +4 位作者 王勇 范可顺 姜冬玲 张光红 周龚莉 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期254-259,共6页

目的探讨针对p27Kip1基因的小发夹RNA（shRNA）表达质粒对牛角膜内皮细胞（bCEC）增殖能力的影响。方法实验研究。设计有发夹状结构的3条p27Kip1—shRNA对应模板DNA序列，并构建无关序列HK—shRNA作为阴性对照。构建并鉴定重组质粒Pgene... 目的探讨针对p27Kip1基因的小发夹RNA（shRNA）表达质粒对牛角膜内皮细胞（bCEC）增殖能力的影响。方法实验研究。设计有发夹状结构的3条p27Kip1—shRNA对应模板DNA序列，并构建无关序列HK—shRNA作为阴性对照。构建并鉴定重组质粒Pgenesil-P1、Pgenesil-P2、Pgenesil—P3及Pgenesil-HK。以脂质体法将以上4种质粒分别转染bCEC，并设立空白组。稳定转染后采用RT-PCR和Westem免疫印迹法检测bcEc内p27Kip1的mRNA及其蛋白水平，筛选出抑制效果最好的阳性siRNA质粒。用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测该质粒组、Pgenesil-HK组及空白组的细胞生长情况。流式细胞术检测各组细胞周期的分布。以上数据结果均采用单因素方差分析。结果酶切及测序证实4个重组质粒均构建成功。与空白组比较，Pgenesil-P1、Pgenesil—P2、Pgenesil—P3各组mRNA的抑制效率分别为32．71％、67．76％及80．28％（F=453．102，P=0．000），蛋白表达水平降低为29．27％、64．73％及76．13％（F=75．385，P=0．000），以Pgenesil—P3抑制效果最明显。空白组与Pgenesil—HK组比较蛋白水平（P=0．356）和mRNA水平（P=0．246）均差异无统计学意义。与空白对照和阴性siRNA相比，Pgenesil—P3组bCEC增殖能力提高，G1期细胞比例下降（F=134．224，P=0．000），S期比例增加（F=334．957，P=0．000）。结论针对p27Kip1的shRNA可有效降低p27Kip1基因及其蛋白的表达水平，并可提高bCEC增殖能力。RNA干扰介导的p27Kip1基因沉默可能是促进角膜内皮细胞再生的有效手段。 展开更多

关键词 RNA 小分子干扰 周期素依赖激酶抑制剂p27 质粒 内皮 角膜 细胞增殖

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siRNA沉默CTCF基因对牛角膜内皮细胞p27蛋白表达的影响 被引量：2

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作者 陈宏 张明昌 张红旭 《中华眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期631-634,共4页

目的 探讨RNA干扰技术沉默结缔组织生长因子（CTGF）基因表达对p27蛋白表达的影响.方法 实验研究.设计并合成CTGF特异性小干扰RNA（siRNA）,用脂质体转染入培养的牛角膜内皮细胞,正常对照组仅加入培养基而未进行siRNA转染.逆转录聚合酶... 目的 探讨RNA干扰技术沉默结缔组织生长因子（CTGF）基因表达对p27蛋白表达的影响.方法 实验研究.设计并合成CTGF特异性小干扰RNA（siRNA）,用脂质体转染入培养的牛角膜内皮细胞,正常对照组仅加入培养基而未进行siRNA转染.逆转录聚合酶链反应法观察基因沉默效果,免疫印迹法观察1.00μg/L转化生长因子β2作用下角膜内皮细胞内p27蛋白表达.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 CTGF siRNA成功转染入培养的牛角膜内皮细胞并有效沉默CTGF mRNA表达,转染24、48及72 h CTGF mRNA表达分别为正常对照组的17.3%、24.4%及41.7%,与正常对照组比较,差异有统计学意义（F=389.9,P〈0.05）.在转染36 h时,p27蛋白表达明显下降（F=299.3,P〈0.05）.结论 CTGF特异性siRNA能有效沉默细胞内CTGF mRNA表达,下调角膜内皮细胞p27蛋白的表达. 展开更多

关键词 结缔组织生长因子 转化生长因子Β2 RNA 小分子干扰 内皮 角膜 周期素依赖激酶抑制剂p27结缔组织生长因子 转化生长因子Β2 RNA 小分子干扰 内皮 角膜 周期素依赖激酶抑制剂p27

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姜黄素的抗胰腺癌作用及相关机制研究 被引量：2

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作者 谷倬宇 李思源 +2 位作者 肖智伟 周婷 李军 《天津医药》 CAS 北大核心 2014年第12期1159-1162,共4页

目的探讨姜黄素(curcumin)的抗胰腺癌作用及其可能的机制。方法采用免疫组化法检测35例胰腺癌组织及相邻非癌组织中Smad4、Jab1的表达情况,并从中抽取21例胰腺癌组织测定Jab1与Smad4染色的阳性细胞百分比,分析两者相关性。将人胰腺癌细... 目的探讨姜黄素(curcumin)的抗胰腺癌作用及其可能的机制。方法采用免疫组化法检测35例胰腺癌组织及相邻非癌组织中Smad4、Jab1的表达情况,并从中抽取21例胰腺癌组织测定Jab1与Smad4染色的阳性细胞百分比,分析两者相关性。将人胰腺癌细胞系PANC-1细胞分为PANC-1对照组(不做处理)和PANC-1 cur-cumin组(含10μmol/L姜黄素的细胞培养液处理),采用Western Blot检测姜黄素对肿瘤抑制物p53、Smad4及细胞循环抑制剂p27蛋白表达的影响。将人胚肾细胞系293T细胞分为293T对照组(不做处理)、293T curcumin组(含10μmol/L姜黄素的细胞培养液处理)和293T Jab1组(转染HA-Jab1质粒),采用免疫共沉淀法检测姜黄素对β-Tr CP1与Smad4结合的蛋白表达影响。结果与相邻非癌组织比较,胰腺癌组织中Smad4呈低表达,Jab1呈高表达(均P<0.01),Jab1与Smad4的表达呈负相关(n=21,r=-0.71,P=0.007)。姜黄素可增加PANC-1细胞中Smad4、p53和p27蛋白表达的水平,降低293T细胞中β-Tr CP1与Smad4结合的蛋白表达水平;Jab1可增加293T细胞中β-Tr CP1与Smad4结合的蛋白表达水平(均P<0.05)。结论姜黄素可能通过上调Smad4、p53和p27的蛋白表达进而起到抗胰腺癌作用,其上调Smad4表达的机制可能与其抑制Smad4蛋白的泛素化进程有关,而Jab1也可能通过参与Smad4的泛素化进程影响Smad4蛋白降解。 展开更多

关键词 胰腺肿瘤 姜黄素 Smad4蛋白质 肿瘤抑制蛋白质p53 周期素依赖激酶抑制剂p27 泛素化 JAB1

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