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银杏叶提取物EGb761对NO供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用 被引量:8
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作者 张海风 刘勇军 +1 位作者 祝其锋 张海涛 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期94-97,共4页
目的 探讨银杏叶提取物 (EGb 761 )对NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 采用MTT比色分析测细胞存活率、Hoechst 332 58荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果 不同剂量EGb761预处理海马神经元... 目的 探讨银杏叶提取物 (EGb 761 )对NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 采用MTT比色分析测细胞存活率、Hoechst 332 58荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果 不同剂量EGb761预处理海马神经元 6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡 ,提高神经元的存活率 ;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象 ;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变。结论 EGb 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 银杏叶提取物 神经元凋亡 硝普钠 MTT比色分析法 Hoechst33258荧光染色 DNA琼脂糖凝胶电泳分析法
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SNP对体外培养的海马神经元bcl-2和bax基因表达的影响 被引量:9
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作者 张海风 刘勇军 +1 位作者 祝其锋 张海涛 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第19期16-20,23,共6页
目的 :探讨NO供体硝普钠 (SodiumNitroprusside,SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与Bcl- 2、Bax表达变化的关系。方法 :终浓度分别为 0、2 5、5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μmol/L的SNP处理海马神经元 2 4h ,或用终浓度为 5 0 μmol/L的SN... 目的 :探讨NO供体硝普钠 (SodiumNitroprusside,SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与Bcl- 2、Bax表达变化的关系。方法 :终浓度分别为 0、2 5、5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μmol/L的SNP处理海马神经元 2 4h ,或用终浓度为 5 0 μmol/L的SNP分别处理海马神经元 0、6、12、18、2 4h ,用RT -PCR检测Bcl- 2、baxmRNA表达变化 ,Westernblot检测Bcl- 2、Bax蛋白表达的变化。结果 :随着SNP剂量的增加 ,bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白表达逐渐减少 ,而baxmRNA、Bax蛋白表达逐渐增加 ;随着时间的处长 ,bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白表达逐渐减少 ,而baxmRNA、Bax蛋白表达去逐渐增加。结论 :SNP可时间、剂量依赖性地降低bcl- 2mRNA、Bcl- 2蛋白的表达 ,时间、剂量依赖性地增加baxmRNA、Bax蛋白的表达。SNP诱导海马神经元凋亡的机制 ,可能是与降低Bcl- 2 /Bax的比值有关。 展开更多
关键词 SNP 老年性痴呆 细胞凋亡 体外培养 海马神经元 bcl-2 BAX 基因表达
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共聚焦激光扫描显微镜技术在研究大鼠海马神经元胞内钙超载中的应用 被引量:4
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作者 黄娅林 赵鹏 程介士 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期98-100,104,F003,共5页
目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3/ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像... 目的 观察抑制性氨基酸牛磺酸对兴奋性氨基酸谷氨酸所致胞内钙超载的影响。方法 选择Fluo-3/ AM对培养的海马神经元进行着色后,用共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)实时 扫描,动态显示海马神经元二维图像,以计算机相应软件对胞内钙的荧光强度变化进行分析统计。结果 在 0.5 mmol/L谷氨酸作用下,胞内钙荧光强度迅速升高(P<0.001);0.5 mmol/L谷氨酸与3 mmol/L牛磺酸共同 作用于海马神经元时,胞内钙荧光强度明显降低(P<0.001);灌流液中去除牛磺酸后,胞内钙荧光强度上升(P <0.001)。结论 抑制性氨基酸牛磺酸可抑制由兴奋性氨基酸谷氨酸所致神经元的胞内钙超载;CLSM以其独 特的优势,在高清晰度地显示海马神经元形态的同时,也可动态地观察活细胞在不同环境下胞内钙的快速变化 以及定量分析。该技术在动态观察和二维图像的高分辨率上比传统测钙方法有更大的优越性。 展开更多
关键词 钙超载 海马神经元 共聚焦激光扫描显微镜 牛磺酸 谷氨酸 CLSM 大鼠海马 荧光强度 活细胞 Fluo-3/AM
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阿魏酸钠对SNP诱导的凋亡海马神经元NF-κB、par-4基因表达的影响 被引量:1
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作者 张海风 李月百 +3 位作者 安玉会 邢路伟 王俊萍 单杰 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第14期1361-1364,共4页
目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用5... 目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对一氧化氮(NO)供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡及NF-κBP65、par-4基因表达的影响。方法采用SD大鼠海马神经元原代培养,经终浓度分别为10、20、40、80、120、160μmol/L的SF预处理后,用50μmol/L的SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest33258荧光染色检测凋亡,Westernblot及RT-PCR检测NF-κBP65、par-4基因表达。结果不同剂量SF(10~160μmol/L)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;降低NF-κBP65、par-4mRNA及蛋白的表达。结论SF抑制NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡,其机制可能与降低促凋亡基因NF-κBP65、par-4表达有关。 展开更多
关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡 NF-KB P65 PAR-4
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硝普钠对体外培养的海马神经元NF-κB和caspase-3基因表达的影响 被引量:1
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作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 单杰 安玉会 李道明 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期847-850,共4页
目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258... 目的探讨NO供体硝普钠(SNP)诱导体外培养的海马神经元凋亡与核因子-kappaB(NF)-κB p65和caspase-3表达变化的关系。方法终浓度分别为0、25、50、100、200、400μmol/L的SNP处理海马神经元24 h,用MTT比色法分析细胞存活率;Hoechst33258荧光染色观察凋亡的形态学改变;DNA琼脂糖凝胶分析凋亡的生化特征;用RT-PCR检测NF-κB p65、caspase-3 mRNA表达变化;Western印迹检测NF-κB p65、caspase-3蛋白表达的变化。结果SNP可剂量依赖性的降低神经元的存活率;荧光显微镜可见染为高亮蓝色的典型凋亡小体,其细胞核明显固缩、凝聚和断裂;电泳图谱显示清晰的DNA梯度。随着SNP剂量的增加,NF-κB p65 mRNA、NF-κB p65蛋白表达逐渐增加;caspase-3 mRNA表达无改变,但caspase-3酶原被裂解活化;从50μmol/LSNP起,caspase-3相对酶活性显著增加,为对照组的3.02倍,100μmol/L达最大值。结论SNP可诱导培养的海马神经元凋亡,其凋亡机制可能与增加NF-κB p65表达及激活caspase-3酶原有关。 展开更多
关键词 硝普钠(SNP) 体外培养 海马神经元 凋亡 NF-ΚBP65 CASPASE-3
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阿魏酸钠对硝普钠诱导的原代培养海马神经元凋亡的保护作用 被引量:1
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作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 安玉会 李道明 单杰 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1129-1133,共5页
目的:探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡保护作用的可能机制。方法:原代培养的大鼠海马神经元,经终浓度为10~160μmol·L^-1的SF预处理6h后,用50μmol-L^-1的SNP处理24h,采... 目的:探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡保护作用的可能机制。方法:原代培养的大鼠海马神经元,经终浓度为10~160μmol·L^-1的SF预处理6h后,用50μmol-L^-1的SNP处理24h,采用MTT法检测细胞存活率,Hochest 33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡,Western blot及RT-PCR检测bcl-2基因表达。结果:不同浓度SF(10~160μmol·L^-1)预处理6h可显著提高神经元的存活率,减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变;增加bcl-2 mRNA及蛋白的表达。结论:SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用,其机制可能与增加抗凋亡基因bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡 BCL-2
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磷酸吡哆醛对培养的海马神经细胞形态学的影响(英文)
7
作者 耿美玉 李静 +3 位作者 辛现良 邓岗 徐家敏 管华诗 《青岛海洋大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第2期249-254,共6页
实验观察磷酸吡哆醛对培养的海马神经细胞形态学的影响 ,选用妊娠 18d Wistar大鼠胎鼠 ,采用酶消化法获得单个海马神经细胞 ,通过原代低密度细胞培养法观察磷酸吡哆醛 (PLP)对其形态学的影响。结果表明 :在浓度为 1,10μ m时 ,能明显地... 实验观察磷酸吡哆醛对培养的海马神经细胞形态学的影响 ,选用妊娠 18d Wistar大鼠胎鼠 ,采用酶消化法获得单个海马神经细胞 ,通过原代低密度细胞培养法观察磷酸吡哆醛 (PLP)对其形态学的影响。结果表明 :在浓度为 1,10μ m时 ,能明显地促进海马神经细胞轴突的伸展 ,但对树突总长度、每个轴突上的分叉数及胞体的突起数均无明显影响 ;Ifenprodil和 Picrotoxin尽管能明显拮抗 PL P介导的神经细胞营养作用 ,但对 PL P的促神经细胞伸展作用却无明显影响。总之 ,认为 PL P之所以具有促海马神经细胞轴突伸展作用 ,不是通过 PL P神经细胞的营养作用来发挥的。 展开更多
关键词 磷酸吡哆醛 神经突触伸展 培养 海马 神经细胞
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培养海马CA1神经细胞中谷氨酸受体介导BDNF mRNA的表达
8
作者 赵彬 要航 +3 位作者 吴燕 汪家政 王福庄 范明 《中国神经科学杂志》 CSCD 1998年第1期34-37,共4页
用原位杂交法观察了培养海马神经元中BDNFmRNA的表达,得出与他人报道略有不同的结果:上述种经元经KA处理后,BDNFmRNA表达增高不仅可经非NMDA受体介导,而且可通过谷氨酸的释放再间接活化NMDA受体.
关键词 海马 神经元 谷氨酸受体 原位杂交
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阿魏酸钠对一氧化碳供体硝普钠诱导的海马神经元凋亡的保护作用
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作者 张海风 臧明玺 +2 位作者 单杰 安玉会 李道明 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第18期2601-2604,2608,共5页
目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果不同剂量SF(10~160μmol/mL)预处理... 目的探讨阿魏酸钠(sodium ferulate,SF)对NO供体硝普钠(SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法采用MTT比色分析测细胞存活率,Hoechst33258荧光染色及DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果不同剂量SF(10~160μmol/mL)预处理海马神经元6h可剂量依赖地对抗SNP引起的神经元凋亡,提高神经元的存活率;减少SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象;DNA凝胶电泳图谱未见典型的"梯子状"改变。结论SF对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡具有明显的保护作用。 展开更多
关键词 阿魏酸钠 硝普钠 海马神经元 凋亡
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EGb761对NO供体SNP诱导的海马神经元凋亡的保护作用 被引量:7
10
作者 张海风 刘勇军 +1 位作者 祝其锋 张海涛 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期220-223,共4页
目的 探讨银杏叶提取物 (EGb761 )对 NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 采用 MTT比色分析测细胞存活率、 Hoechst 332 58荧光染色及 DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果 不同剂量 EGb 761预处理海马... 目的 探讨银杏叶提取物 (EGb761 )对 NO供体硝普钠 (SNP)引起的大鼠海马神经元凋亡的影响。方法 采用 MTT比色分析测细胞存活率、 Hoechst 332 58荧光染色及 DNA琼脂糖凝胶电泳分析等方法检测凋亡。结果 不同剂量 EGb 761预处理海马神经元 6 h可剂量依赖地对抗 SNP引起的神经元凋亡 ,提高神经元的存活率 ;减少 SNP引起的核固缩、凝聚和碎裂现象 ;DNA凝胶电泳图谱未见典型的“梯子状”改变。结论  EGb 761对 NO供体 展开更多
关键词 EGB761 NO供体 SNP 诱导 海马神经元凋亡 保护作用 硝普钠 银杏叶提取物 大鼠
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黄蒲通窍胶囊对阿尔茨海默病细胞模型细胞凋亡的影响 被引量:7
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作者 蔡标 叶树 +6 位作者 王艳 汪婷婷 王靓 江爱娟 方正清 申国明 谢道俊 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期2378-2383,共6页
海马神经细胞丢失是阿尔茨海默病(AD)的主要病理特征之一,其发生与海马神经细胞凋亡有关。黄蒲通窍胶囊用于治疗AD,但其作用机制尚未明确。该实验通过观察黄蒲通窍胶囊含药血清对Aβ25-35诱导的原代培养海马神经元AD细胞模型神经损伤... 海马神经细胞丢失是阿尔茨海默病(AD)的主要病理特征之一,其发生与海马神经细胞凋亡有关。黄蒲通窍胶囊用于治疗AD,但其作用机制尚未明确。该实验通过观察黄蒲通窍胶囊含药血清对Aβ25-35诱导的原代培养海马神经元AD细胞模型神经损伤的保护作用及细胞凋亡的影响,探讨黄蒲通窍胶囊治疗AD的神经保护作用机制。原代培养海马神经元,倒置显微镜观察细胞生长状态,MAP-2免疫荧光法鉴定原代培养的海马神经元。运用血清药理学方法制备黄蒲通窍胶囊含药血清,MTT法筛选黄蒲通窍胶囊含药血清最佳浓度范围和Aβ25-35造模浓度。用Aβ25-35诱导建立AD细胞模型后,给予不同浓度的黄蒲通窍胶囊含药血清继续干预,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞内Bax,Cyt C,caspase-3蛋白表达。结果显示,原代培养海马神经元成功,且海马神经元在培养至第7天时生长成熟;与正常组比较,模型组海马神经元细胞存活率下降,细胞凋亡率增加,Bax,Cyt C,caspase-3蛋白表达增加(P〈0.05,P〈0.01);与模型组比较,黄蒲通窍胶囊含药血清组细胞存活率明显升高,细胞凋亡率减少,Bax,Cyt C,caspase-3蛋白表达明显降低(P〈0.05,P〈0.01)。结果表明,黄蒲通窍胶囊含药血清对Aβ25-35诱导的原代培养海马神经元损伤具有保护作用,可抑制海马神经元细胞凋亡从而起到治疗AD的作用。 展开更多
关键词 黄蒲通窍胶囊 阿尔茨海默病 原代培养海马神经元 神经保护 细胞凋亡
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Effects of Single and Repeated Exposure to a 50-Hz 2-mT Electromagnetic Field on Primary Cultured Hippocampal Neurons 被引量:6
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作者 Ying Zeng Yunyun Shen +4 位作者 Ling Hong Yanfeng Chen Xiaofang Shi Qunli Zeng Peilin Yu 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期299-306,共8页
The prevalence of domestic and industrial electrical appliances has raised concerns about the health risk of extremely low-frequency magnetic fields(ELF-MFs). At present, the effects of ELF-MFs on the central nervou... The prevalence of domestic and industrial electrical appliances has raised concerns about the health risk of extremely low-frequency magnetic fields(ELF-MFs). At present, the effects of ELF-MFs on the central nervous system are still highly controversial, and few studies have investigated its effects on cultured neurons. Here, we evaluated the biological effects of different patterns of ELF-MF exposure on primary cultured hippocampal neurons in terms of viability, apoptosis, genomic instability,and oxidative stress. The results showed that repeated exposure to 50-Hz 2-mT ELF-MF for 8 h per day after different times in culture decreased the viability and increased the production of intracellular reactive oxidative species in hippocampal neurons. The mechanism was potentially related to the up-regulation of Nox2 expression.Moreover, none of the repeated exposure patterns had significant effects on DNA damage, apoptosis, or autophagy, which suggested that ELF-MF exposure has no severe biological consequences in cultured hippocampal neurons. 展开更多
关键词 ELF-MF Primary cultured hippocampal neurons Oxidative stress Cell viability
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七氟烷对大鼠原代培养海马神经元细胞毒性作用 被引量:3
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作者 周雪 刘晶巾 +2 位作者 杨小宇 牛丽君 冯霞 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期2180-2182,共3页
目的探讨吸入麻醉药物七氟烷对原代培养的SD乳鼠大脑海马神经元的细胞毒性作用。方法新生1d的SD乳鼠,雌雄不限,当天取脑行大脑海马细胞原代培养,种植于96孔板(15孔/板)后置于温箱中培养,于培养第7天,建立体外培养大脑海马神经... 目的探讨吸入麻醉药物七氟烷对原代培养的SD乳鼠大脑海马神经元的细胞毒性作用。方法新生1d的SD乳鼠,雌雄不限,当天取脑行大脑海马细胞原代培养,种植于96孔板(15孔/板)后置于温箱中培养,于培养第7天,建立体外培养大脑海马神经元暴露七氟烷模型,将同一批体外培养的海马神经元随机分为3组:正常温箱空白对照组(C1)、实验对照组(C2)、吸入麻醉药物七氟烷组(S组),C1组置于温箱中不行任何处理;C2组和S组置于相同条件的密闭容器中(5%二氧化碳,21%氧气,37℃),s组同时给予3%七氟烷4h,4h后立即采用噻唑蓝(MTT)法分别测定3组神经元的细胞活力。实验共重复3次。结果与C1组和C2组比较,S组MTT值下降,与前两组比较差异有统计学意义(P〈0.05);C1组和C2组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。结论本实验成功建立了体外培养海马神经元暴露七氟烷模型,模型中七氟烷直接作用于纯度较高的海马神经元,且模型中除七氟烷外的其他环境条件不会对培养的大脑海马神经元细胞活力产生影响;体外给予3%吸入麻醉药物七氟烷4h会降低大脑海马神经元的细胞活力,产生神经毒性作用。 展开更多
关键词 七氟烷 原代培养海马神经元 细胞毒性 MTT法
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β-淀粉样蛋白对原代培养大鼠海马神经细胞Sorcin、RyR2mRNA基因表达的影响
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作者 任锐 张旸 +3 位作者 任世刚 郑晶 王明秋 孔庆博 《国际免疫学杂志》 CAS 2017年第4期382-386,共5页
目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的影响。方法新生1-3天的Wistar大鼠,取其海马组织,原代培养8d后,用已老化过的Aβ25-35对海马神经细胞进行1μmol/L,10μmol/L和20... 目的研究β-淀粉样蛋白(Aβ)对原代培养的大鼠脑海马神经细胞内钙稳态相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的影响。方法新生1-3天的Wistar大鼠,取其海马组织,原代培养8d后,用已老化过的Aβ25-35对海马神经细胞进行1μmol/L,10μmol/L和20μmol/L剂量的染毒,培养24和48h后分别观察海马神经细胞形态、和海马神经细胞内钙调节相关蛋白Sorcin、RyR2mRNA的基因表达水平。结果随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长,可发现随着Aβ25-35剂量的增加和染毒时间的延长,海马细胞出现细胞凋亡的比例增加,其中Aβ25-35 20μmol/L染毒48h培养海马细胞中出现了大量早期凋亡细胞和少量中期凋亡细胞。实时定量PCR结果显示,10μLmol/LAβ25-35在对原代细胞染毒24和48h后SorcinmRNA的相对表达量为(1.42±0.03)和(1.63±0.02),与对照组相比,表达增加(P〈0.05);20μmol/L Aβ25-35在对原代细胞染毒24h和48h后SorcinmRNA的相对表达量(2.11±0.05)和(2.23±0.05),与对照组相比,表达增加(P〈0.05);20μmol/L Aβ25-35在对原代细胞染毒24和48h后RyR2mRNA的相对表达量为(1.64±0.03)和(1.95±0.03),表达显著高于对照组相(P〈0.05)。结论Aβ具有神经毒性,可抑制海马神经细胞的生长,可通过作用于钙调节相关蛋白的表达,诱发阿尔茨海默氏病(AD)的发生。 展开更多
关键词 原代培养海马神经细胞 Sorcin基因 RyR2基因
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中药更年春方通过ERβ及PI3K/Akt信号通路对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元损伤的保护作用 被引量:15
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作者 张阳 高玲芸 王文君 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期66-75,共10页
目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-S... 目的观察中药更年春方(Gengnianchun formula,GNC)通过雌激素受体β(estrogen receptorβ,ERβ)及PI3K/Akt信号通路对β淀粉样蛋白25-35片段(Aβ25-35)致大鼠胎鼠海马神经元细胞损伤的保护作用。方法采用Aβ25-35作用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系,通过CCK-8法检测细胞活力摸索Aβ25-35及GNC含药血清(GNC serum,GS)处理神经细胞的合适浓度及时间。采用Aβ25-35作用大鼠胎鼠海马神经元构建阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的体外模型,分为无血清对照组、模型组、GS组、空白血清对照(normal saline serum,NS)组和PHTPP(选择性ERβ拮抗剂)组。利用正置显微镜观察细胞形态、CCK-8法检测细胞活力及LDH释放法检测细胞损伤。利用Hoest33258/PI双重荧光染色实验、qRT-PCR及Western blot实验检测细胞凋亡相关指标。结果与无血清对照组相比,模型组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触出现明显的收缩崩解和细胞碎片、细胞活力下降、LDH释放升高。与模型组和NS组相比,GS组大鼠胎鼠海马神经元胞体及突触的收缩崩解和细胞碎片减少、细胞活力上升、LDH释放减少、PI阳性神经元细胞数目下降、神经元bax/bcl-2mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase 3、cyt-c蛋白表达水平下降、p-Akt蛋白表达水平上升。与GS组相比,PHTPP组大鼠胎鼠海马神经元bax/bcl-2 mRNA、cyt-c mRNA水平及bax/bcl-2、cleaved-caspase3、cyt-c蛋白表达水平上升、p-Akt蛋白表达水平下降。结论GNC对Aβ25-35致大鼠胎鼠海马神经元的损伤具有保护作用,此作用是通过ERβ及PI3K/Akt信号通路介导的。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病(AD) 更年春方(GNC) 雌激素受体β(ERβ) PI3K/AKT信号通路 大鼠胎鼠海马神经元 SH-SY5Y细胞系
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