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转化医学真菌学实例——直接提取DNA鉴定菌种及体外药敏试验指导诊治面部难辨认癣 被引量：7
1
作者 康道现 冉玉平 +1 位作者 尹斌 代亚玲 《中国真菌学杂志》 2011年第6期324-327,共4页
目的报道1例由万博节皮菌(趾间毛癣菌有性期)所致面部难辨认癣,取皮损鳞屑直接提取真菌DNA做菌种鉴定,并与真菌培养鉴定结果比较,对培养的菌落直接用抗真菌乳膏做药敏实验指导治疗。方法病变部鳞屑经KOH涂片真菌镜检阳性后,取鳞屑直接提... 目的报道1例由万博节皮菌(趾间毛癣菌有性期)所致面部难辨认癣,取皮损鳞屑直接提取真菌DNA做菌种鉴定,并与真菌培养鉴定结果比较,对培养的菌落直接用抗真菌乳膏做药敏实验指导治疗。方法病变部鳞屑经KOH涂片真菌镜检阳性后,取鳞屑直接提取DNA,以真菌通用引物ITS1/4做PCR扩增后测序;同时从培养生长的菌提取DNA做分子生物学鉴定;并将抗真菌乳膏加入含菌平板孔中观察抑菌圈大小。结果鳞屑直接提取的DNA与培养获得菌落提取的DNA经PCR-测序均鉴定为万博节皮菌,诊断万博节皮菌感染所致面部难辨认癣。镜检阳性后即给予特比萘芬口服(250mg/d)及1%萘替芬-0.25%酮康唑乳膏外用,每周复诊并取鳞屑镜检和培养,基于药物抑菌实验结果指导治疗5周,至临床治愈和真菌培养转阴。结论鳞屑直接提取DNA做PCR-测序能及早明确菌种,待培养菌落长出后做PCR-测序验证,直接用成品抗真菌乳膏做体外药敏实验指导临床选药,动态培养鳞屑以确定疗程。此个体化诊治方案为从临床到实验室、从实验室到临床转化医学真菌学的成功实例。 展开更多
关键词 万博节皮菌(趾间毛癣菌) 非培养法 药敏试验 转化医学真菌学
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直接从病发提取DNA鉴定菌种诊治万博节皮菌所致脓癣 被引量：6
2
作者 康道现 冉玉平 代亚玲 《临床皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期348-350,共3页
目的:报告1例由万博节皮菌(趾间毛癣菌有性期)引起的脓癣。在患儿已口服抗真菌药培养生长缓慢的情况下从病发直接提取DNA鉴定菌种,以明确致病菌,指导治疗。方法:病发经KOH涂片真菌镜检阳性后,从病发直接提取DNA,以真菌通用引物ITS1和ITS... 目的:报告1例由万博节皮菌(趾间毛癣菌有性期)引起的脓癣。在患儿已口服抗真菌药培养生长缓慢的情况下从病发直接提取DNA鉴定菌种,以明确致病菌,指导治疗。方法:病发经KOH涂片真菌镜检阳性后,从病发直接提取DNA,以真菌通用引物ITS1和ITS4做PCR扩增后测序比对;同时做真菌培养,菌落长出后做钢圈小培养进行形态学鉴定。并提取菌落DNA做分子生物学鉴定。结果:病发直接提取的DNA与从培养菌落提取的DNA经PCR-序列分析均鉴定为万博节皮菌.与形态学鉴定相符。诊断万博节皮菌感染所致头癣。予口服伊曲康唑(100mg/d),2%酮康唑洗剂外洗后外擦1%萘替芬-0.25%酮康唑乳膏。治疗4个月后痊愈。结论:在已用抗真菌药培养生长不良的情况下直接提取DNA做PCR-序列分析的非培养法能尽早明确致病菌种,指导用药。待培养菌落长出后再做PCR-序列分析及形态学验证。 展开更多
关键词 万博节皮菌(趾间毛癣菌) 脓癣 非培养法
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温泉环境宏基因组文库中醛脱氢酶基因的克隆及分析 被引量：2
3
作者 谌容 王秋岩 +2 位作者 杨兵 魏东芝 谢恬 《杭州师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2010年第5期379-384,共6页
甲基丙二酸半醛脱氢酶(MMSDH)是唯一需要CoA的一类醛脱氢酶.采用免培养-PCR技术结合基因组步移从宏基因组中成功分离一条MMSDH,获得的MMSDH在序列上具有醛脱氢酶的10个保守模块,以芽胞杆菌的MMSDH为模板预测其三维结构.研究证实采用免培... 甲基丙二酸半醛脱氢酶(MMSDH)是唯一需要CoA的一类醛脱氢酶.采用免培养-PCR技术结合基因组步移从宏基因组中成功分离一条MMSDH,获得的MMSDH在序列上具有醛脱氢酶的10个保守模块,以芽胞杆菌的MMSDH为模板预测其三维结构.研究证实采用免培养-PCR技术及基因组步移在微生物基因研究中具有重要的价值,且为新酶的筛选技术提供一条简单有效的途径. 展开更多
关键词 醛脱氢酶 免培养-pcr技术 基因组步移技术
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