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纳米羟基磷灰石的制备及其抗肿瘤活性的研究 被引量：19
1
作者 袁媛 唐胜利 +1 位作者 洪华 刘昌胜 《中国生物医学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期26-30,共5页
采用溶胶凝胶法合成了含CO32 - 的纳米羟基磷灰石 ,研究了热处理温度对羟基磷灰石结晶性能、粒子大小和形貌的影响。并采用体外细胞培养的方法对含CO32 - 纳米羟基磷灰石的抗肿瘤活性进行了初步的探索。结果表明 :以Ca(NO3) 2 ·4H... 采用溶胶凝胶法合成了含CO32 - 的纳米羟基磷灰石 ,研究了热处理温度对羟基磷灰石结晶性能、粒子大小和形貌的影响。并采用体外细胞培养的方法对含CO32 - 纳米羟基磷灰石的抗肿瘤活性进行了初步的探索。结果表明 :以Ca(NO3) 2 ·4H2 O和PO(CH3O) 3为原料 ,采用溶胶凝胶法 ,6 0 0℃处理可得到结晶性能良好、分散均匀、5 0nm左右大小的含CO32 - 的羟基磷灰石粉体。MTT比色法研究结果表明纳米HAP粒子对正常肝细胞L 0 2的抑制率较小 ,而对BEL 74 0 2肝癌细胞有明显的抑制作用 ,且呈现明显的浓度和时间依赖性。荧光显微照片显示纳米HAP粒子能够诱导BEL 74 0 2肝癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 纳米羟基磷灰石 制备 BEL-7402细胞 抗肿瘤活性
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白菜与甘蓝的种间杂交及其杂种后代的研究 被引量：19
2
作者 梁红 冯午 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期203-210,共8页
利用杂交授粉后子房离体培养的方法克服了白菜与甘蓝的种间不亲和性,并获得二倍体和四倍体的杂种后代。对杂种后代进行形态观察、核型研究、同工酶分析和回交试验。杂种后代的形态性状介于两亲本之间,较偏向父本。二倍体杂种有明显的生... 利用杂交授粉后子房离体培养的方法克服了白菜与甘蓝的种间不亲和性,并获得二倍体和四倍体的杂种后代。对杂种后代进行形态观察、核型研究、同工酶分析和回交试验。杂种后代的形态性状介于两亲本之间,较偏向父本。二倍体杂种有明显的生长优势,根尖细胞染色体数为19。四倍体杂种生长发育较迟缓,根尖细胞染色体数为38。杂种后代过氧化物酶同工酶表现为“偏母本的互补型”,并在二倍体杂种中出现新的酶带。杂种后代高度不育,用白菜花粉回交二倍体杂种有低度的育性,用甘蓝花粉回交则不育。回交试验与同工酶分析的结果给我们以启示,应是由于杂种细胞质基因作用的结果。 展开更多
关键词 白菜 甘蓝 种间杂交 杂种后代
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血管体外应力培养系统:一种新的血管生物力学实验模型 被引量：21
3
作者 刘波 姜宗来 +3 位作者 张炎 刘艳春 覃开荣 杨向群 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 2001年第4期225-230,共6页
本文设计并建立一种新型的血管体外应力培养系统,分别施加定常流与脉动流,检测其运行稳定性后,将猪颈总动脉进行体外培养7d,采用组织形态学方法结合计算机图像分析与透射电镜技术,评价培养动脉的状态。结果表明,颈外动脉进行体外培养7d... 本文设计并建立一种新型的血管体外应力培养系统,分别施加定常流与脉动流,检测其运行稳定性后,将猪颈总动脉进行体外培养7d,采用组织形态学方法结合计算机图像分析与透射电镜技术,评价培养动脉的状态。结果表明,颈外动脉进行体外培养7d仍然存活,血管几何形态结构与细胞超微结构基本正常。本系统能够提供多种较为稳定的应力培养条件,为血管生物力学和血管组织工程研究提供了一种有效的实验模型。 展开更多
关键词 切应力 器官培养 血管重建 平滑肌细胞 几何形态学 生物力学 组织工程
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大鼠脑微血管内皮细胞与周细胞、星形胶质细胞共培养建立体外血脑屏障模型 被引量：28
4
作者 查雨锋 傅晓钟 +5 位作者 张顺 罗敏 欧瑜 董永喜 王爱民 王永林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期730-735,共6页
目的应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovessel endothelial cells,BMECs)与脑微血管周细胞(brain-microvessel pericytes,BMPC)、星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障(blood-brain barrier... 目的应用原代培养的大鼠脑微血管内皮细胞(brainmicrovessel endothelial cells,BMECs)与脑微血管周细胞(brain-microvessel pericytes,BMPC)、星形胶质细胞(astrocytes,AS)共培养建立可模拟在体状态的体外血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)模型。方法原代分离、纯化和培养大鼠BMECs、BMPC和AS,通过细胞形态学和免疫细胞化学染色方法鉴定原代培养的细胞,应用Millicell细胞培养插(孔径0.4μm)建立5种不同类型的体外BBB模型,经跨内皮电阻值(transendothelial electrical resistance,TEER)、荧光素钠通透性(sodium fluorescent,Na-FLU)、碱性磷酸酶(AKP)和γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT1)的表达测定以及阳性药在体内和体外BBB通透量的相似性,比较评价其屏障功能。结果原代培养的BMECs呈典型的铺路卵石样结构,BMPC胞体较大且呈分枝状,AS有细长突触,胞质较浅;免疫细胞化学染色证实原代细胞为目标细胞;BMECs与BMPC、AS共培养后TEER值可达(478±25)Ω·cm2,Na-FLU的表观渗透系数为[(8.23±0.78)×10-6]cm·s-1,AKP和γ-GT1表达分别为(6.90±0.27)金氏单位·g-1Pro,(4.39±0.32)μg·g-1Pro;阳性药在体外BBB的表观渗透系数(apparent permeability coefficient,Papp)与在体数据具有较好的相关性(R2=0.92)。结论原代培养的大鼠BMECs与BMPC、AS共培养建立的体外BBB模型在形态、结构及屏障功能方面具备BBB的基本特征,为研究BBB的生理学、病理学以及筛选化合物提供了一种有用工具。 展开更多
关键词 原代培养 脑微血管内皮细胞 周细胞 星形胶质细胞 血脑屏障 形态学 免疫细胞化学
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烟草黑胫病菌培养性状的研究 被引量：23
5
作者 马国胜 高智谋 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期512-517,共6页
目的对烟草黑胫病菌的若干培养性状进行研究,进一步了解烟草黑胫病菌的培养特性的稳定性,为烟草黑胫病的相关研究和综合治理提供试验依据。方法从安徽10个主要生产烟草的市(县)多点采集发生烟草黑胫病的烟株,采用组织分离法进行病原菌分... 目的对烟草黑胫病菌的若干培养性状进行研究,进一步了解烟草黑胫病菌的培养特性的稳定性,为烟草黑胫病的相关研究和综合治理提供试验依据。方法从安徽10个主要生产烟草的市(县)多点采集发生烟草黑胫病的烟株,采用组织分离法进行病原菌分离,经纯化后获得69个烟草黑胫病菌(Phytophthora nicotianae Breda de Haan var.nicotianae Waterh.)菌株,对其进行游动孢子囊的诱导、配对培养、生长特性测定等进行研究。结果烟草黑胫病菌的主要培养性状为:异宗配合,与标准相对交配型菌株配对培养可以产生有性器官;卵孢子球形,满器或不满器,雄器围生,藏卵器小;孢子囊多近球形,乳突明显,有双乳突现象,孢子囊具脱落性,且孢子囊柄短,不对称孢子囊较常见,孢子囊外着生有长短不一的附属丝;菌丝最适生长温度为20～30℃,最高生长温度大于35℃,小于40℃,最低生长温度大于8℃,小于10℃。结论供试烟草黑胫病菌的培养性状与前人的研究结论基本一致,初步认为10多年来生态环境和农业措施的变化没有导致烟草黑胫病菌的生长性状发生较大的改变,表明烟草黑胫病菌的培养性状是较为稳定的。 展开更多
关键词 烟草黑胫病 烟草疫霉烟草变种 培养性状 形态特征 异宗配合
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成年大鼠嗅球成鞘细胞的原代培养及形态学研究 被引量：17
6
作者 魏开斌 刘爱华 +2 位作者 孙卫山 潘新 汤继文 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第20期1561-1564,共4页
目的探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)分离与纯化培养方法并对形态学进行研究。方法取材后采用差速贴壁和阿糖胞苷(Arac)抑制相结合的纯化培养方法培养嗅鞘细胞,并分不同阶段进行观察和NGFRp75和GFAP免疫组化染色... 目的探讨大鼠嗅球成鞘细胞(olfactoryensheathingcells,OECs)分离与纯化培养方法并对形态学进行研究。方法取材后采用差速贴壁和阿糖胞苷(Arac)抑制相结合的纯化培养方法培养嗅鞘细胞,并分不同阶段进行观察和NGFRp75和GFAP免疫组化染色鉴定。结果成功培养出高纯度的嗅鞘细胞,胞体呈梭形、多突起形及油煎蛋形三种类型,突起细长编织成网状为其特点。结论差速贴壁和Ara-c抑制相结合的纯化培养方法兼收了两者的优点,实践证实是一种简单经济而又有实效的嗅鞘细胞培养方法。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 细胞培养 形态学 嗅球
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体外诱导大鼠骨髓基质细胞向心肌细胞的分化 被引量：9
7
作者 唐耀亮 赵强 +5 位作者 葛均波 储以微 王春生 胡美玉 杨英珍 刘康达 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第5期329-332,共4页
目的　通过体外诱导研究骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞的分化和心肌细胞特异性标志的表达。方法　抽取雄性SD大鼠骨髓 ,进行体外培养和连续传代 ,获得较纯的MSC。采用第 8代的MSC ,以去甲基化药物 5 氮杂胞苷进行体外诱导 ,相差显... 目的　通过体外诱导研究骨髓基质细胞 (MSC)向心肌样细胞的分化和心肌细胞特异性标志的表达。方法　抽取雄性SD大鼠骨髓 ,进行体外培养和连续传代 ,获得较纯的MSC。采用第 8代的MSC ,以去甲基化药物 5 氮杂胞苷进行体外诱导 ,相差显微镜下观察其形态变化 ,通过流式细胞仪 (FACS)分析细胞形态比例 ,以免疫组化方法鉴定心肌特征性蛋白Desmin和肌钙蛋白T(cTnT)表达 ,并通过RT PCR鉴定心肌特异因子基因的表达。结果　诱导前MSC多呈扁平多突起形态 ,诱导后形态发生变化 ,10d细胞呈长梭形 ,2 0d后细胞之间形成连接 ,排列方向渐趋一致 ,1月时出现肌管样结构。FACS检测发现诱导后MSC形态构成发生变化 ,以形态较小细胞为主。免疫组化检测Desmin阳性比例近 35 % ,有cTnT免疫荧光阳性细胞出现 ,约占 10 %。RT PCR显示诱导后MSC后有GATA 4、ANP和a MHC基因表达。结论　成体中的MSC在一定诱导条件下可以表现心肌样特征 。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 心肌化 细胞心肌成形术 组织工程
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野生和养殖矛尾复虾虎鱼营养组成和形态学的比较研究 被引量：18
8
作者 罗智 李晓东 +2 位作者 白海娟 袁勇超 龚世园 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2008年第2期182-186,共5页
在野外自然海区取100尾矛尾复虾虎鱼(Synechogobius hasta),挑选体重一致、健康无病的虾虎鱼做实验鱼,随机分为3组,每组20尾,投放到3个室内流水玻璃纤维钢水族箱中,以冻虾喂养30 d后称重、取样。在捕获野生虾虎鱼同一水域取同样规格的... 在野外自然海区取100尾矛尾复虾虎鱼(Synechogobius hasta),挑选体重一致、健康无病的虾虎鱼做实验鱼,随机分为3组,每组20尾,投放到3个室内流水玻璃纤维钢水族箱中,以冻虾喂养30 d后称重、取样。在捕获野生虾虎鱼同一水域取同样规格的矛尾复虾虎鱼24尾,进行同样的称重、取样和分析,比较研究野生虾虎鱼和养殖虾虎鱼体组成及形态学的异同。结果表明:野生组全鱼的粗蛋白和粗脂肪含量显著高于养殖组(P<0.05),而肌肉中的粗蛋白和粗脂肪含量差异不显著(P>0.05)。养殖组与野生组矛尾复虾虎鱼在肥满度(CF)、脏体比(VSI)和肝体比(HSI)存在显著性差异(P<0.05)。野生组全鱼总的必需氨基酸含量及必需氨基酸与总氨基酸含量的百分比例显著高于养殖组(P<0.05)。肝脏脂肪酸组成方面,野生虾虎鱼的C18:2n-6和C18:3n-3脂肪酸含量显著高于养殖虾虎鱼(P<0.05),而养殖虾虎鱼的C22:6n-3(DHA)比例显著高于野生虾虎鱼(P<0.05)。野生和养殖组C20:5n-3(EPA)含量差异不显著(P>0.05)。 展开更多
关键词 矛尾复虾虎鱼 野生 养殖 营养组成 形态学
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大鼠肝干细胞定位及形态学特征研究 被引量：12
9
作者 马俊勋 方驰华 +1 位作者 张伟 朱新勇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期940-941,共2页
目的 研究大鼠肝干细胞在肝脏的定位及其形态学特征。方法采用3’-甲基-4-二甲基偶氮苯诱癌建立大鼠肝癌模型,于造模第4周取肝脏组织进行免疫组织化学染色定位,同时分离干细胞,采用相差显微镜摄像、透射和扫描电镜摄像对分离的细胞进行... 目的 研究大鼠肝干细胞在肝脏的定位及其形态学特征。方法采用3’-甲基-4-二甲基偶氮苯诱癌建立大鼠肝癌模型,于造模第4周取肝脏组织进行免疫组织化学染色定位,同时分离干细胞,采用相差显微镜摄像、透射和扫描电镜摄像对分离的细胞进行形态学观察。结果 组织免疫化学发现细胞角蛋白(CK)18、19、CD_(34)、c-kit阳性。从成体大鼠肝脏分离的肝干细胞体积小、外形及胞核为圆形或椭圆形,可以稳定传代,细胞形态不发生改变;结论 成体大鼠肝干细胞位于汇管区,肝干细胞的成功培养为研究肝干细胞的生物学特性和临床应用提供了理论依据。 展开更多
关键词 鼠肝 肝干细胞 大鼠 临床应用 肝脏组织 形态学特征 C-KIT 成体 细胞形态 传代
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城市滨水区历史文态与空间形态的整合与延续──以杭州市湖滨地区整治规划为例 被引量：5
10
作者 张建强 汪海峰 《浙江工业大学学报》 CAS 2000年第S1期247-250,共4页
通过对杭州湖滨地区空间环境进行整治规划的实践 ,说明城市滨水地区改造应建立在多重意义上的融合 ,其空间形态要反映城市历史文化的内涵 。
关键词 城市滨水地区 历史文态 空间形态 整治 延续
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水培条件下花生磷效率品种间差异机理初探 被引量：7
11
作者 姚丽贤 张政勤 周文龙 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期93-94,共2页
关键词 花生 磷效率 根系形态 动力学参数 品种差异
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切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的形态学 被引量：9
12
作者 姜宗来 丛兴忠 +4 位作者 李玉泉 张炎 陈双红 张传森 杨向群 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第11期1007-1010,I001,共5页
目的 :观察生理切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗应力能力。方法 :应用内皮细胞与血管平滑肌细胞联合培养模型和流动腔系统 ,以倒置相差显微镜及电镜观察生理切应力作用下的联合培养的内皮细胞的形态及超微结构。 结... 目的 :观察生理切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的抗应力能力。方法 :应用内皮细胞与血管平滑肌细胞联合培养模型和流动腔系统 ,以倒置相差显微镜及电镜观察生理切应力作用下的联合培养的内皮细胞的形态及超微结构。 结果 :0 .2 m N/ cm2和 0 .4m N/ cm2切应力作用 2 4h,绝大多数内皮细胞均沿切应力方向发生重排 ,细胞内肌动蛋白微丝形成与切应力方向平行的应力纤维。 2 4h后 ,内皮细胞未见明显脱落。结论 :联合培养条件下 ,内皮细胞重排程度与切应力大小有关。切应力越大 ,重排程度越高 ,提示内皮细胞抗应力能力增强。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 联合培养 切应力 形态学 人工血管
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一种高纯度和高活力的大鼠脑微血管内皮细胞的提取及原代培养方法 被引量：12
13
作者 查雨锋 张顺 +5 位作者 苏航 刘亭 傅晓钟 董永喜 王爱民 王永林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1616-1619,共4页
目的：建立一种纯度和活力较高、简单实用的大鼠脑微血管内皮细胞分离及原代培养方法,为建立体外血脑屏障提供材料。方法采集1-2周SD大鼠大脑皮质,应用Ⅱ型胶原酶和分散酶/胶原酶连续消化法,筛网过滤法及20%BSA和44%Percoll两次梯度离... 目的：建立一种纯度和活力较高、简单实用的大鼠脑微血管内皮细胞分离及原代培养方法,为建立体外血脑屏障提供材料。方法采集1-2周SD大鼠大脑皮质,应用Ⅱ型胶原酶和分散酶/胶原酶连续消化法,筛网过滤法及20%BSA和44%Percoll两次梯度离心法获得脑微血管段后,接种于培养瓶中进行原代培养,采用倒置显微镜对所培养的细胞进行形态学观察,以Ⅷ因子相关抗原免疫染色法对其进行鉴定。结果体外培养2h后,微血管内皮细胞爬出血管段进行贴壁生长,3～4 d呈典型的铺路卵石样结构,Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测内皮细胞表达呈阳性,可见细胞胞质呈棕色,阳性细胞占99%以上。结论该方法能成功地分离并培养出高纯度的大鼠脑微血管内皮细胞,对体外血脑屏障的建立以及脑微血管内皮细胞的生物学特性和功能的深入研究具有重要意义。 展开更多
关键词 大鼠 脑微血管内皮细胞 原代培养 血脑屏障 形态学 免疫染色
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传统聚落景观形态基因图谱研究——以湘江流域为例 被引量：8
14
作者 印朗川 刘沛林 +3 位作者 李伯华 祁剑青 胡最 邓运员 《地理科学》 CSCD 北大核心 2023年第6期1053-1065,共13页
文化景观是地理学研究的重要对象之一,而聚落为文化景观的重要构成。本文在文化景观基因内涵进行剖析的基础上,结合传统聚落的形态构成及感知结构,从环境、布局、边界、标志物、道路以及住宅6个方面来解析传统聚落的景观形态基因。以湘... 文化景观是地理学研究的重要对象之一,而聚落为文化景观的重要构成。本文在文化景观基因内涵进行剖析的基础上,结合传统聚落的形态构成及感知结构,从环境、布局、边界、标志物、道路以及住宅6个方面来解析传统聚落的景观形态基因。以湘江流域为研究区域,通过对上中下游案例聚落形态基因的提取、转译与比对,形成文化景观形态基因图谱及编码序列图谱。在对编码序列图谱的比较分析中,得出如下结果:①相同景观形态基因。流域内传统聚落多依山而建,村前开塘,河流或溪涧环绕,多祠庙,村内常见桥梁、门楼、水井及古树,民居建筑基本以中轴对称、围合及天井为基本规则;②差异景观形态基因。中上游多为集聚形态,有较为清晰的水体边界,村内常见单栋的书房或书院;上游和下游多使用围墙围合,且民居易纵向延伸,形成多进住宅;在独特性上,上游聚落前多有案山作为屏障,聚落布局顺应山势呈“弧形”拓展,道路网络也多变体,多筑有风水阁塔,以求地方文武兴盛;中游多方正布局,主体路网也呈“网格”状,多设商铺街道;下游聚落离散分布,干枝状连接各处住宅,多南方大屋,布置庭院,两侧布置横屋。最后通过两张图谱呈现了湘江流域内传统聚落文化景观多位形态基因的空间分布规律。 展开更多
关键词 传统聚落 文化景观 形态基因 基因图谱 湘江流域
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森林文化形态的划分问题 被引量：6
15
作者 苏祖荣 《北京林业大学学报（社会科学版）》 2005年第2期18-21,共4页
森林文化是一个整体,不同的森林文化形态构成森林文化的整体。原生态的森林文化一般由树种文化(如松文化、竹文化、茶文化等)形态组成,具有明显类的特征。随着人类社会的发展,森林文化形态突破树种文化的制约,呈现多样化的趋势,如地域... 森林文化是一个整体,不同的森林文化形态构成森林文化的整体。原生态的森林文化一般由树种文化(如松文化、竹文化、茶文化等)形态组成,具有明显类的特征。随着人类社会的发展,森林文化形态突破树种文化的制约,呈现多样化的趋势,如地域的与民族的森林文化形态,城市的与乡村的森林文化形态,外在的与内在的森林文化形态,产业的与非物质的森林文化形态等。森林文化形态的多样性表明:在工业社会背景下,非主流的森林文化并没有退出文化领域,相反,森林文化对工业社会进行渗透和扩张,以其独特的生命力和深邃的意境,在社会主义文化体系中占据一席之地。 展开更多
关键词 森林文化 形态 划分
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三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞的诱导凋亡作用 被引量：7
16
作者 旭东 王建华 胡美玉 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期473-475,F003,共4页
目的　研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞 (PIEC)的诱导凋亡作用。方法　采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化。结果　PIEC细胞与三氧化二砷共孵育... 目的　研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞 (PIEC)的诱导凋亡作用。方法　采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化。结果　PIEC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞变圆、贴壁减少、上浮、细胞空泡样变性 ,脂肪颗粒增多 ;电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象 ,并且在一定的范围内该现象随药物浓度的增加而明显。结论　一定浓度的三氧化二砷能抑制PIEC细胞的生长 ,细胞脂肪变性 ,并诱导细胞凋亡。提示向肿瘤组织局部导入三氧化二砷可以抑制肿瘤局部供血动脉内皮的生长 ,促进供血动脉闭塞。 展开更多
关键词 三氧化二砷 猪髂动脉 内皮细胞 细胞凋亡 抗白血病药
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人皮肤成纤维细胞原代培养及生物学特性 被引量：11
17
作者 王晓华 王扬 +2 位作者 蒋涛 付立业 姜又红 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1041-1044,共4页
目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法,为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指... 目的探索和建立人皮肤成纤维细胞原代培养的方法,为皮肤成纤维细胞在临床医学中的应用提供可靠的科学依据。方法胰蛋白酶消化法分离培养人皮肤成纤维细胞;细胞生长曲线及MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪测定细胞生长周期及细胞增殖指数;倒置显微镜下观察成纤维细胞生长状态;HE染色观察细胞爬片下的形态及着色;免疫组织化学染色观察成纤维细胞中间丝波形蛋白;电子显微镜下观察成纤维细胞超微结构。结果体外用胰蛋白酶消化法建立了人皮肤成纤维细胞;传5代内细胞及传5代内冻存复苏后人皮肤成纤维细胞增殖能力均很强;倒置镜下观察、HE染色、波形蛋白免疫组化染色及电镜下观察鉴定培养细胞的形态及生物学特性符合成纤维细胞。结论本研究确立了体外人皮肤成纤维细胞原代培养。 展开更多
关键词 人 皮肤 原代培养 成纤维细胞 细胞增殖指数 细胞形态学
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生物人工肝乳猪肝细胞的聚集培养、冻存及形态、功能观察 被引量：10
18
作者 秦爱兰 周霞秋 +3 位作者 俞红 谢青 张韡 郭清 《肝脏》 2003年第3期9-11,72,共4页
目的　为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法　采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞 ,并对其活力、单层、聚集培养及冻存复苏后培养的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果　采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为 ( 3 ... 目的　为构建生物人工肝进行肝细胞的准备。方法　采用胶原酶半原位灌流法分离单个乳猪肝细胞 ,并对其活力、单层、聚集培养及冻存复苏后培养的白蛋白、尿素合成功能进行检测。结果　采用本方法从每头乳猪中分离到的单个肝细胞数为 ( 3 .1± 1.5 )× 10 10 ,活性超过 95 %。在加入激素和生长因子的培养基中单层培养时 ,肝细胞功能良好 ,可维持 2周左右 ,而在未加入激素和生长因子的培养基中肝细胞虽能存活 1周 ,但功能于 2 4h后即丧失。球形聚集培养可实现肝细胞的大量培养 ,且生物学活性较单层培养显著提高。冻存复苏后肝细胞活力仍超过 90 % ,肝细胞功能与新鲜分离培养的肝细胞功能间无明显差异。结论　采用胶原酶半原位灌注法所得单个乳猪肝细胞基本满足构建生物人工肝对肝细胞数量的要求。聚集培养接种密度大 ,细胞生物学活性高 ,可用于构建生物人工肝。冻存复苏后肝细胞仍功能良好。 展开更多
关键词 生物人工肝 乳猪 肝细胞 细胞聚集 细胞培养 冷冻保存
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与平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的形态学和生长增殖 被引量：7
19
作者 姜宗来 陈双红 +3 位作者 张炎 张传森 李玉泉 丛兴忠 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期274-276,共3页
目的　探讨平滑肌细胞对内皮细胞形态和增殖的影响 ,为内皮细胞种植的组织工程学提供理论基础。　方法　模拟血管壁的内层结构及内皮细胞平滑肌细胞间的相互影响途径 ,建立内皮细胞与平滑肌细胞联合培养的模型 ,应用形态学、细胞计数对... 目的　探讨平滑肌细胞对内皮细胞形态和增殖的影响 ,为内皮细胞种植的组织工程学提供理论基础。　方法　模拟血管壁的内层结构及内皮细胞平滑肌细胞间的相互影响途径 ,建立内皮细胞与平滑肌细胞联合培养的模型 ,应用形态学、细胞计数对内皮细胞的结构和增殖进行研究。　结果　联合培养的新内皮细胞呈伸长性生长 ,沿细胞长轴排列的微丝增多 ,增殖受抑制。　结论　内皮细胞和平滑肌细胞联合培养的新模型是目前研究这两种细胞间相互影响的最佳方式。联合培养的内皮细胞的形态结构更接近于在体生理状态 。 展开更多
关键词 血管 内皮细胞 平滑肌细胞 形态学
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木霉属12个中国新记录种和3个新组合 被引量：9
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作者 朱兆香 庄文颖 《菌物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1175-1209,共35页
对来自我国不同地区的木霉属采集物进行分离培养和系统分类研究,报道12个中国新记录种:奥地利木霉Trichoderma austriacum,英丹木霉T.britdaniae,蓝木霉T.caerulescens,英治木霉T.eijii,叶生木霉T.foliicola,马地木霉T.margaretense,彼... 对来自我国不同地区的木霉属采集物进行分离培养和系统分类研究,报道12个中国新记录种:奥地利木霉Trichoderma austriacum,英丹木霉T.britdaniae,蓝木霉T.caerulescens,英治木霉T.eijii,叶生木霉T.foliicola,马地木霉T.margaretense,彼得森木霉T.petersenii,假乳白木霉T.pseudolacteum,罗德曼木霉T.rodmanii,罗杰森木霉T.rogersonii,闪碳团木霉T.stilbohypoxyli和沃格玛木霉T.voglmayrii。提供上述种的详细描述及宏观和微观特征的图示。根据现行的国际藻类真菌和植物命名法规,建立3个新组合:鹿角状木霉T.cornu‐damae、粗皱木霉T.corrugatum和拟层孔木霉T.fomitopsis。 展开更多
关键词 培养特性 形态学 分类 新组合
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