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低氧环境下共培养的骨膜细胞和髓核细胞骨向分化能力的研究 被引量:5
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作者 陆海涛 袁峰 +1 位作者 张峻玮 杨宇明 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期839-844,共6页
[目的]探讨低氧环境对体外共培养的骨膜细胞、髓核细胞骨向分化能力的影响。[方法]采用组织块法分离兔骨膜细胞,胰酶、胶原酶消化法获取髓核细胞,传至3代进行共培养实验,实验分为2组:正常氧组(20%O2)、低氧组(5%O2),共培养后用CCK-8检... [目的]探讨低氧环境对体外共培养的骨膜细胞、髓核细胞骨向分化能力的影响。[方法]采用组织块法分离兔骨膜细胞,胰酶、胶原酶消化法获取髓核细胞,传至3代进行共培养实验,实验分为2组:正常氧组(20%O2)、低氧组(5%O2),共培养后用CCK-8检测细胞增殖情况,用AKP试剂盒、BCA试剂盒检测碱性磷酸酶活性,RT-PCR检测骨钙素、Ⅰ型胶原、RUNX2以及HIF-1a mRNA的表达,免疫组化试剂盒检测Ι型胶原的表达,茜素红染色检测钙盐沉积或钙结节。[结果]骨膜细胞和髓核细胞在体外成功分离和培养,共培养后保持了较高的增殖率,经过成骨诱导培养后成功诱导为成骨细胞,细胞增殖曲线为"S"型,两组在1、3、5、7、9 d的光吸收值(OD)比较差异有统计学意义(P<0.05);低氧组的骨钙素、Ⅰ型胶原、RUNX2以及HIF-1a mRNA表达水平高于常氧组(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)活性高于常氧组(P<0.05),细胞成骨染色(茜素红染色、免疫组化)结果显示低氧组较常氧组表达增多。[结论]低氧条件下体外共培养的骨膜细胞和髓核细胞经成骨诱导后向成骨细胞分化的能力更强。 展开更多
关键词 低氧 骨膜细胞 髓核细胞 共培养 成骨分化
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切应力作用下联合培养的血管平滑肌细胞对内皮细胞F-肌动蛋白构筑的影响 被引量:5
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作者 张炎 李玉泉 +2 位作者 王栋 丛兴忠 姜宗来 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期380-383,共4页
目的 探讨切应力作用下联合培养的血管平滑肌细胞对内皮细胞抗应力和粘附能力的影响 ,为改进血管内皮细胞种植的组织工程学技术提供生物力学基础。 方法 应用荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术 ,以静态条件下单独培养的内皮细胞、... 目的 探讨切应力作用下联合培养的血管平滑肌细胞对内皮细胞抗应力和粘附能力的影响 ,为改进血管内皮细胞种植的组织工程学技术提供生物力学基础。 方法 应用荧光标记和激光共聚焦扫描显微镜技术 ,以静态条件下单独培养的内皮细胞、联合培养的内皮细胞以及切应力作用下单独培养的内皮细胞为对照组 ,研究了切应力作用下与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的细胞骨架F 肌动蛋白构筑的变化。 结果 静态条件下单独培养的内皮细胞的F 肌动蛋白排列松散 ,不规则 ,微丝较细 ;联合培养的内皮细胞的F 肌动蛋白微丝明显增多增粗。切应力作用下 ,与血管平滑肌细胞联合培养的内皮细胞的F 肌动蛋白发生重排 ,并形成大量沿切应力方向排列的应力纤维 ,且发生重排的时间明显早于单独培养的内皮细胞。 结论 在切应力作用和血管平滑肌细胞的影响下 ,内皮细胞F 展开更多
关键词 内皮细胞 平滑肌细胞 联合培养 切应力 F-肌动蛋白 组织工程
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黑曲霉与里氏木霉固态混合发酵产β-葡萄糖苷酶 被引量:4
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作者 史通 宋向阳 +1 位作者 欧阳嘉 勇强 《生物加工过程》 CAS CSCD 2013年第5期11-15,共5页
对黑曲霉NL02与里氏木霉RUT-C30固态混合发酵产β-葡萄糖苷酶的发酵培养基进行优化,研究培养基含水率、C源、N源、接种量、温度和2种菌种不同延长接种时间与接种比例对β-葡萄糖苷酶活力的影响。研究表明:麸皮17.5 g、玉米芯7.5 g、(NH4... 对黑曲霉NL02与里氏木霉RUT-C30固态混合发酵产β-葡萄糖苷酶的发酵培养基进行优化,研究培养基含水率、C源、N源、接种量、温度和2种菌种不同延长接种时间与接种比例对β-葡萄糖苷酶活力的影响。研究表明:麸皮17.5 g、玉米芯7.5 g、(NH4)2SO40.40 g、尿素0.37 g、黑曲霉孢子接入量为107个接种到250 mL三角瓶中,温度30℃、摇床转速100 r/min时,里氏木霉以105个孢子与黑曲霉同时接入,每克干曲所得β-葡萄糖苷酶的活力为132.45 IU,较黑曲霉单独培养时的104.35 IU提高了26.94%。 展开更多
关键词 黑曲霉 里氏木霉 混合培养 Β-葡萄糖苷酶
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Transwell小室环境下小鼠不同器官微环境对人舌癌细胞生长的影响 被引量:4
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作者 郭梦竹 牟云 +3 位作者 于大海 梁飞新 温琦涛 王振瑞 《临床口腔医学杂志》 2016年第5期269-272,共4页
目的:探讨骨髓和淋巴结微环境对人舌癌细胞SCC-9生长的影响。方法:利用Transwell小室建立微环境与SCC-9共培养体外模型,分为5组:SCC-9单独培养组(对照组),SCC-9+Balb/c小鼠骨髓共培养组,SCC-9+Balb/c小鼠淋巴结共培养组,SCC-9+Balb/c裸... 目的:探讨骨髓和淋巴结微环境对人舌癌细胞SCC-9生长的影响。方法:利用Transwell小室建立微环境与SCC-9共培养体外模型,分为5组:SCC-9单独培养组(对照组),SCC-9+Balb/c小鼠骨髓共培养组,SCC-9+Balb/c小鼠淋巴结共培养组,SCC-9+Balb/c裸鼠骨髓共培养组,SCC-9+Balb/c裸鼠淋巴结共培养组。采用直接计数法分别于24 h、48 h、72 h、96 h、120 h、144 h检测SCC-9的数量。结果:利用Transwell小室成功构建骨髓、淋巴结微环境与SCC-9共培养体外模型。计数结果显示,SCC-9在Balb/c裸鼠淋巴结共培养组中的增殖程度高于其他4组(P<0.05);在Balb/c裸鼠骨髓,Balb/c小鼠骨髓和淋巴结共培养组中均低于对照组(P<0.05),且抑制程度无明显差异(P>0.05)。结论:不同微环境可能通过不同的肿瘤休眠机制,控制肿瘤细胞的增殖与休眠,最终被动形成淋巴转移的靶向性。 展开更多
关键词 Transwell小室 共培养 舌癌细胞 微环境 肿瘤休眠
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The clinical effects of DC-CIK cells combined with chemotherapy in the treatment of advanced NSCLC 被引量:3
5
作者 Junping Zhang Guanghua Mao +8 位作者 Yaping Han Xiaoling Yang Huijing Feng Linzi Jia Ting Zhi Yan Xiao Libin Zhang Jiangtao Wang Tianliang Shi 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2012年第2期67-71,共5页
Objective: The aim of the study was to evaluate the safety and therapeutic effects of autologous dendritic cells co-cultured with cytokine-induced killer cells (DC-CIK) combined with chemotherapy in advanced non-small... Objective: The aim of the study was to evaluate the safety and therapeutic effects of autologous dendritic cells co-cultured with cytokine-induced killer cells (DC-CIK) combined with chemotherapy in advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) patients. Methods: Fifty patients with advanced NSCLC (stages III to IV), who had received therapies in our Center (Department of Biotherapy, Affiliated to Cancer Hospital of Shanxi Medical University, Taiyuan, China) from August 2008 to January 2010, were treated by DC-CIK + chemotherapy as the combined treatment group; fifty advanced NSCLC patients treated with chemotherapy at the same time served as controls. The immunologic function, short-term therapeutic effects, the 1-year survival rate, the life quality, the chemotherapy side effects were compared between the two groups, the safety and therapeutic effects of DC-CIK cells therapy were observed too. Results: There was no obvious change of subsets of T cells in peripheral blood before and after therapy in DC-CIK + chemotherapy group, and IFN-γ was improved after therapy in this group (P < 0.05); in chemotherapy alone group, the ratios of CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD56+ cells and the secretion of IL-2, TNF-α decreased significantly after therapy (P < 0.05); the ratios of CD3+CD8+, CD3+CD56+ were improved after cell culture (P < 0.05). The disease control rate (DCR) of DC-CIK + chemotherapy group was higher than that in the chemotherapy alone group (78.0% vs 56.0%, P < 0.05); the 1-year survival rates of DC-CIK + chemotherapy group and chemotherapy alone group were 50% and 44% respectively, had no significant difference. Compared with chemotherapy alone group, the occurrence of chemotherapy side effects (including bone marrow suppression, nausea and vomiting, peripheral nerve toxicity) was less in the DC-CIK + chemotherapy group (P < 0.05). The physical and appetite were better in DC-CIK + chemotherapy group after therapy. Conclusion: To compare with simple chemotherapy, DC-CIK + chemotherapy for advanced NSCLC is safe an 展开更多
关键词 autologous dendritic cells co-cultured with cytokine-induced killer cells (DC-CIK) non-small cell lung cancer (NSCLC) adoptive cellular immunotherapy CHEMOTHERAPY
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Effects of Pulsed Electromagnetic Fields of Different Frequencies on the Gene Expression of RANK and NFATc1 in Rat Osteoclasts Co-Cultured with Osteoblasts 被引量:1
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作者 Jian Chen Hui Huang +1 位作者 Jianquan He Zhang Xin 《Journal of Biomedical Science and Engineering》 2017年第1期21-30,共10页
The study investigated the effects of pulsed electromagnetic fields (PEMFs) of different frequencies on the gene expression of receptor activator of nuclear factor kappa B (RANK) and Nuclear factor of activated T-cell... The study investigated the effects of pulsed electromagnetic fields (PEMFs) of different frequencies on the gene expression of receptor activator of nuclear factor kappa B (RANK) and Nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1 (NFATc1) in rat osteoblast and osteoclast co-cultured model. Osteoblast-like cells were isolated from calvariae of Newborn Sprague Dawley rats (SD rats), while osteoclast-like cells were obtained from femora and tibiae of five weeks old SD rats. After 1 days of co-culture, the cells were exposed to premarin (E2) and different frequencies of PEMFs (8 Hz and 16 Hz, respectively) for 3 days. The expression of RANK and NFATc1 mRNA was analysed with realtime quantitative polymerase chain reaction. The gene expression of RANK and NFATc1 in the E2, PEMF with 8 Hz and 16 Hz group was significantly lower than that in the control group respectively. The gene expression of NFATc1 in the PEMF with 8 Hz group was significantly lower than that in the control group and PEMF with 16 Hz group. The study indicates that PEMF with 8 Hz could regulate the gene expression of RANK and NFATc1 in co-cultured model. 展开更多
关键词 PEMFs co-cultured RANK MRNA NFATc1 MRNA
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Preclinical stem cell therapy in Chagas Disease: Perspectives for future research 被引量:1
7
作者 Katherine Athayde Teixeira de Carvalho Eltyeb Abdelwahid +2 位作者 Reginaldo Justino Ferreira Ana Carolina Irioda Luiz Cesar Guarita-Souza 《World Journal of Transplantation》 2013年第4期119-126,共8页
Chagas cardiomyopathy still remains a challenging problem that is responsible for high morbidity and mortality in Central and Latin America. Chagas disease disrupts blood microcirculation via various autoimmune mechan... Chagas cardiomyopathy still remains a challenging problem that is responsible for high morbidity and mortality in Central and Latin America. Chagas disease disrupts blood microcirculation via various autoimmune mechanisms, causing loss of cardiomyocytes and severe impairment of heart function. Different cell types and delivery approaches in Chagas Disease have been studied in both preclinical models and clinical trials. The main objective of this article is to clarify the reasons why the benefits that have been seen with cell therapy in preclinical models fail to translate to the clinical setting. This can be explained by crucial differences between the cellular types and pathophysiological mechanisms of the disease, as well as the differences between human patients and animal models. We discuss examples that demonstrate how the results from preclinical trials might have overestimated the efficacy of myocardial regeneration therapies. Future research should focus, not only on studying the best cell type to use but, very importantly, understanding the levels of safety and cellular interaction that can elicit efficient therapeutic effects in human tissue. Addressing the challenges associated with future research may ensure the success of stem cell therapy in improving preclinical models and the treatment of Chagas disease. 展开更多
关键词 CHAGAS Disease PRECLINICAL stem cell therapy co-cultured TRANSLATION pathophysiologie MYOBLASTS
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The Skin Whitening Effect of Co-Cultured Conditioned Medium: Involvement of Synergy between Stem Cells and Immune Cells
8
作者 Tae-Kyung Ko Hye-Mi Hong +3 位作者 Dong-Soo Kim Da-Young Yoo Sung Hwan Hwang Jung-Hwa Kang 《Journal of Cosmetics, Dermatological Sciences and Applications》 2021年第4期342-355,共14页
Many researchers have described that mesenchymal stem cells conditioned medium and immune cells conditioned medium have a clear whitening effect when they are used as cosmetic ingredients. In this study, we confirmed ... Many researchers have described that mesenchymal stem cells conditioned medium and immune cells conditioned medium have a clear whitening effect when they are used as cosmetic ingredients. In this study, we confirmed the whitening efficacy of various concentrations of immune cells and stem cell conditioned media. The author tried to study a conditioned medium that has a strong whitening effect even with a composition of less than 20% (the most used concentration in cosmetics). Because of the fact that the conditioned medium contains various cytokines and growth factors secreted by stem cells or immune cells, it is known to have effects such as wound healing, antioxidant, and whitening effect. Recently, stem cells have been used not only in the development of cosmetic raw materials but also in skincare procedures, and there are reports being released of cosmetics using immune cells conditioned medium. The concentration-dependent whitening effect equivalently increased as the concentration of the mono-cultured conditioned medium was obtained through the stem cells or immune cells culture. In the case of co-culture, whitening results are like the effect of positive control such as arbutin in the medium carrying only 10% of the co-cultured conditioned medium. It is possible that enhanced whitening efficiency in co-cultured conditioned medium leads to a major innovation in the global cosmetic market. 展开更多
关键词 Stem Cell Immune Cell Natural Killer Cell (NK Cell) conditioned Medium co-cultured Skin Whitening
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混合共培养条件下骨髓间充质干细胞与脂肪间充质干细胞成骨性能分析 被引量:1
9
作者 王小伟 高春生 +1 位作者 晏慧超 李勇光 《实用骨科杂志》 2017年第12期1091-1094,共4页
目的探讨混合共培养条件下骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC)和脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSC)成骨分化潜能变化。方法无菌条件下获取BMSC和ADSC,纯化后倒置显微镜下观察细胞形态,... 目的探讨混合共培养条件下骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSC)和脂肪间充质干细胞(adipose-derived mesenchymal stem cells,ADSC)成骨分化潜能变化。方法无菌条件下获取BMSC和ADSC,纯化后倒置显微镜下观察细胞形态,对两种细胞分别进行成脂肪诱导、成软骨、成骨诱导,分别利用油红O染色、甲苯胺蓝染色、茜素红染色进行鉴定。实验分四组:A组:BMSC+ADSC未诱导(BMSC︰ADSC=1︰1);B组:BMSC诱导组;C组:ADSC诱导组;D组:BMSC+ADSC诱导组(BMSC︰ADSC=1︰1)。诱导组采用成骨诱导液进行成骨诱导,体外培养14d后Real-time PCR检测骨钙素(osteocalcin,OCN)及Runt相关转录因子2(Runx-2)基因表达情况,以及通过Western-blot法检测OCN及Runx-2蛋白表达情况。结果两种细胞在体外诱导后油红O染色、甲苯胺蓝染色、茜素红染色均为阳性,q-PCR结果显示D组OCN及Runx-2表达量明显高于A、B、C组(P<0.05),Westernblot结果显示OCN及Runx-2蛋白表达量D组明显高于其他三组P<0.05)。结论 BMSC与ADSC在体外混合共培养条件下可促进干细胞的成骨性能。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 脂肪间充质干细胞 混合培养 成骨潜能
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P物质在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用 被引量:1
10
作者 李富航 靳宇飞 +1 位作者 毕龙 裴国献 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第19期3615-3618,共4页
目的:观察P物质(substance P,SP)在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用,研究P物质作用于种子细胞的最适浓度指导组织工程骨修复骨缺损。方法:采用新生新西兰大白兔胎兔(雌雄不限)密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞行... 目的:观察P物质(substance P,SP)在BMSCs来源的成骨细胞与内皮细胞体外联合培养中的作用,研究P物质作用于种子细胞的最适浓度指导组织工程骨修复骨缺损。方法:采用新生新西兰大白兔胎兔(雌雄不限)密度梯度离心法分离骨髓间充质干细胞行体外培养和连续传代,获得较纯的BMSCs。取生长状态良好的第3代BMSCs行成骨诱导培养及成血管内皮细胞诱导培养并鉴定。将诱导7 d的两种细胞按2:1比例混合培养,待细胞传至2代加入不同浓度的SP作为实验组,以正常未加SP的细胞培养基为对照组。培养后1、3、5、7 d采用CCK-8法测定细胞增殖并绘制生长曲线,观察细胞生长数量,测定碱性磷酸酶活性及观察细胞周期分布。结果:浓度范围从1×10-12-1×10-6mol/L的SP对联合共培养的成骨细胞增殖和活性都有促进作用,在浓度为1×10-8mol/L对联合共培养的成骨细胞增殖和活性的作用功效最强。结论:在体外直接联合共培养的体系中,SP对新种子细胞促进效果明显,其在1×10-8mol/L对联合共培养的成骨细胞增殖和活性作用最强。 展开更多
关键词 P物质 BMSCS 成骨细胞 内皮细胞 共培养
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Histological observation on acellular nerve grafts co-cultured with Schwann cells for repairing defects of the sciatic nerve 被引量:1
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作者 Xiaohong Sun Jiangyi Tian +2 位作者 Xiaojie Tong Xu Zhang Zheng He 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第1期44-46,共3页
BACKGROUND: Animal experiments and clinical studies about tissue engineering method applied to repair nerve injury mainly focus on seeking ideal artificial nerve grafts, nerve conduit and seed cells. Autologous nerve... BACKGROUND: Animal experiments and clinical studies about tissue engineering method applied to repair nerve injury mainly focus on seeking ideal artificial nerve grafts, nerve conduit and seed cells. Autologous nerve, allogeneic nerve and xenogeneic nerve are used to bridge nerve defects, it is one of the methods to promote the repair of nerve injury by culturing and growing Schwann cells, which can secrete various neurotrophic factor activities, in the grafts. OBJECTIVE : To observe the effect of acellular nerve grafts co-cultured with Schwann cells in repairing defects of sciatic nerve. DESIGN: An observational comparative study.SETTING: Tissue Engineering Laboratory of China Medical University.MATERIALS: The experiment was carried out in the Tissue Engineering Laboratory of China Medical University between April 2004 and April 2005. Forty neonatal Sprague-Dawley rats of 5-8 days (either males or females) and 24 male Wistar rats of 180-220 g were provided by the experimental animal center of China Medical University. METHODS: ① Culture of Schwann cells: The bilateral sciatic nerves and branchial plexus were isolated from the 40 neonatal SD rats. The sciatic nerves were enzymatically digested with collagenase and dispase, isolatd, purified and cultured with the method of speed-difference adhersion, and identified with the SABC immunohistochemical method. ② Model establishment: In vitro Schwann cells were microinjected into 10-mm long acellular nerve grafts repairing a surgically created gap in the rat sciatic nerve. According to the different grafted methods, the animals were randomly divided into three groups: autografts (n=8), acellular nerve grafts (n=8), or acellular nerve grafts with Schwann cells (n=8). ③ The regenerated nerve fiber number and average diameter of myeline sheath after culture were statistically anlayzed. MAIN OUTCOME MEASURES: ① The regenerated nerve ultrastructure, total number and density of myelinated nerve fibers, and the thickness of myeline 展开更多
关键词 Histological observation on acellular nerve grafts co-cultured with Schwann cells for repairing defects of the sciatic nerve
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小鼠骨髓间充质干细胞与脑胶质细胞及基底膜细胞共培养后向毛细胞样细胞分化 被引量:1
12
作者 杨文飞 黄建民 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第3期283-290,共8页
目的探讨体外建立诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向毛细胞分化的方法。方法分离培养小鼠骨髓间充质干细胞、脑胶质细胞(ASTs)与基底膜细胞(BAMCs)至第3代。取MSCs与ASTs共培养于DMEM/F12/RA+10%FBS培养基中。7 d后免疫荧光法检测Nesti... 目的探讨体外建立诱导小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)向毛细胞分化的方法。方法分离培养小鼠骨髓间充质干细胞、脑胶质细胞(ASTs)与基底膜细胞(BAMCs)至第3代。取MSCs与ASTs共培养于DMEM/F12/RA+10%FBS培养基中。7 d后免疫荧光法检测Nestin的表达。所得细胞再与BAMCs共培养于DMEM/F12+10%FBS中。14 d后免疫荧光法检测诱导后细胞中毛细胞的标志物(Math1与MyosinVIIa)的表达。RT-PCR检测毛细胞的标志物(Math1与MyosinVIIa)mRNA的表达。结果经ASTs共培养后的MSCs表达Nestin。Nestin阳性细胞与BAMCs共培养后部分细胞表达Math1和MyosinVIIa的蛋白与mRNA。结论 MSCs经与ASTs及BAMCs共培养后,部分细胞被诱导分化为毛细胞样细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 毛细胞 共培养
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量子点标记共培养睾丸体细胞体外培养观察 被引量:1
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作者 李鸣 王晓云 +3 位作者 皮庆猛 周广东 戴海英 邢新 《中国美容整形外科杂志》 CAS 2011年第3期164-167,共4页
目的 初步验证量子点能否对共培养睾丸体细胞进行标记,为睾丸体细胞的体内外研究提供一种细胞损伤小,且简便、有效的标记手段.方法 取雄性Wistar大鼠的睾丸组织小块,胶原酶消化,差速贴壁法收集睾丸体细胞,取第一代睾丸体细胞以0.25%胰... 目的 初步验证量子点能否对共培养睾丸体细胞进行标记,为睾丸体细胞的体内外研究提供一种细胞损伤小,且简便、有效的标记手段.方法 取雄性Wistar大鼠的睾丸组织小块,胶原酶消化,差速贴壁法收集睾丸体细胞,取第一代睾丸体细胞以0.25%胰酶蛋白酶-0.02%EDTA消化,制备单细胞悬液,与量子点共同孵育2h后贴壁及传代培养,共聚焦荧光显微镜动态观察细胞生长、增殖情况.结果 相差显微镜下观察,标记细胞形态无明显改变,荧光显微镜下可见摄取量子散在分布于细胞内,主要集中于细胞核周围,分裂细胞及增殖活跃细胞摄取量明显高于老化细胞.传代后仍可见细胞内的量子点分布,荧光强度未见明显衰减.结论 量子点能够被共培养睾丸体细胞摄取,且摄取速度快,荧光显微镜下易于观察.量子点标记法对共培养细胞损伤小,操作简便易行,是共培养睾丸体细胞标记的理想选择之一. 展开更多
关键词 量子点 共培养 睾丸体细胞 细胞标记
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CD—CIK细胞对急性白血病细胞体外杀伤作用的研究 被引量:1
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作者 张小艳 魏绪仓 +1 位作者 杨娣娣 韩秀蕊 《现代检验医学杂志》 CAS 2009年第4期32-35,共4页
目的探讨树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖能力、免疫表型、分泌细胞因子水平以及抗白血病细胞作用的影响。方法健康人外周血单个核细胞诱导Dc和CIK细胞,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用台盼蓝活细... 目的探讨树突状细胞(DC)对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)增殖能力、免疫表型、分泌细胞因子水平以及抗白血病细胞作用的影响。方法健康人外周血单个核细胞诱导Dc和CIK细胞,将DC与CIK共培养,以CIK细胞单独培养为对照。用台盼蓝活细胞计数计算细胞扩增倍数,MTT法测定杀伤活性,流式细胞术分析免疫表型,ELISA双抗体夹心法检测分泌干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素12(1L-12)的水平。结果DC—CIK细胞增殖能力明显高于CIK细胞(P〈0.05);DC,CIK细胞共培养后,CD3+CD8+,CD3+CD56+阳性细胞比率较同条件下CIK细胞组显著增多(P〈0.05);共培养3d,DC—CIK细胞上清液中IL-12,INF--/分泌量均比CIK细胞单独培养的分泌量高(P〈0.01,P〈0.05);在5:1~40:1的效靶比范围内,DC—CIK细胞对白血病细胞的杀伤率显著高于CIK细胞(P〈0.05),且杀伤率与效靶比呈正相关。结论DC—CIK细胞增殖能力和抗白血病活性显著高于CIK细胞,DC—CIK细胞可作为-种临床有效的抗白血病免疫治疗策略。 展开更多
关键词 树突状细胞 细胞因子诱导的杀伤细胞 共培养 白血病 杀伤活性
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Expressions of Collagen I and III in Mesenchymal Stem Cells Co-cultured with Ligament Fibroblasts
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作者 Said SLIMANI 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第S1期75-76,共2页
关键词 III Expressions of collagen I and III in Mesenchymal Stem Cells co-cultured with Ligament Fibroblasts
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巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶来源的NO对共培养HL-60细胞凋亡的影响
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作者 张申 尹利华 卫涛涛 《怀化医专学报》 2006年第2期6-11,共6页
目的 研究巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)来源的一氧化氮(NO)时共培养HL-60细胞凋亡的影响。方法 以脂多糖(LPS)和у-干扰素(INF-у)诱导RAW264.7巨噬细胞iNOS基因的表达产生过量NO为实验模型,通过噻唑蓝(MTT)试验、... 目的 研究巨噬细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)来源的一氧化氮(NO)时共培养HL-60细胞凋亡的影响。方法 以脂多糖(LPS)和у-干扰素(INF-у)诱导RAW264.7巨噬细胞iNOS基因的表达产生过量NO为实验模型,通过噻唑蓝(MTT)试验、蛋白质印迹分析、荧光分析、流式细胞术(FCM)、透射电镜和DNA琼脂糖凝肢电泳等分析技术.观察NO对共培养的HL-60细胞存活率、Bcl-2和Bax蛋白表达、Caspase-3活性和细胞凋亡(apoptosis)的影响。结果 RAw264.7巨噬细胞中iNOS来源的NO对共培养HL一60细胞能造成氧化损伤,降低细胞的存活率;Bel一2表达明显下降。而Bax表达增加;激活Caspase-3和促进DNA的降解。结论 巨噬细胞中iNOS来源的NO在诱导细胞凋亡中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 诱导型一氧化氮合酶 一氧化氮 共培养 细胞凋亡 巨噬细胞 半胱氨酰天冬氨酸 特异性蛋白酶-3
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不同状态巨噬细胞对RSC96细胞NGF及Laminin表达的影响
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作者 赵利 曹欣 +6 位作者 欧阳钧 余磊 张贤祚 刘若岩 薛旭凯 卢智鹇 秦建强 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第3期321-324,共4页
目的研究不同活化状态的巨噬细胞与雪旺细胞株(RSC96)共培养条件下雪旺细胞神经营养因子(NGF)及层粘连蛋白(Laminin,LN)的表达情况。方法利用Transwell建立大鼠腹膜腔巨噬细胞和RSC96细胞的共培养体系,分别将RSC96细胞与未激活巨噬细胞... 目的研究不同活化状态的巨噬细胞与雪旺细胞株(RSC96)共培养条件下雪旺细胞神经营养因子(NGF)及层粘连蛋白(Laminin,LN)的表达情况。方法利用Transwell建立大鼠腹膜腔巨噬细胞和RSC96细胞的共培养体系,分别将RSC96细胞与未激活巨噬细胞、激活态巨噬细胞共培养;采用Real-time PCR检测、Western blot分析、以及酶联ELISA测定等研究手段,比较各组NGF及LN的表达差异。结果与未激活巨噬细胞共培养组RSC96细胞NGF表达增强,激活态组表达明显增强;而各组LN表达差异不明显。结论巨噬细胞对RSC96细胞NGF表达有促进作用,受其活化状态的影响,激活状态的巨噬细胞的促进作用更明显;对影响RSC96细胞迁移功能的LN的表达作用不明显,无统计学意义,有待进一步研究。 展开更多
关键词 RSC96细胞 巨噬细胞 NGF LAMININ 共培养
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综合养殖池塘中三角帆蚌和鱼类肠道细菌的组成 被引量:25
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作者 张涵 周涛 王岩 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期824-835,共12页
采用PCR-DGGE(PCR-denaturing gradient gel electrophoresis)方法研究了综合养殖池塘中三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、鳊(Parabramis pekinensis)、银鲫(Carassius auratus gibelio)、青鱼(Mylopharyn... 采用PCR-DGGE(PCR-denaturing gradient gel electrophoresis)方法研究了综合养殖池塘中三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、鳊(Parabramis pekinensis)、银鲫(Carassius auratus gibelio)、青鱼(Mylopharyngodon piceus)和鳙(Aristichthys nobilis)的肠道细菌组成,并分析了水体中的浮游细菌对鱼、蚌肠道细菌的影响。研究结果表明,三角帆蚌和混养鱼类肠道细菌属于厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、蓝细菌(Cyanobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)。其中,三角帆蚌肠道优势菌群为不动杆菌属(Acinetobacter)、志贺氏菌属(Shigella)和分枝杆菌属(Mycobacterium),草鱼肠道优势菌群为梭菌属(Clostridium),鳊肠道优势菌群为梭菌属和假单胞菌属(Pseudomonas),银鲫肠道优势菌群为不动杆菌属和志贺氏菌属,青鱼肠道优势菌群为梭菌属和不动杆菌属,鳙肠道优势菌群为不动杆菌属和弧菌属(Vibrio)。三角帆蚌与银鲫肠道细菌谱带相似性较高,草鱼与鳊肠道细菌谱带相似性较高,表明鱼类肠道细菌组成特点与食性存在一定的关系。水体浮游细菌优势菌群为类芽孢杆菌属(Paenibacillus)。三角帆蚌及鱼类肠道细菌群落与水体浮游细菌群落组成相似性较低,表明水体浮游细菌对三角帆蚌和鱼类肠道细菌优势菌群的影响有限。 展开更多
关键词 三角帆蚌 混养鱼类 肠道细菌 浮游细菌 变性梯度凝胶电泳(DGGE)
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当归补血汤抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞的增殖及其分子机制 被引量:25
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作者 张三印 冯蓓 杨苗 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第2期163-167,共5页
目的:通过当归补血汤对与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖及分子表达的研究,探讨当归补血汤抑制肿瘤血管生成的可能机制。方法:应用Transwell建立与肿瘤共培养血管内皮细胞模型(以下简称共培养模型),在不同剂量当归补血汤的干预下,通过CCK-... 目的:通过当归补血汤对与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖及分子表达的研究,探讨当归补血汤抑制肿瘤血管生成的可能机制。方法:应用Transwell建立与肿瘤共培养血管内皮细胞模型(以下简称共培养模型),在不同剂量当归补血汤的干预下,通过CCK-8法观察与肿瘤共培养血管内皮细胞的增殖作用;通过ELISA法检测与肿瘤共培养血管内皮细胞血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR1,VEGFR2,sVEGFR1,sVEGFR2)的表达。结果:当归补血汤能够促进正常血管内皮细胞增殖,与正常组比较,高、中、低剂量组均有差异性(P<0.01,P<0.01,P<0.05);抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞增殖,且与剂量呈正相关,与共培养模型组比较,各剂量组均有显著差异(P<0.01)。当归补血汤各剂量组均能促进与肿瘤共培养血管内皮细胞VEGF的表达;抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞VEGFR1,VEGFR2的表达,且与剂量呈正相关;促进与肿瘤共培养血管内皮细胞sVEGFR1,sVEGFR2的表达。结论:当归补血汤能够抑制与肿瘤共培养血管内皮细胞的增殖,其机制可能与其调节VEGF与VEGFR和sVEGFR两种受体的结合有关。 展开更多
关键词 当归补血汤 与肿瘤共培养血管内皮细胞 细胞增殖 分子机制
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淫羊藿苷对SD大鼠成骨-破骨细胞共育体系的影响 被引量:16
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作者 王建钧 张晓荣 李晓冬 《江西中医学院学报》 2010年第2期75-77,共3页
目的:检测成骨-破骨细胞共育体系中应用淫羊藿苷后碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的变化,探讨淫羊藿苷的作用机理。方法:建立成骨-破骨细胞共育体系,分为淫羊藿组、空白对照组和阳性对照三组,每组于同一培养板重复6孔,分... 目的:检测成骨-破骨细胞共育体系中应用淫羊藿苷后碱性磷酸酶(ALP)和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)的变化,探讨淫羊藿苷的作用机理。方法:建立成骨-破骨细胞共育体系,分为淫羊藿组、空白对照组和阳性对照三组,每组于同一培养板重复6孔,分别检测上清液中ALP和TRACP的含量,并进行组内和组间的统计学分析。结果:经鉴定成功培养成骨细胞和破骨细胞,并建立成骨-破骨细胞共育体系,测定结果显示,在ALP活性中,三组间比较差异显著(P<0.01),LSD法组内比较淫羊藿苷组与空白对照组差异显著(P<0.01);淫羊藿苷组与阳性对照组无显著性差异(P=0.546);在TRACP活性中:三组间比较差异显著(P<0.01),LSD法比较淫羊藿苷组与空白对照组比较差异显著(P<0.01);淫羊藿苷组与阳性对照组无显著性差异(P=0.10)。结论:淫羊藿苷可以增强共育体系中成骨细胞的活性,抑制破骨细胞的功能。 展开更多
关键词 成骨-破骨细胞共育体系 淫羊藿苷 ALP TRACP
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