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动物细胞培养过程中的细胞凋亡 被引量:17
1
作者 陈昭烈 《生物工程进展》 CSCD 1998年第6期17-20,共4页
细胞培养过程中的细胞凋亡是细胞受环境因素的影响而发生的现象。随着对细胞凋亡的分子生物学和细胞生物学了解的深入,显示了有效地控制动物细胞培养中细胞凋亡的巨大潜力。包括采用DNA重组技术把抗细胞凋亡的基因导入细胞和在培基... 细胞培养过程中的细胞凋亡是细胞受环境因素的影响而发生的现象。随着对细胞凋亡的分子生物学和细胞生物学了解的深入,显示了有效地控制动物细胞培养中细胞凋亡的巨大潜力。包括采用DNA重组技术把抗细胞凋亡的基因导入细胞和在培基中加入具有抗细胞凋亡的生存因子或化合物等手段已用于控制细胞培养过程中的细胞凋亡。这些技术将大大延长细胞达到饱和密度后的培养时间,提高细胞培养系统的生产效率。 展开更多
关键词 动物细胞 细胞培养 细胞凋亡
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淡水白鲳细胞建系及其生长温度特性的研究 被引量:10
2
作者 张铭 陈荪红 赵小立 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期105-108,共4页
Four cell lines originated from embryo,caudal fin,anal fin and snout of Colossoma brachypomum were established,and subcultured for 70,47,45 and 40 passages to the present.The results of the experiment indicated that t... Four cell lines originated from embryo,caudal fin,anal fin and snout of Colossoma brachypomum were established,and subcultured for 70,47,45 and 40 passages to the present.The results of the experiment indicated that the four cell lines were fibroblast\|like diploid cells,and the model number of their chromosome is 54.These cell lines could grow under temperature of 20-35℃,and its optimum temperature was 27-30℃.The cells grew slowly at 20℃,stopped growth at 15℃,and died below 10℃.This indicated that the growth temperature of the these cell lines was coincident with that of fish.In addition,the attachment time,doubling time,mitotic index,passage survival rate and cell cycle were determined and compared. 展开更多
关键词 淡水白鲳 细胞系 胚胎 动物细胞培养
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骨髓基质干细胞移植治疗兔股骨头缺血性坏死的实验研究 被引量:19
3
作者 刘长安 王江泳 +1 位作者 张卫平 步建立 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期58-60,I0003,共4页
[目的]探讨骨髓基质干细胞移植对股骨头缺血性坏死的治疗作用和修复机理,为临床应用提供依据。[方法]24只新西兰大白兔随机分为两组,A组为髓芯减压组,B组为干细胞移植组。采用液氮冷冻法造模。A组钻孔后植入空白明胶海绵,B组钻孔后植入... [目的]探讨骨髓基质干细胞移植对股骨头缺血性坏死的治疗作用和修复机理,为临床应用提供依据。[方法]24只新西兰大白兔随机分为两组,A组为髓芯减压组,B组为干细胞移植组。采用液氮冷冻法造模。A组钻孔后植入空白明胶海绵,B组钻孔后植入复合有骨髓基质干细胞的明胶海绵。术后每组分别于2、4、6、8周各处死3只动物,做X线及组织学检查。[结果](1)X线结果:2周时A、B组钻孔区均呈低密度,4周时A组钻孔边缘密度增加,B组整个钻孔区密度增加,8周时A组钻孔区均呈低密度,边缘形成硬化线,B组钻孔区形成骨小梁结构。(2)组织学结果:2周时A组钻孔区出现少许炎症细胞,边缘出现较多成骨细胞并有骨组织形成,至8周时,钻孔区内形成骨髓组织,只在边缘形成骨小梁结构。2周时B组钻孔区有大量的成骨细胞,边缘有较多骨组织形成,4周时钻孔区内充满新生骨小梁结构,8周时钻孔区内骨小梁成熟,小梁有骨髓组织填充。[结论]骨髓基质干细胞对兔股骨头缺血性坏死有良好的修复作用。 展开更多
关键词 股骨头缺血性坏死 动物模型 骨髓基质干细胞 细胞培养 移植
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动物细胞培养及微载体技术研究进展 被引量:20
4
作者 刘轶 朱国强 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期203-206,共4页
动物细胞培养作为生化工程学科领域中迅速发展起来的生物技术与化学工程结合的新型学科,无论在基础研究和应用研究方面都越来越受到生物技术界的重视,现已成为生化工程学科主要前沿学科之一。文中介绍了动物细胞培养技术,并就微载体细... 动物细胞培养作为生化工程学科领域中迅速发展起来的生物技术与化学工程结合的新型学科,无论在基础研究和应用研究方面都越来越受到生物技术界的重视,现已成为生化工程学科主要前沿学科之一。文中介绍了动物细胞培养技术,并就微载体细胞培养进行了详细的论述。 展开更多
关键词 动物 细胞培养 微载体 生化工程
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多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA 被引量:17
5
作者 胡显文 肖成祖 +5 位作者 李佐虎 郭志霞 高丽华 张正光 胥照平 王菲 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期387-391,共5页
在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,... 在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,细胞密度可维持在 (1 3~ 2 6 )× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 90 %以上。在7 5L搅拌罐中培养细胞 ,利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术 ,可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响 ,在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在 6 7d连续换液培养中 ,细胞最高密度为 2 6 4× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 95 %以上。与稳压操作相比 ,利用周期变压刺激技术可提高产量 10 %~ 2 0 % ,且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率 ,利用 4步纯化工艺 ,从含u PA约 135g的 2 10 0L上清中获得约 80 gu PA(单链比例约为 90 % )。 展开更多
关键词 动物细胞培养 微载体更新 U-PA RCHO细胞
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5例伴有t(16;21)(p11;q22)急性白血病的临床和实验研究 被引量:13
6
作者 吴亚芳 薛永权 +1 位作者 潘金兰 马勤芬 《中华医学遗传学杂志》 EI CAS CSCD 2003年第2期171-173,共3页
目的 报告 5例伴有t( 16;2 1) ( p11;q2 2 )的急性白血病和其中 1例的染色体涂染分析。 方法骨髓细胞 2 4h培养后按常规方法制备染色体 ,采用R显带技术进行染色体核型分析 ,并以 16号和 2 1号整条染色体涂染探针对其中 1例患者进行染... 目的 报告 5例伴有t( 16;2 1) ( p11;q2 2 )的急性白血病和其中 1例的染色体涂染分析。 方法骨髓细胞 2 4h培养后按常规方法制备染色体 ,采用R显带技术进行染色体核型分析 ,并以 16号和 2 1号整条染色体涂染探针对其中 1例患者进行染色体涂染检测。结果  5例均显示t( 16;2 1) ( p11;q2 2 ) ,占 15年来进行染色体检查的急性非淋巴细胞白血病患者总数的 0 3 % ( 5 /14 48)。 5例均无白血病细胞吞噬其他血细胞现象。 1例患者的染色体涂染分析证实了 16号和 2 1号染色体之间发生了相互易位。结论 t( 16;2 1)是急性非淋巴细胞白血病中 1种少见的非随机的染色体易位 ,代表了 1种独特的白血病亚型。染色体涂染技术是比常规核型分析更为可靠的检测该易位的手段。 展开更多
关键词 细胞遗传学 染色体涂染 急性白血病
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重组CHO细胞培养过程中氨对细胞代谢的影响 被引量:10
7
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期304-309,共6页
研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批... 研究了重组CHO细胞批培养过程中 ,氨浓度对细胞的葡萄糖、谷氨酰胺及其它氨基酸代谢的影响。表明 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数随着氨浓度的增加而降低 ,起始氨浓度为 5 6 6mmol L的批培养过程与起始氨浓度为 0 2 1mmol L的批培养过程相比 ,细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的得率系数分别下降了 78%和 74% ,细胞对其它氨基酸的得率系数也分别下降了 5 0 %~ 70 %。氨浓度的增加明显地改变了细胞的代谢途径 ,葡萄糖代谢更倾向于厌氧的乳酸生成。在谷氨酰胺的代谢过程中 ,谷氨酸经谷氨酸脱氢酶进一步生成α 酮戊二酸的过程受到了氨的抑制 ,而氨对谷氨酸经谷氨酸转氨酶反应生成α 酮戊二酸的过程有促进作用 ,但总体上谷氨酸进一步脱氨生成α 展开更多
关键词 动物细胞培养 细胞代谢 CHO细胞 葡萄糖 谷氨酰胺
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动物细胞培养生物反应器研究进展 被引量:10
8
作者 张前程 张凤宝 +2 位作者 姚康德 张国亮 张晓萍 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第8期560-563,共4页
介绍了搅拌式生物反应器、非搅拌式生物反应器、粘性泵生物反应器、膜式旋转细胞培养器、旋转式细胞 /组织三维培养器以及脉冲式生物反应器 ,其中有新型的 ,也有改进传统型的。
关键词 研究进展 动物细胞 动物细胞培养 生物反应器
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TGF-β1对醛糖还原酶在大鼠系膜细胞及人肾小球肾炎中表达的影响 被引量:13
9
作者 蒋涛 刘国元 +2 位作者 赵仲华 张秀荣 张农 《复旦学报(医学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期565-569,F005,共6页
目的 探讨转化生长因子 β1(tranforminggrowthfactor betal,TGF β1)对其反应性基因产物醛糖还原酶(aldosereductase ,AR)在大鼠系膜细胞中表达的影响及两者在人肾小球肾炎中的表达及其相互关系。方法 采用RT PCR、Westernblot法观... 目的 探讨转化生长因子 β1(tranforminggrowthfactor betal,TGF β1)对其反应性基因产物醛糖还原酶(aldosereductase ,AR)在大鼠系膜细胞中表达的影响及两者在人肾小球肾炎中的表达及其相互关系。方法 采用RT PCR、Westernblot法观察外源性TGF β1对大鼠系膜细胞中AR表达的影响 ;以 12例肾小球轻微病变作为对照 ,对各种不同组织学类型的IgA肾病 (15例 ) ,膜性肾炎 (14例 ) ,局灶节段增生性肾炎 (12例 ) ,狼疮性肾炎 (14例 ) ,新月体性肾炎 (9例 )的人肾穿刺活检标本 ,应用免疫组织化学ABC方法分别观察TGF β1和AR在肾炎组织中的表达 ,并对其染色强度作图像定量分析。结果 外源性TGF β1作用后 ,大鼠系膜细胞中AR的mRNA表达与蛋白水平升高 ,并显示出一定的时间与浓度依赖性。各型肾炎中TGF β1的表达均显著高于对照组 ;除IgA肾病之外的各型肾炎中AR的表达均显著高于对照组 ,AR的表达与TGF β1表达之间具有显著的相关性。结论 TGF β1相关反应性基因产物AR的表达与TGF β1的作用密切相关 。 展开更多
关键词 TGF-Β1 表达 AR 系膜细胞 大鼠 肾小球肾炎 醛糖还原酶 产物 标本 RT-PCR
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豚鼠生殖器疱疹模型及细胞培养法观察中药抗病毒胶囊的抗病毒作用 被引量:11
10
作者 范瑞强 李红毅 +2 位作者 谢长才 国维 朱宇同 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期198-201,共4页
目的探讨抗病毒胶囊治疗生殖器疱疹的作用机理。方法用雌性豚鼠生殖道单纯疱疹病毒( HSV) 2型感染的模型,采取抗病毒胶囊内服,观察豚鼠阴道内病毒滴度、外阴症状;用体外细胞培养法观察抗病毒胶囊对 HSV-2的直接灭活和三种给药途径... 目的探讨抗病毒胶囊治疗生殖器疱疹的作用机理。方法用雌性豚鼠生殖道单纯疱疹病毒( HSV) 2型感染的模型,采取抗病毒胶囊内服,观察豚鼠阴道内病毒滴度、外阴症状;用体外细胞培养法观察抗病毒胶囊对 HSV-2的直接灭活和三种给药途径下对 HSV-2的抑制作用。结果抗病毒胶囊组豚鼠阴道内病毒滴度与阿昔洛韦组比较差异无显著性( P >0.05);外阴症状评分在第 2、 3、 5、 7、 8天显著低于生理盐水对照组( P< 0.05),与阿昔洛韦组大致相同( P >0.05);细胞培养结果:抗病毒胶囊 1号、 2号对 HSV-2的最低有效抑制浓度分别 0.390625 mg/mL和 1.5625 mg/mL。结论中药抗病毒胶囊在动物体内和体外对 HSV-2均有抑制作用。 展开更多
关键词 疱疹 生殖器 中草药 疾病模式 细胞培养 抗病毒胶囊 GH
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大鲵输卵管的基本组织结构及其发育变化 被引量:11
11
作者 杨楚彬 罗凯坤 +3 位作者 周海燕 周工健 刘筠 罗琛 《湖南师范大学自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2003年第1期64-68,共5页
研究了大鲵在性未成熟期、性成熟后的产卵期以及退化期的输卵管的基本组织结构和在不同发育阶段的结构和形态变化 .结果表明 :1)不同时期的输卵管壁均由黏膜、肌层和浆膜 3层构成 ;其主要区别在于黏膜的固有层是否形成分泌腺 ;2 )产卵... 研究了大鲵在性未成熟期、性成熟后的产卵期以及退化期的输卵管的基本组织结构和在不同发育阶段的结构和形态变化 .结果表明 :1)不同时期的输卵管壁均由黏膜、肌层和浆膜 3层构成 ;其主要区别在于黏膜的固有层是否形成分泌腺 ;2 )产卵期输卵管明显分成伞部、中段和直段 ,其末端以尖端突入泄殖腔 ;3)在尖端突的横切面上首次发现有单管腺 . 展开更多
关键词 大鲵 输卵管 组织结构 发育变化 尖端突 产卵期 退化期 两栖类
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纤维素多孔微载体的制备及其用于动物细胞培养 被引量:10
12
作者 胡显文 肖成祖 +1 位作者 黄子才 张正光 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期93-97,共5页
将纤维素铜氨溶液喷洒至-40℃的硅油:正己烷=1:4的冷冻液中形成含冰晶的微球,用-30℃、40%的H2SO4再生纤维素,并用EDAE盐酸盐修饰其表面,制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿... 将纤维素铜氨溶液喷洒至-40℃的硅油:正己烷=1:4的冷冻液中形成含冰晶的微球,用-30℃、40%的H2SO4再生纤维素,并用EDAE盐酸盐修饰其表面,制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿激酶原(ProUK)的重组CHO细胞,在100mL搅拌瓶中换液培养25d,细胞最高密度为63×106/mL,尿激酶原最高活性为2325IU/mL,共获287mg产品。之后转入1000mL搅拌瓶中培养,可观察到细胞可从种子微载体中自动转移到新微载体中生长繁殖直至所有微载体中都长有细胞。在25d二级培养中,细胞最高密度为73×106/mL,尿激酶原最高活性为3108IU/mL,共获含353mg尿激酶原的上清137L。在培养后期换用无血清培养基培养,细胞生长及蛋白表达水平正常。 展开更多
关键词 多孔微载体 动物细胞培养 尿激酶原
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接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响 被引量:3
13
作者 孙祥明 谭文松 +2 位作者 张元兴 华平 周亚竞 《华东理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期367-370,共4页
研究了接种密度对Vero细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于1.0×105cels/mgMC时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进... 研究了接种密度对Vero细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于1.0×105cels/mgMC时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Vero细胞培养过程,适宜的表面接种密度为3×104~7×104cels/mgMC,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。实验结果还表明Vero细胞在CT-3微载体表面呈单层生长且不受表面限制,所达到的最高密度约为5.2×105cels/mgMC。 展开更多
关键词 VERO细胞 细胞培养 接种密度 微载体表面生长
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家兔子宫内膜细胞和平滑肌细胞的分离培养及鉴定 被引量:7
14
作者 李瑞梅 陈秀荔 +1 位作者 王海滨 靳亚平 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第6期19-23,共5页
为了建立一种高效的子宫细胞分离培养方法,用酶消化、过滤、离心与差速贴壁纯化相结合的方法分离培养家兔子宫细胞,分别以上皮细胞角蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白等为抗原的免疫荧光对分离培养的细胞进行鉴定,并采用流式细胞仪分... 为了建立一种高效的子宫细胞分离培养方法,用酶消化、过滤、离心与差速贴壁纯化相结合的方法分离培养家兔子宫细胞,分别以上皮细胞角蛋白、波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白等为抗原的免疫荧光对分离培养的细胞进行鉴定,并采用流式细胞仪分析细胞纯度。结果表明,家兔子宫内膜上皮细胞培养24 h后大部分贴壁,培养3 d左右形成单层细胞集落,呈角蛋白阳性,细胞圆形或椭圆形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达96%以上;子宫内膜基质细胞培养0.5 h后即有贴壁,培养2 d后呈单层细胞集落状生长,呈波形蛋白阳性,细胞多边形或梭形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达95%以上;平滑肌细胞培养24 h后大部分贴壁,6-7 d融合成片,呈α-平滑肌肌动蛋白阳性,细胞大都长梭形,胞质呈红色,核呈蓝色,纯度达98%以上。说明该方法能够成功分离并得到高产量、高纯度、高增殖能力的子宫内膜细胞及平滑肌细胞。 展开更多
关键词 动物细胞培养 子宫内膜上皮细胞 子宫内膜基质细胞 子宫平滑肌细胞 家兔
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乙醇肝损伤小鼠肝脏的基因表达谱研究 被引量:7
15
作者 韩凤梅 程明 +1 位作者 夏启松 陈勇 《中国药学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1349-1352,共4页
目的研究乙醇肝损伤小鼠肝组织的基因表达谱,筛选乙醇肝损伤相关基因,并探讨其肝损伤机制。方法①将实验小鼠分为正常对照组与乙醇肝损伤组,分别提取2组小鼠肝脏mRNA,经反转录后分别用Cy3,Cy5荧光标记,获得2组动物来源的cDNA探针;②cDN... 目的研究乙醇肝损伤小鼠肝组织的基因表达谱,筛选乙醇肝损伤相关基因,并探讨其肝损伤机制。方法①将实验小鼠分为正常对照组与乙醇肝损伤组,分别提取2组小鼠肝脏mRNA,经反转录后分别用Cy3,Cy5荧光标记,获得2组动物来源的cDNA探针;②cDNA探针与联合基因公司BiostarM-141S小鼠基因表达谱芯片杂交,结果由扫描仪扫描并用统计软件进行分析。结果与正常对照组相比,乙醇肝损伤组有117条基因发生差异性表达(0.83%),其中46条基因表达上调,另外71条基因表达下调。结论利用表达谱芯片结合实验动物模型能大规模、高通量地研究乙醇肝损伤相关基因,对进一步阐明乙醇对肝脏的损伤机制具有重要的意义。 展开更多
关键词 小鼠 乙醇肝损伤 基因芯片 基因表达谱
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脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞共同培养建立血脑屏障模型 被引量:3
16
作者 田成林 蒲传强 +1 位作者 刘洁晓 张凤英 《军医进修学院学报》 CAS 2002年第2期119-121,共3页
目的 :建立能够模拟在体血脑屏障的体外模型。方法 :培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞 ,用免疫组织化学染色的方法鉴定细胞 ,分别接种两种细胞于多聚酯多孔膜的两面 ,相差显微镜及HE染色观察细胞在多聚酯膜上的生长情况。结果 :... 目的 :建立能够模拟在体血脑屏障的体外模型。方法 :培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞 ,用免疫组织化学染色的方法鉴定细胞 ,分别接种两种细胞于多聚酯多孔膜的两面 ,相差显微镜及HE染色观察细胞在多聚酯膜上的生长情况。结果 :培养的脑微血管内皮细胞多数为梭形铺路石样外观 ,而星形胶质细胞呈具有多个突起的典型形态 ,免疫组织化学染色鉴定细胞的纯度分别在 90 %和 95 %以上 ,两种细胞能够以单层细胞的形式生长于多聚酯多孔膜的两面。结论 :通过脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共同培养能够形成与在体血脑屏障类似的结构 ,是一种建立血脑屏障模型的可行方法。 展开更多
关键词 脑微血管内皮细胞 星形胶质细胞 血脑屏障 疾病模型 细胞培养
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金属离子对CHO细胞抗体表达及抗体电荷分布的影响 被引量:7
17
作者 张鑫涛 唐红萍 +4 位作者 赵亮 范里 刘旭平 缪仕伟 谭文松 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期233-241,共9页
旨在深入认识金属离子在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养生产单克隆抗体过程中所发挥的作用。综合考察了不同铜离子和锌离子浓度下CHO细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布情况。结果显示,一方面,当培养基中铜离子浓度为120 nmol/L、锌... 旨在深入认识金属离子在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养生产单克隆抗体过程中所发挥的作用。综合考察了不同铜离子和锌离子浓度下CHO细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布情况。结果显示,一方面,当培养基中铜离子浓度为120 nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时,最有利于CHO细胞的生长和抗体的表达。过高或过低的铜离子和锌离子均对细胞的生长和活性的维持产生了不利影响。另一方面,作为碱性羧肽酶抑制剂和辅因子的铜离子和锌离子对抗体的电荷分布有着重要的影响。当培养基中铜离子浓度为50 nmol/L、锌离子浓度为50μmol/L时,最有利于减少抗体的电荷变体,提高主峰含量。过高或过低的铜离子和锌离子均导致了电荷变体的增加,主峰含量的降低。且两者的浓度和比例影响了抗体C末端赖氨酸的酶切过程,进而影响了碱性变体的含量。此外,对铜、锌离子的操作空间进行了初步的研究。金属离子在CHO细胞培养过程中对细胞的生长、抗体的表达以及抗体的电荷分布等方面都发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 动物细胞培养 电荷分布 金属离子 单克隆抗体
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不同品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型的比较研究 被引量:5
18
作者 赵丽娟 余娇 +4 位作者 李影 陈奕 夏芳珍 王宁荐 陆颖理 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期381-385,共5页
目的对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系。方法选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定。荧光激活细胞筛选... 目的对不同品系大鼠肝卵圆细胞增殖模型进行比较,筛选建模效率较高的大鼠品系。方法选择F344、Wistar和SD大鼠各10只,经2-乙酰氨基芴灌胃和四氯化碳腹腔注射建立肝脏卵圆细胞增殖模型,组织学和免疫组织化学检测鉴定。荧光激活细胞筛选法分选并纯化各品系大鼠肝脏卵圆细胞,分析Thy-1.1^+细胞百分率,观察Thy-1.1^+细胞培养结果。结果成功建立三种品系大鼠肝脏卵圆细胞增殖模型。流式细胞仪分选结果显示,F344、Wistar和SD大鼠Thy-1.1^+细胞百分率分别为(9.46±0.99)%、(2.46±0.37)%和(1.46±0.12)%;各品系大鼠间Thy-1.1^+细胞百分率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞培养观察发现,与Wistar和SD大鼠比较,F344大鼠分选得到的肝脏卵圆细胞生长状态好且纯度较高。结论在用于建立肝脏卵圆细胞增殖模型最为常见的三种品系大鼠中,F344大鼠所建模型的肝脏卵圆细胞活化效率最高。 展开更多
关键词 大鼠品系 肝脏卵圆细胞 细胞增殖模型 细胞分选 细胞培养
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葡萄糖对重组CHO细胞生长代谢及EPO表达的影响 被引量:4
19
作者 孙祥明 张元兴 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期698-702,共5页
在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ... 在CHO细胞批培养中 ,葡萄糖浓度从 8 9增加到 4 9 6mmol L ,最大活细胞密度没有明显的差异 ,乳酸对葡萄糖的得率系数首先随着葡萄糖浓度的增加而增加 ,葡萄糖浓度达到 17 9mmol L后 ,乳酸对葡萄糖的得率系数基本上维持恒定。在本实验中 ,葡萄糖浓度对谷氨酰胺代谢没有明显的影响。EPO的累积浓度首先随着起始葡萄糖浓度的增加 ( 8 9~ 17.9mmol L)而增加 ,进而又随着葡萄糖浓度的增加 ( 17 9~ 4 9.6mmol L)而下降 ,表明存在一最适浓度 ,在此浓度下重组CHO细胞的EPO表达最大。 展开更多
关键词 CHO细胞 葡萄糖 代谢 红细胞生成素 动物细胞培养
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无血清培养基中蛋白类补充因子重组生产研究进展 被引量:6
20
作者 宗超 黄磊 +1 位作者 蔡谨 徐志南 《药物生物技术》 CAS 2014年第2期162-165,共4页
鉴于用于动物细胞培养的血清培养基存在诸多缺陷,无血清培养基已成为动物细胞培养的主要培养基。无血清培养基主要由基本培养基和补充因子组成,补充因子包括结合蛋白、贴壁因子、生长激素、生长因子和微量元素等。尽管无血清培养基已经... 鉴于用于动物细胞培养的血清培养基存在诸多缺陷,无血清培养基已成为动物细胞培养的主要培养基。无血清培养基主要由基本培养基和补充因子组成,补充因子包括结合蛋白、贴壁因子、生长激素、生长因子和微量元素等。尽管无血清培养基已经在动物细胞培养和蛋白类药物生产中广泛使用,但其中最重要的蛋白类补充因子的研究进展并没有得到很好总结。文章系统总结了各类蛋白补充因子在无血清培养基中的生理功能和相关的重组生产方面的最新研究进展,对蛋白类补充因子高效生产和高质量无血清培养基的规模化制备具有借鉴意义。 展开更多
关键词 无血清培养基 动物细胞培养 补充因子 基因表达 重组蛋白质 生长因子
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