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正常中国人及内源性高甘油三酯血症患者酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶基因多态性的研究 被引量:6
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作者 李琴 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期206-210,共5页
目的研究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl—coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACATl)基因rsl044925多态性是否与正常汉族中国人及内源性高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)患者血脂及载脂蛋白水平存在关联。... 目的研究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl—coenzyme A:cholesterol acyltransferase 1,ACATl)基因rsl044925多态性是否与正常汉族中国人及内源性高甘油三酯血症(hypertriglyceridemia,HTG)患者血脂及载脂蛋白水平存在关联。方法应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法,对成都地区372名汉族人(267名正常人和105例内源性高甘油三酯血症患者)ACAT1 基因rsl044925多态位点进行分析。结果中国人ACAT1 基因rsl044925多态位点C等位基因频率为0.137,显著低于中部和南部欧洲人的0.354(P〈0.05);HTG组和对照组C等位基因频率分别为0.153和0.137,两者之间差异无统计学意义。对照组从基因型携带者血清低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)和非高密度脂蛋白胆固醇(non-high density lipoprotein cholesterol,nHDL-C)水平均较C等位基因携带者(AC和CC基因型者)显著升高[(3.25±0.68)mmol/Lvs(3.03±0.87)mmol/L,P〈0.05;(3.80±0.71)mmol/S(3.23±0.82)mmol/L,P〈0.05],HTG组AA因型基携带者血清高密度脂蛋白胆固醇non-density lipoprotein-cholesterol-terol,HDL-C)水平较C等位基因携带者显著升高[(1.00±0.28)mmol/Lvs(0.87±0.17)mmol/L,P〈0.05]。结论ACAT1基因rsl044925多态性不仅与正常中国成都地区汉族人血清LDL-C、nHDL-C含量有关,而且还与内源性高甘油三酯血症患者血清HDL-C水平相关联。 展开更多
关键词 内源性高甘油三酯血症 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1 遗传多态性
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牛磺酸下调单核-巨噬细胞ACAT-1表达 被引量:4
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作者 柯丽 成蓓 +2 位作者 余其振 何平 白智峰 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期299-301,共3页
目的:观察牛磺酸对THP-1及THP-1源性巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达及活性的影响。方法:将THP-1细胞与PMA孵育48h使之分化为巨噬细胞,在有或无干扰素-γ(IFN-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续作用不同的时... 目的:观察牛磺酸对THP-1及THP-1源性巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达及活性的影响。方法:将THP-1细胞与PMA孵育48h使之分化为巨噬细胞,在有或无干扰素-γ(IFN-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续作用不同的时间,RTPCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达,并测定其酶活性。结果:牛磺酸显著下调THP1及THP1源性巨噬细胞的ACAT1mRNA和蛋白表达水平以及ACAT-1活性(P<0.05~0.01,n=3);IFNγ促进ACAT1mRNA和蛋白表达、增强ACAT-1活性(P<0.05,n=3)的作用被牛磺酸部分抑制(P<0.05,n=3)。结论:牛磺酸不但能降低单核巨噬细胞ACAT-1的基础表达和活性,而且能抑制由IFN-γ诱导的ACAT-1表达和活性,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 牛磺酸 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1
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可溶性Klotho蛋白抑制THP-1源性泡沫细胞形成 被引量:4
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作者 刘玮 李琳 +3 位作者 刘佳妮 石晶 洪畋 陈秀娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期816-821,共6页
目的:探讨可溶性Klotho(KL)蛋白对THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法:THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯孵育48 h后,诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,给予THP-1源性巨噬细胞不同浓度(25、50、100和200μg/L)的可溶性KL蛋白预处理后,再由氧... 目的:探讨可溶性Klotho(KL)蛋白对THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法:THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯孵育48 h后,诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,给予THP-1源性巨噬细胞不同浓度(25、50、100和200μg/L)的可溶性KL蛋白预处理后,再由氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导其转变为泡沫细胞。油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,通过液体闪烁计数法测定THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出情况,酶荧光法检测细胞内游离胆固醇及胆固醇酯的含量,并分别用Western blot法及RT-qPCR法检测酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)和ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的蛋白及mRNA表达。结果:可溶性KL蛋白能增加THP-1源性巨噬细胞内胆固醇流出,抑制THP-1源性泡沫细胞形成,且可溶性KL蛋白呈一定浓度依赖性地抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程中ACAT1表达的上调和ABCA1表达的下调(P<0.05)。结论:可溶性KL蛋白能够抑制THP-1源性泡沫细胞形成,其机制可能与靶向调控细胞内ACAT1和ABCA1的表达有关。 展开更多
关键词 KLOTHO蛋白 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1 ATP结合盒转运体A1 泡沫细胞 动脉粥样硬化
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酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1与动脉粥样硬化 被引量:2
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作者 高小花 王庸晋 《心血管病学进展》 CAS 2011年第4期604-606,共3页
酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶目前认为是细胞内唯一合成胆固醇酯的酶,维持着细胞以及生物体胆固醇代谢的平衡,而酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1在动脉粥样硬化的发生、发展过程中发挥着至关重要的作用。自从酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶的cDNA... 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶目前认为是细胞内唯一合成胆固醇酯的酶,维持着细胞以及生物体胆固醇代谢的平衡,而酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1在动脉粥样硬化的发生、发展过程中发挥着至关重要的作用。自从酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶的cDNA在1993年首次被克隆之后,许多学者对酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1进行了大量的研究,现就近年来酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1与动脉粥样硬化关系的研究予以综述。 展开更多
关键词 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1 动脉粥样硬化
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脂肪分化相关蛋白促进RAW264.7细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1高表达 被引量:2
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作者 乔运成 黄谙非 +2 位作者 田国平 刘晓辉 袁中华 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期643-647,共5页
目的观察高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达的变化,阐明脂肪分化相关蛋白促进细胞内脂质蓄积的机制。方法构建的pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒。用病毒感染RA... 目的观察高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达的变化,阐明脂肪分化相关蛋白促进细胞内脂质蓄积的机制。方法构建的pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒载体转染PA317包装细胞,获得pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒。用病毒感染RAW264.7细胞,Puromycin筛选后获得稳定高表达脂肪分化相关蛋白的RAW264.7细胞株。应用逆转录聚合酶链反应和免疫印迹法检测经感染后细胞内脂肪分化相关蛋白和酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1的表达。并应用阿托伐他汀处理高表达脂肪分化相关蛋白的RAW264.7细胞,观察酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达的改变。结果用pQCXIP-HA-Adi逆转录病毒感染RAW264.7细胞后,脂肪分化相关蛋白和酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1 mRNA和蛋白表达明显升高,而对照组表达无明显变化。加入阿托伐他汀后,即在去除底物对酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达影响的情况下,高表达脂肪分化相关蛋白细胞内酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1表达仍升高。结论高表达脂肪分化相关蛋白可明显上调RAW264.7细胞酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1的表达。 展开更多
关键词 脂肪分化相关蛋白 酰基辅酶A∶胆固醇酰基转移酶1 RAW264.7细胞 动脉粥样硬化
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邯郸地区汉族人群酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1位点rs1044925基因多态性与冠心病患者血脂代谢的相关性研究
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作者 李琴 王倩 +5 位作者 李玉玲 冯海斌 信栓力 刘吉祥 常超 孟利民 《实用心脑肺血管病杂志》 2016年第7期51-55,共5页
目的探究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)位点1044925基因多态性与冠心病患者血脂代谢的相关性。方法选取2015年邯郸市第一医院心内一科收治的冠心病住院患者396例作为冠心病组,另选择同期冠状动脉造影检查正常者428例作为对照组... 目的探究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)位点1044925基因多态性与冠心病患者血脂代谢的相关性。方法选取2015年邯郸市第一医院心内一科收治的冠心病住院患者396例作为冠心病组,另选择同期冠状动脉造影检查正常者428例作为对照组。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)对两组患者ACAT-1位点rs1044925基因多态性进行分析。比较两组受试者体质指数(BMI)、血脂指标、ACAT-1位点rs1044925基因型及等位基因分布情况,分别比较两组不同基因型受试者血脂指标。结果冠心病组患者BMI及血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、非高密度脂蛋白胆固醇(n HDL-C)、脂蛋白(a)水平均高于对照组,血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平低于对照组(P<0.05);两组受试者血清载脂蛋白A_1(ApoA_1)、载脂蛋白B(Apo B)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。两组受试者基因型和A、C等位基因分布情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。对照组不同基因型受试者血清TC、TG、LDL-C、nHDL-C、LDL-C、ApoA_1、Apo B及脂蛋白(a)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。冠心病组不同基因型患者血清TC、TG、nHDL-C、ApoA_1、Apo B及脂蛋白(a)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);AA基因型患者血清HDL-C水平低于AC/CC基因型患者,血清LDL-C水平高于AC/CC基因型患者(P<0.05);采用协方差分析校正性别、年龄和BMI,结果显示冠心病组AA基因型患者血清HDL-C水平低于AC/CC基因型患者,血清LDL-C水平高于AC/CC基因型患者(P<0.05)。结论邯郸地区汉族人群ACAT-1位点rs1044925基因多态性与冠心病患者血清LDL-C和HDL-C水平有关,ACAT-1位点rs1044925基因多态性可能通过影响血脂代谢而参与冠心病的发生和发展。 展开更多
关键词 冠心病 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1 多态性 单核苷酸 血脂 邯郸
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ACAT1基因干扰对人结肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响 被引量:3
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作者 陈心 梁慧玲 +5 位作者 徐细明 张一桥 陈能 林丹丹 冯翎 郑勇斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第7期1074-1077,共4页
目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hi... 目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 si RNA转染至人结肠癌HT29细胞中干扰ACAT1基因的表达,利用Real time PCR检测转染前后ACAT1基因表达的变化,利用ACAT1基因干扰前后的HT29细胞,采用CFSE染色法检测HT29细胞增殖能力的变化;Transwell小室法检测HT29细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:ACAT1 si RNA转染HT29细胞后ACAT1 m RNA的表达明显下降,ACAT1 si RNA转染后的HT29细胞与转染前比较,增殖及侵袭转移的能力均受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACAT1基因干扰使HT29细胞的增殖减慢,侵袭迁移能力降低,为结肠癌治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1 小干扰RNA
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糖基化终产物对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响 被引量:1
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作者 杨启红 徐强 +1 位作者 张红 司良毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1630-1633,共4页
目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine ... 目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine serum albumin,AGE-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h的THP-1巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和Western blot分别检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果PMA诱导72h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞。用50、100、200和400mg/L AGE-BSA处理巨噬细胞后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐增加;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐增加,二者较对照牛血清白蛋白组明显增加(P<0.05)。用200mg/LAGE-BSA作用巨噬细胞0、12、24、36h和48h后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐升高;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐升高,较0h明显增加(P<0.05)。结论AGEs可上调THP-1巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性,这可能与糖尿病动脉粥样硬化有关。 展开更多
关键词 糖尿病 糖基化终产物 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1 基因表达
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沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1基因对人前列腺癌细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 陈心 徐细明 +3 位作者 甘园园 曹德东 伍龙 陈志远 《中国医药导报》 CAS 2017年第22期4-7,15,共5页
目的观察ACAT1在人前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭迁移中的作用。方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 siRNA转染至人前列腺癌PC-3细胞中沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因的表达,Real-time PCR验证沉... 目的观察ACAT1在人前列腺癌PC-3细胞增殖和侵袭迁移中的作用。方法体外培养人前列腺癌PC-3细胞,通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 siRNA转染至人前列腺癌PC-3细胞中沉默酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因的表达,Real-time PCR验证沉默的效果。利用CFSE染色法分别检测加入无血清1640培养基的空白对照组、加入阴性-siRNA-Hiper Fect复合物的阴性对照组和加入ACAT1 siRNA-Hiper Fect复合物的ACAT1组人前列腺癌PC-3细胞的增殖率,比较ACAT1基因沉默前后细胞增殖的变化。利用Transwell小室法检测ACAT1基因沉默前后人前列腺癌PC-3细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与空白对照组和阴性对照组比较,ACAT1 siRNA组转染48 h ACAT1 mRNA表达水平最低(P<0.05)。与阴性对照组和空白对照组比较,ACAT1siRNA组细胞增殖率下降,侵袭和迁移实验中穿膜细胞数减少,差异有高度统计学意义(P<0.01)。阴性对照组与空白对照组比较,细胞增殖率、侵袭和迁移能力无变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 ACAT1基因干扰能抑制PC-3细胞的增殖,减弱侵袭迁移能力,为探寻前列腺癌发病机制和治疗提供新的思路和手段。 展开更多
关键词 前列腺癌 酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1 小干扰RNA 生物学行为
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Toll样受体4小干扰RNA通过影响酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1的表达以抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移 被引量:1
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作者 吴毅阳 叶凯 +3 位作者 陈琦玮 孙亚锋 林建安 许建华 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期215-218,共4页
目的观察在体外实验中,Toll样受体4(TLR4)对人结直肠癌细胞HT29和SW480酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响及其癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TLR4和ACAT1... 目的观察在体外实验中,Toll样受体4(TLR4)对人结直肠癌细胞HT29和SW480酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响及其癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TLR4和ACAT1在结直肠癌组织和细胞株中的表达水平。利用TLR4小干扰RNA(siRNA)特异性沉默TLR4后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell小室检测并评估人结直肠癌细胞HT29和SW480的增殖、侵袭和迁移能力的变化。采用RT-PCR和Western blot法研究TLR4和ACAT1之间的关系。结果相对于癌旁组织,结直肠癌组织TLR4和ACAT1 mRNA和蛋白表达明显增高(TLR4 mRNA:2.395 0±0.247 7比1.093 0±0.075 8,P=0.000;ACAT1 mRNA:2.196 0±0.189 5比1.093 0±0.075 8,P=0.000);人结直肠癌细胞株HT29、SW480、Caco-2和DLD-1相对于正常人结直肠细胞株FHC TLR4和ACAT1表达也均表达上调。TLR4 siRNA抑制TLR4的表达,可抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。同时,TLR4 siRNA在结直肠癌细胞HT29中可降低ACAT1的表达(mRNA:0.350 0±0.145 7比1.017 0±0.145 0,P=0.032;蛋白:0.523 3±0.052 1比1.140 0±0.105 8,P=0.006),而利用ACAT1的慢病毒基因过表达载体pLV-Neo-ACAT1使ACAT1过表达后,可解除TLR4 siRNA对结直肠癌的这一抑制作用。结论TLR4 siRNA在结直肠癌细胞中通过影响ACAT1的表达以抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 TOLL样受体4 小干扰RNA 结直肠癌 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1
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ACAT1、BDH2基因与肾透明细胞癌患者发病及病情进展的关系
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作者 雷乃军 祝德 +2 位作者 龙家才 张旭明 宋争放 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2021年第4期384-387,共4页
目的研究胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)、3-羟基丁酸脱氢酶2(BDH2)基因与肾透明细胞癌患者发病及病情进展的关系。方法选择2018年5月至2020年5月巴中市人民医院收治的86例肾透明细胞癌患者为研究组,另选择同期收治的因肾外伤行肾切除的患者3... 目的研究胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)、3-羟基丁酸脱氢酶2(BDH2)基因与肾透明细胞癌患者发病及病情进展的关系。方法选择2018年5月至2020年5月巴中市人民医院收治的86例肾透明细胞癌患者为研究组,另选择同期收治的因肾外伤行肾切除的患者30例为对照组,收集研究组术中切除的癌组织及对照组术中切除的肾组织,比较两组组织中ACAT1、BDH2基因相对表达量,比较不同临床病理特征肾透明细胞癌患者癌组织中ACAT1、BDH2基因相对表达量,采用Spearman相关分析ACAT1、BDH2基因与肾透明细胞癌患者病情进展的相关性,采用Logistic回归分析肾透明细胞癌患者发病的影响因素。结果研究组的ACAT1、BDH2基因相对表达量为11.52±0.99、10.48±0.73,均低于对照组(分别为13.93±1.32、12.86±1.01),差异有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤部位、病理分级的肾透明细胞癌患者癌组织中ACAT1、BDH2基因相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);不同病理分期、淋巴结转移情况的肾透明细胞癌患者癌组织中ACAT1、BDH2基因相对表达量差异有统计学意义(P<0.05);ACAT1、BDH2基因相对表达量与肾透明细胞癌患者的病理分期、淋巴结转移呈负相关(P<0.05);ACAT1、BDH2基因表达下调是肾透明细胞癌患者发病的危险因素(P<0.05)。结论 ACAT1、BDH2基因在肾透明细胞癌中表达下调,ACAT1、BDH2基因与肾透明细胞癌发病及病理分期、淋巴结转移有关。 展开更多
关键词 胆固醇酰基转移酶1 3-羟基丁酸脱氢酶2 肾透明细胞癌 发病 病情进展
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PPARδ通过下调ACAT1抑制血管平滑肌细胞泡沫样变
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作者 龙春燕 张莉莉 +7 位作者 孙梦娇 黎炳护 皮燕 郭露 曹小洁 尹延伟 廖少琼 李敬诚 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期1801-1805,共5页
目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化过程中的作用及可能机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMCs;用氧化型低... 目的探讨过氧化物酶体增殖物激活受体δ(peroxisome proliferator-activated receptorδ,PPARδ)在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)泡沫化过程中的作用及可能机制。方法用组织贴块法体外培养原代VSMCs;用氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)(50μg/m L)刺激VSMCs构建泡沫细胞模型,分为空白对照组及24、48、72 h组4组以检测VSMCs泡沫化过程中PPARδ的表达变化;利用PPARδ激动剂(GW0742,25 nmol/L)和抑制剂(GSK0660,1μmol/L)调控PPARδ并分为空白对照组、ox-LDL(50μg/m L)组、GW0742+ox-LDL(50μg/m L)组、GSK0660+ox-LDL(50μg/m L)组4组,刺激48 h;油红O染色及酶标仪测细胞内萃取油红光密度值检测细胞内脂质沉积;Western blot检测VSMCs中PPARδ、ACAT1蛋白表达情况以探索PPARδ在VSMCs泡沫细胞中的作用以及PPARδ和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(A-cholesterol acyltransferase 1,ACAT1)的关系。结果 ox-LDL刺激下PPARδ的蛋白水平呈时间依赖地降低,其中48 h最低,下降约29%(P<0.05),随后维持在低水平表达;GW0742激动PPARδ后可明显减少VSMCs内总胆固醇含量约55%(P<0.05),而GSK0660则明显增加细胞内总胆固醇含量约20%(P<0.05);同时,GW0742可使ACAT1的蛋白表达量下降了约28%(P<0.05),而GSK0660则升高ACAT1的蛋白表达量约29%(P<0.05)。结论 PPARδ的激活可通过下调ACAT1表达抑制血管平滑肌源性泡沫细胞的形成。 展开更多
关键词 泡沫细胞 血管平滑肌细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体Δ 胆固醇酰基转移酶1 氧化型低密度脂蛋白
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川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用研究
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作者 于妍 《中国药房》 CAS 北大核心 2015年第22期3096-3098,共3页
目的:研究川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法:将人急性单核细胞白血病细胞株1(THP-1)与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,使之分化为巨噬细胞;再将巨噬细胞与80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培养液孵育24... 目的:研究川芎嗪对巨噬源性泡沫细胞形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法:将人急性单核细胞白血病细胞株1(THP-1)与160 nmol/L佛波酯(PMA)孵育24 h,使之分化为巨噬细胞;再将巨噬细胞与80 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)培养液孵育24 h,使之向泡沫细胞转化;再将上述细胞随机分为空白对照(ox-LDL)组、模型(AngⅡ)组、阳性对照(缬沙坦)组和川芎嗪低、中、高浓度(质量浓度分别为0.025、0.05、0.1 g/L)组,各组细胞分别与80 mg/L ox-LDL培养液孵育48 h后,采用油红O染色观察巨噬源性泡沫细胞转化率,酶化学法测定细胞内胆固醇含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法分别检测酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)m RNA、蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组巨噬源性泡沫细胞转化率升高,细胞内胆固醇含量增加,ACAT-1 m RNA、蛋白的表达均增强,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);与模型组比较,阳性对照组与川芎嗪低、中、高浓度组泡沫细胞转化率降低,细胞内胆固醇含量减少,ACAT-1 m RNA、蛋白的表达减弱,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:川芎嗪可抑制巨噬细胞分化为泡沫细胞。其可能的作用机制为通过抑制ACAT-1的表达、降低细胞内胆固醇含量,从而减少巨噬源性泡沫细胞形成。 展开更多
关键词 川芎嗪 巨噬源性泡沫细胞 血管紧张素Ⅱ 酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1
原文传递
胰岛素对人单核/巨噬细胞ACAT1基因P1和P7启动子活性的影响
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作者 葛晶 成蓓 +2 位作者 何平 戚本玲 柯丽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1955-1960,共6页
目的:研究胰岛素对人单核/巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coenzyme A:choles-terol acyltransferase 1,ACAT1)基因P1和P7启动子的活性及其转录产物表达的影响,从而探讨它们在胰岛素调控ACAT1基因表达中的作用。方法:将人AC... 目的:研究胰岛素对人单核/巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coenzyme A:choles-terol acyltransferase 1,ACAT1)基因P1和P7启动子的活性及其转录产物表达的影响,从而探讨它们在胰岛素调控ACAT1基因表达中的作用。方法:将人ACAT1基因P1和P7启动子调控的报告基因载体pGL3E-P1和pGL3E-P7瞬时转染入体外培养人THP-1单核细胞系,给予不同剂量的胰岛素处理,通过双萤光素酶报告系统检测P1和P7启动子的活性。体外培养THP-1细胞和由佛波脂诱导分化的巨噬细胞,同样用不同剂量的胰岛素干预24 h,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测THP-1细胞ACAT1基因P1和P7启动子转录产物表达,用SYBR GreenⅠ实时定量RT-PCR方法检测THP-1细胞和诱导分化的巨噬细胞ACAT1 mRNA的表达。结果:不同剂量胰岛素处理的人THP-1细胞,与对照组相比,ACAT1基因P1启动子的活性及其转录产物量均显著增强,并随胰岛素剂量的增加而升高。应用实时定量RT-PCR方法检测ACAT1 mRNA的表达与上述结果相一致。结论:胰岛素可通过激活人单核/巨噬细胞ACAT1基因P1启动子上调ACAT1 mRNA的表达,其作用呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 胰岛素 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1 动脉粥样硬化 启动子 转录活性
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干扰素-γ对单核—巨噬细胞源性泡沫细胞ACAT-1表达的影响 被引量:8
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作者 柯丽 成蓓 +2 位作者 余其振 何平 白智峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2005年第10期14-15,共2页
目的观察干扰素-γ对THP-1、THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法将THP-1细胞与PMA孵育48小时使之分化为巨噬细胞,继以100mg/mlOx-LDL处理24小时使之形成泡沫细胞。将THP-1细胞、巨噬细胞、... 目的观察干扰素-γ对THP-1、THP-1源性巨噬细胞泡沫细胞酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法将THP-1细胞与PMA孵育48小时使之分化为巨噬细胞,继以100mg/mlOx-LDL处理24小时使之形成泡沫细胞。将THP-1细胞、巨噬细胞、泡沫细胞分别用300U/mlIFN-γ干预24小时。RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达。结果THP-1细胞分化成巨噬细胞以及形成泡沫细胞时ACAT-1mRNA及蛋白含量增加(P<0.05),而后两种细胞之间无显著性差异。与各自的对照组相比,经IFN-γ作用后三种细胞ACAT-1mRNA及蛋白表达均增强(P<0.05)。结论IFN-γ诱导单核、巨噬细胞、泡沫细胞ACAT-1的mRNA及蛋白表达,这可能是其促进动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 泡沫细胞 干扰素-Γ 细胞源性 单核 THP-1细胞 胆固醇酰基转移酶 RT-PCR检测 IFN-γ Western 巨噬细胞 mRNA水平 蛋白表达 BLOT检测 动脉粥样硬化 酰基辅酶A OxLDL 显著性差异 细胞分化 蛋白含量 种细胞 PMA 对照组
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人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1基因P7启动子调控的报告基因载体的构建及鉴定 被引量:1
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作者 葛晶 成蓓 +4 位作者 何平 文晖 陆菡 陈心 曾永利 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1381-1384,共4页
应用PCR方法从人单核细胞系THP-1基因组DNA扩增人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coen-zyme A:cholesterol acyltransferase1,ACAT1)基因P7启动子全长片段,进行TA克隆,经双酶切、测序鉴定阳性克隆。将该基因亚克隆至荧光素酶报告基... 应用PCR方法从人单核细胞系THP-1基因组DNA扩增人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(acyl coen-zyme A:cholesterol acyltransferase1,ACAT1)基因P7启动子全长片段,进行TA克隆,经双酶切、测序鉴定阳性克隆。将该基因亚克隆至荧光素酶报告基因载体pGL3-Enhancer,用DEAE-葡聚糖(DEAE-dextran)法将重组质粒pGL3E-P7瞬时转染入单核细胞THP-1,检测其活性,证明pGL3E-P7能在体外表达荧光素酶。人ACAT1基因P7启动子调控的荧光素酶报告基因表达载体的成功构建,为研究动脉粥样硬化过程中ACAT1基因的转录调控机制提供新手段。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1 启动子 荧光素酶
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实时定量PCR检测胰岛素和高糖对巨噬细胞ACAT-1表达的影响 被引量:1
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作者 陆菡 成蓓 +3 位作者 何平 王彦富 曾永利 葛晶 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第4期269-272,共4页
目的利用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA的表达。探讨胰岛素和高糖对人THP-1细胞分化的巨噬细胞ACAT-1mRNA表达的影响。方法体外培养人单核细胞株THP-1细胞,由佛波醇肉豆蔻酸乙酸盐(... 目的利用实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)mRNA的表达。探讨胰岛素和高糖对人THP-1细胞分化的巨噬细胞ACAT-1mRNA表达的影响。方法体外培养人单核细胞株THP-1细胞,由佛波醇肉豆蔻酸乙酸盐(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者再由胰岛素和高糖共同干预不同时间(0、6、12、24、48h),用实时定量PCR检测ACAT-1mRNA表达。结果胰岛素和高糖共同作用不同时间后巨噬细胞ACAT-1mRNA的表达量间差别有显著性意义(P<0.01),作用12h与0、6、24、48h的ACAT-1mRNA表达量间差别均有显著性意义(P<0.01),作用48h的ACAT-1mRNA表达量与0h相比差别无显著性意义(P>0.05)。结论胰岛素和高糖共同作用下,巨噬细胞ACAT-1mRNA表达逐渐增加,12h达到高峰,然后逐渐下降,48h恢复到0h时水平。成功建立和应用实时定量PCR检测巨噬细胞ACAT-1mRNA水平是准确评价巨噬细胞功能的方法之一。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 酰基辅酶A 胆固醇酰基转移酶-1 胰岛素 葡萄糖
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