补肾活血汤石油醚提取物对BMSCs迁移过程中Wnt5a/PKC通路的影响 被引量：10

1

作者 罗辉 吴志方 +4 位作者 沈玮 胡流超 王斌 余丽娟 罗毅文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期2462-2468,共7页

目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾... 目的探讨补肾活血汤(熟地黄、菟丝子、补骨脂,等)石油醚提取物对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的迁移作用及相关机制。方法全骨髓贴壁法培养BMSCs,取第3代细胞用于实验,采用流式细胞仪检测细胞表面抗原,细胞划痕、Transwell实验观察补肾活血汤石油醚提取物0、25、50、100、200μg/m L剂量组的细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR检测Wnt5a、蛋白激酶C(PKC)表达情况。结果第3代BMSCs表面抗原CD29、CD90、CD44表达阳性,而CD45表达阴性;细胞划痕6 h及12 h后,药物各剂量组细胞迁移速度明显高于空白组(P<0.05,P<0.01);Transwell实验中100μg/m L补肾活血汤石油醚提取物为促细胞迁移最佳剂量,差异有统计学意义(P<0.01);RT-PCR结果显示与空白对照组比较,药物各剂量组的Wnt5a mRNA水平均升高(P<0.05,P<0.01),而与空白对照组的PKC mRNA水平比较,药物只有100μg/m L剂量mRNA表达水平升高(P<0.01);Western blot结果表明药物组各剂量的Wnt5a、PKC蛋白表达较空白对照组都明显升高(P<0.01),均且以100μg/m L剂量最高(P<0.01)。结论补肾活血汤石油醚提取物可以促进BMSCs体外迁移,其作用机制可能与Wnt5a/PKC信号通路有关。 展开更多

关键词 补肾活血汤 信号通路 体外迁移 骨髓间充质干细胞 WNT5A PKC

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补肾舒脊颗粒含药血清对人骨髓间充质干细胞Wnt5a、β-catenin mRNA及蛋白表达的影响 被引量：8

2

作者 鄢泽然 史光耀 +2 位作者 王晓曈 张岚 阎小萍 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期415-419,共5页

目的探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组。空白组加入基础培养基(3.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);模型组加入诱导培养基(4.8 ml)+5... 目的探讨补肾舒脊颗粒延缓异位骨化的可能作用机制。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(BMSCs)分为空白组、模型组、对照组及中药高、中、低剂量组。空白组加入基础培养基(3.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);模型组加入诱导培养基(4.8 ml)+5%正常大鼠血清(0.2 ml);西药组加入诱导培养基(3.8 ml)+5%洛索洛芬钠含药血清(0.2 ml);中药高、中、低剂量组分别加入诱导培养基(3.8 ml)+5%补肾舒脊颗粒含药血清(0.2 ml)。28天后通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白表达。结果与空白组比较,模型组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,对照组和中药各剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白及mRNA表达均降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低,中药中剂量组Wnt5a、β-catenin蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01);与中药低、中剂量组比较,中药高剂量组Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。与中药低剂量组比较,中药中剂量组Wnt5a蛋白表达降低,中药高剂量组β-catenin蛋白表达升高(P<0.05)。结论补肾舒脊颗粒可能通过Wnt/β-catenin信号通路抑制Wnt5a mRNA、β-catenin mRNA及蛋白的表达,从而起到延缓强直性脊柱炎异位骨化的作用。 展开更多

关键词 强直性脊柱炎 补肾舒脊颗粒 异位骨化 WNT5A Β-CATENIN WNT/Β-CATENIN信号通路

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Wnt5a基因对肝癌细胞增殖及迁移能力的影响 被引量：8

3

作者 毕利泉 刘晓红 +3 位作者 陈英剑 曹永成 毛蕊琪 耿明 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期857-861,共5页

目的探讨Wnt5a基因对人肝癌细胞MHCC97L生物学行为的影响。方法脂质体法介导Wnt5a表达及阴性对照质粒转染MHCC97L细胞;RT-PCR及Western blot法检测质粒DNA片段插入和Wnt5a蛋白的表达;借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期和划痕试验对... 目的探讨Wnt5a基因对人肝癌细胞MHCC97L生物学行为的影响。方法脂质体法介导Wnt5a表达及阴性对照质粒转染MHCC97L细胞;RT-PCR及Western blot法检测质粒DNA片段插入和Wnt5a蛋白的表达;借助生长曲线、平板克隆形成、细胞周期和划痕试验对转染细胞的生物学活性进行检测。结果 pcDNA3.1组细胞生长速度明显快于Wnt5a表达组细胞;pcDNA3.1组细胞克隆形成率明显高于Wnt5a表达组(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Wnt5a表达能抑制细胞由G1期→S期的进程;划痕试验显示,Wnt5a表达组较阴性对照组细胞迁移速度明显减慢,当加入Wnt5a抗体阻遏信号通路时,细胞迁移速度加快。结论 Wnt5a可抑制人肝癌细胞MHCC97L的增殖和迁移能力,在肿瘤生长过程中发挥肿瘤抑制基因样作用。 展开更多

关键词 肝肿瘤 肝细胞癌 WNT5A

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Wnt5a和β-catenin在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量：7

4

作者 季晓辉 《医学与哲学（B）》 2018年第5期44-46,共3页

探讨Wnt5a和β-连环蛋白(β-catenin)在乳腺癌中的表达及其临床意义。采用免疫组化法检测50例乳腺癌组织及24例正常乳腺组织中Wnt5a及β-catenin的阳性表达,并分析Wnt5a及β-catenin与临床病理参数的关系。乳腺癌组织(13/50)中Wnt5a的... 探讨Wnt5a和β-连环蛋白(β-catenin)在乳腺癌中的表达及其临床意义。采用免疫组化法检测50例乳腺癌组织及24例正常乳腺组织中Wnt5a及β-catenin的阳性表达,并分析Wnt5a及β-catenin与临床病理参数的关系。乳腺癌组织(13/50)中Wnt5a的阳性率显著低于正常乳腺组织(18/24)(P<0.05),乳腺癌组织(33/50)中β-catenin的阳性率显著高于正常乳腺组织(3/24)(P<0.05)。乳腺癌组织中Wnt5a及β-catenin的阳性表达与TNM分期及淋巴结转移密切相关,与年龄及组织学分级无关。同时乳腺癌组织中Wnt5a与β-catenin表达负相关。Wnt5a及β-catenin共同参与着乳腺癌的发生发展及浸润转移。 展开更多

关键词 乳腺癌 WNT5A Β-CATENIN 表达

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严重脓毒症胰岛素目标血糖管理下Wnt5a的变化及其临床意义 被引量：6

5

作者 张霞 程青虹 +2 位作者 何永来 刘超 林笑女 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期203-207,共5页

目的探讨严重脓毒症目标血糖管理过程中Wnt5a浓度的动态变化及其临床意义。方法采用随机对照双盲的临床试验设计方案，将61例脓毒症患者随机分为：A组20例（目标血糖控制在4．4—6．1mmol／L），B组21例（目标血糖控制在6．2～8．3mmol... 目的探讨严重脓毒症目标血糖管理过程中Wnt5a浓度的动态变化及其临床意义。方法采用随机对照双盲的临床试验设计方案，将61例脓毒症患者随机分为：A组20例（目标血糖控制在4．4—6．1mmol／L），B组21例（目标血糖控制在6．2～8．3mmol／L），C组20例（目标血糖控制在8．4～10．0mmol／L）。在入住ICU时就给予目标血糖控制，分别在入住ICU时（0d）及入住ICU后1、3、5、7d采集静脉血，分别用ELISA法、酶联荧光分析（ELFA）法、比浊法检测Wnt5a、降钙素原（PCT）、C-反应蛋白（CRP）浓度的变化；相同时间点观察急性生理学和慢性健康状况Ⅱ（APACHEII）评分，并计算28d死亡率。根据28d存活情况将患者分为死亡组和存活组，并进行对比分析。结果随着治疗时间的延长，A、B、C3组Wnt5a浓度及APACHEⅡ评分均降低，治疗第3、5、7天与人院时比较差异有统计学意义（P均〈0．05）；治疗第7天Wnt5a浓度及APACHEII评分A组较B、C组明显降低（P均〈0．05），B组低于C组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。28d死亡率：A组30％（6／20）与B组33．3％（7／21）、C组35％（7／20）比较降低，但差异无统计学意义（P〉0．05）。死亡组Wnt5a浓度及APACHEII评分较存活组明显提高（P〈0．05）。脓毒症患者入院时Wnt5a浓度与APACHEⅡ评分呈正相关（r=0．737，P=0．001）。结论严重脓毒症患者在严格目标血糖管理下，能明显抑制炎症反应程度，降低Wnt5a浓度及病死率，并改善预后，WntSa有望成为判断脓毒症患者病情严重程度和预后的良好指标。 展开更多

关键词 目标血糖 严重脓毒症 WNT5A 预后 降钙素原(PCT) C-反应蛋白(CRP)

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Wnt5a结肠腺瘤性息肉病基因和β-连环素在结直肠腺癌组织中的表达和意义 被引量：6

6

作者 曹永成 杨帆 +3 位作者 刘晓红 辛萱 王翠翠 耿明 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期674-678,共5页

目的探讨Wnt5amRNA和蛋白、结肠腺瘤性息肉病基因（APC）和B-连环素（B—catenin）蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及意义。方法应用实时定量PCR法，检测30例新鲜结直肠腺癌组织和配对的痛旁组织中Wnt5amRNA的表达。采用免疫组织化学sP法... 目的探讨Wnt5amRNA和蛋白、结肠腺瘤性息肉病基因（APC）和B-连环素（B—catenin）蛋白在结直肠腺癌组织中的表达及意义。方法应用实时定量PCR法，检测30例新鲜结直肠腺癌组织和配对的痛旁组织中Wnt5amRNA的表达。采用免疫组织化学sP法，检测62例结直肠腺癌和癌旁组织以及10例正常结直肠黏膜组织中Wnt5a、APC和B—catenin蛋白的表达情况，并分析Wnt5a、APC和B．catenin蛋白的表达与结直肠腺癌患者临床病理特征的关系。结果Wnt5amRNA在新鲜结直肠腺癌组织中的相对表达量为0．1232±0．0140，明显高于其在癌旁结直肠黏膜组织中的相对表达量（0．0497±0．0074，P=0．02）。Wnt5a蛋白在61．3％（38／62）的结直肠腺癌组织中低表达，在38．7％（24／62）的结直肠腺癌组织中高表达，其表达与肿瘤的组织学类型和分化程度有关（均P〈0．05）。APC蛋白住61．3％（38／62）的结直肠腺癌组织中低表达，其表达与肿瘤的组织学分犁有关（P〈0．05）。B—catenin蛋白在80．6％（50／62）的结直肠腺癌组织中呈胞质和（或）胞核的异位表达，其表达与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移、浸润深度以及TNM分期均有关（均P〈0．05）。在结直肠腺癌组织中，Wnt5a（r=0．271，P=0．027）和APC（r=0．343，P=0．004）蛋白的低表达均与B—catenin蛋白的异位表达相关，仉Wnt5a与APC蛋白的表达无关（r=0．218，P=0．078）。结论Wnt5a、APC和B—catenin基因可能参与了结直肠腺癌的发生和发展过程。在结直肠腺癌中，APC和Wnt5a蛋白的低表达可能是B-catenin蛋白异位表达的原因之一。 展开更多

关键词 WNT5A 结肠腺瘤性息肉病基因 Β-连环素 结直肠肿瘤 实时定量PCR

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肥胖及超重人群中血清Wnt5a水平与肝脏脂肪变和纤维化程度的相关性研究 被引量：6

7

作者 梁利波 王霞 +4 位作者 何訸 高赟 贾丹 安振梅 李双庆 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期7-11,共5页

目的探讨肥胖及超重人群中血清Wnt5a水平与肝脏脂肪变及纤维化程度的相关性。方法 134例在我院体检中心参加体检并在内分泌代谢科就诊,同时完成了瞬时弹性扫描仪(Fibroscan)检查的肥胖或超重患者,根据Fibroscan检测结果〔肝脏实时受控... 目的探讨肥胖及超重人群中血清Wnt5a水平与肝脏脂肪变及纤维化程度的相关性。方法 134例在我院体检中心参加体检并在内分泌代谢科就诊,同时完成了瞬时弹性扫描仪(Fibroscan)检查的肥胖或超重患者,根据Fibroscan检测结果〔肝脏实时受控衰减参数(controlled attenuation parameter,CAP)评估肝脏脂肪变性程度,瞬时肝脏弹性测量值(elasticity,E)评估纤维化程度〕分为正常对照组(27例)、轻度非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)组(51例)和中重度NAFLD组(56例)。同时测量腰围(waist circumstance,WC)、臀围(hip circumstance,HC),进行糖耐量试验和胰岛功能试验,检测血清转氨酶、血脂等,并采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清Wnt5a和β-连环蛋白(β-catenin)水平。结果对照组、轻度NAFLD组和中重度NAFLD组3组间年龄、性别、体质量指数(BMI)、WC、HC差异均无统计学意义(P>0.05)。3组间空腹及餐后2h血糖、空腹胰岛素水平和胰岛素抵抗指数差异有统计学意义(P<0.05),而餐后2h胰岛素水平差异无统计学意义(P>0.05)。轻度NAFLD组与对照组的CAP值、E值、血清Wnt5a和β-catenin水平相当,差异均无统计学意义(P>0.05)。中重度NAFLD组CAP值、E值和血清Wnt5a均高于对照组和轻度NAFLD组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,血清Wnt5a水平与CAP值呈负相关(相关系数r=-0.19,P<0.000 1),与E值无显著相关关系(r=0.02,P=0.241)。结论血清Wnt5a水平与NAFLD有关,在肥胖或超重合并NAFLD的发病不同阶段可能起着不同的病理生理作用。 展开更多

关键词 肥胖 WNT5A 肝脂肪变性 肝纤维化

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不同发展阶段黑素瘤细胞中Wnt5A和Wnt11基因表达的动态变化 被引量：2

8

作者 王欢 廖文俊 +3 位作者 于耀清 栾琪 吕雅洁 高天文 《第四军医大学学报》 北大核心 2008年第8期740-742,共3页

目的:研究Wnt/Ca2+通路中Wnt5A,Wnt11基因在不同发展阶段的黑素瘤细胞中的表达水平.方法:运用RT-PCR法,检测正常黑素细胞和6种黑素瘤细胞中Wnt5A和Wnt11基因表达水平.结果:在正常黑素细胞和不同的黑素瘤细胞中,Wnt5A和Wnt11基因的表达... 目的:研究Wnt/Ca2+通路中Wnt5A,Wnt11基因在不同发展阶段的黑素瘤细胞中的表达水平.方法:运用RT-PCR法,检测正常黑素细胞和6种黑素瘤细胞中Wnt5A和Wnt11基因表达水平.结果:在正常黑素细胞和不同的黑素瘤细胞中,Wnt5A和Wnt11基因的表达均表现出动态变化的特征.Wnt5A和Wnt11水平在正常黑素细胞中表达很低,而在黑素瘤细胞中有不同程度的升高.另外,分别来自表面生长阶段、结节状生长阶段和黑色素瘤淋巴结转移的WM793B,451Lu和A2058细胞系中,Wnt5A和Wnt11基因表达水平逐渐下降,甚至在A2058细胞系中,两种基因的表达均低于正常黑素细胞.结论:在黑素瘤的不同发展阶段,Wnt5A和Wnt11基因表达的动态变化使非经典的Wnt/Ca2+通路激活程度不同. 展开更多

关键词 黑素细胞 黑色素瘤 wntsa Wntl1

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高通量组织微阵列研究Wnt5a和LMP1在鼻咽癌癌变中的作用 被引量：3

9

作者 徐丽娜 郑军 +2 位作者 李姣 石磊 范松青 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期865-870,共6页

目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列... 目的:研究Wnt5a和EB病毒潜伏膜蛋白1(Epstein-Barr virus latent membrane protein 1,LMP1)在鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)癌变过程中作用的分子机制,评估其是否可作为NPC相关的分子标志物。方法:利用前期制备的NPC组织微阵列芯片,免疫组织化学检测Wnt5a和LMP1在NPC癌变过程不同组织中的蛋白表达,分析Wnt5a异常激活和LMP1蛋白过表达在NPC发生发展中的作用及其与NPC临床病理特征的关系,评估其是否可作为鉴别鼻咽良恶性病变的分子标志物。结果:Wnt5a和LMP1蛋白在NPC中的阳性表达率显著高于异型增生鼻咽上皮、增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01,P<0.01);异型增生鼻咽上皮中的Wnt5a和LMP1蛋白阳性表达率也显著高于增生鼻咽上皮和正常鼻咽上皮(P<0.05,P<0.01)。Wnt5a蛋白和LMP1蛋白在临床Ⅲ和Ⅳ期NPC组织中的阳性表达率显著高于临床Ⅰ和Ⅱ期(P<0.01,P<0.05),有淋巴结转移的NPC组织中Wnt5a蛋白阳性表达率也显著高于无淋巴结转移NPC组织(P<0.01),非角化性NPC组织LMP1蛋白阳性表达显著高于未分化癌和角化性癌(P<0.05,P<0.05);NPC组织中Wnt5a与LMP1蛋白的阳性表达存在显著正相关性(r=0.354,P<0.001)。LMP1和Wnt5a蛋白联合表达检测有助于鼻咽良恶性病变的鉴别。结论:NPC组织中Wnt5a和LMP1的表达存在显著正相关,两者可能共同或相继促进鼻咽上皮细胞的恶性转化和NPC的发生发展;联合应用LMP1和Wnt5a可作为NPC鉴别诊断的较好分子标志物。 展开更多

关键词 鼻咽癌 WNT5A EB病毒 LMP1 组织微阵列 免疫组织化学

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烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化及其临床意义 被引量：3

10

作者 尹朝奇 贺全勇 +7 位作者 罗成群 周建大 朱颉 李萍 陈铁夫 彭浩 徐阳成 陈佳 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1165-1167,共3页

目的观察烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化。方法采集烧伤脓毒症患者的血清标本,采用Western blotting法检测Wnt5a水平,并比较轻、中、重度脓毒症患者血清Wnt5a水平。同期选取轻度烧伤的非脓毒症患者8例作对照。结果烧伤脓毒症患者血清W... 目的观察烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平变化。方法采集烧伤脓毒症患者的血清标本,采用Western blotting法检测Wnt5a水平,并比较轻、中、重度脓毒症患者血清Wnt5a水平。同期选取轻度烧伤的非脓毒症患者8例作对照。结果烧伤脓毒症患者血清Wnt5a水平高于对照者。动态观察发现,脓毒症痊愈后患者血清Wnt5a水平降低,而随着脓毒症病情恶化血清Wnt5a水平持续升高。结论Wnt5a参与了烧伤患者炎症的发病过程,且检测Wnt5a水平可作为炎症严重程度的诊断指标。 展开更多

关键词 WNT5A 烧伤 脓毒症 炎症因子

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Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞增殖及侵袭能力的影响 被引量：2

11

作者 陈亮 冀宏 +1 位作者 石东亮 刘肖俊 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期2222-2225,共4页

目的观察Wnt5a表达对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响。方法噻唑蓝(MTT)法检测敲低或过表达Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞增殖活性的影响。克隆形成实验检测敲低或过表达Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞单个细胞克隆形成能力的影响。Transw... 目的观察Wnt5a表达对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响。方法噻唑蓝(MTT)法检测敲低或过表达Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞增殖活性的影响。克隆形成实验检测敲低或过表达Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞单个细胞克隆形成能力的影响。Transwell实验检测敲低或过表达Wnt5a对甲状腺乳头状癌细胞侵袭能力的影响。结果MTT法实验显示,Wnt5a过表达的K1细胞在3、4d检测到的吸光度(A)值(0.403±0.003、0.562±0.005)均大于对照组(0.371±0.006、0.454±0.002),Wnt5a-小干扰RNA(siRNA)-2组A值(0.342±0.005、0.402±0.004)均小于对照组,差异有统计学意义(t=0.951、14.206、-6.431、-20.140,P=0.030、0.000、0.003、0.000)。Wnt5a过表达BCPAP细胞在3、4d检测到的A值(0.454±0.007、0.603±0.002)均大于对照组(0.403±0.006、0.493±0.002),Wnt5a-siRNA-2组A值(0.362±0.005、0.370±0.003)均小于对照组,差异有统计学意义(t=0.839、27.361、-9.092、-29.087,P=0.010、0.000、0.001、0.000)。平板克隆形成实验显示,过表达Wnt5a后,细胞株K1及BCPAP细胞克隆的形成数[(130.00±4.34)、(117.00±3.54)个]均明显高于对照组[(88.00±3.44)、(86.00±3.48)个],敲低Wnt5a后,K1及BCPAP细胞克隆的形成数[(50.00±3.45)、(47.00±4.01)个]均明显低于对照组,差异均有统计学意义(t=13.136、10.816、-13.510、-12.253,P=0.000)。Transwell实验显示,过表达Wnt5a后,与对照组[(80.20±1.23)、(83.90±1.45)个]比较,细胞株K1及BCPAP每个高倍镜视野中穿过基底膜细胞数[(155.60±2.01)、(164.50±2.09)个]明显增多,差异均有统计学意义(t=-25.420、-24.881,P=0.000)。敲低Wnt5a后,与对照组比较,细胞株K1及BCPAP穿过基底膜细胞数[(50.80±1.02)、(52.30±1.08)个]明显减少,差异均有统计学意义(t=21.868、28.938,P=0.000)。结论过表达Wnt5a能够促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖、克隆和侵袭;敲低Wnt5a能够抑制细胞的增殖、克隆和侵袭。 展开更多

关键词 wntsa 甲状腺乳头状癌 细胞增殖 细胞侵袭

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Wnt5a在ALS转基因鼠海马齿状回中的表达变化 被引量：1

12

作者 张彩霞 管英俊 +1 位作者 陈燕春 刘冰 《潍坊医学院学报》 2013年第2期81-83,F0003,共4页

目的观察Wnt5a在ALS转基因鼠海马齿状回的表达变化,探讨Wnt5a在ALS转基因鼠发病中的作用机制。方法将30只ALS转基因鼠和同窝出生野生型鼠随机分两组,应用免疫荧光和RT-PCR技术分别于95d,108d,122d龄检测Wnt5a在海马中表达情况。结果免... 目的观察Wnt5a在ALS转基因鼠海马齿状回的表达变化,探讨Wnt5a在ALS转基因鼠发病中的作用机制。方法将30只ALS转基因鼠和同窝出生野生型鼠随机分两组,应用免疫荧光和RT-PCR技术分别于95d,108d,122d龄检测Wnt5a在海马中表达情况。结果免疫荧光结果显示,与同窝出生的野生型鼠相比,在95d变化不明显,108d,122d ALS转基因鼠海马齿状回Wnt5a阳性细胞增多,且Wnt5a与GFAP,β-tubulinⅢ共表达。RT-PCR结果显示,与同窝野生型鼠比较,ALS转基因鼠海马Wnt5a mRNA水平在95d变化不明显,108d和122d均升高(P<0.05)。结论 Wnt5a在ALS转基因鼠海马齿状回高表达,表明Wnt5a与肌萎缩脊髓侧索硬化症海马异常密切相关。 展开更多

关键词 海马齿状回 肌萎缩脊髓侧索硬化症 WNT5A 神经退行性变 信号通路

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大鼠移植静脉重塑中Wnt5a表达的变化 被引量：1

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作者 汪颖厚 辛世杰 +7 位作者 杨栋 王磊 李晰 王雷 丁奎 曹辉 张健 段志泉 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期28-30,共3页

目的研究Wnt5a在自体移植静脉重塑过程中的表达变化。方法建立大鼠颈静脉—腹主动脉移植模型,分别于术后7、14、28 d取材移植血管,采用免疫组化方法检测Wnt5a蛋白在移植血管中的表达,Real-time PCR定量检测Wnt5a mRNA的表达;以对侧颈静... 目的研究Wnt5a在自体移植静脉重塑过程中的表达变化。方法建立大鼠颈静脉—腹主动脉移植模型,分别于术后7、14、28 d取材移植血管,采用免疫组化方法检测Wnt5a蛋白在移植血管中的表达,Real-time PCR定量检测Wnt5a mRNA的表达;以对侧颈静脉作为对照。结果免疫组化结果显示:正常静脉、术后7、14、28 d移植静脉Wnt5a阳性细胞比例分别为(4.67±0.21)%、(20.34±0.26)%、(35.25±0.20)%和(57.24±0.52)%,正常静脉与移植静脉之间差异有统计学意义(P<0.01)。Real-time PCR结果显示:术后7、14、28 d大鼠Wnt5a mRNA表达增加,分别为对照组的3.56、8.44和16.87倍。结论自体静脉移植后,Wnt5a在新生内膜及中膜中高表达,并可能与细胞增殖有关。 展开更多

关键词 自体静脉移植 重塑 WNT5A 血管内膜 平滑肌细胞

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WNT5A与肿瘤的关系 被引量：1

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作者 张晓磊 郑建华 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2011年第2期83-86,共4页

WNT5A与胚胎发育以及肿瘤发生、侵袭、转移及化疗耐药等有重要关系.不同肿瘤中独特的WNT5A信号形成依赖于多种变量,包括受体、下游靶向效应分子、抑制分子以及来自于肿瘤微环境和肿瘤细胞外基质的外部影响.目前有研究对WNT5A作为肿瘤抑... WNT5A与胚胎发育以及肿瘤发生、侵袭、转移及化疗耐药等有重要关系.不同肿瘤中独特的WNT5A信号形成依赖于多种变量,包括受体、下游靶向效应分子、抑制分子以及来自于肿瘤微环境和肿瘤细胞外基质的外部影响.目前有研究对WNT5A作为肿瘤抑制因子还是肿瘤刺激因子的本质角色仍有争议,但WNT5A介导的信号转导通路与肿瘤的多种行为确有密切关系. 展开更多

关键词 肿瘤 信号传导 WNT5A

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Wnt5a在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 被引量：1

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作者 杨栋 辛世杰 +5 位作者 刘彦 汪颖厚 王磊 王雷 宋清斌 张健 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1479-1483,共5页

目的:探讨Wnt5a在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及意义。方法:收集术后病理确诊为PTC的患者石蜡标本47例,包括癌组织及癌旁组织,以及手术切除的PTC新鲜标本及其癌旁组织10例。分别采用免疫组化法及real-time PCR检测Wnt5a在PTC及癌... 目的:探讨Wnt5a在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达及意义。方法:收集术后病理确诊为PTC的患者石蜡标本47例,包括癌组织及癌旁组织,以及手术切除的PTC新鲜标本及其癌旁组织10例。分别采用免疫组化法及real-time PCR检测Wnt5a在PTC及癌旁组织中的表达。结果:47例患者的石蜡标本中,PTC及癌旁组织中,Wnt5a在PTC组织的阳性表达率为68.09%(32/47),在癌旁甲状腺组织为6.38%(3/47),两者间差异有统计学意义(P<0.01);统计分析显示,Wnt5a的表达与患者的性别及年龄无关(均P>0.05),而与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01)。10例手术标本检测显示,PTC中Wnt5a mRNA的表达明显高于其的癌旁甲状腺组织(6.43±1.38 vs.1.12±0.59,P<0.01)。结论:PTC组织中Wnt5a表达水平增高,这可能对PTC的发生和发展有着重要的作用。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 癌 乳头状 WNT5A 肿瘤转移

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Wnt5a在雌性小鼠胚胎生殖管道的时空表达

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作者 梁琳琳 朱桂金 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期247-251,共5页

目的探讨Wnt5a在早期雌性生殖管道发育过程中的表达。方法正常孕15.5d、17.5d、19.5d和21.5d的小鼠胚胎,PCR鉴定性别,取雌性胎鼠石蜡包埋,连续横断切片,每4张行1张HE染色,1张白片待用。HE染色后获取连续切片图像,根据雌性胚鼠生殖管道... 目的探讨Wnt5a在早期雌性生殖管道发育过程中的表达。方法正常孕15.5d、17.5d、19.5d和21.5d的小鼠胚胎,PCR鉴定性别,取雌性胎鼠石蜡包埋,连续横断切片,每4张行1张HE染色,1张白片待用。HE染色后获取连续切片图像,根据雌性胚鼠生殖管道解剖走形,识别中肾旁管/子宫解剖定位。选取含有中段中肾旁管/子宫的白片,用SABC免疫组织化学方法,检测Wnt5a在不同发育时期雌性生殖管道的表达。结果获取含雌性生殖管道的鼠胚切片。同时检测到Wnt5a在孕15.5d到21.5d的雌性鼠胚中段中肾旁管/子宫上皮细胞、间质细胞均有表达,随着鼠胚发育,Wnt5a在间质细胞表达不断增强,差异在统计学上有极显著意义(P<0.01)。结论Wnt5a在雌性小鼠生殖管道形成过程中发挥作用,可能是诱导子宫发育及分化的关键因子。 展开更多

关键词 胚胎 中肾旁管 子宫 石蜡切片 WNT5A 免疫组织化学 小鼠

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wnt5a诱导心肌祖细胞向心肌细胞分化的作用研究

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作者 吴良宇 向平 +5 位作者 刘玲娟 何通川 房松华 吕铁伟 田杰 李谧 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期316-321,共6页

目的探讨wnt5a诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒Ad-wnt5a和Ad-GFP;转染CP15-5a细胞后,设置wnt5a组、GFP组和空白对照组。采用流式细胞技术检测Ad-wnt5a和Ad-GFP的转染效率;1周后,通过实时... 目的探讨wnt5a诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化的作用。方法利用HEK293细胞扩增重组腺病毒Ad-wnt5a和Ad-GFP;转染CP15-5a细胞后,设置wnt5a组、GFP组和空白对照组。采用流式细胞技术检测Ad-wnt5a和Ad-GFP的转染效率;1周后,通过实时定量PCR(q RT-PCR)检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌组织特异性转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌增强因子2C(MEF2C)的表达;2周后,通过Western blotting及免疫荧光技术检测经Ad-wnt5a诱导的CP15-5a细胞中心肌连接因子43(CX43)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达;全细胞膜片钳技术检测钠电流(I_(Na))表达。结果 Ad-wnt5a和Ad-GFP转染效率分别为42.8%、44.3%。腺病毒转染CP15-5a细胞1周后,wnt5a组GATA4和MEF2C基因的表达量(分别为1.717±0.220、1.847±0.190)较GFP组和空白对照组(GATA4:1.003±0.087、0.961±0.063,P<0.05;MEF2C:0.456±0.042、0.500±0.095,P<0.05)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义;腺病毒转染2周后,wnt5a组CX43和c Tn T蛋白的表达量(分别为1.597±0.267、0.727±0.100)较GFP组和空白对照组(CX43:0.723±0.047、0.783±0.1333,P<0.05;cTnT:0.217±0.021和0.253±0.102,P<0.01)明显升高,而GFP组与空白对照组比较差异无统计学意义。与GFP组及空白对照组比较,wnt5a组可检测出I_(Na)。结论 wnt5a可诱导心肌祖细胞CP15-5a向心肌细胞分化。 展开更多

关键词 WNT5A 心肌祖细胞 心肌细胞

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Wnt5a在胃癌的表达及其临床意义

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作者 李亚兰 刘秋雨 张艳丽 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第9期1370-1372,共3页

目的:观察Wnt5a在胃癌中的表达及意义。方法:采用RT-PCR法检测Wnt5a基因在正常胃黏膜细胞GES-1及胃腺癌细胞SGC7901中的表达;应用Western-blot法测定GES-1细胞及SGC7901细胞Wnt5a蛋白的表达;运用免疫组化SP法观察60例胃腺癌及30例癌旁... 目的:观察Wnt5a在胃癌中的表达及意义。方法:采用RT-PCR法检测Wnt5a基因在正常胃黏膜细胞GES-1及胃腺癌细胞SGC7901中的表达;应用Western-blot法测定GES-1细胞及SGC7901细胞Wnt5a蛋白的表达;运用免疫组化SP法观察60例胃腺癌及30例癌旁胃黏膜组织Wnt5a蛋白的表达,分析Wnt5a表达与胃癌临床病理参数间的关系。结果:Wnt5a基因与蛋白在SGC7901细胞中的表达高于GES-1细胞;Wnt5a在胃癌组织中的表达高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05)。淋巴结转移及TNM分期越晚的胃癌组织Wnt5a表达越高(P<0.05)。结论:Wnt5a与胃癌的侵袭和转移有关,在胃癌的发生发展中起癌基因样作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 WNT5A GES-1 SGC7901 转移

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肝细胞肝癌中Wnt5a基因的表达及其临床意义

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作者 刘晓红 周晓军 +3 位作者 王建东 马恒辉 章如松 周志毅 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期113-116,共4页

目的探讨Wnt5a基因mRNA及其蛋白在肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达规律及其临床意义。方法应用实时定量RTPCR方法检测22例HCC癌和癌旁配对组织中Wnt5a基因mRNA表达，采用免疫组织化学（ABC）法检测76例Wnt5a蛋白... 目的探讨Wnt5a基因mRNA及其蛋白在肝细胞肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）中的表达规律及其临床意义。方法应用实时定量RTPCR方法检测22例HCC癌和癌旁配对组织中Wnt5a基因mRNA表达，采用免疫组织化学（ABC）法检测76例Wnt5a蛋白的表达情况，结合病人的临床病理资料分析Wnt5a基因在HCC中的表达意义。结果对比癌旁肝组织，68％（15／22）的肝癌组织Wnt5a基因mRNA呈上调表达（P=0．038）；而80．3％（61／76）的HCC癌组织wnt5a蛋白显示低或阴性表达（P〈0．001），Wnt5a蛋白低表达与病人的性别、肿瘤的大小、肿瘤的分化程度、HBsAg、以及有无肝硬化无关（P〉0．05），而与高的甲胎蛋白水平（AFP，P=0．020）和差的肿瘤分期有关（P〈0．001）。结论Wnt5蛋白缺失表达是HCC进展中的频发事件，Wnt5a在HCC肿瘤发生过程中可能发挥肿瘤抑制基因活性，该蛋白极可能是一个有用的HCC预后不良指标。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 WNT5A 实时定量RT—PCR 免疫组化

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原代人黑素细胞Wnt5A基因沉默的研究

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作者 粟倩雅 林彤 +1 位作者 张孟丽 彭霖 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期706-709,共4页

目的 优化Wnt5A特异性siRNA转染原代人黑素细胞的实验条件，建立沉默Wnt5A基因的模型。方法 培养原代人黑素细胞，将不同浓度（0、20.0、33.3、40.0、60.0 nmol/L）的阳性参照基因GAPDH特异性siRNA通过脂质体法介导转染原代人黑素细胞... 目的 优化Wnt5A特异性siRNA转染原代人黑素细胞的实验条件，建立沉默Wnt5A基因的模型。方法 培养原代人黑素细胞，将不同浓度（0、20.0、33.3、40.0、60.0 nmol/L）的阳性参照基因GAPDH特异性siRNA通过脂质体法介导转染原代人黑素细胞，实时荧光定量PCR（qPCR）筛选转染效率最高的siRNA浓度；合成3条Wnt5A-siRNA（Wnt5A-siRNA-793、Wnt5A-siRNA-943、Wnt5A-siRNA-1743），分别转染原代人表皮黑素细胞，qPCR法选择干扰特异性最佳的Wnt5A-siRNA；用最佳Wnt5A-siRNA转染原代人黑素细胞，分别于培养24、48、72 h提取总mRNA及总蛋白，通过qPCR及Western印迹法确定转染效率最高的时间点。结果 0、20.0、33.3、40.0、60.0 nmol/L GAPDH-siRNA转染原代人黑素细胞后，GAPDH mRNA相对表达量分别为1.009 ± 0.161、0.086 ± 0.010、0.140 ± 0.016、0.285 ± 0.095、0.012 ± 0.007，组间比较，差异有统计学意义（F = 69.469，P 〈 0.05）。60 nmol/L siRNA组GAPDH表达低于其他各组（均P 〈 0.05），干扰效率最佳；各Wnt5A-siRNA组及空白组Wnt5A mRNA相对表达量分别为0.331 ± 0.010、2.229 ± 0.029、0.078 ± 0.006、1.000 ± 0.024，差异有统计学意义（F = 7 006.094，P 〈 0.05）。Wnt5A-siRNA-1743组目标分子表达量低于其他3组（均P 〈 0.05），干扰效率最佳。Wnt5A-siRNA-1743转染原代人表皮黑素细胞后24、48、72 h及空白组 Wnt5A mRNA相对表达量分别为0.396 ± 0.002、0.026 ± 0.008、0.131 ± 0.079、1.025 ± 0.276，组间比较，差异有统计学意义（F = 29.215，P 〈0.05），干扰后48 h低于干扰后24、72 h及空白组（均P 〈 0.05）；Wnt5A蛋白相对表达量分别为112.798 ± 0.218、77.765 ± 0.415、30.540 ± 0.219、130.025 ± 0.158，组间比较，差异有统计学意义（F = 79 122.889，P 〈 0.05），干扰后72 h低于干扰后24、48 h及空白组（均P 〈 0.05）。结论 成功建立siRNA沉默人黑素细胞Wnt5A基因的模型。 展开更多

关键词 黑素细胞 RNA 小分子干扰 基因沉默 WNT5A

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