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鸡PPARγ基因的表达特性及其对脂肪细胞增殖分化的影响 被引量：37
1
作者 王丽 那威 +5 位作者 王宇祥 王彦博 王宁 王启贵 李玉茂 李辉 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期454-464,共11页
为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表... 为分析鸡PPARγ基因的组织表达特性及其在脂肪细胞增殖和分化过程中的功能,文章以东北农业大学高、低腹脂双向选择品系肉鸡为实验材料,利用Western blotting方法,检测PPARγ基因的组织表达特性及其在高、低脂系肉鸡腹部脂肪组织间的表达差异;采用RNAi技术,在鸡原代脂肪细胞中抑制PPARγ基因的表达后,通过MTT和油红O提取比色的方法,研究鸡PPARγ基因对脂肪细胞增殖和分化的调控作用;利用Real-timePCR和Western blotting技术,分析PPARγ基因表达下调后,其他脂肪细胞分化转录因子以及与脂肪细胞分化相关的重要基因的表达变化情况。结果表明,PPARγ基因在7周龄高脂系肉鸡腹部脂肪组织、肌胃、脾脏、肾脏组织中表达量较高,在心脏中表达量较低,在肝脏、胸肌、腿肌、十二指肠中未检测到表达信号;与高脂系相比,PPARγ基因在5和7周龄低脂系肉鸡腹部脂肪组织中的表达量较低(P<0.05);PPARγ基因的表达量下降后,鸡脂肪细胞的增殖能力增强,分化能力减弱;同时,C/EBPα、SREBP1、A-FABP、Perilipin1、LPL、IGFBP-2基因的表达量均下降(P<0.05)。由此可见,PPARγ基因的表达可能与肉鸡腹部脂肪的沉积有一定的关系,该基因可能是调控鸡脂肪细胞增殖与分化的关键因子。 展开更多
关键词 鸡 PPARΓ基因 脂肪细胞增殖分化 组织表达 RNAI
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鸡PPARs基因组织表达特性的研究 被引量：24
2
作者 孟和 李辉 王宇祥 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第7期682-687,共6页
以 8周龄ArberAcres(AA)肉鸡为研究材料 ,采用RT PCR和Northernblot方法对鸡PPAR基因组织表达特点进行了研究。RT PCR半定量检测显示 ,在检测的 10种组织中除胸部肌肉组织外 ,PPAR α基因在其他 9种组织中都表达 ,其中较高表达于脑、肺... 以 8周龄ArberAcres(AA)肉鸡为研究材料 ,采用RT PCR和Northernblot方法对鸡PPAR基因组织表达特点进行了研究。RT PCR半定量检测显示 ,在检测的 10种组织中除胸部肌肉组织外 ,PPAR α基因在其他 9种组织中都表达 ,其中较高表达于脑、肺脏、肾脏、心脏和小肠 ,中等程度表达于胃、肝脏和脂肪 ,较低表达于脾脏。PPAR γ基因除了在肝脏和肌肉中没有检测到外 ,在其他 8种组织都有表达 ,其中高表达于脂肪 ,其次是脑和肾脏 ,低量表达于脾脏、心脏、肺脏、胃和小肠。Northernblot检测显示 ,PPAR α基因在心脏、肝脏、肾脏和胃这 4种组织表达 ,其中在肝脏杂交信号最强 ;PPAR γ基因只在脂肪和肾脏表达 ,其中在脂肪组织有强的杂交信号。以上结果表明 ,鸡PPARs基因的组织表达特点同啮齿动物和人基本一致 ,但也有其自身的特殊性 ,即PPAR α基因不在肌肉组织中表达 ,PPAR γ基因在肾脏中有高表达。PPAR基因与鸡的多种组织的生长和发育有关。 展开更多
关键词 PPARs基因 组织表达特性 鸡
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绵羊FGF 7基因组织表达及其多态性与产羔数之间的关系 被引量：28
3
作者 周梅 曹晓涵 +8 位作者 贺小云 孙庆 狄冉 胡文萍 王翔宇 张效生 张金龙 刘秋月 储明星 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期525-533,共9页
旨在探究绵羊FGF7基因组织表达水平及其多态性与产羔数之间的关系。本研究利用半定量反转录-聚合酶链式反应(sqRT-PCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术对绵羊FGF7基因在多羔小尾寒羊和单羔苏尼特羊以及小尾寒羊FecB不同基因型(BB、B+、++)... 旨在探究绵羊FGF7基因组织表达水平及其多态性与产羔数之间的关系。本研究利用半定量反转录-聚合酶链式反应(sqRT-PCR)和实时荧光定量PCR(qPCR)技术对绵羊FGF7基因在多羔小尾寒羊和单羔苏尼特羊以及小尾寒羊FecB不同基因型(BB、B+、++)各组织中的表达水平进行研究,同时采用Sequenom MassARRAY~?SNP技术,对多羔绵羊品种(小尾寒羊380只)和单羔绵羊品种(滩羊、苏尼特羊、萨福克羊、杜泊羊和草原型藏羊共380只)FGF7基因g.57842893C>T位点多态性进行检测,并与小尾寒羊产羔数进行关联分析。结果表明,FGF7基因在单、多羔绵羊的心和肺中高表达,在其它各组织呈中等或低丰度表达;FGF7基因在多羔小尾寒羊绝大部分组织中的表达量均高于单羔苏尼特羊,但差异均不显著(P>0.05),FGF7在小尾寒羊FecB不同基因型中的表达并无明显差异。g.57842893C>T位点共存在CC、CT和TT 3种基因型,且基因型频率和等位基因频率在单、多羔品种间差异均达到显著水平(P≤0.05);g.57842893C>T位点在苏尼特羊、萨福克羊和杜泊羊中表现为中度多态(0.25<PIC<0.50),在其它品种中表现为低度多态(PIC<0.25);g.57842893C>T位点仅在苏尼特羊、萨福克羊以及杜泊羊3个品种中均处于哈代温伯格平衡状态(P>0.05);g.57842893C>T位点与小尾寒羊第1、2以及第3胎产羔数均无显著关联(P>0.05),但CC型各胎产羔数均高于TT型。综上表明,FGF7基因的表达水平与绵羊产羔数可能存在一定程度的正相关,虽然可能不是影响绵羊产羔数的关键基因,但g.57842893C>T位点对绵羊产羔数性状的选育具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 绵羊 FGF7基因 组织表达 SNP分型 产羔数
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黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织PKD1蛋白表达的影响 被引量：26
4
作者 杨雷 毛秉豫 +3 位作者 徐国昌 叶松山 卞华 曾小涛 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期535-539,共5页
目的探讨黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织蛋白激酶D1(PKD1)蛋白表达的影响。方法成功构建大鼠心肌梗死模型后,随机分为模型组、黄芪提取物3个不同剂量组,每组8只大鼠,另设假手术组8只。术后48 h,黄芪提取物组分别给予低、中、高10,2... 目的探讨黄芪提取物对大鼠心肌梗死后心肌组织蛋白激酶D1(PKD1)蛋白表达的影响。方法成功构建大鼠心肌梗死模型后,随机分为模型组、黄芪提取物3个不同剂量组,每组8只大鼠,另设假手术组8只。术后48 h,黄芪提取物组分别给予低、中、高10,20,40 mg.(kg.d)-1灌胃;模型组和假手术组给予生理盐水20 ml.(kg.d)-1灌胃。8周后测定大鼠的血流动力学变化;应用HE染色分析左心室心肌细胞组织形态学变化;采用Masson染色法检测左心室心肌胶原纤维变化;应用免疫组化法和免疫印迹法分析左心室心肌组织PKD1蛋白的表达情况。结果血流动力学检测结果表明,和模型组相比,假手术组、各治疗组心脏左室收缩压(LVSP)、左室内压曲线最大上升和下降速率(±dp/dt)均明显升高(P<0.05),左室舒张末压(LVEDP)均明显降低(P<0.05)。HE染色分析,模型组大鼠心肌细胞坏死严重,成纤维细胞增生明显,伴有炎症细胞浸润;黄芪提取物低、中剂量组大鼠心肌细胞淡染,界限欠清晰,部分细胞核肥大,伴有成纤维细胞增生和少量炎症细胞浸润;高剂量组大鼠心肌细胞形态较清晰,成纤维细胞和炎症细胞少见。Masson染色表明,模型组大鼠心肌以胶原组织为主,各治疗组大鼠以红色心肌组织为主,间杂以胶原组织。免疫组化和免疫印迹分析表明,模型组大鼠心肌组织胞质中PKD1蛋白的表达明显;和模型组相比,各治疗组大鼠心肌细胞胞质中PKD1蛋白的表达明显下调(P<0.05),但仍清晰可见。结论黄芪提取物可明显改善大鼠心肌梗死后异常的血液流变学指标、组织病变及胶原纤维构成比例,其作用机制可能与下调心肌组织PKD1蛋白的表达相关。 展开更多
关键词 黄芪 提取物 心肌梗死 胶原纤维 蛋白激酶D 表达
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血管内皮细胞生长因子在烧伤后肉芽组织和增生性瘢痕中的表达 被引量：13
5
作者 沈锐 利天增 +4 位作者 祁少海 李叶扬 谢举临 徐盈斌 赵继宗 《中国康复理论与实践》 CSCD 2002年第1期1-2,共2页
目的观察血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在烧伤创面肉芽组织和烧伤后不同时期增生性瘢痕中的动态变化 ,探讨VEGF在烧伤创面修复过程中的表达规律及其作用。方法选择临床手术切除的新鲜烧伤创面肉芽及各个时期的增生性瘢痕 ,制成匀浆液 ,应... 目的观察血管内皮细胞生长因子 (VEGF)在烧伤创面肉芽组织和烧伤后不同时期增生性瘢痕中的动态变化 ,探讨VEGF在烧伤创面修复过程中的表达规律及其作用。方法选择临床手术切除的新鲜烧伤创面肉芽及各个时期的增生性瘢痕 ,制成匀浆液 ,应用ELISA方法检测匀浆液中VEGF的变化。结果VEGF可在烧伤创面肉芽组织中有一定的表达 ,随着增生性瘢痕的发展 ,其表达量进一步增加 ,在 4— 6个月的增生性瘢痕中 ,表达量达到峰值。瘢痕成熟后 ,VEGF的组织表达逐渐下降。 展开更多
关键词 增生性瘢痕 血管内皮生长因子 组织匀浆液 表达
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海水鱼真鲷脂蛋白脂肪酶基因cDNA序列与组织表达 被引量：15
6
作者 梁旭方 Hiromi OKU +3 位作者 Hiroshi Y.OGATA 李月琴 白俊杰 罗建仁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期712-719,共8页
为研究脊椎动物真鲷脂蛋白脂肪酶 (LPL)结构与功能关系以及探讨动脉粥样硬化形成机理 ,通过构建cDNA文库 ,克隆对动脉粥样硬化表现抗性的海水鱼真鲷LPL基因cDNA全序列 .再通过PCR方法扩增基因组DNA ,获取内含子 9及其两侧序列以确定外显... 为研究脊椎动物真鲷脂蛋白脂肪酶 (LPL)结构与功能关系以及探讨动脉粥样硬化形成机理 ,通过构建cDNA文库 ,克隆对动脉粥样硬化表现抗性的海水鱼真鲷LPL基因cDNA全序列 .再通过PCR方法扩增基因组DNA ,获取内含子 9及其两侧序列以确定外显子 10的大小 ,最后通过RT PCR ,以 β肌动蛋白为外参照 ,比较真鲷在食用两种脂肪含量不同饲料和摄食状态不同的处理条件下 ,肝脏和腹腔肠系膜脂肪组织LPLmRNA的相对水平 .从腹腔肠系膜脂肪组织cDNA文库中克隆出LPLcDNA序列 ,其完整的开放阅读框架由 15 36bp组成 ,编码 5 11个氨基酸残基 .与哺乳类不同 ,真鲷LPL基因外显子 10的开始部分是翻译的 .LPL的催化位点、二硫键位点、N 糖基化位点、肝素结合区、脂质结合位点、介导脂蛋白与低密度脂蛋白受体结合位点、二聚体形成位点等主要功能域在真骨鱼类真鲷与其它脊椎动物间基本保守 ,但肝素结合区的碱性氨基酸残基含量较人类减少 ,并在结合脂质底物的疏水环套中出现插入片段 .与哺乳类不同 ,真鲷LPL基因在成体肝脏存在诱导性表达 ,而在其腹腔肠系膜脂肪组织则存在与哺乳类相似的组成性表达 .当真鲷喂食高脂饲料时 ,其饱食状态下肝脏LPLmRNA水平升高 ,但对其腹腔肠系膜脂肪组织LPL表达没有影响 .当真鲷喂食标准商业饲料时 ,? 展开更多
关键词 海水鱼 真鲷 脂蛋白脂肪酶基因 CDNA序列 组织表达
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成熟猕猴桃果实不同组织中ACC氧化酶基因的表达差异研究 被引量：14
7
作者 徐忠传 《中国科学技术大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期235-240,共6页
研究了猕猴桃“海沃特”成熟果实各组织中ACC氧化酶基因的转录水平和翻译水平对乙烯生成的影响 .结果表明 :①乙烯生成具有组织差异性 ;②ACC氧化酶基因mRNA的表达在各组织中水平相似 ;③ACC氧化酶的表达水平具有显著的组织差异性及时... 研究了猕猴桃“海沃特”成熟果实各组织中ACC氧化酶基因的转录水平和翻译水平对乙烯生成的影响 .结果表明 :①乙烯生成具有组织差异性 ;②ACC氧化酶基因mRNA的表达在各组织中水平相似 ;③ACC氧化酶的表达水平具有显著的组织差异性及时间顺序性 .因此 ,ACC氧化酶的表达水平的高低可能是导致乙烯生成的组织差异性的主要原因之一 . 展开更多
关键词 组织 乙烯 ACC氧化酶 猕猴桃 果实 基因表达
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肺癌石蜡包埋组织及新鲜标本组织芯片制备方法学探讨 被引量：17
8
作者 韩瑞刚 张建中 +4 位作者 黄英武 郑燕华 赵尔增 周金莲 张卫国 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期404-407,共4页
目的 :探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法 ,以及在基因表达分析中的应用。方法 :选取肺癌石蜡包埋组织 90例 ,新鲜液氮冻存肺癌及癌旁肺组织 2 0例 ,常规切片HE染色下确定穿刺部位 ,石蜡包埋组织芯片制作按Konone... 目的 :探讨和建立石蜡包埋组织和新鲜冷冻标本制备组织芯片的方法 ,以及在基因表达分析中的应用。方法 :选取肺癌石蜡包埋组织 90例 ,新鲜液氮冻存肺癌及癌旁肺组织 2 0例 ,常规切片HE染色下确定穿刺部位 ,石蜡包埋组织芯片制作按Kononem等方法 (1998) ,每例穿取 0 6mm组织柱 2条 ,制备 180点阵组织芯片 ;而新鲜组织芯片参考Fejzo等方法 (2 0 0 1) ,并略作改良 ,制备 5 0点阵组织芯片。所有组织芯片模块 ,经 4 μm切片、常规组织学染色和免疫组化染色 ,以评价其在形态学及基因表达分析中应用的可行性。结果 :180点阵石蜡包埋肺癌组织芯片 ,组织排列整齐 ,HE染色后组织形态可观察率在 98%以上 ;p5 3、c myc、bcl 2、bax和Ki 6 7等免疫组化染色后 ,肺癌组织可见不同程度的抗原表达 ,组织点阵的形态可观测率在 89%～ 95 %之间。新鲜组织芯片经HE染色后 ,形态可观测率和基因表达可分析率在 70 %左右。结论 :手工法组织芯片制备简便易行 ,使用组织少 ,不破坏原蜡块 ;实验均一性、可比性好 ,且节省试剂。与常规组织切片相比 ,2点 0 6mm组织可以获得原蜡块 95 %以上的信息 ,完全可以用于组织形态学和蛋白水平上的基因表达分析 ;新鲜组织芯片技术已经初步建立 ,但尚有待于进一步完善制备技术和mRNA分析方法。 展开更多
关键词 肺癌 石蜡包埋组织 新鲜标本组织芯片 制备 方法学
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GPxs家族基因在山羊不同组织和睾丸不同发育时期的表达特性研究 被引量：22
9
作者 张建新 王茜 +3 位作者 荀文娟 任有蛇 岳文斌 张春香 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期650-657,共8页
为了研究谷胱甘肽过氧化酶家族(GPxs)在山羊不同组织表达的特异性及在睾丸不同发育时期的表达特性。采用SYBR Green荧光定量PCR的方法对太行青山羊公羊各组织和不同发育时期睾丸GPxsmRNA的表达进行了定量分析。结果表明:GPx1、GPx3、GPx... 为了研究谷胱甘肽过氧化酶家族(GPxs)在山羊不同组织表达的特异性及在睾丸不同发育时期的表达特性。采用SYBR Green荧光定量PCR的方法对太行青山羊公羊各组织和不同发育时期睾丸GPxsmRNA的表达进行了定量分析。结果表明:GPx1、GPx3、GPx4和GPx7在各组织广泛表达,其表达量由高到低的顺序:GPx1是肝脏>肺脏>心脏>睾丸、脾脏>肾脏>背最长肌,肝脏GPx1mRNA表达量是肌肉组织的6.7倍;GPx3是肾脏>心脏>肝脏、睾丸>脾脏、肺脏、背最长肌,肾脏GPx3mRNA表达量分别是肝脏和肺脏表达量的12和24倍;GPx4是睾丸>心脏>肾脏、肝脏、肺脏>脾脏、背最长肌,睾丸GPx4mRNA表达量分别是肝脏和肌肉的21和137倍;GPx7是肝脏>脾脏、肺脏、背最长肌>心脏>肾脏、睾丸。GPx5和GPx6仅在睾丸和附睾中表达,且GPx5在附睾头中的表达是睾丸的114倍;睾丸中GPx3表达量随日龄增加而降低,GPx1和GPx4表达量随日龄增加而增加,GPx5在90d开始表达且直接到达高峰平台,GPx6和GPx7在60d开始表达,90d到高峰平台,而后其表达量降低。山羊GPxs mRNA表达具有明显的组织特异性,山羊睾丸中GPxs mRNA表达具有时间依赖性。 展开更多
关键词 山羊 GPxs MRNA 组织分布 睾丸 表达特性
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猪PID1基因CDS区的克隆及其mRNA表达与肌内脂肪沉积关系 被引量：20
10
作者 钱源 曾勇庆 +5 位作者 杜金芳 崔景香 李华 陈其美 宋一萍 陈伟 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1153-1158,共6页
为了探索PID1(Phosphotyrosine interaction domain containing1)基因的表达与脂肪沉积的关系,文章利用兼并引物进行RT-PCR从猪脂肪和肌肉组织中克隆PID1基因CDS(Coding region)区全序列,并采用荧光定量PCR方法对大白猪、鲁莱黑猪、莱芜... 为了探索PID1(Phosphotyrosine interaction domain containing1)基因的表达与脂肪沉积的关系,文章利用兼并引物进行RT-PCR从猪脂肪和肌肉组织中克隆PID1基因CDS(Coding region)区全序列,并采用荧光定量PCR方法对大白猪、鲁莱黑猪、莱芜猪3个猪品种的肝脏、脂肪和肌肉组织PID1基因mRNA表达进行了相对定量分析。结果表明:经克隆、测序,得到了猪PID1基因654bp全编码区序列,通过Blast比对,与人、大鼠、牛有93.88%、66.94%、88.07%的同源性。PID1基因在同一个品种猪中mRNA表达水平总体表现为:肝脏>脂肪>肌肉。在不同品种3种组织中PID1基因mRNA表达水平总体表现为:莱芜猪>鲁莱黑猪>大白猪,其中肝脏中差异显著(P<0.05),但是在脂肪和肌肉组织中莱芜猪与鲁莱黑猪差异不显著(P>0.05)。对于高肌内脂肪(LWH)、中等肌内脂肪(LWI)和低肌内脂肪(LWL)沉积的3组莱芜猪,PID1基因在肝脏组织中的表达水平是LWH显著高于LWL(P<0.05),在肌肉组织中则是LWH显著高于LWI和LWL(P<0.05)。PID1基因在莱芜猪品种内3个组织中mRNA表达量与IMF含量相关均不显著,而在品种间3个组织中mRNA表达量与IMF含量呈显著正相关(P<0.05)。结果提示:PID1的表达可能与脂肪沉积性状存在一定的关系。 展开更多
关键词 猪 PID1基因 组织表达 肌内脂肪
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鸭A-FABP基因的克隆及其组织表达 被引量：19
11
作者 张军 董飚 +6 位作者 张红 储冬生 徐国庆 龚道清 段修军 赵旭庭 顾志良 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期819-822,共4页
本文采用RT-PCR方法从35周龄母鸭脂肪组织中克隆了A-FABP基因的cDNA序列,其长度为422 bp,包含了1个399 bp的完整CDS,编码132个氨基酸。该序列与家禽（鹅、鸡）和哺乳动物（人、小鼠、猪、牛）的A-FABP基因序列约有94%和73.4%-75.7%的同... 本文采用RT-PCR方法从35周龄母鸭脂肪组织中克隆了A-FABP基因的cDNA序列,其长度为422 bp,包含了1个399 bp的完整CDS,编码132个氨基酸。该序列与家禽（鹅、鸡）和哺乳动物（人、小鼠、猪、牛）的A-FABP基因序列约有94%和73.4%-75.7%的同源性,而相应氨基酸序列的同源性为92.4%和72.0%-77.3%。半定量RT-PCR研究结果为A-FABP基因在间脑、肺和肾组织中不表达,在脂肪组织中的表达明显高于其他组织（P〈0.5）。表明A-FABP基因在动物进化中具有高度保守性,该基因的表达具有组织特异性。 展开更多
关键词 鸭 A-FABP基因 克隆 组织表达
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β-防御素caBD-1 mRNA在骆驼组织器官中的表达 被引量：14
12
作者 杨银凤 唐博 +1 位作者 余兴邦 曹贵方 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第11期3-6,共4页
根据已知的骆驼 β 防御素caBD 1cDNA序列设计了 1对预计扩增产物为 2 0 3bp的引物 ,通过RT PCR检测骆驼的整个消化道黏膜、肝、胰腺、气管黏膜、肺、肾、膀胱黏膜、卵巢、子宫内膜、脾、淋巴结、心等器官内caBD 1mRNA的表达。结果显示 ... 根据已知的骆驼 β 防御素caBD 1cDNA序列设计了 1对预计扩增产物为 2 0 3bp的引物 ,通过RT PCR检测骆驼的整个消化道黏膜、肝、胰腺、气管黏膜、肺、肾、膀胱黏膜、卵巢、子宫内膜、脾、淋巴结、心等器官内caBD 1mRNA的表达。结果显示 :caBD 1mRNA在整个消化道、气管、膀胱、子宫等管状器官内的黏膜层有表达 ,而在实质性器官如心、肝、胰腺、肺、脾、淋巴结、卵巢、肾中无表达。提示 。 展开更多
关键词 Β-防御素 骆驼 组织表达
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高羊茅组织培养再生体系及GUS基因瞬间表达研究 被引量：11
13
作者 高丽美 徐子勤 +2 位作者 张永彦 黄萱 刘杨 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期40-45,共6页
以成熟种子为外植体,对高羊茅组织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2,4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,结果表明:9.0mg/L2,4-D对愈伤组织的诱导效果最佳,0.2mg/L激动素是愈伤组织分化成苗... 以成熟种子为外植体,对高羊茅组织培养和植株再生体系进行了优化,分析了不同浓度2,4-D、6-BA和激动素对高羊茅愈伤组织诱导和愈伤组织分化成苗的影响,结果表明:9.0mg/L2,4-D对愈伤组织的诱导效果最佳,0.2mg/L激动素是愈伤组织分化成苗的最适浓度,二者的诱导率和分化率分别达到68.08%和45.83%.在愈伤组织继代培养基中附加1.0mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA和1.25mg/LCuSO4有利于胚性愈伤组织的形成,可以明显促进愈伤组织分化.同时,采用基因枪法将GUS基因导入高羊茅愈伤组织中,通过组织化学染色检测到了GUS瞬间表达活性;并对影响GUS基因瞬间表达的因素进行了分析,以期为提高基因枪法遗传转化效率提供参考. 展开更多
关键词 高羊茅 组织培养 基因枪 GUS基因 瞬间表达
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利用电击法转化玉米胚性愈伤组织获得GUS基因瞬时表达的研究 被引量：3
14
作者 曹毅 陈英 +2 位作者 蒋彦 乔代蓉 刘杨 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期913-918,共6页
作者以成单玉米幼胚经诱导、继代、筛选 ,获得了可分化的胚性愈伤组织 ,采用电击转化法 ,将质粒pBI12 1导入成单玉米的胚性愈伤组织中 ,通过组织化学染色法 ,观察到了GUS基因的瞬时表达 ,并筛选出对愈伤组织损害轻、GUS表达较强的最适... 作者以成单玉米幼胚经诱导、继代、筛选 ,获得了可分化的胚性愈伤组织 ,采用电击转化法 ,将质粒pBI12 1导入成单玉米的胚性愈伤组织中 ,通过组织化学染色法 ,观察到了GUS基因的瞬时表达 ,并筛选出对愈伤组织损害轻、GUS表达较强的最适电击条件为 :96 0 μF ,375V/cm ,6 1ms. 展开更多
关键词 玉米 组织培养 胚性愈伤组织 瞬时表达 电击转化 GUS基因
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NYGGF4小鼠同源基因mRNA在遗传性ob／ob肥胖小鼠体内的表达 被引量：16
15
作者 夏黎 钱玲梅 +6 位作者 孔祥清 倪毓辉 张春梅 童梅玲 池霞 吴伟玲 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第19期1488-1490,共3页
目的观察NYGGF4小鼠同源基因在遗传性ob/ob肥胖小鼠(以下简称ob/ob小鼠)与正常C57/BL6J小鼠脂肪组织中的差异表达,分析NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠体内的多组织表达特征,探讨NYGGF4小鼠同源基因与肥胖之间的关系。方法雄性10周龄ob/o... 目的观察NYGGF4小鼠同源基因在遗传性ob/ob肥胖小鼠(以下简称ob/ob小鼠)与正常C57/BL6J小鼠脂肪组织中的差异表达,分析NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠体内的多组织表达特征,探讨NYGGF4小鼠同源基因与肥胖之间的关系。方法雄性10周龄ob/ob小鼠、正常小鼠(对照组)各12只,以乌拉坦(0.4g/kg)深度麻醉后取腹膜后脂肪、肝、脑、骨骼肌、心肌、结肠、肾、小肠、肺、胸腺、脾等组织,采用RT-PCR技术检测NYGGF4小鼠同源基因的mRNA表达水平,比较NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠与正常对照小鼠腹膜后脂肪组织中的差异表达及在ob/ob小鼠各组织中的表达。结果1.ob/ob小鼠体质量[(38.94±1.97)g]显著高于对照组小鼠[(18.47±0.66)g](P<0.001);2.NYGGF4小鼠同源基因在ob/ob小鼠腹膜后脂肪组织中的表达水平[(89.18±8.31)%]显著高于对照组小鼠[(56.84±9.54)%](P<0.001);3.NYGGF4小鼠同源基因在肝脏、脑、腹膜后脂肪、骨骼肌、心肌、结肠、肾脏等组织中均有表达,从高至低依次为肝脏>脑>腹膜后脂肪>骨骼肌>心肌>结肠>肾脏,虽在小肠、肺、胸腺、脾等组织中未检测到阳性信号,但总体上呈现多组织表达特征。结论NYGGF4小鼠同源基因可能参与肥胖发生的病理生理机制,并在肝脏、脑、腹膜后脂肪、骨骼肌等胰岛素作用的靶组织中表达水平相对较高。 展开更多
关键词 NYGGF4小鼠同源基因 遗传性ob/ob小鼠 肥胖 组织 表达
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黄颡鱼HSC70基因及其组织表达分析 被引量：15
16
作者 张娟 张其中 +1 位作者 张占会 崔淼 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期426-434,共9页
热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3... 热休克蛋白70(HSP70)与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE(Rapid amplification of cDNA ends)技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白(HSC70)基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3′非编码区225bp,开放阅读框(ORF)1938bp,编码645个氨基酸组成的蛋白质。黄颡鱼HSC70基因含有8个内含子,与人、鼠、虹鳟和花斑溪鳉的HSC70基因内含子数目相同,位置相似。其中,最长内含子(873bp)位于5′端非编码区,其余内含子(长度在80—251bp之间不等)均在编码区以内。黄颡鱼HSC70基因编码的氨基酸序列与南方鲶的相似度最高,达96.13%,与欧洲银鲫和团头鲂的相似度分别为94.45%和94.14%。RT-PCR检测显示,正常情况下黄颡鱼HSC70在血细胞、心脏、肝、头肾、脾、鳃、肌肉和脑中均有表达,但表达量在鳃中最高,肌肉中最低;统计结果显示,热激后HSC70在血细胞、肝、头肾和脑中的表达量显著上升(p<0.05),而在其余组织中热激前后的表达差异不显著(p>0.05)。 展开更多
关键词 HSC70基因 克隆 组织表达 黄颡鱼
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桑树查尔酮异构酶基因的克隆与原核表达分析 被引量：14
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作者 刘长英 赵爱春 +5 位作者 李军 吕蕊花 余亚圣 王茜龄 鲁成 余茂德 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期39-45,共7页
以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编... 以果叶兼用新桑品种‘嘉陵30号’的果实为材料,采用同源克隆法和抑制PCR法克隆桑树查尔酮异构酶基因(MaCHI)全序列。该基因的基因组序列全长2402bp,包含2112bp长的ORF和290bp长的3'UTR序列,ORF由4个外显子和3个内含子组成,该基因编码219个氨基酸。预测MaCHI编码蛋白质的分子质量为23.8ku,理论等电点为5.29。采用RT-PCR法分析MaCHI在不同组织中的表达水平,在叶片和果中的表达量较高,在根中表达量较低。构建pET-28a(+)-MaCHI原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达。 展开更多
关键词 桑树 查尔酮异构酶 基因克隆 组织表达 原核表达
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饲粮能量水平对乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响 被引量：15
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作者 潘洪彬 赵素梅 +4 位作者 黄英 王静 张曦 葛长荣 高士争 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期781-788,共8页
本试验旨在研究不同饲粮能量水平对乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响。选取体重约15kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头猪,分别饲喂消化能为11.74(低能组)、12.89(中能组)和14.22M J/kg(高能组)的3种饲... 本试验旨在研究不同饲粮能量水平对乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因表达的影响。选取体重约15kg的乌金猪54头,随机分为3组,每组3个重复,每个重复6头猪,分别饲喂消化能为11.74(低能组)、12.89(中能组)和14.22M J/kg(高能组)的3种饲粮。分别在体重为30、60和100kg时屠宰,测定胴体脂肪率,取皮下脂肪组织,荧光定量PCR检测脂肪合成代谢相关酶和因子[乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)和固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1-c)]及脂肪酸转运因子[脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(A-FABP)]表达水平。结果表明:1)体重为60和100kg时,乌金猪脂肪率随饲粮能量水平的升高而极显著升高(P<0.01);2)体重为30和100kg时,与中能组相比,高能组猪ACC、FAS和SREBP-1c的表达水平显著下降(P<0.05),体重60kg时表达水平显著提高(P<0.05);3)体重为30和100kg时,A-FABP表达水平随饲粮能量水平增加显著提高(P<0.05),体重60kg时表达水平随饲粮能量水平增加而显著降低(P<0.05)。结果提示:在体重为60kg时,高能量饲粮显著促进乌金猪脂肪组织脂类合成代谢相关基因(ACC、FAS、SREBP1-c)的表达,显著抑制脂肪酸转运相关基因(A-FABP)的表达,降低了脂肪酸转运,从而使脂肪组织的游离脂肪酸的从头合成增加和对外源脂肪酸的摄取降低。 展开更多
关键词 乌金猪 饲粮能量水平 脂肪组织 脂类合成代谢 基因表达
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脑红蛋白基因在人体不同细胞组织中的表达 被引量：12
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作者 王航雁 邓美玉 +1 位作者 王静 安涛 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期278-280,共3页
目的　了解新发现的脑红蛋白基因在人体不同细胞组织中的分布表达。方法　人 13种组织总RNA ,各等量取总RNA 2 μg ,逆转录成cDNA。取上述逆转录产物cDNA 1μl作为模板做PCR。等量取上述每个标本总RNA 2 μg ,逆转录成cDNA。取PCR产物... 目的　了解新发现的脑红蛋白基因在人体不同细胞组织中的分布表达。方法　人 13种组织总RNA ,各等量取总RNA 2 μg ,逆转录成cDNA。取上述逆转录产物cDNA 1μl作为模板做PCR。等量取上述每个标本总RNA 2 μg ,逆转录成cDNA。取PCR产物行琼脂糖凝胶电泳ImageJ软件定量分析电泳结果。 结果　1.NGB、GAPDH扩增后的产物片段与设计相符。 2 .人 13种组织中都有NGBmRNA表达 ,各组织中NGBmR NA扫描的相对光密度 (A)值胎肾最高 ;其次为肝组织、大脑皮层、全脑、胎肺、回肠慢性炎症、小脑、胎胸腺、膀胱癌、乳腺癌、Hela S3细胞、肝癌、胎心 ,提示NGBmRNA在脑组织中表达量相对较高 ,胎肾和正常人肝组织的表达亦很高。结论　人体不同细胞组织中都有NGBmRNA表达 ,但不同的组织其表达水平不同 ,提示NGB基因并不是神经系统所特有的 。 展开更多
关键词 脑红蛋白 细胞 组织 基因 表达
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组织因子表达与胃癌微血管生成的关系及其临床意义 被引量：8
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作者 焦作义 苟长征 +1 位作者 曹农 李玉民 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期880-884,共5页
背景与目的组织因子(tissuefactor,TF)生理功能为凝血过程的启动者。近来发现TF参与多种恶性肿瘤微血管形成的过程。本研究旨在探讨胃癌组织中表达的组织因子与其微血管形成过程之间的关系和临床意义。方法应用免疫组织化学EnVisionTM法... 背景与目的组织因子(tissuefactor,TF)生理功能为凝血过程的启动者。近来发现TF参与多种恶性肿瘤微血管形成的过程。本研究旨在探讨胃癌组织中表达的组织因子与其微血管形成过程之间的关系和临床意义。方法应用免疫组织化学EnVisionTM法,检测了80例胃癌和20例正常胃组织标本中TF、VEGF(血管内皮生长因子)的表达情况和CD34单克隆抗体标记的MVD值(肿瘤微血管密度)。结果胃癌组织中TF和VEGF的阳性表达率分别为65.00%(52/80)和67.50%(54/80),MVD值为36.14±9.94;正常胃组织中TF和VEGF的阳性表达率分别为5.00%(1/20)和5.00%(1/20),MVD值为12.10±3.27。胃癌组织中TF的表达与VEGF的表达和MVD值之间均存在相关性(P<0.05),组织中TF表达越高,相应VEGF的表达越高,MVD值也越大。TF与患者的总生存期、TNM分期和肝脏转移状况有关。结论胃癌组织中异常表达增高的TF与胃癌微血管形成过程和患者预后有关。 展开更多
关键词 胃肿瘤 组织因子 血管内皮生长因子 基因表达 微血管密度 免疫组 织化学
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