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亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库的构建及EST测序 被引量：44
1
作者 黄江 胡旭初 +4 位作者 包怀恩 余新炳 李丽 郎书源 廖兴江 《热带医学杂志》 CAS 2007年第2期116-118,184,共4页
目的构建亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库,为获取亚洲绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取亚洲带绦虫成虫mRNA,构建pBluescript II SK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;用载体克... 目的构建亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库,为获取亚洲绦虫成虫的基因信息,建立基因表达谱,并为筛选疫苗基因和诊断抗原基因奠定基础。方法提取亚洲带绦虫成虫mRNA,构建pBluescript II SK全长cDNA质粒文库,测定扩增文库的滴度;用载体克隆位点两端的引物进行PCR扩增,以检测所构建文库的质量。随机挑选质粒文库转化的阳性重组克隆,进行较大规模的5′端测序,归并unigene。结果测定文库的滴度为1011pfu/μl,插入片段的大小主要在1000bp以上。共测1495个克隆,获得有效EST序列1126个,归并为643条unigene。结论已成功获得一高质量的亚洲带绦虫成虫全长cDNA表达文库,并获得了较丰富的成虫表达基因数据。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 全长cDNA质粒文库 表达序列标签(EST)
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都匀亚洲带绦虫与从江牛带绦虫实验感染牛和猪的比较研究 被引量：17
2
作者 莫兴泽 包怀恩 +1 位作者 戎聚全 吴桂萍 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第2期120-123,F004,共5页
目的比较贵州省都匀亚洲带绦虫与从江牛带绦虫在牛和猪体内的发育情况。方法用都匀带绦虫孕节和从江带绦虫孕节分别灌喂5～33d龄健康乳牛2头和3头、17～23d龄健康乳猪各2头。于感染后25～85d分别剖检、观察牛和猪体内囊尾蚴的分布、大... 目的比较贵州省都匀亚洲带绦虫与从江牛带绦虫在牛和猪体内的发育情况。方法用都匀带绦虫孕节和从江带绦虫孕节分别灌喂5～33d龄健康乳牛2头和3头、17～23d龄健康乳猪各2头。于感染后25～85d分别剖检、观察牛和猪体内囊尾蚴的分布、大小、形态及成熟情况。结果在感染都匀带绦虫62、85d的2头乳牛肝脏中共检获28个囊尾蚴,其大小为1.16～1.91mm×1.03～1.50mm。在感染都匀带绦虫50、62d的2头乳猪肝脏中共检获67个囊尾蚴,大小为1.28～2.84mm×1.26～2.57mm。两组囊尾蚴仅分布在肝脏且形态特征相同,活体观察成熟囊尾蚴均可见到头节上有4个吸盘和伸缩活动的顶突。压片染色镜检,31%的囊尾蚴顶突略凸,69%的顶突略凹,56%的顶突周围有两圈退化的小钩。在感染从江带绦虫25、35、67d的3头乳牛体内共检获2745个囊尾蚴,为全身分布,大小为0.86～6.52mm×0.66～4.39mm。在感染从江带绦虫50、67d的2头乳猪体内共检获106个囊尾蚴,仅分布于肝脏,其大小为1.08～2.86mm×0.96～2.68mm。从江带绦虫在牛和猪体内的囊尾蚴,活体观察及压片染色镜检,囊尾蚴原头节均未发现顶突和小钩。结论都匀带绦虫为亚洲带绦虫,在牛和猪体内囊尾蚴仅分布于肝脏,其囊尾蚴常具有退化小钩;从江带绦虫为传统牛带绦虫,在牛体内囊尾蚴呈全身分布。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 牛带绦虫 实验动物感染 形态学
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贵州牛带绦虫亚洲亚种实验感染家猪的研究 被引量：15
3
作者 莫兴泽 包怀恩 +2 位作者 戎聚全 吴桂萍 牟荣 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2004年第6期335-337,F004,共4页
目的　观察贵州省牛带绦虫亚洲亚种囊尾蚴在猪体内的发育情况。　方法　用牛带绦虫亚洲亚种孕节直接灌喂当地圈养的 14d龄健康乳猪 8头 ,并以健康乳猪 4头作对照。于感染后 40、5 0、60和 75d分别剖检 ,观察猪体内囊尾蚴的分布、大小、... 目的　观察贵州省牛带绦虫亚洲亚种囊尾蚴在猪体内的发育情况。　方法　用牛带绦虫亚洲亚种孕节直接灌喂当地圈养的 14d龄健康乳猪 8头 ,并以健康乳猪 4头作对照。于感染后 40、5 0、60和 75d分别剖检 ,观察猪体内囊尾蚴的分布、大小、形态及成熟情况。　结果　从感染后 40d起 ,在 6头猪的肝脏表面和实质内共检获 42 1个囊尾蚴 ,多分布在肝实质内 ,其大小为 1.3 4～ 2 .78mm× 1.2 2～ 2 .3 1mm。其余部位未找到囊尾蚴。感染后 40d和 5 0d ,囊尾蚴经胆汁孵育 ,头节翻出率分别为 78.3 %和 93 .4%。感染后 5 0d开始发现钙化的囊尾蚴。囊尾蚴活体观察可见头节上 4个吸盘和活动的顶突。压片染色镜检 ,头节有 4个吸盘和顶突 ,顶突周围发现不完整的两圈点状结构。　结论　根据囊尾蚴的分布、大小、发育时间及形态特征 ,进一步认定贵州省都匀市的带绦虫为牛带绦虫亚洲亚种。家猪是其可能的中间宿主。 展开更多
关键词 牛带绦虫亚洲亚种 实验动物感染 家猪 形态学
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云南、贵州两省38条人体带绦虫的分子鉴别 被引量：10
4
作者 陈峥宏 包怀恩 +4 位作者 牟荣 吴晓娟 郎书源 杨廷秀 胡兴竹 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第4期263-265,共3页
目的对采自云南、贵州两省的38条人体带绦虫进行分子鉴别,了解当地猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫的分布状况。方法对云南大理和贵州都匀及从江地区有排节片史的病人以槟榔-南瓜子法驱虫,虫体经形态学初步鉴别后,以组织DNA提取试剂盒... 目的对采自云南、贵州两省的38条人体带绦虫进行分子鉴别,了解当地猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫的分布状况。方法对云南大理和贵州都匀及从江地区有排节片史的病人以槟榔-南瓜子法驱虫,虫体经形态学初步鉴别后,以组织DNA提取试剂盒提取虫体基因组DNA,分别采用亚洲带绦虫、牛带绦虫和猪带绦虫线粒体细胞色素C氧化酶亚单位1基因(cox1)片段的特异性引物对各DNA样品进行常规PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳检测;PCR阴性样品采用带绦虫cox1片段PCR通用引物进行扩增,并选择1份亚洲带绦虫特异性PCR阳性的样品作为对照。从3种带绦虫PCR阳性的扩增产物中各选择1份进行核酸序列测定,并用NCBIBlast将各核酸序列与GenBank数据库中带绦虫的cox1进行比对分析。结果采自大理的4条带绦虫(DL1～4)的猪带绦虫cox1片段PCR为阳性,扩增产物约980bp;其余25条大理带绦虫(DL5～29)和5条都匀带绦虫(DY1～5)的亚洲带绦虫cox1片段PCR为阳性,扩增产物约260bp;各样品的牛带绦虫cox1片段PCR均为阴性。DL2PCR产物的核酸序列与GenBank中猪带绦虫cox1的同源性为99%～100%,DY1PCR产物的核酸序列与亚洲带绦虫cox1的同源性为100%。特异性PCR均阴性的4条从江带绦虫(CJ1～4)和亚洲带绦虫特异性PCR阳性的DL7以带绦虫cox1片段通用引物的PCR扩增出约1kb的产物。测序表明,CJ1片段的核酸序列与牛带绦虫cox1的同源性为99%,DL7与亚洲带绦虫cox1的同源性为99%～100%。结论cox1片段PCR扩增和核酸测序分析表明,采集的云南大理人体带绦虫为猪带绦虫和亚洲带绦虫,贵州都匀和从江人体带绦虫分别为亚洲带绦虫和牛带绦虫。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 猪带绦虫 牛带绦虫 分子鉴别
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云南大理白族带绦虫mtDNA-Cytb序列测定及分析 被引量：6
5
作者 罗浪 杨毅梅 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期425-428,共4页
目的利用分子遗传标记对采自云南大理白族地区人体带绦虫标本进行生物多态性的研究。方法从云南大理采集人体带绦虫标本株成虫节片,抽提虫体基因组DNA,PCR扩增线粒体DNA细胞色素B(mtDNA-Cytb)序列部分片段,测序;结合GenBank中已知猪带... 目的利用分子遗传标记对采自云南大理白族地区人体带绦虫标本进行生物多态性的研究。方法从云南大理采集人体带绦虫标本株成虫节片,抽提虫体基因组DNA,PCR扩增线粒体DNA细胞色素B(mtDNA-Cytb)序列部分片段,测序;结合GenBank中已知猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫mtDNA-Cytb序列,经DNAMAN软件处理后计算遗传距离并构建系统发育树状图。结果大理白族带绦虫标本系统发育树显示大理(B1,B2,B5,B6)株带绦虫标本与亚洲带绦虫的遗传距离最接近,距牛带绦虫标本较远,与猪带绦虫则更远。大理(B3,B4)株带绦虫标本与猪带绦虫的遗传距离最接近,距牛带绦虫和亚洲带绦虫标本远。结论云南大理(B1,B2,B5,B6)株带绦虫标本属于亚洲带绦虫,而(B3,B4)株带绦虫标本属于猪带绦虫;mtDNA-Cytb序列分析可以用于带绦虫生物多态性研究。 展开更多
关键词 猪带绦虫 牛带绦虫 亚洲带绦虫 分子遗传学标记 聚合酶链反应 序列分析
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亚洲带绦虫烯醇酶基因及其蛋白质的结构与功能 被引量：8
6
作者 黄艳 黄江 +5 位作者 胡旭初 徐劲 曹开源 余新炳 包怀恩 郎书源 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期575-580,共6页
【目的】分析和预测亚洲带绦虫烯醇酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。【方法】利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具... 【目的】分析和预测亚洲带绦虫烯醇酶基因及其编码蛋白的结构和特性,用于指导其生物学功能的实验研究。【方法】利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其他生物信息学分析软件包,如Pcgene和Vector NTIsuite,从亚洲带绦虫全长cDNA质粒文库中识别烯醇酶基因及其编码区,分析、预测该基因编码的蛋白质的理化特性、翻译后的修饰位点、功能域、亚细胞定位、拓扑结构、二级结构、三维空间构象等。【结果】该基因全长1737bp,编码区为第205～1503bp,编码433个氨基酸,为全长基因。GenBank中与棘口吸虫烯醇酶氨基酸序列同源性最高,达78%。相对分子量理论预测值为46653.5 Ku。没有质体、线粒体定位序列。预测编码蛋白有1个跨膜区,3个亲水性部位。与吸虫属的烯醇酶进化关系最近。【结论】应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出了亚洲带绦虫烯醇酶cDNA全长序列并预测得到其结构与功能方面信息。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 烯醇酶 结构 功能 生物信息学
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亚洲带绦虫成虫延伸因子-1基因的克隆和分析 被引量：8
7
作者 庞建新 黄江 +4 位作者 胡旭初 徐劲 余新炳 包怀恩 郎书源 《热带医学杂志》 CAS 2007年第6期513-515,共3页
目的分析和预测亚洲带绦虫成虫延伸因子-1(elongation factor 1,EF-1)基因及其编码的蛋白的结构和功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http:∥www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统... 目的分析和预测亚洲带绦虫成虫延伸因子-1(elongation factor 1,EF-1)基因及其编码的蛋白的结构和功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http:∥www.ncbi.nlm.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http:∥ca.expasy.org/)中有关基因和蛋白的序列和结构信息分析的各种工具,结合其它生物信息学分析软件包,从亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库中识别延伸因子-1的全长编码基因并预测其蛋白的结构和功能。结果该基因是全长基因,长度988bp,编码区为67～868,编码269个氨基酸,无跨膜区;与GenBank中细粒棘球绦虫同源基因的一致性达87%,相似性达91%;预测三个主要的抗原表位位于135～140,126～131,157～162。结论应用生物信息方法从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出EF-1基因。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 延伸因子-1 CDNA 生物信息学
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中国西部地区牛带绦虫的分子鉴定和生物行为研究进展 被引量：6
8
作者 包怀恩 牟荣 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期520-526,共7页
本文对近年来涉及中国西部7省(区)10县(市)的牛带绦虫病的流行病学调查和驱虫治疗、成虫标本的形态学观察、11个地理虫株的分子生物学鉴定、牛带绦虫和亚洲带绦虫感染中间宿主猪和牛后囊尾蚴的发育和生物行为观察,以及中间宿主组织病理... 本文对近年来涉及中国西部7省(区)10县(市)的牛带绦虫病的流行病学调查和驱虫治疗、成虫标本的形态学观察、11个地理虫株的分子生物学鉴定、牛带绦虫和亚洲带绦虫感染中间宿主猪和牛后囊尾蚴的发育和生物行为观察,以及中间宿主组织病理学变化的比较等进行综述,认为将亚洲带绦虫定为新物种比作为牛带绦虫的亚种更合适。 展开更多
关键词 牛带绦虫 亚洲带绦虫 分子鉴定 实验感染 家猪 牛
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云南香格里拉的带绦虫rDNA-ITS1序列测定及分析 被引量：6
9
作者 李晓娟 杨毅梅 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期923-925,共3页
目的利用分子生物学技术鉴定产于云南香格里拉带绦虫的种类,以明确当地是否存在亚洲带绦虫。方法从云南香格里拉采集带绦虫标本株成虫节片,抽提DNA,PCR扩增rDNA-ITS1区段,克隆此片段后做序列测定;结合GenBank中已知的亚洲带绦虫、牛带... 目的利用分子生物学技术鉴定产于云南香格里拉带绦虫的种类,以明确当地是否存在亚洲带绦虫。方法从云南香格里拉采集带绦虫标本株成虫节片,抽提DNA,PCR扩增rDNA-ITS1区段,克隆此片段后做序列测定;结合GenBank中已知的亚洲带绦虫、牛带绦虫、猪带绦虫rDNA-ITS1序列,经DNAMAN软件处理后计算遗传距离并构建系统发育树状图。结果香格里拉的带绦虫标本与GenBank中已知的亚洲带绦虫序列同源性为99%;与牛带绦虫同源性98%;与猪带绦虫同源性92%。系统发育树显示:香格里拉标本与亚洲带绦虫标本遗传距离最近,距牛带绦虫标本较远,与猪带绦虫则更远。结论云南香格里拉存在亚洲带绦虫。 展开更多
关键词 牛带绦虫 亚洲带绦虫 rDNA—ITS1
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云南弥渡县带绦虫感染状况调查 被引量：7
10
作者 方文 刘宏坤 +7 位作者 李科荣 罗华 徐新 陈凤 李荣 刘继兵 黄明皓 李素梅 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期116-117,121,共3页
2010年10～12月采用自然沉淀法查粪便中带绦虫卵,结合询检、问卷调查和槟榔南瓜子驱虫治疗法,对大理州弥渡县格者村进行带绦虫流行状况及虫种调查。结果显示,人群带绦虫感染率为15.7%(65/414),其中40～岁组和50～岁组的阳性率分别高达24... 2010年10～12月采用自然沉淀法查粪便中带绦虫卵,结合询检、问卷调查和槟榔南瓜子驱虫治疗法,对大理州弥渡县格者村进行带绦虫流行状况及虫种调查。结果显示,人群带绦虫感染率为15.7%(65/414),其中40～岁组和50～岁组的阳性率分别高达24.7%(21/85)和26.3%(15/57)。对26例粪检阳性者和47例有排节片史者进行驱虫治疗,前者全部有虫体驱出,后者23例有虫体驱出;驱虫最多的1例共排出11条,另有1例排出2条,其余均为1条。共收集到15条有头节和成熟孕节的虫体,经形态学鉴定为亚洲带绦虫。该地区居民的亚洲带绦虫感染率较高可能与村民的饮食习惯(喜食生猪肉和生猪肝)、生活习惯(野外大小便)和环境污染(粪便未经无害化处理外排)有关。 展开更多
关键词 流行 亚洲带绦虫 云南弥渡县
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2012—2022年肠道绦虫感染患者的临床表现和流行病学特征
11
作者 李小丽 栗绍刚 吴赵永 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期309-314,共6页
目的 探讨肠道绦虫病病例的临床表现及流行病学特征。方法 对北京市某医院2012年1月—2022年7月就诊的35例肠道绦虫病患者临床特点进行总结,并分析患者流行病学特征。结果 35例肠道绦虫病患者均有绦虫节片排出,经鉴定牛带绦虫病18例(51.... 目的 探讨肠道绦虫病病例的临床表现及流行病学特征。方法 对北京市某医院2012年1月—2022年7月就诊的35例肠道绦虫病患者临床特点进行总结,并分析患者流行病学特征。结果 35例肠道绦虫病患者均有绦虫节片排出,经鉴定牛带绦虫病18例(51.43%),阔节裂头绦虫病17例(48.57%)。临床表现为腹痛、腹胀症状11例(31.43%),肛周瘙痒及头晕各2例(各占5.71%),恶心及呕吐、腹泻、发热、体重下降各1例(各占2.86%),无症状16例(45.71%)。21例(60.00%)北京市本地病例,其余患者来自北京市以外省份。31例(88.57%)患者有食用生或半生可疑食物病史。结论 肠道绦虫病患者多无临床症状或有轻微消化道症状,易被误诊、漏诊,重视流行病学史的询问可提高该疾病的诊断率。 展开更多
关键词 肠道绦虫病 猪带绦虫 牛带绦虫 亚洲带绦虫 阔节裂头绦虫 临床表现 流行病学
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云南洱海环湖带绦虫rDNA-ITS2序列测定及分析 被引量：5
12
作者 李强 杨毅梅 《第四军医大学学报》 北大核心 2009年第4期295-297,共3页
目的:对云南洱海环湖地区的带绦虫标本的rDNA-ITS2区段序列进行测定,确定亚洲带绦虫在洱海环湖地区的分布情况,进一步探讨亚洲带绦虫的分类地位.方法:取大理挖色、洱源、喜洲、周城、双廊、贵州都匀、贵州从江和传统牛带绦虫成虫标本,... 目的:对云南洱海环湖地区的带绦虫标本的rDNA-ITS2区段序列进行测定,确定亚洲带绦虫在洱海环湖地区的分布情况,进一步探讨亚洲带绦虫的分类地位.方法:取大理挖色、洱源、喜洲、周城、双廊、贵州都匀、贵州从江和传统牛带绦虫成虫标本,分别提取DNA,PCR扩增rDNA-ITS2片段后做序列测定及分析,并构建系统进化树.结果:根据ITS2测序结果构建系统进化树显示,树共分为两大枝,洱源、挖色和从江标本为第1枝,周城、喜洲、双廊和都匀为第2枝.结论:洱源与挖色存在传统牛带绦虫,周城、喜洲和双廊存在亚洲带绦虫.传统牛带绦虫和亚洲带绦虫在大理地区有分布区域上的重叠性. 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 牛带绦虫 rDNA-ITS2序列
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亚洲带绦虫成虫谷胱甘肽S-转移酶基因的克隆及生物信息学分析 被引量：4
13
作者 黄江 胡旭初 +5 位作者 徐劲 黄艳 余新炳 包怀恩 郎书源 廖兴江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1093-1096,1100,共5页
目的分析亚洲带绦虫成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST,glutathione S-transferase)基因结构并预测其编码蛋白的结构和功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nl m.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋... 目的分析亚洲带绦虫成虫谷胱甘肽S-转移酶(GST,glutathione S-transferase)基因结构并预测其编码蛋白的结构和功能。方法利用生物信息网站如美国国家生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nl m.nih.gov/)和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统(ExPASY,http://ca.expasy.org/)中生物信息学分析工具,并结合其它分析软件,从获得亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库的表达序列标签(EST,expression sequence tag)中识别GST基因,分析该基因的结构并预测其编码的蛋白质的结构和功能特征。结果该基因与猪带绦虫GST的一致性为94%,相似性为97%;全长810bp,编码区为28~687bp,编码219个氨基酸,无各种亚细胞定位序列,具有多个潜在的磷酸化位点,蛋白的理化性质稳定;预测三个主要的抗原表位89aa^94aa,27aa^32aa,119aa^124aa位于空间结构上相距较远的分子表面,前面两个表位属于绦虫共有的线性抗原表位。结论从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出GST基因,预测为胞浆型蛋白,可能具有较好的免疫诊断抗原应用前景。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 谷胱甘肽S-转移酶 CDNA 生物信息学
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猪带绦虫囊尾蚴与亚洲带绦虫囊尾蚴蛋白双向电泳图谱分析 被引量：3
14
作者 方文 肖靓靓 +1 位作者 包怀恩 牟荣 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期188-190,共3页
将2头20日龄三元杂交乳猪分别感染猪带绦虫虫卵和亚洲带绦虫虫卵,8×104个/头。感染后40 d分别收集寄生在肝脏的未成熟猪带绦虫囊尾蚴(简称猪囊尾蚴)和亚洲带绦虫囊尾蚴,制备囊尾蚴蛋白,并进行蛋白双向电泳分析,用ImageMaster 2D Pl... 将2头20日龄三元杂交乳猪分别感染猪带绦虫虫卵和亚洲带绦虫虫卵,8×104个/头。感染后40 d分别收集寄生在肝脏的未成熟猪带绦虫囊尾蚴(简称猪囊尾蚴)和亚洲带绦虫囊尾蚴,制备囊尾蚴蛋白,并进行蛋白双向电泳分析,用ImageMaster 2D Plantinum 6.0软件分析差异表达蛋白。结果显示,感染后40 d肝脏寄生的未成熟猪囊尾蚴和亚洲带绦虫囊尾蚴蛋白的双向电泳凝胶上分别有(236±12)和(231±14)个蛋白斑点,差异表达2倍以上的蛋白共10个,其中猪囊尾蚴表达上调的蛋白3个,下调的蛋白7个。 展开更多
关键词 猪带绦虫 亚洲带绦虫 囊尾蚴 双向电泳 蛋白质组
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基于线粒体nad1基因的大理州亚洲带绦虫遗传多样性分析
15
作者 尹雪宇 陈远腾 +3 位作者 庄尔俊 赵俊杰 董玲 李海龙 《热带医学杂志》 CAS 2023年第3期301-304,共4页
目的了解云南省大理州亚洲带绦虫的遗传多样性。方法2019年5月-2021年8月从大理市(DL)、巍山县(WS)、弥渡县(MD)、漾濞县(YB)和洱源县(EY)5个地区采集到131份亚洲带绦虫样本,利用PCR技术扩增其线粒体nad1基因序列,运用MEGA7.0和DNASP5.1... 目的了解云南省大理州亚洲带绦虫的遗传多样性。方法2019年5月-2021年8月从大理市(DL)、巍山县(WS)、弥渡县(MD)、漾濞县(YB)和洱源县(EY)5个地区采集到131份亚洲带绦虫样本,利用PCR技术扩增其线粒体nad1基因序列,运用MEGA7.0和DNASP5.10.01软件对所得序列进行分析,计算其碱基含量、遗传多样性参数、遗传分化系数和基因流以及遗传距离等数据。结果5个亚洲带绦虫群体的nad1基因片段大小均为1058 bp,A、T、G、C的碱基平均含量分别为22.0%、48.2%、23.0%和6.8%;比对发现131条亚洲带绦虫共形成53个单倍型,其中单倍型多样性为0.9485,核酸多样性为0.0101;遗传分化指数和基因流范围分别为-0.0012~0.1072和2.0825~283.8409;遗传距离为0.0052~0.0189,MD与YB之间的遗传距离最大,DL与EY之间的遗传距离最小。中性检验结果显示,大理州5个群体的Tajima’s D和Fu’s Fs值均为负值,分别为-2.2477~-0.5001和-4.1664~-0.4196,DL和YB两个群体为显著负值,差异有统计学意义(P<0.05),推测这2个群体可能发生过群体扩张。结论大理州亚洲带绦虫群体遗传多样性水平较高,种群间基因交流频繁,遗传分化较弱,DL与MD群体间存在中等程度的遗传分化。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 线粒体nad1基因 遗传多样性
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基于线粒体12S rRNA基因对大理州亚洲 带绦虫遗传多样性的分析
16
作者 尹雪宇 陈远腾 +3 位作者 庄尔俊 赵俊杰 董玲 李海龙 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期784-788,共5页
目的为了解云南省大理州亚洲带绦虫的遗传多样性。方法本研究采集到大理(DL)、巍山(WS)、弥渡(MD)、漾濞(YB)和洱源(EY)5个地区的131份亚洲带绦虫样本,基于线粒体12S rRNA基因进行扩增,运用MEGA7.0和DNASP5.10.01软件对所得序列进行分析... 目的为了解云南省大理州亚洲带绦虫的遗传多样性。方法本研究采集到大理(DL)、巍山(WS)、弥渡(MD)、漾濞(YB)和洱源(EY)5个地区的131份亚洲带绦虫样本,基于线粒体12S rRNA基因进行扩增,运用MEGA7.0和DNASP5.10.01软件对所得序列进行分析,计算其碱基含量、遗传多样性参数、遗传分化系数和基因流以及遗传距离等数据。结果5个地区的亚洲带绦虫12S rRNA基因片段大小均为493 bp,平均A、T、G、C的碱基含量为28.3%、43.2%、19.4%和9.1%;共定义76个单倍体型,其中单倍型多样性为0.9830,核酸多样性为0.0332;遗传分化指数和基因流范围分别为-0.01913~0.04080和5.87745~22.49795;遗传距离为0.0023~0.0229,大理与巍山之间的遗传距离最大,漾濞与洱源群体之间的遗传距离最小。结论大理州5个地区亚洲带绦虫的线粒体12S rRNA基因的遗传多样性水平较高,基因交流频繁,但种群间的遗传分化较弱,本研究为亚洲带绦虫遗传多样性提供了基础数据。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 线粒体12S rRNA基因 遗传多样性 大理
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雷丸、阿苯达唑和吡喹酮对亚洲带绦虫囊尾蚴超微结构的影响 被引量：4
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作者 杜娟 牟荣 +2 位作者 包怀恩 何平 常傲霜 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第1期34-40,共7页
目的应用透射电镜观察雷丸、阿苯达唑和吡喹酮作用后亚洲带绦虫囊尾蚴的超微结构变化。方法将亚洲带绦虫囊尾蚴分别放入20%雷丸、1%阿苯达唑和0.04%吡喹酮中,于37℃培养18h,清洗后戊二醛固定,制成透射电镜标本,于透射电镜下观察超微结... 目的应用透射电镜观察雷丸、阿苯达唑和吡喹酮作用后亚洲带绦虫囊尾蚴的超微结构变化。方法将亚洲带绦虫囊尾蚴分别放入20%雷丸、1%阿苯达唑和0.04%吡喹酮中,于37℃培养18h,清洗后戊二醛固定,制成透射电镜标本,于透射电镜下观察超微结构变化。实验以含5%猪胆汁的生理盐水为空白对照。结果空白对照组囊尾蚴皮层和实质区形态正常;微毛密集整齐,有棘样尖端,基部较粗有颗粒状物;基膜界限清晰,基质区有大量囊泡和线粒体、内质网等细胞器。环状肌束靠近实质区外侧,纵状肌束呈散在分布,均为平滑肌,纹理清晰。皮层细胞、实质细胞、石灰小体及石灰小体细胞形态正常。排泄系统由焰细胞和初级排泄管、收集管和集合管组成。雷丸组囊尾蚴损伤严重,皮层及实质区呈坏死状,石灰小体消失,微毛完全脱落,基底膜消失,基质区线粒体、内质网等细胞器消失。实质区结构疏松,肌束断裂、溶解。实质区组织溶解,正常细胞结构和排泄系统完全消失。阿苯达唑组囊尾蚴皮层和实质区均受损,微毛断裂脱落,基质区结构疏松,部分区域基底膜尚清晰。肌束肿胀,肌纤维弥漫性扩张,实质区细胞结构和排泄系统被破坏,部分区域实质组织尚可辨认,可见形态完整的石灰小体。吡喹酮组囊尾蚴组织损伤严重,呈坏死状。虫体出现长杆状分泌物并排出虫体外,石灰小体形态正常。微毛脱落,基底膜消失,基质区电子致密度下降。实质区结构疏松,肌束严重溶解变形,正常结构消失,成空泡状,仅残部分肌纤维结构,正常细胞结构和排泄系统完全消失。结论雷丸、阿苯达唑和吡喹酮对亚洲带绦虫囊尾蚴均有杀伤作用,其中雷丸作用程度与吡喹酮相当,且优于阿苯达唑。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 囊尾蚴 雷丸 阿苯达唑 吡喹酮 透射电镜
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亚洲带绦虫烯醇化酶基因的原核表达、鉴定与组织定位 被引量：4
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作者 杜武英 戴佳琳 +5 位作者 黄江 胡旭初 徐劲 余新炳 廖兴江 郎书源 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期458-462,共5页
目的表达亚洲带绦虫(Taenia asiatica,Ta)成虫烯醇化酶(enolase,ENO)基因,并对其进行组织定位和免疫反应性分析。方法通过大规模测序从亚洲带绦虫cDNA文库中确定ENO基因,PCR扩增目的片段,将其克隆至表达质粒pET-30a(+),在大肠埃希菌BL-2... 目的表达亚洲带绦虫(Taenia asiatica,Ta)成虫烯醇化酶(enolase,ENO)基因,并对其进行组织定位和免疫反应性分析。方法通过大规模测序从亚洲带绦虫cDNA文库中确定ENO基因,PCR扩增目的片段,将其克隆至表达质粒pET-30a(+),在大肠埃希菌BL-21/DE3中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)观察重组蛋白的表达情况,用镍离子金属螯合剂亲和层析柱纯化重组蛋白,蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组蛋白的免疫反应性。将重组蛋白免疫SD大鼠制备免疫血清,ELISA检测抗体水平,间接免疫荧光检测确定ENO在亚洲带绦虫成虫组织中的定位。结果PCR、双酶切和DNA测序结果均表明,重组质粒pET-30a(+)-TaENO构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白TaENO的相对分子质量(Mr)为47000。经亲和层析获高纯度的蛋白,蛋白浓度为0.37mg/ml。重组蛋白TaENO能被SD大鼠抗血清、感染亚洲带绦虫的猪血清和患者血清识别。间接免疫荧光检测结果显示,TaENO主要定位于成虫的表膜。结论纯化后的亚洲带绦虫成虫烯醇化酶重组蛋白具有较强的免疫反应性,烯醇化酶主要定位于成虫表膜。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 烯醇化酶基因 原核表达 组织定位
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抗亚洲带绦虫药物对乳酸脱氢酶抑制作用 被引量：4
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作者 陈祖云 戴佳琳 +2 位作者 黄江 申萍香 廖兴江 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期553-554,共2页
目的探讨抗亚洲带绦虫药物对于重组的亚洲带绦虫乳酸脱氢酶(Ta.LDH)酶促功能的影响。方法将不同浓度的吡喹酮、阿苯达唑和甲苯咪唑加入Ta.LDH所催化的丙酮酸还原成乳酸(正反应)以及乳酸氧化成丙酮酸(逆反应)的标准反应体系当中,测定烔?... 目的探讨抗亚洲带绦虫药物对于重组的亚洲带绦虫乳酸脱氢酶(Ta.LDH)酶促功能的影响。方法将不同浓度的吡喹酮、阿苯达唑和甲苯咪唑加入Ta.LDH所催化的丙酮酸还原成乳酸(正反应)以及乳酸氧化成丙酮酸(逆反应)的标准反应体系当中,测定烔?废汆堰?核苷酸(NADH)在A340处吸光度的变化值。采用SPSS 16.0软件进行分析,计算药物对酶活性的相对抑制率。结果与对照组比较,0.10 mmol/L吡喹酮对Ta.LDH催化正逆反应的相对抑制率分别为93.99%(P<0.01)和94.67%(P<0.01),0.10 mmol/L阿苯达唑分别为85.45%(P<0.01)和73.81%(P<0.01);0.15 mmol/L甲苯咪唑分别为92.2%(P<0.01)和86.13%(P<0.01)。结论Ta.LDH可能为吡喹酮、阿苯达唑和甲苯咪唑抗亚洲带绦虫药物作用的靶标分子。 展开更多
关键词 亚洲带绦虫 乳酸脱氢酶 重组蛋白 吡喹酮 阿苯达唑 甲苯咪唑
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分子分类结合形态学方法对云南大理带绦虫的鉴定 被引量：1
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作者 罗浪 林春榕 +1 位作者 马顺高 杨毅梅 《国际医学寄生虫病杂志》 CAS 2010年第1期29-31,共3页
目的鉴定云南大理洱源（E1-E2）、鹤庆（H1—H2）、双廊（SL）、挖色（WS）带绦虫的种。方法首先对大理分离株带绦虫成虫进行形态学鉴定，从成虫节片中抽提DNA，PCR扩增线粒体DNA细胞色素B（mtDNA—Cytb）的部分序列并测序；结合GenBan... 目的鉴定云南大理洱源（E1-E2）、鹤庆（H1—H2）、双廊（SL）、挖色（WS）带绦虫的种。方法首先对大理分离株带绦虫成虫进行形态学鉴定，从成虫节片中抽提DNA，PCR扩增线粒体DNA细胞色素B（mtDNA—Cytb）的部分序列并测序；结合GenBank中已知猪带绦虫、牛带绦虫和亚洲带绦虫mtDNA—Cytb序列，经DNAMAN软件处理后构建系统发育树状图。结果大理带绦虫E1的形态和牛带绦虫相似，系统发育树显示大理分离株E1、E2、SL、WS带绦虫标本与亚洲带绦虫的遗传距离最接近，距牛带绦虫较远，与猪带绦虫则更远。大理分离株H1、H2带绦虫标本与猪带绦虫的遗传距离最近，距牛带绦虫和亚洲带绦虫则较远。结论经形态学和分子生物学鉴定，云南大理分离株E1、E2、SL、WS带绦虫标本属于亚洲带绦虫．而H1、H2株带绦虫标本属于猪带绦虫。 展开更多
关键词 牛带绦虫 猪带绦虫 亚洲带绦虫 分子分类 形态学
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