转TPS1基因促进干旱胁迫条件下的花青素积累提高玉米植株抗旱性 被引量：12

1

作者 项阳 刘延波 +1 位作者 赵德刚 Yi Li 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期2054-2062,共9页

以不同浓度的PEG-6000溶液模拟干旱胁迫条件,研究转TPS1基因玉米植株抗旱性增强的原因。结果表明,随着干旱胁迫加重,野生型和转基因玉米植株的叶片相对含水量和耐旱系数逐渐降低;但转基因玉米植株叶片相对含水量和耐旱系数高于野生型,... 以不同浓度的PEG-6000溶液模拟干旱胁迫条件,研究转TPS1基因玉米植株抗旱性增强的原因。结果表明,随着干旱胁迫加重,野生型和转基因玉米植株的叶片相对含水量和耐旱系数逐渐降低;但转基因玉米植株叶片相对含水量和耐旱系数高于野生型,表明转基因玉米植株比野生型更抗旱。同时随着干旱加重,野生型和转基因玉米植株花青素含量也随之增加,且转基因玉米植株的花青素含量高于野生型。相关性分析表明,花青素含量与转基因玉米抗旱性增强显著相关。干旱胁迫前,转TPS1基因玉米植株花青素含量与野生型植株无显著差异,而在10%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,转TPS1基因玉米植株根、茎、叶的花青素含量极显著高于野生型,分别是野生型的8.5、5.4和1.8倍。分析调控花青素合成基因的相对表达量结果表明,正调控基因PL1、R1和PAC1在转基因植株根、茎、叶中表达均上调,而负调控基因c1-I-2K1在根、茎、叶中表达下调。表明TPS1基因的表达影响花青素合成调控基因的表达促进花青素积累,进而提高植株抗旱性。此外,干旱胁迫后,转基因植株的CAT活性比野生型高56.3%,MDA含量比野生型低36.7%,说明TPS1基因的表达提高了玉米抗氧化能力。 展开更多

关键词 玉米 tps1基因 花青素 抗旱性

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酿酒酵母海藻糖合成酶基因的克隆和在大肠杆菌中的表达 被引量：3

2

作者 杨波 戴秀玉 周坚 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第4期372-378,共7页

用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　... 用ＰＣＲ方法克隆了１．５ｋｂ的酿酒酵母Ｓａｃｃｈｒｏｍｙｃｅｓ　ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ海藻糖合成酶基因ＴＰＳ１，将该片段连接到ｐＵＣ１９载体，通过转化分别引入海藻糖合成酶基因缺失和缺陷的大肠杆菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ　ＦＦ４１６９和ＦＦ４１６９和ＦＦ４０５０。对转化株的质粒ＤＮＡ酶切分析表明均含有１．５ｋｂＰＣＲ克隆片段。生长曲线实难证明，带有克隆片段的转化株在含０．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的高渗透压基础培养基中生长良好；用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）结合蒸发光散射（ＥＬＳＤ）技术测定细胞内海藻糖实验证明转化株能够合成海藻糖。 展开更多

关键词 tps1基因 海藻糖 PCR克隆 表达 酿酒酵母 海藻糖合成酶

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酵母TPS1基因促进干旱胁迫下玉米的根系生长 被引量：10

3

作者 项阳 刘延波 +1 位作者 秦利军 赵德刚 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期363-369,共7页

本文对干旱胁迫下转酵母TPS1基因玉米的根系生长进行了研究。结果显示,经干旱胁迫后,转基因玉米的根系较野生型相比,根长和直径分别增加了79.3%和13.3%,一级、二级侧根数、根系的总吸收面积、活跃吸收面积、比表面积和根系活力较野生型... 本文对干旱胁迫下转酵母TPS1基因玉米的根系生长进行了研究。结果显示,经干旱胁迫后,转基因玉米的根系较野生型相比,根长和直径分别增加了79.3%和13.3%,一级、二级侧根数、根系的总吸收面积、活跃吸收面积、比表面积和根系活力较野生型也极显著增加。对根系组织观察发现,转TPS1基因玉米植株的根系细胞较大,细胞纵向和横向显著增长。转基因玉米根系的生长素含量较野生型的高,而其细胞分裂素含量则低。进一步对玉米根系生长相关基因的表达水平分析发现,与生长素有关的根系生长正调控基因PLT1、PIN1、AUX/IAA、CRL1表达较野生型上调,其中PLT1、AUX/IAA、CRL1的表达量比野生型的高2倍以上,而与细胞分裂素有关的根系生长负调控基因WOX11、ARR2、ARR1表达较野生型下调,比野生型的下降50%以上。 展开更多

关键词 玉米 tps1基因 根系生长 生长素 细胞分裂素 抗旱性

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农杆菌介导的玉米茎尖遗传转化研究及转TPS1基因和VlmybA2基因玉米鉴定 被引量：7

4

作者 安立昆 赵德刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期578-584,共7页

本研究以优良玉米自交系交51为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化将海藻糖-6-磷酸合成酶基因TPS1和葡萄花青素调控基因VlmybA2转入玉米中。确立了最佳的除草剂Basta筛选浓度,研究了不同真空渗透压、农杆菌液浓度、侵染时间等因素在转化过... 本研究以优良玉米自交系交51为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化将海藻糖-6-磷酸合成酶基因TPS1和葡萄花青素调控基因VlmybA2转入玉米中。确立了最佳的除草剂Basta筛选浓度,研究了不同真空渗透压、农杆菌液浓度、侵染时间等因素在转化过程中对玉米植株存活率的影响。结果表明80 mg/L除草剂Basta为最佳筛选浓度,真空渗透压为60 kPa、农杆菌液浓度OD600为0.8、侵染时间为8 min时是最佳转化条件,经过GUS组织化学染色和PCR检测,证明TPS1基因和VlmybA2基因已经整合到玉米基因组中。 展开更多

关键词 玉米 茎尖 农杆菌 tps1基因 VlmybA2基因

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酵母TPS1基因对干旱胁迫下北苍术的影响 被引量：3

5

作者 于佳慧 王丹丹 冷春玲 《中药材》 CAS 北大核心 2019年第9期2013-2018,共6页

目的:通过培养北苍术转TPS1抗性基因植株,探究转TPS1基因北苍术抗旱机制,提高北苍术的抗旱性。方法:以啤酒酵母基因组DNA为模板,PCR扩增、克隆TPS1基因,并构建pX6-TPS1重组载体,采用农杆菌介导法将构建的重组载体pX6-TPS1导入北苍术中,... 目的:通过培养北苍术转TPS1抗性基因植株,探究转TPS1基因北苍术抗旱机制,提高北苍术的抗旱性。方法:以啤酒酵母基因组DNA为模板,PCR扩增、克隆TPS1基因,并构建pX6-TPS1重组载体,采用农杆菌介导法将构建的重组载体pX6-TPS1导入北苍术中,经抗生素培养基筛选获得转基因北苍术。结果:干旱胁迫后,转基因北苍术中促进根系生长的PLT1、PIN1、CRLⅠ基因表达量均显著高于野生型,其中PLT1、CRLⅠ的表达量约为野生型3倍左右,而野生型抑制根系生长的WOXⅡ、ARRⅠ基因表达量高于转基因北苍术;且干旱胁迫后,转基因北苍术根直径约为野生型的1.2倍,平均根长为野生型的2.7倍,一级侧根数目为野生型的2.4倍,转基因北苍术根部总吸收面积增加57.1%,活跃吸收面积增加57.8%,比表面积增加19.6%,根系活力指数增加30.9%。结论:转TPS1基因北苍术根系较野生型发达,有利于抵御干旱胁迫,可为抗旱育种、种质创新提供理论基础和技术指导。 展开更多

关键词 北苍术 tps1基因 抗旱性 农杆菌介导 根系活力

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金针菇tps1基因序列分析及不同温度下tps1、tps2基因定量表达研究 被引量：1

6

作者 刘建辉 张俊玲 +2 位作者 李亮 尚晓冬 谭琦 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第16期173-177,182,共6页

研究探讨金针菇海藻糖合成相关酶基因及其功能,为进一步揭示其生长发育过程中的变化规律奠定基础。本研究对金针菇6-磷酸海藻糖合成酶基因tps1的序列进行分析,并以金针菇孢子单核体菌株Dan3为实验材料,采用实时荧光定量PCR技术比较了tps... 研究探讨金针菇海藻糖合成相关酶基因及其功能,为进一步揭示其生长发育过程中的变化规律奠定基础。本研究对金针菇6-磷酸海藻糖合成酶基因tps1的序列进行分析,并以金针菇孢子单核体菌株Dan3为实验材料,采用实时荧光定量PCR技术比较了tps1、tps2基因在不同温度变化下金针菇中的相对表达量差异。结果表明,金针菇tps1基因c DNA序列包含1455 bp的ORF,编码1个由484个氨基酸残基组成的蛋白质;对其起始密码子上游2000 bp调控区域进行分析,发现具有典型的热激反应元件(HSE,C4T)和压力反应元件(STRE,AG4)等调控元件;实时荧光定量PCR结果显示,相对于对照组21℃处理,37℃高温及4℃低温处理2 h后,tps1、tps2基因相对表达量均有显著(p<0.05)升高。说明tps1、tps2基因在转录水平上受到温度调控。 展开更多

关键词 金针菇 温度 tpst1 tps2 实时荧光定量PCR 生物信息学

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球孢白僵菌海藻糖-6-磷酸合成酶基因tps1真核表达载体的构建

7

作者 谢翎 黄勃 《长春师范学院学报（自然科学版）》 2013年第2期66-68,共3页

本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1。PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列。并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中。因此,... 本研究针对球孢白僵菌的tps1基因,通过双酶切和T4连接,构建了tps1基因的真核表达载体pPIC9K/tps1。PCR鉴定和测序表明,该重组质粒包含了球孢白僵菌tps1基因的全长cDNA序列。并且Bbtps1基因被正确地插入到了pPIC9K质粒的表达框中。因此,该重组质粒可以直接用于tps1基因的酵母表达。 展开更多

关键词 tps1基因 pPIC9K载体 重组质粒

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玉米植株转酿酒酵母海藻糖合成酶基因TPS1的鉴定

8

作者 周安莲 张友洪 +4 位作者 肖文福 青学刚 张剑飞 邹邦兴 肖金树 《贵州农业科学》 CAS 2017年第11期7-9,共3页

为进一步探明海藻糖对生命体的作用,丰富转基因食品的鉴定方法及玉米抗旱性研究提供参考,采用分子生物学方法对玉米植株的转酿酒酵母海藻糖合成酶基因TPS1进行研究。结果表明:建立了鉴定转酿酒酵母海藻糖合成酶基因TPS1玉米植株的特异PC... 为进一步探明海藻糖对生命体的作用,丰富转基因食品的鉴定方法及玉米抗旱性研究提供参考,采用分子生物学方法对玉米植株的转酿酒酵母海藻糖合成酶基因TPS1进行研究。结果表明:建立了鉴定转酿酒酵母海藻糖合成酶基因TPS1玉米植株的特异PCR检测方法;TPS1基因全长1 603bp;参试的10份转基因样品均含有TPS1基因片段,对照样品不含TPS1基因。 展开更多

关键词 海藻糖 转基因 分子鉴定 tps1基因 PCR

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香蕉MaTPS1基因序列及其表达特性分析 被引量：2

9

作者 许桂莺 徐碧玉 +6 位作者 邢文婷 贾彩虹 王卓 常胜和 王安邦 舒海燕 金志强 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1934-1940,共7页

通过随机克隆测序法,从香蕉根系cDNA文库中获得海藻糖合成酶基因,命名为MaTPS1。MaTPS1扩增获得cDNA序列,全长3 946bp,开放阅读框2 562bp,编码853个氨基酸。生物学信息分析表明,MaTPS1蛋白属于不稳定蛋白,等电点4.72,具有TPS和TPP结构... 通过随机克隆测序法,从香蕉根系cDNA文库中获得海藻糖合成酶基因,命名为MaTPS1。MaTPS1扩增获得cDNA序列,全长3 946bp,开放阅读框2 562bp,编码853个氨基酸。生物学信息分析表明,MaTPS1蛋白属于不稳定蛋白,等电点4.72,具有TPS和TPP结构域。序列预测分析表明,MaTPS1蛋白定位于细胞质中,不存在信号肽,为跨膜疏水蛋白。与已知植物TPS氨基酸同源序列比对结果显示,一致性达74.81%,其中与2种马来西亚野生蕉、玉米、野茶树、中果咖啡的TPS编码氨基酸序列一致性分别为100%、79.91%、71.33%、63.93%和65.13%。器官特异性分析表明,MaTPS1在香蕉的根、球茎、假茎、叶、花和果实中都有表达,其中在根、球茎、假茎和花中表达量较高。qRT-PCR分析表明,ABA、ACC、干旱、低温、盐害和枯萎病胁迫处理后,MaTPS1表达量在盐胁下增加,于24h时达到最高,而在其他胁迫下较正常条件下降低。研究认为,MaTPS1可能参与调控香蕉抗盐胁迫机制,从而提高香蕉耐盐性。 展开更多

关键词 香蕉 海藻糖-6-磷酸合成酶基因(tps1) 生物信息学 表达分析

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拟南芥AtTPS1基因的生物信息学分析与功能预测

10

作者 陆玉建 张伟 +2 位作者 张韩杰 韩文瑜 沈志强 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期34-39,共6页

目的:对At TPS1基因及其编码产物的结构、表达定位、分子进化、蛋白互作等进行预测和分析。方法:利用在线网络生物信息学相关数据库和分析软件对目的蛋白的同源性、保守结构域、疏水性、跨膜区进行分析;并对基因的表达情况、蛋白质的亚... 目的:对At TPS1基因及其编码产物的结构、表达定位、分子进化、蛋白互作等进行预测和分析。方法:利用在线网络生物信息学相关数据库和分析软件对目的蛋白的同源性、保守结构域、疏水性、跨膜区进行分析;并对基因的表达情况、蛋白质的亚细胞定位、蛋白质间的相互作用进行预测。结果:At TPS1表现出较强的亲水性,在多肽链的内部可能存在跨膜结构和保守结构域。在拟南芥的不同组织和器官都可检测到At TPS1基因的表达,尤其在茎顶端分生组织、种子和花中表达强烈。At TPS1在叶绿体中分布最为广泛,其次是线粒体和细胞核。至少有四类蛋白与At TPS1之间存在较为强烈的相互作用。结论:生物信息学分析结果表明,At TPS1功能复杂,很可能在细胞分裂、胚胎和花发育、种子萌发、光合作用、物质代谢等过程中充当重要的角色。 展开更多

关键词 生物信息学 拟南芥 At tps1基因 海藻糖 胁迫

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甘薯IbTPS1基因的克隆与活性鉴定 被引量：1

11

作者 王文斌 于欢 +1 位作者 杨燕新 邱相坡 《山西农业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第4期17-23,共7页

[目的]发掘植物海藻糖合成途径关键酶基因,探究其编码蛋白TPS活性,为作物遗传改良抗多种胁迫提供优良的候选基因。[方法]本研究基于干旱条件下从甘薯转录组数据库中得到一条与拟南芥AtTPS1基因高度同源的Unigene序列,通过RT-PCR技术克... [目的]发掘植物海藻糖合成途径关键酶基因,探究其编码蛋白TPS活性,为作物遗传改良抗多种胁迫提供优良的候选基因。[方法]本研究基于干旱条件下从甘薯转录组数据库中得到一条与拟南芥AtTPS1基因高度同源的Unigene序列,通过RT-PCR技术克隆了甘薯TPS基因。利用生物信息学软件分析序列特征,酵母互补试验鉴定编码蛋白TPS活性。[结果]IbTPS1基因cDNA序列全长2811bp,编码936个氨基酸,且具有典型的GT1-TPS和HAD-TPP结构域;生物信息学预测表明IbTPS1编码的蛋白是一个不稳定亲水性蛋白,无信号肽,定位于细胞质中;二级结构元件多以无规则卷曲和α-螺旋为主;酵母互补实验证明表达IbTPS1基因的TPS突变酵母菌株(tps1Δ)和TPS,TPP双突变酵母菌株(tps1Δtps2Δ),以葡萄糖为唯一碳源的尿嘧啶缺失培养基上可恢复生长。[结论]证实甘薯IbTPS1基因的编码蛋白具有生物活性。 展开更多

关键词 甘薯 海藻糖-6-磷酸合成酶基因(tps1) 基因克隆

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