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TNHH对大鼠全脑缺血再灌注损伤的抗氧化性保护作用 被引量：7
1
作者 于晓彦 魏欣冰 +1 位作者 陈琳 张岫美 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期36-38,共3页
目的观察TNHH对大鼠全脑缺血再灌注损伤的抗氧化性保护作用。方法以改良的四血管阻塞法(Pulsinelli four-vessel occlusion model)建立大鼠全脑缺血模型,于缺血30 min,再灌注48 h后进行脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧... 目的观察TNHH对大鼠全脑缺血再灌注损伤的抗氧化性保护作用。方法以改良的四血管阻塞法(Pulsinelli four-vessel occlusion model)建立大鼠全脑缺血模型,于缺血30 min,再灌注48 h后进行脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)测定。结果TNHH能显著降低大鼠缺血损伤脑组织中MDA含量,降低MPO活性,提高SOD活性。结论TNHH对大鼠全脑缺血再灌注损伤的具有明显的抗氧化作用。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 tnhh 抗氧化
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重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白工程菌的高密度发酵 被引量：3
2
作者 冀成法 马鲁南 +4 位作者 柳常青 滕学东 邵明学 刘忠 张贵民 《生物加工过程》 CAS 2021年第3期250-255,共6页
重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)是治疗用生物制品Ⅰ类新药,具有多种功效,可用于治疗脑卒中。本文旨在优化TNHH工程菌发酵工艺,以实现该工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高效表达。笔者采用摇瓶试验和发酵罐发酵,从培养基碳、... 重组白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)是治疗用生物制品Ⅰ类新药,具有多种功效,可用于治疗脑卒中。本文旨在优化TNHH工程菌发酵工艺,以实现该工程菌的高密度发酵和目的蛋白的高效表达。笔者采用摇瓶试验和发酵罐发酵,从培养基碳、氮源配比正交试验入手,对工程菌生长和目的蛋白表达影响较大的单因子条件进行重点考察,如温度、pH、诱导策略、诱导剂和抗生素替代及补料流加方式。通过优化,6批50 L发酵工艺稳定,菌体密度(OD 600)均能达79以上,目的蛋白表达量均在30%以上,质粒丢失率均低于10%。优化后的发酵工艺稳定,产量提高258%,质粒丢失率保持在10%以内,为TNHH项目进一步大规模生产奠定了基础。 展开更多
关键词 脑卒中 tnhh 大肠杆菌 高密度发酵 质粒丢失率 水蛭肽
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白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白表达纯化及活性研究 被引量：2
3
作者 宫晓建 魏永永 +4 位作者 张苏 冀成法 马鲁南 刘忠 张贵民 《生物技术》 CAS 2021年第2期129-133,共5页
[目的]采用大肠杆菌表达白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白,表达纯化后进行抗细胞黏附活性及抑制凝血酶活性的功能研究。[方法]将编码白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白的基因构建到pET28a载体上,转化菌株Rosetta(DE3)并经IPTG诱导表达后分... [目的]采用大肠杆菌表达白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白,表达纯化后进行抗细胞黏附活性及抑制凝血酶活性的功能研究。[方法]将编码白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白的基因构建到pET28a载体上,转化菌株Rosetta(DE3)并经IPTG诱导表达后分别经镍柱和分子筛进一步纯化,使用实时细胞分析仪和血凝仪分别测定了白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白的抗粘附活性及抗凝血活性。[结果]成功表达并纯化出白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白,并测定了嵌合蛋白生化及细胞水平活性。[结论]白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白在大肠杆菌中经IPTG诱导表达。经亲和层析和分子筛层析纯化,蛋白纯度达到90%以上,该蛋白同时具有抗细胞粘附及抗凝血双功能,为后续成药性开发奠定基础。 展开更多
关键词 tnhh 蛋白表达 蛋白纯化 活性
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3种基因工程药物对大鼠动脉阻塞性脑损伤治疗作用的比较研究 被引量：2
4
作者 杨辉 王宁 +2 位作者 周远大 何海霞 范开 《中国药房》 CAS CSCD 2004年第6期337-338,共2页
目的 :探讨基因工程药物NIF、NHH、TNHH对大鼠动脉阻塞性脑损伤的治疗作用。方法 :用线栓法将24只大鼠制成动脉阻塞性脑缺血损伤模型后分为治疗组 (3组 )和模型对照组 ,每组6只。治疗组静脉给予NIF、NHH、TNHH ,模型组给予生理盐水。分... 目的 :探讨基因工程药物NIF、NHH、TNHH对大鼠动脉阻塞性脑损伤的治疗作用。方法 :用线栓法将24只大鼠制成动脉阻塞性脑缺血损伤模型后分为治疗组 (3组 )和模型对照组 ,每组6只。治疗组静脉给予NIF、NHH、TNHH ,模型组给予生理盐水。分别于术后4、8、24、48、72h进行神经行为学评分 ;术后72h取血测定血清APTT ,判断凝血功能 ;取脑组织行TTC染色 ,计算梗塞灶体积 ;HE染色观察脑组织病理变化。结果 :治疗组各时间点行为学评分均优于模型组 (P<0 05) ,血清APTT比模型组均有明显延长 (P<0 05) ,脑组织梗塞灶体积比模型组小 (P<0 05) ,HE染色脑组织病理变化均较模型组轻。结论 :NIF、NHH、TNHH对大鼠动脉阻塞性脑缺血损伤有明显的保护作用 ,其中以TNHH最优。 展开更多
关键词 脑缺血 NIF NHH tnhh 梗塞灶体积
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重组人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白保护大鼠局灶性脑缺血损伤 被引量：3
5
作者 牛荣荣 于晓彦 +3 位作者 孙玉 魏欣冰 陈琳 张岫美 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期863-867,共5页
目的观察重组人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法本实验采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)的局灶性脑缺血模型,将大鼠随机分为5组:1空白对照组,2假手术... 目的观察重组人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)对大鼠局灶性脑缺血的保护作用。方法本实验采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)的局灶性脑缺血模型,将大鼠随机分为5组:1空白对照组,2假手术组,3脑缺血损伤模型组,4溶媒对照组和5人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(6.75 mg·kg-1)组。持续性脑缺血12 h后进行神经行为学评分,处死动物后用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定脑梗死面积,并对脑组织切片进行HE染色检测脑组织病理损伤情况,酶联免疫分析(ELISA)和放射免疫法分别测定血清中炎症因子肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β水平。结果与缺血损伤模型组相比,人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白可以明显改善大鼠脑缺血损伤后的神经行为,减少脑梗死面积,减轻脑水肿程度和脑组织病理损伤,显著降低血清中肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β水平。结论人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白具有明显的抗炎、抗水肿作用,可以有效改善大鼠局灶性脑缺血的损伤。 展开更多
关键词 人白细胞抑制因子和水蛭肽嵌合蛋白(tnhh) 局灶性脑缺血 抗炎作用 脑水肿
原文传递
新型水蛭肽嵌合蛋白治疗脑出血后脑水肿的实验研究 被引量：3
6
作者 杨辉 周远大 何海霞 《中国药业》 CAS 2010年第8期22-23,共2页
目的探讨新型基因工程药物水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)对大鼠脑出血后脑水肿的治疗作用及其机制。方法将96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、TNHH组,以自体血注入大鼠尾状核方法建立脑出血模型,假手术组只进针不注血。TNHH组... 目的探讨新型基因工程药物水蛭肽嵌合蛋白(TNHH)对大鼠脑出血后脑水肿的治疗作用及其机制。方法将96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、TNHH组,以自体血注入大鼠尾状核方法建立脑出血模型,假手术组只进针不注血。TNHH组静脉注射TNHH(2mg/kg),分别于造模前30min及造模后每12h给药1次。于6,24,72,168h时分别用Longa标准测定神经功能缺损,干、湿重法检测脑含水量,分光光度法测定脑血肿周围脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性。结果与假手术组相比,脑出血模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性均显著增高(P<0.05或P<0.01);与脑出血模型组相比,TNHH组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论 TNHH对大鼠脑出血后脑水肿有治疗作用,其机制可能与抑制凝血酶活性、降低中性粒细胞浸润有关。 展开更多
关键词 水蛭肽嵌合蛋白 脑出血 脑含水量 髓过氧化物酶
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NHH、NIF、TNHH对大鼠实验性脑血肿治疗作用的比较研究
7
作者 杨辉 周远大 +1 位作者 何海霞 范开 《四川生理科学杂志》 2004年第4期174-174,共1页
关键词 NHH NIF tnhh 大鼠 实验性 脑血肿 药理学 脑组织
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TNHH对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用
8
作者 于晓彦 魏欣冰 +1 位作者 陈琳 张岫美 《中国药理通讯》 2008年第2期59-59,共1页
目的：观察白细胞抑制因子[neutrophil inhibitory factor，NIF，特征表述为NIF-Gly（5-10））]与水蛭素（hirudin）段经基因工程重组表达和纯化技术合成的重组双功能嵌合蛋白（NIF-hirudin hybrid，NHH）对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护... 目的：观察白细胞抑制因子[neutrophil inhibitory factor，NIF，特征表述为NIF-Gly（5-10））]与水蛭素（hirudin）段经基因工程重组表达和纯化技术合成的重组双功能嵌合蛋白（NIF-hirudin hybrid，NHH）对大鼠局灶性脑缺血损伤的保护作用，并探讨其作用机制。方法：以大脑中动脉栓线阻断法（MCAO）制备大鼠局灶性脑缺血损伤模型，缺血12小时后进行大鼠神经行为学评分，并断头取脑测定脑梗死面积， 展开更多
关键词 tnhh 大鼠 局灶性脑缺血损伤 保护作用
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