肺癌抑癌基因1对前列腺癌T_3B细胞侵袭、成瘤和转移能力的影响

1

作者 袁林 陈安民 +3 位作者 郭风劲 祝文涛 王江 廖晖 《肿瘤学杂志》 CAS 2009年第11期990-994,共5页

[目的]研究肺癌抑癌基因1(TSLC1)对人前列腺癌T3B细胞侵袭、成瘤和转移能力的影响。[方法]将克隆有TSLC1全长cDNA的真核表达载体pCI-TSLC1稳定转染至前列腺癌T3B细胞中。实验组T3B细胞转染pCI-TSLC1质粒,以转染空质粒pCI-neo的T3B细胞... [目的]研究肺癌抑癌基因1(TSLC1)对人前列腺癌T3B细胞侵袭、成瘤和转移能力的影响。[方法]将克隆有TSLC1全长cDNA的真核表达载体pCI-TSLC1稳定转染至前列腺癌T3B细胞中。实验组T3B细胞转染pCI-TSLC1质粒,以转染空质粒pCI-neo的T3B细胞为对照组,未加任何处理的T3B细胞为空白组。Transwell法检测体细胞体外侵袭能力,将三组细胞分别以4.0×106/200μl浓度注入裸鼠皮下,观察各组成瘤情况,将三组细胞分别以2.0×106/10μl进行骨原位注射建立骨转移瘤模型,观察各组骨转移率。[结果]与对照组和空白组相比,实验组细胞株细胞体外侵袭能力受到显著抑制(P<0.01);实验组皮下瘤出现明显晚于对照组和空白组,而且瘤体也明显小于对照组和空白组(P<0.01);实验组骨转移率为20%,明显低于对照组(100%)和空白组(100%)(P<0.05)。[结论]TSLC1基因明显抑制T3B细胞的侵袭、成瘤和转移能力。 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 T3b细胞 抑癌基因 肺癌抑癌基因1

原文传递

博落回总碱对肝癌细胞的毒性作用和体内抗肿瘤作用 被引量：34

2

作者 庞建新 马仁强 +2 位作者 刘兰梅 蒋毅萍 孙莉莎 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第3期325-328,共4页

目的观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果(1)TAP... 目的观察博落回总碱(TAPP)的体内外抗肿瘤活性作用。方法MTT法检测TAPP体外对人肝癌Hep3B细胞、小鼠H22肝癌细胞的抑瘤作用;用小鼠移植性肿瘤法检测TAPP对小鼠H22肝癌细胞、S180肿瘤细胞的体内抑瘤作用。测3次重复实验结果。结果(1)TAPP在体外有明显的细胞毒性作用,可抑制Hep3B、H22细胞增殖,且呈剂量依赖性:其对Hep3B细胞的半数抑制浓度(IC50) 3次重复实验结果分别为3.04、3.98、2.98 μg/ml,对H22细胞则分别为2.89、2.21、2.34 μg/ml。(2)体内实验表明,TAPP可抑制H22细胞皮下移植瘤的生长,在剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w.时,3次腹腔注射给药实验测得抑瘤率分别为18.6%、35.1%、44.9%,而以每天4 mg/kg·b.w.时口服给药抑瘤率则为7.9%;另外,TAPP可明显延长S180腹水瘤小鼠存活时间,剂量为每天1、2、4 mg/kg·b.w. 时静脉注射给药生命延长率3次重复结果平均分别为24.8%、48.9%、52.7%。结论TAPP在体内外均有明显的抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 博落回 MTT法 S180/腹水瘤 人肝癌Hep3b 鼠肝癌H22/移植瘤

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仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性研究 被引量：10

3

作者 蔺红伟 江春霞 +1 位作者 陆文铨 朴淑娟 《药学服务与研究》 CAS 2020年第2期98-101,共4页

目的:考察仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性。方法:不同浓度的仙灵骨葆同方、缺方及各单方提取物作用于人肝癌Hep3B细胞后,用CCK-8试剂盒检测肝细胞毒性。以阳性药物FCCP验证该细胞模型并获得量效参考值,进而筛选出不同提取物的半数抑制... 目的:考察仙灵骨葆同方提取物的肝细胞毒性。方法:不同浓度的仙灵骨葆同方、缺方及各单方提取物作用于人肝癌Hep3B细胞后,用CCK-8试剂盒检测肝细胞毒性。以阳性药物FCCP验证该细胞模型并获得量效参考值,进而筛选出不同提取物的半数抑制浓度(IC50),比较各提取物的肝细胞毒性的差异。结果:全方、缺方和各单方提取物的IC50分别为:全方提取物153.2μg/ml,缺淫羊藿提取物312.2μg/ml,缺续断提取物217.1μg/ml,缺丹参提取物256.5μg/ml,缺知母提取物229.6μg/ml,缺补骨脂提取物246.9μg/ml,缺地黄提取物259.4μg/ml;淫羊藿提取物91.77μg/ml,续断提取物179.0μg/ml,丹参提取物410.6μg/ml,知母提取物307.9μg/ml,补骨脂提取物73.22μg/ml,地黄提取物180.2μg/ml。其中全方提取物、淫羊藿提取物和补骨脂提取物的IC50值明显低于其他提取物,故初步判断仙灵骨葆处方中造成肝毒性的主要是淫羊藿和补骨脂。结论:本研究采用CCK-8法,筛选出仙灵骨葆处方中的肝毒性成分主要为淫羊藿和补骨脂提取物,为深入研究仙灵骨葆的肝毒性打下了基础。 展开更多

关键词 仙灵骨葆 HEP3b细胞 CCK-8 肝细胞毒性 体外

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藏族药翼首草正丁醇部位提取物体外抑制人肝癌Hep3B细胞增殖和侵袭转移 被引量：10

4

作者 郭晨旭 吴迎春 +4 位作者 朱元章 田丽莉 陆怡 韩聪 朱国福 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期100-105,共6页

目的：本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物（YSC-ZDC）抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法：取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×10^4/m L（MTT法）或2.5×... 目的：本研究旨在体外筛选出藏族药翼首草正丁醇部位提取物（YSC-ZDC）抑制人肝癌Hep3B细胞侵袭转移的有效萃取部位,并对其抗肿瘤作用机制进行初步探讨。方法：取对数生长期Hep3B细胞,调整细胞密度为4×10^4/m L（MTT法）或2.5×105/m L（Western blot,heochst 33258实验）,1×10^5/m L（划痕实验）,5×10^4/m L（Transwell实验）,培养24,48,72 h后分别加入不同质量浓度的药物（50,100,200 mg·L^-1）,分组设3-4个复孔。通过MTT法检测YSC-ZDC对于Hep3B细胞增殖的影响,形态观察该药对Hep3B细胞凋亡的影响。划痕实验和Transwell小室检测YSC-ZDC对Hep3B细胞侵袭、迁移的影响;Western blot检测侵袭转移相关信号通路分子表达的变化。结果：YSC-ZDC 50,100,200 mg·L^-1作用于Hep3B细胞24,48,72 h后可明显抑制其增长。50,100,200 mg·L^-1YSC-ZDC作用于Hep3B细胞24 h后可明显抑制其侵袭和迁移;YSC-ZDC可明显影响上皮-间质转化（EMT）相关蛋白E-钙黏素,N-钙黏素（E-cadherin,N-cadherin）和纤维连接蛋白（FN）的表达（P〈0.05）。结论：YSC-ZDC能显著抑制Hep3B细胞的增殖和侵袭转移,并诱导Hep3B细胞凋亡,其作用机制可能与EMT有关。 展开更多

关键词 翼首草 HEP3b细胞 侵袭 转移 上皮-间质转化

原文传递

靶向Cyclin D1基因RNA干扰对肝癌细胞增殖和Mdm2等基因表达影响的研究 被引量：10

5

作者 张弘英 胡树根 +1 位作者 胡利琳 丁浩 《重庆医学》 CAS 2018年第15期1981-1985,共5页

目的探讨Cyclin D1表达下调对Mdm2等基因表达及人肝癌细胞增殖的影响。方法用脂质体将Cyclin D1-siRNA转染人肝癌细胞株Hep3B细胞。实验分为空白对照组、阴性对照siRNA组、Cyclin D1-siRNA组。采用RT-PCR和Western blot检测Cyclin D1、M... 目的探讨Cyclin D1表达下调对Mdm2等基因表达及人肝癌细胞增殖的影响。方法用脂质体将Cyclin D1-siRNA转染人肝癌细胞株Hep3B细胞。实验分为空白对照组、阴性对照siRNA组、Cyclin D1-siRNA组。采用RT-PCR和Western blot检测Cyclin D1、Mdm2、Mdm4、P53和P21表达,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞活力,TUNEL检测细胞凋亡。结果与空白对照组和阴性对照siRNA组相比,Cyclin D1-siRNA组P53和P21表达上调(P<0.05),Cyclin D1、Mdm2和Mdm4表达下调(P<0.01);3组细胞周期G1、S及G2期均无明显差异(P>0.05);Cyclin D1-siRNA组较其他两组细胞活力明显减弱(P<0.01),细胞凋亡明显增强(P<0.01)。结论 Cyclin D1表达下调能抑制Mdm2和Mdm4的表达,并能上调P53和P21的表达;Cyclin D1表达下调能抑制肝癌细胞的增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 细胞周期蛋白D1 RNA干扰 HEP3b细胞 细胞增殖 MDM2

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复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖影响 被引量：9

6

作者 刘璐 李川 韩涛 《临床军医杂志》 CAS 2018年第9期1011-1013,共3页

目的探讨复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法运用细胞计数法(CCK-8)检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞的抑制作用。采用流式细胞术检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞周期的及凋亡的影响。结果复方苦参注射液对Hep3B细胞... 目的探讨复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞增殖的影响。方法运用细胞计数法(CCK-8)检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞的抑制作用。采用流式细胞术检测复方苦参注射液对肝癌Hep3B细胞周期的及凋亡的影响。结果复方苦参注射液对Hep3B细胞的增殖有明显的抑制作用,且存在时间-浓度依赖性。随着复方苦参注射液浓度的增加,凋亡细胞的比例逐渐增大,G1期细胞逐渐增加,S期细胞逐渐减少。结论复方苦参注射液可以抑制Hep3B细胞的生长,可能与促进细胞凋亡并引起细胞阻滞有关。 展开更多

关键词 复方苦参注射液 肝癌Hep3b细胞 周期 凋亡

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姜黄素对小鼠CFU-GM及WEHI-3B细胞增殖的影响(英文) 被引量：7

7

作者 蒋德昭 谢祁阳 王绮如 《湖南医科大学学报》 CSCD 2000年第3期216-218,共3页

用体外半固体集落培养方法 ,观察不同浓度姜黄素 ( 10 - 8～ 10 - 4 mol·L- 1 )对BALB/c小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)及骨髓单核系白血病干细胞 (WEHI 3B细胞系 )增殖的影响。结果显示 ,姜黄素呈剂量依赖性抑制CFU GM和WEHI... 用体外半固体集落培养方法 ,观察不同浓度姜黄素 ( 10 - 8～ 10 - 4 mol·L- 1 )对BALB/c小鼠骨髓粒 巨噬系祖细胞 (CFU GM)及骨髓单核系白血病干细胞 (WEHI 3B细胞系 )增殖的影响。结果显示 ,姜黄素呈剂量依赖性抑制CFU GM和WEHI 3B细胞增殖 ,其半抑制剂量 (IC5 0 )分别为 1.0 36× 10 - 5 mol·L- 1 和 1.2 2 0× 10 - 6 mol·L- 1 。表明姜黄素对WEHI 3B白血病细胞的抑制作用强于对CFU 展开更多

关键词 姜黄素 粒-巨噬系祖细胞 WEHI-3b细胞系 白血病

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多途径丝裂原激活的蛋白激酶介导一氧化氮引起的肝癌细胞凋亡 被引量：3

8

作者 任正刚 刘银坤 +2 位作者 Ziqiu Wang Sid Kar Brian I Carr 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期459-463,共5页

目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系... 目的 研究非离子型的diazeniumdiolate类一氧化氮供体引起肝癌细胞凋亡的分子机制。方法 利用免疫印迹、免疫沉淀、凝胶阻滞实验研究一氧化氮供体处理Hep3B肝癌细胞后,丝裂原激活的蛋白激酶、AP-1的激活以及和Hep3B肝癌细胞凋亡的关系。结果 一氧化氮可引起细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶和p38激酶的激活,特别是细胞外信号调节的蛋白激酶的持续激活,其中细胞外信号调节的蛋白激酶和c-jun N末端激酶的特异的阻断剂U0126和JNK抑制剂Ⅱ可阻断AP-1的激活和Hep3B细胞的凋亡,而p38激酶的阻断剂SB203580不能阻断AP-1的激活和Hep3B肝癌细胞的凋亡。结论 一氧化氮通过激活细胞外信号调节蛋白激酶、c-jun N末端激酶,进而激活AP-1而引起Hep3B肝癌细胞的凋亡。 展开更多

关键词 肝肿瘤 HEP3b细胞 蛋白激酶类 丝裂原激活的 一氧化氮 细胞凋亡

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汉防己碱对肝癌Hep3b细胞生长的双向作用 被引量：5

9

作者 蒋心惠 黄开顺 +2 位作者 滕永真 何百成 周岐新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1281-1284,共4页

目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0... 目的考察汉防己碱(tetrandrine,Tet)对肝癌Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长的影响。方法采用体外细胞培养,结合流式细胞术、MTT和Western blot方法研究Tet(0.33～1.0μg/ml)对肝癌Hep3b及Hep3b/5-Fu细胞生长的作用特点。结果 Tet在0.33～1.0μg/ml时呈浓度依赖性降低Hep3b细胞存活率;0.5和1.0μg/ml显著提高5-Fu对Hep3b细胞的IC50,但降低5-Fu对Hep3b/5-Fu细胞的IC50;0.33μg/ml的Tet明显增加cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50,而0.5和1.0μg/ml显著降低cDDP对Hep3b/5-Fu细胞的IC50(P<0.01)。1.0μg/ml的Tet作用48 h后使Hep3b细胞中的P-gp和MRP1表达明显上调(P<0.05)。Tet单用对Hep3b细胞生长有一定抑制作用,高浓度Tet逆转Hep3b/5-Fu细胞对5-Fu耐药和增强cDDP对Hep3b/5-Fu细胞生长的抑制作用,但低浓度分别促进Hep3b细胞和Hep3b/5-FU细胞对5-Fu和cDDP耐药。结论 Tet对Hep3b和Hep3b/5-Fu细胞生长呈浓度相关的双向作用,其促进耐药细胞发展的机制至少与提升P-gp和MRP1表达有关。 展开更多

关键词 汉防己碱 肝癌Hep3b细胞 逆转耐药性 促进耐药

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基于转录组测序探究OSW-1抗肝癌的作用机制

10

作者 徐博 姜汀 +1 位作者 金旺德 金星林 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第24期346-352,共7页

目的:基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷(Ornithogalum saundersiae Saponins,OSW-1)作用于肝癌细胞(HEP3B)后的关键通路及差异表达基因。方法:利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据,通过测定的序列信息精确地分析转录本... 目的:基于转录组测序发掘虎眼万年青皂苷(Ornithogalum saundersiae Saponins,OSW-1)作用于肝癌细胞(HEP3B)后的关键通路及差异表达基因。方法:利用转录组测序技术检测OSW-1处理HEP3B的基因表达数据,通过测定的序列信息精确地分析转录本,筛选与细胞存活相关的表达差异基因,得到核心基因,并通过实验验证OSW-1是否通过调控核心靶点治疗肝细胞癌。结果:MTT结果表明,经OSW-1给药后HEP3B细胞活性明显降低,且呈浓度依赖性。通过转录组测序检测,共获得1381个存在明显表达差异的基因,并且多数基因富集在TNF信号通路。进一步通过免疫荧光及Western blot表明,OSW-1干预HEP3B细胞后,p-PI3K、p-AKT、p-NF-κB蛋白水平表达降低。结论:OSW-1可能通过调控炎症信号通路降低炎症反应,抑制HEP3B细胞活性,可作为潜在的治疗肝癌的药物,以及为保肝护肝的保健食品研发提供实验依据。 展开更多

关键词 虎眼万年青皂苷 转录组测序 HEP3b细胞 差异表达基因

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双硫仑联合二价铜离子诱导铜死亡抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭

11

作者 唐敏 黄娟婵 +2 位作者 韦杏雯 罗雪文 赵伟 《中国癌症防治杂志》 CAS 2024年第4期417-423,共7页

目的探讨双硫仑(disulfiram,DSF)联合二价铜离子(Cu^(2+))对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养肝癌Hep3B细胞,分别采用DSF(30 nmol/L)溶液、Cu^(2+)(1μmol/L)溶液和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomo... 目的探讨双硫仑(disulfiram,DSF)联合二价铜离子(Cu^(2+))对肝癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法体外培养肝癌Hep3B细胞,分别采用DSF(30 nmol/L)溶液、Cu^(2+)(1μmol/L)溶液和铜螯合剂四硫代钼酸铵(ammonium tetrathiomolybdateⅥ,ATTM)(30 nmol/L)溶液单独或联合干预,以二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)(30 nmol/L)作用的细胞为对照组。分别采用CCK-8实验、划痕实验和Transwell小室实验检测细胞的增殖能力、迁移能力和侵袭能力;采用免疫荧光实验检测细胞中铜死亡相关蛋白二氢硫辛酰胺-S-乙酰转移酶(dihydrolipoamide S-acetyltransferase,DLAT)和铁氧还蛋白1(ferredoxin 1,FDX1)的表达。结果与对照组相比,DSF、Cu^(2+)单独或联合干预后Hep3B细胞的增殖、迁移和侵袭能力均下降(均P<0.05),其中DSF+Cu^(2+)联合干预的细胞增殖、迁移和侵袭能力下降更加显著(均P<0.0001)。在DSF联合Cu^(2+)的基础上加入ATTM后逆转了DSF联合Cu^(2+)对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,其增殖、迁移以及侵袭能力较DSF+Cu^(2+)组增强(均P<0.05)。与对照组相比,DSF、Cu^(2+)单独干预后铜死亡相关蛋白DLAT和FDX1的荧光强度改变并不明显,但Cu^(2+)联合DSF后DLAT蛋白的荧光强度增加而FDX1蛋白的荧光强度减弱,加入ATTM后则逆转了DLAT和FDX1蛋白的表达趋势。结论DSF联合Cu^(2+)能抑制肝癌细胞Hep3B增殖、迁移和侵袭能力,其作用机制可能是通过诱导铜死亡的发生实现。 展开更多

关键词 肝癌 HEP3b细胞 双硫仑 铜死亡 增殖 迁移 侵袭

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顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1表达及药物敏感性的研究

12

作者 赵向阳 刘双池 +2 位作者 张懿刚 陶滔 谈燚 《中华普通外科学文献（电子版）》 CAS 2024年第1期51-55,共5页

目的探讨顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达以及PD-L1对顺铂敏感性的影响。方法使用不同浓度的顺铂(0、5、10、20 mg/L)处理Hep3B细胞,利用q PCR、Western blotting法检测细胞中PD-L1的表达情况。设置对照组(加入PBS)... 目的探讨顺铂对肝细胞癌Hep3B细胞程序性死亡配体1(PD-L1)表达以及PD-L1对顺铂敏感性的影响。方法使用不同浓度的顺铂(0、5、10、20 mg/L)处理Hep3B细胞,利用q PCR、Western blotting法检测细胞中PD-L1的表达情况。设置对照组(加入PBS)、顺铂组(5 mg/L)、MK2206组(AKT抑制剂,5μmol/L)和顺铂+MK2206组(5 mg/L顺铂处理前1 h给予5μmol/L MK2206),分别干预Hep3B细胞,Western blotting检测AKT、p-AKT和PD-L1的表达情况。si RNA-PD-L1转染Hep3B细胞,Western blotting检测PD-L1和上皮-间质转化标志物(E-cadherin和N-cadherin)表达变化,CCK-8、细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞功能变化。结果顺铂可上调Hep3B细胞中PD-L1的蛋白表达水平(P<0.05)。与对照组相比,5 mg/L的顺铂显著促进Hep3B细胞中PD-L1的m RNA水平(P<0.05)。MK2206可抑制顺铂对p-AKT和PD-L1的上调(P<0.05),而AKT的蛋白水平差异无统计学意义。si RNA-PD-L1可抑制顺铂对Hep3B细胞PD-L1表达的上调(P<0.05),增强顺铂对Hep3B细胞增殖、迁移和侵袭的抑制,以及对E-cadherin的表达上调和N-cadherin的表达下调(P<0.05)。结论顺铂可促进肝细胞癌Hep3B细胞PD-L1表达,其机制可能与上调了AKT通路蛋白的磷酸化水平相关;抑制PD-L1表达可增强肝细胞癌Hep3B细胞对顺铂的敏感性。 展开更多

关键词 肝细胞癌 顺铂 程序性死亡配体1 敏感性 HEP3b细胞

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六神丸和砷化合物对人肝癌Hep3B细胞增殖的影响 被引量：3

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作者 梁世霞 刘正芸 +5 位作者 余丽梅 刘云 郭静 贾智诚 拓军雄 刘杰 《遵义医学院学报》 2016年第6期558-562,共5页

目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞... 目的中药六神丸(LSW)含雄黄(As_4S_4)。近年研究表明砷化合物对血液肿瘤有显著的抑制作用,但其对实体瘤的作用报道少。故我们就六神丸和砷化合物[Na_2HAsO_4(As^(5+))、NaAsO_2(As^(3+))、As_2O_3、As_4S_4和As_2S_2]对人肝癌Hep3B细胞的抗肿瘤作用进行了研究。方法采用MTS法检测六神丸、雄黄及其他含砷化合物对人肝癌Hep3B细胞的杀灭作用,通过原子吸收光谱测定各砷化合物中砷(As)的溶出度;流式细胞仪检测药物对细胞周期和细胞凋亡的影响;荧光定量PCR检测相关基因的表达。结果六神丸中As的溶出度高于雄黄和As_2S_2,但低于亚砷酸钠(As^(3+))、砷酸钠(As^(5+))和As_2O_3。六神丸对Hep3B有较好的抑制增殖和杀灭作用其作用仅次于亚砷酸钠。六神丸可诱导Hep3B细胞凋亡,作用机制与降低Bcl-2及Bcl-w的表达有关,并降低ABCG2、VEGF(血管内皮生长因子)和肿瘤转移相关基因MMP-9的表达。但六神丸对细胞周期无明显影响。结论六神丸通过多途径对肝癌Hep3B细胞具有明显的抗增殖作用。 展开更多

关键词 六神丸 抗肿瘤 HEP3b细胞 砷化合物 凋亡

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一种新的蝮蛇蛇毒磷脂酶A2同源物的分离纯化及其对Hep3B细胞基因谱的影响 被引量：2

14

作者 马安德 吴少瑜 +5 位作者 张嘉杰 李志琴 徐伟 文晓芸 余乐 吴曙光 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期75-79,共5页

目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2(PLA2)同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响。方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度。用电喷雾质谱仪测定PLA2 同源物分子量。体外培养Hep3B细... 目的从中国蝮蛇蛇毒中分离纯化出一种新的磷脂酶A2(PLA2)同源物,并研究其对Hep3B细胞基因谱的影响。方法用C18反相高效液相层析从蛇毒粗毒中分离纯化出PLA2同源物,并检测其纯度。用电喷雾质谱仪测定PLA2 同源物分子量。体外培养Hep3B细胞,以139μg／ml PLA2同源物处理12 h,应用基因芯片检测基因表达的改变。结果从蛇毒粗毒中分离纯化出一种新的PL,A2同源物,纯度为97．2％,相对分子质量为13 900。139μg／ml PLA2同源物处理 Hep3B细胞12 h后,19个基因表达下调,20个基因表达上调。表达改变的基因按功能分主要为以下6类:细胞周期控制和DAN损伤修复类、细胞调亡和衰老类信号转导分子和转录因子、细胞黏附类、血管生成类以及肿瘤细胞入侵和转移类。结论PLA2同源物作用于Hep3B细胞后,可影响细胞多种基因的表达,表达改变的基因主要参与肿瘤细胞的生长和转移。本研究为进一步深入研究PLA2对肿瘤细胞的作用机制提供线索和依据。 展开更多

关键词 蛇毒 蝮蛇 PLA2同源物 HEP3b细胞 基因芯片

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人参皂苷Rg3联合奥沙利铂对肝癌Hep3B细胞株增殖及凋亡的影响 被引量：1

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作者 孙海凤 郭亚焕 +5 位作者 经里 赵征 苏智祥 雷宝霞 焦敏 南克俊 《疑难病杂志》 CAS 2015年第9期963-966,共4页

目的探讨人参皂苷Rg3(GS-Rg3)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对肝癌Hep3B细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法培养Hep3B细胞株,采用不同浓度GS-Rg3(12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)(G组)、LOHP(1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)(O组... 目的探讨人参皂苷Rg3(GS-Rg3)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对肝癌Hep3B细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法培养Hep3B细胞株,采用不同浓度GS-Rg3(12.5、25.0、50.0、100.0μmol/L)(G组)、LOHP(1.25、2.50、5.00、10.00 mg/L)(O组)单药及联合应用(L组)进行干预,并设空白对照组(C组),MTt法观察各组对Hep3B细胞株生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对Hep3B细胞株凋亡率的影响。结果GS-Rg3、L-OHP单药及联合采用对Hep3B细胞株的抑制作用均呈明显的时间与浓度依赖关系,O组较G组抑制率高,且与O组、G组比较,L组抑制率更高(P<0.05)。与C组比较,G组、O组、L组细胞凋亡率均增高(P<0.05),O组高于G组,且C组均高于O组、G组(P<0.05)。与GS-Rg3组比较,L-OHP组对Hep3B细胞株的抑制率及诱导凋亡率均较高(P<0.05)。结论 GS-Rg3、L-OHP能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖并诱导凋亡,两药联合有协同作用,且西药L-OHP抗增殖效应和诱导凋亡作用,均比中药GS-Rg3强。 展开更多

关键词 人参皂苷RG3 奥沙利铂 Hep3b细胞株 增殖 凋亡

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雷公藤多甙对小鼠髓样单核白血病细胞系WEHI-3B作用机理的研究 被引量：1

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作者 唐小玲 刘静 张彬 《实用预防医学》 CAS 2005年第1期93-94,共2页

目的　探讨雷公藤多甙对小鼠髓样单核白血病细胞系WEHI -3B作用机理。　方法　应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪 (FCM )、电镜等方法检测雷公藤多甙对WEHI -3B细胞的影响。　结果　雷公藤多甙能显著抑制小鼠白血病细胞的增殖 ,降... 目的　探讨雷公藤多甙对小鼠髓样单核白血病细胞系WEHI -3B作用机理。　方法　应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞仪 (FCM )、电镜等方法检测雷公藤多甙对WEHI -3B细胞的影响。　结果　雷公藤多甙能显著抑制小鼠白血病细胞的增殖 ,降低细胞存活率 ,其半数细胞抑制剂量 (IC5 0值 )为 2 μg/ml;FCM检测雷公藤多甙实验组凋亡细胞百分率显著上升 ;雷公藤多甙实验组细胞核固缩 ,染色质边集。　结论　雷公藤多甙能显著抑制小鼠髓样单核白血病细胞系WEHI -3B细胞的生长 ,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 雷公藤多甙 WEHI-3b细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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COX-2 siRNA诱导人肝癌Hep3B细胞凋亡实验研究

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作者 刘靳波 何鹏 +2 位作者 朱喜丹 陶华林 王开正 《泸州医学院学报》 2012年第1期30-34,共5页

目的:观察COX-2在人肝癌细胞Hep3B中的表达及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默COX-2基因对COX-2 mRNA和蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:将siRNA-COX-2质粒载体转染Hep3B细胞,WST-8法检测细胞增殖抑制情况,透射电镜观... 目的:观察COX-2在人肝癌细胞Hep3B中的表达及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默COX-2基因对COX-2 mRNA和蛋白表达、细胞增殖及凋亡的影响。方法:将siRNA-COX-2质粒载体转染Hep3B细胞,WST-8法检测细胞增殖抑制情况,透射电镜观察凋亡小体出现情况;筛选单克隆细胞株Hep3B-sh,采用RT-PCR和Western blotting检测COX-2 mRNA和蛋白情况。结果:siRNA-COX-2能抑制Hep3B细胞的增殖,稳定转染pshRNA-COX-2可使Hep3B细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达明显减弱(P<0.01);透射电镜下可见凋亡小体出现,发生凋亡细胞数增加。结论:COX-2siRNA能有效抑制肝癌Hep3B细胞中COX-2的表达和细胞的增殖,促进凋亡发生,为肝细胞癌基因治疗提供实验依据和治疗靶点。 展开更多

关键词 肝癌 小分子干扰 COX-2 细胞凋亡 HEP3b细胞

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蓝舌病毒HbC_3株诱导人肝癌细胞Hep-3B的凋亡

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作者 汪艳 雷森林 +3 位作者 郭淑芳 高婧 戴莹 董长垣 《中国病毒学》 CSCD 2006年第6期556-559,共4页

采用MTT法检测BTV-HbC3对Hep-3B细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞的凋亡情况,透射电镜观察感染BTV-HbC3的Hep-3B细胞超微结构变化。结果表明BTV-HbC3对Hep-3B细胞具有抑制效应,并呈浓度和时间依赖性;BTV-HbC3... 采用MTT法检测BTV-HbC3对Hep-3B细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞的凋亡情况,透射电镜观察感染BTV-HbC3的Hep-3B细胞超微结构变化。结果表明BTV-HbC3对Hep-3B细胞具有抑制效应,并呈浓度和时间依赖性;BTV-HbC3作用下Hep-3B细胞呈现凋亡特征;BTV-HbC3能有效感染人肝癌细胞株Hep-3B,并在其中有限地复制,同时抑制该细胞增殖,诱导其进入凋亡。本研究证实了蓝舌病毒HbC3株对人肝癌细胞Hep-3B的杀伤及其诱导凋亡作用,结合本室已反复证实该病毒不感染人源正常细胞的事实,提示了该病毒具有抗人肝癌之潜能。 展开更多

关键词 蓝舌病毒HbC3(bTV-HbC3) 人肝癌细胞(Hep-3b) 凋亡 溶癌病毒

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人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC_3株超微结构的动态观察

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作者 汪艳 雷森林 +2 位作者 郭淑芳 易有荣 董长垣 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期856-858,共3页

目的 探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法 利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成... 目的 探讨蓝舌病毒靶向抗肿瘤的细胞生物学机制。方法 利用透射电镜观察蓝舌病毒HbC3株感染人肝癌细胞Hety-3B的形态发生学以及该病毒引起的细胞的病理改变。结果 BTV-HbC3以受体介导的胞饮作用穿入细胞，溶酶体水解病毒外衣壳，使之成为亚病毒粒子，胞浆内有病毒包涵体及未装配成熟的亚病毒颗粒。随后亚病毒颗粒装配上外层蛋白结构，形成成熟的病毒粒子。病毒感染细胞12～18h时，细胞以挤出的方式释放病毒并达到高峰。18-48h时，病毒进入超感染期，大量细胞发生病变，出现细胞凋亡和溶解。结论 一旦蓝舌病毒感染Hep-3B肿瘤细胞即可在细胞内增殖并诱导该肿瘤细胞进入凋亡，死亡的肿瘤细胞释放出的病毒粒子并再次感染其他肿瘤细胞，直至将全部肿瘤细胞杀灭，其溶瘤方式为链式反应。 展开更多

关键词 蓝舌病毒HbG(bTV-HbC3) 人肝癌细胞(Hep-3b) 形态发生学 溶癌病毒

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类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B酵母双杂交cDNA文库的构建

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作者 余新 刘天 +2 位作者 德洪波 李国惠 邵江华 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期400-403,共4页

目的:构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法:从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo(dT)AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA... 目的:构建类泛素FAT10高表达肝癌细胞株Hep3B的酵母双杂交用cDNA文库.方法:从肝癌细胞Hep3B中提取总RNA,分离mRNA.利用反转录酶M-MLV与Oligo(dT)AnchorPrimer合成1stStrandcDNA,用E.coliDNAPolymerase与E.coliDNALigase将RNA链置换成DNA链,合成2ndStrandcDNA.将双链cDNA与EcoRⅠAdaptor连接,然后用EcoRⅠ/XhoⅠ进行酶切.使用SpinColumn除去短链cDNA与pGADT7载体连接,转化入E.coliDH10B,建成原始文库.然后对其进行扩增并随机挑取单菌落,酶切鉴定重组子插入片段大小.结果:提取的总RNA降解少且分子完整;RNA纯度高,相对分子质量为400-5000bp;成功合成双链cDNA,均符合建库要求;库容量达到1.03×106克隆,原始文库滴度为2.50×109cfu/L,扩增后的文库滴度为3.60×1012cfu/L.插入片段大小分布为0.5-3.5kb,平均长度约为2.0kb.结论:所构建文库的各项指标均达到要求,为筛选FAT10作用蛋白奠定了重要基础. 展开更多

关键词 人肝癌细胞Hep3b 酵母双杂交cDNA文库 FAT10

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