脂溢性角化病皮损区Smurf1和Smurf2表达增强 被引量：4

1

作者 李颖 何威 +3 位作者 何云志 黄海 王亚丽 杨扬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期911-914,共4页

目的探讨脂溢性角化病皮损区Smad泛素化调节因子1和2(Smad ubiquitination regulatory factor1 and 2,Smurf1,2)的表达及其意义。方法采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative Real-time PCR,RT-PCR)和免疫组织化学技术分别检测脂溢性... 目的探讨脂溢性角化病皮损区Smad泛素化调节因子1和2(Smad ubiquitination regulatory factor1 and 2,Smurf1,2)的表达及其意义。方法采用实时定量聚合酶链式反应(quantitative Real-time PCR,RT-PCR)和免疫组织化学技术分别检测脂溢性角化病皮损和对照正常皮肤中Smurf1和2的表达情况。结果与对照正常皮肤相比,脂溢性角化病皮损中Smurf1和2表达水平上调。结论脂溢性角化病皮损中Smurf1和2的过度表达可干扰转化生长因子β(transfor-ming growth factor-β,TGF-β)信号转导通路,可能使TGF-β抑制上皮增生的作用不能有效发挥,促进了脂溢性角化病表皮的过度增生。 展开更多

关键词 脂溢性角化病 smurf1 Smuf2 转化生长因子Β 信号通路

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补肾填精中药对骨质疏松症模型大鼠股骨中Smurf1信号转导蛋白表达影响的实验研究 被引量：5

2

作者 邓洋洋 郑洪新 +2 位作者 林庶茹 蒋宁 孙鑫 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2011年第4期307-311,295,共6页

目的通过观察去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨中Smurf1的表达变化,探索骨质疏松症的发病机理。方法实验采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,同时应用补肾填精作用的纳米钙补肾填精中药低、高剂量组,对模型大鼠给药干预12周,用... 目的通过观察去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨中Smurf1的表达变化,探索骨质疏松症的发病机理。方法实验采用切除大鼠双侧卵巢的方法复制骨质疏松症模型,同时应用补肾填精作用的纳米钙补肾填精中药低、高剂量组,对模型大鼠给药干预12周,用骨疏康颗粒剂、盖天力作为阳性对照组,以及正常对照组、假手术对照组和模型空白组,并与补脾中药补中益气汤作比较;免疫组化SABC法检测股骨中的Smurf1蛋白活性表达。结果与正常组相比较,模空组Smurf1阳性表达显著下降,P<0.01;用药12周后,与模空组相比较,各用药组均可上调其表达情况,P<0.01。结论骨组织中Smurf1阳性表达降低可能是骨质疏松症发生的机制之一,补肾填精中药可能通过改善和调控股骨中Smurf1的表达,而起到防治骨质疏松症的作用。 展开更多

关键词 骨质疏松症 免疫组化法 smurf1

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SMURF1对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞增殖影响的分子机制及其对乳腺癌患者预后的影响 被引量：5

3

作者 李洪波 匡黎 《医学分子生物学杂志》 CAS 2020年第1期79-84,共6页

目的探讨SMURF1对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞增殖的影响及其分子机制,进一步探讨其表达水平与乳腺癌患者预后的相关性.方法首先采用体外实验探索SMURF1同ERα表达的关系,与此同时收集湖北医药学院附属国药东风医院2012年2月至2018年3... 目的探讨SMURF1对雌激素受体α阳性乳腺癌细胞增殖的影响及其分子机制,进一步探讨其表达水平与乳腺癌患者预后的相关性.方法首先采用体外实验探索SMURF1同ERα表达的关系,与此同时收集湖北医药学院附属国药东风医院2012年2月至2018年3月肿瘤科收治的89例乳腺癌病例的临床及病理资料进行回顾性分析.长期对患者进行随访,确定SUMRF1在乳腺癌患者中的表达与预后的相关性.结果体外研究表明敲低SMURF1将减少ERα阳性细胞在体外和体内的增殖,SMURF1敲低显著降低乳腺癌细胞中ERα靶基因的表达.远期随访无复发或转移的乳腺癌患者组织中SMURF1蛋白质、SMURF1 mR-NA水平均低于有复发的患者;无复发或转移的乳腺癌患者组织中ERα蛋白质水平显著低于有复发或转移的乳腺癌患者,两组差异有统计学意义(t=18.361,P<0.01);乳腺癌复发患者组织中SMURF1 mRNA表达水平显著高于未复发患者组织,差异具有显著统计学意义(t=13.512,P<0.001)同时相关性分析表明,SMURF1蛋白质水平的表达同ERα蛋白质水平具有正相关性(r=1.356,P<0.001).结论SUMRF1的表达有可能影响ERα的信号途径,同时与乳腺癌患者的预后有一定的相关性,SUMRF1的表达水平低者的生存期限更长.SMURF1和ERα信号在支持乳腺癌生长方面可能具有调控作用.靶向SMURF1可能是ERα阳性乳腺癌治疗的一种有前途的策略.同时SMURF1未来有可能作为预测患者预后的有效临床指标. 展开更多

关键词 smurf1 雌激素受体 乳腺癌

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CKIP-1与骨质疏松的最新研究进展 被引量：6

4

作者 胡炯 王博 +1 位作者 吴鹏 史晓林 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1053-1057,共5页

骨质疏松是严重威胁中老年人健康的骨科常见病。酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2 interaction protein 1,CKIP-1)是近年来发现的一种重要分子,它通过与其他分子的相互作用在许多细胞行为中都发挥着重要的作用。CKIP-1是参与... 骨质疏松是严重威胁中老年人健康的骨科常见病。酪蛋白激酶2相互作用蛋白1(casein kinase 2 interaction protein 1,CKIP-1)是近年来发现的一种重要分子,它通过与其他分子的相互作用在许多细胞行为中都发挥着重要的作用。CKIP-1是参与调节骨形成的最重要的蛋白因子,与骨质疏松有密切联系,并已成为药物设计的新靶点。因此,对其的深入研究将为骨质疏松、病理机制阐明及骨疾病防治带来积极影响。本文就CKIP-1与骨质疏松症的关系进行综述。 展开更多

关键词 酪蛋白激酶2相互作用蛋白1 骨质疏松 泛素连接酶

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皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中Smad 7、Smurf 1和Smurf 2的表达 被引量：1

5

作者 李颖 何威 +3 位作者 何云志 黄海 林自华 吴军 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期736-739,共4页

目的探讨Smad 7、Smurf 1和Smurf 2在基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中表达水平的变化及其意义。方法采用实时定量聚合酶链反应和免疫组化技术分别检测基底细胞癌、鳞状细胞癌及正常人对照皮肤中Smad 7、Smurf 1和Smurf 2的表达。结果Smad ... 目的探讨Smad 7、Smurf 1和Smurf 2在基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中表达水平的变化及其意义。方法采用实时定量聚合酶链反应和免疫组化技术分别检测基底细胞癌、鳞状细胞癌及正常人对照皮肤中Smad 7、Smurf 1和Smurf 2的表达。结果Smad 7、Smurf 1和Smurf 2在基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达较正常表皮显著升高。结论基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中Smad 7、Smurf 1和Smurf 2的表达增强可能干扰转化生长因子β(TGFβ)信号转导通路的多个环节,使TGFβ抑制上皮增生的作用不能有效发挥,从而有助于上述表皮肿瘤的异常增殖。 展开更多

关键词 癌 基底细胞 癌 鳞状细胞 SMAD 7 smurf 1 smurf 2 转化生长因子Β 信号转导

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去卵巢骨质疏松症模型大鼠股骨、肾、下丘脑中Smurf1信号转导蛋白的活性变化研究 被引量：6

6

作者 邓洋洋 孙鑫 +2 位作者 李佳 尚德阳 郑洪新 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期574-578,共5页

目的:观察去卵巢骨质疏松症(OP)模型大鼠股骨、肾、下丘脑中Smurf1在细胞中的定位和活性变化,探讨肾虚OP病机的分子生物学机制。方法:实验采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚OP模型,同时应用纳米钙补肾中药低、高剂量,对模型大鼠... 目的:观察去卵巢骨质疏松症(OP)模型大鼠股骨、肾、下丘脑中Smurf1在细胞中的定位和活性变化,探讨肾虚OP病机的分子生物学机制。方法:实验采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法复制肾虚OP模型,同时应用纳米钙补肾中药低、高剂量,对模型大鼠灌胃干预12周,用骨疏康颗粒剂、盖天力、补中益气汤干预模型大鼠作为阳性对照组,以及正常组、假手术对照组和模型组;免疫组化SABC法检测股骨、肾、下丘脑中的Smurf1蛋白活性表达。结果:Smurf1在股骨中的表达结果:与正常组比较,模型组表达显著下降(P<0.01);与模型组比较,各用药组可上调其表达,其中补肾中药低、高剂量组、补中益气汤组有显著差异(P<0.01)。在肾中表达的结果:与正常组比较,模型组表达显著下降(P<0.01);与模型组比较,各用药组均可上调其表达情况(P<0.01)。在下丘脑中的表达结果:与正常组比较,模型组表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各用药组均可下调其表达情况(P<0.01)。结论:肾虚OP模型大鼠股骨、肾中Smurf1的表达降低,下丘脑中表达水平升高,可能是肾虚OP发生的机制之一。纳米钙补肾中药可能通过改善和调控股骨、肾、下丘脑中Smurf1表达,而起到防治原发性OP的作用。 展开更多

关键词 骨质疏松症 补肾 smurf1 纳米钙

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去泛素化酶USP10通过稳定Smurf1抑制TGF-β/BMP信号通路

7

作者 张新 李洪昌 +1 位作者 汪思应 张令强 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第4期760-769,共10页

目的 探究生理条件下去泛素化酶USP10调控的关键信号通路及分子机制。方法 利用GEO2R和Metascape对Usp10+/+和Usp10-/-新生小鼠肾组织基因芯片(GSE198574)差异表达基因和通路富集分析,使用免疫印迹实验和免疫组化技术检验核心转录因子... 目的 探究生理条件下去泛素化酶USP10调控的关键信号通路及分子机制。方法 利用GEO2R和Metascape对Usp10+/+和Usp10-/-新生小鼠肾组织基因芯片(GSE198574)差异表达基因和通路富集分析,使用免疫印迹实验和免疫组化技术检验核心转录因子的表达情况;进一步利用免疫印迹检测该信号通路,并通过基因芯片和免疫组化分析候选分子的表达情况;使用免疫共沉淀(Co-IP)和GST-pull down实验验证USP10与候选分子的相互作用,通过泛素化实验明确USP10对底物分子的调控机制;利用免疫印迹检测细胞增殖、凋亡相关蛋白p21、Cleaved-caspase 3的表达情况,使用CCK-8和克隆形成实验分析USP10对细胞增殖的影响。结果 Usp10-/-新生小鼠肾组织中TGF-β/BMP通路激活,USP10在小鼠体内缺失后导致Smad泛素相关因子1 (Smurf1)蛋白质水平降低,Smad1/5蛋白质水平上调,却不影响它们的转录水平;机制上,USP10与Smurf1存在相互作用,并依赖其去泛素化酶活性去除Smurf1多聚泛素化。Usp10敲除后促进细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白p21表达上调,并抑制细胞的增殖能力。结论 USP10通过去泛素化并稳定Smurf1,抑制TGF-β/BMP信号通路,从而维持小鼠组织器官和细胞增殖稳态。 展开更多

关键词 USP10 smurf1 Smad1/5 去泛素化 细胞增殖

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Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用 被引量：3

8

作者 袁恒锋 何崇儒 +1 位作者 高金巍 徐卫东 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期783-785,共3页

骨形态发生蛋白(BMP)是明确具有诱导成骨作用的生长因子。其通过结合靶细胞表面受体,活化细胞内一系列Sm ad蛋白,经Sm ad蛋白介导,将信号转导至细胞核内,在一系列辅助因子的作用下,启动成骨基因的表达。细胞内源性Smurf1对这一整个过程... 骨形态发生蛋白(BMP)是明确具有诱导成骨作用的生长因子。其通过结合靶细胞表面受体,活化细胞内一系列Sm ad蛋白,经Sm ad蛋白介导,将信号转导至细胞核内,在一系列辅助因子的作用下,启动成骨基因的表达。细胞内源性Smurf1对这一整个过程起抑制作用。本文就Smurf1调节因子在骨形态发生蛋白诱导骨生成中的作用做一综述。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白质类 SMAD蛋白质类 smurf1

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miR-367-3p靶向SMURF1抑制BCG介导的巨噬细胞凋亡和自噬 被引量：3

9

作者 姬文兰 王启源 +2 位作者 虞秀锋 胡萍 王亚梅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第18期2195-2199,共5页

目的:本研究旨在探讨miR-367-3p对BCG介导的细胞凋亡和自噬途径的调控的影响及其可能的作用机制。方法:采用卡介苗菌株BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,RT-PCR检测miR-367-3p与SMURF1mRNA的表达;Westernblot检测SMURF1、凋亡相关蛋白及自... 目的:本研究旨在探讨miR-367-3p对BCG介导的细胞凋亡和自噬途径的调控的影响及其可能的作用机制。方法:采用卡介苗菌株BCG感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,RT-PCR检测miR-367-3p与SMURF1mRNA的表达;Westernblot检测SMURF1、凋亡相关蛋白及自噬相关蛋白表达水平;菌落形成单位(CFU)计数检测BCG生存率;运用ELISA技术检测巨噬细胞凋亡率;双荧光素酶报告系统、RT-PCR及Westernblot法验证miR-367-3p与SMURF1之间的靶向调控关系。结果:BCG感染诱导巨噬细胞RAW246.7中miR-367-3p高表达,并呈时间依赖性。此外,下调miR-367-3p明显降低BCG感染的巨噬细胞的存活率,并促进巨噬细胞凋亡,同时下调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达且上调促凋亡蛋白Bax的表达水平。另外,抑制miR-367-3p表达明显增加巨噬细胞中LC3-Ⅱ表达水平,同时降低p62的表达量,从而加强细胞的自噬水平。生物信息学分析显示SMURF1是miR-367-3p的靶基因。双荧光素酶报告系统、RT-PCR及Westernblot结果证实miR-367-3p可靶向作用于SMURF1-3′-UTR并负调控其表达。结论:下调miR-367-3p通过靶向调控SMURF1可促进巨噬细胞凋亡和自噬进程,进而介导了BCG的免疫逃逸从而抑制胞内BCG的生存,提示miR-367-3p有望成为结核感染的诊断标志物和治疗性疫苗的靶标,可为结核病的基因诊断和治疗提供参考。 展开更多

关键词 miR-367-3p 自噬 凋亡 smurf1

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泛素连接酶Smurf1促进Smurf2的Nedd化修饰

10

作者 刘超 李海文 +2 位作者 韦荣飞 谢萍 张令强 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期86-89,共4页

目的探讨泛素连接酶Smad泛素化相关因子2(Smad ubiquitination-related factor 2,Smurf2)Nedd化修饰的机制。方法梯度过表达Nedd8检测Smuff2的蛋白水平变化,免疫共沉淀(IP)和Western印迹分析Smurf2的Nedd化修饰,GST融合蛋白沉降技术(GST... 目的探讨泛素连接酶Smad泛素化相关因子2(Smad ubiquitination-related factor 2,Smurf2)Nedd化修饰的机制。方法梯度过表达Nedd8检测Smuff2的蛋白水平变化,免疫共沉淀(IP)和Western印迹分析Smurf2的Nedd化修饰,GST融合蛋白沉降技术(GST-pulldown)验证相互作用,分析Smurf1 C426A基因敲入(knock in)小鼠体内Smurf2在淋巴、脾、肝和肺组织的蛋白表达水平。结果 Smurf2可发生Nedd化修饰,过表达Nedd8可导致Smurf2蛋白水平下调,Smurf1和Smurf2能相互作用,且Smurf1可使Smurf2的Nedd化修饰增强。在Smurf1 C426A基因敲入小鼠的组织细胞中Smurf2蛋白水平上调。结论 Smurf1能促进Smurf2的Nedd化修饰。 展开更多

关键词 泛素蛋白连接酶类 泛素 免疫沉淀法 smurf1 smurf2 Nedd8 nedd化

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Smurf2单克隆抗体的制备与鉴定

11

作者 丁宇婷 林志妙 +1 位作者 李振 李晓彤 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期292-296,共5页

Smad泛素调节因子家族的两个E3泛素连接酶成员Smurf1和Smurf2(Smad ubiquitin regulatory factor 1and 2)具有至少80%的同源性.为了更好地研究它们的功能,需要获得一个能区分Smurf1和Smurf2的单克隆抗体.选取Smurf2与Smurf1蛋白序列中... Smad泛素调节因子家族的两个E3泛素连接酶成员Smurf1和Smurf2(Smad ubiquitin regulatory factor 1and 2)具有至少80%的同源性.为了更好地研究它们的功能,需要获得一个能区分Smurf1和Smurf2的单克隆抗体.选取Smurf2与Smurf1蛋白序列中仅有的非同源区域序列作为抗原免疫Bal b/C小鼠,成功制备若干株能稳定分泌抗Smurf2抗体的杂交瘤细胞株.对所获得的单克隆抗体的效价和特异性等进行一系列检测,结果表明该抗体能特异性地识别过表达及细胞内源Smurf2蛋白.此外该抗体能被应用于Western blot和免疫荧光实验,从而为深入研究Smurf2的细胞生物学功能提供了良好的实验基础. 展开更多

关键词 smurf1 smurf2 杂交瘤 单克隆抗体

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Smurf1通过抑制LKB1的多聚泛素化而调控其蛋白稳定性 被引量：1

12

作者 袁志 马林强 +2 位作者 程志 梁森 黄慧哲 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1485-1491,共7页

目的:为了探寻肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的上游调控分子,并研究其对LKB1的影响。方法:首先,利用UbiBrowser数据库预测LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1和LKB1相关... 目的:为了探寻肝脏激酶B1(liver kinase B1,LKB1)的上游调控分子,并研究其对LKB1的影响。方法:首先,利用UbiBrowser数据库预测LKB1可能的上游调控分子,并根据评分筛选出可能对LKB1具有调控作用的Smurf1基因。然后,构建Smurf1和LKB1相关过表达质粒,并转染HEK293T细胞,通过Western blot检测LKB1蛋白质表达的变化。最后,运用荧光定量PCR(qPCR)、免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)探索Smurf1调控LKB1可能的分子机制。结果:①成功构建LKB1和Smurf1相关过表达质粒。②在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的野生型Smurf1时其对应的LKB1蛋白相对表达量分别为0.0262±0.0007、0.0727±0.0003、0.1301±0.0013、0.4315±0.0010。经单因素方差分析,其结果为F=79636.433,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。③在HEK293T细胞中过表达0、0.5、1、2μg的突变型Smurf1时其对应的LKB1的蛋白相对表达量分别为0.0180±0.0001、0.0530±0.0004、0.1250±0.0010、0.2004±0.0017。经单因素方差分析,其结果为F=12887.993,P=0.000。与0μg对照组相比,进一步采用LSD-t法分析,0.5、1、2μg各组P值分别为0.000、0.000和0.000。④以GAPDH为内参,未过表达Smurf1组和过表达Smurf1组中,LKB1的相对mRNA表达水平分别为1.0851±0.4125、2.3982±1.7669。经独立样本t检验统计分析,P=0.257。⑤以β-actin为内参,未经Smurf1处理组、野生型Smurf1(WT)处理组、突变型Smurf1(C699A)处理组中LKB1的相对泛素化水平分别为1.8238±0.0278、0.0881±0.0051、0.2127±0.0062。经单因素方差分析,其结果为F=6721.953,P=0.000。与未经Smurf1处理组相比,进一步采用LSD-t法分析,野生型Smurf1组和突变型Smurf1组各组P值分别为0.000和0.000。结论:这些结果表明Smurf1通过降低LKB1的多聚泛素化从而参与其蛋白稳定性的调节。 展开更多

关键词 smurf1 LKB1 多聚泛素化 稳定性

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泛素连接酶Smurf1与接头蛋白TRAF1相互作用并介导其泛素化降解 被引量：1

13

作者 奚慎立 卢克峰 +1 位作者 张令强 贺福初 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第6期501-504,共4页

目的研究泛素连接酶Smurf1与接头蛋白TRAF1之间的相互作用,并检测TRAF1蛋白水平是否受Smurf1调控。方法在HEK293T细胞中共表达TRAF1与Smurf1,通过免疫共沉淀测定二者结合,并检测与Smurf1共表达时TRAF1蛋白水平变化,最后用AP-1报告基因测... 目的研究泛素连接酶Smurf1与接头蛋白TRAF1之间的相互作用,并检测TRAF1蛋白水平是否受Smurf1调控。方法在HEK293T细胞中共表达TRAF1与Smurf1,通过免疫共沉淀测定二者结合,并检测与Smurf1共表达时TRAF1蛋白水平变化,最后用AP-1报告基因测定TRAF1功能是否受Smurf1调控。结果 TRAF1可以特异性地与Smurf1相互作用,其在细胞内的蛋白水平可以被Smurf1所降低,而且TRAF1在AP-1报告基因中的抑制功能可以被Smurf1逆转。结论 TRAF1与Smurf1相互作用导致TRAF1在细胞内的蛋白水平降低而且在AP-1通路中的抑制作用减弱。 展开更多

关键词 TRAF1 smurf1 蛋白质相互作用 蛋白质降解 泛素蛋白连接酶类 免疫沉淀法 受体 肿瘤坏死因子 Ⅰ型

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miRNA-125a靶向调控SMURF1对结肠癌生物学行为的影响 被引量：1

14

作者 邢旻琰 何美文 +1 位作者 余佳泽 张超 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2019年第2期138-143,共6页

目的探讨miRNA-125a通过对靶基因SMURF1的调控在结肠癌中的影响。方法 qRT-PCR检测结肠癌患者血清中miRNA-125a和SMURF1表达水平并分析其与结肠癌相关临床指标的相关性;microRNA靶基因数据库预测miRNA-125a靶基因SMURF1并使用荧光素酶... 目的探讨miRNA-125a通过对靶基因SMURF1的调控在结肠癌中的影响。方法 qRT-PCR检测结肠癌患者血清中miRNA-125a和SMURF1表达水平并分析其与结肠癌相关临床指标的相关性;microRNA靶基因数据库预测miRNA-125a靶基因SMURF1并使用荧光素酶报告基因法验证其结合;qRTPCR和Western blot检测miRNA-125a模拟物对SMURF1mRNA及蛋白表达的影响;HE染色检测结肠癌组织中SMURF1的表达;CCK-8法、细胞划痕实验及流式细胞法检测miRNA-125a模拟物和SMURF1对SW480细胞增殖、迁移及周期的影响;构建结肠癌肿瘤异种移植小鼠模型,采用称重及PCNA染色检测miRNA-125a模拟物对小鼠体内肿瘤生长的影响。结果结肠癌患者血清中miRNA-125a表达水平与结肠癌相关临床指标呈负相关性,SMURF1表达水平与结肠癌相关临床指标呈正相关性。结肠癌组织中miRNA-125a的表达水平显著降低,miRNA-125a模拟物可抑制SMURF1的mRNA翻译及蛋白水平。结肠癌肿瘤组织中SMURF1表达水平明显升高,miRNA-125a模拟物可以抑制SW480细胞的增殖、迁移和S期细胞周期的聚集,然而这种抑制效果会因SMURF1表达升高而减弱。miRNA-125a模拟物抑制小鼠体内结肠癌生长及SMURF1的表达。结论 miRNA-125a通过下调SMURF1的表达在结肠癌的发展过程中发挥抑制作用,具有成为结肠癌诊断及治疗靶点的潜力。 展开更多

关键词 结肠癌 miRNA-125a smurf1

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育亨宾对肾移植中肾间质纤维化的抑制作用及其机制

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作者 张瑞琴 吴东娟 +3 位作者 韩士超 李转 陈利娟 贺海玲 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第7期863-870,共8页

目的探索育亨宾对肾移植大鼠肾间质纤维化的抑制作用及其机制。方法在F344大鼠(供体)和Lewis大鼠(受体)之间进行原位左肾移植。对照组大鼠行右肾切除,其他组大鼠为肾移植大鼠。肾移植后,将48只Lewis大鼠随机分为4组:对照组、肾移植组、0... 目的探索育亨宾对肾移植大鼠肾间质纤维化的抑制作用及其机制。方法在F344大鼠(供体)和Lewis大鼠(受体)之间进行原位左肾移植。对照组大鼠行右肾切除,其他组大鼠为肾移植大鼠。肾移植后,将48只Lewis大鼠随机分为4组:对照组、肾移植组、0.1 mg/kg育亨宾治疗组(低剂量组)和0.5 mg/kg育亨宾治疗组(高剂量组)。从肾移植后的第1天起,育亨宾治疗组每周2次大鼠腹腔分别注射0.1 mg/kg和0.5 mg/kg的育亨宾(2 ml),对照组和肾移植组大鼠腹腔注射2 ml的0.9%生理盐水,共治疗16周。通过苏木精-伊红(HE)染色和Masson三色染色检测肾形态和纤维化。通过肌氨酸氧化酶法检测大鼠血清肌酐(Scr),通过二乙酰肟比色法检测血尿素氮(BUN),通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)。通过免疫组化和Western blotting检测肾组织中α-SMA、E-cadherin、Smurf1、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、P70S6K和p-P70S6K的表达。结果肾移植组大鼠肾小管扩张、上皮萎缩、间质炎性细胞浸润、间质间隙明显扩张,胶原沉积明显。低剂量组和高剂量组大鼠的肾组织形态较肾移植组明显改善。与肾移植组比较,低剂量组和高剂量组大鼠肾组织纤维化面积明显减小(P<0.05),血清TNF-α和TGF-β1水平明显降低(P<0.05),Scr和BUN水平明显降低(P<0.05)。与肾移植组比较,低剂量组和高剂量组大鼠α-SMA和Smurf1的蛋白表达水平降低(P<0.05),p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR和p-P70S6K/P70S6K水平降低(P<0.05),而E-cadherin的蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论育亨宾可改善肾移植大鼠的肾形态和功能,并减轻肾纤维化,育亨宾对移植肾的保护作用可能通过Smurf1和Akt-mTOR-P70S6K信号通路来介导。 展开更多

关键词 育亨宾 肾移植 肾间质纤维化 smurf1 Akt-mTOR-P70S6K信号通路

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SMURF1、RUNX3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 郭小卫 权明明 +2 位作者 张卓妮 张伟峰 戴岳楚 《浙江医学》 CAS 2015年第18期1522-1525,共4页

目的探讨SMURF1、RUNX3蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化SP法检测60例PTC组织及20例正常甲状腺组织中SMURF1、RUNX3蛋白的表达,分析两者在PTC与正常甲状腺组织中的表达差异及其与PT... 目的探讨SMURF1、RUNX3蛋白在甲状腺乳头状癌(PTC)中的表达及其与患者临床病理特征的相关性。方法采用免疫组化SP法检测60例PTC组织及20例正常甲状腺组织中SMURF1、RUNX3蛋白的表达,分析两者在PTC与正常甲状腺组织中的表达差异及其与PTC患者临床病理特征的相关性。结果 PTC组织中SMURF1蛋白阳性表达率高于正常甲状腺组织,而RUNX3阳性表达率低于正常甲状腺组织(均P<0.01);SMURF1、RUNX3蛋白的表达与PTC患者的TNM分期、病理分级及淋巴结转移均相关(均P<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤大小等因素均无关(均P>0.05)。PTC组织中SMURE1的蛋白表达与RUNX3蛋白表达呈负相关(r=-0.564,P<0.05)。结论 SMURF1、RUNX3蛋白在PTC组织中表达异常,并呈负相关,提示两者可能相互作用,共同促进PTC发生、发展,两者可作为PTC分类和分期的辅助指标。 展开更多

关键词 甲状腺乳头状癌 smurf1 RUNX3

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补肾活血方对骨质疏松症大鼠Smurf1信号转导蛋白的影响 被引量：2

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作者 石树培 陈鹏 +5 位作者 林海仙 刘蔚楠 朱玮 韩海 郑春盛 杨直 《福建中医药》 2019年第3期38-40,共3页

目的通过观察摘除卵巢所致骨质疏松症模型中肾脏组织的Smurf1蛋白表达量的变化,研究补肾活血方治疗骨质疏松症的作用机制。方法采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法制备骨质疏松症的模型,应用补肾活血方干预模型大鼠,以戊酸雌二醇作为阳性... 目的通过观察摘除卵巢所致骨质疏松症模型中肾脏组织的Smurf1蛋白表达量的变化,研究补肾活血方治疗骨质疏松症的作用机制。方法采用切除雌性大鼠双侧卵巢的方法制备骨质疏松症的模型,应用补肾活血方干预模型大鼠,以戊酸雌二醇作为阳性对照组,以正常大鼠及假手术组作为标准的对照组,观察各组大鼠肾脏组织中的Smurf1 mRNA和蛋白表达变化。结果空白模型组中Smurf1 mRNA及蛋白的表达较空白组和假手术组显著降低(P<0.01);治疗12周后,各用药组Smurf1 mRNA及蛋白表达均较空白模型组显著上调(P<0.01)。结论补肾活血方可能通过调控雌性大鼠中Smurf1 mRNA及蛋白的表达,对骨质疏松症起到防治的作用。 展开更多

关键词 骨质疏松症 补肾活血 smurf1

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人Smurf1基因真核表达质粒的构建和表达

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作者 李莎莎 贺虹 +3 位作者 崔冠一 欧丽娜 邓博 王梅林 《生物技术》 CAS 2019年第3期205-209,共5页

[目的]构建人Smurf1基因的真核表达载体并检测其表达和细胞亚定位。[方法]PCR法从人胚肾细胞HEK-293T中扩增Smurf1基因的ORF序列,将其插入到带Flag标签的p CMV5真核表达载体,插入位点为限制性内切酶SalⅠ和XbaⅠ之间。酶切并测序鉴定该... [目的]构建人Smurf1基因的真核表达载体并检测其表达和细胞亚定位。[方法]PCR法从人胚肾细胞HEK-293T中扩增Smurf1基因的ORF序列,将其插入到带Flag标签的p CMV5真核表达载体,插入位点为限制性内切酶SalⅠ和XbaⅠ之间。酶切并测序鉴定该质粒的正确性。将成功构建的质粒Flag-Smurf1转染HEK-293T细胞和Hela细胞,Western Blotting检测Smurf1蛋白的表达情况;转染Mv. 1. Lu细胞,免疫荧光检测Smurf1蛋白在细胞中的亚定位。[结果]成功扩增出Smurf1基因的ORF序列;连入p CMV5中获得了质粒Flag-Smurf1;酶切鉴定得到2. 2 kb大小的片段,测序结果显示连入的是Smurf1基因的c DNA序列正确。Western Blotting结果显示该质粒可在HEK-293T细胞和Hela细胞中表达,表达大小约为80 k Da,符合预期。免疫荧光实验结果显示过表达的Smurf1主要定位在细胞膜上。[结论]成功构建了带Flag标签的人Smurf1基因的真核表达质粒,该质粒可在细胞中顺利表达。 展开更多

关键词 smurf1 分子克隆 转染 免疫荧光

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HECT类泛素连接酶Smurf1自身调控机制的研究

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作者 沈珊 郭兴 +2 位作者 卢克峰 张令强 范礼斌 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期91-94,103,共5页

目的泛素连接酶Smurf1在胚胎发育、骨形成调控和细胞极性控制中具有重要的生理功能,但是其自身的泛素化降解机制尚不清楚。本论文拟研究Smurf1分子间自我调控的机制,以期揭示一种新的泛素连接酶调控方式。方法通过免疫共沉淀实验确证了S... 目的泛素连接酶Smurf1在胚胎发育、骨形成调控和细胞极性控制中具有重要的生理功能,但是其自身的泛素化降解机制尚不清楚。本论文拟研究Smurf1分子间自我调控的机制,以期揭示一种新的泛素连接酶调控方式。方法通过免疫共沉淀实验确证了Smurf1分子间存在相互作用,体内泛素化、半衰期及降解实验研究了Smurf1的自身泛素化降解。结果 Smurf1存在分子间相互作用和泛素化降解,这种分子间的相互调控是由C2和WW结构域介导。结论 Smurf1分子间存在自我泛素化修饰及蛋白酶体依赖的降解,是一种新的HECT类泛素连接酶的调控机制。 展开更多

关键词 泛素化 泛素蛋白连接酶类 HECT smurf1 活性调控 分子间相互作用 转染

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泛素连接酶Smurf1促进PDK1的多聚泛素化修饰

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作者 魏军 时慧森 +2 位作者 党智笙 张令强 张学利 《军事医学》 CSCD 北大核心 2017年第12期947-951,共5页

目的探讨3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)发生多聚泛素化修饰的机制。方法免疫共沉淀(COIP)和免疫印迹(WB)分析PDK1的多聚泛素化修饰,MEF细胞内印证泛素连接酶Smad泛素化修饰调节因子1(Smurf1)增强PDK1多聚泛素化修饰,定点突变和CO-IP... 目的探讨3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)发生多聚泛素化修饰的机制。方法免疫共沉淀(COIP)和免疫印迹(WB)分析PDK1的多聚泛素化修饰,MEF细胞内印证泛素连接酶Smad泛素化修饰调节因子1(Smurf1)增强PDK1多聚泛素化修饰,定点突变和CO-IP及WB确定PDK1多聚泛素化修饰位点。结果 PDK1可发生多聚泛素化修饰,泛素连接酶Smurf1增强PDK1多聚泛素化修饰,且依赖HECT类泛素连接酶Smurf1 K699位点活性;K304是PDK1多聚泛素化修饰位点。结论泛素连接酶Smurf1增强PDK1的多聚泛素化修饰。 展开更多

关键词 泛素连接酶 泛素化修饰 免疫共沉淀 免疫印迹法 smurf1 PDK1 PDPK1 细胞增殖 质粒 突变

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