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缺口酶Cas9 D10A和Cas9 H840A在大肠杆菌基因组编辑中的应用
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作者 韦佳妤 吴方 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1677-1691,共15页
目前Ⅱ型CRISPR/Cas9工具被广泛应用于基因组编辑中,利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术对大肠杆菌(Escherichia coli)基因组进行编辑,可应用于代谢工程及细菌耐药性等研究领域中。利用单缺口核酸酶Cas9 nickase(Cas9n)工具对宿主细胞基因... 目前Ⅱ型CRISPR/Cas9工具被广泛应用于基因组编辑中,利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术对大肠杆菌(Escherichia coli)基因组进行编辑,可应用于代谢工程及细菌耐药性等研究领域中。利用单缺口核酸酶Cas9 nickase(Cas9n)工具对宿主细胞基因进行修饰,可降低由于双链断裂对宿主带来的毒性。但目前利用CRISPR/Cas9n对大肠杆菌基因组编辑的研究较少,不利于缺口酶Cas9 D10A和Cas9 H840A在大肠杆菌基因组编辑的应用。本研究在前人报道的细菌双质粒Cas9基因编辑系统(pCas/pTarget)基础上,通过分子突变的方法构建缺口酶Cas9突变体质粒pCas-D10A和pCas-H840A,以及携带修复模板或无修复模板的靶向大肠杆菌sseA基因的质粒pTargetT-△sseA(993 bp)和pTargetT-△sseA,系统研究了两种缺口酶编辑大肠杆菌内源性基因sseA的有效性和效率。在稳定表达pCas质粒的MG1655菌株中转入携带修复模板的pTargetT-△sseA(993 bp)质粒,通过菌落PCR及DNA测序方法验证基因编辑的有效性和效率,同时用醋酸铅试纸生化方法对敲除sseA基因的菌株进行功能验证。同时,将不含修复模板的pTargetT-△sseA质粒转入含有pCas的MG1655菌株中,通过平板菌落计数检测编辑效率。实验结果表明,在有修复模板和无修复模板两种系统中,Cas9 D10A和Cas9 H840A均可以编辑大肠杆菌内源性基因sseA,两者编辑效率基本一致,但都低于Cas9-WT的编辑效率。相对于野生型Cas9、Cas9 D10A或Cas9 H840A编辑大肠杆菌基因组时具有更小的细菌毒性。本研究为后续发展大肠杆菌的基因组编辑技术提供了一定的研究基础和新的研究思路。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9n 大肠杆菌 基因编辑 ssea 缺口酶
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基于知识库的基因组数据整合分析
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作者 杨文涛 石建涛 +3 位作者 陈明杰 徐海峰 王侃侃 张济 《生物信息学》 2011年第4期318-321,共4页
数据整合逐渐成为生物数据分析的重要方向。随着高通量技术的广泛应用,基因组序列数据大量产生,而如何充分、高效地整合这些序列数据成为了一个难题。本文从序列角度出发设计了一套新的数据整合方法:序列群富集分析(SequenceSet Enrichm... 数据整合逐渐成为生物数据分析的重要方向。随着高通量技术的广泛应用,基因组序列数据大量产生,而如何充分、高效地整合这些序列数据成为了一个难题。本文从序列角度出发设计了一套新的数据整合方法:序列群富集分析(SequenceSet Enrichment Analysis,SSEA),并用实验数据探讨了其潜在的应用价值,结果显示SSEA能更好的挖掘出序列数据中的复杂生物学信息。 展开更多
关键词 数据整合 生物序列 生物信息学 ssea
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Human adult stem cells from menstrual blood and endometrial tissue 被引量:2
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作者 Julie ALLICKSON Charlie XIANG 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期419-420,共2页
The article "Plasticity of human menstrual blood stem cells derived from the endometrium" by Lin et al (2011), published in Journal of Zhejiang University- SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), described a n... The article "Plasticity of human menstrual blood stem cells derived from the endometrium" by Lin et al (2011), published in Journal of Zhejiang University- SCIENCE B (Biomedicine & Biotechnology), described a newly identified mesenchymal-like stem cell (MSC) from human menstrual blood known as MenSC. Here we describe the latest findings in this area and clarify the difference between human adult stem cells from menstrual blood and endometrial tissue. 展开更多
关键词 CLC number R329.2
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Efficient Derivation of Human Induced Pluripotent Stem Cells with a c-Myc-Free Non-Integrating Episomal Vector
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作者 Juan Wang Qi Gu +4 位作者 Jie Hao Donghui Bai Liu Wang Zhonghua Liu Qi Zhou 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2016年第3期161-164,共4页
Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) can self-renew indefinitely and have the potential to differentiate into all cell types in the human body, thus hold great promise in regen- erative medicine, drug scree... Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) can self-renew indefinitely and have the potential to differentiate into all cell types in the human body, thus hold great promise in regen- erative medicine, drug screening and developmental biology studies. However, integrating retroviral (Takahashi et al., 2007) or lentiviral (Hockemeyer et al., 2008) gene delivery systems and the exogenous oncogene c-Myc (Takahashi et al., 2007; Hockemeyer et al., 2008) have been typically used in the reprogramming process, which could increase risks of insertional mutations or epigenetic abnormalities and conse- quently pose biosecurity concerns for basic research and clinical applications of hiPSCs. 展开更多
关键词 PSCs CELL In ssea SOX
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《扬州大学学报(农业与生命科学版)》第28卷2007年总目次
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《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期106-110,共5页
关键词 PING 水稻生产 ssea 大学学报 gene 氮素形态 观光农业园区 禽流感病毒 流感病毒群 AIRS 灭活疫苗 目次 李世平 DNA 农业 生命 扬州 江苏
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电针对脊髓损伤大鼠星形胶质细胞的影响及机制 被引量:20
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作者 何娟 王忠华 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期253-257,共5页
目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型... 目的观察电针治疗脊髓损伤大鼠的行为功能及脊髓损伤部位胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和阶段性特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达,阐明电针对脊髓损伤后反应性星形胶质细胞增生及分化的影响及其机制。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针治疗组,每组20只。分别于脊髓损伤造模后第3、7、14、28天时进行BBB评分(Basso-Beaie-Bresnehan scale),并用免疫组化方法检测大鼠脊髓损伤部位GFAP和SSEA-1变化并与对照组比较。结果电针组与模型组在3d和7d时,GFAP和SSEA-1阳性细胞数有差异(P<0.01),7d时阳性细胞数达到峰值,在14d时电针组和模型组的阳性细胞数有差异(P<0.05),而在28d时,电针组和模型组GFAP阳性细胞无明显差异(P>0.05),但SSEA-1阳性细胞有统计学差异(P<0.05)。结论电针治疗能够增加脊髓损伤模型大鼠星形胶质细胞逆分化,激发星形胶质细胞的干细胞潜能,从而促进损伤后脊髓功能的恢复;损伤后的脊髓GFAP和SSEA-1阳性表达的高峰期都在7d,提示脊髓损伤后7d内可能为电针治疗介入的黄金期。 展开更多
关键词 大鼠 脊髓损伤 星形胶质细胞 阶段性特异性胚胎抗原-1(ssea-1) 胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 电针
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巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1在大鼠2型星形胶质细胞中的表达 被引量:12
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作者 李春鹏 张晔 +3 位作者 夏春林 沈慧 张静 陆志方 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期153-157,共5页
目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA... 目的观察1型和2型星形胶质细胞(T1A、T2A)是否表达神经干细胞的标志物、是否具有神经干细胞的特性。方法取新生大鼠脑皮质,体外培养纯化的O-2A祖细胞、T1A和T2A,应用激光共焦双重免疫荧光标记技术检测巢蛋白和阶段特异性胚胎抗原-1(SSEA-1)的表达;观察O-2A祖细胞、T1A和T2A在碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)的培养液中生长方式的改变。结果巢蛋白在O-2A祖细胞和T2A中表达,T1A不表达;SSEA-1仅在T2A中表达。在干细胞培养基中培养10d,T2A形成能增殖和连续传代的细胞球,细胞球巢蛋白标记阳性,贴壁后分化细胞具有神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞样形态;但相同培养条件下的O-2A祖细胞和T1A生长方式无改变。结论巢蛋白和SSEA-1在两型星形胶质细胞中的表达存在差异,T2A具有神经干细胞的某些生物学特性。 展开更多
关键词 胶质细胞谱系 O—2A祖细胞 巢蛋白 阶段特异性胚胎抗原-1 免疫细胞化学 大鼠
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胎儿骨髓间充质干细胞中SSEA-4阳性表达细胞的分离和检测 被引量:5
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作者 刘大庆 杨印祥 +7 位作者 高艳红 袁红丰 秦立蓬 王韫芳 南雪 施双双 岳文 裴雪涛 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1276-1280,共5页
为了验证成体干细胞中全能性干细胞存在的可能性,以SSEA-4抗原为筛选标志,利用免疫磁珠筛选技术从胎儿来源的骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,fMSCs)中筛选并培养得到SSEA-4表达阳性的fMSC-SSEA-4细胞,从形态学、生长曲... 为了验证成体干细胞中全能性干细胞存在的可能性,以SSEA-4抗原为筛选标志,利用免疫磁珠筛选技术从胎儿来源的骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,fMSCs)中筛选并培养得到SSEA-4表达阳性的fMSC-SSEA-4细胞,从形态学、生长曲线、表面标志及细胞周期、核型分析等方面检测其生物学性状,并通过Oct-4及SSEA-4抗体的表达及致瘤性等方面分析其全能性状.同时观察了fMSC-SSEA-4细胞的诱导分化能力.结果发现,fMSC-SSEA-4细胞的形态学表现、细胞周期和生长曲线检测与fMSCs无明显差异;fMSC-SSEA-4细胞Oct-4和SSEA-4抗体表达阳性,并且表现为正常的二倍体核型,无明显的致瘤性状.在不同的诱导条件下,fMSC-SSEA-4细胞可向成骨细胞、脂肪细胞和神经元样细胞分化.实验结果提示,fMSCs中存在有全能干细胞性状的一群细胞,从而为进一步深入研究和更好地应用fMSCs提供了理论依据. 展开更多
关键词 胎儿骨髓间充质干细胞 ssea-4抗原 免疫磁珠筛选 全能性 生物学性状
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基于CHELSA的1980—2018年南亚—东南亚气候变化特征与趋势分析 被引量:3
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作者 金相皓 李鹏 +1 位作者 李霞 张国壮 《地理科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第7期1365-1379,共15页
全球变暖背景下增温导致区域气候要素变化组合与气候风险类型复杂多样。南亚—东南亚因其热带季风气候特征而受到更多关注。探索南亚—东南亚温度和降水量变化规律,对评估其对区域人类活动(如活跃火发生发展)的影响意义重大。论文基于1... 全球变暖背景下增温导致区域气候要素变化组合与气候风险类型复杂多样。南亚—东南亚因其热带季风气候特征而受到更多关注。探索南亚—东南亚温度和降水量变化规律,对评估其对区域人类活动(如活跃火发生发展)的影响意义重大。论文基于1980—2018年全球气候要素数据集CHELSA V2.1(30″×30″),采用线性拟合、Mann-Kendall检验等数理统计方法,从整体变化趋势、区域差异特性等方面揭示了南亚—东南亚温度和降水量的时空特征与演变趋势。主要结论有:①近40年南亚—东南亚降水量呈显著增加趋势,降水量变化趋势于2005年发生突变。②南亚—东南亚降水量变化呈增加趋势区占近2/3。南亚与东南亚雨季降水量变化显著性相近,但东南亚旱季降水量变化的显著性较南亚更突出。③近40年南亚—东南亚温度呈显著上升趋势,月际升温较均衡。④南亚—东南亚温度变化呈上升趋势区占到99.13%。东南亚雨季温度变化较南亚更显著;南亚旱季温度上升显著性大于雨季,而东南亚则相反。⑤南亚—东南亚近40年气候变化表现出暖湿化发展特征,且东南亚温度与降水量变化的显著性与幅度均要高于南亚。 展开更多
关键词 暖湿化 气候变化 温度—降水 趋势分析 南亚—东南亚
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Endometrial stem/progenitor cells: Properties, origins, and functions 被引量:2
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作者 In-Sun Hong 《Genes & Diseases》 SCIE CSCD 2023年第3期931-947,共17页
The endometrium is the inner mucosal lining of the uterus that undergoes extensive cyclic growth, regeneration, differentiation, and shedding throughout the menstrual cycle in response to steroid hormones. It repeated... The endometrium is the inner mucosal lining of the uterus that undergoes extensive cyclic growth, regeneration, differentiation, and shedding throughout the menstrual cycle in response to steroid hormones. It repeatedly undergoes approximately 450 cycles of degeneration and regeneration in a woman's lifetime. Endometrial abnormalities can be associated with repeated embryo implantation failure, recurrent spontaneous abortion, and other physiological features responsible for female infertility. This significant regenerative capacity may occur as a result of tissue-resident stem cell populations within the endometrium. Indeed, the existence of endometrial stem cells was only observed in humans and rodents through several isolation and characterization methods in the last few years. Although endometrial stem cells share various biological characteristics with other types of mesenchymal stem cells, they also show some differences in phenotype, self-renewal, and multilineage differentiation potential. Extensive studies over many years on endometrial stem cells will provide new insights into the physiology and mechanisms underlying various gynaecological diseases related to endometrial abnormalities such as female infertility, endometriosis, and endometrial cancer. Here we summarized recent studies about cellular origins and biological characteristics of endometrial stem cells. We also reviewed various recent studies to improve our understanding of their physiological roles. Many preclinical studies on their potential therapeutic applications to various endometrial diseases that could lead to reproductive dysfunction were also reviewed. 展开更多
关键词 CD146 LGR5 0CT-4 Side population S0X9 ssea-1 SUSD2 WNT/Β-CATENIN
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人脐带与人脂肪间充质干细胞中应激耐受多系分化细胞的分离鉴定及分化能力比较 被引量:2
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作者 张坤 李芳 +3 位作者 肖东杰 汪运山 黄国宝 刘华 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2022年第24期3802-3807,共6页
背景:多系分化应激耐受(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse)细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能、可向3个胚层分化的细胞,并且具有非致瘤性和低端粒酶活性,是组织工程、细胞移植及基因治疗领域的理想种子细胞,为临... 背景:多系分化应激耐受(multilineage-differentiating stress-enduring,Muse)细胞是一种具有自我更新和多向分化潜能、可向3个胚层分化的细胞,并且具有非致瘤性和低端粒酶活性,是组织工程、细胞移植及基因治疗领域的理想种子细胞,为临床上多种疾病的治疗提供了广阔的前景。目的:探讨脐带间充质干细胞与脂肪间充质干细胞分选获得的Muse细胞的生物学特性,为临床研究获得足量的Muse细胞提供实验数据。方法:胰酶长时间消化处理脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞,锥虫蓝染色及流式细胞仪检测比较不同消化时间下两种细胞的存活率与SSEA-3表达阳性率;通过悬浮贴壁法获取Muse细胞,碱性磷酸酯酶染色检测获取Muse细胞的多能干性,Muse细胞在不同诱导分化液作用下进行多系分化,油红O、茜素红、Von Kossa染色检测比较成脂、成骨诱导分化能力,RT-PCR检测多能干细胞标志基因Oct-3/4,Nanog,SSEA-3的表达及Muse细胞诱导分化后双皮质素、神经元特异性烯醇化酶、脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、甲胎蛋白的表达变化。结果与结论:①随着胰酶消化时间的延长,脐带间充质干细胞、脂肪间充质干细胞存活率下降,SSEA-3阳性率上升;②悬浮贴壁获得的Muse细胞碱性磷酸酯酶染色呈阳性反应,间充质干细胞碱性磷酸酯酶染色阴性;③Muse细胞SSEA-3、Nanog、Oct-3/4基因表达水平明显高于间充质干细胞,与脐带来源Muse细胞相比,脂肪来源Muse细胞Nanog、Oct-3/4基因表达增加;油红O、茜素红、Von Kossa染色结果显示Muse细胞成脂、成骨能力高于间充质干细胞;④间充质干细胞及Muse细胞在成脂、成骨诱导培养液、神经元细胞诱导液、肝细胞诱导液作用下分化效率不一样,但均高表达脂蛋白脂肪酶、骨桥蛋白、神经元特异性烯醇化酶、双皮质素及甲胎蛋白,Muse细胞相关基因表达高于间充质干细胞;⑤实验结果证 展开更多
关键词 间充质干细胞 脐带 脂肪 多系分化应激耐受细胞 ssea-3
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SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达 被引量:2
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作者 李芳 陈永珍 +2 位作者 陈谦 朱旻 张苏 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期21-24,共4页
分离5~9周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,采用组织块法进行体外培养,免疫细胞化学染色法检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达,以证实利用组织块体外培养所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。结果表明:组织块体... 分离5~9周人胚胎生殖腺嵴和背侧肠系膜,采用组织块法进行体外培养,免疫细胞化学染色法检测SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT在人胚胎生殖细胞中的表达,以证实利用组织块体外培养所获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。结果表明:组织块体外培养得到的细胞或细胞集落均阳性表达SSEA-1、SSEA-3、Oct-4及hTERT,说明组织块体外培养获得的细胞为未分化的人胚胎生殖细胞。 展开更多
关键词 人胚胎生殖细胞 ssea-1 ssea-3 OCT-4 HTERT 表达
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Targeting lentiviral vectors to primordial germ cells(PGCs):An efficient strategy for generating transgenic chickens 被引量:5
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作者 Zi-Qin Jiang Han-Yu Wu +2 位作者 Jing Tian Ning Li Xiao-Xiang Hu 《Zoological Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第3期281-291,共11页
Recent advances in avian transgenic studies highlight the possibility of utilizing lentiviral vectors as tools to generate transgenic chickens. However, low rates of gonadal chimerism and germ line transmission effici... Recent advances in avian transgenic studies highlight the possibility of utilizing lentiviral vectors as tools to generate transgenic chickens. However, low rates of gonadal chimerism and germ line transmission efficiency still limit the broad usage of this method in creating transgenic chickens. In this study, we implemented a simple strategy using modified lentiviral vectors targeted to chicken primordial germ cells(PGCs) to generate transgenic chickens. The lentiviral vectors were pseudotyped with a modified Sindbis virus envelope protein(termed M168) and conjugated with an antibody specific to PGC membrane proteins. We demonstrated that these optimized M168-pseudotyped lentiviral vectors conjugated with SSEA4 antibodies successfully targeted transduction of PGCs in vitro and in vivo. Compared with the control, 50.0%–66.7% of chicken embryos expressed green fluorescent protein(GFP) in gonads transduced by the M168-pseudotyped lentivirus. This improved the targeted transduction efficiency by 30.0%–46.7%. Efficient chimerism of exogenous genes was also observed. This targeting technology could improve the efficiency of germ line transmission and provide greater opportunities for transgenic poultry studies. 展开更多
关键词 M168-pseudotyped lentiviral vectors Primordial germ cells Targeted transduction Transgenic chickens ssea4
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胶质瘤干细胞标记物的研究进展 被引量:3
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作者 陈石蕊 杨柳 +3 位作者 倪晓琛 王钟 汤臻 李燕 《现代生物医学进展》 CAS 2018年第15期2992-2996,共5页
胶质瘤作为一种恶性脑肿瘤,具有预后差、易复发、对放化疗有抵抗性等特点。为了提高对胶质瘤的分级及预后评价的准确性,获得有效的、有针对性的胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)标记物具有十分重要的意义。本文主要对CD133、SSEA-1、... 胶质瘤作为一种恶性脑肿瘤,具有预后差、易复发、对放化疗有抵抗性等特点。为了提高对胶质瘤的分级及预后评价的准确性,获得有效的、有针对性的胶质瘤干细胞(glioma stem cell,GSC)标记物具有十分重要的意义。本文主要对CD133、SSEA-1、Nestin等干细胞标记物在胶质瘤临床诊治中的应用特征与相互联系进行了综述。CD133作为一种最早发现的胶质瘤干细胞标志物应用广泛,但其分布无特异性、表达不稳定限制了其预后评价的精确性,其有效性目前仍存在争议。SSEA-1(CD15)与Nestin等分子弥补了CD133的部分不足。这三种标记物的联合应用为胶质瘤的临床诊断和治疗提供了重要的参考依据。后续研究陆续发现的A2B5、BMI1、LGR5等标记物有助于进一步了解GSC的性质,提高胶质瘤的诊治水平和预后评价的准确度。 展开更多
关键词 胶质瘤干细胞(GSC) CD133 ssea-1(CD15) NESTIN
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领海安全视域下我国海疆历史档案音像化开发研究 被引量:1
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作者 华林 白沂鑫 彭媛媛 《档案管理》 北大核心 2023年第5期88-90,95,共4页
我国现存有丰富的海疆历史档案,从维护国家领海安全的政治高度,对档案进行音像化开发,有助于利用其可视化、形象性优势,开展海洋意识教育,维护领海安全。论文基于海疆历史档案开发背景、现状,提出海疆历史档案音像化开发问题;在阐述档... 我国现存有丰富的海疆历史档案,从维护国家领海安全的政治高度,对档案进行音像化开发,有助于利用其可视化、形象性优势,开展海洋意识教育,维护领海安全。论文基于海疆历史档案开发背景、现状,提出海疆历史档案音像化开发问题;在阐述档案内涵外延,音像化开发含义、优势的基础上,提出海疆历史档案音像化开发对策。依托证据链理论,从构建营运机制、策划开发选题、征集组合档案、制作音像产品等维度对海疆历史档案进行音像化开发,可形成可视化档案证据产品,从文化宣示主权的高度,维护国家领海完整与安全。 展开更多
关键词 领海安全 海疆 历史档案 档案证据 证据链 音像化开发
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人脑胶质瘤中CD133、SSEA-1、Nestin的表达和意义 被引量:1
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作者 李世泽 黄纬 +3 位作者 杨雷霆 余永佳 黄光翔 黄朝觉 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2014年第7期327-330,共4页
目的研究胶质瘤干细胞标志物CD133、SSEA-1和Nestin在胶质瘤组织中表达及其与病理分级的相关性;探讨三者在人脑胶质瘤的诊断及恶性程度判断中的临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例脑胶质瘤组织和6例正常脑组织标本中CD133、SSE... 目的研究胶质瘤干细胞标志物CD133、SSEA-1和Nestin在胶质瘤组织中表达及其与病理分级的相关性;探讨三者在人脑胶质瘤的诊断及恶性程度判断中的临床意义。方法应用免疫组织化学方法检测54例脑胶质瘤组织和6例正常脑组织标本中CD133、SSEA-1及Nestin的表达。结果 CD133、SSEA-1和Nestin在胶质瘤组织中的阳性细胞平均表达率分别为25.38%、26.62%和22.39%,而在正常脑组织中均无表达。CD133、SSEA-1和Nestin阳性细胞率在胶质瘤各病理级别间比较,差异均有统计学意义,且三者的表达与胶质瘤病理级别呈正相关(P<0.05)。SSEA-1与CD133、CD133与Nestin及SSEA-1与Nestin阳性细胞表达均呈正相关(P<0.05)。结论检测CD133、SSEA-1、Nestin表达,有利于胶质瘤的诊断及恶性程度判断,并在胶质瘤的个性化综合治疗和预后评估发挥作用。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 CD133 ssea-1 NESTIN 免疫组织化学
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经典饲养层细胞Wnt表达的差异及其对人胚胎干细胞Wnt/β-Catenin信号通路的影响 被引量:1
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作者 邓磊玉 林戈 卢光琇 《激光生物学报》 CAS 2016年第5期423-430,共8页
目的:研究比较三种经典饲养层体系使用的成纤维细胞中Wnt基因的表达,及其对共培养的人胚胎干细胞的影响。方法:PCR验证19种Wnt基因在三种不同来源饲养层细胞中的表达情况,q PCR验证各组共培养人胚胎干细胞的Wnt/β-Catenin信号通路相关... 目的:研究比较三种经典饲养层体系使用的成纤维细胞中Wnt基因的表达,及其对共培养的人胚胎干细胞的影响。方法:PCR验证19种Wnt基因在三种不同来源饲养层细胞中的表达情况,q PCR验证各组共培养人胚胎干细胞的Wnt/β-Catenin信号通路相关基因表达水平,流式检测其在不同密度饲养层条件下的增殖分化情况。结果:在全部19种Wnt基因(Wnt1,Wnt2,Wnt2b,Wnt3,Wnt3a,Wnt4,Wnt5a,Wnt5b,Wnt6,Wnt7a,Wnt7b,Wnt8a,Wnt8b,Wnt9a,Wnt9b,Wnt10a,Wnt10b,Wnt11,Wnt16)的表达检测中,昆明白小鼠来源饲养层细胞表达其中的16种,ICR小鼠来源饲养层细胞表达其中的10种,人成纤维细胞来源饲养层细胞表达其中的10种;增加饲养层细胞密度能够不同程度活化Wnt/β-Catenin信号通路下游基因的表达,并激活人胚胎干细胞中的负反馈机制;高密度小鼠饲养层条件促进人胚胎干细胞的分化,高密度人饲养层条件促进人胚胎干细胞的增殖和分化。结论:不同经典饲养层体系提供的Wnt环境不同,其培养的人胚胎干细胞状态也有差异。 展开更多
关键词 人胚胎干细胞 饲养层细胞 WNT/Β-CATENIN KI67 ssea4
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免疫磁珠分选降低分化体系中胚胎干细胞的比例 被引量:1
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作者 朱宛宛 杜庆安 +3 位作者 王淑艳 徐艳玲 关云谦 张愚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期63-68,共6页
研究目的:采用免疫磁珠分选系统(magnetic activated cell sorting,MACS)分离去除小鼠胚胎干细胞(murine embryonic stem cells,mES)向神经细胞分化时培养体系中的ES细胞,即对分化细胞进行纯化,以期减少移植致瘤性。方法:诱导mES细胞向... 研究目的:采用免疫磁珠分选系统(magnetic activated cell sorting,MACS)分离去除小鼠胚胎干细胞(murine embryonic stem cells,mES)向神经细胞分化时培养体系中的ES细胞,即对分化细胞进行纯化,以期减少移植致瘤性。方法:诱导mES细胞向神经细胞分化,取分化第四期的细胞,胰酶消化制成单细胞悬液,用mES特异性表面抗原SSEA-1(special stage embryonic antigen-1)单抗标记,间接免疫磁珠分选系统分离去除SSEA-1阳性细胞,流式细胞仪检测分选前后细胞中mES细胞的比例,台盼蓝染色检测分选前后细胞存活率。结果:经MACS分选后的阴性细胞中的SSEA-1阳性率可以由分选前的(7.19±1.36)%下降到(1.34±0.80)%,结果具有显著性差异;分选后的细胞存活率仍为92%左右,与分选前存活率无明显变化。结论用SSEA-1作为表面标志,用MACS方法能有效地去除胚胎干细胞分化细胞中残存的胚胎干细胞,得到高纯度的分化细胞,并且细胞存活率不受影响,为下一步进行移植实验奠定基础。 展开更多
关键词 免疫磁珠分选 胚胎干细胞 神经前体细胞 ssea-1 分化
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SSEA-4在不同分期卵巢腺癌中表达及与化疗耐药和预后相关性
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作者 刘忠杰 宋永祯 +5 位作者 王菲 范凤霞 王静 赵宁 毕凤玲 李桂芬 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第6期1325-1329,共5页
目的 探讨阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-4在不同分期卵巢腺癌中表达及其与化疗耐药性及预后的相关性。方法 应用免疫组化法检测SSEA-4在不同分期卵巢腺癌组织中表达;分析不同分期及SSEA-4表达患者临床资料、近期化疗疗效、术后5年存活率、... 目的 探讨阶段特异性胚胎抗原(SSEA)-4在不同分期卵巢腺癌中表达及其与化疗耐药性及预后的相关性。方法 应用免疫组化法检测SSEA-4在不同分期卵巢腺癌组织中表达;分析不同分期及SSEA-4表达患者临床资料、近期化疗疗效、术后5年存活率、复发情况等。结果 Ⅳ期组卵巢腺癌转移及腹水显著高于Ⅰ~Ⅱ期组及Ⅲ期组(P<0.05),即随着卵巢腺癌分期的增加淋巴转移及腹水增多。患者年龄、绝经情况、妊娠次数及分化程度在不同SSEA-4表达的患者的卵巢癌组织中无差异(P>0.05);其中淋巴结转移情况及腹水发生在SSEA-4阳性表达组相较于阴性表达组显著偏高(P<0.05)。SSEA-4在Ⅳ期组表达显著高于Ⅲ期组及Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),即随着卵巢腺癌肿瘤分期的增加,SSEA-4阳性表达升高。SSEA-4阴性表达组化疗有效及化疗敏感性显著高于SSEA-4阳性组(P<0.05)。关于患者预后,SSEA-4阳性表达患者复发情况及死亡情况显著偏高(P<0.05)。SSEA-4阳性表达患者3、5年生存率显著低于SSEA-4阴性表达患者(P<0.05),1年生存率差异无统学意义(P>0.05)。SSEA-4阳性表达与不同卵巢腺癌分期与患者化疗有效、耐药性、复发具有显著正相关(P<0.05)。结论 SSEA-4在卵巢腺癌中的表达与肿瘤分期显著相关,可作为卵巢腺癌恶行程度的评价指标。SSEA-4与患者化疗耐药及预后显著相关,其表达强度可有效反映患者对化疗的敏感程度,可作为化疗耐药及预后的指标,有希望成为卵巢腺癌肿瘤恶性程度、近期化疗疗效及远期预后的有效指标。 展开更多
关键词 卵巢腺癌 化疗耐药 阶段特异性胚胎抗原(ssea)-4
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胚胎干细胞标志CD31、SSEA-1在小鼠胚胎发育和成体组织中表达的初步研究 被引量:3
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作者 王书军 付炜 张文杰 《组织工程与重建外科杂志》 2010年第5期241-243,共3页
目的观察胚胎干细胞表面标志CD31、SSEA-1在小鼠胚胎发育过程中不同阶段的表达及在新生鼠、成体骨髓、睾丸中的表达情况,为进一步利用它们作为分子标志从胚胎及成体组织中分离多潜能性干细胞奠定基础。方法本实验选用129/SV系小鼠。孕1... 目的观察胚胎干细胞表面标志CD31、SSEA-1在小鼠胚胎发育过程中不同阶段的表达及在新生鼠、成体骨髓、睾丸中的表达情况,为进一步利用它们作为分子标志从胚胎及成体组织中分离多潜能性干细胞奠定基础。方法本实验选用129/SV系小鼠。孕10.5天、14.5天、18.5天的胚胎各取3例,新生鼠、6周龄成年鼠骨髓、成体睾丸各取3例,0.3%胶原酶消化获得单细胞悬液,经抗体染色标记后,通过流式细胞仪分析CD31、SSEA-1的表达情况。结果胚胎第10.5天、14.5天、18.5天和新生鼠中均有CD31、SSEA-1的表达,阳性细胞量随胚胎发育呈下降趋势。成年鼠骨髓和睾丸组织中也有CD31、SSEA-1阳性细胞存在,含量低于胚胎中的数量。结论 CD31、SSEA-1在小鼠个体发育过程以及成体组织中都有不同程度的表达,阳性细胞比率随个体发育而降低。 展开更多
关键词 血小板内皮细胞粘附分子- 1 时相专一性胚胎抗原-1 胚胎 骨髓 睾丸
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