三七皂甙对无糖培养引起SK-N-SH细胞损伤的保护作用 被引量：9

1

作者 刘雯 吴青锋 +1 位作者 李华 左伋 《上海中医药杂志》 北大核心 2002年第2期46-48,F003,共4页

采用SK N SH细胞无糖培养方法 ,建立神经细胞能量代谢障碍模型 ,通过细胞学、形态学与脂质过氧化损伤指标的检测 ,观察中药三七皂甙 (PNS)对模型细胞的保护作用。结果 :无糖培养下细胞皱缩、形态不完整 ,用药后细胞形态正常 ,神经细胞... 采用SK N SH细胞无糖培养方法 ,建立神经细胞能量代谢障碍模型 ,通过细胞学、形态学与脂质过氧化损伤指标的检测 ,观察中药三七皂甙 (PNS)对模型细胞的保护作用。结果 :无糖培养下细胞皱缩、形态不完整 ,用药后细胞形态正常 ,神经细胞存活数增加 ,细胞凋亡率降低 ;细胞脂质过氧化损伤减轻。表明三七皂甙对能量代谢障碍引起的神经细胞损伤有保护作用 ,这一作用可能与其抗脂质过氧化损伤有关。 展开更多

关键词 无糖培养 细胞损伤 三七皂甙 PnS sh-n-sh 能量代谢障碍 脂质过氧化 中药

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甾体激素对神经母细胞株SK-N-SH细胞摄取甘氨酸的快速作用 被引量：2

2

作者 毕钢 陈宜张 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期603-608,共6页

本研究观察了SKNSH细胞摄取甘氨酸的一般情况,并进一步研究了甾体激素对SKNSH细胞摄取甘氨酸的快速作用。结果显示:SKNSH细胞高亲和力的甘氨酸摄取是Na+和Cl-依赖性的。皮质酮、孕酮和地塞米松对这种摄取有快速促进作用,雌二醇和脱氧皮... 本研究观察了SKNSH细胞摄取甘氨酸的一般情况,并进一步研究了甾体激素对SKNSH细胞摄取甘氨酸的快速作用。结果显示:SKNSH细胞高亲和力的甘氨酸摄取是Na+和Cl-依赖性的。皮质酮、孕酮和地塞米松对这种摄取有快速促进作用,雌二醇和脱氧皮质酮无明显作用,表明甾体激素快速作用有特异性。皮质酮作用在10-9～10-6mol/L范围内呈浓度依赖性。皮质酮快速作用不受蛋白质合成抑制剂影响。耦联牛血清白蛋白后,快速作用仍然存在。但细胞外液无Ca2+影响甾体激素快速作用。结果提示皮质酮。 展开更多

关键词 甾体激素 sk-n-sh细胞 甘氨酸 摄取 na^+ Cl^-

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调心方对Aβ和TNFα诱导的SK-N-SH细胞株毒性的保护作用

3

作者 陈沙维 郁志华 +4 位作者 徐品初 赵德敏 薛人华 林水淼 赵伟康 《中药药理与临床》 CAS CSCD 2001年第2期20-22,共3页

目的 :观察调心方对由TNFα加Aβ(2 5～ 35 )诱导的SK N SH (神经源性细胞株 )细胞毒性的保护作用。 方法 :用TNFα 5 0ng/ml和Aβ(2 5～ 35 ) 0 1μM处理SK N SH细胞造成细胞损伤模型。以MTT和DNAladder为指标。 结果 :TNFα和Aβ(2 5... 目的 :观察调心方对由TNFα加Aβ(2 5～ 35 )诱导的SK N SH (神经源性细胞株 )细胞毒性的保护作用。 方法 :用TNFα 5 0ng/ml和Aβ(2 5～ 35 ) 0 1μM处理SK N SH细胞造成细胞损伤模型。以MTT和DNAladder为指标。 结果 :TNFα和Aβ(2 5～ 35 )处理SK N SH细胞 2 4小时细胞生存率减少约 5 0 % ,而调心方含药血清能提高细胞模型的生存率 ,减少细胞DNA的降解。结论 :一定剂量的TNFα加小剂量的Aβ(2 5～ 35 )能造成接近体内病理生理机制的细胞损伤模型 ,调心方对TNFα加Aβ(2 5～35 ) 展开更多

关键词 调心方 sk-n-sh细胞株 Β-淀粉样肽 TnFΑ MTT测定 DnA断片

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反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达 被引量：7

4

作者 刘朝晖 杨宇 +3 位作者 庄鹏辉 许杰华 马延兵 胡海涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期10-13,共4页

目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH... 目的构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率。方法使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP)。将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率。结果成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL。在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达。在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到30%以上。结论SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率。 展开更多

关键词 sk—n—sh神经母细胞瘤细胞 增强型绿色荧光蛋白 反转录病毒载体

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人参皂苷Rg_1对LPS诱导的SK-N-SH细胞株脑啡肽酶表达的影响 被引量：7

5

作者 吕俊华 黄丰 +4 位作者 刘月丽 胡海燕 张荣华 蔡宇 杨丽 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期117-119,共3页

目的:探讨人参皂苷Rg1 对LPS诱导的SK- N -SH细胞株脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1 (5、10、20μmol/L)对SK -N- SH细胞存活率的影响,应用RT PCR观察细胞中NEP表达的变化... 目的:探讨人参皂苷Rg1 对LPS诱导的SK- N -SH细胞株脑啡肽酶 (NEP)表达的影响。方法:应用MTT比色法检测一定剂量LPS(50mg/L)和不同浓度人参皂苷Rg1 (5、10、20μmol/L)对SK -N- SH细胞存活率的影响,应用RT PCR观察细胞中NEP表达的变化。结果: 50mg/L的LPS能使SK- N -SH细胞存活率降低,细胞内NEP的表达下降。人参皂苷Rg1 能提高LPS处理的SK- N -SH细胞的存活率,使NEP的表达增高。结论:人参皂苷Rg1 对LPS造成的细胞毒性具有一定的保护作用,并可对抗LPS对细胞内NEP表达的降低。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 sh sk LPS诱导 表达 脑啡肽 细胞株 肽酶 细胞内 RT-PCR

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川楝素引起的NG108-15细胞和SK-N-SH细胞形态学变化 被引量：5

6

作者 陈文雁 施玉樑 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期1-5,共5页

实验观察了ＮＧ１０８－１５和ＳＫ－Ｎ－ＳＨ细胞在含川楝素的培养基中产生的形态学变化。（１）光镜下发现，川楝素可以引起ＮＧ１０８－１５细胞突起变短甚至消失、胞体变圆、细胞萎缩、失去贴壁能力出现飘浮，数量逐渐减少；在有血... 实验观察了ＮＧ１０８－１５和ＳＫ－Ｎ－ＳＨ细胞在含川楝素的培养基中产生的形态学变化。（１）光镜下发现，川楝素可以引起ＮＧ１０８－１５细胞突起变短甚至消失、胞体变圆、细胞萎缩、失去贴壁能力出现飘浮，数量逐渐减少；在有血清培养的情况下，川楝素引起ＳＫ－Ｎ－ＳＨ细胞间界限不清，无血清时，细胞出现飘浮现象。（２）电镜观察显示，川楝素引起ＮＧ１０８－１５细胞和ＳＫ－Ｎ－ＳＨ细胞的死亡，大多数具有坏死细胞的特征，仅个别细胞的死亡具有典型凋亡细胞的特征。 展开更多

关键词 川楝素 nG108-15细胞 sk-n-sh细胞 细胞形态变化

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半胱氨酰白三烯受体1拮抗剂普鲁司特调节SK-N-SH细胞分化 被引量：5

7

作者 彭芳 方三华 +3 位作者 郑晓亮 张纬萍 卢韵碧 魏尔清 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2007年第2期123-129,共7页

目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-S... 目的:观察半胱氨酰白三烯受体激动剂LTD4以及受体1(CysLT1)拮抗剂普鲁司特对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH细胞分化的影响。方法:以维A酸为阳性对照,观察LTD4、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞形态学变化;用免疫印迹法观察SK-N-SH细胞CysLT1和CysLT2受体的表达;用免疫荧光法观察神经元分化标记物微管相关蛋白(MAP-2)的表达。结果:免疫印迹显示,SK-N-SH表达CysLT1受体和CysLT2受体,CysLT2受体表达较多。形态学结果显示,维A酸、普鲁司特、LTD4+普鲁司特诱导SK-N-SH细胞发生形态学改变,表现为胞体变小,有明显的突起生长;而LTD4无明显作用。免疫荧光结果显示,在对照组和普鲁司特组MAP-2主要分布于胞体;在维甲酸组MAP-2除了分布于胞体外,还分布于突起。普鲁司特增加MAP-2阳性细胞数。结论:CysLT1受体拮抗剂普鲁司特参与SK-N-SH细胞分化的调节。 展开更多

关键词 白三烯类/治疗应用 受体 白三烯 神经母细胞瘤/病理学 半胱氨酰白三烯受体 白三烯D4 普鲁司特 sk—n—sh细胞 细胞分化

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人参皂苷Rg1对过氧化氢诱导SK-N-SH细胞凋亡的保护作用 被引量：3

8

作者 邵世滨 丁岩 +2 位作者 张亚伦 段珊 崔行 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期401-404,共4页

目的研究人参皂苷Rg1对过氧化氢(H2O2)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法建立H2O2致SK-N-SH细胞凋亡模型,MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(... 目的研究人参皂苷Rg1对过氧化氢(H2O2)诱导SK-N-SH细胞凋亡的影响。方法建立H2O2致SK-N-SH细胞凋亡模型,MTT比色法检测细胞活力;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;DNA梯型观察凋亡细胞的DNA片段化;化学比色法测定细胞培养液和细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;RT-PCR检测细胞bcl-2、bax的表达水平。结果100μmol/LH2O2诱导SK-N-SH细胞12h,细胞活力下降(均P<0.01),细胞凋亡率为16.6%,DNA断裂呈片段状,细胞培养液及细胞内MDA含量增加,SOD活性下降,细胞中bax表达明显升高。而人参皂苷Rg1可明显减少细胞损伤,使细胞中bax表达明显减少、细胞培养液及细胞内MDA含量减少、SOD活性增加、细胞凋亡的各项指标均明显改善。结论人参皂苷Rg1对H2O2诱导的SK-N-SH细胞凋亡具有保护作用,其作用机制可能与提高SK-N-SH细胞的抗氧化能力以及减少bax表达有关。 展开更多

关键词 人参皂苷RG1 sk—n-sh细胞 过氧化氢 细胞凋亡

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转录因子CREB激活介导吗啡依赖SK-N-SH细胞的nNOS及fosB基因表达的调控机制 被引量：3

9

作者 苏彦君 丛斌 +4 位作者 张国忠 张瑾 李淑瑾 姚玉霞 付丽红 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期395-398,共4页

目的　探讨吗啡依赖的SK- N -SH细胞表达神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase ,nNOS)及fosB基因的调控机制。方法　建立吗啡依赖及戒断细胞模型 ,体外合成含cAMP反应元件 (cAMPresponseelement ,CRE)序列的寡核苷酸 ,经... 目的　探讨吗啡依赖的SK- N -SH细胞表达神经元型一氧化氮合酶 (neuronalnitricoxidesynthase ,nNOS)及fosB基因的调控机制。方法　建立吗啡依赖及戒断细胞模型 ,体外合成含cAMP反应元件 (cAMPresponseelement ,CRE)序列的寡核苷酸 ,经硫代磷酸化修饰 ,作为单链寡核苷酸 (CRE transcriptionfactordecoyoligodeoxynucleotide ,CRE decoyODN)。分别采用电泳迁移率改变分析 (electrophoresismobilityshiftassay ,EMSA)及RT -PCR技术 ,检测CRE decoyODN对吗啡依赖及纳络酮急性戒断诱导的CREB的DNA结合活性、nNOS及fosBmRNA表达的影响。结果　吗啡依赖及纳络酮急性戒断使SK- N- SH细胞的CREB的DNA结合活性、nNOS及fosBmRNA明显升高 ,CRE decoyODN可特异抑制上述指标升高。结论　CREB的激活介导了吗啡依赖SK- N 展开更多

关键词 sk-n-sh细胞 吗啡依赖 nnOS CREB 调控机制 FOSB 基因表达 转录因子 介导 激活 神经元型一氧化氮合酶 DnA结合活性 电泳迁移率改变分析 RT-PCR技术 nitric factor mRnA表达 寡核苷酸 oxide decoy 细胞表达 细胞模型 反应元件 cAMP 体外合成 表达上调 纳络酮 ODn

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α2β1整合素对神经母细胞瘤细胞侵袭迁移的影响 被引量：4

10

作者 邹彩艳 文飞球 +2 位作者 陈亦欣 刘智屏 张朝霞 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 2008年第3期386-390,共5页

目的近年来研究表明细胞间黏附分子整合素的变化与肿瘤细胞的侵袭迁移之间有着重要的联系,该研究进一步深入探讨α2β1整合素对神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力的影响,为预防神经母细胞瘤细胞的转移和辅助治疗提供理论依据。方法采用细... 目的近年来研究表明细胞间黏附分子整合素的变化与肿瘤细胞的侵袭迁移之间有着重要的联系,该研究进一步深入探讨α2β1整合素对神经母细胞瘤细胞侵袭和迁移能力的影响,为预防神经母细胞瘤细胞的转移和辅助治疗提供理论依据。方法采用细胞倾斜实验、聚碳酸酯膜侵袭试验观察神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株细胞在整合素α2单克隆抗体(anti-α2)和β1单克隆抗体(anti-β1)作用下,瘤细胞迁移、侵袭能力的变化。迁移或侵袭的细胞通过姬姆萨染色,200倍显微镜下计数,计算不同条件下细胞迁移或侵袭抑制率。结果anti-α2和anti-β1阻断组细胞的迁移能力较对照组98.1±7.4明显降低,分别为50.9±10.5和54.3±9.0(P<0.01),抑制率分别为48.1%和44.5%。anti-α2和anti-β1阻断组细胞的侵袭能力较对照组41.5±4.8明显减弱,分别为25.3±4.4和18.8±3.9(P<0.01),抑制率分别为39.0%和54.7%;结论α2β1整合素在神经母细胞瘤细胞迁移侵袭过程中起着促进作用。 展开更多

关键词 神经母细胞瘤 α2β1整合素 迁移 侵袭 sk—n-sh细胞株

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葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒作用评价 被引量：5

11

作者 徐炳欣 郑甲信 +3 位作者 赵媛媛 李强 兰丙欣 王艳芝 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期1894-1898,共5页

目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作... 目的研究葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的体外细胞毒性。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH的细胞毒性;倒置显微镜观察细胞形态;流式细胞仪定量分析细胞周期。结果作用48 h后,葫芦素B以剂量依赖方式抑制SK-N-SH细胞的生长,0.143和0.716μmol.L-1葫芦素B固体脂质纳米粒对SK-N-SH细胞的抑制率分别为(34.9±4.6)%和(53.6±6.3)%,与对应浓度的葫芦B原料组的(13.2±2.3)%和(43.4±5.5)%相比较有显著性差异(P<0.05)。葫芦素B固体脂质纳米粒对人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的IC50为0.508μmol.L-1,而葫芦素B原料为12.6μmol.L-1。细胞形态观察结果显示,与二甲基亚砜(DMSO)组相比较,葫芦素B原料及葫芦素B固体脂质纳米粒组的细胞密度下降,细胞体积缩小,大多数细胞形状发生改变。流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B原料可将SK-N-SH细胞抑制在S期和G2/M期,而葫芦素B固体脂质纳米粒可把SK-N-SH抑制在G2/M期。结论葫芦素B固体脂质纳米粒与葫芦素B原料药既能抑制人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性,且前者毒性更强。 展开更多

关键词 葫芦素B固体脂质纳米粒 人神经母细胞瘤sk-n-sh细胞 细胞毒性

原文传递

人参皂苷Rgl对慢性吗啡作用及纳洛酮催促戒断SK-N-SH细胞的影响及机制研究 被引量：4

12

作者 闫玉仙 宋月英 +2 位作者 王小平 陈海生 文春晓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1074-1078,共5页

目的探讨人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用及纳洛酮催促戒断SK-N-SH细胞的影响及其机制。方法采用不同浓度人参皂苷Rgl1、2、4、8、16、32μmol·L-1对SK-N-SH细胞预处理24h后,用吗啡(100μmol·L-1培养基)孵育24h,采用MTT法研究人参... 目的探讨人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用及纳洛酮催促戒断SK-N-SH细胞的影响及其机制。方法采用不同浓度人参皂苷Rgl1、2、4、8、16、32μmol·L-1对SK-N-SH细胞预处理24h后,用吗啡(100μmol·L-1培养基)孵育24h,采用MTT法研究人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖的影响;用相同浓度的吗啡作用于SK-N-SH细胞后,10μmol·L-1纳洛酮催促戒断前24h,加入1、2、4μmol·L-1的Rg1作用24h,采用荧光分光光度法、RT-PCR及Western blot技术分别检测人参皂苷Rgl对吗啡慢性作用纳洛酮催促戒断SK-N-SH细胞内[Ca2+]i、CaMKⅡβ mRNA及蛋白表达的影响。结果①与对照组相比,吗啡慢性作用48h可抑制SK-N-SH细胞的增殖;细胞内[Ca2+]i增高(P<0.01);细胞CaMKⅡβ mRNA及蛋白表达明显升高;②加入10μmol·L-1纳洛酮作用30min后,细胞内[Ca2+]i急剧降低(P<0.05);CaMKⅡβ mRNA及蛋白表达进一步升高(P<0.05);③2μmol·L-1人参皂苷Rg1对细胞进行预处理能缓解吗啡对细胞的增殖活性的抑制作用(P<0.01)。④慢性吗啡作用SK-N-SH细胞,在纳洛酮急性戒断前,加入不同浓度的Rg1可缓解细胞内钙离子浓度的降低;同时可降低CaMKⅡβ mRNA和蛋白表达的进一步升高。结论人参皂苷Rgl可缓解吗啡对SK-N-SH细胞的抑制作用,通过调控细胞内[Ca2+]i以及CaMKⅡβ mRNA和蛋白表达,从而缓解吗啡成瘾及戒断症状的产生。 展开更多

关键词 吗啡 纳洛酮 人参皂苷RG1 sk-n-sh细胞 [CA2+]I CaMKⅡβ

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蜂斗菜素抑制人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖作用机制研究 被引量：4

13

作者 程月芳 王彩芳 +2 位作者 李文杰 林青 张旗 《神经药理学报》 2011年第3期1-6,22,共7页

目的:探讨蜂斗菜素(petasin)对人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖抑制作用的机制。方法:采用罗丹明B(SRB)法检测蜂斗菜素对肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察蜂斗菜素对SK-N-SH细胞周期和凋亡的影响;采用Hoechst 33258染色法观察... 目的:探讨蜂斗菜素(petasin)对人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH增殖抑制作用的机制。方法:采用罗丹明B(SRB)法检测蜂斗菜素对肿瘤细胞的增殖抑制作用;采用流式细胞术观察蜂斗菜素对SK-N-SH细胞周期和凋亡的影响;采用Hoechst 33258染色法观察蜂斗菜素对SK-N-SH凋亡的影响;蛋白免疫印迹法(WesternBlotting)检测蜂斗菜素对SK-N-SH细胞ERK1/2蛋白磷酸化的影响。结果:蜂斗菜素对SK-N-SH,SGC7901,SPC-A-1,SMMC 7721,Ec9706,SK-N-BE(2)和U251细胞有不同程度的抑制作用。蜂斗菜素使SK-N-SH细胞的周期阻滞于G0/G1期,但不诱导其凋亡,且下调ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结论:蜂斗菜素是一种潜在的抗肿瘤天然化合物,其机制为抑制细胞增殖,但不诱导其凋亡。其分子机制可能包括下调ERK1/2蛋白的磷酸化水平。 展开更多

关键词 蜂斗菜素 sk-n-sh 细胞 增殖 ERK1/2

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吴茱萸碱对神经母细胞瘤SK-N-SH细胞增殖、迁移及侵袭的影响 被引量：2

14

作者 逯文娟 李昭 +1 位作者 马小云 史晓玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期887-892,共6页

目的:探讨吴茱萸碱(Evo)是否通过调控lncRNA LINC00858表达调控神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖、迁移及侵袭。方法:在体外以3、6、12μmol/L Evo处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,利用RNA干扰技术分别将si-NC、si-LINC00858转染至SK-N-SH... 目的:探讨吴茱萸碱(Evo)是否通过调控lncRNA LINC00858表达调控神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖、迁移及侵袭。方法:在体外以3、6、12μmol/L Evo处理人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞,利用RNA干扰技术分别将si-NC、si-LINC00858转染至SK-N-SH细胞,将pcDNA、pcDNA-LINC00858转染至SK-N-SH细胞并经12μmol/L Evo处理,实验分为对照组、Evo低剂量组、Evo中剂量组、Evo高剂量组、si-NC组、si-LINC00858组、Evo+pcDNA组、Evo+pcDNA-LINC00858组。采用q PCR法检测各组细胞LINC00858的表达量,MTT、Transwell实验分别检测细胞的增殖、迁移、侵袭能力,WB法检测细胞中cyclinD1、MMP-2、MMP-9和p21蛋白的表达。结果:与对照组相比,Evo低、中、高剂量组SK-N-SH细胞中LINC00858表达均显著降低(均P<0.05),细胞增殖抑制率显著升高、迁移及侵袭细胞数显著减少(均P<0.01),cyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达降低、p21蛋白表达升高(均P<0.01)。与si-NC组相比,si-LINC00858组细胞的增殖抑制率、迁移和侵袭细胞数及相关蛋白表达变化同Evo低、中、高剂量组。与Evo+pcDNA组相比,Evo+pcDNA-LINC00858组细胞的增殖抑制率显著降低、迁移及侵袭细胞数均显著增多(均P<0.01),cyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达升高、p21蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:Evo通过下调LINC00858表达抑制神经母细胞瘤SK-N-SH细胞的增殖、迁移及侵袭。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 lncRnA LInC00858 神经母细胞瘤 sk-n-sh细胞 增殖 迁移 侵袭

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白芍总苷对阿尔茨海默病的保护作用及机制的研究 被引量：3

15

作者 李岩 李宁 +1 位作者 赵飞飞 冯宗妹 《职业与健康》 CAS 2014年第17期2525-2528,共4页

目的探讨白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对阿尔茨海默病(AD)的保护作用及其作用机制。方法实验共分为7组,分别为正常对照组(Control组)、模型组[连二亚硫酸钠(Na2S2O4)缺氧无保护组]及TGP各干预组(剂量分别为50、100、200、... 目的探讨白芍总苷(total glucosides of paeony,TGP)对阿尔茨海默病(AD)的保护作用及其作用机制。方法实验共分为7组,分别为正常对照组(Control组)、模型组[连二亚硫酸钠(Na2S2O4)缺氧无保护组]及TGP各干预组(剂量分别为50、100、200、400、800 mg/L)。采用Na2S2O4建立人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞缺氧损伤模型,Na2S2O4于不同浓度TGP干预1 h后加入,作用16 h。利用倒置相差显微镜观察各组SK-N-SH细胞生长及形态的变化;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法测定各组SK-N-SH细胞的存活率;利用蛋白免疫印迹(western blot)法检测SK-N-SH细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达水平。结果形态学研究显示,正常对照组SK-N-SH细胞呈圆形,较少有突起,为贴壁细胞,折光性较强;模型组多数细胞肿胀,折光度减弱,最终细胞成团、漂浮,并有许多细胞崩解物,TGP各浓度组均较模型组细胞数量较多,折光性明显增强,细胞裂解碎片减少,多数细胞重新贴壁伸展;TGP 100、200、400、800 mg/L干预组能够有效改善SK-N-SH细胞缺氧损伤造成的细胞死亡率的增加;TGP 50、100、200、400、800 mg/L干预明显抑制SK-N-SH细胞缺氧损伤造成的Caspase-3蛋白表达的增加。结论 TGP对AD具有明显的保护作用,其作用机制与通过调控Caspase-3蛋白的表达影响神经细胞的凋亡相关。 展开更多

关键词 白芍总苷 阿尔茨海默病 sk—n-sh细胞 缺氧损伤 细胞凋亡 CASPASE-3

原文传递

甲醇对人神经母细胞瘤细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

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作者 郝乐乐 宋辉 +2 位作者 陈楠 李亚妮 刘贺荣 《宁夏医科大学学报》 2019年第5期456-460,共5页

目的探讨甲醇对人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的增殖及细胞凋亡的影响。方法设置不同浓度梯度甲醇溶液(0、250、500、750、1000、1250、1500、1750、2000mmol·L^-1)染毒SK-N-SH细胞24、48h后,用CCK-8法测出各组光密度(OD)值,并绘制... 目的探讨甲醇对人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的增殖及细胞凋亡的影响。方法设置不同浓度梯度甲醇溶液(0、250、500、750、1000、1250、1500、1750、2000mmol·L^-1)染毒SK-N-SH细胞24、48h后,用CCK-8法测出各组光密度(OD)值,并绘制甲醇染毒对SK-N-SH细胞活力影响曲线,得出半数染毒剂量(IC50),确定后续实验的甲醇染毒浓度为0、250、750、1250mmol·L^-1,分析各浓度甲醇对SK-N-SH细胞活力和形态的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果甲醇对SK-N-SH细胞的半数染毒浓度IC50为1292.96mmol·L^-1。与对照组比较,250、750、1250mmol·L^-1甲醇作用SK-N-SH细胞24、48h后,均对细胞活力有影响(P均<0.01);且随甲醇浓度增加和作用时间的延长,SK-N-SH细胞活力明显下降。对照组SK-N-SH细胞形态为梭形或多边形,有较长的突起,细胞之间存在细胞连接,为单层呈扁平贴壁生长的神经胶质瘤细胞。250mmol·L^-1甲醇组有个别细胞变为圆形,随着甲醇浓度增高,多数细胞变圆缩小、细胞漂浮失去贴壁能力,细胞间隙增大,折光性变强,细胞周围有明显透明圈,培养液中有大量变形细胞漂浮,只有少量正常细胞贴壁。不同浓度(0、250、750、1250mmol·L^-1)、不同时间(0、6、12、24、48h)甲醇染毒SK-N-SH细胞凋亡率差异均有统计学意义(P均<0.001),SK-N-SH细胞甲醇染毒与细胞凋亡率之间存在时间和浓度依赖关系,并且时间和浓度之间存在交互作用(P<0.001)。随着染毒浓度增加,不同时间甲醇染毒组细胞凋亡率变化趋势一致,浓度越高、时间越长、细胞凋亡率越高。结论甲醇可抑制SK-N-SH细胞增殖活力,促进其凋亡。 展开更多

关键词 甲醇 人神经母细胞瘤细胞 细胞增殖 细胞凋亡

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锰铅镉复合暴露对人神经母细胞瘤细胞的毒性作用 被引量：2

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作者 徐怡璐 吴彬 +8 位作者 石倩倩 韦兰成 敖青青 孟玲 韦雪静 李习艺 唐深 王新航 陆彩玲 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2019年第8期679-684,共6页

目的探索重金属复合暴露对人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞的毒性效应。方法将SK-N-SH细胞分别暴露于空白培养基(对照)和氯化锰(125、250、500、750、1000、1500、2000、4000、6000μmol/L),乙酸铅(500、750、1000、1500、2000、2500、3000... 目的探索重金属复合暴露对人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞的毒性效应。方法将SK-N-SH细胞分别暴露于空白培养基(对照)和氯化锰(125、250、500、750、1000、1500、2000、4000、6000μmol/L),乙酸铅(500、750、1000、1500、2000、2500、3000μmol/L),氯化镉(5、10、15、20、30、40、60、80μmol/L)单一及二元、三元复合溶液24、48、96 h后,检测细胞存活率,计算锰、铅、镉的药物抑制浓度(IC)。其中,二元、三元复合溶液的浓度均为相应金属IC10、IC20、IC30、IC50的等毒效应比混合,分别用毒性单位法、混合毒性指数法对毒性效应进行评价。结果与对照组相比,不同浓度锰、铅、镉单独染毒不同时间SK-N-SH细胞的存活率均较低,除500μmol/L铅染毒24、96 h组和5μmol/L镉染毒24、48 h组外,差异均有统计学意义(P<0.05);随着锰、铅、镉单独染毒浓度的升高和染毒时间的延长,SK-N-SH细胞的存活率均呈下降趋势。三种金属对SK-N-SH的细胞急性毒性依次为镉(IC50:38.728μmol/L)>锰(IC50:442.739μmol/L)>铅(IC50:1624.850μmol/L)。同一金属不同染毒时间的IC50排序均为96 h<48 h<24 h。锰和镉复合暴露对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h均表现为拮抗作用,在48 h均表现为协同作用;96 h在毒效应为IC10、IC20时均表现为部分相加作用,在IC30、IC50时均表现为协同作用。镉和铅对SK-N-SH细胞的联合毒性在24 h毒效应为IC10、IC20、IC30时均表现为拮抗作用,在IC50时表现为部分相加作用;在48 h毒效应为IC10时表现为拮抗作用,在IC20、IC30、IC50时均表现为部分相加作用;在96 h时均表现为部分相加作用。铅和锰对SK-N-SH细胞的联合毒性在24、96 h毒效应为IC50时分别表现为简单相加、协同作用,其余均表现为部分相加作用。锰、铅、镉对SK-N-SH细胞的联合作用在24、96 h时均表现为部分相加作用;48 h时在IC10、IC20、IC30均表现为协同作用,在IC50时表现为部分相加作用。结论� 展开更多

关键词 锰 铅 镉 联合毒性效应 神经毒性 sk-n-sh细胞

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复方瑞康欣对吗啡依赖人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞[Ca^(2+)]_i的影响 被引量：2

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作者 吴明松 罗素元 +3 位作者 王大忠 李晓东 汤贤春 凌锌 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期833-835,共3页

目的观察复方瑞康欣对吗啡依赖人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞[Ca2+]i的影响并探讨其机制。方法SK-N-SH细胞周期同步化后,用10μmol/L的吗啡作用48 h,建立吗啡依赖细胞模型;再用复方瑞康欣含药血清干预12 h,纳洛酮戒断,Fluo 3-AM标记后,流... 目的观察复方瑞康欣对吗啡依赖人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞[Ca2+]i的影响并探讨其机制。方法SK-N-SH细胞周期同步化后,用10μmol/L的吗啡作用48 h,建立吗啡依赖细胞模型;再用复方瑞康欣含药血清干预12 h,纳洛酮戒断,Fluo 3-AM标记后,流式细胞仪检测SK-N-SH细胞内游离Ca2+荧光强度。结果复方瑞康欣含药血清中、高剂量组细胞内游离Ca2+荧光强度均降低,与空白血清戒断组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论复方瑞康欣的戒毒作用可能与其下调细胞Ca2+水平有关。 展开更多

关键词 复方瑞康欣 吗啡依赖 中药血清药理学 细胞内钙离子 sk—n—sh细胞

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敌敌畏对人神经母细胞瘤细胞SK-N-SH的氧化损伤作用 被引量：2

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作者 杨裔 朱家佳 +1 位作者 唐乖 龙鼎新 《实用预防医学》 CAS 2017年第6期646-649,共4页

目的研究敌敌畏(O,O-dimethyl-O-2,2-dichlorovinylphosphate,DDVP)对人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的氧化损伤作用。方法 MEM培养基培养SK-N-SH细胞,细胞计数测定SK-N-SH细胞群体倍增时间;不同浓度(0~120μmol/L)DDVP作用SK细胞48 h后,... 目的研究敌敌畏(O,O-dimethyl-O-2,2-dichlorovinylphosphate,DDVP)对人神经母细胞瘤细胞(SK-N-SH)的氧化损伤作用。方法 MEM培养基培养SK-N-SH细胞,细胞计数测定SK-N-SH细胞群体倍增时间;不同浓度(0~120μmol/L)DDVP作用SK细胞48 h后,MTT法测定SK-N-SH细胞48 h半数抑制浓度(IC50);巴氏染色后观察细胞形态变化;同时分别检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量的变化。结果SK-N-SH细胞群体倍增时间(36.28±1.46)h;48 h半数抑制浓度(IC50)为(105.22±5.80)μmol/L;随着DDVP染毒浓度的增高,细胞内MDA的含量逐渐增高,SOD、CAT活性逐渐降低,呈现明显的剂量—效应关系(P<0.05)。结论 DDVP对SK-N-SH细胞有明显的氧化损伤作用。 展开更多

关键词 sk-n-sh细胞 敌敌畏 丙二醛 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 氧化损伤

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人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖及[Ca^(2+)]_i的影响 被引量：2

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作者 闫玉仙 宋月英 +2 位作者 王小平 文春晓 陈海生 《中国药物依赖性杂志》 CAS CSCD 2010年第6期468-472,共5页

目的:探讨人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖及[Ca2+]i的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)研究人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖的影响,应用荧光分光光度法观察人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞内[Ca2+]... 目的:探讨人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖及[Ca2+]i的影响。方法:采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)研究人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞增殖的影响,应用荧光分光光度法观察人参皂苷Rb1对吗啡慢性作用SK-N-SH细胞内[Ca2+]i的影响。结果:与对照组相比,吗啡慢性作用48h可显著抑制SK-N-SH细胞的增殖,细胞内游离钙离子浓度显著增高(P<0.01);单独加入16μmol.L-1Rb1可显著促进SK-N-SH细胞的增殖(P<0.05);人参皂苷Rb1(16μmol.L-1,32μmol.L-1)对细胞进行预处理能缓解吗啡对细胞的抑制作用(P<0.05)。单独加入16μmol.L-1Rb1可使SK-N-SH细胞内[Ca2+]i显著降低(P<0.01);慢性吗啡作用SK-N-SH细胞48h,能使细胞内[Ca2+]i明显升高(P<0.01);慢性吗啡作用SK-N-SH后,加入(16μmol.L-1,32μmol.L-1)人参皂苷Rb1能有效地抑制吗啡引起的细胞内[Ca2+]i升高(P<0.01)。结论:人参皂苷Rb1可显著缓解吗啡对SK-N-SH细胞的抑制作用和吗啡引起的[Ca2+]i升高。 展开更多

关键词 人参皂苷RB1 吗啡 sk-n-sh细胞 钙

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