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精制血府胶囊对缺氧缺糖心肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响 被引量:21
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作者 王伟 陈可冀 +2 位作者 史大卓 钟蓓 朱应葆 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第11期670-672,共3页
应用血清药理学、反转录PCR(RT-PCR)、Northern杂交等方法比较研究了精制血府胶囊、血府逐瘀胶囊、硫氮酮对缺氧缺糖培养心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达及乳酸脱氢酶(LDH-L)、肌酸激酶(CK)... 应用血清药理学、反转录PCR(RT-PCR)、Northern杂交等方法比较研究了精制血府胶囊、血府逐瘀胶囊、硫氮酮对缺氧缺糖培养心肌细胞一氧化氮合酶(NOS)mRNA表达及乳酸脱氢酶(LDH-L)、肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(GOT)释放的影响。结果表明:三种药物均可显著提高缺氧缺糖心肌细胞NOSmRNA的表达(P<0.01),且以精制血府胶囊最显著(P<0.01)。三种药物均可显著降低缺氧缺糖心肌细胞LDH-L、CK、GOT的释放(p<0.01)。精制血府胶囊和硫氮 酮抑制LDH-L的释放较血府逐瘀胶囊更为显著(P<0.01)。提示:三种药物均具有明显的心肌细胞保护作用,以精制血府胶囊和硫氮 酮为优,这种保护作用与其刺激心肌细胞生成一氧化氮(NO)有一定关系。 展开更多
关键词 精制血府胶囊 心肌细胞 一氧化氮合酶
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化疗对胃癌Th1和Th2类细胞因子漂移的影响及临床意义 被引量:20
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作者 李岩 梁婧 +2 位作者 刘文波 许晓群 赵跃然 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期732-734,共3页
目的观察化疗对胃癌患者体内Th1和Th2类细胞因子表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,检测胃癌患者在化疗前后外周血单个核细胞Th1和Th2类细胞因子的基因表达。结果胃癌患者外周血在化疗前呈Th2类细胞因子的强势表达;化... 目的观察化疗对胃癌患者体内Th1和Th2类细胞因子表达的影响。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术,检测胃癌患者在化疗前后外周血单个核细胞Th1和Th2类细胞因子的基因表达。结果胃癌患者外周血在化疗前呈Th2类细胞因子的强势表达;化疗后,Th2类细胞因子的表达减弱,甚至有向Th1类细胞因子漂移的趋势。结论化疗可降低Th2类细胞因子的表达,甚至有向Th1类细胞因子漂移的趋势,这可能与化疗抑制肿瘤的生长、有助于机体的预后和康复有关。 展开更多
关键词 化疗 胃癌 TH1 TH2 细胞因子漂移
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乳腺癌特异基因1在乳腺癌表达的意义 被引量:18
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作者 吴克瑾 翁子毅 +4 位作者 林古法 殷敏智 钱惠琴 张一楚 丁小燕 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期193-195,共3页
目的 检测乳腺癌特异基因 1(BCSG1)在乳腺癌中的表达 ,评价其表达与乳腺癌临床病理因素的相关性。方法 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 )检测 2 8例乳腺癌、7例乳腺增生症及 5例乳腺纤维瘤中BCSG1的表达。结果  2 8例乳腺癌中有... 目的 检测乳腺癌特异基因 1(BCSG1)在乳腺癌中的表达 ,评价其表达与乳腺癌临床病理因素的相关性。方法 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR法 )检测 2 8例乳腺癌、7例乳腺增生症及 5例乳腺纤维瘤中BCSG1的表达。结果  2 8例乳腺癌中有BCSG1表达 12例 (4 2 .9% ) ,其中Ⅲ /Ⅳ期乳腺癌的表达率为 6 9.2 %(9/ 13例 ) ,乳腺良性病变中BCSG1无一例表达。BCSG1的表达与乳腺癌分期密切相关 (P =0 .0 2 ) ,与患者年龄、月经、肿瘤部位以及雌激素受体、孕激素受体、核增殖抗原、C erbB2 的表达等无相关性。结论 BCSG1可能是与肿瘤恶性进展有关的肿瘤标记物 ,是乳腺癌发生过程中的中晚期事件 ,为判定乳腺癌预后的新指标。 展开更多
关键词 乳腺癌 特异基因1 表达 逆转录-聚合酶链反应
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益气化瘀补肾方及拆方影响椎间盘细胞外基质胶原和代谢酶mRNA表达的研究 被引量:21
4
作者 施杞 王拥军 +4 位作者 李晨光 周泉 胡志俊 刘梅 周重建 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期142-146,共5页
目的探讨益气化瘀补肾方及拆方影响退变模型大鼠颈椎间盘细胞外基质中Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和相关代谢酶MMPs/TI MP mRNA的表达。方法采用RT-PCR法检测胶原和MMPs/TI MP mRNA表达,凝胶成像系统扫描仪对各条带进行扫描,计算机自动计算出... 目的探讨益气化瘀补肾方及拆方影响退变模型大鼠颈椎间盘细胞外基质中Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和相关代谢酶MMPs/TI MP mRNA的表达。方法采用RT-PCR法检测胶原和MMPs/TI MP mRNA表达,凝胶成像系统扫描仪对各条带进行扫描,计算机自动计算出光密度。结果与假手术组比较,模型组Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13mRNA表达明显升高(P<0.01);TI MP-1mRNA表达无明显统计学差异(P>0.05)。益气化瘀补肾方及其拆方可明显降低Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13mRNA的过度表达(P<0.01或P<0.05)。结论退变椎间盘的Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原mRNA表达增高,MMP-13mRNA的高表达和TI MP-1mRNA的低表达,MMPs/TI MP的比例失调,反映了退变椎间盘ECM合成和降解的失调。益气化瘀补肾方及拆方可能通过影响颈椎间盘组织胶原及相关代谢酶mRNA表达而延缓椎间盘的退变。 展开更多
关键词 益气化瘀补肾方 细胞外基质 胶原 基质金属蛋白酶 基质金属蛋白酶组织抑制剂 逆转录多聚酶链式反应
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Expression of Yes-associated protein in non-small cell lung cancer and its relationship with clinical pathological factors 被引量:18
5
作者 SU Li-li MA Wei-xia YUAN Jian-feng SHAO Yang XIAO Wei JIANG Shu-juan 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2012年第22期4003-4008,共6页
Background Yes-associated protein (YAP) plays an important role in signal transduction and gene transcription regulation in normal cells, with elevated and over-expressed YAP levels observed in various malignant tum... Background Yes-associated protein (YAP) plays an important role in signal transduction and gene transcription regulation in normal cells, with elevated and over-expressed YAP levels observed in various malignant tumors. The aim of this study was to investigate the expression of YAP in non-small cell lung cancer (NSCLC), and to study the possible relationship of YAP expression with the occurrence and development of NSCLC. Methods YAP expression was assessed in 40 cases of NSCLC tumor tissues by immunohistochemistry, and their protein and mRNA levels were evaluated through Western blotting and reverse transcription-polymerase chain reaction (PCR), respectively. Normal lung tissues obtained from the same patient were used as control. Statistical analysis was performed to correlate the YAP expression to clinical pathological factors, such as tumor type, stage and grade. Results YAP-positive expression was found in 28 (70%) of the 40 cases of NSCLC, which included 10 cases of squamous cell carcinoma (25%), 17 cases of adenocarcinoma (42.5%) and 1 case of squamous adenocarcinoma (2.5%). In the 28 YAP-positive cases, 19 cases showed lymph node metastasis and were classified in TNM stage II + III (47.5%); the other nine cases showed no lymph node metastasis (22.5%) and were classified in the TNM stage I. There was no relationship between YAP expression and patients' age, gender or tumor histological grades. However, YAP showed significant over expression in late period of T stage (P=0.012), TNM stage (P=0.039), and lymph node metastasis (P=-0.013), respectively. Notably, YAP-positive expression was significantly higher in adenocarcinoma than that in squamous cell carcinoma (P=0.041). Conclusions Over-expression of YAP was associated with NSCLC, especially lung adenocarcinoma. The high YAP expression in late period of tumor stage and lymph node metastasis may indicate that YAP expression could be an early marker for NSCLC tumorigenesis. 展开更多
关键词 non-small cell lung cancer Yes-associatedprotein IMMUNOHISTOCHEMISTRY Western blotting reverse transcription-polymerase chain reaction
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复方丹参注射液防治大鼠环孢菌素A慢性肾毒性的实验研究 被引量:17
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作者 乔保平 唐孝达 +1 位作者 阮翘 李道明 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期611-614,共4页
目的 :从基因水平探讨复方丹参注射液防治环孢菌素A(CsA)慢性肾毒性的机理。方法 :大鼠灌服CsA及低盐饮食 2 8天 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)的方法观察肾内转化生长因子 β1(TGF β1)、肾素的mRNA表达及TGF β1、Ⅳ型胶原 (Colla... 目的 :从基因水平探讨复方丹参注射液防治环孢菌素A(CsA)慢性肾毒性的机理。方法 :大鼠灌服CsA及低盐饮食 2 8天 ,用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)的方法观察肾内转化生长因子 β1(TGF β1)、肾素的mRNA表达及TGF β1、Ⅳ型胶原 (CollagenⅣ )免疫组化的改变 ,并观察复方丹参注射液对上述改变的影响。结果 :CsA能诱导大鼠肾内TGF β1、肾素mRNA的高表达 ;并伴有CollagenⅣ肾内沉积增加。复方丹参注射液能减轻上述改变。结论 :复方丹参注射液对CsA的慢性肾毒性的防治与其减低肾素、TGF β1mRNA的高表达及减轻肾内CollagenⅣ的沉积有关。 展开更多
关键词 复方丹参注射液 环孢菌素A 肾毒性 逆转录聚合酶链式反应 实验研究
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人牙囊细胞的分离培养和生物学特性 被引量:13
7
作者 王浈 刘宏伟 +3 位作者 金岩 刘兰宁 刘源 轩昆 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2004年第9期490-493,共4页
目的 :应用酶消化法体外培养人牙囊细胞并研究其生物学特性。方法 :分离合法引产人胚胎乳牙胚的牙囊组织 ,消化法获得人牙囊细胞 ,HE染色观察细胞形态、免疫组织化学染色技术检测波形丝蛋白、Ⅰ型胶原表达 ,RT -PCR检测细胞的骨钙素、... 目的 :应用酶消化法体外培养人牙囊细胞并研究其生物学特性。方法 :分离合法引产人胚胎乳牙胚的牙囊组织 ,消化法获得人牙囊细胞 ,HE染色观察细胞形态、免疫组织化学染色技术检测波形丝蛋白、Ⅰ型胶原表达 ,RT -PCR检测细胞的骨钙素、骨涎蛋白、碱性磷酸酶的表达。结果 :原代培养的人牙囊细胞呈成纤维细胞形态 ,有部分上皮成分混杂 ,经纯化后可排除 ;在牙囊细胞中Ⅰ型胶原和波形丝蛋白的表达呈阳性 ,定位于细胞的胞质中 ;RT -PCR结果显示骨涎蛋白、骨钙素、碱性磷酸酶表达。结论 :体外培养的人牙囊细胞具有成纤维细胞的特性 ,具有合成Ⅰ型胶原的能力 ;不同程度表达Ⅰ型胶原、骨钙素、骨涎蛋白、碱性磷酸酶等矿化相关蛋白。 展开更多
关键词 人牙囊细胞 细胞培养 免疫细胞化学 反转录聚合酶链反应
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北京市某些医院内腹泻暴发与诺如病毒的相关性研究 被引量:18
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作者 贾立平 钱渊 +3 位作者 张又 陈冬梅 高燕 徐潜 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期213-217,共5页
目的确定2006年11~12月北京市某些医院内发生的住院患者腹泻爆发性流行的病原及其分子生物学特点。方法首先检测腹泻标本中轮状病毒抗原并用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒核酸检测,然后用塑转录-聚合酶链反应进行诺如病毒核酸检测... 目的确定2006年11~12月北京市某些医院内发生的住院患者腹泻爆发性流行的病原及其分子生物学特点。方法首先检测腹泻标本中轮状病毒抗原并用聚丙烯酰胺凝胶电泳进行轮状病毒核酸检测,然后用塑转录-聚合酶链反应进行诺如病毒核酸检测,对检测阳性标本进行诺如病毒VP1全基因的扩增;并对其中一例进行全基因克隆、测序和分析。另外对来自不同医院的2份阳性标本中的VP1的5'端部分序列进行测序分析。结果30份腹泻患者粪便标本中共有17份检测为诺如病毒阳性,总阳性率为56.7%,每一家医院送检标本的阳性率都在42.9%以上。对其中一份标本的诺如病毒VP1全基因序列测定和分析显示为GⅡ-4型诺如病毒。另2份标本中的部分序列测定显示与全基因序列高度保守,只有1个核苷酸的差异,因此也提示为GⅡ-4型诺如病毒。结论诺如病毒是北京地区医院内腹泻暴发的重要病原,此次暴发极可能是由GⅡ-4型诺如病毒引起。 展开更多
关键词 诺如病毒 医院内感染 逆转录-聚合酶链反应 序列分析
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抗纤益心方对扩张型心肌病大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响 被引量:17
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作者 王振涛 韩丽华 +2 位作者 朱明军 柴松波 曹程浩 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1496-1500,共5页
目的:探讨抗纤益心方(党参、黄芪、茯苓、白术、丹参、川芎、红花、赤芍、泽兰、益母草)抑制扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重构的机制。方法:采用自主饮用呋喃唑酮水溶液建立DCM大鼠模型,8周后,存活大鼠随机分成5组(每组14只)16周时,处死... 目的:探讨抗纤益心方(党参、黄芪、茯苓、白术、丹参、川芎、红花、赤芍、泽兰、益母草)抑制扩张型心肌病(DCM)大鼠心室重构的机制。方法:采用自主饮用呋喃唑酮水溶液建立DCM大鼠模型,8周后,存活大鼠随机分成5组(每组14只)16周时,处死动物。用免疫组化法(SP法)和逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果:模型组心肌间质内Ⅰ、Ⅲ型胶原大量增生,与正常组比较有显著差异性(P<0.05);中西药联用组、大剂量组心肌内Ⅰ、Ⅲ型胶原较模型组明显减少(P<0.05);大剂量组与卡托普利组比较无差别(P>0.05),与小剂量组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:DCM大鼠心肌呈明显纤维化,与Ⅰ、Ⅲ型胶原在心肌组织内较高的表达存在密切关系。抗纤益心方能够抑制心肌间质Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达,从而起到抑制心室重构的作用。 展开更多
关键词 抗纤益心方 扩张型心肌病 心室重构 Ⅰ、Ⅲ型胶原 免疫组化法 逆转录-聚合酶链反应
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补阳还五汤对脑出血大鼠脑内促血管生成素-1及其受体mRNA表达的影响 被引量:15
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作者 周华军 唐涛 +5 位作者 钟建华 罗杰坤 刘小娟 虢灿杰 杨期东 张海男 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期343-347,共5页
目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)及其内皮特异性受体(endothelial-specific receptor tyrosine kinase,Tie-2)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法160只SD大鼠随... 目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区促血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)及其内皮特异性受体(endothelial-specific receptor tyrosine kinase,Tie-2)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法160只SD大鼠随机分为正常组(10只)、假手术组(60只)、模型组(60只)、补阳还五汤(BYHWD)组(30只),通过立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U建立脑出血模型。其中正常组自由饮水,假手术组和模型组灌服蒸馏水,BYHWD组灌服补阳还五汤。采用免疫组化方法检测假手术组和模型组1、4、7、14、21、28天各时间点Ang-1及其受体表达位置变化。运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常组及其它各组造模术后1、4、7、14、21、28天各时间点Ang-1和Tie-2mRNA的动态变化。结果正常组和假手术组不同时间点Ang-1和Tie-2未见明显表达;模型组1-4天即有Ang-1/Tie-2阳性微血管段在血肿边缘表达,且从7天开始阳性微血管段逐渐伸入血肿区。模型组在脑出血术后1天Ang-1和Tie-2mRNA即有表达,到4天其表达仍然很微弱,与1天比较无明显的差异,随后两者表达逐渐增多,到28天时达到高峰(P〈0.05);补阳还五汤组在术后第7天开始两者的表达即显著高于模型组同-时间点水平(P〈0.05),且补阳还五汤组在术后21天即达到高峰(P〈0.01)。结论补阳还五汤能促进脑出血大鼠脑内Ang-1和Tie-2mRNA表达的上调,可能在脑出血后微血管系统重建过程中促进血管生成,从而促进损伤组织的修复。 展开更多
关键词 脑出血 促血管生成素-1 受体 补阳还五汤 逆转录聚合酶链式反应
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多发性肌炎/皮肌炎患者外周血单个核细胞中糖皮质激素受体α、β mRNA表达与糖皮质激素疗效相关性的研究 被引量:13
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作者 刘继峰 许爱娥 宋芳吉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期364-367,共4页
目的探讨多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中糖皮质激素受体(GR)正常表位α和突变体表位β mRNA表达与PM/DM患者对糖皮质激素(GC)疗效的相关性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对18例GC治疗敏感、10例GC... 目的探讨多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)患者外周血单个核细胞(PBMC)中糖皮质激素受体(GR)正常表位α和突变体表位β mRNA表达与PM/DM患者对糖皮质激素(GC)疗效的相关性。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对18例GC治疗敏感、10例GC治疗抵抗的PM/DM患者PBMC中GRα、β mRNA的表达水平进行了检测,同时采用放射免疫分析法测定血清中的皮质醇含量,并与20例正常对照进行比较。结果血清皮质醇含量在GC治疗敏感和抵抗的PM/DM患者及正常对照间差异均无统计学意义(均P>0.05)。GC治疗敏感和抵抗的PM/DM患者PBMC中GRα mRNA的表达水平均显著低于正常对照(均P<0.01),且GC治疗抵抗的PM/DM患者显著低于GC治疗敏感的PM/DM患者(P<0.05)。GC治疗敏感和抵抗的PM/DM患者PBMC中GRβ mRNA的表达均显著高于正常对照(均P<0.05),但在GC治疗敏感和抵抗的PM/DM患者间则差异无统计学意义(P>0.05)。结论GRα mRNA表达水平降低可能与PM/DM患者对GC治疗抵抗相关,GRβ mRNA表达水平在PM/DM患者的GC治疗抵抗中无显著作用。 展开更多
关键词 多发性肌炎/皮肌炎 糖皮质激素受体 糖皮质激素 逆转录-聚合酶链反应
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应用RT-PCR分子检测技术快速检测大蒜普通潜隐病毒 被引量:16
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作者 张威 张匀华 +2 位作者 李学湛 高艳玲 白艳菊 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期133-137,共5页
根据大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus,GCLV)的外壳蛋白区域的保守序列设计合成一对寡核苷酸引物,以带毒植物的总RNA为模板,进行反转录和PCR扩增,通过反应体系和反应程序的建立与优化,扩增得到长300 bp的目的片段,并将目的... 根据大蒜普通潜隐病毒(Garlic common latent virus,GCLV)的外壳蛋白区域的保守序列设计合成一对寡核苷酸引物,以带毒植物的总RNA为模板,进行反转录和PCR扩增,通过反应体系和反应程序的建立与优化,扩增得到长300 bp的目的片段,并将目的片段转入大肠杆菌进行了克隆和序列测定。测序结果与GenBank中其他GCLV相应区域的序列同源性最高达98%。并对其检测的特异性和灵敏度进行了验证,从而建立了快速、灵敏、特异性强的GCLV分子生物学检测方法。 展开更多
关键词 大蒜普通潜隐病毒 反转录-聚合酶链式反应 病毒检测
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中国麻疹病毒疫苗株与野毒株鉴别方法的建立 被引量:15
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作者 周剑惠 王爽 +7 位作者 陈超 常新 刘桂艳 桃育晖 潘希平 张燕 许松涛 许文波 《中国疫苗和免疫》 CAS 2009年第4期310-315,共6页
目的研究建立一种简便快速的鉴别中国麻疹病毒疫苗株与野病毒的方法。方法在血凝素(Hemagglutinin)蛋白基因(H基因)上,寻找能将中国麻疹病毒疫苗株区别于野毒株的限制性内切酶酶切位点,并在包含此酶切位点的基因片段上设计逆转录-聚合... 目的研究建立一种简便快速的鉴别中国麻疹病毒疫苗株与野病毒的方法。方法在血凝素(Hemagglutinin)蛋白基因(H基因)上,寻找能将中国麻疹病毒疫苗株区别于野毒株的限制性内切酶酶切位点,并在包含此酶切位点的基因片段上设计逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)引物,同时对所建立的RT-PCR方法进行敏感性和特异性实验证明,对RT-PCR产物利用限制性片段长度多态性分析方法(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)进行酶切鉴定。结果该一步法RT-PCR方法比较敏感,至少能够检测4.64TCID50(50%组织培养感染剂量,Median Tissue Culture Infective Dose)麻疹病毒。而非麻疹病毒RT-PCR结果均未见阳性条带,说明RT-PCR方法特异。PCR产物经Af1Ⅱ酶切作用后,中国麻疹病毒疫苗株沪191与长47PCR产物均能被切成两个片段,分别为287bp和151bp,2株麻疹野病毒代表株均不能被Af1Ⅱ酶切。结论新建立的RT-PCR-RFLP是一种快速、简便的鉴别中国麻疹病毒疫苗株与野毒株的方法。 展开更多
关键词 麻疹病毒 疫苗株 野毒株 逆转录-聚合酶链反应 限制性片段长度多态性分析
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环磷酰胺对成年大鼠卵巢的损伤以及GnRHR在卵巢的表达 被引量:13
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作者 罗璐 杨冬梓 +3 位作者 王箴 莫亚勤 张清学 郑澄宇 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1714-1717,共4页
目的探讨化疗药物对卵巢的损伤及其可能机制。方法将成年SD大鼠分为2组:生理盐水组和环磷酰胺组。大鼠腹腔注射环磷酰胺;8周后固定一侧卵巢,连续切片,观察卵巢形态学改变并计数卵泡数目;免疫组化法检测GnRHR在卵巢的表达。RT-PCR法检测... 目的探讨化疗药物对卵巢的损伤及其可能机制。方法将成年SD大鼠分为2组:生理盐水组和环磷酰胺组。大鼠腹腔注射环磷酰胺;8周后固定一侧卵巢,连续切片,观察卵巢形态学改变并计数卵泡数目;免疫组化法检测GnRHR在卵巢的表达。RT-PCR法检测对侧卵巢GnRHR mRNA的表达。结果环磷酰胺可引起卵巢皮质区原始卵泡发生大量丢失,卵巢间质严重损害,血管发生特征性病理改变;局部发生纤维化。GnRHR mRNA和蛋白质可表达于大鼠卵巢。与对照组相比,环磷酰胺组颗粒细胞GnRHR蛋白表达减少;化疗组GnRHR mRNA表达量低于对照组(P<0.05)。结论GnRHR在化疗卵巢较低水平的表达,提示化疗晚期卵巢局部微环境的紊乱。 展开更多
关键词 环磷酰胺 卵巢 GnRHR 免疫组化 RT-PCR
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补阳还五汤对脑出血大鼠脑内血管内皮生长因子mRNA表达的影响 被引量:12
15
作者 刘小娟 唐涛 +5 位作者 罗杰坤 黄菊芳 杨期东 邢之华 齐勇 王玲 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 2007年第2期100-103,共4页
目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法以立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U,建立脑出血模型。95只SD大鼠随... 目的通过观察补阳还五汤对脑出血大鼠脑内损伤区血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤的作用机制。方法以立体定位向脑内苍白球注入Ⅶ型胶原酶0.5U,建立脑出血模型。95只SD大鼠随机分为正常组5只、假手术组、模型组、补阳还五汤(BYHWD)组各30只,BYH-WD组灌服补阳还五汤,运用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测正常组及其他组造模术后1,4,7,14,21,28d各时间点VEGF mRNA的动态变化。结果正常组及假手术组不同时间点VEGF mRNA未见明显表达;模型组、补阳还五汤组在脑出血术后1d即有表达,其后逐渐增多,模型组在术后21d达到高峰(P<0.01);而补阳还五汤组在术后14d即达到高峰(P<0.01),随后开始下降;从第7天开始补阳还五汤组即高于模型组(P<0.05)。结论补阳还五汤能促进脑出血大鼠脑内VEGF mRNA的表达,从而调整血管新生过程,这可能是其促进组织修复的机制之一。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑出血 血管内皮生长因子 逆转录聚合酶链式反应
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运动训练对大鼠出血性脑损伤BDNF基因及其蛋白表达的影响 被引量:12
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作者 李红玲 王马魁 +2 位作者 任力 陈维 李春岩 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期782-785,共4页
目的:观察运动训练对脑出血(ICH)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)及其蛋白表达的影响。方法:实验动物用健康雄性SD大鼠155只。其中120只随机分为3组:实验组(出血后运动n=40)、对照组(出血后不运动n=40)、假手术组(无出血不运动n=40只)。... 目的:观察运动训练对脑出血(ICH)大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)及其蛋白表达的影响。方法:实验动物用健康雄性SD大鼠155只。其中120只随机分为3组:实验组(出血后运动n=40)、对照组(出血后不运动n=40)、假手术组(无出血不运动n=40只)。各组又分为术后第7天、第14天、第21天、第28天共4个时相点,每个时相点5只用于免疫组化检测,5只用于RT-PCR检测。实验组大鼠于术后第72h开始跑笼训练,其余大鼠在标准笼内自由活动。另外35只随机分为脑出血后第6小时、第12小时、第24小时、第48小时、第72小时,假手术和正常组,每组5只,用于免疫组化和RT-PCR检测。结果:①免疫组化结果:BDNF阳性细胞表达为细胞浆着棕黄色,阳性细胞主要分布于血肿周围和大脑皮质的神经元。脑出血后第12hBDNF曾一度升高,第72h基本恢复正常。实验组随运动训练时间延长表达有上调趋势,第28d达高峰,较对照组相比有差异有显著性(P<0.05),实验组和对照组与假手术组相比差异有显著性(P<0.05)。②RT-PCR结果:实验组与对照组和假手术组的BDNFmRNA表达(第21—28d)相比差异有显著意义(P<0.05),但对照组与假手术组相比无显著性意义(P>0.05)。结论:BDNF参与了脑出血后神经可塑性的发生,运动训练可促进BDNF基因及其蛋白表达,从而改善神经功能。 展开更多
关键词 运动训练 脑出血 脑源性神经营养因子 免疫组化 反转录-聚合酶链式反应 神经可塑性
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补阳还五汤和其有效部位对大鼠脑缺血再灌注后IL-1β及相关因子表达的影响 被引量:13
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作者 张淑萍 梁燕 邓常青 《湖南中医药大学学报》 CAS 2007年第2期24-27,共4页
目的研究补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素1β(IL-1)β及其相关因子mRNA表达的影响。方法采用颈内动脉线栓法建立大鼠MACO再灌注模型,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定缺血脑组织IL-1β、IL-1R1、IL... 目的研究补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷对大鼠脑缺血再灌注后白细胞介素1β(IL-1)β及其相关因子mRNA表达的影响。方法采用颈内动脉线栓法建立大鼠MACO再灌注模型,以逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定缺血脑组织IL-1β、IL-1R1、IL-1ra、ICAM-1 mRNA的表达。结果脑缺血2h再灌注22h后,模型组IL-1β、IL-1R1、IL-1ra和ICAM-1 mRNA表达较假手术组均显著增强(P<0.05和P<0.01)。补阳还五汤组IL-1β表达显著高于假手术组(P<0.05),而生物碱组和苷组较模型组有所降低;补阳还五汤组IL-1R1表达较模型组显著降低(P<0.05),而生物碱组和苷组IL-1R1表达均显著高于假手术组(P<0.05),与模型组接近。补阳还五汤组、生物碱组和苷组IL-1ra表达均显著高于假手术组(P<0.05和P<0.01)。补阳还五汤组、生物碱组、苷组ICAM-1表达低于模型组(P<0.05)。结论补阳还五汤及其有效部位生物碱、苷通过抑制IL-1β、IL-1R1I、CAM-1 mRNA的表达,从而减少炎症因子及炎症介质的表达,对缺血脑组织起保护作用。各药对脑缺血后IL-1ra表达无影响。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血再灌注 IL-1Β IL-11型受体 IL-1受体拮抗剂 细胞间黏附因子-1 逆转录 聚合酶链式反应 大鼠 黄芪 赤芍 当归 地龙
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传染性法氏囊病病毒中国强毒株A节段cDNA基因的克隆和序列分析 被引量:8
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作者 胡子信 张曼夫 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期330-338,共9页
以来自哈尔滨传染性法氏囊病病毒(IBDV) 强毒株(Harbin 毒株,H) 的基因组RNA为模板,用反转录聚合酶链反应(RT- PCR) 的方法得到了其A 节段的全长cDNA 片段,分5'端(1 659bp) 和3'端(1 ... 以来自哈尔滨传染性法氏囊病病毒(IBDV) 强毒株(Harbin 毒株,H) 的基因组RNA为模板,用反转录聚合酶链反应(RT- PCR) 的方法得到了其A 节段的全长cDNA 片段,分5'端(1 659bp) 和3'端(1 444bp) 上下两段分别克隆到pGEMB○R - T 载体上,测定了其核苷酸顺序,在长为3 101 bp 中含有两个阅读框ORFA1 和ORFA2 ,分别编码1 012 个氨基酸的前体蛋白(VP2 - 4 -3) 和145 个氨基酸的VP5,ORFA1 和ORFA2 有部分的重叠。将核苷酸序列及推测出的氨基酸序列与已报道的IBDV 血清Ⅰ型和Ⅱ型毒株的相应序列进行了比较,结果表明:H 毒株与其它血清Ⅰ型毒株之间,在核苷酸水平上存在25bp - 267bp 的差异;在氨基酸水平上存在17 ~40 个氨基酸的差异。在VP2 - 4 - 3 内比较显示,H 毒株与P2 、Cu- 1 之间氨基酸的差异最小为1 .7% ,H 毒株与UK661 之间氨基酸的差异最大为3 .9 % 。变异主要发生在VP2 的可变区(206 - 350 位氨基酸) ,在H 毒株所特有的12 个氨基酸当中,该区就占5 个,代表1 .76 % 的变异。VP4、VP3 展开更多
关键词 PT-PCR 序列分析 IBDV 疫苗 基因克隆
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人神经元特异性烯醇化酶在肿瘤细胞系中的表达检测及意义 被引量:12
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作者 张青云 徐建军 王雅明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期728-731,共4页
目的探讨从蛋白及细胞水平检测人神经元特异性烯醇化酶(NSE)在非神经内分泌性肿瘤细胞系中的表达及其意义。方法用NSE特异引物和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、蛋白印迹、免疫细胞化学(ICC)染色技术检测NSE在肿瘤细胞中的表达。结果从转... 目的探讨从蛋白及细胞水平检测人神经元特异性烯醇化酶(NSE)在非神经内分泌性肿瘤细胞系中的表达及其意义。方法用NSE特异引物和逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、蛋白印迹、免疫细胞化学(ICC)染色技术检测NSE在肿瘤细胞中的表达。结果从转录蛋白及细胞水平都能从黑色素瘤细胞株WM451和WM983A、前列腺癌高转移细胞株PC3M和低转移细胞株PC3、乳腺癌细胞株MCF7、结直肠癌细胞株HT29和SL180、胃癌细胞株MGC803中检测到NSE的表达,阳性率为100%。结论NSE除在神经内分泌细胞表达外,在肿瘤细胞亦有更为广泛的表达谱,其作为神经内分泌来源肿瘤标志物的作用值得深入研究。 展开更多
关键词 人神经元特异性烯醇化酶 肿瘤细胞系 基因表达 神经内分泌细胞 肿瘤标志物
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大鼠肝硬化形成过程中肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7水平动态的变化 被引量:8
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作者 俞蕾敏 吕宾 +1 位作者 李善高 斯淑英 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第30期3163-3167,共5页
目的:观察实验性大鼠肝硬化形成过程中,肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7水平的动态变化,研究三者在肝硬化发生过程中的作用及机制.方法:以SD大鼠为实验对象,于实验开始时处死6只大鼠作为wk 0正常对照组,剩余大鼠,600 mL/L四氯化碳3 mL/kg,sc,... 目的:观察实验性大鼠肝硬化形成过程中,肝组织TGF-β1,Smad3,Smad7水平的动态变化,研究三者在肝硬化发生过程中的作用及机制.方法:以SD大鼠为实验对象,于实验开始时处死6只大鼠作为wk 0正常对照组,剩余大鼠,600 mL/L四氯化碳3 mL/kg,sc,2次/ wk,复制肝硬化动物模型.于wk 3,6,9,12各处死一批大鼠,用RT-PCR检测动物肝组织中TGF-β1,TGF-βRⅡ的mRNA表达水平,Western blot检测肝组织中Smad3,Smad7蛋白水平,免疫组织化学方法检测动物肝组织中TGF-β1的表达和定位.结果:正常肝组织中有少量TGF-β1,TGF-βRⅡ的mRNA表达.随着肝纤维化及肝硬化的形成,模型组wk 0,3,6,9,12,TGF-β1,TGF-βRⅡ和Smad3表达量分别逐渐递增(TGF-β1:0.19±0.12,0.29±1.02,0.89±0.23,0.98±0.77,1.7±1.00;TGF-βRⅡ:0.30±0.22,0.49±0.16,1.02±0.33,1.51±0.72,2.14±1.02;Smad3:0.44±0.24,0.84±0.69,1.10±0.16,1.40±0.12,1.75±1.05),Smad7表达量呈逐渐减少(1.35±0.12,1.09±0.78,1.14±0.31,1.11±0.91,0.74±1.21).正常肝组织TGF-β1可见少量表达,主要在中央静脉周围肝细胞中.随着肝纤维化及肝硬化的形成,TGF-β1表达增强(P<0.01).结论:随着肝硬化的形成,肝脏中TGF-β1,TGF-βRⅡ和Smad3表达增加,Smad7表达下降. 展开更多
关键词 肝硬化 转移生长因子-Β1 SMAD3 Smad7逆转录聚合酶链式反应 免疫印迹
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