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姜黄素调控炎症对内皮细胞增殖凋亡的影响 被引量：4
1
作者 薛君力 代喆 +4 位作者 邓浩华 陈小奇 孙家忠 钟绍 徐焱成 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2013年第9期536-540,共5页
目的明确姜黄素对炎症诱导的血管内皮细胞损伤的保护机制。方法将人单核／巨噬细胞系（THP-1）分为空白对照组、高脂高糖组、高脂高糖＋姜黄素预处理组（高脂高糖浓度为25mmol／L葡萄糖＋500μmol／L棕榈酸），分别给予相应处理24h，更... 目的明确姜黄素对炎症诱导的血管内皮细胞损伤的保护机制。方法将人单核／巨噬细胞系（THP-1）分为空白对照组、高脂高糖组、高脂高糖＋姜黄素预处理组（高脂高糖浓度为25mmol／L葡萄糖＋500μmol／L棕榈酸），分别给予相应处理24h，更换培养基继续培养24h，利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清及实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）分析THP-1细胞内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的表达，同时将上清作用脐静脉血管内皮细胞（HUVECs），HUVECs分为空白对照组、空对照条件培养基组、高脂高糖条件培养基组、姜黄素处理条件培养基组，并行噻唑蓝法（MTT）检测HUVECs增殖、流式细胞仪检测凋亡，Westernblotting分析磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析。结果高脂高糖组THP-1细胞内受体相互作用蛋白140（RIPl40）、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中炎症因子TNF-α和IL-6浓度明显高于空白对照组（t=8．55、9．44、9．73、16．01、19．22，均P〈0．05）。相对于高脂高糖组，姜黄素预处理组THP-1细胞内RIPl40、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中TNF-α和IL-6浓度明显下降（t=3．59、5．96、5．59、6．95、23．91，均P〈0．05）；高脂高糖条件培养基组HUVECs细胞活力明显低于空对照条件培养基组（24h，1．22±0．07比1．85±0．14，t=6．58，P〈0．05；48h，1．72±0．02比2．49±0．09，t=10．08，P〈0．05），而姜黄素处理条件培养基组能够改善高脂高糖条件培养基对HUVECs增殖的抑制作用（24h，1．22±0．07比1．72±0．11，t=2．13，P〈0．05；48h，1．72±0．02比2．33±0．11，t=6．92，P〈0．05）；与空对照条件培养基组比较，高脂高糖条件培养基组能够明显增加HUVECs凋亡率、p-ERK表达及降低Bcl-2表达（t=9� 展开更多
关键词 姜黄素 受体相互作用蛋白140 炎症 血管内皮细胞
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RIP140在H2O2诱导MIN6细胞损伤中的作用机制研究 被引量：1
2
作者 薛君力 邓浩华 +5 位作者 曾姣娥 陈小奇 代喆 邹润梅 孙家忠 徐焱成 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期516-519,共4页
MIN6细胞给予400 μmol/L H2O2处理分为正常对照组、正常加H2 O2组、Scramble siRNA（Small interfering RNA）组和RIP140 siRNA组,400 μmol/L H2O2能增加MIN6细胞的凋亡率（27.89％±1.91％对3.74％±0.55％,P＜0.01）和丙二... MIN6细胞给予400 μmol/L H2O2处理分为正常对照组、正常加H2 O2组、Scramble siRNA（Small interfering RNA）组和RIP140 siRNA组,400 μmol/L H2O2能增加MIN6细胞的凋亡率（27.89％±1.91％对3.74％±0.55％,P＜0.01）和丙二醛含量[（35.17±6.26对20.07±1.86） nmol/mg,P＜0.05],明显减少MIN6细胞活力（24和48 h,均P＜0.01）、总超氧化合物歧化酶水平[SOD,（4.79±0.85对3.09±0.60） U/mg,P＜0.05].下调受体相互作用蛋白140（RIP140）表达能减少H2O2诱导的MIN6细胞凋亡率（11.45％ ±2.27％对30.39％±5.32％,P＜0.01）和丙二醛含量[（22.32±1.94对33.42±2.51）nmol/mg,P＜0.01],增加总SOD水平[（5.32±0.40对3.09 ±0.15）nmol/mg,P＜0.01）]. 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白140 过氧化氢 MIN6细胞 增殖 细胞凋亡
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RIP140在姜黄素抑制MIN6细胞凋亡中的作用机制
3
作者 薛君力 代喆 +1 位作者 曾姣娥 徐焱成 《国际内分泌代谢杂志》 2018年第3期154-157,162,共5页
目的 明确受体相互作用蛋白140 （RIP140）在姜黄素抑制胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡中的作用.方法 将MIN6细胞分为对照组、高糖高脂处理组、姜黄素干预组、O-RIP140-MIN6组（过表达RIP140细胞株）、GFP-MIN6组（对照细胞株）.除对照组外,... 目的 明确受体相互作用蛋白140 （RIP140）在姜黄素抑制胰岛β细胞株MIN6细胞凋亡中的作用.方法 将MIN6细胞分为对照组、高糖高脂处理组、姜黄素干预组、O-RIP140-MIN6组（过表达RIP140细胞株）、GFP-MIN6组（对照细胞株）.除对照组外,其余各组细胞给予25 mmol/L葡萄糖＋ 500μmol/L棕榈酸处理24 h.姜黄素干预组与O-RIP140-MIN6组、GFP-MIN6组均在25 mmol/L葡萄糖＋500 μmol/L棕榈酸处理24h前给予20 μmol/L姜黄素预处理2h.流式细胞仪检测细胞凋亡率、Western印迹检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、细胞外信号调节激酶（ERK）及其磷酸化水平.结果 与对照组相比,高糖高脂处理组RIP140蛋白表达、细胞凋亡率及ERK磷酸化水平均明显增加、Bcl-2表达下降（F=22.42～111.43,P均＜0.01）;与高糖高脂处理组相比,姜黄素干预组细胞凋亡率及RIP140蛋白表达均明显下降、ERK磷酸化水平明显降低,Bcl-2表达升高（F=22.42～111.43,P均＜0.01）;与GFP-MIN6组相比,O-RIP140-MIN6组细胞凋亡率明显升高（t=7.16,P＜0.01）、ERK的磷酸化水平升高（t=8.37,P＜0.01）,Bcl-2表达降低（t=5.88,P＜0.05）.结论 姜黄素通过下调RIP140的表达来抑制高糖高脂诱导的胰岛β细胞凋亡. 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白140 姜黄素 胰岛Β细胞 细胞凋亡
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受体相互作用蛋白140对吡格列酮改善胰岛β细胞糖脂毒性损伤的影响 被引量：2
4
作者 薛君力 曾姣娥 +2 位作者 代喆 彭湾湾 徐焱成 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1094-1099,共6页
目的探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)激动剂吡格列酮对胰岛β细胞糖脂毒性损伤的保护及受体相互作用蛋白140(RIP140)在其中的介导机制。方法将胰岛β细胞株MIN6细胞分为NC组、高糖高脂组、吡格列酮干预组。稳定过表达RIP140的M... 目的探讨过氧化物酶增殖活化受体-γ(PPAR-γ)激动剂吡格列酮对胰岛β细胞糖脂毒性损伤的保护及受体相互作用蛋白140(RIP140)在其中的介导机制。方法将胰岛β细胞株MIN6细胞分为NC组、高糖高脂组、吡格列酮干预组。稳定过表达RIP140的MIN6细胞(O-RIP140-MIN6)和过表达绿色荧光蛋白(GFP)的MIN6细胞(GFP-MIN6)。分别予高糖高脂(25 rmmol/L葡萄糖+500μmol/L棕榈酸)和/或10/μmol/L吡格列酮干预。利用MTT分别检测各组细胞增殖率、流式细胞仪检测凋亡率、RT-PCR检测RIP140 mRNA、Western blot检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达、硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)水平及黄嘌呤氧化酶法检测超氧化合物歧化酶(SOD)含量。结果 NC组、高糖高脂组及吡格列酮干预组MTT吸光值分别为:24 h(1.80±0.04)、(0.95±0.04)及(0.97±0.03);48 h(2.70±0.11)、(1.04±0.06)及(1.30±0.03)。NC组与高糖高脂组比较,差异有统计学意义(24 h:t=25.94,P<0.01,48 h:t=24.00,P<0.01)。高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,差异有统计学意义(48 h:t=9.37,P<0.01)。各组间的24 h凋亡率分别为(2.93±0.66)%、(48.08±3.95)%(vs NC组,t=19.54,P<0.01)及(31.38±3.92)%(vs高糖高脂组,t=5.20,P<0.01)。Bcl-2相对表达量分别为(1.14±0.06)、(0.42±0.02)(vs NC组,t=20.52,P<0.01)及(0.86±0.04)(vs高糖高脂组,t=17.71,P<0.01)。RIP140表达量分别为(1.13±0.11)、(2.34±0.21)(vs NC组,t=9.69,P<0.01)及(1.63±0.13)(vs高糖高脂组(t=5.03,P<0.01);高糖高脂组与NC组比较,MDA[(10.13±0.47vs(5.00±0.26)nmol/mg,t=16.57,P<0.01]、SOD[(5.15±1.07)协(12.25±1.25)nmol/mg,t=7.51,P<0.01]比较,差异均有统计学意义。高糖高脂组与吡格列酮干预组比较,MDA[(10.13±0.47)vs(7.83±0.36)nmol/mg,t=6.77,P<0.01]、SOD[(5.15±1.07)v5(8.74±0.59)nmol/mg,t=5.16,P<0.01)差异有统计学意义。O-RIP140-MIN6和GFP-MIN6细胞分别给予高糖高脂及吡格列酮处理后,两组MTT吸光值:24 h(1.04±0.07)vs(1.40±0.16)(t=5.01,P<0.01),48 h(1.16±0.13)vs(1. 展开更多
关键词 受体相互作用蛋白140 吡格列酮 胰岛Β细胞 糖脂毒性
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核受体相互作用蛋白140及其相关核受体辅助因子在足细胞高糖损伤中的表达分析
5
作者 薛君力 曾姣娥 +2 位作者 代喆 李兰芳 徐焱成 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期488-491,共4页
目的探讨核受体相互作用蛋白140(RIP140)及其相关核受体辅助因子在足细胞高糖损伤中的表达及可能作用。方法分离培养小鼠原代肾脏足细胞,分为对照组(Con)、浓度为25mmol/L甘露醇高渗组(MT)及浓度为25mmol/L葡萄糖高糖组(HG),流式细胞仪... 目的探讨核受体相互作用蛋白140(RIP140)及其相关核受体辅助因子在足细胞高糖损伤中的表达及可能作用。方法分离培养小鼠原代肾脏足细胞,分为对照组(Con)、浓度为25mmol/L甘露醇高渗组(MT)及浓度为25mmol/L葡萄糖高糖组(HG),流式细胞仪检测细胞凋亡率。分别提取细胞mRNA、总蛋白、核蛋白及胞浆蛋白,RT-PCR检测辅助活化因子PGC-1α、PGC-1β、SRC-1、SRC-2、SRC-3、PCAF及辅助抑制因子N-COR1、RIP140表达,Western blot分析细胞总蛋白、核内蛋白及胞浆蛋白内RIP140表达。结果 HG组足细胞凋亡率明显增加(t=6.72,P<0.01),HG组足细胞内核辅助活化因子PGC-1α(t=6.22,P<0.01)、PGC-1β(t=11.41,P<0.01)、SRC-1(t=4.92,P<0.01)、SRC-2(t=5.40,P<0.01)及PCAF(t=6.57,P<0.01)mRNA表达下降,RIP140 mRNA表达(t=6.36,P<0.01)升高,辅助活化因子SRC-3及辅助抑制因子N-COR1表达差异无统计学意义(P>0.05)。HG组足细胞总蛋白及胞浆蛋白中RIP140表达增加,而胞核内RIP140表达下降。结论 RIP140及其相关核受体辅助因子表达变化可能参与调控高糖对足细胞的损伤。 展开更多
关键词 足细胞 葡萄糖 核受体辅助因子 核受体相互作用蛋白140
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