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广东地区2782例妇女高危型人乳头瘤病毒感染阳性率和年龄段的关系 被引量:9
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作者 李亚红 李楠 +2 位作者 张珍 李泽泳 雷达 《分子诊断与治疗杂志》 2010年第2期112-114,共3页
目的探讨广东地区妇女高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)感染的阳性率和各年龄段的关系。方法回顾性分析2007年10月到2008年11月在本院妇科门诊就诊的妇女2782例。用实时多重荧光PCR技术对13种HR-HPV进行检测... 目的探讨广东地区妇女高危型人乳头瘤病毒(high-risk human papilloma virus,HR-HPV)感染的阳性率和各年龄段的关系。方法回顾性分析2007年10月到2008年11月在本院妇科门诊就诊的妇女2782例。用实时多重荧光PCR技术对13种HR-HPV进行检测,将筛查人群分为8个年龄段,分别计算阳性检出率,分析HR-HPV的阳性检出率和年龄段的关系,并以年龄段和阳性率的关系作图加以分析。结果在2782例中共检出HR-HPV564例阳性,阳性率为20.3%。HR-HPV的感染阳性检出率和年龄段相关,分别为36~40岁和46~50岁的两年龄段阳性检出率高。结论广东地区妇女HR-HPV的阳性检出率和年龄段相关,且以36~40岁和46~50岁的两年龄段阳性检出率高。 展开更多
关键词 高危型人乳头瘤病毒 实时荧光pcr 年龄 筛查
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实时荧光PCR和RT-PCR方法检测甲型流感病毒的比较 被引量:3
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作者 于雪晶 孟庆敏 王彬 《职业与健康》 CAS 2010年第11期1232-1233,共2页
目的比较实时荧光PCR检测(FQ-PCR)与RT-PCR在鉴定甲型流感病毒中的优劣,建立能快速简便、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法对200份临床采集的咽拭子样本进行FQ-PCR与RT-PCR检测,综合比较2种监测方法之间的差异。结果... 目的比较实时荧光PCR检测(FQ-PCR)与RT-PCR在鉴定甲型流感病毒中的优劣,建立能快速简便、特异地从临床标本中检测并鉴定流感病毒的新方法。方法对200份临床采集的咽拭子样本进行FQ-PCR与RT-PCR检测,综合比较2种监测方法之间的差异。结果 FQ-PCR检测200份临床咽拭标本,96份甲型阳性,阳性率为48.0%;从RNA提取到检测结果仅需3~3.5 h。RT-PCR检测200份临床咽拭标本,69份阳性,阳性率为34.5%;从RNA提取到检测结果约需8 h。结论 FQ-PCR方法快速、特异、灵敏,在甲型流感病毒检测中具有较大的应用价值。 展开更多
关键词 实时荧光pcr rt-pcr 甲型流感病毒
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ELISA法和RT-PCR法在麻疹病毒检测中的应用比较分析 被引量:12
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作者 褚文达 《标记免疫分析与临床》 CAS 2016年第11期1352-1354,共3页
目的探讨酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,RT-PCR)对疑似麻疹病例的麻疹病毒的检测,为疾病的尽早确诊及治疗提供实验依据。方法以上海市宝山区2014年4月至2015... 目的探讨酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)和实时荧光定量PCR(quantitative realtime PCR,RT-PCR)对疑似麻疹病例的麻疹病毒的检测,为疾病的尽早确诊及治疗提供实验依据。方法以上海市宝山区2014年4月至2015年12月的250例疑似麻疹病例为研究对象,采集其血清标本和咽拭子标本,分别应用ELISA法检测患者血清中的麻疹特异性的免疫球蛋白M(immunoglobulin M,Ig M)抗体和RT-PCR法检测咽拭子中麻疹病毒的核酸。结果 250例疑似麻疹病例,排除风疹病毒阳性的34例病例,其中麻疹病毒(measles virus,MV)Ig M抗体呈阳性的有80例,阳性率为37.04%;MV RT-PCR呈阳性的有128例,阳性率为59.26%。RT-PCR的检测阳性率显著高于Ig M检测(χ2=41.14,P<0.001)。结论 RT-PCR法可快速诊断麻疹病毒的病原学,且对出疹初期麻疹Ig M呈阴性的病例可进一步确诊,是一种有效可靠的方法。 展开更多
关键词 麻疹病毒 酶联免疫吸附试验 实时荧光定量pcr 血清 核酸
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应用实时荧光定量PCR技术快速检测甲型H1N1流感病毒 被引量:9
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作者 陈棋炯 孙永祥 +2 位作者 丁水军 傅丹青 戴城钢 《中国卫生检验杂志》 CAS 2010年第6期1394-1396,共3页
目的:对疑似甲型H1N1流感患者标本进行病毒核酸检测确诊,探讨实时荧光定量PCR检测方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法:采用WHO标准实时荧光定量PCR方法对2009年6月~12月萧山地区采集的436份疑似甲型H1N1流感患者咽拭子标本进行病... 目的:对疑似甲型H1N1流感患者标本进行病毒核酸检测确诊,探讨实时荧光定量PCR检测方法在流行性感冒检测诊断中的意义。方法:采用WHO标准实时荧光定量PCR方法对2009年6月~12月萧山地区采集的436份疑似甲型H1N1流感患者咽拭子标本进行病毒核酸检测,并对甲型H1N1流感病毒、甲1型流感病毒、甲3型流感病毒和乙型流感病毒进行快速分型。结果:436份咽拭子标本中有144份呈甲型H1N1流感病毒核酸阳性,阳性率33.03%,另检出甲1型流感病毒15份,甲3型流感病毒30份,没有检出乙型流感病毒。结论:实时荧光定量PCR方法操作方便、耗时短、特异性强、灵敏度高,可作为甲型H1N1流感疫情可靠的快速诊断方法。 展开更多
关键词 甲型H1N1流感病毒 实时荧光定量pcr rt-pcr 快速检测
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RT-PCR和实时荧光RT-PCR一步法检测大豆中菜豆荚斑驳病毒 被引量:9
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作者 廖芳 郭京泽 +2 位作者 刘鹏 张裕君 黄国明 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期141-145,共5页
针对进口大豆的菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)检测,建立了一步法RT-PCR和一步法实时荧光RT-PCR检测方法。依据BPMV的外壳蛋白编码基因设计了特异引物和特异Taqman探针,特异引物的扩增片段约为500bp,阳性质粒的实时荧光PC... 针对进口大豆的菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)检测,建立了一步法RT-PCR和一步法实时荧光RT-PCR检测方法。依据BPMV的外壳蛋白编码基因设计了特异引物和特异Taqman探针,特异引物的扩增片段约为500bp,阳性质粒的实时荧光PCR方法的检测下限为20fg/μL,是一步法RT-PCR方法的100倍,检测时间由约8 h缩短至4 h。种脐灰色斑驳的大豆种子BPMV检测呈阳性,种脐黑色斑驳的大豆种子BPMV检测呈阴性。 展开更多
关键词 大豆 菜豆荚斑驳病毒 一步法实时荧光rt-pcr 一步法rtpcr 检测
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西生菜中低污染量GⅡ型诺如病毒的富集与定量检测研究 被引量:8
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作者 管锦绣 许喜林 +3 位作者 翁文川 凌莉 刘静宇 冼钰茵 《食品安全质量检测学报》 CAS 2017年第9期3536-3542,共7页
目的优化新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒富集方法,比较实时荧光RT-PCR与微滴式数字RT-PCR检测方法,研究适用于新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒的定量检测方法。方法选取洗脱液种类、沉淀剂种类、沉淀剂作用温度及沉淀剂作用... 目的优化新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒富集方法,比较实时荧光RT-PCR与微滴式数字RT-PCR检测方法,研究适用于新鲜西生菜中低污染量的GⅡ型诺如病毒的定量检测方法。方法选取洗脱液种类、沉淀剂种类、沉淀剂作用温度及沉淀剂作用时间4个因素进行研究,以确定较优的GⅡ型诺如病毒富集条件。结合较优的富集条件,分别采用实时荧光RT-PCR方法和微滴式数字RT-PCR方法进行定量检测。结果病毒富集方法研究表明:洗脱液为牛肉膏-甘氨酸洗脱液、沉淀剂为PEG6000+PEG8000、沉淀剂作用温度为4℃,沉淀剂作用时间为4 h为较优条件,此时富集后的平均病毒浓度最高,平均回收率可达53.43%。实时荧光RT-PCR的检测限为1.44×10~4 copies/g;而微滴式数字RT-PCR的检测限为7.86×10~2 copies/g。结论通过优化西生菜中低污染量的GⅡ诺如病毒富集方法,比较实时荧光RT-PCR方法与微滴式数字RT-PCR方法定量检测病毒的效果,建立了适用于西生菜样品中低污染量GⅡ诺如病毒的定量检测方法。 展开更多
关键词 西生菜 GⅡ型诺如病毒 富集 实时荧光rt-pcr 微滴式数字rt-pcr
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实时荧光定量PCR及RT-PCR与常规PCR及RT-PCR检测对虾病毒效果的比较 被引量:3
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作者 沈飚 王忠发 +1 位作者 胡兴娟 顾松叶 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第3期30-36,共7页
常规PCR及RT-PCR已用于对虾DNA及RNA病毒检测,但存在费时、灵敏度较低、不能定量等问题。建立了TaqMan实时荧光定量PCR及RT-PCR方法,分别用于检测白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)及桃拉综合征病毒(TSV)、黄... 常规PCR及RT-PCR已用于对虾DNA及RNA病毒检测,但存在费时、灵敏度较低、不能定量等问题。建立了TaqMan实时荧光定量PCR及RT-PCR方法,分别用于检测白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)及桃拉综合征病毒(TSV)、黄头病毒(YHV)4种对虾病毒。与常规PCR及RT-PCR比较,所建立的TaqMan实时荧光定量PCR及RT-PCR检测上述4种对虾病毒不仅有很高的特异性,检测灵敏度也提高了10~100倍,同时还具有快速、简便、不污染环境、重复性好、实时定量等优点,可明显提高对虾病毒检验检疫工作质量及效率。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr/rtpcr 常规pcr/rtpcr 对虾病毒 检测效果 比较
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GⅡ型诺如病毒微滴式数字RT-PCR检测方法的建立及初步应用 被引量:3
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作者 管锦绣 翁文川 +4 位作者 许喜林 凌莉 冼钰茵 易蓉 李志勇 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2018年第5期222-228,共7页
为了建立快速准确的GⅡ型诺如病毒定量检测方法,本研究将微滴式数字RT-PCR技术应用于GⅡ型诺如病毒检测中,并与实时荧光RT-PCR法进行了比对。微滴式数字RT-PCR反应退火温度的优化实验确定了其最佳退火温度为56℃,实时荧光RT-PCR和微滴... 为了建立快速准确的GⅡ型诺如病毒定量检测方法,本研究将微滴式数字RT-PCR技术应用于GⅡ型诺如病毒检测中,并与实时荧光RT-PCR法进行了比对。微滴式数字RT-PCR反应退火温度的优化实验确定了其最佳退火温度为56℃,实时荧光RT-PCR和微滴式数字RT-PCR两种方法的灵敏度实验对比表明微滴式数字RT-PCR法检测GⅡ型诺如病毒的灵敏度为5.40 copies/μL,其灵敏度高于实时荧光RT-PCR法,重复性实验对比表明两种方法在检测中间浓度的GⅡ型诺如病毒时重复性均较好;人工污染西生菜实验中表明微滴式数字RT-PCR法最低检测限为54.00 copies/μL。本研究建立的GⅡ型诺如病毒的微滴式RT-PCR检测方法,灵敏度高,重复性良好,在人工污染西生菜GⅡ型诺如病毒的检测中表现理想,具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 实时荧光rt-pcr 微滴式数字rt-pcr GⅡ型诺如病毒 灵敏度 重复性 西生菜
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实时荧光PCR技术在手足口病病毒核酸检测中的应用 被引量:3
9
作者 陶力新 《职业与健康》 CAS 2010年第9期994-996,共3页
目的探讨实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测手足口病病毒核酸的应用价值。方法采集2009年5-8月奉贤区幼儿疑似肠道病毒感染者粪便和咽拭子标本,分别用实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对肠道病毒EV71、Cox... 目的探讨实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测手足口病病毒核酸的应用价值。方法采集2009年5-8月奉贤区幼儿疑似肠道病毒感染者粪便和咽拭子标本,分别用实时荧光RT-PCR和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对肠道病毒EV71、Coxsackie A16(CoXA16)病毒进行检测。结果在对38例疑似病例的粪便和咽拭子标本进行检测时,用实时荧光RT-PCR方法检测到EV71、CoXA16阳性标本为63份,阳性率为82.89%;而用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测到52份阳性标本,阳性率为68.42%。结论实时荧光RT-PCR技术具有特异性强、灵敏度高的特点,且能在采样后数小时内检测到病毒的RNA,从而达到快速诊断的目的。因此,该方法对肠道病毒的流行病学调查及控制起重要作用。 展开更多
关键词 手足口病 肠道病毒EV71 COXA16 实时荧光rt-pcr rt-pcr
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实时荧光定量PCR检测不同舌苔黏膜组织中PLOD1基因表达水平 被引量:2
10
作者 吴慧平 范媛 +2 位作者 丁兴 许冬青 詹瑧 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期249-251,255,共4页
目的应用实时荧光定量PCR检测不同舌苔黏膜组织中赖氨酰羟化酶(PLOD1)基因表达,分析该基因表达量与不同舌苔之间的关系。方法通过RT-PCR逆转录得到正常胎儿和五种病理性舌苔黏膜组织的cDNA,再经实时荧光定量PCR,测定PLOD1基因在不同舌... 目的应用实时荧光定量PCR检测不同舌苔黏膜组织中赖氨酰羟化酶(PLOD1)基因表达,分析该基因表达量与不同舌苔之间的关系。方法通过RT-PCR逆转录得到正常胎儿和五种病理性舌苔黏膜组织的cDNA,再经实时荧光定量PCR,测定PLOD1基因在不同舌苔黏膜组织的定量表达,观察其表达量的变化趋势。结果检测发现PLOD1基因在病理性舌黏粘膜组织中表达量递减趋势为:白薄苔组>黄薄苔组>黄厚苔组>白厚苔组>无苔组>正常组;其中再与无苔组PLOD1基因拷贝比值倍比分别呈2.97、2.68、2.21、1.50倍。结论PLOD1基因在病理性舌苔黏膜组织表达量的改变,影响舌苔性质。 展开更多
关键词 舌苔 实时荧光定量pcr 逆转录聚合酶链反应 赖氨酰羟化酶基因
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3种检测方法在出血热病原检测中的应用效果比较 被引量:1
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作者 魏卓超 张巍 +2 位作者 隋丹 邓晓丽 王盛 《中华卫生杀虫药械》 CAS 2020年第6期556-559,共4页
目的探究3种检测方法在出血热病原检测中的实际应用效果,为出血热防控提供科学准确的检测数据。方法参照《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》中的检测方法,以免疫荧光法(IFA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法... 目的探究3种检测方法在出血热病原检测中的实际应用效果,为出血热防控提供科学准确的检测数据。方法参照《全国肾综合征出血热监测方案(试行)》中的检测方法,以免疫荧光法(IFA)、酶联免疫吸附实验(ELISA)法、实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对2018—2019年鞍山市国家级监测点采集的宿主动物标本进行检测。结果利用IFA法在400份鼠肺标本中共检出30份鼠肺抗原阳性,带毒率为7.5%;用ELISA法在400份鼠血标本中共检出41份鼠血总抗体阳性,鼠感染率为10.25%;用RT-PCR法检测400份鼠肺标本,检出22株出血热阳性,4份灰区,PCR法阳性率为5.5%;3种方法两两配对卡方检验,对IFA法和ELISA法结果进行比较,差异无统计学意义(χa^2=3.70,P>0.05),将PCR法分别与IFA法和ELISA法的结果比较,差异有统计学意义(χb^2=4.08,χc^2=12.96,P<0.05);对3种方法进行筛选试验,RT-PCR法灵敏度和特异度更高。结论 3种方法各有特点,IFA法适合初步筛查性工作,ELISA法检测时间较短,RT-PCR方法较为精准。 展开更多
关键词 出血热 免疫荧光法 酶联免疫吸附实验(ELISA) 实时荧光定量pcr(rt-pcr)
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鲫血髓过氧化物酶的表达及其与血药浓度的关联性 被引量:1
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作者 刘腾飞 马荣荣 +3 位作者 肖艳翼 朱凤娇 杨先乐 胡鲲 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1332-1338,共7页
为了研究在吡喹酮代谢过程中,鲫血髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)m RNA表达与血药浓度的相关性,以体重为(80±10.5)g的鲫鱼(Carassius auratus)为试验动物,单剂量(10 mg/kg)口灌吡喹酮(praziquantel,PZQ)后,在鲫血液中选取β-ac... 为了研究在吡喹酮代谢过程中,鲫血髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)m RNA表达与血药浓度的相关性,以体重为(80±10.5)g的鲫鱼(Carassius auratus)为试验动物,单剂量(10 mg/kg)口灌吡喹酮(praziquantel,PZQ)后,在鲫血液中选取β-actin为内参基因,通过设计特异性引物,利用荧光定量PCR,分析了不同时间点鲫血MPO m RNA水平的相对表达量的变化;利用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定了吡喹酮在鲫鱼体内的血药浓度,分析两者之间的相关性。结果显示,吡喹酮能够迅速进入血液,并被快速消除,药时数据符合二室开放模型。在1 h时,血液中吡喹酮的浓度达到最大值,为2.85?g/m L,96 h后血液中检测不到吡喹酮;灌药后,MPO基因表达量随时间呈先升后降趋势,在1 h时髓过氧化物酶表达量最高。此外,0.25 h、0.5 h、1 h、3 h与6 h组与对照组差异性极显著(P<0.01),12 h组与对照组差异显著(P<0.05)。48 h与96 h组与对照组差异不显著(P>0.05)。相关性分析发现,MPO m RNA相对表达量与血液中吡喹酮的浓度之间相关系数r=0.96,为高度相关,并且推测MPO可能参与吡喹酮的氧化代谢。结论认为:(1)MPO m RNA相对表达量的升高与外源性药物吡喹酮的摄入有关。(2)血液中吡喹酮的残留量与MPO m RNA相对表达量线性相关。本研究旨在提供一种从分子水平评价水产动物体内药物残留的新思路。 展开更多
关键词 髓过氧化物酶 吡喹酮 荧光定量pcr 血药浓度 代谢
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