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RAPD在枇杷品种鉴定中的应用 被引量：45
1
作者 潘新法 孟祥勋 +1 位作者 曹广力 徐春明 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期136-138,共3页
运用RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA,即随机扩增多态性DNA)分析技术,对16个枇杷品种的基因组DNA进行RAPD分析,从几个随机引物中筛选出2个随机引物能从各个品种的基因组DNA扩增出DNA片段,在16个枇杷品种中2个引物扩增出19个DNA片段... 运用RAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA,即随机扩增多态性DNA)分析技术,对16个枇杷品种的基因组DNA进行RAPD分析,从几个随机引物中筛选出2个随机引物能从各个品种的基因组DNA扩增出DNA片段,在16个枇杷品种中2个引物扩增出19个DNA片段,其中3个为公共,16个为多态性或单态性DNA片段,表明不同枇杷品种基因型间存在着极为丰富的遗传多样性,扩增的DNA指纹图谱可将16个品种一一区分,为枇杷品种鉴定提供了新的方法,同时也为分子标记辅助育种提供了依据。 展开更多
关键词 rapd 枇杷 品种鉴定 DNA多态性
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利用RAPD-PCR方法鉴定我国烟粉虱的生物型(英文) 被引量：52
2
作者 邱宝利 任顺祥 +1 位作者 温硕洋 Nasser S.MANDOUR 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期605-608,共4页
收集了国内北京、山东、广东和海南等 14个省市 2 3个地区的蔬菜、园林花卉和杂草上的 2 3个烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)种群 ,根据报道合成了一个随机引物H1 6 ,运用RAPD PCR技术对所收集的烟粉虱种群进行了生物型鉴定。结果表明在... 收集了国内北京、山东、广东和海南等 14个省市 2 3个地区的蔬菜、园林花卉和杂草上的 2 3个烟粉虱Bemisiatabaci(Gennadius)种群 ,根据报道合成了一个随机引物H1 6 ,运用RAPD PCR技术对所收集的烟粉虱种群进行了生物型鉴定。结果表明在 2 3个烟粉虱种群中 ,有 17个种群同属于危害严重的“B生物型” ,这些种群主要分布在交通便利的城市或沿海地区 ,而非B生物型则主要分布在交通不便的山区或内陆。 展开更多
关键词 烟粉虱 生物型 鉴定 rapd—pcr 中国
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利用RAPD-PCR与ISSR-PCR标记技术分析长江口刀鲚的群体遗传结构 被引量：28
3
作者 张媛 胡则辉 +1 位作者 周志刚 陈亚瞿 《上海水产大学学报》 CSCD 北大核心 2006年第4期390-397,共8页
利用RAPD-PCR及ISSR-PCR两种分子标记技术对长江出海口两年3个群体的52条刀鲚（Goiliaectenes）进行群体遗传结构的分析。在3个群体中，利用RAPD-PCR标记技术，15个10bp随机引物共检测到110条带，多态性为0．490～0．657，Shannon多样... 利用RAPD-PCR及ISSR-PCR两种分子标记技术对长江出海口两年3个群体的52条刀鲚（Goiliaectenes）进行群体遗传结构的分析。在3个群体中，利用RAPD-PCR标记技术，15个10bp随机引物共检测到110条带，多态性为0．490～0．657，Shannon多样性指数为18．63～22．38，Nei平均遗传距离为0．1195～0．1454；而利用11个ISSR引物所获得的相应结果分别为67、0．576～0．682、11．56～13．66以及0．117～0．147。相关性分析表明这两种技术所获得的上述数据呈正相关（r=0．95，P〈0．05）。AMOVA结果显示，3个群体按采集时间划分成的两年之间的遗传变异不超过总变异的1．1％，同一年内群体间的遗传变异也分别只占总变异的6．99％（RAPD）和2．75％（ISSR-PCR），群体内各个体之间的遗传变异占总变异的96％（P〈0．0001），说明两年内所采集的3个群体之间基本上没有产生遗传分化。基于样品之间的Nei遗传距离所构建的Neighborjohing聚类图也清楚地显示出没有按采样的时间产生群体的遗传分化。对各样品之间的Nei遗传距离及Neighbor-joining聚类图分别经Mantel检测及支序分析，发现ISSR-PCR技术所获得的结果与RAPD-PCR技术的结果不存在明显的正相关，但ISSR-PCR标记技术具有在待测样品中能检测到高多态性等优点。 展开更多
关键词 刀鲚 遗传多样性 遗传变异 rapd ISSR-pcr AMOVA
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不同寄主植物上烟蚜DNA多态性的RAPD-PCR分析 被引量：19
4
作者 杨效文 张孝羲 +1 位作者 陈晓峰 王瑛 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期147-152,共6页
用RAPD-PCR技术研究了桃树、油菜和烟草上烟蚜的DNA多态性。结果表明,用相似性指数(SI)和Nei的遗传距离(D)及聚类分析对本研究筛选的三个引物OPX-04、OPX-06和OPX-19的扩增结果进行比较,除OPX-06的D值聚类可将各寄主植物上的烟蚜分开外... 用RAPD-PCR技术研究了桃树、油菜和烟草上烟蚜的DNA多态性。结果表明,用相似性指数(SI)和Nei的遗传距离(D)及聚类分析对本研究筛选的三个引物OPX-04、OPX-06和OPX-19的扩增结果进行比较,除OPX-06的D值聚类可将各寄主植物上的烟蚜分开外,其余均可将样本分为两类,即来自桃树的烟蚜和来自油菜、烟草上的烟蚜。这说明与桃树的烟蚜相比,在DNA水平上,油菜上的烟蚜与烟草上的烟蚜更为接近。结果还表明,在烟蚜的体色方面,与黄绿色相比,红色与褐色更为接近。 展开更多
关键词 烟蚜 rapd pcr 桃树 油菜 烟草 DNA 寄主植物
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正交试验设计在建立杜鹃花RAPD-PCR反应体系中的应用 被引量：22
5
作者 张丽 周兰英 +1 位作者 肖千文 吴开志 《北方园艺》 CAS 北大核心 2007年第5期124-126,共3页
利用正交试验对影响RAPD-PCR反应体系的各种因素进行研究,从而建立适合杜鹃花RAPD反应的最佳反应体系,最终选择杜鹃基因组RAPD-PCR的最佳扩增反应体系,即模板DNA80ng、随机引物0.5μmol/L、dNTPs1.1mmol/L、MgCl22.5mmol/L,1.2μmol/LTa... 利用正交试验对影响RAPD-PCR反应体系的各种因素进行研究,从而建立适合杜鹃花RAPD反应的最佳反应体系,最终选择杜鹃基因组RAPD-PCR的最佳扩增反应体系,即模板DNA80ng、随机引物0.5μmol/L、dNTPs1.1mmol/L、MgCl22.5mmol/L,1.2μmol/LTag—DNA聚合酶,buffer2μL,总反应体系20μL。试验设计的6个因子、5个水平中,Mg2+、dNTPs和引物的浓度是主要因子,其中Mg2+的浓度对试验的影响最大,dNTPs和引物浓度在较低的水平就可满足需要,高浓度并没有显著提高试验效果。 展开更多
关键词 杜鹃花 rapd--pcr 正交试验设计
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猕猴桃模板DNA的提取及RAPD-PCR最佳反应体系的建立 被引量：23
6
作者 陈万秋 李思光 +1 位作者 罗玉萍 陈少风 《生物技术通报》 CAS CSCD 2003年第3期40-43,共4页
以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会... 以改良CTAB法从猕猴桃叶片中制备模板DNA ,优化了PCR热循环参数 ,建立了RAPD PCR扩增的最佳反应体系。实验结果表明 ,CTAB提取液中EDTA组分的浓度对模板提取影响很大 ,其最适浓度为 80mmol/L ;用异丙醇沉淀后不经乙醇洗涤纯化的DNA不会影响扩增效果。PCR热循环参数为 :94℃预变性 5min ;94℃变性 1min ,37℃退火 1min ,72℃延伸 2min ,循环 4 0次 ;最后在 72℃延伸 6min。 展开更多
关键词 猕猴桃 模板DNA 提取 rapd-pcr 最佳反应体系
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RAPD-PCR对梨属植物品种鉴定的研究 被引量：13
7
作者 马兵钢 牛建新 +2 位作者 潘立忠 鲁晓燕 冯建荣 《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第1期84-88,共5页
用RAPD-PCR技术分析鉴定了梨属的18份品种材料(包括不同品种、杂交种和芽变种材料)。从OP系列8组共160个10碱基随机引物中,筛选出12种能很好地用于梨品种鉴定的引物。
关键词 rapd-pcr 梨属 品种鉴定 分子标记
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西花蓟马的SCAR分子检测技术 被引量：20
8
作者 孟祥钦 闵亮 +3 位作者 万方浩 周忠实 王文凯 张桂芬 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期323-330,共8页
西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)是一种世界性入侵害虫,寄主范围广,危害严重,2003年首次在我国发生危害,并有进一步扩散蔓延的趋势。针对蓟马类害虫虫体微小、形态相似,难以准确快速区分的问题,采用特征序列扩增区域(SCAR... 西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)是一种世界性入侵害虫,寄主范围广,危害严重,2003年首次在我国发生危害,并有进一步扩散蔓延的趋势。针对蓟马类害虫虫体微小、形态相似,难以准确快速区分的问题,采用特征序列扩增区域(SCAR)标记技术,以西花蓟马及与之同域发生的其他种类蓟马为对象,筛选出1对西花蓟马特异性引物(FOMF/FOMR),其扩增片段大小为320bp。种特异性检测结果显示,该对引物只对西花蓟马的基因组DNA具有扩增能力,对同域发生的花蓟马F.intonsa(Trybom)、禾花蓟马F.tenuicornis(Uzel)、烟蓟马Thripstabaci L.等41种蓟马不具有扩增效果。该对引物不仅对不同虫态的西花蓟马具有扩增能力,而且在西花蓟马发生地的寄主植物组织内亦检测到了其卵的存在。同时,该检测技术灵敏度高,对成虫的最低检出阈值为1/160头。本检测技术在口岸检疫以及花卉、蔬菜和种苗调运中的害虫检测和监测中具有重要意义。 展开更多
关键词 西花蓟马 rapd-pcr SCAR 快速检测 特异扩增 检出阈值
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红曲霉DNA提取及其RAPD-PCR反应体系的建立 被引量：13
9
作者 袁勇芳 许杨 +1 位作者 李思光 汤祖辉 《生物技术》 CAS CSCD 2002年第1期2-4,共3页
采用改进的氯化苄法对红曲霉DNA进行提取纯化 ,探讨了提取液中EDTA的浓度以及其他因素对提取结果的影响。同时 ,以该法提取的DNA为模板 ,采用正交实验优化RAPD分析最佳反应条件。结果表明 ,当提取液中EDTA浓度为 12 5mmol/l时 ,所得的... 采用改进的氯化苄法对红曲霉DNA进行提取纯化 ,探讨了提取液中EDTA的浓度以及其他因素对提取结果的影响。同时 ,以该法提取的DNA为模板 ,采用正交实验优化RAPD分析最佳反应条件。结果表明 ,当提取液中EDTA浓度为 12 5mmol/l时 ,所得的红曲霉DNA的质量和数量均较理想 ,每克红曲霉菌丝体 (湿重 )能提取到 5 0 μg的DNA ,分子量约为 2 5kb ,以此DNA为模板进行PCR扩增 ,其最佳反应体系为 :Mg2 + 2 0mmol/l,dNTPs 0 15mmol/l,Taq 0 0 5U/ μl,模板DNA 1 2ng/ μl,随机引物 0 36 μmol/l,Tris-HCl10mmol/lpH9 0 ,KCl 5 0mmol/l,NonidetP40 0 1%。另外 ,通过对比RNA酶消化前后的模板扩增结果证明了本实验酶的消化的必要性 ,对比了不同预变性时间处理模板对RAPD -PCR扩增的影响 ,发现不经过预变性的模板扩增结果最理想。 展开更多
关键词 红曲霉 rapd-pcr DNA提取 氯化苄法 反应体系
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鲤鱼耐寒性状研究 被引量：18
10
作者 常玉梅 孙效文 梁利群 《上海水产大学学报》 CSCD 2003年第2期102-105,共4页
用80个随机引物对黑龙江野鲤(耐寒)、柏氏鲤(不耐寒)和杂交F1(越冬成活)的群体混合DNA样品进行RAPD PCR扩增,结果引物S1043、S1052和S1066扩增出与抗寒性状相关的分子标记各一个。至此,共获得9个与鲤鱼抗寒性状相关的分子标记,进一步表... 用80个随机引物对黑龙江野鲤(耐寒)、柏氏鲤(不耐寒)和杂交F1(越冬成活)的群体混合DNA样品进行RAPD PCR扩增,结果引物S1043、S1052和S1066扩增出与抗寒性状相关的分子标记各一个。至此,共获得9个与鲤鱼抗寒性状相关的分子标记,进一步表明抗寒性是数量性状(QTL)受微效多基因控制。此外,就RAPD PCR实验中需要注意的问题如模板纯度、水的去离子和不同商标酶的活性等进行了简单的讨论;并对目前所应用的淡水鱼类抗寒基因工程研究策略及现状进行了简单概述。 展开更多
关键词 随机扩增多态性DNA—聚合酶链式反应 抗寒基因工程 抗冻蛋白 基因 性状 鲤鱼
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不同致害性褐飞虱种群的DNA多态性研究 被引量：15
11
作者 关秀杰 傅强 +2 位作者 王桂荣 赖凤香 张志涛 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期152-158,共7页
采用RAPD_PCR方法 ,对分别在水稻品种TN1、Mudgo和ASD7上纯化 82代的 3个不同致害性褐飞虱种群的基因组DNA多态性进行了分析。从 2 0 5个RAPD引物中筛选出了具种群特异性的引物 10个 ,结果表明 :尽管未达到统计意义上的显著差异 ,雌、... 采用RAPD_PCR方法 ,对分别在水稻品种TN1、Mudgo和ASD7上纯化 82代的 3个不同致害性褐飞虱种群的基因组DNA多态性进行了分析。从 2 0 5个RAPD引物中筛选出了具种群特异性的引物 10个 ,结果表明 :尽管未达到统计意义上的显著差异 ,雌、雄两性试虫种群间的遗传多样性一般高于种群内 ,种群内的多样性则以未经抗性品种筛选的TN1种群最高。用相似性系数进行类平均距离法聚类 ,能将同一致害性种群的各个个体与其他致害种群分开 ,雌、雄虫均无一例外 ,表明不同致害性种群间存在明显的遗传分化 ;同时雌、雄两性试虫分别归为 2组 ,提示褐飞虱致害性遗传可能与性染色体连锁。不同致害性种群存在特有条带 。 展开更多
关键词 褐飞虱 致害性 生物型 DNA多态性 rapd-pcr
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蘑菇分离物的DNA指纹鉴别 被引量：13
12
作者 罗信昌 《中国食用菌》 北大核心 2001年第3期3-4,共2页
按照植物病理学原则 ,蘑菇分离物应依据柯赫法则 (Koch’spostulate)回接。在一定条件下 ,人工诱发子实体得以鉴别。但是一些蘑菇种类 (如某些共生食用蘑菇 )难以人工诱发子实体 ,即使能形成子实体也费时费力。本文介绍DNA指纹鉴别技术 ... 按照植物病理学原则 ,蘑菇分离物应依据柯赫法则 (Koch’spostulate)回接。在一定条件下 ,人工诱发子实体得以鉴别。但是一些蘑菇种类 (如某些共生食用蘑菇 )难以人工诱发子实体 ,即使能形成子实体也费时费力。本文介绍DNA指纹鉴别技术 ,即运用RAPD -PCR技术制成分离物及对应子实体指纹图谱 ,分析它们间DNA同源性及遗传相似度以鉴别分离物真伪 ,探求快速 ;简便 ;有效的鉴别方法。 展开更多
关键词 蘑菇 分离物 rapd-pcr DAN图谱 指纹鉴别
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天敌对烟粉虱捕食作用的SCAR标记检测 被引量：16
13
作者 吕志创 张桂芬 +1 位作者 万方浩 邓国荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1167-1173,共7页
以烟粉虱和捕食性天敌为研究对象,采用特征序列扩增区域(SCAR)标记法,通过对目的片段的克隆与测序设计烟粉虱特征片段扩增引物,检验该引物的种、虫态及性别特异性,并利用该引物检测捕食性天敌对棉田烟粉虱的捕食作用。研究结果表明,利用... 以烟粉虱和捕食性天敌为研究对象,采用特征序列扩增区域(SCAR)标记法,通过对目的片段的克隆与测序设计烟粉虱特征片段扩增引物,检验该引物的种、虫态及性别特异性,并利用该引物检测捕食性天敌对棉田烟粉虱的捕食作用。研究结果表明,利用SCAR标记法获得了长度为347bp的烟粉虱特异性片段(GenBank登录号为AY841800),根据此片段的碱基序列设计烟粉虱特异引物1对TB-F/TB-R94585,其扩增片段约为240bp;种特异性检验结果表明,该引物只对烟粉虱具有扩增能力,对温室粉虱及其它相关种类不具有扩增效果;同时该引物对不同虫态、不同性别的烟粉虱具有同样的扩增效应。田间检测结果表明,同种天敌昆虫幼体捕食作用检出率高于成虫;在所检测的4类群9种捕食性天敌中,龟纹瓢虫幼虫、异色瓢虫幼虫、草蛉幼虫及东亚小花蝽成虫和蜘蛛对烟粉虱捕食作用的检出率高于50%。 展开更多
关键词 捕食作用 烟粉虱 SCAR标记 捕食性天敌 东亚小花蝽 特征序列 研究结果 序列设计 扩增片段 检验结果 种特异性 扩增效果 温室粉虱 检测结果 天敌昆虫 龟纹瓢虫 异色瓢虫 标记法 检出率 引物 幼虫 性别 虫态 成虫 棉田 田间
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苦瓜枯萎病菌的鉴定及其遗传多样性分析 被引量：18
14
作者 陈振东 袁高庆 +3 位作者 黎起秦 秦健 蒋雅琴 黄如葵 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期36-45,共10页
对分离获得的32株苦瓜枯萎病菌菌株进行形态学特征和寄主专化型测定，结果表明，测试的苦瓜枯萎病菌株均为尖孢镰刀菌苦瓜专化型（Fusariumoxysporumf．sp．momordicae），这些菌株可以侵染苦瓜和瓠瓜幼苗，但不侵染其他葫芦科瓜类作物... 对分离获得的32株苦瓜枯萎病菌菌株进行形态学特征和寄主专化型测定，结果表明，测试的苦瓜枯萎病菌株均为尖孢镰刀菌苦瓜专化型（Fusariumoxysporumf．sp．momordicae），这些菌株可以侵染苦瓜和瓠瓜幼苗，但不侵染其他葫芦科瓜类作物。对苦瓜枯萎病菌菌株的rDNA—ITS区（ITS1、5．8S和ITS2）序列进行扩增测序，结果显示其序列长度均为456bp；聚类分析表明测序菌株与镰刀菌属中尖孢镰刀菌不同专化型的菌株聚为一群。利用RAPD标记技术分析苦瓜枯萎病菌的遗传多样性，结果显示苦瓜枯萎病菌株与其他葫芦科瓜类作物枯萎病菌株间的遗传相似系数范围为0．59～0．99，当遗传相似系数为0．85时，供试的48个菌株分成10个类群（G1-10）。在RAPD聚类树中所有苦瓜枯萎病菌株聚在一个分支上（G，群），菌株间的遗传相似系数范围为0．92～1．00，具有较高的遗传相似性，且菌株的聚群与地理来源存在一定的相关性。 展开更多
关键词 尖孢镰刀菌苦瓜专化型 RDNA-ITS rapd-pcr 遗传多样性
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枯萎病尖孢镰刀菌的RAPD-PCR多态性分析 被引量：14
15
作者 曹宜 刘波 +2 位作者 林营志 朱育菁 周涵韬 《厦门大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第B08期74-79,共6页
利用随机扩增多态性DNA(RAPD PCR),对采自我省不同地区、不同寄主和同一寄主不同植株的瓜类枯萎病原菌尖孢镰刀菌进行遗传多样性分析,筛选到6个多态性随机引物,共产生了72条RAPD带,其中86.11%具有多态性;通过聚类分析,将供试菌株分为4个... 利用随机扩增多态性DNA(RAPD PCR),对采自我省不同地区、不同寄主和同一寄主不同植株的瓜类枯萎病原菌尖孢镰刀菌进行遗传多样性分析,筛选到6个多态性随机引物,共产生了72条RAPD带,其中86.11%具有多态性;通过聚类分析,将供试菌株分为4个RAPD组,确定了菌株间的亲缘关系,为瓜类枯萎病原菌尖孢镰刀菌的分类提供有利的分子证据. 展开更多
关键词 枯萎病 尖孢镰刀菌 rapd-pcr 多态性分析 随机扩增多态性DNA 瓜类
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利用RAPD-PCR技术区分4种仓虫幼虫的初步研究 被引量：13
16
作者 陈乃中 汤德良 刘永平 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期20-21,共2页
以花斑皮蠹、谷斑皮蠹、黑毛皮蠹和印度谷螟等４种仓储害虫的幼虫为材料，借用小麦ＤＮＡ提取方法提取了虫体的ＤＮＡ，用Ｅ１２、Ｅ１５、Ｅ１８、Ｇ１０和Ｇ１４等５种引物采用ＲＡＰＤＩ程序进行扩增。电泳检测结果显示，５种引物均... 以花斑皮蠹、谷斑皮蠹、黑毛皮蠹和印度谷螟等４种仓储害虫的幼虫为材料，借用小麦ＤＮＡ提取方法提取了虫体的ＤＮＡ，用Ｅ１２、Ｅ１５、Ｅ１８、Ｇ１０和Ｇ１４等５种引物采用ＲＡＰＤＩ程序进行扩增。电泳检测结果显示，５种引物均产生可用以区分这４种仓虫的扩增谱带。从ＤＮＡ提取到获得结果，只需４８ｈ。 展开更多
关键词 rapd-pcr 仓储 害虫 植物检疫
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瓢虫干标本基因组DNA的提取及RAPD分析 被引量：13
17
作者 张迎春 郑哲民 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期581-583,共3页
实验对保存多年的瓢虫干标本进行了基因组 ＤＮＡ提取和 ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增。结果显示 ＤＮＡ分子的提取与保存年代长短无直接关系；ＲＡＰＤ－ＰＣＲ增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，分子量大小约为 １９８４ｂｐ～６３０ｂｐ；不同种... 实验对保存多年的瓢虫干标本进行了基因组 ＤＮＡ提取和 ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增。结果显示 ＤＮＡ分子的提取与保存年代长短无直接关系；ＲＡＰＤ－ＰＣＲ增产物经琼脂糖凝胶电泳检测，分子量大小约为 １９８４ｂｐ～６３０ｂｐ；不同种瓢虫的 ＤＮＡ用同一引物，扩增片段是多态表现，同一种瓢虫的干标本保存时间虽不同，但扩增产物中均具有相同的ＤＮＡ片段。 展开更多
关键词 瓢虫 干标本 rapd-pcr DNA 基因组
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萝卜基因组DNA RAPD与ISSR-PCR反应体系优化 被引量：8
18
作者 宋贤勇 柳李旺 +3 位作者 龚义勤 王明霞 赵丽萍 黄丹琼 《种子》 CSCD 北大核心 2007年第2期1-5,共5页
对影响PCR反应的主要因子——模板DNA、引物、dNTPs和Mg^2＋浓度进行优化，建立起适合于萝卜基因组DNA的RAID和IssR反应体系。RAPD反应体系（18μl）为随机引物0．4～0．6μmol／L，dNTPs0．15～0．2mmol／L，Mg^2＋ 2．0mmol／L，模板D... 对影响PCR反应的主要因子——模板DNA、引物、dNTPs和Mg^2＋浓度进行优化，建立起适合于萝卜基因组DNA的RAID和IssR反应体系。RAPD反应体系（18μl）为随机引物0．4～0．6μmol／L，dNTPs0．15～0．2mmol／L，Mg^2＋ 2．0mmol／L，模板DNA10～40ng，TaqDNA聚合酶0．8U；ISSR反应体系（16-）为引物0．5μmol／L，dNTPs 0．16mmol／L，Mg^2＋ 2．5mmol／L，模板DNA10～40ng，TaqDNA聚合酶0．64U。对扩增程序中复性温度进行了梯度PCR试验，表明35～42℃（37℃）与52．4-58．3℃（55℃）分别适于萝卜基因组DNA的RAID．PCR和ISSR-PCR反应：应用优化的RAPD和ISSR反应体系对17个萝卜品种进行了鉴定分析。研究结果将为萝卜分子育种、品种鉴定与种子纯度检测提供重要的技术基础。 展开更多
关键词 萝卜 rapd-pcr ISSR-pcr 体系优化
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正交优化法建立奶牛基因组DNA RAPD-PCR最佳反应体系 被引量：10
19
作者 万海伟 张传生 杜立新 《生物技术通报》 CAS CSCD 2004年第3期45-47,共3页
从 36头荷斯坦奶牛血样中提取基因组DNA ,以相同DNA浓度混成DNA池。以其为模板 ,通过正交设计试验 ,建立了RAPD PCR最佳反应体系。
关键词 rapd-pcr 基因组 DNA 正交优化 奶牛 分子标记
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EMS对丽格海棠离体诱变的生物学效应 被引量：11
20
作者 徐美隆 张怀渝 +1 位作者 唐宗祥 任正隆 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期577-580,596,共5页
将不同浓度EMS处理的丽格海棠叶片作为外植体进行离体再生,以期获得性状优异的变异材料。结果表明:随EMS浓度的增加,其诱导率和增殖倍数降低,而变异率增加,0.4%(20℃,8h)EMS为丽格海棠叶片外植体再生的半抑制剂量,该浓度为诱变处理的适... 将不同浓度EMS处理的丽格海棠叶片作为外植体进行离体再生,以期获得性状优异的变异材料。结果表明:随EMS浓度的增加,其诱导率和增殖倍数降低,而变异率增加,0.4%(20℃,8h)EMS为丽格海棠叶片外植体再生的半抑制剂量,该浓度为诱变处理的适合浓度。对21株表型变异植株进行RAPD-PCR分析表明,有12株的电泳条带表现出多态性,进一步证明这些变异是由于基因组DNA的变异而引起的。 展开更多
关键词 EMS 丽格海棠 离体诱变 生物学效应 rapd-pcr
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