目的探讨清燥救肺汤(QJD)及其拆方对肺炎支原体(MP)感染小鼠肺组织Bax、Bcl-2、Caspase-3凋亡蛋白表达的影响。方法将Balb/c小鼠随机分成对照组、模型组、QJD组、QJD拆方I组、QJD拆方II组、阿奇霉素组。除对照组小鼠外,其余5组采用滴鼻...目的探讨清燥救肺汤(QJD)及其拆方对肺炎支原体(MP)感染小鼠肺组织Bax、Bcl-2、Caspase-3凋亡蛋白表达的影响。方法将Balb/c小鼠随机分成对照组、模型组、QJD组、QJD拆方I组、QJD拆方II组、阿奇霉素组。除对照组小鼠外,其余5组采用滴鼻法对实验Balb/c小鼠进行MP感染。透射电镜观察肺组织超微结构改变和细胞凋亡,运用免疫组织化学SP法和Western blotting法检测肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,并采用q RT-PCR法检测Caspase-3 m RNA的表达。结果 MP感染后,小鼠肺组织出现炎症改变,肺泡壁增厚、肺泡上皮细胞破坏、细胞浸润,并发现凋亡的特征改变。MP感染后的小鼠肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达明显升高,但是Bcl-2/Bax的值明显下降;与模型组相比,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组的Bcl-2的表达升高,Bcl-2/Bax的值也明显升高,Bax、Caspase-3的表达下降;QJD拆方II组与模型组比较各蛋白表达差异不明显。Caspase-3 m RNA检测结果显示,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组表达较模型组降低,QJD拆方II组的改变不明显。结论 QJD能够抑制MP感染诱导的细胞凋亡,Bax、Bcl-2可能为其效应靶点之一,其中QJD拆方I起主要作用。展开更多
建立清燥救肺汤中8个成分的超高效液相色谱含量测定方法;探索清燥救肺汤中具有抗氧化活性的相关化学物质基础。色谱柱为Waters Cortecs RP Shield C18(150 mm×2.1 mm,1.6μm),柱温30℃,流速0.30 m L·min^(-1),流动相为0.1%磷...建立清燥救肺汤中8个成分的超高效液相色谱含量测定方法;探索清燥救肺汤中具有抗氧化活性的相关化学物质基础。色谱柱为Waters Cortecs RP Shield C18(150 mm×2.1 mm,1.6μm),柱温30℃,流速0.30 m L·min^(-1),流动相为0.1%磷酸水(A)-乙腈(B);梯度洗脱程序(1)同时测定苦杏仁苷、甘草苷、芹糖甘草苷、芦丁和异槲皮苷等5个成分,检测波长为210、237和358 nm;梯度洗脱程序(2)同时测定甘草素、甘草酸和芝麻素等3个成分,检测波长为210和265 nm;通过2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS;)自由基清除实验和Probit模型得到10批清燥救肺汤清除自由基的IC_(50),与8个成分的含量进行相关性分析。所建立的含量测定方法线性关系良好(r>0.999),同时具有较好的重复性和稳定性,回收率在82.8%~112.4%之间。在系列浓度范围内,清燥救肺汤的浓度越高,自由基清除效果越强;芦丁和甘草酸的含量与清除自由基的IC_(50)呈显著性相关。本实验所建立的含量测定方法为合理科学地评价清燥救肺汤的质量提供了依据;清燥救肺汤具有抗氧化活性,与芦丁和甘草酸的含量呈显著性正相关。展开更多
文摘目的探讨清燥救肺汤(QJD)及其拆方对肺炎支原体(MP)感染小鼠肺组织Bax、Bcl-2、Caspase-3凋亡蛋白表达的影响。方法将Balb/c小鼠随机分成对照组、模型组、QJD组、QJD拆方I组、QJD拆方II组、阿奇霉素组。除对照组小鼠外,其余5组采用滴鼻法对实验Balb/c小鼠进行MP感染。透射电镜观察肺组织超微结构改变和细胞凋亡,运用免疫组织化学SP法和Western blotting法检测肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,并采用q RT-PCR法检测Caspase-3 m RNA的表达。结果 MP感染后,小鼠肺组织出现炎症改变,肺泡壁增厚、肺泡上皮细胞破坏、细胞浸润,并发现凋亡的特征改变。MP感染后的小鼠肺组织Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达明显升高,但是Bcl-2/Bax的值明显下降;与模型组相比,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组的Bcl-2的表达升高,Bcl-2/Bax的值也明显升高,Bax、Caspase-3的表达下降;QJD拆方II组与模型组比较各蛋白表达差异不明显。Caspase-3 m RNA检测结果显示,QJD组、QJD拆方I组及阿奇霉素组表达较模型组降低,QJD拆方II组的改变不明显。结论 QJD能够抑制MP感染诱导的细胞凋亡,Bax、Bcl-2可能为其效应靶点之一,其中QJD拆方I起主要作用。
