SPINDLY在壳寡糖诱导拟南芥抗丁香假单胞菌中的功能 被引量：5

1

作者 刘俊杰 贾晓晨 +2 位作者 赵小明 王文霞 尹恒 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期766-772,共7页

为了探讨拟南芥O-岩藻糖基转移酶(SPINDLY)在病原体相关分子模式诱导抗性中的作用,该研究以SPINDLY缺失拟南芥突变体spy-3为实验材料,从叶片表型、病情指数、病菌定殖量以及丁香假单胞菌(Pst DC3000)关键基因的表达水平等指标,系统考察... 为了探讨拟南芥O-岩藻糖基转移酶(SPINDLY)在病原体相关分子模式诱导抗性中的作用,该研究以SPINDLY缺失拟南芥突变体spy-3为实验材料,从叶片表型、病情指数、病菌定殖量以及丁香假单胞菌(Pst DC3000)关键基因的表达水平等指标,系统考察了SPINDLY在壳寡糖诱导拟南芥抗Pst DC3000中的功能。结果显示:(1)spy-3突变体比野生型更易被Pst DC3000侵染。(2)与病菌侵染组相比,壳寡糖预处理明显缓解植株叶片黄化现象,显著降低Pst DC3000的定殖量。(3)壳寡糖预处理的spy-3植株中水杨酸和茉莉酸途径相关基因的表达量及水杨酸和茉莉酸含量均较病菌侵染组明显升高。(4)壳寡糖在spy-3中的诱抗效果与野生型相比无明显差别。研究表明,SPINDLY在植物先天免疫过程发挥重要作用,但并不影响壳寡糖的诱导抗性。 展开更多

关键词 O-岩藻糖基化 壳寡糖 病原体相关分子模式 O-岩藻糖基转移酶 植物免疫 丁香假单胞菌(pst dc3000)

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丁香假单胞菌番茄致病变种(Pst DC3000)抗病机制研究进展

2

作者 王傲雪 田雨鑫 白怡潇 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期90-98,共9页

丁香假单胞菌番茄致病变种(Pst DC3000)是导致番茄细菌性叶斑病的主要病原体,严重威胁番茄产量和品质。Pst DC3000是一种局部感染的半生物营养性病原菌,其Ⅲ型分泌系统和冠状毒素生物合成与植物免疫抑制密切相关。Pst DC3000引发的植物... 丁香假单胞菌番茄致病变种(Pst DC3000)是导致番茄细菌性叶斑病的主要病原体,严重威胁番茄产量和品质。Pst DC3000是一种局部感染的半生物营养性病原菌,其Ⅲ型分泌系统和冠状毒素生物合成与植物免疫抑制密切相关。Pst DC3000引发的植物免疫反应涉及病原相关分子模式触发免疫和效应器触发免疫两个途径,共同增强植物对病原菌的防御能力,其中水杨酸和茉莉酸信号传导途径在植物免疫防御机制中发挥核心作用。活性氧作为关键信号分子,在植物免疫反应中起“双重作用”,其参与促进植物生长和逆境胁迫下的信号传导,因过量积累导致细胞程序性死亡。文章总结Pst DC3000的抗病机制,为探讨植物激素和活性氧在植物免疫中的作用机制提供新的思路和方法。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌 抗病机制 激素信号传导 水杨酸 茉莉酸 活性氧

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番茄SlWDR141基因的克隆及功能研究 被引量：4

3

作者 余佳 苗敏 +5 位作者 高兰阳 杨述章 邓恒 郭秀红 唐维 刘永胜 《中国科技论文》 北大核心 2017年第6期639-646,共8页

为研究番茄WD40蛋白基因(SlWDR141)的功能,对SlWDR141蛋白进行生物信息学分析,发现SlWDR141蛋白在进化过程中高度保守,与土豆的同源性最高。在克隆SlWDR141基因全长序列的基础上,构建了亚细胞定位和酵母双杂交表达载体,证实SlWDR141蛋... 为研究番茄WD40蛋白基因(SlWDR141)的功能,对SlWDR141蛋白进行生物信息学分析,发现SlWDR141蛋白在进化过程中高度保守,与土豆的同源性最高。在克隆SlWDR141基因全长序列的基础上,构建了亚细胞定位和酵母双杂交表达载体,证实SlWDR141蛋白主要定位在细胞核中,与DDB1具有相互作用。实时荧光定量PCR(real-time PCR)分析SlWDR141基因在组织中的表达谱,发现它在各个组织中均有表达,但在根中的表达量最高。为研究该基因的生物学功能,进一步构建了SlWDR141基因的干涉载体,用农杆菌介导法转化番茄得到转基因阳性番茄,荧光定量PCR鉴定出3个表达量下调的独立转基因株系。NaCl胁迫和Pst DC3000侵染野生型和转基因植株发现,转基因植株相对于野生型植株抗盐性和抗病性均下降,表明SlWDR141基因对盐胁迫和细菌侵染均起正调控作用。 展开更多

关键词 植物生理与分子生物学 WD40蛋白 番茄 酵母双杂交 转基因 盐胁迫 pst dc3000

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拟南芥T1N6_22在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能分析 被引量：3

4

作者 郝丛丛 郑会欣 +6 位作者 贾娇 司贺龙 陈展 赵斌 张靖 邢继红 董金皋 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期678-685,共8页

【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N6_22在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n6_22突变体和转基因回复突变体(t1n6_22/T1N6_22)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测... 【目的】明确拟南芥抗灰霉病基因T1N6_22在抗Pst DC3000过程中的功能,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【方法】对t1n6_22突变体和转基因回复突变体(t1n6_22/T1N6_22)接种Pst DC3000,检测其症状;采用间苯胺蓝染色法检测接种突变体中胼胝质的积累情况;测定接种叶片中Pst DC3000的生长量,明确T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中的功能。利用RT-PCR技术,检测SA、JA和ET对T1N6_22表达的影响及T1N6_22对抗病防御相关基因表达的影响;利用quantitative real-time PCR技术,检测Pst DC3000对T1N6_22及抗病相关基因表达的影响,分析T1N6_22影响拟南芥对Pst DC3000的抗性原因。【结果】t1n6_22突变体接种Pst DC3000后表现明显的抗病症状,而回复突变体t1n6_22/T1N6_22和拟南芥野生型表现明显的感病症状。SA处理拟南芥野生型,T1N6_22的表达量明显增强,经JA和ACC处理,该基因的表达量无显著变化。t1n6_22突变体中,PAL、PR4、PPO、SOD和CAT的表达水平均明显高于野生型Col-0和转基因回复植株。接种Pst DC3000后,拟南芥野生型中T1N6_22及抗病相关基因PR1、PR3、PR5和PDF1.2的表达量明显增强。【结论】T1N6_22在拟南芥抗Pst DC3000过程中起负调控作用,T1N6_22的表达受SA诱导,可能主要通过调节植物的次生代谢产物的分泌影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。 展开更多

关键词 T1N6_22 拟南芥 pst dc3000 抗病信号途径

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番茄SlWRKY1转录因子在植物生物和非生物胁迫中的调控 被引量：2

5

作者 张凝 高永峰 +1 位作者 孙晓春 刘永胜 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期435-440,共6页

克隆番茄SlWRKY1基因,构建植物过量表达载体pBI121-35S∷SlWRKY1并通过农杆菌介导的遗传转化法转化番茄,成功获得3株过量表达的转基因植株.研究发现:转基因植株对丁香假单胞菌番茄变种(Pst DC3000)的感染表现出敏感性,表明SlWRKY1基因... 克隆番茄SlWRKY1基因,构建植物过量表达载体pBI121-35S∷SlWRKY1并通过农杆菌介导的遗传转化法转化番茄,成功获得3株过量表达的转基因植株.研究发现:转基因植株对丁香假单胞菌番茄变种(Pst DC3000)的感染表现出敏感性,表明SlWRKY1基因可以减弱由Pst DC3000引起的植物防御反应,在相关信号通路中起到负调控作用.同时SlWRKY1转基因植株对盐胁迫表现出抗逆性,在胁迫条件下转基因植物中积累了大量的脯氨酸.推测SlWRKY1基因可能参与番茄脯氨酸代谢调控. 展开更多

关键词 番茄 WRKY转录因子 SlWRKY1 干旱胁迫 pst dc3000 盐胁迫

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异源表达胡杨PeBAK1;1基因增强烟草对Pst DC3000的抗性 被引量：2

6

作者 唐海 姚银安 +4 位作者 张国燕 李星 丁红霞 吴英青 高永峰 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期335-341,共7页

BAK1（BRI1-associated receptor kinase 1）是一个富亮氨酸重复序列（LRR）的膜受体蛋白激酶，除参与植物油菜素内酯信号的转导外，还可以结合其他的LRR-RLKs蛋白来启动植物的先天免疫反应. 为明确胡杨PeBAK1;1基因在烟草中抗Pst DC300... BAK1（BRI1-associated receptor kinase 1）是一个富亮氨酸重复序列（LRR）的膜受体蛋白激酶，除参与植物油菜素内酯信号的转导外，还可以结合其他的LRR-RLKs蛋白来启动植物的先天免疫反应. 为明确胡杨PeBAK1;1基因在烟草中抗Pst DC3000（丁香假单胞杆菌种番茄致病变种）的功能及其在植物抗病中的调控方式，克隆胡杨PeBAK1;1基因cDNA序列构建PeBAK1;1基因的过量表达载体pBI121-35S：：PeBAK1;1，并利用农杆菌介导法将其转化野生型烟草，筛选获得PeBAK1;1基因过表达的转基因烟草植株. 生物信息学分析结果表明胡杨PeBAK1;1蛋白具有植物SERK家族的全部结构特征，系统进化树分析表明胡杨PeBAK1;1与毛果杨PtBAK1的序列同源性最高；组织表达分析表明PeBAK1;1基因主要在根和叶中表达；Pst DC3000侵染试验结果显示，野生型烟草植株接种Pst DC3000后表现出明显的感病症状，而PeBAK1;1基因过表达的转基因烟草植株表现出明显的抗病症状；Real-time PCR及quantitative real-time-PCR分析结果表明，与野生型相比，转基因烟草中抗病防御相关基因PR1、PR3、PR4和PR5的表达量显著升高，且参与植物生长发育与先天防卫反应的基因BIR1和BON1的表达量也明显升高. 上述结果表明，异源表达胡杨PeBAK1;1基因在烟草抗Pst DC3000过程中起正调控作用，能够增强植物的抗病能力. （图6 表1 参31） 展开更多

关键词 PeBAK1 1 胡杨 烟草 抗病相关基因 pst dc3000

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番茄SlβCA3在防御丁香假单胞菌番茄致病变种中的功能 被引量：2

7

作者 方瀚墨 胡璋健 +4 位作者 马巧梅 丁淑婷 王萍 王安然 师恺 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第14期2740-2751,共12页

【背景】在全球气候变化的背景下,大气CO_(2)浓度的升高会影响植物病害的发生,进而影响农业生产。β型碳酸酐酶(βcarbonic anhydrase,βCA)是植物CO_(2)感应和浓缩系统中的重要组成元件,参与拟南芥和烟草的植物免疫过程,但在番茄(Solan... 【背景】在全球气候变化的背景下,大气CO_(2)浓度的升高会影响植物病害的发生,进而影响农业生产。β型碳酸酐酶(βcarbonic anhydrase,βCA)是植物CO_(2)感应和浓缩系统中的重要组成元件,参与拟南芥和烟草的植物免疫过程,但在番茄(Solanum lycopersicum)等园艺作物中的研究较少。【目的】通过探究番茄SlβCA3在抵御植物病害中的作用及机制,为番茄生产中的抗性调控提供科学依据。【方法】以拟南芥AtβCA氨基酸系列为参考序列,在番茄Sol genomics network数据库中鉴定到4个SlβCA。进一步以野生型(wild-type,WT)番茄‘Ailsa Craig’(AC)为材料接种丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,Pst DC3000),利用qRT-PCR技术测定叶片中SlβCA的表达量,筛选出受Pst DC3000诱导表达的基因SlβCA3。在此基础上,以AC为背景,利用农杆菌介导法进行番茄遗传转化,构建SlβCA3稳定过表达植株(OE-SlβCA3)。通过观察OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000后的抗性表型,明确SlβCA3在番茄抵御Pst DC3000过程中的作用。为了研究SlβCA3调控植物抗病性的内在机制,比较WT和OE-SlβCA3植株接种Pst DC3000与对照条件下转录组的变化,并利用KEGG数据库对差异基因进行功能分析,推测糖代谢与SlβCA3介导的免疫反应有关。最后,通过测定WT和OE-SlβCA3植株糖代谢及其信号途径相关基因表达量以及葡萄糖、果糖和蔗糖含量,对转录组结果进行验证及分析。【结果】OE-SlβCA3植株对Pst DC3000的抗性增强,接种Pst DC3000后,叶片中的细菌生长量、病斑数以及死细胞积累量明显减少。转录组测序结果显示,正常条件下,OE-SlβCA3植株转录谱没有发生明显变化;接种Pst DC3000后,在WT和OE-SlβCA3植株中检测到2100个Pst DC3000诱导基因,其中有63.3%的基因在OE-SlβCA3植株中表达量更高。KEGG分析结果显示,依赖于SlβCA3过表达的Pst DC3000诱导基因富集在糖代谢相关路� 展开更多

关键词 番茄 SlβCA 丁香假单胞菌番茄致病变种 抗病性 糖代谢 糖信号

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拟南芥AtBT4在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能 被引量：1

8

作者 郑旭 黄聪聪 +5 位作者 庞茜 藏金萍 曹宏哲 张康 董金皋 邢继红 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期32-36,共5页

为明确拟南芥AtBT4基因在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能,本研究检测AtBT4基因的T-DNA插入突变体bt4和bt4-1、回复突变体CE和超表达突变体OE对Pst DC3000的敏感性,结果发现,bt4、bt4-1突变体感病症状较为严重、病菌cfu值明显增强、胼... 为明确拟南芥AtBT4基因在抵抗Pst DC3000侵染过程中的功能,本研究检测AtBT4基因的T-DNA插入突变体bt4和bt4-1、回复突变体CE和超表达突变体OE对Pst DC3000的敏感性,结果发现,bt4、bt4-1突变体感病症状较为严重、病菌cfu值明显增强、胼胝质含量明显降低,表明AtBT4基因在拟南芥抵抗Pst DC3000侵染过程中发挥正调控的作用。利用Real-time PCR技术,检测野生型和突变体bt4、bt4-1、CE、OE接种Pst DC3000后SA、JA/ET信号途径关键基因ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达情况,发现bt4和bt4-1突变体中各基因的表达水平显著低于野生型、回复突变体和超表达突变体,表明AtBT4基因正调控ICS1、NPR1、JAR1、PDF1.2的表达。由此推测,AtBT4基因通过调控SA、JA/ET信号途径影响拟南芥对Pst DC3000的抗性。研究结果为进一步阐明AtBT4基因调控拟南芥抵抗Pst DC3000侵染的分子机制奠定了良好基础。 展开更多

关键词 拟南芥 AtBT4 pst dc3000 抗病信号途径

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拟南芥PUB10和PUB11基因抵抗丁香假单胞杆菌番茄致病变种DC3000株的功能分析 被引量：1

9

作者 余涛涛 李驰宇 +1 位作者 于峰 廖红东 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第6期1894-1901,共8页

丁香假单胞杆菌Pseudomonas syringae pv tomato(Pst)DC3000是研究植物免疫机制的常用病原菌。为分析拟南芥E3泛素连接酶PUB10、PUB11在免疫中的功能,本研究构建了pub10/pub11双突变体。在分析拟南芥PUB10、PUB11序列相似性和进化关系... 丁香假单胞杆菌Pseudomonas syringae pv tomato(Pst)DC3000是研究植物免疫机制的常用病原菌。为分析拟南芥E3泛素连接酶PUB10、PUB11在免疫中的功能,本研究构建了pub10/pub11双突变体。在分析拟南芥PUB10、PUB11序列相似性和进化关系的基础上,比较了pub10/pub11双突变体和Col-0对Pst DC3000的敏感性、MAPK磷酸化水平、ROS产生的影响,并检测JA信号响应途径和免疫防御相关的部分代表性基因的表达量。结果表明PUB10、PUB11氨基酸序列高度保守,pub10/pub11双突变体对Pst DC3000的侵染更敏感,侵染后叶片病原菌数目明显增多,MAPK磷酸化水平迅速下降,ROS释放量降低,JA信号响应基因(LOX3,JR2)、免疫防御负调控基因(NIMIN1,WRKY38,WRKY62,RIN4)表达量上升显著高于Col-0,而免疫防御正调控基因(AZI1,EDS1,PAD4,EDS5,FMO1,NPR1)表达量显著低于Col-0。由此推断,AtPUB10、AtPUB11在防御Pst DC3000中起正调控作用,并且存在功能冗余。研究结果为进一步探索PUB10、PUB11调控植物防御的分子作用机制和分子育种提供了依据。 展开更多

关键词 拟南芥 PUB10 PUB11 pst dc3000 功能分析

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番茄SlNBRP1基因的克隆及抗病性的研究 被引量：1

10

作者 黄曼 于淑坤 +2 位作者 张琳 刘永胜 苗敏 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2020年第8期1131-1135,共5页

作物病害是农业生产的主要限制因子之一,利用植物抗病基因(R基因)培育抗性品种是防治植物病害最环保、有效、直接的手段。植物体内绝大多数R基因编码含有卷曲螺旋结构、核苷酸结合位点和富含亮氨酸重复序列(coiled-coil nucleotide-bind... 作物病害是农业生产的主要限制因子之一,利用植物抗病基因(R基因)培育抗性品种是防治植物病害最环保、有效、直接的手段。植物体内绝大多数R基因编码含有卷曲螺旋结构、核苷酸结合位点和富含亮氨酸重复序列(coiled-coil nucleotide-binding site and leucine-rich-repeat,CC-NBS-LRR)结构域的蛋白质。文章通过酵母双杂筛选鉴定得SlNBRP1基因,利用植物基因工程技术,构建植物过表达载体pBI121-35S::SlNBRP1;通过农杆菌介导法,将SlNBRP1基因导入野生型番茄基因组中,得到转基因植株。通过生物信息学分析SlNBRP1蛋白序列,发现含有高度保守的CC结构域和NBS结构域。采用Real-time聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)分析转基因植株中SlNBRP1 mRNA的表达情况,结果显示SlNBRP1的表达量显著下调,表现出共抑制(co-suppression,CoR),即基因间相互作用引起的失活现象。番茄病原菌丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae pv.Tomato DC3000,Pst DC3000)侵染野生型和共抑制转基因植株发现,共抑制转基因植株抗病性下降且叶片菌量增加,表明SlNBRP1基因正调控植物对病原菌的免疫反应。该文为遗传育种改良作物抗病性增加了新的分子靶标。 展开更多

关键词 番茄 CC-NBS-LRR结构域 共抑制 pst dc3000 抗病性

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丁香假单胞菌番茄致病变种DC3000甘油激酶基因的克隆与功能研究 被引量：1

11

作者 刘晓柱 李银凤 +1 位作者 于志海 刘晓辉 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2018年第6期70-75,共6页

为研究丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pathovar tomato,Pst)DC3000甘油激酶(Glycerol kinase,GK)的功能,根据Gen Bank中登录的Pst DC3000 GK氨基酸序列设计引物,克隆了Pst DC3000 GK基因,对其生物信息学特征进行分析,... 为研究丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pathovar tomato,Pst)DC3000甘油激酶(Glycerol kinase,GK)的功能,根据Gen Bank中登录的Pst DC3000 GK氨基酸序列设计引物,克隆了Pst DC3000 GK基因,对其生物信息学特征进行分析,然后构建了GK基因敲除突变体,探讨其对菌体生理特性的影响。序列分析表明,GK基因全长1 506 bp,可编码一条501个氨基酸的多肽。生物信息学分析结果显示,Pst DC3000 GK蛋白分子质量55.8 ku,等电点5.54,富含无规卷曲结构。敲除Pst DC3000 GK后,可降低菌体在基本培养基与丰富培养基中的生长速率,增加细胞中甘油含量,同时也使菌体在拟南芥叶片上的增殖能力降低。因此,Pst DC3000 GK基因参与调控菌体的生长过程,影响菌体甘油代谢。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌番茄致病变种dc3000 甘油激酶 基因克隆 功能分析

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解淀粉芽孢杆菌B6对拟南芥拮抗病原菌Pst DC3000的作用研究

12

作者 王静 刘娜 +1 位作者 赵会君 尚洁 《北方农业学报》 2018年第4期82-86,共5页

为研究解淀粉芽孢杆菌B6能否帮助拟南芥抵抗病原菌Pst DC3000侵害,通过皿内拮抗及灌根和喷施盆栽实验,分析解淀粉芽孢杆菌B6对拟南芥拮抗病原菌Pst DC3000的效果。结果表明:解淀粉芽孢杆菌B6能够有效抑制病原菌Pst DC3000生长。观察施... 为研究解淀粉芽孢杆菌B6能否帮助拟南芥抵抗病原菌Pst DC3000侵害,通过皿内拮抗及灌根和喷施盆栽实验,分析解淀粉芽孢杆菌B6对拟南芥拮抗病原菌Pst DC3000的效果。结果表明:解淀粉芽孢杆菌B6能够有效抑制病原菌Pst DC3000生长。观察施加病原菌Pst DC3000后拟南芥叶片,并统计叶片中病原菌数量,发现经B6灌根或喷施预处理的拟南芥,叶片变黄萎蔫时间推后,叶片中病原菌数量显著低于对照组。可见,解淀粉芽孢杆菌B6对拟南芥有较好的拮抗Pst DC3000的作用。这为研究解淀粉芽孢杆菌B6防病机理奠定实验基础。 展开更多

关键词 解淀粉芽孢杆菌 拟南芥 pst dc3000

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转胡杨PeBAK1;2基因烟草的获得及对丁香假单胞杆菌抗性的分析

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作者 郭垚霖 唐海 +6 位作者 张秋媚 丁红霞 何增辉 李琦瑕 杨丰铭 张元珠 高永峰 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期4626-4634,共9页

BAK1(BRI1-ASSOCIATED RECEPTORKINASE1)是油菜素内酯信号途径上具有重要功能的植物受体激酶,参与细胞信号转导的许多过程和调控植物生长发育,其在胡杨中的同源基因有2个,分别为PeBAK1;1和PeBAK1;2。本研究克隆了在胡杨中的其中一个同... BAK1(BRI1-ASSOCIATED RECEPTORKINASE1)是油菜素内酯信号途径上具有重要功能的植物受体激酶,参与细胞信号转导的许多过程和调控植物生长发育,其在胡杨中的同源基因有2个,分别为PeBAK1;1和PeBAK1;2。本研究克隆了在胡杨中的其中一个同源基因PeBAK1;2,并在烟草中进行了超量表达,通过研究转基因株系对Pst DC3000的抗性表型,以及下游抗病相关基因的表达水平,揭示了PeBAK1;2基因在植物抗丁香假单胞杆菌中的作用和初步的调控机制。抗病表型实验结果显示:与野生型烟草植株相比,PeBAK1;2基因超表达的转基因烟草植株在接种Pst DC3000六天后表现出明显的抗病症状,且转基因叶片中单位面积内的细菌菌落数显著少于野生型;同时,与野生型相比,转基因烟草中与抗病防御相关的Marker基因PR3和PR5的表达量显著升高,且参与植物生长发育与先天防卫反应基因BIR1和BON1的表达量也明显升高;此外,组织表达模式分析实验结果表明,PeBAK1;2基因呈现出组成型的表达模式,但在根和叶片中的表达量较高,在茎中表达量较低。综上所述,我们的研究表明PeBAK1;2基因通过正向调控抗病相关基因和先天防卫反应基因的转录来提高PeBAK1;2转基因烟草对丁香假单胞杆菌的抗性。 展开更多

关键词 胡杨 PeBAK1 2 pst dc3000 转基因烟草 过量表达

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病原菌Pst DC3000侵染拟南芥导致自噬和光合作用的抑制 被引量：5

14

作者 杨柳 董浚键 陈文利 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期517-527,共11页

在病原菌侵染下,植物体是如何通过超敏反应限制病原菌扩增的,到目前为止还不清楚。最近的研究显示自噬起了必要的作用,可见,研究自噬和超敏反应的机制非常重要。本研究通过观察在非寄主病原菌突变体丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomona... 在病原菌侵染下,植物体是如何通过超敏反应限制病原菌扩增的,到目前为止还不清楚。最近的研究显示自噬起了必要的作用,可见,研究自噬和超敏反应的机制非常重要。本研究通过观察在非寄主病原菌突变体丁香假单胞菌番茄致病变种(Pseudomonas syringae pv.tomatoDC3000,Pst DC3000)的侵染下,拟南芥光合功能的变化及自噬现象出现的情况,以为进一步研究植物抗病机理提供实验基础。以野生型拟南芥为材料,采用光谱分析和叶绿素荧光成像分析手段,研究不同浓度的Pst DC3000侵染对拟南芥离体叶片光合功能的影响;以转基因野生型拟南芥(绿色荧光蛋白标记的自噬基因8a)幼根为材料,应用共聚焦显微镜,研究不同浓度的Pst DC3000诱导拟南芥自噬的情况。实验发现,OD600=0.2的Pst DC3000侵染,可显著诱导拟南芥叶片活性氧的积累和迸发,并会引起拟南芥叶片光合作用效率的下降。同时发现,该病原菌处理2 h,可导致拟南芥根中自噬小体的产生。用2',7'-二氯二氢荧光素二乙酯(2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate,H2DCFDA)标记活性氧,检测了Pst DC3000作用下叶片活性氧产生量的变化,发现,在OD600=0.2的Pst DC3000作用下,90 min内,叶片组织中的活性氧产生了明显的积累。以上结果说明:Pst DC3000侵染叶片,导致了活性氧迸发和光合系统的受损,进而推测这两个结果具有相关性;在植物与病原菌的互作系统中,光合系统的变化规律可以作为典型的指标来加以检测。 展开更多

关键词 丁香假单胞菌番茄致病变种 拟南芥 光合功能 细胞自噬 活性氧

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番茄叶片酵母双杂交cDNA文库的构建及Pti互作蛋白筛选 被引量：2

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作者 王洋 王莹莹 +3 位作者 张政 冯国栋 周宇 牛向丽 《合肥工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第10期1420-1424,共5页

酵母双杂交技术作为检测蛋白质之间相互作用的有效手段,不仅能验证与已知蛋白质的相互作用,还可从文库中筛选与特定蛋白互作的未知蛋白。文章为研究番茄抗病相关蛋白Pti(Pto interaction protein)的生物学功能,筛选与其互作的蛋白,以未... 酵母双杂交技术作为检测蛋白质之间相互作用的有效手段,不仅能验证与已知蛋白质的相互作用,还可从文库中筛选与特定蛋白互作的未知蛋白。文章为研究番茄抗病相关蛋白Pti(Pto interaction protein)的生物学功能,筛选与其互作的蛋白,以未处理野生型番茄叶片、真空渗透法接种丁香假单胞杆菌番茄致病变种DC 3000(Pseudomonas syringae pv.tomato DC3000,Pst DC3000)的感病株系prf3、抗性株系PtoR的植株叶片提取RNA,构建酵母双杂交文库。经检测,文库容量为1.25×107 CFU,阳性率大于95%,插入片段平均长度约1200 bp。通过构建Pti5重组诱饵载体并转化酵母菌,筛选与其相互作用的蛋白质。初步获得的Pti5互作的靶标基因,可用于进一步研究番茄抗病基因Pti的作用机制。 展开更多

关键词 番茄 丁香假单胞杆菌番茄致病变种(pst dc3000) 酵母双杂交 文库筛选 蛋白质相互作用

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