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谷氨酸棒杆菌PhoPR双组分系统应答低氧胁迫功能研究 被引量:2
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作者 陈静 彭枫 +2 位作者 刘秀霞 杨艳坤 白仲虎 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期24-31,共8页
探究谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum,C. glutamicum)中PhoPR双组分系统响应外界溶氧变化功能机制。通过转录组数据分析发现PhoPR为C. glutamicum在不同溶氧水平下转录变化最明显双组分系统(Two-component system,TCS),表明Ph... 探究谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum,C. glutamicum)中PhoPR双组分系统响应外界溶氧变化功能机制。通过转录组数据分析发现PhoPR为C. glutamicum在不同溶氧水平下转录变化最明显双组分系统(Two-component system,TCS),表明PhoPR可感应环境中氧气变化。实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和电泳迁移率试验(Electrophoretic mobility shift assay,EMSA)表明PhoPR效应蛋白PhoP可直接调控电子传递链相关基因sdhCAB和细胞膜相关基因betP、proP,间接调控qcrB,PhoPR高表达可增强细胞电子传递链和细胞膜基因转录。另外PhoPR还影响胞内ATP生成速度和峰值。基于以上结果推断,PhoPR通过调节电子传递链和ATP生成以维持C. glutamicum在低氧条件下生命活动。 展开更多
关键词 谷氨酸棒杆菌 双组分系统 phopr 溶氧 EMSA
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结核分枝杆菌双组分系统PhoPR的研究进展 被引量:2
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作者 陈伟 袁俐 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第6期458-461,共4页
双组分系统(Two-component systems,2CS)是高度保守的原核信号转导系统,最简单的2CS由感受器-组氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和效应器-反应调节器(Response Regulator,RR)组成。PhoPR是结核分枝杆菌中最重要的双组分系统,PhoP是结核... 双组分系统(Two-component systems,2CS)是高度保守的原核信号转导系统,最简单的2CS由感受器-组氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和效应器-反应调节器(Response Regulator,RR)组成。PhoPR是结核分枝杆菌中最重要的双组分系统,PhoP是结核分枝杆菌PhoPR2CS中的反应调节器。运用转录组学和蛋白组学分析可以揭示PhoP基因调控结核分枝杆菌的许多功能。本文对双组分系统PhoPR及PhoP基因在结核分枝杆菌中的研究进展进行了综述。 展开更多
关键词 PHOP phopr 双组分系统 结核分枝杆菌 综述
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PhoPR双组分系统与结核病的研究进展 被引量:1
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作者 梁晨 张万江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第9期851-853,共3页
双组分系统是高度保守的信号转导系统。经典的双组分系统由组氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和反应调节蛋白(Response Regulator protein,RR)构成。PhoPR双组分系统是结核分枝杆菌最基本、最重要的双组分系统。该系统能感应外界环境变化... 双组分系统是高度保守的信号转导系统。经典的双组分系统由组氨酸激酶(Histidine Kinase,HK)和反应调节蛋白(Response Regulator protein,RR)构成。PhoPR双组分系统是结核分枝杆菌最基本、最重要的双组分系统。该系统能感应外界环境变化,并做出相应反应。本文综述了结核分枝杆菌PhoPR双组分系统的结构、反应机制和功能方面的研究进展。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 双组分系统 phopr 综述
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结核分枝杆菌PhoPR双组分系统与不同毒力结核分枝杆菌致病性的相关性研究 被引量:3
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作者 邬博 吴芳 +14 位作者 章乐 吴江东 张辉 张春军 曹旭东 朱彬 李瑞山 何丽 王钊 张玉清 庄睿 李文娟 梁晨 樊超 张万江 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1320-1324,1329,共6页
目的:通过比较分析卡介苗株(BCG)、结核分枝杆菌国际标准无毒株(H37Ra)、结核分枝杆菌国际标准强毒株(H37Rv)、新疆地区流行的优势强毒株结核分枝杆菌临床分离株(XJ-MTB)的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究结核分枝杆菌PhoPR... 目的:通过比较分析卡介苗株(BCG)、结核分枝杆菌国际标准无毒株(H37Ra)、结核分枝杆菌国际标准强毒株(H37Rv)、新疆地区流行的优势强毒株结核分枝杆菌临床分离株(XJ-MTB)的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究结核分枝杆菌PhoPR双组分系统与不同毒力结核分枝杆菌的致病性是否具有相关性。方法:首先提取上述四种不同毒力结核分枝杆菌菌株的总RNA,并进行完整性鉴定;再运用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术检测各组菌株中PhoP基因和PhoR基因的表达水平;最后比较不同毒力结核分枝杆菌PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异。结果:四种不同毒力菌株PhoP基因的相对表达量,由高到低依次为XJ-MTB(9.05)、H37Rv(1.00)、H37Ra(0.25)、BCG(0.08),且四种菌株中PhoP基因的表达有显著的统计学差异(P<0.05);同时四种不同毒力菌株PhoR基因的相对表达量,由高到低依次为XJ-MTB(5.72)、H37Rv(1.00)、H37Ra(0.18)、BCG(0.07),且四种菌株中PhoR基因的表达有显著的统计学差异(P<0.05)。其中XJ-MTB菌株PhoP基因和PhoR基因的表达水平与BCG、H37Rv、H37Ra相比存在显著的统计学差异(P<0.05);H37Rv菌株PhoP基因和PhoR基因的表达与BCG、H37Ra相比存在显著的统计学差异(P<0.05);而BCG菌株PhoP基因和PhoR基因的表达与H37Ra相比统计学差异不显著(P>0.05)。结论:结核分枝杆菌PhoPR双组分系统中PhoP基因和PhoR基因在不同毒力结核分枝杆菌中的表达存在差异,并且该系统与不同毒力结核分枝杆菌的致病性存在相关性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 致病性 phopr双组分系统
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耐药结核分枝杆菌PhoPR双组分系统基因表达的研究 被引量:3
5
作者 李文娟 宝音 +11 位作者 王霞 张峰 章乐 吴芳 吴江东 庄睿 邬博 梁晨 樊超 张春军 张辉 张万江 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2014年第4期303-308,共6页
目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基... 目的比较结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)原始耐药菌株与经过含不同浓度培养基培养后的菌株中PhoPR双组分系统基因表达水平的差异,研究MTB PhoPR双组分系统与MTB耐药的相关性。方法分别在原始状态下和用低浓度含药培养基及高浓度含药培养基培养单纯耐异烟肼MTB临床分离株(INH-MTB)、单纯耐利福平的MTB临床分离株(RFP-MTB)、单纯耐链霉素MTB临床分离株(SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的MTB临床分离株(EB-MTB)、耐多药MTB临床分离株(MDR)养至对数期,提取各组MTB总RNA,并进行纯度鉴定;运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR,检测各组MTB的PhoP基因和PhoR基因的表达,比较不同耐药的MTB临床分离株PhoP基因和PhoR基因表达水平的差异。结果在低浓度抗结核药物条件下培养的INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB与原始状态下MTB相比,PhoP基因表达分别上调2.19、2.04、1.72、2.73倍,PhoR基因分别上调1.57、2.57、1.56和2.83倍,差异有统计学意义(P<0.05);在高浓度抗结核药物条件下培养,INH-MTB、RFP-MTB、SMMTB、EB-MTB和MDR组MTB中的PhoP基因表达分别上调1.79、1.44、2.10、1.27和1.97倍,PhoR基因在INHMTB、RFP-MTB、SM-MTB和MDR组MTB分别上调1.05、1.91、1.76和2.13倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 PhoP和PhoR基因的差异表达与MTB的耐药性相关,提示PhoPR双组分系统与MTB耐药具有相关性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 phopr双组分系统
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PhoPR双组份系统在结核分枝杆菌致病机制中的研究进展 被引量:1
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作者 邬博 张万江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1062-1065,共4页
双组份信号转导系统(Two-component signal transduction system,TCS)广泛存在于原核生物细胞内,对细胞生长、分化、代谢、毒力、持留性、致病性等方面的调控发挥着重要作用。PhoPR TCS作为双组份系统中最基本、最重要的感应外界环境变... 双组份信号转导系统(Two-component signal transduction system,TCS)广泛存在于原核生物细胞内,对细胞生长、分化、代谢、毒力、持留性、致病性等方面的调控发挥着重要作用。PhoPR TCS作为双组份系统中最基本、最重要的感应外界环境变化,并作出相应反应的调控系统,能够调控结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)更好的适应宿主微环境变化。因此PhoPR TCS作为MTB适应环境变化的重要调控系统已愈来愈受关注,关于PhoPR TCS在MTB的致病机制调控方面的研究正在成为新的热点。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 phopr双组份信号转导系统 致病机制
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结核杆菌PhoPR双组分系统与广泛流行的耐药结核杆菌耐药性的相关性研究
7
作者 李文娟 宝音 +11 位作者 王霞 张峰 梁晨 庄睿 樊超 庹清章 张春军 张辉 吴芳 吴江东 章乐 张万江 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期773-779,共7页
目的:通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研... 目的:通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象,分别提取结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株( INH-MTB)、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株( RFP-MTB)、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株( SM-MTB)、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株( EB-MTB)、耐多药结核杆菌临床分离株( MDR)总RNA,并进行纯度鉴定,运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法,分别检测各组结核杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因的表达,比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平的差异。结果与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比,PhoP基因在RFP-MTB中的表达上调1.48倍,在MDR中的表达上调2.74倍,差异有统计学意义(P<0.05);与MDR相比,PhoP基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达下调0.70、0.50、0.25和0.21倍,差异有统计学意义(P<0.05)。与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比,PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达分别上调6.33、4.56、2.34和1.85倍,在MDR中的表达上调9.06倍,差异有统计学意义( P<0.05);与 MDR相比,PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB 和EB-MTB 中的表达下调0.36、0.54、0.35和0.19倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、EB-MTB和MDR中,结核杆菌PhoP和PhoR基因的表达有差异,结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌的耐药性具有相关性。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 耐药性 phopr双组分系统
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PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制研究
8
作者 邬博 雷英 +13 位作者 吴芳 章乐 吴江东 曹旭东 朱彬 何丽 李瑞山 张玉清 王钊 王君 柳小玲 张培培 梁粟 张万江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期116-120,142,共6页
目的本研究通过诱导结核分枝杆菌在低氧环境中进入持留状态,来比较分析不同时间不同低氧环境下结核分枝杆菌中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制。方法首先对结核分... 目的本研究通过诱导结核分枝杆菌在低氧环境中进入持留状态,来比较分析不同时间不同低氧环境下结核分枝杆菌中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异,探讨研究PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌持留性的调控机制。方法首先对结核分枝杆菌国际标准无毒株(H37Ra)和结核分枝杆菌国际标准强毒株(H37Rv)在不同低氧环境下进行培养,提取每个样本菌株的总RNA,并进行完整性鉴定;运用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测每个样本菌株中PhoP基因和PhoR基因的表达水平;比较分析不同时间不同低氧环境下的结核分枝杆菌菌株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异。结果在不同时间点对低氧环境的结核分枝杆菌PhoP基因和PhoR基因的表达水平进行检测,结果显示:与第10d相比,培养至第15d时H37Rv菌株和H37Ra菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05);并且培养至第25d时,H37Rv菌株中的PhoP基因和PhoR基因的表达水平比H37Ra菌株表达均上调2.34倍,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在不同时间点相同毒力的结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达存在差异,而且在相同时间点不同毒力结核分枝杆菌的PhoPR双组分信号转导系统中PhoP基因和PhoR基因在不同低氧环境下的表达也存在差异,表明PhoPR双组分信号转导系统对结核分枝杆菌的持留性具有调控作用。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 持留性 phopr双组分信号转导系统
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利用融合PCR技术和T载体克隆技术构建结核分枝杆菌PhoPR双组份系统缺失突变载体 被引量:2
9
作者 王君 吴芳 +6 位作者 柳小玲 梁粟 张培培 章乐 吴江东 曹旭东 张万江 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期276-280,共5页
目的基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法。方法利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、Pho... 目的基于融合PCR技术(SOE-PCR)、T载体克隆技术,构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)双组份系统缺失突变载体的方法。方法利用SOE-PCR技术,将PhoP、PhoR和PhoPR基因上、下游的同源臂与卡那霉素抗性基因融合,构建PhoP、PhoR和PhoPR突变片段,然后将突变片段直接与T载体连接,将其转入E.coli DH5α感受态细胞并筛选抗性克隆,进而获得MTB PhoP、PhoR和PhoPR缺失突变载体。结果成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,与传统方法相比,效率高、周期短。结论基于融合PCR技术和T载体克隆技术成功构建MTB PhoPR双组份系统缺失突变载体,为下一步构建MTB突变株以及相关研究奠定基础。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 phopr双组份系统 缺失突变株 构建
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黄连总生物碱对结核菌PhoPR双组份系统基因转录水平影响的研究 被引量:1
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作者 曾范利 于丹 +5 位作者 姜园园 时坤 李健明 宗颖 赵丹 杜锐 《中国兽药杂志》 北大核心 2016年第9期6-10,共5页
为研究黄连总生物碱对结核菌Pho PR双组份系统基因转录水平的影响,对不同药物作用的菌液提取总RNA并进行反转录,根据Gen Bank中H37Rv的Pho P(0757)基因、PhoR(0758)基因和Sig A的基因序列,应用Primer6.0软件设计荧光定量引物并进行荧光... 为研究黄连总生物碱对结核菌Pho PR双组份系统基因转录水平的影响,对不同药物作用的菌液提取总RNA并进行反转录,根据Gen Bank中H37Rv的Pho P(0757)基因、PhoR(0758)基因和Sig A的基因序列,应用Primer6.0软件设计荧光定量引物并进行荧光定量PCR分析。结果显示:在高浓度黄连生物碱作用时,多药耐药结核菌MT-7、MB-1的Pho P和PhoR的基因的表达水平明显下降,并且黄连总生物碱与RPF联合作用时,多药耐药结核菌MT-7、MB-1的Pho P和PhoR的基因的表达水平明显下降,表明黄连生物碱是RFP抗菌增效剂。本试验为结核菌抗菌增效作用机制研究奠定了理论基础。 展开更多
关键词 黄连总生物碱 结核菌 Pho PR双组份系统 转录水平
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