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几种不同化学激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响 被引量:24
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作者 李雪峰 安志兴 +1 位作者 郭继彤 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2002年第2期43-47,共5页
为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮... 为确定牛体细胞核移植胚胎的激活条件 ,比较了几种不同化学激活方法对牛卵母细胞激活的影响。选择明显具有第一极体的成熟卵母细胞 ,随机分为 9组 :1Ionomycin(I) +6 -甲氨基嘌呤 (D) (ID) ;2 I+D+细胞松弛素 B(CCB) (IDC) ;3I+放线菌酮 (X) (IX) ;4 I+X+CCB(IXC) ;5体积分数 7%乙醇 (E) +D(ED) ;6E+D+CCB(EDC) ;7E+X(EX) ;8E+X+CCB(EXC) ;9Sr2 + +CCB(SC)。Ionom ycin和乙醇的处理时间为 5min,6 - DMAP± CCB的处理时间为 4 h,放线菌酮± CCB的处理时间为 5 h,Sr2 + +CCB的处理时间为 10 h。培养36 h后 ,各组卵母细胞的卵裂率分别为 72 .0 % ,75 .5 % ,81.3% ,85 .1% ,81.7% ,82 .4 % ,74 .4 % ,78.1%和 5 1.0 % ;培养到 196 h时 ,各组的囊胚发育率分别为 18.2 % ,2 4 .5 % ,7.2 % ,11.9% ,11.1% ,19.4 % ,6 .7% ,12 .2 %和 2 .0 %。结果表明 ,在 10 mm ol/ L Sr2 +内培养 10 h不能有效地激活牛卵母细胞 ,Ionom ycin+6 - DMAP± CCB以及乙醇 +6 -DMAP+CCB结合使用可以有效地激活牛卵母细胞。Ionom ycin比乙醇对牛卵母细胞的激活作用强 ;6 - DMAP比CHX的激活效果好 ,激活液中 展开更多
关键词 化学激活方法 牛卵母细胞 孤雌激活 影响
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孤雌生殖中卵母细胞激活的研究进展
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作者 徐芳 马辰恺 +3 位作者 崔春光 胡成洁 王永强 徐霞 《蚕桑通报》 2024年第1期1-6,共6页
卵母细胞从第一次减数分裂前期转变到第二次减数分裂中期,称之为卵母细胞的减数分裂成熟时期。在有性生殖中,卵母细胞成熟后便拥有了受精的能力。孤雌生殖激活是指卵母细胞处于第二次减数分裂中期时,不经过精子的刺激而在某些物理化学... 卵母细胞从第一次减数分裂前期转变到第二次减数分裂中期,称之为卵母细胞的减数分裂成熟时期。在有性生殖中,卵母细胞成熟后便拥有了受精的能力。孤雌生殖激活是指卵母细胞处于第二次减数分裂中期时,不经过精子的刺激而在某些物理化学因素的刺激下自发恢复并完成减数分裂,进行有丝分裂并发育到胚胎的过程。卵母细胞具备成熟能力是孤雌生殖发生的必要条件。已知卵母细胞成熟与cAMP、PKA、MPF等因子的水平调节紧密相关。人工激活卵母细胞的原理则是通过外界刺激改变卵母细胞内的分子作用网络及化学信号传导,其方法包括物理性激活、化学性激活及联合性激活。对于不同物种选取不同方法,孤雌激活的效果与卵母细胞的来源、卵龄、方法的选择和培养条件有关。 展开更多
关键词 孤雌生殖 卵母细胞 减数分裂 激活方法 激活机制
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不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活的研究进展 被引量:6
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作者 乌云其其格 李向臣 +4 位作者 跃华 刘鹏 希尼尼根 关伟军 马月辉 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第9期55-58,共4页
卵母细胞孤雌激活是核移植的关键技术之一,卵母细胞激活率的高低直接影响核移植的效率。作者主要对卵母细胞孤雌激活的机制、激活途径及不同哺乳动物卵母细胞孤雌激活进行概括性的分析。
关键词 卵母细胞 孤雌生殖 孤雌激活
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印记基因在孤雌生殖方面的研究进展
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作者 彭晟坤 张子敬 +9 位作者 张格阳 张志浩 闵佳 李欣淼 王香南 施巧婷 祁兴山 黄永震 李惠侠 王二耀 《中国畜禽种业》 2024年第1期36-41,共6页
孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能... 孤雌生殖是一种独特的生殖方式,指的是卵母细胞在不经过受精的情况下,可以自发或通过物理、化学刺激发育为正常个体,而无需精子参与。在低等动物中,孤雌生殖可以仅由雌性个体完成,从而实现从单个雌性个体产生后代。然而在哺乳动物中,能够通过孤雌生殖发育为正常个体的实例极为罕见。该文介绍了孤雌激活的方式,孤雌胚胎获取方式和印记基因在孤雌生殖中的应用,以期为未来孤雌生殖的相关应用提供思路。 展开更多
关键词 孤雌生殖 印记基因 孤雌激活 孤雌胚胎
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Collection of superovulated mouse oocytes continuously by surgery and their development after activation 被引量:1
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作者 王敏康 张田 《生殖医学杂志》 CAS 2005年第B10期68-72,共5页
Objective:To establish a new way to collect superovulated oocytes or zygotes repeatedlyfrom an individual mouse.Methods:Superovulations were induced by injection PMSG and hCG in Kunming strainmice.The ampullaes of ovi... Objective:To establish a new way to collect superovulated oocytes or zygotes repeatedlyfrom an individual mouse.Methods:Superovulations were induced by injection PMSG and hCG in Kunming strainmice.The ampullaes of oviduct of all anaesthetised mouse were put in a specially designed'U'sink and released.The second and third times of PMSG injection were made on the sixth day andeleventh day after the first superovulation injection.The capacity of development was examinedby in vitro culture of parthenogenesis activation oocytes.Results:Development to blastocyst stage was not significantly different between the first andsecond time collection.The percentage of blastocyst stage in CD and Sr^(++) treatment was signifi-cantly higher(P<0.05)than the oocytes treated in CB and Sr^(++).Conclusion:This method enables us to collect oocytes or zygotes repeatedly from one individ-ual mouse in an interval as short as 5 days and without influence on the quality of oocytes. 展开更多
关键词 Embryo culture Kunming strain mouse parthenogenesis activation Surgery collection oocytes
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不同激活方法对绵羊体外成熟卵母细胞孤雌生殖的影响 被引量:3
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作者 张红琴 周欢敏 +2 位作者 李宝山 张东 朱琳 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第1期78-81,共4页
为确定绵羊体细胞核移植胚胎的激活条件,本实验探讨了不同激活方法对绵羊体外成熟卵母细胞的孤雌激活及其后的发育影响。选择体外成熟绵羊卵母细胞,随机分为3组:①电激活+6-DMAP4h;②I(5μm)5min+6-DMAP4h;③7%乙醇7min+6-DMAP4h,培养48... 为确定绵羊体细胞核移植胚胎的激活条件,本实验探讨了不同激活方法对绵羊体外成熟卵母细胞的孤雌激活及其后的发育影响。选择体外成熟绵羊卵母细胞,随机分为3组:①电激活+6-DMAP4h;②I(5μm)5min+6-DMAP4h;③7%乙醇7min+6-DMAP4h,培养48h后,各组卵母细胞的卵裂率分别为60.93%,79.96%,78.28%;培养到7d时,各组的桑椹/囊胚发育率分别为17.03%,42.84%,39.39%。化学激活的卵裂率、桑椹/囊胚率显著高于电激活(p<0.05);乙醇与Ionomycin相比,其卵裂率、桑椹/囊胚率差异不显著,但Ionomycin处理组效果稍好于乙醇组。结果表明,电激活、Ionomycin、7%乙醇都可以有效激活绵羊卵母细胞,并孤雌发育到囊胚,Ionomycin的激活效果最佳;同时也比较了不同电压对绵羊体外成熟卵母细胞激活的影响,以1.300kV/cm-1.350kV/cm,脉冲时间10us,脉冲次数为2次,间隔0.5s效果较好。 展开更多
关键词 卵母细胞 孤雌激活 绵羊
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Parthenogenesis and activation of mammalian oocytes for <i>in vitro</i>embryo production: A review
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作者 Suresh Dinkar Kharche Hemant Shankar Birade 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 2013年第2期170-182,共13页
Parthenogenesis is a form of asexual reproduction found in females, where growth and development of embryos occurs without fertilization by a male. Parthenogenesis occurs naturally in aphids, Daphnia, rotifers, nemato... Parthenogenesis is a form of asexual reproduction found in females, where growth and development of embryos occurs without fertilization by a male. Parthenogenesis occurs naturally in aphids, Daphnia, rotifers, nematodes and some other invertebrates but can also be induced efficiently in mammalian oocytes by providing appropriate stimuli invitro. Recently, parthenogenesis has attracted wide attention because of the role of activated oocytes in the field of research that have been described such as intra cytoplasmic sperm injection, cloning by nuclear transfer, somatic cell cloning, investigating culture conditions etc. & potential for deriving pluripotent stem cell lines and their differentiation into various cell lines that can be utilized for various tissue engineering applications. The parthenogenetically activated oocytes possess maternal genome and can developed in to either haploid, diploid or polyploidy embryos with the help of it we can analyze the possible role of all the genes involved in imprinting processes as well as the role the paternal genome plays during early embryo development by comparing them with fertilized embryos. Several methods are able to induce parthenogenetic activation through the elevation of cytoplasmic free calcium in oocytes. But one common, universal method or activation agents has not been developed for all species because the process is highly specific for each species. Therefore, activation step for each species need to be optimized accordingly. This review describes the general method of activation of mammalian oocytes and their genomic imprinting analysis. 展开更多
关键词 Epigenetic Modification Genomic IMPRINTING In-Vitro Maturation OOCYTES activation parthenogenesis
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影响牛卵母细胞孤雌激活胚胎发育的因素
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作者 李绍龙 张桂春 何剑斌 《黄牛杂志》 2004年第5期37-39,共3页
卵母细胞体外成熟后孤雌激活发育是一个新兴的研究方向,影响牛卵母细胞孤雌激活发育因素很多,国内此方面的报道较少,文中就牛卵母细胞体外成熟后孤雌激活胚胎发育的影响因素进行总结。旨在为研究体外孤雌胚发育和孤雌胚胎的培养提供参考。
关键词 卵母细胞 孤雌激活 体外成熟 孤雌胚胎
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哺乳动物卵母细胞孤雌生殖激活的研究进展 被引量:1
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作者 张敏 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第26期8233-8235,共3页
介绍了哺乳动物孤雌激活的方式,阐述了孤雌激活的方式机制及提高孤雌激活的技术措施。
关键词 孤雌生殖 卵母细胞 激活
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小鼠卵母细胞的电激活 被引量:1
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作者 王炜 李跃民 俞纯方 《动物医学进展》 CSCD 2005年第6期75-78,共4页
采用宁波新科CRY 3 细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0. 5mm)对影响小鼠卵母细胞电激活效率的诸多因素,如直流脉冲的强度(1. 0 kV/cm、1. 5kV/cm、2.0 kV/cm、2.5 kV/cm)、脉冲宽度(40μs、80 μs、100 μs、150 μs)和脉... 采用宁波新科CRY 3 细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0. 5mm)对影响小鼠卵母细胞电激活效率的诸多因素,如直流脉冲的强度(1. 0 kV/cm、1. 5kV/cm、2.0 kV/cm、2.5 kV/cm)、脉冲宽度(40μs、80 μs、100 μs、150 μs)和脉冲次数(1次、2次、3次)进行了比较研究,结果表明,卵母细胞激活率随电场强度的增加而升高,场强为2.0 kV/cm时,获得了较高的卵母细胞激活率和卵裂率(74.47%,77.14%),场强继续增加,卵母细胞的激活率和卵裂率反而开始下降。场强为2.0 kV/cm,脉宽为80μs时,卵母细胞的激活率最高(77.78%)。多次连续脉冲(3次,每次间隔10 min)处理卵子,可明显升高卵母细胞的激活率和囊胚发育率(89.58%,20.59%)。 展开更多
关键词 孤雌生殖 小鼠 卵母细胞 电激活
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电激活参数与渗透压阶段培养法对孤雌胚胎发育能力的影响 被引量:1
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作者 黄雷 樊俊华 +4 位作者 武海燕 李林 高青 李奎 敖红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第1期155-158,共4页
试验旨在摸索猪卵母细胞孤雌激活的电场强度和脉冲时间,并探索渗透压阶段培养法对孤雌胚胎后期发育的影响。猪卵母细胞成熟培养42~44h后,分别在电场强度2.1、2.3、2.5kV/mm和脉冲时间30、60、90!s的9组电激活参数下进行孤雌激活试验;... 试验旨在摸索猪卵母细胞孤雌激活的电场强度和脉冲时间,并探索渗透压阶段培养法对孤雌胚胎后期发育的影响。猪卵母细胞成熟培养42~44h后,分别在电场强度2.1、2.3、2.5kV/mm和脉冲时间30、60、90!s的9组电激活参数下进行孤雌激活试验;卵母细胞在2.1kV/mm和30!s的参数下进行孤雌激活后,分别培养于渗透压为271、280、290、302mOsm的PZM-3中,48h后移入渗透压280mOsm的PZM-3中继续培养96h;孤雌胚胎于电激活后先在含2mmol/L 6-DMAP的PZM-3中培养4~6h,然后移入不含6-DMAP的PZM-3中继续培养。试验结果表明,电场强度和脉冲时间两个参数间无显著的交互作用(P>0.05),脉冲时间相同条件下,卵裂率在不同电场强度条件下均无显著差异(P>0.05),2.1和2.5kV/mm的电场强度条件下,脉冲时间为30!s时的卵裂率显著高于60和90!s(P<0.05),而2.3kV/mm电场强度下3个脉冲时间试验组的卵裂率无显著差异(P>0.05),各试验组的囊胚率无显著差异(P>0.05);孤雌胚胎在渗透压为290~310mOsm的PZM-3中培养48h,卵裂率得到显著提高(P<0.05),渗透压对囊胚率无显著影响(P>0.05);6-DMAP对孤雌胚胎卵裂率无显著影响(P>0.05),但可以显著提高囊胚率(P<0.05)。结果提示,猪卵母细胞孤雌激活需要较高的电场强度(2.1~2.3kV/mm)而脉冲时间不宜过长(30!s);48h的高渗培养和6-DMAP的辅助激活有助于孤雌胚胎的后期发育。 展开更多
关键词 孤雌生殖 高渗 6-DMAP 电激活
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卵龄及激活液中Ca^(2+)浓度对小鼠卵母细胞电激活效率的影响
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作者 王炜 李跃民 俞纯方 《现代畜牧兽医》 2005年第5期5-6,共2页
采用宁波新科CRY-3细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0.5mm)对影响电激活效率的两个因素——卵龄及激活液中Ca2+浓度进行了比较研究。结果表明:①卵母细胞的活化率随卵龄的增加明显升高,电刺激hCG后18~19h的卵母细胞可获得... 采用宁波新科CRY-3细胞融合仪及其配备的镀银电融合槽(电极宽度为0.5mm)对影响电激活效率的两个因素——卵龄及激活液中Ca2+浓度进行了比较研究。结果表明:①卵母细胞的活化率随卵龄的增加明显升高,电刺激hCG后18~19h的卵母细胞可获得较高的卵母细胞激活率(71.67%),继续增加卵龄,卵母细胞激活率、卵裂率和囊胚发育率开始下降。②使用含Ca2+的激活液可获得较高的卵母细胞激活率,但Ca2+的浓度变化对激活效果无显著影响(P>0.05)。 展开更多
关键词 CA^2+浓度 小鼠卵母细胞 电激活 卵龄 囊胚发育率 激活率 比较研究 细胞融合 浓度变化 电融合 活化率 hCG 电刺激 卵裂率
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氨基酸对水牛孤雌激活胚胎体外发育的研究
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作者 成俊萍 石德顺 +4 位作者 陆风花 韦精卫 王晓丽 潘红平 李日聪 《畜牧兽医杂志》 2008年第1期1-3,共3页
本研究主要探讨氨基酸对水牛孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响。在SOF液中添加1.5%的MEM非必需氨基酸(NEAA)显著提高PA(79.8%vs 67.7%)胚胎的分裂率(P<0.05),囊胚发育率和囊胚孵化率无显著差异;添加1.0%的EAA显著提高PA胚胎的囊胚孵化... 本研究主要探讨氨基酸对水牛孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响。在SOF液中添加1.5%的MEM非必需氨基酸(NEAA)显著提高PA(79.8%vs 67.7%)胚胎的分裂率(P<0.05),囊胚发育率和囊胚孵化率无显著差异;添加1.0%的EAA显著提高PA胚胎的囊胚孵化率(77.3%vs 43.3%,P<0.05),但各组间的分裂率和囊胚发育率无显著差异;在改良SOF基础液中联合添加1.0%NEAA和2.0%EAA可显著提高孤雌激活胚胎的分裂率(84.4%vs 68.8%,P<0.05),但囊胚发育率和孵化率均无显著差异。 展开更多
关键词 水牛 孤雌激活 胚胎发育 氨基酸
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不同化学激活方法对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响 被引量:2
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作者 张晓建 海里且木 +2 位作者 孙玉红 陈静波 张涌 《黑龙江动物繁殖》 2005年第1期8-10,共3页
本研究利用常规化学激活剂离子酶素(Ionomycin)和乙醇分别与6-二甲基氨基嘌呤(6-Dimethylaminoputine,6-DMAP)和细胞松弛素B(CB)的不同组合对绵羊卵母细胞的激活后体外发育效果进行了比较。结果表明:在桑囊胚率上,Ionomycin联合6-DMAP... 本研究利用常规化学激活剂离子酶素(Ionomycin)和乙醇分别与6-二甲基氨基嘌呤(6-Dimethylaminoputine,6-DMAP)和细胞松弛素B(CB)的不同组合对绵羊卵母细胞的激活后体外发育效果进行了比较。结果表明:在桑囊胚率上,Ionomycin联合6-DMAP与联合6-DMAP+CB差异不显著(40.4%vs46.0%),而与联合CB组差异显著(40.4%、46.0%vs 29.5%,p<0.05),与单独Ionomycin激活差异极显著(40.4%、46.0%vs 15%,p<0.01);乙醇联合6-DMAP+CB与联合6-DMAP、CB差异显著(46.9%vs 34.2%、36.2%,p<0.05),而与单独乙醇激活差异极显著(46.9%vs 21%,p<0.01)。 展开更多
关键词 6-DMAP 绵羊 化学激活方法 体外发育 囊胚率 孤雌生殖 6-二甲基氨基嘌呤 细胞松弛素 研究利用 卵母细胞
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化学激活对小鼠卵母细胞孤雌发育的影响 被引量:1
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作者 岳福杰 董雅娟 +5 位作者 柏学进 淡新刚 王雪红 赵兴 于进亮 张廷龙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2006年第16期4008-4009,4037,共3页
分别用不同浓度的氯化锶联合细胞松弛素、钙离子载体A23187和乙醇分别与6-二甲氨基嘌呤和细胞松弛素B刺激小鼠卵母细胞,比较卵母细胞的激活率和体外发育情况。结果表明,乙醇+6-DMAP+CB和A23187+6-DMAP+CB激活获得的激活率、桑囊胚率较高。
关键词 小鼠 卵母细胞 孤雌激活 化学激活剂
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