PTEN和p27Kip1共表达对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6

1

作者 邱镇 孙颖浩 +3 位作者 许传亮 王元天 顾正勤 刘毅 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期600-603,共4页

目的　通过腺病毒介导转染前列腺癌PC 3细胞 ,探讨人 10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白类似物 (PTEN)和p2 7Kip1对肿瘤细胞增殖和凋亡等方面的影响及二者的协同作用。方法　构建携带人PTEN和p2 7Kip1基因的腺病毒载体 ,体外转染PC ... 目的　通过腺病毒介导转染前列腺癌PC 3细胞 ,探讨人 10号染色体上缺失的磷酸酶和张力蛋白类似物 (PTEN)和p2 7Kip1对肿瘤细胞增殖和凋亡等方面的影响及二者的协同作用。方法　构建携带人PTEN和p2 7Kip1基因的腺病毒载体 ,体外转染PC 3细胞 ,通过RT PCR、Westernblot检测目的基因不同水平的表达。采用细胞生长试验、流式细胞仪检测PC 3转染前后细胞增殖、细胞周期和早期凋亡率的变化。结果　病毒滴度Ad PTEN为 1 8× 10 7pfu ml、Ad p2 7Kip1为 1 2× 10 9pfu ml,RT PCR检测有PTEN mRNA(46 2bp)和p2 7Kip1 mRNA (32 0bp) ,Westernblot检测有PTEN蛋白 (6 0KD)和P2 7蛋白 (2 7KD)特异表达 ,可明显抑制PC 3细胞的增殖 ,诱导细胞凋亡 ,联合基因治疗组与单基因组相比差异有显著意义。结论　成功构建携带人PTEN和p2 7Kip1的重组腺病毒载体 ,在前列腺癌细胞株PC 3得到了稳定、特异的高表达 ,联合基因疗法有望成为治疗前列腺癌的有效方法。 展开更多

关键词 pTEN p27kip1 表达 前列腺癌 pC-3细胞增殖 细胞凋亡

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p27^(Kip1)和细胞周期蛋白D1在胃癌中的表达及其预后意义 被引量：5

2

作者 宋传贵 卢辉山 张祥福 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第4期309-312,共4页

目的 :研究p2 7Kip1、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在胃癌组织中的表达水平以及与生物学行为的关系和对预后评价的意义。方法 :以免疫组化方法检测 92例胃癌组织中p2 7Kip1、cyclinD1蛋白的表达水平。结果 :本组 92例胃癌中 ,p2 7Kip1蛋白... 目的 :研究p2 7Kip1、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在胃癌组织中的表达水平以及与生物学行为的关系和对预后评价的意义。方法 :以免疫组化方法检测 92例胃癌组织中p2 7Kip1、cyclinD1蛋白的表达水平。结果 :本组 92例胃癌中 ,p2 7Kip1蛋白阳性 39例 ,占 42 .4% ;cyclinD1蛋白表达阳性 44例 ,占 47.8% ;胃癌组织中 ,p2 7Kip1蛋白水平与胃壁浸润深度、TNM分期、病理组织学分级、区域淋巴结转移均相关 (P <0 .0 5 ) ;cyclinD1蛋白表达与病理组织学分级负相关 (P <0 .0 5 ) ;p2 7Kip1与cyclinD1蛋白阳性表达显著相关 (P <0 .0 5 ) ;单变量生存分析结果 ,p2 7Kip1高表达组三年、五年生存率分别为 77.1%、5 7.8% ,明显高于低表达组的 33.7%、2 6 .3 % (P =0 .0 0 7) ,多变量分析显示p2 7Kip1是一个独立的预后指标 (P =0 .0 0 0 3)。结论 :p2 7Kip1可作为反映肿瘤恶性表型的指标 ,对胃癌预后具有一定的价值 ;cyclinD1是胃癌发生、发展过程中早期的分子事件 ;p2 7Kip1在胃癌进展中起着比cyclinD1更重要的作用。 展开更多

关键词 胃肿瘤 p^27kip1基因 细胞周期蛋白D1 预后 免疫组织化学

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p27kip1复制缺陷腺病毒重组体的构建与鉴定 被引量：8

3

作者 童强 吴清明 +3 位作者 黄永章 王家宁 王卫民 于皆平 《武汉大学学报（医学版）》 CAS 2002年第1期9-12,共4页

目的 :构建含人细胞周期依赖激酶抑制剂p2 7kip1基因的重组腺病毒载体 ,为采用p2 7kip1cDNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法 :将人p2 7kip1cDNA插入到穿梭质粒pACCMVPLPA的CMV启动子之下 ,即pAd p2 7kip1。后者与pJM17通过脂质体共转染 2... 目的 :构建含人细胞周期依赖激酶抑制剂p2 7kip1基因的重组腺病毒载体 ,为采用p2 7kip1cDNA防治肿瘤的研究奠定基础。方法 :将人p2 7kip1cDNA插入到穿梭质粒pACCMVPLPA的CMV启动子之下 ,即pAd p2 7kip1。后者与pJM17通过脂质体共转染 2 93细胞 ,经同源重组获得含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒Ad p2 7kip1。结果 :p2 7kip1cDNA成功地插入了pACCMVPLPA载体 ,以重组病毒基因组DNA为模板 ,同时扩增出了 2 75bp的p2 7kip1基因片段和 86 0bp的腺病毒骨架基因片段 ,证实了Ad p2 7kip1的正确性。病毒滴度为 1.2 4× 10 1 2 pfu ml。结论 :成功构建了携带人p2 7kip1基因的腺病毒Ad p2 7kip1,为采用p2 7kip1cDNA途径防治消化道肿瘤的在体。 展开更多

关键词 p27kip1 腺病毒 DNA 基因扩增 病毒复制 消化道肿瘤 基因治疗

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p27kip1基因纳米粒子抑制鼠移植静脉内膜增殖的实验研究 被引量：4

4

作者 杨菁 宋存先 郎晓讴 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1192-1198,共7页

用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p... 用美国FDA批准使用的生物可降解材料聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)为载体材料,制备载p27kip1基因的纳米粒子.用激光光散射法测定纳米粒子的平均粒径为288.9nm,粒径呈窄分布,扫描电镜观察纳米粒子表面光滑.DNA含量为3%.包封效率为86%.观察p27kip1基因纳米粒子的体外释放情况,发现DNA体外最初释放速度较大,约1周后释放速度开始减缓,可维持平稳释放15天以上.体外转染大鼠血管平滑肌细胞,用流式细胞仪检测到p27kip1基因纳米粒子对细胞周期进程的抑制作用.建立自体静脉移植大鼠模型,随机分成三组进行试验:p27kip1基因纳米粒子组,空白纳米粒子组,单纯静脉移植组.分别于给药后3天、7天、14天、28天取材,HE染色及Verhoeff染色检测内膜厚度,蛋白质印迹检测P27抑癌基因蛋白的表达,免疫组化SABC法检测移植静脉内膜PCNA、E2F表达.动物模型试验中转基因组内膜平均厚度较其他组明显减少(P<0.01);转基因组PCNA的表达较其他组明显降低(P<0.01);转基因组E2F的表达7￣14天较其他组显著降低(P<0.01);对照组及单纯静脉移植组之间均无明显差异.纳米粒子作为p27kip1基因载体能够有效抑制自体静脉移植后内膜平滑肌细胞的增殖. 展开更多

关键词 p27kip1基因 再狭窄 纳米粒子 静脉移植

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PTEN基因影响K562细胞周期的分子机制探讨 被引量：5

5

作者 成志勇 潘崚 +5 位作者 梁文同 焦婷 温省初 姚丽 魏晓璇 王素云 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期183-186,190,共5页

【目的】探讨抑癌基因PTEN对人慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞周期的影响。【方法】将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及对照载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562。MTT检测细胞增殖抑制率;流式... 【目的】探讨抑癌基因PTEN对人慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞周期的影响。【方法】将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及对照载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562。MTT检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测转染效率、细胞凋亡率和细胞周期的变化;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN、CyclinD1、CyclinD2、CDK4、P27Kip1 mRNA水平变化,Western blot检测上述蛋白表达水平的变化。【结果】与Ad-GFP组比较,Ad-PTEN-GFP转染K562细胞后,细胞凋亡率最高为30%,细胞周期显示:G0/G1期细胞比例由54.9%增加至78.5%,G2/M期比例由30.2%降至13.6%,Cyclin D1、Cyclin D2、CDK4 mRNA及Cyclin D1蛋白表达降低,P27Kip1 mRNA及蛋白表达增加。【结论】PTEN基因高表达可以促进K562细胞凋亡,并通过抑制Cyclin D1、Cyclin D2、CDK4及增加P27Kip1表达使细胞周期阻滞在G0/G1期。 展开更多

关键词 pTEN基因 细胞周期 CYCLINS p27kip1

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腺病毒介导的p27kip1基因转移对食管癌细胞及裸鼠移植瘤生长的抑制作用 被引量：3

6

作者 吴清明 张卫国 +3 位作者 童强 李胜保 王小虎 谢国建 《郧阳医学院学报》 2004年第5期257-261,269,F002,共7页

目的 :研究p2 7kip1基因转移对食管癌的体内、外抑制作用 ,并探讨其抑癌机制。方法 :①构建携带人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Ad p2 7kip1) ;②将Ad p2 7kip1转染人食管癌细胞Eca970 6 ,MTT法、3 H TdR和3 H Leucine掺入试验检测对细胞... 目的 :研究p2 7kip1基因转移对食管癌的体内、外抑制作用 ,并探讨其抑癌机制。方法 :①构建携带人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 (Ad p2 7kip1) ;②将Ad p2 7kip1转染人食管癌细胞Eca970 6 ,MTT法、3 H TdR和3 H Leucine掺入试验检测对细胞增殖的影响 ,流式细胞仪 (FCM)、DNA片段分析检测对细胞周期和凋亡的影响 ,TRAPPCR -ELISA法检测端粒酶活性 ,免疫细胞化学法及Westernblotting法检测p2 7kip1和Survivin的表达 ;③Ad p2 7kip1直接注射入人食管癌裸鼠移植瘤中 ,观测抑瘤效应 ,并检测p2 7kip1和Survivin的表达。结果 :①Ad p2 7kip1转染食管癌细胞后 ,细胞增殖明显受抑制 ,G0 /G1期细胞比例增加 ,并出现明显的亚二倍体凋亡峰和特征性的凋亡梯状条带 ,细胞端粒酶活性降低 ,p2 7kip1表达增强 ,Survivin表达降低 ;②采用p2 7kip1基因治疗 ,食管癌裸鼠移植瘤生长明显受抑制 ,肿瘤生长抑制率达 6 4 .1% ,移植瘤中p2 7kip1表达增强 ,Survivin表达降低。结论 :p2 7kip1基因转移对食管癌具有较显著的体内、外抑制作用 ,其机制是增强p2 7kip1表达、抑制Survivin表达 ,使细胞产生G1期阻滞 ,抑制端粒酶活性 ,并诱导凋亡 ,表明该基因疗法是食管癌治疗的新途径。 展开更多

关键词 p27kip1基因 裸鼠移植瘤 SURVIVIN表达 食管癌细胞 治疗 抑制作用 转移 DNA片段分析 转染 二倍体

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人p27kip1重组腺病毒载体的构建及其介导的p27kip1表达 被引量：5

7

作者 潘晓明 章卫平 +1 位作者 吴宗贵 曹雪涛 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期120-123,共4页

目的　研究外源性p2 7kip1基因对细胞周期及细胞增殖的影响。方法　构建CMV启动子转录调控的含人p2 7kip1cDNA的E1区替代的腺病毒载体pAxlcw .CIhp2 7kip1,与经EcoT2 2 1酶切的Ad5腺病毒DNA -末端肽复合物共转染 2 93细胞 ,制备p2 7kip... 目的　研究外源性p2 7kip1基因对细胞周期及细胞增殖的影响。方法　构建CMV启动子转录调控的含人p2 7kip1cDNA的E1区替代的腺病毒载体pAxlcw .CIhp2 7kip1,与经EcoT2 2 1酶切的Ad5腺病毒DNA -末端肽复合物共转染 2 93细胞 ,制备p2 7kip1重组腺病毒 ,在体外转染HeLa细胞 ,Westernblot、FACS及MTT检测分析外源性p2 7kip1蛋白在细胞内的表达 ,以及对细胞周期及细胞增殖的影响。结果　获得含人p2 7kip1cDNA的重组腺病毒 ,滴度为 1.7× 10 9pfu/ml。体外转染HeLa细胞2 4h后 ,p2 7kip1蛋白在p2 7kip1转染后的HeLa细胞中高表达 ;FACS检测表明 ,p2 7kip1和LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞 ,经 10 %血清刺激后处于G1期的细胞分别为 89.93%和 5 9.84% ;MTT法检测表明 ,人p2 7kip1重组腺病毒转染后的HeLa细胞经 2 0 %血清刺激后 ,48及 72h的A值均低于LacZ重组腺病毒转染后的HeLa细胞 (P <0 .0 1)。结论　本研究中所制备的p2 7kip1重组腺病毒能有效介导外源性p2 7kip1基因在体外转染HeLa细胞并高表达p2 7kip1,抑制细胞由G1期向S期过渡 ,从而抑制细胞增殖 ,为进一步研究p2 7kip1基因治疗奠定了基础。 展开更多

关键词 p27kip1基因 基因治疗 腺病毒载体 肿瘤

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外源性p27^(Kip1)基因转染对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞周期和增殖的影响 被引量：5

8

作者 杜莉莉 管晓翔 +3 位作者 陈龙邦 王靖华 耿怀成 张群 《医学研究生学报》 CAS 2007年第10期1010-1013,I0002,共5页

目的:探讨外源性p27Kip1基因对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞周期和增殖的影响。方法:应用脂质体转染法将含人野生型p27Kip1基因质粒DNA转染乳腺癌MCF-7细胞,免疫细胞荧光化学方法验证p27Kip1基因转染MCF-7细胞后蛋白表达情况;流式细胞仪检... 目的:探讨外源性p27Kip1基因对人乳腺癌MCF-7细胞株细胞周期和增殖的影响。方法:应用脂质体转染法将含人野生型p27Kip1基因质粒DNA转染乳腺癌MCF-7细胞,免疫细胞荧光化学方法验证p27Kip1基因转染MCF-7细胞后蛋白表达情况;流式细胞仪检测细胞周期的变化;细胞计数法绘制细胞生长曲线,观察外源性p27Kip1对乳腺癌细胞MCF-7生长的影响。结果:免疫细胞荧光化学方法证实p27Kip1基因转染MCF-7细胞后存在蛋白表达;流式细胞仪检测结果提示,细胞周期出现G0/G1期阻滞;细胞计数法绘制细胞生长曲线显示细胞增殖明显抑制。结论:外源性p27Kip1基因对乳腺癌MCF-7细胞生长和细胞周期有明显抑制作用。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞株MCF-7 p27kip1基因 细胞周期 细胞增殖

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p27Kip1与消化系肿瘤关系的研究进展 被引量：1

9

作者 王福生 荆梦杰 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2001年第1期81-83,共3页

p2 7kipl定位于染色体 12p13,含 2个外显子。p2 7一方面抑制CDK激活 ,另一方面尚可抑制激活后的cyclin CDK的活性。p2 7不仅在细胞周期增殖调控中起关键作用 ,而且与细胞的分化发育及凋亡也有关系。p2 7蛋白缺失或低表达在消化系恶性肿... p2 7kipl定位于染色体 12p13,含 2个外显子。p2 7一方面抑制CDK激活 ,另一方面尚可抑制激活后的cyclin CDK的活性。p2 7不仅在细胞周期增殖调控中起关键作用 ,而且与细胞的分化发育及凋亡也有关系。p2 7蛋白缺失或低表达在消化系恶性肿瘤中是一个较为普遍的现象 。 展开更多

关键词 消化系肿瘤 p27kip1基因 基因缺失 基因低表达

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△Np63基因沉默对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制 被引量：2

10

作者 张翾 张家模 +1 位作者 吴小候 何云锋 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期141-144,共4页

目的探讨癌基因△Np63对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法通过将△Np63特异性短发夹RNA(△Np63-shRNA)和非特异性短发夹RNA(Control-shRNA)转染膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinom a of bladder,TC... 目的探讨癌基因△Np63对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法通过将△Np63特异性短发夹RNA(△Np63-shRNA)和非特异性短发夹RNA(Control-shRNA)转染膀胱移行细胞癌(transitional cell carcinom a of bladder,TCCB)5637细胞,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Westernblot分别检测△Np63、p27kip1、p57kip2mRNA和蛋白的表达水平,WST-1法检测细胞增殖活性,利用流式细胞术(FCM)检测细胞周期分布,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果特异性的△Np63-shRNA能够有效地沉默△Np63并上调p27kip1和p57kip2的基因和蛋白水平,转染△Np63-shRNA的5637细胞的增殖能力明显受到抑制(P<0.05),且明显促进了细胞的凋亡(P<0.05)。结论靶向△Np63基因的shRNA片段可以有效的抑制人膀胱癌5637细胞的增殖并促进其凋亡,其可能的机制是通过上调p27kip1和p57kip2的表达实现的。 展开更多

关键词 △Np63 膀胱癌 基因沉默 p27kip1 p57kip2

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Jab1和p27^(kip1)基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义 被引量：2

11

作者 李发萍 曹华 吴玉瑛 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期252-255,259,共5页

目的:探讨Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测50例喉鳞状细胞癌组织和10例癌旁正常组织中Jab1和p27kip1的表达。采用人工合成Jab1siRNAⅡ用脂质体2000包裹后转染Hep-2细... 目的:探讨Jab1和p27kip1基因在喉鳞状细胞癌组织和喉癌Hep-2细胞中的表达及意义。方法:采用免疫组织化学方法检测50例喉鳞状细胞癌组织和10例癌旁正常组织中Jab1和p27kip1的表达。采用人工合成Jab1siRNAⅡ用脂质体2000包裹后转染Hep-2细胞,用RT-PCR方法分析转染后喉癌细胞中Jab1和p27kip1基因的表达情况。结果:Jab1和p27kip1蛋白的阳性表达定位为细胞核中,Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中高表达,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1在人喉癌组织中弱表达,正常喉黏膜中强表达;两者呈负相关。Jab1siRNAⅡ可降低Jab1mRNA表达,并且随着时间的延长,Jab1mRNAⅡ在Hep-2细胞中的表达逐渐减弱,而p27kip1 mRNA的表达则无明显变化。结论:Jab1在人喉鳞状细胞癌组织中表达增强,正常喉黏膜中不表达或弱表达;p27kip1则正好相反。两者在喉癌中的表达呈负相关。Jab1siRNAⅡ可以特异性降低Jab1mRNA在喉癌Hep-2细胞中的表达,为进一步研究Jab1基因在喉癌中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 喉鳞状细胞癌 Jab1基因 p27kip1基因 RNA干扰 HEp-2细胞 RT-pCR

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重组腺病毒介导的p27Kip1基因治疗大鼠神经胶质瘤的实验研究 被引量：2

12

作者 赵斌杰 赵洪洋 +2 位作者 戢翰升 王家宁 潘国栋 《中国临床神经外科杂志》 2006年第3期160-163,共4页

目的研究腺病毒介导的人p27Kip1基因(Ad-p27Kip1)对大鼠神经胶质瘤生长的抑制作用。方法建立大鼠胶质瘤模型,随机分成3组:Ad-p27Kip1组、Ad-LacZ和对照组,分别给予Ad-p27Kip1、Lacz重组复制缺陷性腺病毒(Ad-LacZ)和PBS瘤内注射,观察对... 目的研究腺病毒介导的人p27Kip1基因(Ad-p27Kip1)对大鼠神经胶质瘤生长的抑制作用。方法建立大鼠胶质瘤模型,随机分成3组:Ad-p27Kip1组、Ad-LacZ和对照组,分别给予Ad-p27Kip1、Lacz重组复制缺陷性腺病毒(Ad-LacZ)和PBS瘤内注射,观察对肿瘤生长的抑制情况,并用免疫荧光法检测p27和细胞周期素(cyclinD1)的表达;原位末端标记法检测细胞凋亡情况。结果Ad-p27Kip1组肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05),免疫荧光染色显示移植瘤p27表达明显增强(P<0.05),cyclinD1的表达受到明显抑制(P<0.05),且细胞凋亡显著多于Ad-LacZ组和对照组(P<0.05)。结论Ad-p27Kip1对大鼠胶质瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制可能是增强p27表达、抑制cyclinD1表达。p27Kip1有望成为胶质瘤基因治疗的新策略。 展开更多

关键词 胶质瘤 p27kip1 基因治疗 细胞凋亡

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上颌窦鳞癌中P21^(WAF1/CIP1)和P27^(KIP1)的表达及意义 被引量：1

13

作者 王瑛 王建波 《济宁医学院学报》 2004年第3期14-15,共2页

目的　检测上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性粘膜中P2 1 WAF1/CIP1和P2 7KIP1的表达情况 ,分析其表达与上颌窦鳞癌临床病理特性的关系。方法　应用免疫组织化学法检测 5 0例上颌窦鳞癌、2 0例上颌窦内翻性乳头状瘤、1 0例... 目的　检测上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性粘膜中P2 1 WAF1/CIP1和P2 7KIP1的表达情况 ,分析其表达与上颌窦鳞癌临床病理特性的关系。方法　应用免疫组织化学法检测 5 0例上颌窦鳞癌、2 0例上颌窦内翻性乳头状瘤、1 0例上颌窦炎性黏膜中P2 1 WAF1/CIP1和P2 7KIP1的表达情况。结果　 (1 )在上颌窦鳞癌、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦炎性黏膜中 ,P2 1 WAF1/CIP1阳性表达率分别为 80 0 %、6 5 0 %、4 0 0 % (P <0 0 5 ) ;P2 7KIP1阳性表达率分别为 70 0 %、75 0 %、4 0 0 % (P <0 0 5 )。 (2 )P2 1 WAF1/CIP1和P2 7KIP1阳性表达率与上颌窦鳞癌的型别、T分型无显著性差异 (P >0 0 5 )。 (3)P2 1 WAF1/CIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率分别为 73 2 % (1 1 / 1 5 )、5 8 9% (1 1 / 1 9)、2 5 0 % (4 / 1 6 ) (P <0 0 5 ) ;P2 7KIP1在高、中和低分化的喉癌中阳性表达率组间比较无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　在上颌窦炎性黏膜、上颌窦内翻性乳头状瘤及上颌窦鳞癌中 ,随病变加重 ,P2 1 WAF1/CIP1、P2 展开更多

关键词 上颌窦 p27^kip1 鳞癌 p21^WAF1/CIp1 阳性表达率 内翻性乳头状瘤 炎性 分化 粘膜 免疫组织化学法

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胃癌中P27^(Kip1)、P53表达与其浸润、转移和预后的关系 被引量：1

14

作者 宋红杰 陈莉 《南通医学院学报》 2004年第2期170-172,共3页

目的 :研究胃癌组织中 P2 7Kip1和 P5 3的表达与胃癌浸润、转移和预后的关系。方法 :用免疫组化 (二步法 )检测 10 0例胃癌组织中的 P2 7Kip1 蛋白和 P5 3蛋白的表达。结果 :P2 7Kip1 蛋白阳性表达检测率 4 4 % ;P5 3蛋白阳性表达检测率... 目的 :研究胃癌组织中 P2 7Kip1和 P5 3的表达与胃癌浸润、转移和预后的关系。方法 :用免疫组化 (二步法 )检测 10 0例胃癌组织中的 P2 7Kip1 蛋白和 P5 3蛋白的表达。结果 :P2 7Kip1 蛋白阳性表达检测率 4 4 % ;P5 3蛋白阳性表达检测率 4 9%。在胃癌浸润浆膜组、淋巴结转移组和 5年内死亡组中 P2 7Kip1低表达与 P5 3高表达均与相应组比较差异有显著性 (P<0 .0 5 )。单变量生存分析结果显示 P2 7Kip1 高表达组 5年生存率为 70 .5 9% ,显著高于低表达组 5 4 .5 5 %和阴性组 2 6 % ;P5 3高表达组 5年生存率为 19.2 3% ,显著低于低表达组 4 3.75 %和阴性组 5 3.19%。多变量 Cox回归模型分析显示 P2 7Kip1 、P5 3均是判断胃癌独立的预后指标 ,但低 P2 7Kip1 表达对患者预后差的相对危险度 (RR=3.0 6 )显著大于高 P5 3表达对患者预后差的相对危险度 (RR=2 .33)。结论 :P2 7Kip1低表达与 P5 3高表达的癌细胞常更能浸润与转移 ,使患者生存率明显降低。 P2 7Kip1 和 P5 3是判断胃癌预后的独立指标 ,其中 P2 7Kip1 展开更多

关键词 胃癌 p27^kip1基因 p53基因 预后

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p27kip1基因转移抑制大鼠胶质瘤生长的实验研究 被引量：1

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作者 赵斌杰 戢翰升 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2007年第23期4410-4412,共3页

[目的]探讨重组腺病毒介导的人突变型p27kip1基因(Ad-p27kip1)表达对大鼠神经胶质瘤移植瘤生长的抑制作用。[方法]建立大鼠胶质瘤移植瘤模型,随机分成3组:Ad-p27组、Ad-LacZ组、PBS组。Ad-p27组给予腺病毒介导的人p27 kip1基因(Ad-p27ki... [目的]探讨重组腺病毒介导的人突变型p27kip1基因(Ad-p27kip1)表达对大鼠神经胶质瘤移植瘤生长的抑制作用。[方法]建立大鼠胶质瘤移植瘤模型,随机分成3组:Ad-p27组、Ad-LacZ组、PBS组。Ad-p27组给予腺病毒介导的人p27 kip1基因(Ad-p27kip1)瘤内注射,另2组分别给予Ad-LacZ和PBS瘤内注射,观察对肿瘤生长的抑制情况,并用免疫荧光法检测P27和CyclinD1的表达;原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡情况。[结果]给予Ad-p27kip1基因治疗的实验组大鼠肿瘤生长受到明显抑制;在颅内肿瘤模型组给予Ad-p27治疗的大鼠生存时间明显延长;免疫荧光染色显示移植瘤P27表达明显增强,CyclinD1的表达受到抑制。Ad-p27组细胞凋亡显著多于Ad-LacZ组和PBS组。[结论]腺病毒介导的人p27基因(Ad-p27kip1)对大鼠胶质瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制是增强p27表达、抑制CyclinD1的表达、诱导胶质瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 胶质瘤 p27kip1 基因治疗 细胞凋亡

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人类p27^(kip1)基因正、反义真核表达质粒的构建 被引量：1

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作者 张冬梅 程纯 +1 位作者 严美娟 陆建新 《南通大学学报（医学版）》 2005年第1期4-6,共3页

目的 :克隆人类 p2 7kip1 基因 ,构建其正、反义真核表达质粒。方法 :采用逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)技术 ,从人类伯基特淋巴瘤细胞株 Raji中扩增出人类 p2 7kip1 c DNA全长序列 ,通过 DNA重组技术将该基因重组于 pc DNA3.1真核表... 目的 :克隆人类 p2 7kip1 基因 ,构建其正、反义真核表达质粒。方法 :采用逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR)技术 ,从人类伯基特淋巴瘤细胞株 Raji中扩增出人类 p2 7kip1 c DNA全长序列 ,通过 DNA重组技术将该基因重组于 pc DNA3.1真核表达载体上 ,构建 p2 7kip1 正、反义表达质粒。通过酶切电泳分析及 DNA测序的方法对重组表达质粒进行鉴定。结果 :通过酶切鉴定及测序分析证实 ,本实验构建的重组表达质粒目的基因片段为人类 p2 7kip1 c DNA。结论 :本实验成功地克隆了人类 p2 7kip1基因并构建了其正、反义真核表达质粒 ,为进一步研究 p2 展开更多

关键词 p27^kip1 基因克隆 基因重组 非霍奇金淋巴瘤 逆转录聚合酶链反应

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p27^(kip1)基因转染增强放射抗拒人食管癌细胞的放射敏感性 被引量：1

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作者 童强 侯晓华 金曙 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期28-31,共4页

目的研究腺病毒介导的p27kip1基因转染对人放射抗拒食管癌细胞放射敏感性的影响。方法以重组腺病毒介导的p27kip1基因转染人放射抗拒食管癌细胞EC9706R,免疫细胞化学法检测p27kip1表达;流式细胞仪检测转染前后肿瘤细胞周期,克隆形成实... 目的研究腺病毒介导的p27kip1基因转染对人放射抗拒食管癌细胞放射敏感性的影响。方法以重组腺病毒介导的p27kip1基因转染人放射抗拒食管癌细胞EC9706R,免疫细胞化学法检测p27kip1表达;流式细胞仪检测转染前后肿瘤细胞周期,克隆形成实验检测p27kip1基因转染前后两种EC9706R细胞的放射敏感性。结果腺病毒转染后放射抗拒食管癌EC9706R细胞p27kip1表达明显升高,细胞周期结果显示G0/G1期阻滞;转染p27kip1前后放射敏感性参数检测结果比较:转染前EC9706R细胞SF2=67.4%,Dq=1.66 Gy,转染后SF2=49.7%,Dq=1.03 Gy,放射增敏比SERSF2、SERDq分别为1.36,1.61,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 p27kip1基因转染能增强人放射抗拒食管癌细胞的放射敏感性。 展开更多

关键词 基因 p27kip1 食管癌 放射抗拒 放射增敏

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纳米粒子PLGA介导p27kip1基因转染抑制兔RPE细胞增殖的研究 被引量：1

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作者 杨智 王昕华 李若溪 《国际眼科杂志》 CAS 2011年第12期2082-2084,共3页

目的:通过聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子载体介导p27kip1基因转染视网膜色素上皮(retinal pigmentepithelium,RPE)细胞,观察其对视网膜脱离(retinadetachment,RD)的兔眼RPE增殖的抑制情况。方法:制备p27kip1基因纳米粒子,并进行... 目的:通过聚乳酸-聚乙醇酸共聚物(PLGA)纳米粒子载体介导p27kip1基因转染视网膜色素上皮(retinal pigmentepithelium,RPE)细胞,观察其对视网膜脱离(retinadetachment,RD)的兔眼RPE增殖的抑制情况。方法:制备p27kip1基因纳米粒子,并进行基因含量的测定。然后制备RD动物模型,应用免疫组织化学法检测PCNA蛋白的表达,蛋白质印迹法检测p27kip1蛋白在各视网膜细胞的表达。结果:p27kip1基因治疗组于7,14,28d的PCNA蛋白表达阳性率较对照组明显低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明PCNA蛋白阳性表达受到p27kip1基因纳米粒子的明显抑制。且基因转染组3,7,14d时p27kip1蛋白表达较对照组明显增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:p27kip1基因有可能作为一个目的基因,借助新兴的基因载体纳米粒子用于抑制RPE细胞增殖的基因治疗。 展开更多

关键词 纳米粒子 p27kip1 视网膜色素上皮细胞 pCNA

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腺病毒介导的p27kip1基因转移对食管癌细胞周期的影响 被引量：1

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作者 张卫国 吴清明 +4 位作者 童强 于皆平 王小虎 谢国建 王卫明 《中国医师杂志》 CAS 2004年第4期456-458,共3页

目的　用腺病毒为载体 ,研究p2 7kip1基因转移对食管癌细胞周期的影响。方法　将携带p2 7kip1基因的重组腺病毒转染食管癌细胞株Eca970 6,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定细胞生长抑制效应 ,免疫细胞化学法检测p2 7kip1表达 ,流式细胞仪(F... 目的　用腺病毒为载体 ,研究p2 7kip1基因转移对食管癌细胞周期的影响。方法　将携带p2 7kip1基因的重组腺病毒转染食管癌细胞株Eca970 6,用四甲基偶氮唑蓝 (MTT)法测定细胞生长抑制效应 ,免疫细胞化学法检测p2 7kip1表达 ,流式细胞仪(FCM)检测细胞周期。结果　p2 7kip1基因转染食管癌细胞株Eca970 6后 ,p2 7kip1表达增强 ,细胞生长显著受抑制 ,GO/G1期细胞比例增加 ,S期、G2 /M期比例降低。结论　腺病毒介导的p2 7kip1基因转移能显著抑制食管癌细胞的生长 ,使细胞产生G1期阻滞。 展开更多

关键词 p27kip1 基因转移 食管癌 腺病毒 细胞周期 抑癌基因

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p27^(KIP1)-绿色荧光蛋白融合基因在HCC-9204细胞中的瞬时表达

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作者 郑建勇 李江 +2 位作者 李开宗 王文亮 王为忠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期218-220,共3页

目的 :观察 p2 7KIP1 绿色荧光蛋白 (GFP)融合蛋白在肝癌细胞系HCC 92 0 4中的表达及定位。方法 :根据p2 7KIP1基因的编码顺序 ,应用PCR技术将 p2 7KIP1基因 3′末端终止密码TAA突变为TGT ,并通过基因重组技术将其与GFP基因融合。再采... 目的 :观察 p2 7KIP1 绿色荧光蛋白 (GFP)融合蛋白在肝癌细胞系HCC 92 0 4中的表达及定位。方法 :根据p2 7KIP1基因的编码顺序 ,应用PCR技术将 p2 7KIP1基因 3′末端终止密码TAA突变为TGT ,并通过基因重组技术将其与GFP基因融合。再采用脂质体转染法 ,将 p2 7KIP1 GFP融合基因转入HCC 92 0 4细胞中 ,用荧光显微镜观察其表达情况。结果 :DNA序列测定的结果显示 ,p2 7KIP1基因与基因库中已收录的 p2 7KIP1的序列相比较 ,仅有 1个核苷酸的差异。荧光显微镜显示 ,在转染GFP基因的HCC 92 0 4 /GFP细胞中 ,荧光均匀地分布于整个细胞 ;而在转染融合基因 p2 7KIP1 GFP的HCC 92 0 4 /GFP p2 7细胞中 ,绿色荧光主要见于核内。结论 :转染的HCC 92 0 4细胞能高效表达融合基因p2 7KIP1 GFP ,且定位于细胞核内 ,与 p2 7KIP1基因的表达方式相同。 展开更多

关键词 肝癌细胞 p27^kip1基因 绿色荧光蛋白

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