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川续断皂苷Ⅵ诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化的研究 被引量:82
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作者 武密山 赵素芝 +4 位作者 任立中 王茹 白霞 韩红伟 李彬 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期222-226,共5页
目的探讨川续断皂苷Ⅵ(akebia saponin D)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化为成骨细胞的影响。方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,选择合适的培养基,传代扩增。采用不同浓度的川续断皂苷Ⅵ对大鼠MSCs定向... 目的探讨川续断皂苷Ⅵ(akebia saponin D)对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)定向诱导分化为成骨细胞的影响。方法用密度梯度离心结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSCs,选择合适的培养基,传代扩增。采用不同浓度的川续断皂苷Ⅵ对大鼠MSCs定向诱导分化,MTT法观察各组对MSCs的增殖作用并绘制细胞生长曲线;观察MSCs诱导分化过程中成骨细胞内碱性磷酸酶(alkaliphosphatase,ALP)活性;采用ELISA法检测MSCs诱导分化过程中骨钙素(Osteo-calcin,OC)的含量;RT-PCR方法检测MSCs诱导分化过程中核心结合因子α-1(Cbfα1)mRNA表达。结果细胞生长曲线显示各组MSCs数量均随时间延长而增加,中、高浓度的川续断皂苷Ⅵ能明显提高MSCs分化为成骨细胞的ALP活性和骨钙素的含量,且使Cbfα1 mRNA的表达升高。结论川续断皂苷Ⅵ具有促进大鼠体外MSCs向成骨细胞增殖和分化的作用,这一作用可能与其升高Cbfα1 mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 川续断皂苷Ⅵ 骨髓间充质干细胞 成骨细胞 细胞增殖 细胞分化 碱性磷酸酶 核心结合因子α-1
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骨碎补提取物促小鼠成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和钙化作用的研究 被引量:49
2
作者 唐琪 陈莉丽 严杰 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期164-168,共5页
目的 :探讨中药骨碎补有无促进成骨细胞增殖、分化和钙化的作用。方法 :制备骨碎补的水、醇提取液。小鼠成骨细胞株MC3T3 E1作为药物筛选的细胞模型 ;用MTT法和流式细胞术测定不同浓度的骨碎补水、醇提取液的促细胞增殖作用 ;采用ALP活... 目的 :探讨中药骨碎补有无促进成骨细胞增殖、分化和钙化的作用。方法 :制备骨碎补的水、醇提取液。小鼠成骨细胞株MC3T3 E1作为药物筛选的细胞模型 ;用MTT法和流式细胞术测定不同浓度的骨碎补水、醇提取液的促细胞增殖作用 ;采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察上述药物提取液的促细胞分化作用 ;以Vonkossa钙化染色法了解上述药物提取液的促细胞钙化作用。结果 :0 .0 1,1mg·L-1骨碎补水提液能促进MC3T3 E1细胞数量增加 (P <0 .0 5 ) ;0 .0 1,1mg·L-1骨碎补水提液和醇提液能使S期细胞百分率升高、G1期细胞百分率减少 ;1,10 0mg·L-1骨碎补醇提液能使细胞ALP的活性升高 (P <0 .0 5 ) ;10 0mg·L-1骨碎补醇提液能明显促进细胞骨钙素合成和分泌 (P <0 .0 0 1) ;1mg·L-1骨碎补水提液及 0 .0 1mg·L-1骨碎补醇提液均可促进细胞钙化 (P <0 .0 5 )。结论 :骨碎补水相和醇相提取物中分别存在有较高活性的促成骨细胞增殖、分化和钙化的物质。 展开更多
关键词 骨碎补 提取物 成骨细胞 MC3T3-E1 细胞增殖 分化 钙化
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不同大小机械牵张力对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶的影响 被引量:44
3
作者 唐林 林珠 +1 位作者 李永明 王华 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期580-581,共2页
目的研究不同大小机械牵张力对成骨细胞增殖能力及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,以了解牙槽骨改建机制。方法通过自行研制的多通道细胞牵张应力加载系统对小鼠成骨样细胞MC3T3E1同时施加0%、6%、12%和18%的机械牵张力,作用24h和48h后,用MT... 目的研究不同大小机械牵张力对成骨细胞增殖能力及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响,以了解牙槽骨改建机制。方法通过自行研制的多通道细胞牵张应力加载系统对小鼠成骨样细胞MC3T3E1同时施加0%、6%、12%和18%的机械牵张力,作用24h和48h后,用MTT法检测细胞受力后的增殖变化,ALP试剂盒检测ALP的变化。结果细胞受力后,其增殖能力随牵张力值的增大而明显增强(P<0.01),而ALP活性随牵张力值的增大明显降低(P<0.01)。结论不同大小机械牵张力可以影响成骨细胞的增殖能力及ALP活性,与力值大小密切相关。 展开更多
关键词 机械牵张力 成骨细胞 增殖 碱性磷酸酶
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老年大鼠含淫羊藿血清对成骨细胞的增殖与分化的影响 被引量:27
4
作者 马涛 崔燎 +2 位作者 吴铁 艾春媚 李青南 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2002年第1期55-57,60,共4页
目的 观察老年雄性大鼠含淫羊藿血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响。方法 雄性 ,19月龄SD大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,分别为生理盐水组、淫羊藿低剂量组 (1g ml)、淫羊藿高剂量组 (2g ml) ,按 0 5ml 10 0g的量 ,每日两次 ... 目的 观察老年雄性大鼠含淫羊藿血清对新生大鼠颅骨成骨细胞增殖和分化的影响。方法 雄性 ,19月龄SD大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,分别为生理盐水组、淫羊藿低剂量组 (1g ml)、淫羊藿高剂量组 (2g ml) ,按 0 5ml 10 0g的量 ,每日两次 ,连续灌胃 1个月 ,处死前 1h ,再灌胃一次 ,取血清 (灭活 ,过滤 ) ,最终稀释成 1∶2 0、1∶4 0、1∶80加入新生大鼠颅骨成骨细胞体系 ,用MTT法检测细胞增殖 ,另外 ,分别在第 2天、第 3天、第 4天动态观察细胞生长过程 ,做生长曲线和检测分化指标ALP。结果 老年大鼠含药血清在 1∶80稀释比 ,MTT测得的OD值给药组高于对照组 (P <0 0 5 )且以高剂量组高于低剂量组 (P <0 0 5 ) ,生长曲线表现为 ,在第 2天各组无明显差别 ,从第 3天开始 ,含药血清增殖速度加快 ,仍以高剂量组最快。ALP检测结果 ,含药血清OD值高于对照组 (P <0 0 5 ) ,但不同剂量之间没有差异 (P >0 0 5 )。结论 老年雄性SD大鼠连续服用淫羊藿水提液 1个月 。 展开更多
关键词 老年大鼠 淫羊藿水提液 含药血清 成骨细胞 增殖 分化
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含淫羊藿总黄酮大鼠血清对成骨细胞发育的影响 被引量:39
5
作者 马慧萍 贾正平 +3 位作者 陈克明 张汝学 李茂星 王娟 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期928-931,共4页
目的:研究含淫羊藿总黄酮大鼠血清对体外培养成骨细胞(ROB)增殖和分化的影响。方法:将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.1,1,10,100μg.mL-14种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2.5%,5%,10%3种质量浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液... 目的:研究含淫羊藿总黄酮大鼠血清对体外培养成骨细胞(ROB)增殖和分化的影响。方法:将淫羊藿总黄酮(TFE)以0.1,1,10,100μg.mL-14种质量浓度、含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2.5%,5%,10%3种质量浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对细胞增殖和分化成熟的影响。细胞增殖采用MTT法进行分析,细胞分化是于培养第4,8,12,20天分别检测碱性磷酸酶活性(比色法)、骨钙素分泌量(放射免疫法)、钙盐沉积量(比色法)和矿化结节(组织化学法)等。结果:TFE 4种质量浓度均对ROB细胞增殖和分化无明显影响,2.5%和5%SRAT则表现出强烈的刺激细胞增殖活性并显著提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、矿化结节数和钙盐沉积量。结论:淫羊藿总黄酮代谢产物强烈刺激成骨细胞的增殖并促进其分化成熟,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有抗骨质疏松的活性。 展开更多
关键词 淫羊藿 黄酮 成骨细胞 分化 增殖
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地黄活性成分梓醇对小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化和矿化的影响 被引量:39
6
作者 武密山 赵素芝 +1 位作者 李恩 白霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期509-513,共5页
目的检测地黄活性成分梓醇对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法制备不同浓度地黄活性成分梓醇提取液。以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型;用MTT法测定不同浓度的梓醇溶液的促细胞增殖作用;采用ALP活性... 目的检测地黄活性成分梓醇对成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。方法制备不同浓度地黄活性成分梓醇提取液。以小鼠成骨细胞株MC3T3-E1作为药物筛选的细胞模型;用MTT法测定不同浓度的梓醇溶液的促细胞增殖作用;采用ALP活性和骨钙素定量检测分别观察不同浓度的梓醇溶液的促细胞分化作用;以Vonkos-sa钙化染色法了解不同浓度的梓醇溶液的促细胞钙化作用。结果梓醇在1×10-7~1×10-9mol·L-1浓度范围内培养24及48h促进成骨细胞株MC3T3-E1细胞增殖。梓醇在浓度1×10-5~1×10-6mol·L-148及72h提高成骨细胞株MC3T3-E1细胞内碱性磷酸酶的活性。梓醇在浓度1×10-5~1×10-6mol·L-1培养8及12d时能明显促进成骨细胞MC3T3-E1骨钙素合成和分泌。梓醇在浓度1×10-5~1×10-6mol·L-1培养19d时成骨细胞株MC3T3-E1细胞的矿化结节(mineralized bone nodular structure,MBNS)数目增多。结论梓醇可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖和分化能力,梓醇可能是地黄治疗骨质疏松作用的活性成分之一。 展开更多
关键词 梓醇 地黄 成骨细胞 增殖 分化 基质矿化
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骨碎补含药血清对成骨细胞增殖、成骨的影响 被引量:31
7
作者 宋渊 李盛华 何志军 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期125-128,170,共5页
目的研究骨碎补含药血清对成骨细胞的增殖、成骨的影响。方法取乳鼠颅骨,利用二型胶原酶反复消化,离心,提取成骨细胞。利用骨碎补含药血清干预,分别测定细胞增殖率、ALP活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量等,研究骨碎补含药血清对成骨细胞... 目的研究骨碎补含药血清对成骨细胞的增殖、成骨的影响。方法取乳鼠颅骨,利用二型胶原酶反复消化,离心,提取成骨细胞。利用骨碎补含药血清干预,分别测定细胞增殖率、ALP活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量等,研究骨碎补含药血清对成骨细胞的增殖、成骨分化及其抗氧化性的影响;结果用含药血清干预,测定增殖率、ALP活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量、钙化结节量均高于空白对照组。结论骨碎补含药血清可以促进成骨细胞的增殖、成骨分化及其增强其抗氧化性。 展开更多
关键词 成骨细胞 增殖分化 骨碎补 含药血清
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木豆叶提取物对人的类成骨细胞TE85成骨功能和体外破骨细胞分化的影响 被引量:27
8
作者 郑元元 杨京 +1 位作者 陈迪华 孙兰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期386-391,共6页
木豆素是从天然植物木豆叶中提取的单体化合物,结构类似乙烯雌酚。本文观察木豆素及4种木豆叶提取物总成分(32-1,35-1,35-2和35-3)对人的类成骨细胞HOS TE85成骨功能、间质矿化及体外破骨细胞分化的影响。以木豆叶提取物作用于细胞48 h... 木豆素是从天然植物木豆叶中提取的单体化合物,结构类似乙烯雌酚。本文观察木豆素及4种木豆叶提取物总成分(32-1,35-1,35-2和35-3)对人的类成骨细胞HOS TE85成骨功能、间质矿化及体外破骨细胞分化的影响。以木豆叶提取物作用于细胞48 h,观察细胞增殖、3H-脯氨酸掺入量及碱性磷酸酶活性;用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色法观察体外破骨细胞形成;作用于细胞18 d,用茜素红染色法观察细胞间质矿化。结果表明,作用于细胞48 h后,木豆素可促进细胞增殖,在1×10-8g.mL-1时细胞数增加57.7%,3H-脯氨酸掺入量增加98.5%。35-1和35-3还可明显增加碱性磷酸酶活性。长时程作用后,32-1和35-3可明显增加成骨细胞间质矿化程度。木豆素(1×10-7g.mL-1)对破骨细胞形成有明显的抑制作用,抑制率为22.8%,32-1(1×10-7g.mL-1)的抑制率为37.9%。木豆素及木豆叶提取物都具有刺激成骨细胞骨形成、促进细胞间质矿化及抑制破骨细胞形成的活性,提示木豆素在骨细胞上有类雌激素样作用,具有抗骨质疏松新药的研究前景。 展开更多
关键词 木豆叶提取物 成骨细胞 破骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶
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淫羊藿总黄酮含药血清对成骨细胞OPG/OPGL基因表达的影响 被引量:29
9
作者 宋敏 罗晓 +1 位作者 李宁 李晶 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期883-886,共4页
目的研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞骨保护素(OPG)和骨保护素配体(OPGL)基因表达的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化... 目的研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞骨保护素(OPG)和骨保护素配体(OPGL)基因表达的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化法体外培养成骨细胞;将含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以5%的质量浓度加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对OPG/OPGL基因表达水平的影响。OPG/OPGL基因表达水平用RT-PCR法检测。结果半定量RT-PCR显示5%含淫羊藿总黄酮大鼠血清干预成骨细胞时,存在OPG mRNA的转录,在此浓度下,随着时间的延长转录水平逐渐增加,而OPGL mRNA水平随着时间的延长转录水平逐渐减弱。结论淫羊藿总黄酮代谢产物能上调成骨细胞中OPG mRNA的表达、抑制OPGL mRNA的表达,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 含药血清 成骨细胞 OPG/OPGL
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不同频率振动应变对成骨细胞增殖及分化能力的影响 被引量:22
10
作者 查丁胜 陈建庭 +5 位作者 邓轩庚 孙学刚 佟丽 王建钧 翁科捷 金大地 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第5期303-307,312,共6页
目的观察不同频率振动应变(vibration strain)对体外培养成骨细胞细胞周期、增殖能力及分化的影响,确定最佳振动频率。方法应用自制复合振动仪,将振动强度0.5g(g为加速度),不同频段3~10、15~30、25~45、50~80和80~100Hz振... 目的观察不同频率振动应变(vibration strain)对体外培养成骨细胞细胞周期、增殖能力及分化的影响,确定最佳振动频率。方法应用自制复合振动仪,将振动强度0.5g(g为加速度),不同频段3~10、15~30、25~45、50~80和80~100Hz振动应变分别作用于成骨细胞,振动应变加载后分别检测细胞周期、细胞增殖能力(MTT法)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的变化。结果15~30和25~45Hz频段诱导成骨细胞周期循环(P〈0.01),促进细胞增殖(P〈0.01),增强ALP活性(P〈0.01);80~100和3~10Hz频段抑制细胞周期循环(P〈0.01);80~100Hz频段抑制细胞增殖(P〈0.01);50~80和80~100Hz频段抑制ALP活性(P〈0.01)。结论不同频率振动应变对成骨细胞周期、增殖能力、ALP活性均有影响,振动应变促进成骨细胞增殖及分化的最佳频率为15~45Hz。 展开更多
关键词 振动应变 不同频率 成骨细胞 细胞周期 增殖 碱性磷酸酶
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丹酚酸B对体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞的影响 被引量:24
11
作者 范焕琼 崔燎 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期978-979,共2页
关键词 丹酚酸B 成骨细胞 增殖 分化 矿化
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淫羊藿苷促进MC3T3-E1成骨分化通过Hedgehog信号通路 被引量:24
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作者 辛红美 许洁 汪长东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期616-620,共5页
目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对MC3T3-E1前成骨细胞系增殖和分化的影响。方法CCK-8检测MC3T3-E1细胞增殖活性;茜素红染色(AR-S)检测成骨分化和钙结节的形成;Western blot检测osteocalcin、ALP、Shh蛋白表达;测定ALP活性。结果CCK-8结... 目的研究淫羊藿苷(icariin,ICA)对MC3T3-E1前成骨细胞系增殖和分化的影响。方法CCK-8检测MC3T3-E1细胞增殖活性;茜素红染色(AR-S)检测成骨分化和钙结节的形成;Western blot检测osteocalcin、ALP、Shh蛋白表达;测定ALP活性。结果CCK-8结果显示,ICA(5~40μmol·L^-1)组与对照组相比,显著促进MC3T3-E1细胞增殖;ICA组与对照组相比,ALP活性和蛋白表达量明显升高,且矿化沉积增多;ICA+CYC组与ICA组相比,ALP活性和Shh蛋白表达量明显下降,且茜素红染色定量明显降低。结论ICA能够通过Hedgehog信号通路促进成骨细胞增殖和分化。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 成骨 HEDGEHOG信号通路 骨钙素 碱性磷酸酶 细胞增殖 细胞分化
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黄芪多糖对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究 被引量:24
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作者 孔祥鹤 牛银波 +2 位作者 王婷梅 王娟 梅其炳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2065-2069,共5页
目的研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法体外培养的新生SD大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度(0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/mL)的黄芪多糖,24、48 h后MTT法检测细胞增殖... 目的研究黄芪多糖对体外培养大鼠原代成骨细胞增殖、分化及矿化的影响及其作用机制。方法体外培养的新生SD大鼠颅骨原代成骨细胞体系中分别加入不同质量浓度(0.1、0.3、1、3、10、30、100μg/mL)的黄芪多糖,24、48 h后MTT法检测细胞增殖,碱性磷酸酶(AKP)活性检测法检测细胞分化,茜素红染色法观察黄芪多糖10μg/mL对细胞矿化的影响,Western blotting法检测黄芪多糖1、10μg/mL作用于细胞24 h后,对细胞中骨形成蛋白(BMP-2)的表达、MAPK信号通路中关键蛋白ERK、P38、p-ERK、p-P38等表达的影响。结果黄芪多糖能剂量相关地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调BMP-2、p-ERK、p-P38蛋白的表达,提高p-ERK/ERK、p-P38/P38值。结论黄芪多糖可通过促进BMP-2的表达、上调其下游的ERK MAPK和P38 MAPK的磷酸化水平来促进成骨细胞增殖、分化。 展开更多
关键词 黄芪多糖 原代成骨细胞 增殖 分化 矿化 BMP-2 MAPK
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含药血清对体外培养成骨细胞的影响 被引量:18
14
作者 邵敏 庄洪 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第2期117-119,共3页
目的 研究中药骨康吸收后不同浓度血清对离体大鼠成骨细胞增殖的影响及其对成骨细胞分泌IL 6的影响。方法 采用胶原 胰蛋白酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞 ,然后以中药骨康吸收后血清 ,加入体外培养成骨细胞中进行培养 ,MTT法测成... 目的 研究中药骨康吸收后不同浓度血清对离体大鼠成骨细胞增殖的影响及其对成骨细胞分泌IL 6的影响。方法 采用胶原 胰蛋白酶消化法获得新生大鼠的成骨细胞 ,然后以中药骨康吸收后血清 ,加入体外培养成骨细胞中进行培养 ,MTT法测成骨细胞增殖 ,ELISA法测培养上清中IL 6含量。结果 发现中药吸收后血清能促进成骨细胞的增殖和分化 ,各种浓度中以正常剂量药物灌胃后 5h取血清含 1 0 %药物浓度最佳。同时 ,新生大鼠体外培养成骨细胞能够分泌IL 6 ,体外培养成骨细胞在培养后 9d左右 ,IL 6的分泌达到高峰值 ,随后分泌IL 6的能力逐步下降 ,中药骨康含药血清可作用于成骨细胞 ,使其分泌IL 6的能力下降。结论 中药骨康含药血清能够促进成骨细胞的增殖与分化 ,从而促进骨形成同时可抑制成骨细胞分泌IL 6 ,这可能是中药骨康抑理骨吸收的机制之一。 展开更多
关键词 含药血清 体外培养 成骨细胞 大鼠 骨质疏松症 白介素-6
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淫羊藿总黄酮含药血清对成骨细胞增殖、分化的影响 被引量:23
15
作者 宋敏 罗晓 +1 位作者 李宁 李晶 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2010年第2期3-5,共3页
目的:研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞增殖与分化功能的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法:采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化法体外培养成骨细胞;将含淫... 目的:研究淫羊藿总黄酮含药血清对体外培养成骨细胞增殖与分化功能的影响,进一步揭示淫羊藿"补肾壮阳,益精健骨"的作用机制。方法:采用中药血清药理学方法制备含淫羊藿总黄酮大鼠血清;用多次酶消化法体外培养成骨细胞;将含淫羊藿总黄酮大鼠血清(SRAT)以2.5%,5%,10%三种质量浓度分别加入新生大鼠颅骨成骨细胞培养液中,研究它们对细胞增殖与分化成熟的影响。细胞增殖采用MTT法进行分析;细胞分化并于培养第4、8、12、16天检测碱性磷酸酶活性(组织化学法)、Ⅰ-型胶原(Co-l)的表达(免疫组化法)和矿化结节(组织化学法)。结果:2.5%和5%SRAT表现出强烈的刺激细胞增殖活性并显著提高碱性磷酸酶活性、矿化结节数和Ⅰ-型胶原表达。结论:淫羊藿总黄酮代谢产物强烈刺激成骨细胞的增殖并促进其分化成熟,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性。 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 含药血清 成骨细胞 增殖 分化
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补肾健骨汤对成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响 被引量:14
16
作者 邢国胜 谈志龙 +3 位作者 王淑云 白人骁 沈启捷 禹军 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1020-1022,共3页
目的 考察补肾健骨汤体外对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响。方法 采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞 ,取第 3代为实验模型 ,用常规计数法每日同时间检测成骨细胞增殖情况 ,连续 7d,观察补肾健骨汤提取液及载药血清... 目的 考察补肾健骨汤体外对大鼠成骨细胞增殖及碱性磷酸酶、骨钙素合成的影响。方法 采用酶消化法分离大鼠颅骨成骨细胞 ,取第 3代为实验模型 ,用常规计数法每日同时间检测成骨细胞增殖情况 ,连续 7d,观察补肾健骨汤提取液及载药血清对成骨细胞增殖的影响 ;以酶免法测定培养第 5天细胞内骨钙素的含量。结果 补肾健骨汤提取液及载药血清对体外培养的成骨细胞增殖均有显著的促进作用 ,其中提取液的作用在 0~ 10 0 μg/ m L浓度范围内呈剂量依赖性 ;提取液与载药血清均提高细胞内碱性磷酸酶和骨钙素含量 ,与空白对照组比较均有显著差异 (P<0 .0 5 )。结论 补肾健骨汤体外对成骨细胞的增殖及碱性磷酸酶。 展开更多
关键词 补肾健骨汤 提取液 载药血清 成骨细胞 细胞增殖 碱性磷酸酶 大鼠 骨钙素 中医药治疗
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补骨脂单体成分对体外培养成骨细胞和破骨细胞分化的影响 被引量:23
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作者 柴丽娟 樊娜 +5 位作者 王虹 张晗 王少峡 苗琳 毛浩萍 周昆 《天津中医药》 CAS 2015年第5期299-303,共5页
[目的]研究补骨脂单体成分异补骨脂素、异补骨脂查尔酮对体外培养破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)及成熟破骨细胞形成数目、体外培养成骨细胞增殖与分化的影响。[方法]体外采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配... [目的]研究补骨脂单体成分异补骨脂素、异补骨脂查尔酮对体外培养破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)及成熟破骨细胞形成数目、体外培养成骨细胞增殖与分化的影响。[方法]体外采用巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导培养破骨细胞前体细胞,考察异补骨脂素、异补骨脂素查尔酮对破骨细胞前体细胞在分化过程中其标志性酶TRACP的活性和成熟破骨细胞产生数目的影响。对硝基苯磷酸盐法(PNPP法)测定破骨细胞TRACP活性,TRACP细胞染色法鉴定并检测成数破骨细胞数目。酶消化法体外培养新生小鼠成骨细胞,(CCK-8)(cell counting kit-8)法检测两成分对成骨细胞增殖的影响,磷酸苯二钠法测定两成分对成骨细胞标志性酶碱性磷酸酶(ALP)的影响。[结果]体外成功培养小鼠破骨细胞和成骨细胞,两细胞强表达各自的标志性酶TRACP和ALP。异补骨脂查尔酮在0.05μmol/L浓度下对成熟破骨细胞的形成有显著抑制作用。异补骨脂素在0.1μmol/L浓度下对成骨细胞增殖有显著促进作用。[结论]补骨脂单体成分异补骨脂素对成骨细胞有促进作用、异补骨脂查尔酮对破骨细胞有抑制作用,提示补骨脂可能作为抗骨质疏松或骨吸收的药物。 展开更多
关键词 异补骨脂素 异补骨脂查尔酮 成骨细胞 破骨细胞 增殖 分化
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薯蓣皂苷元对大鼠成骨细胞增殖、分化及OPG/RANKL mRNA表达的影响 被引量:22
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作者 江洋珍 王俊俊 +1 位作者 梁继超 陈勇 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期134-136,共3页
目的:研究薯蓣皂苷元对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配基(OPG/RANKL) mRNA的影响,探讨薯蓣皂苷元预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法:在体外培养的大鼠成骨细胞培养基中分别加入不同浓度的薯蓣皂... 目的:研究薯蓣皂苷元对体外培养的大鼠成骨细胞增殖、分化及护骨素/核因子κB受体活化因子配基(OPG/RANKL) mRNA的影响,探讨薯蓣皂苷元预防与治疗骨质疏松的作用机制。方法:在体外培养的大鼠成骨细胞培养基中分别加入不同浓度的薯蓣皂苷元作用不同时间,用MTT法检测药物对成骨细胞增殖的影响,检测成骨细胞内ALP活性分析药物对成骨细胞分化的影响,用半定量RT-PCR检测成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的表达量,分析药物对破骨细胞重要信号传导通路OPG/RANKL/RANK系统的影响。结果:3.64×10-8-3.64×10-7mol/L的薯蓣皂苷元作用于大鼠成骨细胞3d,可促进成骨细胞的增殖(P<0.01),上调成骨细胞内OPG/RANKL mRNA的比值(P<0.01);作用7d,可提高成骨细胞内ALP活性(P<0.05或P<0.01)。结论:适量浓度薯蓣皂苷元可促进成骨细胞的增殖、分化及抑制破骨细胞的形成。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷元 成骨细胞 增殖 分化 MRNA表达
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葛根素对成骨细胞增殖能力及靶向Runx2的miRNA的影响 被引量:22
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作者 张莹莹 周建斌 +3 位作者 曾祥伟 赵凤鸣 刘光东 詹秀琴 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1457-1462,共6页
目的研究葛根素作用成骨细胞MC3T3-E1后对细胞的增殖能力和靶向Runx2基因的miRNA的影响。方法 1MTT法检测葛根素作用于MC3T3-E1细胞后对成骨细胞增殖能力的影响。2碱性磷酸酶活性检测葛根素对于成骨细胞活力影响。3葛根素作用于成骨细胞... 目的研究葛根素作用成骨细胞MC3T3-E1后对细胞的增殖能力和靶向Runx2基因的miRNA的影响。方法 1MTT法检测葛根素作用于MC3T3-E1细胞后对成骨细胞增殖能力的影响。2碱性磷酸酶活性检测葛根素对于成骨细胞活力影响。3葛根素作用于成骨细胞后,采用荧光实时定量PCR(Q-PCR)和蛋白印迹法(Western blot)法检测Runx2的mRNA表达水平和蛋白表达水平。4采用Target Scan、Pic Tar等靶点预测软件预测靶向Runx2的miRNA,并与表达谱测定的葛根素作用MC3T3-E1前后miRNA变化作比较。5采用Q-PCR法验证葛根素作用MC3T3-E1前后靶向Runx2基因的miRNA表达量。6构建Runx2 3'UTR/突变型Runx2 3'UTR重组质粒、合成miRNA-204mimics、miRNA-204inhibitor、miRNA-204NC共转染MC3T3-E1细胞,用双荧光素酶报告基因系统验证Runx2与miRNA-204的靶向关系。结果葛根素作用后,与空白对照组比较,细胞增殖活性提高,Runx2的mRNA和蛋白表达水平上升,miRNA-204和miRNA-344f-5p表达水平下降,miRNA-2861表达水平上升,miRNA-23a-5p、miRNA-770-5p、miRNA-871-5p表达水平无明显改变。细胞转染48h后,只有Runx2 3'UTR+miRNA-204 mimics组荧光素蛋白的表达水平明显降低,说明只有miRNA-204可抑制Runx2 3'UTR报告基因的表达。结论葛根素可促进成骨细胞增殖,并通过下调靶向Runx2的miRNA的表达来提高Runx2表达水平。 展开更多
关键词 葛根素 成骨细胞 增殖 碱性磷酸酶 Runx2miR-204 双荧光素酶报告基因
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胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对成骨细胞的成骨影响 被引量:12
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作者 储诚兵 陈艺新 +1 位作者 尹培荣 陈雄德 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2002年第11期1104-1105,共2页
目的 :探讨不同浓度IGF 1对兔成骨细胞的成骨影响。方法 :采用组织块细胞培养技术获得兔成骨细胞 ,第 2代成骨细胞分别在含 0 .1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、2 0ng/mlIGF 1的DMEM中培养 ,2 4、36h后行MTT法检测细胞增殖情况 ,72、10 8h收... 目的 :探讨不同浓度IGF 1对兔成骨细胞的成骨影响。方法 :采用组织块细胞培养技术获得兔成骨细胞 ,第 2代成骨细胞分别在含 0 .1ng/ml、1ng/ml、10ng/ml、2 0ng/mlIGF 1的DMEM中培养 ,2 4、36h后行MTT法检测细胞增殖情况 ,72、10 8h收集培养上清进行骨钙素放射免疫法 (RI)测定。结果 :IGF 1与成骨细胞培养 2 4、36h ,经MTT法检测 ,不同浓度IGF 1与对照组比较 ,有显著性差异 (P <0 .0 0 1) ;IGF 1浓度为 0 .1、1、10ng/ml,各组之间相比存在显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;IGF 1与成骨细胞培养 72、10 8h ,经RI检测 ,不同浓度IGF 1对成骨细胞合成骨钙素与对照组比较无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :IGF 1对成骨细胞有明显促进增殖作用 ;在 0 .1~ 10ng/ml范围 ,存在浓度依赖性 ;未发现IGF 1对成骨细胞合成骨钙素有影响。 展开更多
关键词 成骨细胞 胰岛素样生长因子-1 细胞增殖 骨钙素 放射免疫法 细胞培养
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