雪峰虫草对DC-CIK增殖及HepG-2细胞杀伤作用的实验研究 被引量：10

1

作者 郑兵 谢芳一 +6 位作者 蔡国辉 朱如彩 李柯 高守泉 谭电波 郝晓勇 秦裕辉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期189-192,共4页

目的:研究雪峰虫草对DC-CIK细胞增殖及肝癌Hep G-2细胞杀伤作用。方法:常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导生成DC细胞和CIK细胞,将DC细胞与CIK细胞按1∶5共培养7 d后给药组加入不同浓度的雪峰虫草水提取物,第10天观察形态并计数各组D... 目的:研究雪峰虫草对DC-CIK细胞增殖及肝癌Hep G-2细胞杀伤作用。方法:常规分离健康人外周血单个核细胞并诱导生成DC细胞和CIK细胞,将DC细胞与CIK细胞按1∶5共培养7 d后给药组加入不同浓度的雪峰虫草水提取物,第10天观察形态并计数各组DC-CIK细胞;收集培养第10天的DC-CIK细胞作为效应细胞,对数生长期Hep G-2肝癌细胞作为靶细胞,使Hep G-2∶DC-CIK靶效比为1∶5,cck-8法检测DC-CIK对Hep G-2的杀伤率。结果:雪峰虫草水提物组对DC-CIK有显著的促增长作用,其作用的最佳浓度为0.1 mg/ml。雪峰虫草诱导的DC-CIK细胞对肝癌Hep G-2细胞的杀伤作用优于常规方法培养的DC-CIK细胞;常规方法培养的DC-CIK细胞加雪峰虫草与常规方法培养的DC-CIK细胞对肝癌Hep G-2细胞的杀伤作用无显著性差异,雪峰虫草体外直接杀伤肝癌Hep G-2细胞的作用不明显。结论:雪峰虫草通过促进DC-CIK细胞增殖而增强其杀伤肝癌Hep G-2细胞的作用。 展开更多

关键词 雪峰虫草 树突细胞 杀伤细胞 HEP G-2细胞

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雪峰虫草性状和显微特征研究 被引量：9

2

作者 刘浩 镇兰萍 +2 位作者 朱如彩 张水寒 黄惠勇 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第14期2820-2824,共5页

该文应用性状和显微鉴定法,对雪峰虫草不同批号样品的子座和虫体性状、组织、表面和粉末进行观察。研究发现雪峰虫草的形态、大小、腹节环纹等性状特征明显,虫体体表菌丝、体壁纹理、腹足趾钩等表面显微特征为稳定的鉴别特征,可作为雪... 该文应用性状和显微鉴定法,对雪峰虫草不同批号样品的子座和虫体性状、组织、表面和粉末进行观察。研究发现雪峰虫草的形态、大小、腹节环纹等性状特征明显,虫体体表菌丝、体壁纹理、腹足趾钩等表面显微特征为稳定的鉴别特征,可作为雪峰虫草的鉴别依据,其中腹足趾钩呈椭圆形二行环,内环趾钩呈长条形,外环趾呈钩状具有特异性。 展开更多

关键词 雪峰虫草 性状 显微特征 腹足趾钩

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雪峰虫草高效液相色谱指纹图谱研究 被引量：7

3

作者 秦优 陈林 +3 位作者 梁雪娟 糜亚男 肖娟 张水寒 《湖南中医药大学学报》 CAS 2016年第2期47-50,共4页

目的建立雪峰虫草药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为月旭AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);检测波长260 nm;以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30... 目的建立雪峰虫草药材的高效液相色谱指纹图谱,为评价其质量提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为月旭AQ-C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);检测波长260 nm;以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;进样量20μL。结果建立了11批雪峰虫草药材高效液相色谱指纹图谱,确定共有峰15个,采用对照品结合HPLC-Q-TOF-MS/MS技术对7个特征峰进行了指认,并采用相似度分析、主成分分析、聚类分析的方法对指纹图谱进行了分析。结论建立的雪峰虫草高效液相指纹图谱方法简便、可靠且重复性好,为雪峰虫草的质量控制提供了有效的手段。 展开更多

关键词 雪峰虫草 高效液相色谱 指纹图谱 质量控制 聚类分析度 相似度分析

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不同采收时期雪峰虫草中腺苷含量的动态变化 被引量：6

4

作者 朱如彩 谭电波 +3 位作者 秦优 梁雪娟 张水寒 黄惠勇 《中国现代中药》 CAS 2015年第11期1180-1183,共4页

目的：通过研究不同采收期雪峰虫草腺苷含量的动态变化，为确定雪峰虫草的最佳采收期提供科学依据。方法：采用高效液相色谱法，以C18柱，磷酸盐缓冲液（PH6．5）-甲醇（85：15）为流动相；在260nm波长处测定不同采收期雪峰虫草中腺苷... 目的：通过研究不同采收期雪峰虫草腺苷含量的动态变化，为确定雪峰虫草的最佳采收期提供科学依据。方法：采用高效液相色谱法，以C18柱，磷酸盐缓冲液（PH6．5）-甲醇（85：15）为流动相；在260nm波长处测定不同采收期雪峰虫草中腺苷的含量。结果：不同时期采收的雪峰虫草中腺苷含量存在差异，以8～12月份较高。结论：确定8～12月为雪峰虫草的最佳采收期。 展开更多

关键词 雪峰虫草 腺苷 高效液相色谱法 采收期 动态变化

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液态发酵法合成雪峰虫草活性成分的初步研究 被引量：5

5

作者 刘莎 张小娟 +5 位作者 王炜 陈林 廖彦 鲁耀邦 唐映红 崔培梧 《中国药房》 CAS 北大核心 2017年第22期3079-3083,共5页

目的:探索液态发酵法合成雪峰虫草活性物质的基础工艺,为雪峰虫草资源的综合开发提供必要技术支持。方法:利用液态发酵技术对雪峰虫草菌丝体进行培养,并通过培养基组成和培养条件控制来实现活性物质的高效合成。以雪峰虫草菌为出发菌株... 目的:探索液态发酵法合成雪峰虫草活性物质的基础工艺,为雪峰虫草资源的综合开发提供必要技术支持。方法:利用液态发酵技术对雪峰虫草菌丝体进行培养,并通过培养基组成和培养条件控制来实现活性物质的高效合成。以雪峰虫草菌为出发菌株,分别考察不同碳源(蔗糖、葡萄糖和可溶性淀粉)、不同氮源(蛋白胨、酵母浸粉、酵母浸膏、硝酸钠、硝酸钾和尿素)、不同维生素B(维生素B1和复合维生素B)和不同初始p H(p H为4、5、6、7、8、9)对雪峰虫草菌丝生长和胞外多糖、胞内多糖、虫草酸、胞内三萜合成的影响,进而筛选最佳培养基成分。结果:最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为酵母浸粉,最佳维生素B为维生素B1,最佳初始p H为8。在碳源为蔗糖、氮源为酵母浸粉、添加0.1 g/L维生素B1和初始p H为8时可得到较高的生物量和代谢产物积累水平。结论:雪峰虫草可在液态发酵体系高效积累代谢产物;可通过发酵过程优化控制,实现该菌株细胞生长和活性代谢产物合成的优化。 展开更多

关键词 雪峰虫草 活性成分 液态发酵 生物合成

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雪峰虫草补肾壮阳及抗疲劳作用的研究 被引量：3

6

作者 谢芳一 郑兵 +4 位作者 蔡媛 高守泉 李心亮 肖梅英 熊宇杰 《湖南中医杂志》 2017年第7期164-166,共3页

目的:探讨雪峰虫草在补肾助阳及抗疲劳方面的作用。方法:通过建立雄性去势大鼠模型和氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察雪峰虫草对去势大鼠的附性器官、性激素水平的影响及抗疲劳作用。结果:雪峰虫草小、中、高剂量组能显著缩短大鼠阴茎... 目的:探讨雪峰虫草在补肾助阳及抗疲劳方面的作用。方法:通过建立雄性去势大鼠模型和氢化可的松致小鼠肾阳虚模型,观察雪峰虫草对去势大鼠的附性器官、性激素水平的影响及抗疲劳作用。结果:雪峰虫草小、中、高剂量组能显著缩短大鼠阴茎勃起时间,增加大鼠包皮腺指数、精囊腺+前列腺指数;能显著增加肾阳虚小鼠自主活动次数、负重游泳时间,并且雪峰虫草中、高剂量组能显著增加小鼠实验后体质量,与模型对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:雪峰虫草具有较好的补肾助阳和抗疲劳作用。 展开更多

关键词 雪峰虫草 补肾助阳 抗疲劳 实验研究

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雪峰虫草乙酸乙酯及石油醚部位的GC-MS分析 被引量：2

7

作者 宛玉祥 陈林 +3 位作者 唐雪阳 沈冰冰 黄惠勇 张水寒 《湖南中医药大学学报》 CAS 2017年第11期1209-1213,共5页

目的利用GC-MS分析技术鉴定雪峰虫草中的挥发性成分。方法采用Rxi-5MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)弹性石英毛细管柱;以高纯He气(纯度99.999%)为载气,进行程序升温;质谱定性以EI电离方式采集数据;根据NIST质谱数据库推测雪峰虫草的物质... 目的利用GC-MS分析技术鉴定雪峰虫草中的挥发性成分。方法采用Rxi-5MS(30 m×0.25 mm,0.25μm)弹性石英毛细管柱;以高纯He气(纯度99.999%)为载气,进行程序升温;质谱定性以EI电离方式采集数据;根据NIST质谱数据库推测雪峰虫草的物质成分。结果分别从雪峰虫草的石油醚部位中鉴定了44个化合物;从雪峰虫草的乙酸乙酯部位中鉴定了28个化合物。两部位的主要化合物类型为酸类、酯类以及甾醇类,石油醚和乙酸乙酯部位的相对含量分别占78.5%和77.36%。结论首次采用GC-MS方法对雪峰虫草两部位的挥发性成分进行对比分析,以期为雪峰虫草的物质基础研究提供参考。 展开更多

关键词 GC-MS 雪峰虫草 甾醇类化合物

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雪峰虫草液体培养产三萜及其抗菌作用的初步研究 被引量：1

8

作者 王英 张向红 +1 位作者 张少冰 王晓玲 《中国中医药科技》 CAS 2020年第1期34-37,共4页

目的:通过液体培养体系培养雪峰虫草菌体合成三萜化合物,并检测其三萜提取物对大肠杆菌等5种菌的体外抑菌作用。方法:液体培养法和杯碟法。结果:适宜雪峰虫草细胞生长和三萜产物合成的最佳条件是:起始pH 6.0,摇床转速160 r/min,培养温... 目的:通过液体培养体系培养雪峰虫草菌体合成三萜化合物,并检测其三萜提取物对大肠杆菌等5种菌的体外抑菌作用。方法:液体培养法和杯碟法。结果:适宜雪峰虫草细胞生长和三萜产物合成的最佳条件是:起始pH 6.0,摇床转速160 r/min,培养温度28℃,培养时间8 d,接种量15%,装液量100 mL/250 mL。在此条件下,雪峰虫草三萜产量可达197.28 mg/L,虫草细胞生物量可达10.87 g/L。大肠杆菌和枯草芽孢杆菌对该三萜提取物较为敏感,其MIC均为20 g/L,产黄青霉最不敏感,MIC为80 g/L。结论:通过液体培养体系培养雪峰虫草菌体合成三萜化合物具有可行性,所得三萜类化合物具有较好的抑菌作用。 展开更多

关键词 雪峰虫草 细胞培养 三萜 抑菌作用 最小抑菌浓度

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雪峰虫草超微粉Ⅰ段生殖毒性试验研究 被引量：1

9

作者 肖志勇 刘新民 +2 位作者 关岚 李海钢 王安 《湖南师范大学学报（医学版）》 2018年第3期190-192,共3页

目的 :探讨雪峰虫草超微粉对SD大鼠生育力与早期胚胎发育的影响。方法 :根据《药物生殖毒性研究技术指导原则》对雪峰虫草超微粉灌胃给药对SD大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性进行试验。结果 :试验期间各组动物进食量及体重增长正常;动... 目的 :探讨雪峰虫草超微粉对SD大鼠生育力与早期胚胎发育的影响。方法 :根据《药物生殖毒性研究技术指导原则》对雪峰虫草超微粉灌胃给药对SD大鼠生育力与早期胚胎发育的毒性进行试验。结果 :试验期间各组动物进食量及体重增长正常;动物交配、生育能力及早期胚胎发育未见明显异常,组间比较差异无统计学意义。结论 :在本试验条件下,雪峰虫草超微粉对SD大鼠生育力与早期胚胎发育未见明显毒性作用。 展开更多

关键词 雪峰虫草超微粉 Ⅰ阶段 生殖毒性试验

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雪峰虫草多糖的抗氧化活性研究 被引量：1

10

作者 娄婷 鲁耀邦 +4 位作者 刘莎 贺经纬 邓丹 唐泽群 崔培梧 《广东化工》 CAS 2020年第3期8-9,37,共3页

为探索雪峰虫草多糖的抗氧化活性,采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、DPPH自由基分析法、邻苯三酚自氧化法分别考察了雪峰虫草胞内多糖、胞外多糖对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除活性,并采... 为探索雪峰虫草多糖的抗氧化活性,采用邻二氮菲-Fe2+氧化法、DPPH自由基分析法、邻苯三酚自氧化法分别考察了雪峰虫草胞内多糖、胞外多糖对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除活性,并采用红外光谱分析法对其结构进行初步分析。结果表明:雪峰虫草胞内多糖和胞外多糖均表现出对3种自由基的清除活性,结果显示雪峰虫草胞内多糖的抗氧化活性优于胞外多糖,其对羟基自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的最大清除率分别为64.43%、62.70%和60.56%。红外光谱分析证实两种多糖均存在糖的特征吸收峰,且胞内多糖存在典型的甘露糖吸收峰。这些数据证实了雪峰虫草多糖的抗氧化活性,为其综合开发提供了必要参考。 展开更多

关键词 雪峰虫草 多糖 抗氧化活性 红外光谱分析

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高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱分析雪峰虫草化学成分 被引量：27

11

作者 张水寒 蔡萍 +4 位作者 陈林 梁雪娟 秦优 朱如彩 黄惠勇 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期817-821,共5页

目的采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对雪峰虫草醇提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法超声法制备雪峰虫草醇提取物,月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分;电喷雾... 目的采用高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱法(HPLC-Q-TOF-MS/MS)对雪峰虫草醇提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法超声法制备雪峰虫草醇提取物,月旭AQ-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离各主要成分;电喷雾电离源正离子模式和负离子模式对色谱流出物进行检测,四级杆飞行时间串联质谱法对各主要色谱峰进行归属。结果通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定28个化合物的结构,其主要化学成分为甘露醇、腺苷、麦角甾醇、谷甾醇、氨基酸、脂肪酸、糖类等成分。结论 HPLC-Q-TOF-MS/MS可从保留时间、紫外吸收光谱、精确相对分子质量、分子式和二级结构碎片等方面对雪峰虫草的主要成分进行定性分析,为寻找虫草中活性物质提供一种快速准确的分析方法。 展开更多

关键词 雪峰虫草 高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱 定性分析 腺苷 麦角甾醇 氨基酸

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雪峰虫草子座不同生长发育时期的转录组研究

12

作者 钟灿 金剑 +3 位作者 刘浩 谢景 刘平安 张水寒 《中国现代中药》 CAS 2023年第3期523-532,共10页

目的:挖掘调控雪峰虫草生长发育的相关通路和基因,揭示其子座生长发育的内在分子机制。方法:采用转录组测序技术(RNA-Seq)对雪峰虫草子座菌丝体(MD1)、子座原基(PD2)和子座(SD3)生长发育3个不同阶段进行测序;数据通过非冗余蛋白(NR)、Sw... 目的:挖掘调控雪峰虫草生长发育的相关通路和基因,揭示其子座生长发育的内在分子机制。方法:采用转录组测序技术(RNA-Seq)对雪峰虫草子座菌丝体(MD1)、子座原基(PD2)和子座(SD3)生长发育3个不同阶段进行测序;数据通过非冗余蛋白(NR)、Swiss-Prot、Pfam、京都基因与基因组百科全书(KEGG)、真核生物相邻类的聚簇(KOG)、基因本体(GO)数据库进行功能注释。利用EdgeR软件进行差异表达基因分析,挖掘调控雪峰虫草子座生长发育的相关通路和基因。结果:测序结果显示,MD1、PD2、SD3分别获得了8.15、7.51、6.87GB分析数据,拼接分析数据共获得34218个转录本,平均长度为5502bp,组装及去冗余后获得10511条unigenes,平均长度为2470bp。KOG功能注释和GO富集分析显示,细胞和细胞组分、新陈代谢过程、信号转导及碳代谢是雪峰虫草子座发育过程中的关键基因类别。对子座不同生长发育时期的基因进行差异表达分析发现,PD2和SD3相比差异表达基因最多,其中上调基因1073个,下调基因1036个,MD1和SD3相比差异表达基因最少,上调基因533个,下调基因578个。差异表达基因的KEGG通路富集结果显示,细胞外信号调节激酶(MAPK)信号通路是参与调节雪峰虫草子座生长发育的关键信号通路。结论:Ste2和Gpd1及其所在途径可能分别调控雪峰虫草子座原基的形成和子座的生长。 展开更多

关键词 雪峰虫草 人工培育 丝状真菌

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巨疖蝙蛾幼虫的营养成分分析

13

作者 唐慧敏 樊子婧 周琼 《湖南师范大学自然科学学报》 CAS 北大核心 2020年第1期30-34,共5页

巨疖蝙蛾Endoclita davidi(Poujade,1886)是新近发现的中药材雪峰虫草Ophiocordyceps xuefengensis的重要寄主昆虫。采用国家标准检测方法,定性和定量分析了野生和人工饲养巨疖蝙蛾幼虫的营养成分。结果表明:野生巨疖蝙蛾幼虫的含水量... 巨疖蝙蛾Endoclita davidi(Poujade,1886)是新近发现的中药材雪峰虫草Ophiocordyceps xuefengensis的重要寄主昆虫。采用国家标准检测方法,定性和定量分析了野生和人工饲养巨疖蝙蛾幼虫的营养成分。结果表明:野生巨疖蝙蛾幼虫的含水量和脂肪质量分数分别为61.37%和39.4%,均低于人工饲养幼虫(分别为64.96%和50.7%);而蛋白质和灰分质量分数分别为48.7%和3.4%,高于人工饲养幼虫(分别为34.9%和2.4%);野生幼虫的总氨基酸质量分数和不饱和脂肪酸占总油脂的质量分数分别为41.01%和72.60%,均高于人工饲养幼虫(分别为30.5%和69.02%)。结果显示,野生和人工饲养的巨疖蝙蛾幼虫均含有较高的营养成分,以及较多的抗疲劳和提高运动能力的功效成分,这些为雪峰虫草的开发利用提供了依据。 展开更多

关键词 巨疖蝙蛾 幼虫 营养成分 雪峰虫草

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