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人类SR蛋白超家族新成员——SFRS12(SRrp508)的基因克隆和特性分析 被引量:43
1
作者 张德礼 孙晓静 +2 位作者 凌伦奖 陈润生 马大龙 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期377-383,共7页
采用生物信息学方法克隆出全长 3811bp的人类RC5 0 8cDNA片段 ,经核酸和蛋白质分析为人类新基因 (Gen Bank登记号 :AF4 5 90 94 ) ,利用RT PCR方法从人类胰脏组织中扩增出包含编码 5 0 8个氨基酸残基最大开放读码框架 (ORF)的 16 80bpc... 采用生物信息学方法克隆出全长 3811bp的人类RC5 0 8cDNA片段 ,经核酸和蛋白质分析为人类新基因 (Gen Bank登记号 :AF4 5 90 94 ) ,利用RT PCR方法从人类胰脏组织中扩增出包含编码 5 0 8个氨基酸残基最大开放读码框架 (ORF)的 16 80bpcDNA片段 ,经核酸测序证明与电子克隆结果完全一致。该基因具有启动子和TATA box,ORF前同一相位有多个终子码 ,后有加尾信号 ,显示为客观存在基因。该基因含有 12个外显子 (96~ 2 0 93bp)和 11个内含子 (14 0~ 5 15 3bp) ,定位于人类 5号染色体 5q11.2~q12 .1,无任何连锁基因存在。该基因ORF 342~ 186 8(15 2 7)横跨10个外显子 ,所编码 5 0 8氨基酸蛋白的全长序列与大鼠丝氨酸 精氨酸二肽富含性 (SR)剪切调控蛋白 86 (SRrp86 )高度同源 ,在核酸和蛋白水平的同源性分别为 84 %和 86 % ,与其他已知蛋白无论在核酸水平还是在氨基酸水平几乎均无整体的同源性。结果表明 ,所克隆的 5 0 8氨基酸蛋白才是大鼠SRrp86的人类同源物 ,从而修正了Barnard(2 0 0 0 )所指出的人类同源物为人类精氨酸富含性核蛋白 5 4 (p5 4 )这一论断 ,并提示它是日益增长的SR蛋白超家族的又一个新成员。该基因组织表达谱广泛 ,有可能具有转录因子活性 ,暂命名为SR相关剪切调控蛋白 5 0 8(SRrp5 0 展开更多
关键词 人类SR蛋白超家族 SRrp508 基因克隆 特性分析
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中日产川芎的matK、ITS基因序列及其物种间的亲缘关系 被引量:32
2
作者 刘玉萍 曹晖 +2 位作者 韩桂茹 伏见裕利 小松かつ子 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期63-68,共6页
目的 分析中国产川芎LigusticumchuanxiongHort.及日本产川芎CnidiumofficinaleMakino的核基因组ITS和叶绿体基因组matK序列 ,为探讨中日产川芎物种间的亲缘关系提供分子依据。方法 采用PCR直接测序技术测定川芎和日本川芎的ITS基因和... 目的 分析中国产川芎LigusticumchuanxiongHort.及日本产川芎CnidiumofficinaleMakino的核基因组ITS和叶绿体基因组matK序列 ,为探讨中日产川芎物种间的亲缘关系提供分子依据。方法 采用PCR直接测序技术测定川芎和日本川芎的ITS基因和matK基因核苷酸序列并作序列变异分析。结果 川芎和日本川芎的matK序列长度均为 12 68bp ,编码 4 2 2个氨基酸。ITS1 5 8S ITS2序列长度均为 699bp ,其中 18SrRNA基因 3′端序列 5 4bp ,ITS1序列 2 15bp ,5 8SrRNA基因序列 162bp ,ITS2序列 2 2 2bp ,2 6SrRNA基因 5′端序列 4 6bp。根据排序比较 ,川芎原植物与其商品药材间的matK基因和ITS基因序列完全相同 ,而川芎与日本川芎间matK基因则仅有 1个变异位点 ,即在上游 95 9nt处 1个转换替代 (T→C) ,反映在氨基酸序列则发生一个非同义取代V(GTG)→A(GCG) ;ITS基因也仅有 1个变异位点 ,即在ITS1上游 5 4nt处 1个转换替代 (T→C)。结论 通过进化速率较快的基因序列同源性分析 ,基本可以认为中日所产川芎基原一致 ,日本川芎学名似应改为LigusticumchuanxiongHort. 展开更多
关键词 川芎 日本川芎 MATK基因 ITS基因 核苷酸测序
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福州市2004年登革热流行病学和病原学特征分析 被引量:42
3
作者 严延生 洪荣涛 +10 位作者 沈晓娜 翁育伟 蔡少健 徐保海 李世清 何家鑫 许龙善 林云钦 郑能雄 林茂 林淑华 《中华流行病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期371-374,共4页
目的对福州市2004年登革热疫情及病原学特征进行分析。方法调查和分析福州市2004年登革热流行病学特点及影响因素;用C6/36细胞分离患者血清标本中病毒,并用单克隆抗体鉴定型别;通过比对核苷酸序列,分析本次疫情可能的传染源。结果福州... 目的对福州市2004年登革热疫情及病原学特征进行分析。方法调查和分析福州市2004年登革热流行病学特点及影响因素;用C6/36细胞分离患者血清标本中病毒,并用单克隆抗体鉴定型别;通过比对核苷酸序列,分析本次疫情可能的传染源。结果福州市2004年9月中旬起至10月底发生一起登革热暴发疫情,所确认的93例病例消长情况基本与当地的蚊媒消长情况相一致。从病例的10份血清标本中分离出6株病毒,经单克隆抗体鉴定均为登革热病毒1型,病毒基因的核苷酸序列比对证明同源性与东埔寨分离株(DENV-1/KHM/2001;GenBank Accession No.L0904278)最为接近。结论福州市2004年登革热疫情为感染登革1型病毒所引起;疫情的发生主要为输入性病例流行引起。 展开更多
关键词 登革热1型病毒 疫情 序列分析
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产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原基因的克隆与核苷酸序列分析 被引量:25
4
作者 许崇波 朱平 +4 位作者 姚湘燕 王卓 冯书章 马从林 孟锐奇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期140-143,共4页
将含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒pKMA100用限制性核酸内切酶BamHI和HindⅢ双酶切,经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离、透析袋电洗脱法回收0.95kbα毒素基因片段,再将载体pET-28b(+)用BamHI和Hi... 将含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒pKMA100用限制性核酸内切酶BamHI和HindⅢ双酶切,经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离、透析袋电洗脱法回收0.95kbα毒素基因片段,再将载体pET-28b(+)用BamHI和HindⅢ双酶切,然后将处理好的pET-28b(+)与0.95kb的α毒素基因片段通过T4DNA连接酶进行粘性末端连接,转化至受体菌BL21(DE3)中。经BamHI和HindⅢ双酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒pXETA1含有产气荚膜梭菌α毒素基因。确定了α毒素基因的全部核苷酸序列,并证明其具有正确的阅读框架。 展开更多
关键词 产气荚膜梭菌 Α毒素基因 基因克隆 核苷酸序列
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在江苏省发现曾有Ⅰ型脊髓灰质炎疫苗衍生病毒在自然界循环 被引量:20
5
作者 侯晓辉 张礼璧 +3 位作者 冷红英 张勇 郑红 方勇 《中国计划免疫》 2001年第6期311-314,共4页
目前我国已通过了世界卫生组织 (WHO)西太平洋区关于中国无脊髓灰质炎 (脊灰 )的认证。但近几年在实验室监测中发现了为数不少的脊灰疫苗相关株病毒。经逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)、限制性酶切片段长度多态性分析 (RFLP)和核苷酸... 目前我国已通过了世界卫生组织 (WHO)西太平洋区关于中国无脊髓灰质炎 (脊灰 )的认证。但近几年在实验室监测中发现了为数不少的脊灰疫苗相关株病毒。经逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)、限制性酶切片段长度多态性分析 (RFLP)和核苷酸序列分析证实 ,在我国存在不同型别脊灰疫苗衍生株间的重组病毒 ,以及同一型别脊灰疫苗株病毒基因组核苷酸序列的差异。最近从江苏省 1996年和 1998年的急性弛缓性麻痹病例粪便标本中 ,各分离到 2株Ⅰ型脊灰病毒 ,经鉴定 ,这 4株病毒均为同源Ⅰ型脊灰疫苗的衍生株病毒。证明江苏省曾有Ⅰ型脊灰疫苗衍生株病毒在自然界循环。 展开更多
关键词 脊髓灰质炎野病毒 脊髓灰质炎疫苗衍生株病毒 强化免疫 核苷酸序列分析 变异
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大肠杆菌不耐热性肠毒素LT_B基因的克隆及其核苷酸序列分析 被引量:14
6
作者 许崇波 卫广森 +3 位作者 吴广谋 张立国 冯书章 刘晓明 《畜牧与兽医》 北大核心 1997年第4期154-156,共3页
用内切酶SacⅠ和HindⅢ双酶切大肠杆菌质粒pEWD299,回收505bp的LTB基因片段,再将载体pUC18用SacⅠ和HindⅢ双酶切,最后将pUC18DNA与505bp的LTBDNA进行连接,转化至受体菌DH... 用内切酶SacⅠ和HindⅢ双酶切大肠杆菌质粒pEWD299,回收505bp的LTB基因片段,再将载体pUC18用SacⅠ和HindⅢ双酶切,最后将pUC18DNA与505bp的LTBDNA进行连接,转化至受体菌DH5α中,经SacⅠ/HindⅢ、EcoRⅠ/HindⅢ酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pXLT1。再将pXLT1进行EcoRⅠ酶切、大肠杆菌聚合酶ⅠKlenow大片段补平、HindⅢ酶切处理,然后与用HicⅡ和HindⅢ酶切的pUC18连接,转化至受体菌DH5α中,经XbaⅠ/HindⅢ酶切反应鉴定重组子,得到了理想重组子质粒pXLT1-1。将质粒pXLT1-1进行核苷酸序列分析。 展开更多
关键词 大肠杆菌 LTB基因 基因克隆 核苷酸序列分析
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6种川产姜黄属药用植物叶绿体trnK基因序列变异分析及其分子鉴定(英文) 被引量:13
7
作者 曹晖 小松かつ子 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期871-875,共5页
目的 建立 6种川产姜黄属 (Curcuma)药用植物快速简单的分子鉴定方法。方法 采用叶绿体赖氨酸tRNA基因 (trnK)测序与序列变异分析方法。结果  6种姜黄属药用植物 (包括姜黄C .longa、莪术C .phaeocaulis、川郁金C .sichuanensis、川... 目的 建立 6种川产姜黄属 (Curcuma)药用植物快速简单的分子鉴定方法。方法 采用叶绿体赖氨酸tRNA基因 (trnK)测序与序列变异分析方法。结果  6种姜黄属药用植物 (包括姜黄C .longa、莪术C .phaeocaulis、川郁金C .sichuanensis、川郁金C .chuanyujin、川黄姜C .chuanhuangjiang、川莪术C .chuanezhu)完整trnK基因长度在2 6 99~ 2 70 5bp。序列可变区包括matK基因编码区和trnK外显子与matK内含子之间区域 ,共有 6个单核苷酸多态性 (SNPs)位点、1个 9 bp的缺失重复序列和 2个 4 bp、14 bp插入重复序列。结论 trnK基因序列可变位点可以作为6种川产姜黄属药用植物快速简单的分子鉴定标记 。 展开更多
关键词 姜黄属 核苷酸测序 trnK基因 分子鉴定
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产气荚膜梭菌的β_2毒素基因克隆及其核苷酸序列分析 被引量:9
8
作者 王玉炯 邓光存 +2 位作者 曾瑾 许崇波 李芳 《宁夏大学学报(自然科学版)》 CAS 2004年第1期63-65,共3页
利用PCR技术 ,从C型产气荚膜梭菌中国标准株C5 9— 4 4基因组DNA中扩增出了约 0 .7kb的基因 ,并将其克隆到pGEM T载体上 ,经酶切鉴定及核苷酸序列分析表明 ,该基因片段的核苷酸序列与国外报道的 β2 毒素基因序列一致 .
关键词 产气荚膜梭菌 β2毒素 基因克隆 核苷酸 序列分析
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大连市“蜱咬”患者新布尼亚病毒(SFTSV)的检测分析 被引量:11
9
作者 刘芸 张洁 +7 位作者 王博 田疆 毛玲玲 孙英伟 王子江 孙婷婷 姚文清 赵卓 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期159-161,共3页
目的通过对大连市一起"蜱咬"患者流行病学调查及病原体检测,探讨新布尼亚病毒(Severe fever with throm-bocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)在辽宁省南部沿海地区的流行范围。方法采用ELISA方法对"蜱咬"患者... 目的通过对大连市一起"蜱咬"患者流行病学调查及病原体检测,探讨新布尼亚病毒(Severe fever with throm-bocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)在辽宁省南部沿海地区的流行范围。方法采用ELISA方法对"蜱咬"患者急性期血清样本及同居住地的26份非患者血清样本进行SFTSV的IgM、IgG抗体检测;采用实时荧光定量RT-PCR方法检测"蜱咬"患者血液样本SFTSV核酸;采用VERO-E6细胞对"蜱咬"患者血液样本进行病毒分离并鉴定。结果 "蜱咬"患者急性期血清样本SFTSV的IgM抗体阳性、IgG抗体阴性;26份非患者血清样本中4份SFTSV的IgG抗体阳性;"蜱咬"患者血液样本SFTSV核酸阳性;从"蜱咬"患者血液样本和体表叮咬的蜱虫中各分离出1株病毒,经SFTSV的M片段全基因测序引物测序鉴定为SFTSV。结论 "蜱咬"患者血液分离株与蜱虫分离株均为SFTSV,同源性达99.7%,该病毒是导致患者发病的重要原因。本次分离到的2株病毒与我省东部(丹东、抚顺),北部(铁岭)山区分离株遗传距离相对较远。SFTSV在正常人群中存在隐性感染者。 展开更多
关键词 RT—PCR 细胞培养 核苷酸序列检测
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RT-PCR法检测我国东南沿海凡纳滨对虾的桃拉综合征病毒 被引量:9
10
作者 黄新新 莫胜兰 陆承平 《中国病毒学》 CSCD 2005年第5期546-548,共3页
Taura syndrome virus(TSV) is one of the important pathogenic agents of Penaeus vannami,which causes prawn infection with serious disease in China in recent years.245 samples collected from 26 farms of Zhangzhou,Xiamen... Taura syndrome virus(TSV) is one of the important pathogenic agents of Penaeus vannami,which causes prawn infection with serious disease in China in recent years.245 samples collected from 26 farms of Zhangzhou,Xiamen,Shenzhen,Yangjiang,Ningbo and Guangzhou.were detected for TSV with RT-PCR,the positive rates were 100%,33.3%,40.7%,50% and 40%,respectively.Southern blotting and nucleotide sequencing were performed to confirm the specificity of the amplified RT-PCR products.The homology of 231bp nucleotide sequences reached 98.3%-100% when analysed and compared with the GenBank using the BLAST program.Phylogenetic analyses clustered the TSV isolates into two groups: one contained USA and Chinese Taiwan isolates;the other contained Vietnam isolate(YN1) and 21 isolates of China's Mainland.The 21 China isolates clustered into one branch,while the YN1 distributed in another branch.5 strains from Guangzhou and 2 strains from Shenzhen constituted one subcluster of the China branch. 展开更多
关键词 凡纳滨对虾 RT—PCR 桃拉综合征病毒(TSV) 核酸测序
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抗隐孢子虫子孢子表膜单链抗体基因的克隆和核苷酸序列分析 被引量:5
11
作者 尹继刚 张西臣 +5 位作者 朱平 张国利 李建华 何宏轩 田宗成 杨举 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期166-169,共4页
应用 RT- PCR技术 ,从分泌具有抗隐孢子虫子孢子表膜单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 3D6中扩增出抗体VH 和 VL 基因 ,用 linker(Gly4 Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p MD- 18T载体中。经核苷酸序列分析... 应用 RT- PCR技术 ,从分泌具有抗隐孢子虫子孢子表膜单克隆抗体 (Mc Ab)的杂交瘤细胞 3D6中扩增出抗体VH 和 VL 基因 ,用 linker(Gly4 Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p MD- 18T载体中。经核苷酸序列分析证实 ,VH、VL 基因和 linker基因拼接正确 ,基因全长为 72 0 bp。经计算机分析 ,VH 和 VL 基因均为新发现的基因序列 ,符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。VH和 VL 基因分别属于鼠免疫球蛋白重链 (A)和轻链 κ 家族。 展开更多
关键词 序列分析 隐孢子虫 子孢子 单链抗体 基因克隆 核苷酸序列
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湖南省急性弛缓性麻痹病例分离株的性状分析 被引量:9
12
作者 张勇 张礼璧 +3 位作者 张红 祝双利 张帆 侯晓辉 《中国计划免疫》 2002年第6期306-309,共4页
1 997~ 2 0 0 1年 ,湖南省疾病预防控制中心从急性弛缓性麻痹 (AFP)病例粪便标本中共分离到单型脊髓灰质炎(脊灰 )毒株 85株 ,经中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室用逆转录 聚合酶链反应 限制性酶切片长度多态性分... 1 997~ 2 0 0 1年 ,湖南省疾病预防控制中心从急性弛缓性麻痹 (AFP)病例粪便标本中共分离到单型脊髓灰质炎(脊灰 )毒株 85株 ,经中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室用逆转录 聚合酶链反应 限制性酶切片长度多态性分析 (RT PCR RFLP)方法进行型内鉴定 ,全部为疫苗相关株。对其中从“零”剂次免疫患儿、有残留麻痹患儿和一些其他相关的患儿粪便标本中分离到的脊灰病毒进行了VP1区和 3D区的核苷酸序列测定。结果显示 :在脊灰Ⅱ型毒株中 ,绝大多数毒株在VP1区的核苷酸中第 2 90 9位位点发生突变 ,导致第 1 4 3位氨基酸由Ile变为Asn或Thr。在脊灰Ⅱ型毒株中 ,广泛存在着型间重组现象。在重组病毒中 ,以Ⅱ型与Ⅲ型病毒的重组为主 ,占 90 %。从AFP病例及健康儿童中 ,从有残留麻痹患儿及无残留麻痹患儿的粪便标本中 ,都能分离到重组株 ,说明重组的发生具有普遍性 ,重组发生的位点在核苷酸的不同位置 ,重组的形式又具有多样性。通过对湖南省毒株的碱基突变和重组的研究表明 ,在湖南省 1 997~ 2 0 0 1年的分离株不支持隔年传播 ,只在局部地区某一年内可能发生有限的循环。通过加强口服脊灰疫苗的免疫 ,提高免疫覆盖率 ,可以阻止疫苗相关病毒局限的循环。 展开更多
关键词 湖南 急性弛缓性麻痹 脊髓灰质炎病毒 核苷酸序列分析 基因点突变 型间重组 AFP
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Development of high-resolution multiple-SNP arrays for genetic analyses and molecular breeding through genotyping by target sequencing and liquid chip 被引量:9
13
作者 Zifeng Guo Quannv Yang +11 位作者 Feifei Huang Hongjian Zheng Zhiqin Sang Yanfen Xu Cong Zhang Kunsheng Wu Jiajun Tao Boddupalli MPrasanna Michael SOlsen Yunbo Wang Jianan Zhang Yunbi Xu 《Plant Communications》 SCIE 2021年第6期12-26,共15页
Genotyping platforms,as critical supports for genomics,genetics,and molecular breeding,have been well implemented at national institutions/universities in developed countries and multinational seed companies that poss... Genotyping platforms,as critical supports for genomics,genetics,and molecular breeding,have been well implemented at national institutions/universities in developed countries and multinational seed companies that possess high-throughput,automatic,large-scale,and shared facilities.In this study,we integrated an improved genotyping by target sequencing(GBTS)system with capture-in-solution(liquid chip)technology to develop a multiple single-nucleotide polymorphism(mSNP)approach in which mSNPs can be captured from a single amplicon.From one 40K maize mSNP panel,we developed three types of markers(40K mSNPs,251K SNPs,and 690K haplotypes),and generated multiple panels with various marker densities(1K–40K mSNPs)by sequencing at different depths.Comparative genetic diversity analysis was performed with genic versus intergenic markers and di-allelic SNPs versus non-typical SNPs.Compared with the one-amplicon-one-SNP system,mSNPs and within-mSNP haplotypes are more powerful for genetic diversity detection,linkage disequilibrium decay analysis,and genome-wide association studies.The technologies,protocols,and application scenarios developed for maize in this study will serve as a model for the development of mSNP arrays and highly efficient GBTS systems in animals,plants,and microorganisms. 展开更多
关键词 multiple single-nucleotide polymorphisms mSNPs genotyping by target sequencing GBTS multiplexing PCR sequence capture in-solution(liquid chip) linkage disequilibrium LD
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抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体的基因克隆及核苷酸序列分析 被引量:8
14
作者 许崇波 赵宝华 +2 位作者 马从林 冯书章 朱平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期246-248,共3页
应用 RT-PCR技术 ,从分泌具有中和活性的抗 A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体 ( Mc Ab)的杂交瘤细胞 2 E3中 ,扩增出抗体 VH 和 VL 基因 ,用 linker( Gly4Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p GEM-T载体中。... 应用 RT-PCR技术 ,从分泌具有中和活性的抗 A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体 ( Mc Ab)的杂交瘤细胞 2 E3中 ,扩增出抗体 VH 和 VL 基因 ,用 linker( Gly4Ser) 3基因 ,将 VH 和 VL 基因连接成 Sc Fv基因 ,并将其克隆至 p GEM-T载体中。经核苷酸序列分析证实 ,VH、VL 基因和 linker基因拼接正确 ,基因全长为 72 6bp。经计算机分析 ,VH 和 VL 基因均为新发现的基因序列 ,符合功能性重排的鼠抗体可变区基因特征。VH 和VL 基因分别属于鼠免疫球蛋白重链 ( B)和轻链κ 展开更多
关键词 Α毒素 基因克隆 序列分析 SCFV 创伤性气性坏疽
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汉坦病毒陈株S基因编码区的克隆、序列分析及表达 被引量:5
15
作者 薛小平 徐志凯 +6 位作者 马文煜 闫岩 尹文 张芳琳 吴兴安 赵茜 白文涛 《中国病毒学》 CSCD 1999年第1期48-52,共5页
从汉坦病毒陈株感染的VeroE6细胞裂解液中提取病毒RNA,经逆转录PCR获得病毒S基因编码区约1.3kbcDNA片段,克隆该片段后进行核苷酸序列测定,并与汉坦病毒76118株进行同源性比较,结果二者核苷酸序列同... 从汉坦病毒陈株感染的VeroE6细胞裂解液中提取病毒RNA,经逆转录PCR获得病毒S基因编码区约1.3kbcDNA片段,克隆该片段后进行核苷酸序列测定,并与汉坦病毒76118株进行同源性比较,结果二者核苷酸序列同源性为86%,推导的氨基酸序列同源性为97%。将该基因片段插入原核表达载体pGEX4T1,在大肠杆菌中获得高效表达。表达产物为GSTNP融合蛋白。SDSPAGE检测表达蛋白分子约72kD左右。Westernbloting和ELISA试验结果表明,表达产物可与多株抗汉坦病毒核蛋白的McAb发生反应,其抗原表位及McAb反应谱与76118株相比存在某些差异。 展开更多
关键词 汉坦病毒 S基因 核苷酸序列 基因表达
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风疹病毒JR23株E1包膜糖蛋白的基因克隆与序列分析 被引量:5
16
作者 王志玉 薛永磊 +1 位作者 王小凡 宋艳艳 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期660-665,共6页
目的 建立风疹病毒包膜糖蛋白E1的克隆载体 ;研究E1基因变异情况 ,并对其序列进行系统发生树分析。方法 利用RT PCR方法扩增并回收风疹病毒JR2 3株的包膜糖蛋白E1的基因片段 ,将其与PMD 18T载体连接 ,经氨苄青霉素筛选 ,酶切鉴定 ,以... 目的 建立风疹病毒包膜糖蛋白E1的克隆载体 ;研究E1基因变异情况 ,并对其序列进行系统发生树分析。方法 利用RT PCR方法扩增并回收风疹病毒JR2 3株的包膜糖蛋白E1的基因片段 ,将其与PMD 18T载体连接 ,经氨苄青霉素筛选 ,酶切鉴定 ,以获得风疹病毒E1蛋白基因的克隆。将此基因测序后 ,利用DNASTAR和WINSTAR软件包绘制系统发生树进行序列之间的比较分析。结果 筛选出含有风疹病毒E1蛋白基因的克隆。序列分析及发生树的绘制表明 :JR2 3株与日本TCRB株及英国THOMAS株差别最小 ,分别为 0 .9%和 1.2 %。与北京BRD2株及香港XG379株差别最大 ,分别为 7.6 %和 7.3% ,与其它各株的差别均小于 3% (除NC株为 3.7%外 ) ,系统发生也与THO MAS株、TCRB株最近 ,与BRD2株最远。结论 克隆载体的建立为进一步研究E1基因与糖蛋白功能的关系提供基础。系统发生树表明中国不同地区风疹流行株基因序列存在明显差异。这对风疹病毒遗传与变异、分子流行病学研究 。 展开更多
关键词 风疹病毒 E1基因 系统发生树 核酸序列分析 基因克隆
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3个猪链球菌2型四川分离株4个毒力因子基因序列测定与分析 被引量:5
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作者 蔡振鸿 范伟兴 +5 位作者 赵冉 何海权 王幼明 姜平 李晓成 黄保续 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期901-905,共5页
目的设计了特异性引物对3个致病性猪链球菌2型(Ss2)四川分离株4个主要毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2分别进行了扩增,序列测定与分析结果表明3个Ss2四川分离株均存在4个毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2,其核苷酸序列与1998年江苏分离... 目的设计了特异性引物对3个致病性猪链球菌2型(Ss2)四川分离株4个主要毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2分别进行了扩增,序列测定与分析结果表明3个Ss2四川分离株均存在4个毒力因子基因mrp、epf、sly和orf2,其核苷酸序列与1998年江苏分离株9801及国外参考菌株的同源性均大于99.5%,提示3个四川分离菌株与1998年江苏流行的高毒力菌株可能具有共同的来源。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 毒力因子 核苷酸序列测定 Ss2四川分离株 Ss2江苏分离株9801
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KoNA:Korean Nucleotide Archive as A New Data Repository for Nucleotide Sequence Data
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作者 Gunhwan Ko Jae Ho Lee +19 位作者 Young Mi Sim Wangho Song Byung-Ha Yoon Iksu Byeon Bang Hyuck Lee Sang-Ok Kim Jinhyuk Choi Insoo Jang Hyerin Kim Jin Ok Yang Kiwon Jang Sora Kim Jong-Hwan Kim Jongbum Jeon Jaeeun Jung Seungwoo Hwang Ji-Hwan Park Pan-Gyu Kim Seon-Young Kim Byungwook Lee 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 SCIE CAS CSCD 2024年第1期161-167,共7页
During the last decade,the generation and accumulation of petabase-scale high-throughput sequencing data have resulted in great challenges,including access to human data,as well as transfer,storage,and sharing of enor... During the last decade,the generation and accumulation of petabase-scale high-throughput sequencing data have resulted in great challenges,including access to human data,as well as transfer,storage,and sharing of enormous amounts of data.To promote data-driven biological research,the Korean government announced that all biological data generated from government-funded research projects should be deposited at the Korea BioData Station(K-BDS),which consists of multiple databases for individual data types.Here,we introduce the Korean Nucleotide Archive(KoNA),a repository of nucleotide sequence data.As of July 2022,the Korean Read Archive in KoNA has collected over 477 TB of raw next-generation sequencing data from national genome projects.To ensure data quality and prepare for international alignment,a standard operating procedure was adopted,which is similar to that of the International Nucleotide Sequence Database Collaboration.The standard operating procedure includes quality control processes for submitted data and metadata using an automated pipeline,followed by manual examination.To ensure fast and stable data transfer,a high-speed transmission system called GBox is used in KoNA.Furthermore,the data uploaded to or downloaded from KoNA through GBox can be readily processed using a cloud computing service called Bio-Express.This seamless coupling of KoNA,GBox,and Bio-Express enhances the data experience,including submission,access,and analysis of raw nucleotide sequences.KoNA not only satisfies the unmet needs for a national sequence repository in Korea but also provides datasets to researchers globally and contributes to advances in genomics.The KoNA is available at https://www.kobic.re.kr/kona/. 展开更多
关键词 Korea BioData Station nucleotide sequence Next-generation sequencing repository GENOMICS Deposition and access of big data
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人单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因的PCR扩增、克隆及序列分析 被引量:6
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作者 叶棋浓 苏国富 +1 位作者 袁艺 黄翠芬 《中华微生物学和免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1994年第1期29-32,共4页
本文报道用植物血凝素(PHA)诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC,包括单核细胞和淋巴细胞),提取细胞总RNA,反转录合成cDNA第一链,再以其为模板进行PCR,得到了编码成熟单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的cD... 本文报道用植物血凝素(PHA)诱导健康人外周血单个核细胞(PBMC,包括单核细胞和淋巴细胞),提取细胞总RNA,反转录合成cDNA第一链,再以其为模板进行PCR,得到了编码成熟单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的cDNA。该cDNA用EcoRI、BamHI双酶切后,回收含MCP-1基因的长约280bp的DNA片段,插入到经EcoRI、BamHI双酶切的pUC19载体中,进行序列分析。结果表明,MCP-1中第12个氨基酸的编码序列与国外报道的不同。由TGT变成了TGC,但编码相同的氨基酸即半胱氨酸,其余的编码序列则完全相同,说明MCP-1的基因型可能存在着多态性。 展开更多
关键词 MCP-1 PCR 基因克隆 核苷酸
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High-throughput sequencing analysis of differential microRNA expression in the process of blocking the progression of chronic atrophic gastritis to gastric cancer by Xianglian Huazhuo formula(香连化浊方)
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作者 GUO Yuxi LI Ze +8 位作者 CHENG Nan JIA Xuemei WANG Jie MA Hongyu ZHAO Runyuan LI Bolin XUE Yucong CAI Yanru YANG Qian 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CSCD 2024年第4期703-712,共10页
OBJECTIVE:To explore the mechanism of Xianglian Huazhuo formula(香连化浊方,XLHZ)blocking the development of chronic atrophic gastritis(CAG)to gastric cancer(GC)through bioinformatics analysis and in vitro.METHODS:Path... OBJECTIVE:To explore the mechanism of Xianglian Huazhuo formula(香连化浊方,XLHZ)blocking the development of chronic atrophic gastritis(CAG)to gastric cancer(GC)through bioinformatics analysis and in vitro.METHODS:Pathological morphology of gastric mucosa of rats were observed.High-throughput sequencing was used to analyze the miRNA expression profile of gastric mucosa.The miRanda,miRDB and miRWalk databases were used to predict the differential target genes.Gene Ontology(GO)and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)enrichment analysis were performed for differential target genes.Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction(qRTPCR)was used to verify the differentially expressed miRNAs and target genes.Western blot,EdU,wound healing and flow cytometry were used to observe the effect of XLHZ on epithelial-mesenchymal transition(EMT)markers,proliferation,migration,apoptosis and cell cycle of CAG cells in vitro.RESULTS:A total of five differentially expressed miRNAs and four differential target genes were screened in this study.GO analysis showed that the target genes were enriched in regulation of neuron development,regulation of transcription factor activity and regulation of RNA polymerase.KEGG pathways database differences in gene enrichment of target genes in the Wnt signaling pathway,Phospholipase D signaling pathway and mitogen-activated protein kinase signaling pathway.qRTPCR confirmed that miRNAs and its target genes were consistent with the screening results.In vitro,our study revealed that XLHZ could increase the expression of Ecadherin,decrease the expression of transforming growth factorβ1,vimentin andβ-catenin,inhibite the proliferation and migration of CAG cells,cause cell cycle arrest at G0/G1 and G2/M phase,induce the apoptosis of CAG cells,and prevent the progression of CAG to GC.CONCLUSION:This study provided a new idea for the mechanism of blocking the progression of CAG to GC by XLHZ,which may be related to the expression of miR-20a-3p,miR-320-3p,miR-34b-5p, 展开更多
关键词 high-throughput nucleotide sequencing gastritis atrophic stomach neoplasms microRNAs Xianglian Huazhuo formula
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