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GFAP expression in the optic nerve and increased Н2S generation in the integration centers of the rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) brain after unilateral eye injury 被引量:2
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作者 Evgeniya V.Pushchina Anatoly A.Varaksin +1 位作者 Dmitry K.Obukhov Igor M.Prudnikov 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2020年第10期1867-1886,共20页
Hydrogen sulfide(H2S)is considered as a protective factor against cardiovascular disorders.However,there are few reports on the effects of H2S in the central nervous system during stress or injury.Previous studies on ... Hydrogen sulfide(H2S)is considered as a protective factor against cardiovascular disorders.However,there are few reports on the effects of H2S in the central nervous system during stress or injury.Previous studies on goldfish have shown that astrocytic response occurs in the damaged and contralateral optic nerves.Glial fibrillary acidic protein(GFAP)concentration in the optic nerves of rainbow trout has not been measured previously.This study further characterized the astrocytic response in the optic nerve and the brain of a rainbow trout(Oncorhynchus mykiss)after unilateral eye injury and estimated the amount of H2S-producing enzyme cystathionineβ-synthase(CBS)in the brain of the rainbow trout.Within 1 week after unilateral eye injury,a protein band corresponding to a molecular weight of 50 kDa was identified in the ipsi-and contralateral optic nerves of the rainbow trout.The concentration of GFAP in the injured optic nerve increased compared to the protein concentration on the contralateral side.The results of a quantitative analysis of GFAP+cell distribution in the contralateral optic nerve showed the largest number of GFAP+cells and fibers in the optic nerve head.In the damaged optic nerve,patterns of GFAP+cell migration and large GFAP+bipolar activated astrocytes were detected at 1 week after unilateral eye injury.The study of H2S-producing system after unilateral eye injury in the rainbow trout was conducted using enzyme-linked immunosorbent assay,western blot analysis,and immunohistochemistry of polyclonal antibodies again st CBS in the integrative centers of the brain:telencephalon,optic tectum,and cerebellum.Enzyme-linked immunosorbent assay results showed a 1.7-fold increase in CBS expression in the rainbow trout brain at 1 week after unilateral eye injury compared with that in intact animals.In the ventricular and subventricular regions of the rainbow trout telencephalon,CBS+radial glia and neuroepithelial cells were identified.After unilateral eye injury,the number of CBS+neuroepithelial cells in the 展开更多
关键词 astrocyte-like cells glial fibrillary acidic protein hydrogen sulfide neuroepithelial cells NEUROPROTECTION radial glial cells rainbow trout(Oncorhynchus mykiss) reactive oxygen species unilateral eye injury
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灌服中药补阳还五汤的大鼠血清促进胚胎神经上皮细胞存活与分化的研究 被引量:3
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作者 孙晋浩 杨琳 +1 位作者 高英茂 李振华 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期433-437,共5页
为了观察灌服中药补阳还五汤的大鼠血清对胚胎神经上皮细胞生长分化的影响 ,在给 Wistar大鼠灌服中药后 ,麻醉后取血并分离血清 ;取孕 11d大鼠胚胎神经管上皮细胞 ,分别接种于含有补阳还五汤药物血清和对照鼠血清的培养基内 ,于培养后... 为了观察灌服中药补阳还五汤的大鼠血清对胚胎神经上皮细胞生长分化的影响 ,在给 Wistar大鼠灌服中药后 ,麻醉后取血并分离血清 ;取孕 11d大鼠胚胎神经管上皮细胞 ,分别接种于含有补阳还五汤药物血清和对照鼠血清的培养基内 ,于培养后不同时间观察细胞的生长状况 ,测量细胞突起长度 ,并用免疫组化技术检测胚胎神经上皮细胞的分化状况。结果显示 :药物血清组神经上皮细胞的生长明显优于对照组 ,细胞突起长度也大于对照组 ;免疫组化反应显示 ,药物血清组神经元及神经胶质细胞数量均多于对照组。结论 :灌服补阳还五汤的鼠血清既可促进胚胎神经上皮细胞的生长也可诱导其分化。 展开更多
关键词 神经上皮细胞 补阳还五汤 神经发育 诱导分化 大鼠 中枢神经系统
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牛磺酸对高温后神经上皮细胞的保护作用 被引量:2
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作者 庄园 《山东医学高等专科学校学报》 2011年第4期275-278,F0003,共5页
目的探讨牛磺酸对高温后神经上皮细胞存活的影响。方法取孕12 d小鼠胚胎神经管上皮细胞进行原代培养,将其分为正常对照组、高温对照组和5个牛磺酸组(浓度分别为2、6、10、15和20 mM)。通过MTT法测定细胞光密度值(OD值)以反应细胞增殖活... 目的探讨牛磺酸对高温后神经上皮细胞存活的影响。方法取孕12 d小鼠胚胎神经管上皮细胞进行原代培养,将其分为正常对照组、高温对照组和5个牛磺酸组(浓度分别为2、6、10、15和20 mM)。通过MTT法测定细胞光密度值(OD值)以反应细胞增殖活性,DAPI染色法检测细胞凋亡。结果高温对照组细胞的增殖活性明显低于正常对照组(P<0.01),细胞凋亡明显增多;61、0 mM牛磺酸组细胞的增殖活性明显高于高温对照组(P<0.05),高温12 h后细胞凋亡率低于高温对照组(P<0.01),并持续至高温后48 h。结论 6 mM和10 mM牛磺酸对高温后神经上皮细胞的存活具有保护作用。 展开更多
关键词 牛磺酸 高温 神经上皮细胞
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成人鼻腔嗅黏膜嗅鞘细胞的分离、培养与纯化 被引量:1
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作者 禹晓东 罗卓荆 +1 位作者 白崇峰 李亮 《脊柱外科杂志》 2005年第2期95-98,共4页
目的 自成人鼻腔嗅黏膜中培养纯化嗅鞘细胞,并进行免疫细胞化学鉴定,探讨嗅黏膜中嗅鞘细胞的培养方法。方法 取成人嗅黏膜,采用差速贴壁法获得较高纯度的嗅鞘细胞,并采用免疫细胞化学法进行形态学观察。结果 通过纯化,可获得纯度约为... 目的 自成人鼻腔嗅黏膜中培养纯化嗅鞘细胞,并进行免疫细胞化学鉴定,探讨嗅黏膜中嗅鞘细胞的培养方法。方法 取成人嗅黏膜,采用差速贴壁法获得较高纯度的嗅鞘细胞,并采用免疫细胞化学法进行形态学观察。结果 通过纯化,可获得纯度约为75%的嗅鞘细胞,并表达P75NGFr,光镜下细胞形态以带有细长突起的双极细胞及三极细胞为主,有少量的扁平“煎蛋样”细胞。结论 自成人鼻腔嗅黏膜可成功分离培养出嗅鞘细胞,为开展自体嗅黏膜嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤提供了技术与方法。 展开更多
关键词 嗅鞘细胞 鼻腔 成人 纯化 免疫细胞化学法 形态学观察 技术与方法 化学鉴定 培养方法 人嗅黏膜 双极细胞 细胞形态 分离培养 脊髓损伤 移植修复 高纯度 贴壁法
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hiPSC多能标志物的表达水平与谱系特异性分化潜能的相关性研究
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作者 丁晓雨 朱晓明 +2 位作者 钱昱 刘志强 张海涛 《军事医学》 CAS 2021年第9期653-659,共7页
目的研究人诱导型多能干细胞(hiPSC)不同多能标志物的相对表达水平与其心肌、神经分化潜能的相关性,为hiPSC作为种子细胞在心脏、神经再生医学研究中的应用提供实验指导。方法以人类胚胎干细胞(hESC)系h1ESC作为对照,通过实时定量聚合... 目的研究人诱导型多能干细胞(hiPSC)不同多能标志物的相对表达水平与其心肌、神经分化潜能的相关性,为hiPSC作为种子细胞在心脏、神经再生医学研究中的应用提供实验指导。方法以人类胚胎干细胞(hESC)系h1ESC作为对照,通过实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测2株hiPSC细胞系多能性基因的表达水平;随后,分别利用心肌分化培养基与神经分化培养基对其进行诱导分化。在心肌分化中,通过比较搏动区域数量与面积以及心肌标志物的表达水平,鉴定不同hiPSC的心肌分化潜能;在神经分化中,通过比较早期花结样细胞团的数量与神经标志物的表达水平,鉴定不同hiPSC的神经分化潜能。最后,通过比对hiPSC多能标志物的表达水平高低与谱系分化潜能高低的对应关系,揭示两者的潜在相关性。结果RT-qPCR结果显示,两株hiPSC相比,hiPSC-0100细胞系中SOX2表达显著较高、NANOG显著较低,hiPSC-WTB细胞系SOX2表达显著较低、NANOG显著较高(P<0.05)。在分化潜能上,形态学与RT-qPCR检测共同显示,hiPSC-0100表现相对较低的心肌分化潜能、较高的神经分化潜能,hiPSC-WTB表现较高的心肌分化潜能、较低的神经分化潜能(P<0.05)。结论高表达SOX2、低表达NANOG的hiPSC细胞系倾向于具有较高的神经分化潜能;高表达NANOG、低表达SOX2的hiPSC细胞系倾向于具有较高的心肌分化潜能。 展开更多
关键词 人诱导型多能干细胞 多能性基因 分化潜能 心肌细胞 神经上皮细胞 生物标记 聚合酶链反应
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果蝇胶质细胞在神经系统的功能研究进展
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作者 蒋蓉 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期4998-5002,共5页
胶质细胞是一类广泛存在于神经系统的细胞,但其在神经系统的功能作用尚不太清楚。果蝇神经系统中也存在多种的胶质细胞,包括表面胶质细胞(Surface glia)、皮质胶质细胞(Cortex glia)、类星形胶质细胞(Astrocyte-like glia)、神经节包裹... 胶质细胞是一类广泛存在于神经系统的细胞,但其在神经系统的功能作用尚不太清楚。果蝇神经系统中也存在多种的胶质细胞,包括表面胶质细胞(Surface glia)、皮质胶质细胞(Cortex glia)、类星形胶质细胞(Astrocyte-like glia)、神经节包裹型胶质细胞(Ensheathing glia)和轴突包裹型胶质细胞(Wrapping glia)。本综述介绍果蝇胶质细胞研究的近期进展,研究表明果蝇胶质细胞能激活神经干细胞分裂,维持神经干细胞的存活,促进视叶神经上皮细胞的增殖。胶质细胞还能维持神经元的存活,以及促进轴突的形成、聚束和正常的投射。此外,胶质细胞还具有清除凋亡神经细胞的作用。 展开更多
关键词 胶质细胞 神经干细胞 神经上皮细胞 神经元 果蝇
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Rho激酶抑制剂Y27632促进人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞向多巴胺能神经前体细胞的转化
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作者 李洋洋 徐佳佳 +8 位作者 姜诚诚 陈子龙 陈颖 应梦娇 王澳 马彩云 王春景 郭俣 刘长青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期236-243,共8页
目的提高人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞(hiPSCs-NECs)定向诱导中脑多巴胺能神经前体细胞(DAPs)的效率。方法将人iPSCs在含有小分子组合[DMH1(10μmol/L)、SB431542(10μmol/L)、音猬因子(SHH 200 ng/mL)、成纤维细胞生长因8(FGF... 目的提高人诱导多能干细胞来源原始神经上皮细胞(hiPSCs-NECs)定向诱导中脑多巴胺能神经前体细胞(DAPs)的效率。方法将人iPSCs在含有小分子组合[DMH1(10μmol/L)、SB431542(10μmol/L)、音猬因子(SHH 200 ng/mL)、成纤维细胞生长因8(FGF8100 ng/mL)、嘌吗啡胺(2μmol/L)、CHIR99021(3μmol/L)、N2(1%)]的mTeSRTM培养基中诱导至12 d,细胞分化为原始神经上皮细胞(NECs)。特异性诱导DAPs,将诱导的hiPSCs-NECs用胶原酶IV消化后,在神经分化培养基[添加1%N2、2%B27-A、BDNF(10 ng/mL)、GDNF(10 ng/mL)、AA、TGF-β、cAMP、1%GlutaMax]中加入不同浓度的Rho激酶抑制剂Y27632重新接种,并于次日更换培养基去除Y27632,持续诱导至第28天获得DAPs。结果人iPSCs可在基质胶上稳定传代,表达多潜能性标记物OCT4、SOX2、Nanog和SSEA1,且碱性磷酸酶染色呈阳性。诱导分化至第13天获得hiPSCs-NECs,形成玫瑰花结样结构,能够表达特征性标记物(SOX2、Nestin和PAX6)。将hiPSCs-NECs消化后,添加5μmol/LY27632的hiPSCs-NECs相比较未加Y27632的对照组,细胞解离后贴壁存活率明显增加,处于S期的细胞(P<0.01)与细胞活力显著提高(P<0.01),且凋亡率显著降低(P<0.05),持续诱导至第28天,细胞高表达DAPs特异性的标记物(TH、FOXA2、NURR1和Tuj1)。结论添加Y27632(5μmol/L)24 h可显著提高人iPSCs-NECs细胞向iPSCs-DA神经前体转化时的细胞存活率,并且Y27632去除后,不会影响后续向DA神经前体细胞分化,间接的提高了细胞的分化效率. 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 Y27632 原始神经上皮细胞 多巴胺能神经前体细胞
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人诱导多能干细胞体外定向分化为多巴胺能神经元祖细胞 被引量:1
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作者 徐佳佳 李洋洋 +6 位作者 仲光尚 方祝玲 刘淳博 马彩云 王春景 郭俣 刘长青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期175-182,共8页
目的 探讨人诱导多能干细胞(hiPSCs)体外高效定向分化为中脑多巴胺能神经元祖细胞(DAPs)的方法体系。方法 人iPSCs诱导分化为DAPs遵循两个主要阶段,第1阶段是化学诱导产生中间态细胞,人i PSCs在含小分子化合物组合的神经诱导培养基中培... 目的 探讨人诱导多能干细胞(hiPSCs)体外高效定向分化为中脑多巴胺能神经元祖细胞(DAPs)的方法体系。方法 人iPSCs诱导分化为DAPs遵循两个主要阶段,第1阶段是化学诱导产生中间态细胞,人i PSCs在含小分子化合物组合的神经诱导培养基中培养至第13天,其表观特征类似于原始神经上皮细胞。第2阶段,特异性诱导DAPs,将中间态细胞在神经分化培养基中诱导至第28天获得DAPs。CM-DiI染色后,定向移植帕金森(PD)大鼠模型右前脑内侧束(MFB),实验动物随机分为3组:健康对照组,模型组和DAPs移植组。移植后2周的大鼠全脑冷冻切片免疫荧光检测移植细胞在宿主脑内微环境中存活、迁移及分化状况,移植后8周,对细胞移植组PD大鼠进行行为学鉴定。结果 人iPSCs可在基质胶上稳定传代,具有正常的二倍体核型,表达多潜能性标记物OCT4、SOX2和Nanog,且碱性磷酸酶染色呈阳性。诱导分化至第13天获得原始神经上皮细胞形成玫瑰花结样结构,且能够表达其表面特征性标记物(SOX2、Nestin和PAX6,91.3%~92.8%)。诱导至第28天的DAPs高表达其特异性的标记物(TH、FOXA2、LMX1A和NURR1,93.3%~96.7%)。而且,DAPs移植PD大鼠脑内2周后,可分化为TH^(+),FOXA2^(+)与Tuj1^(+)神经元,移植后8周,移植组较模型组相比,经水迷宫实验(P<0.0001)和阿扑吗啡(APO)诱导的旋转实验(P<0.0001)检测,PD大鼠的运动功能得到明显改善。结论 人iPSCs经多级诱导可高效分化为中脑DA能神经元祖细胞,具备体内和体外分化为功能神经元与胶质细胞的潜能,并可显著改善PD大鼠的运动功能障碍,为hiPSCs-DAPs移植治疗神经系统损伤疾病奠定细胞基础和实验依据。 展开更多
关键词 人诱导多能干细胞 多巴胺能神经元祖细胞 原始神经上皮细胞 细胞移植 帕金森模型大鼠
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急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变黄斑区形态学改变与视功能的关系 被引量:3
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作者 路露 徐延山 +2 位作者 李岩 亢雷 解士勇 《天津医药》 CAS 北大核心 2011年第5期394-397,共4页
目的:探讨急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)的形态学改变与视功能变化的相关性。方法:选取急性CSC患者36例(36只眼),应用光学相干断层扫描(OCT)和多焦视网膜电图(mfERG)进行检查。OCT测量CSC患者黄斑区神经上皮层脱离的高度、水... 目的:探讨急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)的形态学改变与视功能变化的相关性。方法:选取急性CSC患者36例(36只眼),应用光学相干断层扫描(OCT)和多焦视网膜电图(mfERG)进行检查。OCT测量CSC患者黄斑区神经上皮层脱离的高度、水平范围、黄斑体积。mfERG测量视网膜后极部不同区域的N1波、P1波的潜伏期和反应密度。采用Pearson相关分析和Spearman相关分析,分析急性CSC的黄斑区形态学改变与视功能变化的相互关系。结果:急性CSC患者黄斑区神经上皮层脱离高度、神经上皮层脱离水平范围与最佳矫正视力(BCVA)呈负相关(r分别为-0.922和-0.896,均P<0.001),黄斑体积与BCVA无相关(r=0.014,P>0.05)。mfERGP1波1~3环,N1波2环的潜伏期与BCVA呈负相关(rs分别为-0.488、-0.514、-0.452及-0.445,均P<0.05);N1波1、2环的反应密度与BC?VA呈负相关(rs分别为-0.497和-0.502,均P<0.05),N1波2环、P1波1环的潜伏期与神经上皮层脱离高度呈正相关(rs分别为0.486和0.421,均P<0.05)。结论:OCT和mfERG联合应用可准确检测CSC患者的黄斑区形态和功能的变化,CSC患者神经上皮层脱离的高度与黄斑区功能的变化关系密切。 展开更多
关键词 脉络膜视网膜炎 急性病 放射摄影术 全景 神经上皮细胞 多焦视网膜电图
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加味温胆汤对抑郁模型大鼠下丘脑GFAP、CD11b、CNPasemRNA表达的影响 被引量:2
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作者 徐磊 张丽萍 +1 位作者 宋瑞雯 陈颖 《西部中医药》 2020年第10期7-11,共5页
目的:探讨慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS)所致抑郁动物模型下丘脑胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、免疫细胞膜表面整合素CD11b、抗2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(2... 目的:探讨慢性不可预知性温和刺激(chronic unpredictable mild stimulation,CUMS)所致抑郁动物模型下丘脑胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、免疫细胞膜表面整合素CD11b、抗2’,3’-环核苷酸3’-磷酸二酯酶(2’,3’-cyclic nucleotide 3’-phosphodiesterase,CNPase)mRNA的变化及加味温胆汤的干预作用。方法:将40只8周龄SD健康雄性大鼠随机分空白组、模型组、加味温胆汤组、氟西汀组,每组10只。除空白组外,其他各组造模成功后(造模时间21天),连续给药28天。分别在造模前、造模21天后、给药28天后进行旷场试验、糖水偏好实验。实验结束后处死动物,取下丘脑进行GFAP、CD11b、CNPase mRNA分析。结果:1)旷场实验结果显示,造模前各组得分差异无统计学意义(P>0.05),造模21天后模型组、加味温胆汤组、氟西汀组与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.01);给药28天后,加味温胆汤组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05),氟西汀组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。2)糖水偏好实验结果显示造模前各组得分无统计学差异(P>0.05),造模21天后模型组、加味温胆汤组、氟西汀组与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.01);给药28天后,加味温胆汤组、氟西汀组与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。3)实时荧光定量PCR发现下丘脑GFAP、CD11b、CNPase mRNA模型组为与空白组相比显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);加味温胆汤组、氟西汀组与模型组相比表达有所提升,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:加味温胆汤能够改善抑郁模型大鼠抑郁状态,其抗抑郁作用可能与上调抑郁动物模型下丘脑GFAP、CD11b、CNPase mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 加味温胆汤 抑郁模型 大鼠 下丘脑 神经胶质细胞 动物实验
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肝细胞肝癌中神经上皮细胞转化基因1及皮质肌动蛋白表达及其意义 被引量:2
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作者 叶蕴瑶 陈莉 +1 位作者 王桂兰 韩高华 《江苏医药》 CAS 2015年第17期2009-2013,I0001,共6页
目的探讨肝细胞肝癌(HCC)神经上皮细胞转化基因1(NET-1)及皮质肌动蛋白表达水平与HCC患者预后的关系。方法用免疫组化SP法检测103例石蜡标本HCC组织及57例癌旁组织中NET-1和皮质肌动蛋白表达,分析其与临床病理特征和生存率之间的关系。... 目的探讨肝细胞肝癌(HCC)神经上皮细胞转化基因1(NET-1)及皮质肌动蛋白表达水平与HCC患者预后的关系。方法用免疫组化SP法检测103例石蜡标本HCC组织及57例癌旁组织中NET-1和皮质肌动蛋白表达,分析其与临床病理特征和生存率之间的关系。结果 HCC组织中,NET-1和皮质肌动蛋白阳性表达率分别为85.96%和73.68%,高于癌旁组织的59.60%和28.10%(P<0.01)。HCC组织NET-1表达与肿瘤大小、分级、TNM分期和肝硬化背景有关(P<0.05或P<0.01)。皮质肌动蛋白表达与肿瘤包膜完整性、脉管转移、TNM分期有关(P<0.05或P<0.01)。HCC中,NET-1和皮质肌动蛋白表达呈显著正相关(r=0.280,P<0.05)。NET-1和皮质肌动蛋白表达均阳性组5年生存率低于两者均阴性组(27.78%vs.54.54%)(P<0.05)。结论 HCC中的NET-1和皮质肌动蛋白表达增加,可作为评价HCC肿瘤分级、分期及判断预后的重要参考指标。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 神经上皮细胞转化基因1 皮质肌动蛋白
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神经管畸形小鼠胚胎神经上皮细胞的黏弹性特性 被引量:1
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作者 刘成星 李敏 解军 《国际生物医学工程杂志》 CAS 2018年第3期208-212,共5页
目的探索胚胎神经上皮细胞力学特性与神经管闭合之间的关系。方法用全反式维甲酸对胚胎发育第7.5天的小鼠进行灌胃处理,制备小鼠神经管畸形(NTDs)模型。分别于胚胎发育第9.5天与11.5天处死孕鼠,提取正常及神经管畸形原代神经上... 目的探索胚胎神经上皮细胞力学特性与神经管闭合之间的关系。方法用全反式维甲酸对胚胎发育第7.5天的小鼠进行灌胃处理,制备小鼠神经管畸形(NTDs)模型。分别于胚胎发育第9.5天与11.5天处死孕鼠,提取正常及神经管畸形原代神经上皮细胞,采用微管吸吮技术结合标准固体黏弹性力学模型分析神经上皮细胞的力学特性。结果小鼠胚胎神经上皮细胞力学特征表现为典型的黏弹性固体特征。与对照组比较,NTDs组的神经上皮细胞的3个黏弹性参数(平衡模量、瞬态模量和表观黏性系数)均明显升高,差异有统计学意义(均P〈0.05),但同一组细胞的黏弹性参数在不同时间点的差异无统计学意义(均P〉0.05)。结论胚胎神经上皮细胞变形能力下降可能是神经管闭合障碍产生的因素之一。 展开更多
关键词 神经管畸形 胚胎神经上皮细胞 微管吸吮 黏弹性 细胞变形能力
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体外培养及诱导胚兔视网膜及脑神经干细胞分化的研究
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作者 吴婵 董方田 +1 位作者 陈连凤 许卓再 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期265-269,共5页
目的比较体外不同培养条件对视网膜及脑神经干细胞(NSCs)视紫红质的纯化能力及不同诱导条件对NSCs的诱导分化能力。方法取胚兔视网膜及大脑皮质制备单细胞悬液,分别在5种不同培养基中进行体外培养并纯化。选取无血清条件下传3代的NSC... 目的比较体外不同培养条件对视网膜及脑神经干细胞(NSCs)视紫红质的纯化能力及不同诱导条件对NSCs的诱导分化能力。方法取胚兔视网膜及大脑皮质制备单细胞悬液,分别在5种不同培养基中进行体外培养并纯化。选取无血清条件下传3代的NSCs,分别在2种培养基中诱导8~10d。采用免疫荧光法及流式细胞仪检测所获得细胞的神经干细胞和视网膜神经上皮细胞抗原的表达。结果免疫荧光法显示无血清培养条件下2种组织来源的NSCs均部分表达巢蛋白。流式细胞术显示2种诱导方式均部分细胞表达巢蛋白,较诱导前明显降低,而视紫红质及Thyl.1的表达均较诱导前明显增高。经5%胎牛血清(FBS)诱导的细胞表达视紫红质较联合应用全反式视黄酸(ATRA)时高,差异均有统计学意义(X2=30.59,6.76;P〈0.01),但Thyl.1表达低于后者,差异也有统计学意义(X2=6.19,22.92;P=0.01)。结论无血清培养基添加N2、EGF、bFGF、LIF4种因子可以获得最佳纯化效果。2种诱导培养基都能够诱导NSCs的分化,视网膜NSCs分化为视网膜神经上皮细胞的能力高于大脑皮质NSCs。 展开更多
关键词 干细胞/细胞学 细胞培养技术/方法 细胞分化/免疫学 神经上皮细胞/细胞学
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新型冠状病毒(SARS-COV-2)感染后人嗅觉神经上皮细胞的基因组调控网络研究
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作者 解昕轶 杨钰萌 +5 位作者 王少薇 孙娜 史传道 刘启玲 张荣强 李俊杰 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1524-1533,共10页
目的·探索新型冠状病毒(SARS-COV-2)感染人体后,人嗅觉神经上皮细胞的基因组学变化,建立差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)的蛋白互作(protein-protein interactions,PPI)网络等,了解SARS-COV-2感染对人嗅觉神经... 目的·探索新型冠状病毒(SARS-COV-2)感染人体后,人嗅觉神经上皮细胞的基因组学变化,建立差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)的蛋白互作(protein-protein interactions,PPI)网络等,了解SARS-COV-2感染对人嗅觉神经上皮细胞的影响,为新型冠状病毒肺炎的防治提供参考依据。方法·采用NetworkAnalyst分析公共数据集GSE151973,挑选DEGs,进行基因本体(Gene Ontology, GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路分析,创建PPI网络、DEGs-microRNA调控网络、转录因子-DEGs调控网络、环境化学物-DEGs调控网络以及药物-DEGs调控网络,使用Cytoscape 3.7.2进行图视化。结果·SAR-COV-2侵袭人嗅觉神经上皮细胞后,基因表达谱部分发生明显上调或下调,共发现了568个DEGs,其中上调基因550个(96.8%),下调基因18个(3.2%);通过富集分析,DEGs主要参与鼻呼吸和嗅觉上皮的内皮发育、血管生成等生物学过程,N端肉豆蔻酰化结构域结合等分子功能表达。PPI网络提示RTP1和RTP2为核心蛋白;MAZ为最具有影响效应的转录因子;Hsa-mir-26b-5p对DEGs的调控作用最明显;环境化学物丙戊酸钠对DEG最具影响;药物乙醇对DEGs的调控最具有影响。结论·感染SAR-COV-2后嗅觉神经上皮细胞基因表达明显改变,SARS-CoV-2可能通过抑制PAX7功能来抑制肌肉卫星细胞的增殖分化。RTP1、RTP2可能通过促嗅觉受体上膜的能力以及其对气味配体反应性抵抗SARS-CoV-2,MAZ可能通过影响细胞的生长、增殖调控DEGs;microRNA、环境化学物和药物在人嗅觉神经上皮细胞抗SAR-COV-2感染过程中也发挥着不可忽视的作用。 展开更多
关键词 COVID-19 新型冠状病毒(SARS-CoV-2) 嗅觉神经上皮细胞
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轴突导向因子EphA5沉默后抑制中脑神经上皮细胞投射
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作者 房芃 高青 +7 位作者 冯晓雯 张静 暴丽华 董海曼 彭雷 李振华 孙晋浩 高英茂 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期465-468,共4页
目的:探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用。方法:从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞;设计EphA5基因干扰序列,构建RNA干扰载体,采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞,电转后将... 目的:探讨轴突导向因子EphA5在中脑神经上皮细胞向纹状体投射中的作用。方法:从孕11d大鼠胚胎取材并培养中脑神经上皮细胞;设计EphA5基因干扰序列,构建RNA干扰载体,采用电转染技术将EphA5干扰载体转入中脑神经上皮细胞,电转后将中脑神经上皮细胞与纹状体共培养,观察转染后中脑神经上皮细胞向纹状体组织的靶向生长情况。结果:中脑神经上皮细胞与纹状体组织块联合培养,神经突起明显朝向组织块生长;EphA5基因干扰载体转染中脑神经上皮细胞可降低EphA5蛋白表达,EphA5基因沉默后神经上皮细胞突起朝向纹状体生长趋势不明显。结论:EphA5基因沉默后中脑神经上皮细胞向纹状体投射减弱,EphA5基因可调控中脑神经上皮细胞向纹状体的靶向投射。 展开更多
关键词 EphA5 神经上皮细胞 投射 中脑 RNA干扰
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人胚胎干细胞向神经上皮祖细胞的诱导分化 被引量:5
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作者 袁丁 林戈 卢光琇 《生命科学研究》 CAS CSCD 2010年第2期95-99,共5页
人胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能,是研究早期胚胎发育和细胞替代治疗的重要细胞来源.采用一种与小鼠成纤维细胞共培养的方法进行人胚胎干细胞的神经诱导,可产生高纯度的神经上皮祖细胞,其神经上皮特异性基因的表达有一定的时空... 人胚胎干细胞具有自我更新和多向分化潜能,是研究早期胚胎发育和细胞替代治疗的重要细胞来源.采用一种与小鼠成纤维细胞共培养的方法进行人胚胎干细胞的神经诱导,可产生高纯度的神经上皮祖细胞,其神经上皮特异性基因的表达有一定的时空性;诱导生成的神经上皮祖细胞具有增殖潜能并可分化为神经元和星型胶质细胞,是潜在的神经干细胞.人胚胎干细胞来源的神经上皮祖细胞为研究神经发育和神经诱导提供了新材料,也为神经系统疾病的细胞替代治疗提供了新的细胞来源. 展开更多
关键词 胚胎干细胞 神经诱导 神经上皮祖细胞
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神经干细胞治疗应用安全性的研究进展 被引量:5
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作者 徐伟伟 姜晓丹 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期82-84,共3页
目的:神经干细胞具有分化及自我更新的潜能,可分化为神经元及胶质细胞。神经干细胞的发现为神经系统疾病治疗带来了巨大的希望,但当前对于神经干细胞的诱导、分化及迁移等调控机制尚未完全清楚。因此,神经干细胞在完全进入临床治疗应用... 目的:神经干细胞具有分化及自我更新的潜能,可分化为神经元及胶质细胞。神经干细胞的发现为神经系统疾病治疗带来了巨大的希望,但当前对于神经干细胞的诱导、分化及迁移等调控机制尚未完全清楚。因此,神经干细胞在完全进入临床治疗应用之前仍面临许多问题亟待解决。其中,安全性问题(包括其致癌性问题)是人们关注的焦点。本文就目前国内外对此所做的研究及其展望做一综述。 展开更多
关键词 神经系统肿瘤 神经上皮 干细胞 安全
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神经上皮细胞转化因子1在肾细胞癌中的表达及临床意义
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作者 汪建焜 何立 方亮 《癌症进展》 2024年第11期1230-1233,共4页
目的 探讨神经上皮细胞转化因子1(NET1)在肾细胞癌(RCC)中的表达及临床意义。方法 收集RCC组织60例、癌旁组织60例、正常肾组织20例。采用免疫组化法检测各组织中NET1表达情况,分析其表达情况与RCC患者临床特征的相关性。结果 60例RCC... 目的 探讨神经上皮细胞转化因子1(NET1)在肾细胞癌(RCC)中的表达及临床意义。方法 收集RCC组织60例、癌旁组织60例、正常肾组织20例。采用免疫组化法检测各组织中NET1表达情况,分析其表达情况与RCC患者临床特征的相关性。结果 60例RCC组织中NET1阳性表达率明显高于癌旁组织和正常肾组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床分期、分化程度、淋巴结转移情况、远处转移情况RCC患者RCC组织中NET1表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。RCC组织中NET1阳性表达与临床分期、淋巴结转移、远处转移均呈正相关,与分化程度呈负相关(P﹤0.01)。结论 RCC组织中NET1阳性表达率较高,其阳性表达与RCC患者分化程度、淋巴结转移、远处转移、临床分期相关。 展开更多
关键词 神经上皮细胞转化因子1 肾细胞癌 免疫组化法 临床分期
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食管鳞状细胞癌NET1的表达和淋巴管浸润与病理的相关性 被引量:2
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作者 黄海涛 丁胜光 +2 位作者 王飞 陆晨希 仲崇俊 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2016年第5期34-39,共6页
目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中神经上皮细胞转化基因1(neuroepithelial cell transforming gene 1,NET1)的表达及D2-40标记的肿瘤淋巴管浸润与病理之间的相关性。方法采用Western印迹法检测E... 目的探讨食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中神经上皮细胞转化基因1(neuroepithelial cell transforming gene 1,NET1)的表达及D2-40标记的肿瘤淋巴管浸润与病理之间的相关性。方法采用Western印迹法检测ESCC组织及正常食管组织中NET1蛋白的表达情况,免疫组织化学法检测ESCC中NET1及D2-40的表达情况,观察D2-40标记的淋巴管内癌细胞浸润(lymphatic vessel invasive,LVI)的情况,分析NET1、LVI与临床病理指标之间的关系及患者5年生存率的差异。结果 NET1在ESCC组织中阳性表达率(++/+++)为61.3%(20.4%/40.9%)(49/80),正常食管组织中表达阳性率为10.5%(2/19),2例均为弱阳性(+),LVI在ESCC组织中的阳性率为36.3%(29/80),NET1高表达、LVI阳性与ESCC的淋巴结阳性转移、临床分期呈正相关(P<0.05),与肿瘤的神经血管侵犯相关(P<0.05),而与性别、年龄、组织学分级无明显相关性(P>0.05)。NET1高表达与LVI阳性密切相关(P=0.012),NET1高表达或LVI阳性的ESCC患者术后的生存率明显降低,而且同时存在NET1高表达和LVI阳性的ESCC患者术后5年生存率最低。结论联合检测NET1及LVI可以提高对食管鳞癌患者的术后临床病理分期及预后的判断的准确性。 展开更多
关键词 神经上皮细胞转化基因1 D2-40 食管鳞状细胞肿瘤 淋巴管浸润
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神经上皮干细胞的分离培养及其体外分化特性的观察 被引量:2
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作者 赵舒武 高英茂 +1 位作者 张晓丽 邴鲁军 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期671-674,共4页
目的探讨大鼠胚胎神经管神经上皮干细胞的分离培养条件,并观察其在体外的分化特性。方法采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养神经上皮干细胞,采用巢蛋白(nestin)免疫细胞化学染色技术检测神经上皮干细胞,用NSE和GFAP免... 目的探讨大鼠胚胎神经管神经上皮干细胞的分离培养条件,并观察其在体外的分化特性。方法采用显微解剖、机械吹打、无血清悬浮培养方法分离培养神经上皮干细胞,采用巢蛋白(nestin)免疫细胞化学染色技术检测神经上皮干细胞,用NSE和GFAP免疫组化染色检测并计数神经细胞和神经胶质细胞。结果大鼠胚胎神经管神经上皮干细胞在无血清培养基中可形成大量呈nestin抗原阳性细胞构成的神经球,经传代有血清培养后分化为NSE阳性和GFAP阳性细胞,其中NSE阳性细胞占细胞总数的47.7%,GFAP阳性细胞占细胞总数的39.8%。结论胎鼠神经管神经上皮干细胞在无血清培养中可增殖和传代,在有血清培养中可分化为神经细胞和神经胶质细胞,两者之比为47.7∶39.8。 展开更多
关键词 神经上皮干细胞 分离 培养 分化 大鼠
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