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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查 被引量:43
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作者 侯丽丽 赵铁柱 +7 位作者 遇秀玲 曹振 邓小雨 乔明明 张硕 王斌 陈西钊 田克恭 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期677-682,共6页
2006年6月份以来,我国多个省份暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,给我国养猪业造成了巨大经济损失。为全面了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在我国的流行情况以及遗传变异规律,本研究采用RT-PCR的方法,对从2006年8月至2007年10月期间... 2006年6月份以来,我国多个省份暴发高致病性猪繁殖与呼吸综合征,给我国养猪业造成了巨大经济损失。为全面了解高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒在我国的流行情况以及遗传变异规律,本研究采用RT-PCR的方法,对从2006年8月至2007年10月期间,来自于19省(市)共474份样品进行高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒核酸的检测,结果检出阳性样品294份。在各省不同时期样品中均有阳性样品检出。通过对阳性样品进行Nsp2基因和ORF5基因扩增,序列分析发现所有检测的猪繁殖与呼吸综合征病毒株高度同源,为同一毒株遗传变异而来,所有猪繁殖与呼吸综合征毒株与HB-1株遗传关系最近;且Nsp2均缺失30个氨基酸。 展开更多
关键词 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp2 ORF5
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高致病性PRRSV(HuN株)NSP2基因的扩增与分析 被引量:19
2
作者 刘业兵 郑杰 宁宜宝 《中国兽药杂志》 2007年第10期10-12,共3页
从2006年高热病病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(HuN株),利用RT-PCR扩增其NSP2基因,通过与标准毒株VR-2332进行比较,发现共有30个氨基酸缺失,其中29个为连续缺失,缺少氨基酸分别位于481、532~560位。将分离株与同时期分离自不... 从2006年高热病病料中分离到一株猪繁殖与呼吸综合征病毒(HuN株),利用RT-PCR扩增其NSP2基因,通过与标准毒株VR-2332进行比较,发现共有30个氨基酸缺失,其中29个为连续缺失,缺少氨基酸分别位于481、532~560位。将分离株与同时期分离自不同地区高热病毒株的基因序列(EF112445、EF112446、EF112447)相比较,发现全部都具有相同的缺失,这说明引起猪高热病的病原变异不大;与较早期分离的AY150312、AY262352毒株进行比较,发现缺失部位不同。该研究补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据,为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 高热病综合征 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) nsp2
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高致病性猪蓝耳病病毒GS/LZh/07株的分离、鉴定及其非结构蛋白Nsp2基因特性分析 被引量:19
3
作者 吴锦艳 田宏 +9 位作者 尚佑军 刘湘涛 郑海学 靳野 尹双辉 满自萍 赵娜 蔡承茹 蔺芳 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期438-443,共6页
将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR方法扩增该分离毒株的非结构蛋白Nsp2基因,并进行了序列测定,... 将高致病性猪蓝耳病疑似病料接种Marc145细胞,发现该病料可使Marc145细胞产生CPE,应用猪蓝耳病病原检测试剂盒从细胞培养物中检测到PRRSV,命名为Gs/Lzh/07株。同时应用RT-PCR方法扩增该分离毒株的非结构蛋白Nsp2基因,并进行了序列测定,发现所扩增到的Nsp2基因有90个核苷酸的缺失。序列比对结果表明:该分离病毒Nsp2基因与经典毒株PRRSV-ch-1a核苷酸同源性为83.0%,氨基酸同源性为72.7%;与高致病性变异毒株NX和SD核苷酸同源性为95.5%,氨基酸同源性为90.9%,可见该毒来源于2006-2007年流行毒株,说明高致病性猪蓝耳病变异病毒已经在甘肃省存在。该毒株的成功分离为高致病性猪蓝耳病流行病学调查分析提供数据,也为预防控制该病积累了资料。Nsp2的特性分析为揭示高致病性猪蓝耳病PRRSV在甘肃省的流行特点提供参考。 展开更多
关键词 高致病性猪蓝耳病病毒 分离 鉴定 nsp2 特性分析
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2017-2020年我国部分地区PRRSV流行毒株变异情况分析 被引量:16
4
作者 吴瑕 劳梦琴 +9 位作者 谭祥梅 陈鹏飞 于家荣 朱钧锐 张玉娇 虞凌雪 高飞 姜一峰 童光志 周艳君 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第5期64-74,共11页
为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,本研究对采集自上海市、浙江省、江苏省等地区的566份临床样品进行RT-PCR检测,结果显示,其中246份样品呈现PRRSV阳性。对31株Nsp2基因、21株ORF5基因和12株Nsp9基因进行序... 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况,本研究对采集自上海市、浙江省、江苏省等地区的566份临床样品进行RT-PCR检测,结果显示,其中246份样品呈现PRRSV阳性。对31株Nsp2基因、21株ORF5基因和12株Nsp9基因进行序列测定和比对分析,发现不同地区流行的PRRSV其Nsp2基因片段大小存在明显差异,大部分毒株保持了HP-PRRSV类毒株Nsp2基因“1+29 aa”缺失模式,同时,检测到“111+5+1+19 aa”和“1+29+14 aa”两种新的氨基酸缺失模式。ORF5基因主要分布在谱系L8、L3和L1中,氨基酸突变主要位于GP5的信号肽区域和高变区,部分毒株在中和性抗原表位区域存在L39/I39的氨基酸突变,有1株存在H38L39/Y38S39的氨基酸突,另外,部分毒株在毒力相关位点出现了R13/Q13和R151/K151的氨基酸突变,而Nsp9与毒力相关的氨基酸位点则相对保守。本研究表明上述发病猪场中流行的PRRS毒株复杂多样,其中HP-PRRSV类毒株和NADC30类毒株仍然是主要流行毒株,养猪场有必要持续监测PRRSV流行毒株的变异动态,为PRRS的科学防控提供参考依据。 展开更多
关键词 PRRSV nsp2 ORF5 遗传变异
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猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白研究进展 被引量:13
5
作者 刘准 王凤雪 武华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2010年第12期120-124,共5页
猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染病。主要引起母猪繁殖障碍,表现为妊娠后期流产,死胎,木乃伊胎及弱仔;各日龄段的猪特别是仔猪感染PRRSV引起呼吸道疾病,以间质性肺炎为特征,论文主要从... 猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的高度接触性传染病。主要引起母猪繁殖障碍,表现为妊娠后期流产,死胎,木乃伊胎及弱仔;各日龄段的猪特别是仔猪感染PRRSV引起呼吸道疾病,以间质性肺炎为特征,论文主要从近几年研究的PRRSV的非结构蛋白特性、免疫学功能、非结构蛋白基因的变异等方面进行分析,阐述非结构蛋白在病毒的增殖、致病力产生的影响,从而为进一步的研究提供一定的理论基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp2 非结构蛋白
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贵州省PRRSV分离株Nsp2基因的克隆及序列分析 被引量:11
6
作者 刘飞 王开功 +7 位作者 周碧君 罗险峰 文明 安同庆 刘春国 程振涛 路宪礼 陈俊 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期924-928,共5页
为了解贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株的遗传变异情况和分子流行病学背景,本研究收集了2007年以来贵州省不同地区的12株PRRSV,并对其Nsp2基因进行序列测定与遗传变异分析。结果表明,该12株PRRSV均与我国2006年以来流行的高... 为了解贵州省猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)分离株的遗传变异情况和分子流行病学背景,本研究收集了2007年以来贵州省不同地区的12株PRRSV,并对其Nsp2基因进行序列测定与遗传变异分析。结果表明,该12株PRRSV均与我国2006年以来流行的高致病性PRRSV(HP-PRRSV)位于进化树的同一分支中。8株PRRSV的Nsp2蛋白存在第481位和533位~561位共30个氨基酸的不连续缺失,这与以往报道的HP-PRRSV的缺失特征相同;另外4株PRRSV缺失扩大,其中的3株在第481位氨基酸的两翼又缺失了29个氨基酸,即471位~500位氨基酸缺失;另外1株除第481位和533位~561位氨基酸缺失外,在第394位缺失1个氨基酸。这些新缺失毒株的出现,显示HP-PRRSV可能出现了新的变异走向。为深入研究该病毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp2 遗传变异 缺失
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的RT-PCR鉴别诊断方法 被引量:10
7
作者 赵志权 王福广 +2 位作者 郝环颍 张思远 贺东生 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期85-87,共3页
为了快速鉴别诊断高致病性猪繁殖与呼吸综合症,参照GeneBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的Nsp2基因,设计了1对引物,建立了一种RT-PCR检测方法.该方法可以区分高致病性PRRSV毒株与经典PRRSV弱毒疫苗株,扩增PCV2、PRV、PPV和C... 为了快速鉴别诊断高致病性猪繁殖与呼吸综合症,参照GeneBank已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的Nsp2基因,设计了1对引物,建立了一种RT-PCR检测方法.该方法可以区分高致病性PRRSV毒株与经典PRRSV弱毒疫苗株,扩增PCV2、PRV、PPV和CSFV等均为阴性.该方法敏感性较高,可以检测到0.2 ng的病毒核酸. 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合症 RT-PCR nsp2
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2018-2019年河南地区猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学调查 被引量:9
8
作者 赵小月 张格 +6 位作者 汪悦 刘红英 陈宇 赵军 王川庆 陈陆 李永涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2286-2292,共7页
为了解华中地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点及变异规律,本研究对2018-2019年采自河南18个地市94个猪场的414份猪肺脏、脾脏和淋巴结等样品进行PRRSVRT-PCR检测,并将阳性样品进行ORF5和NSP2基因扩增和序列测定以及遗传进化... 为了解华中地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行特点及变异规律,本研究对2018-2019年采自河南18个地市94个猪场的414份猪肺脏、脾脏和淋巴结等样品进行PRRSVRT-PCR检测,并将阳性样品进行ORF5和NSP2基因扩增和序列测定以及遗传进化分析。结果显示,414份病料中共检测出PRRSV阳性样品106份,阳性率为25.48%,其中,豫北地区检出率较高,且2018年11月至2019年2月阳性率明显增加;从阳性样品中扩增得到83个ORF5和31个NSP2基因序列;遗传进化分析表明,检出的PRRSV阳性样品中74株PRRSV属于类NADC30毒株,6株与华南地区主要流行毒株类QYYZ毒株高度相似,2株与商品化活疫苗基因序列高度同源;氨基酸序列比对发现,所检出毒株之间氨基酸同源性差异较大,10株毒株GP5序列在高变区存在插入或缺失,29个NSP2序列存在131位不连续氨基酸缺失,1个NSP2序列与高致病性PRRS疫苗毒株JXA1 NSP2存在相同缺失,1株与经典疫苗毒株RespPRRS MLV完全同源。结果表明,2018-2019年河南地区PRRSV以类NADC30毒株为优势毒株,且NSP2和ORF5基因进一步发生较大变异;同时华南地区主要流行毒株类QYYZ毒株在河南开始增多以及个别活疫苗的使用导致PRRSV的流行趋势更加复杂。因此,加强对PRRSV的流行及遗传变异的持续监测尤为重要,本研究可为PRRS临床诊断、防控以及疫苗研发提供有效的科学依据。 展开更多
关键词 PRRSV ORF5 nsp2 类NADC30毒株 类QYYZ毒株
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PRRSV SC-GY变异株Nsp2、ORF5、ORF3基因遗传变异分析 被引量:9
9
作者 陈希文 李莲 +6 位作者 尹苗 赖守勋 汪谦 罗文涛 叶兆美 王雄清 周杰珑 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1433-1441,共9页
为了监测PRRSV流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对四川省广元市某疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发病猪场病料进行分子鉴定,获得1株PRRSV命名为SC-GY株,并对SC-GY株的Nsp2、ORF5及ORF3基因进行测序比对和系统进化树构建。结... 为了监测PRRSV流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对四川省广元市某疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)发病猪场病料进行分子鉴定,获得1株PRRSV命名为SC-GY株,并对SC-GY株的Nsp2、ORF5及ORF3基因进行测序比对和系统进化树构建。结果表明,SC-GY株为Nsp2基因发生30个氨基酸不连续缺失、ORF3基因第17位插入1个丝氨酸(S)的美洲型高致病性PRRSV变异毒株,其Nsp2、ORF5、ORF3基因与VR2332、SC2012、CH-1a、JXA1、HUN4、NADC30、HENAN-XINX等国内外代表毒株的核苷酸同源性分别为70.3%~97.9%,82.4%~97.6%,83.1%~98.2%,编码氨基酸同源性分别为62.3%~96.3%,78.0%~95.7%,81.6%~96.5%;而与LV等欧洲型毒株的核苷酸同源性分别为18.9%,60.8%,63.7%,编码氨基酸同源性分别为14.0%,54.9%,57.2%。基因遗传进化树分析表明,SC-GY株与JXA1、TJ、HUN4等前期分离的毒株以及近期在四川周边分离的SC2012、SCwhn09CD、SCwhn14DY等毒株都相距较远。由此表明,该地区PRRSV在当前高频度活疫苗免疫下,流行毒株基因仍在不断变异,猪场应减少PRRSV活疫苗的免疫并加强对临床PRRSV流行毒株的监测。 展开更多
关键词 PRRSV nsp2 ORF5 ORF3 遗传变异
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Low phosphorus promotes NSP1–NSP2 heterodimerization to enhance strigolactone biosynthesis and regulate shoot and root architecture in rice 被引量:7
10
作者 Kun Yuan Hao Zhang +21 位作者 Chaoji Yu Nan Luo Jijun Yan Shuang Zheng Qingliang Hu Dahan Zhang Liquan Kou Xiangbing Meng Yanhui Jing Mingjiang Chen Xinwei Ban Zongyun Yan Zefu Lu Jian Wu Yu Zhao Yan Liang Yonghong Wang Guosheng Xiong Jinfang Chu Ertao Wang Jiayang Li Bing Wang 《Molecular Plant》 SCIE CSCD 2023年第11期1811-1831,共21页
Phosphorus is an essential macronutrient for plant development and metabolism,and plants have evolved ingenious mechanisms to overcome phosphate(Pi)starvation.However,the molecular mechanisms underlying the regulation... Phosphorus is an essential macronutrient for plant development and metabolism,and plants have evolved ingenious mechanisms to overcome phosphate(Pi)starvation.However,the molecular mechanisms underlying the regulation of shoot and root architecture by low phosphorus conditions and the coordinated utilization of Pi and nitrogen remain largely unclear.Here,we show that Nodulation Signaling Pathway 1(NSP1)and NSP2 regulate rice tiller number by promoting the biosynthesis of strigolactones(SLs),a class of phytohormones with fundamental effects on plant architecture and environmental responses.We found that NSP1 and NSP2 are induced by Oryza sativa PHOSPHATE STARVATION RESPONSE2(OsPHR2)in response to low-Pi stress and form a complex to directly bind the promoters of SL biosynthesis genes,thus markedly increasing SL biosynthesis in rice.Interestingly,the NSP1/2–SL signaling module represses the expression of CROWN ROOTLESS 1(CRL1),a newly identified early SL-responsive gene in roots,to restrain lateral root density under Pi deficiency.We also demonstrated that GR24^(4DO) treatment under normal conditions inhibits the expression of OsNRTs and OsAMTs to suppress nitrogen absorption but enhances the expression of OsPTs to promote Pi absorption,thus facilitating the balance between nitrogen and phosphorus uptake in rice.Importantly,we found that NSP1p:NSP1 and NSP2p:NSP2 transgenic plants show improved agronomic traits and grain yield under low-and medium-phosphorus conditions.Taken together,these results revealed a novel regulatory mechanism of SL biosynthesis and signaling in response to Pi starvation,providing genetic resources for improving plant architecture and nutrient-use efficiency in low-Pi environments. 展开更多
关键词 RICE Pi deficiency STRIGOLACTONE nsp1 and nsp2 CRL1 nitrogen and Pi absorption
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一株类NADC30猪繁殖与呼吸综合征病毒的全基因组序列分析 被引量:7
11
作者 李天宇 常亚飞 +4 位作者 阮坤祥 王同燕 谭菲菲 李向东 田克恭 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2020年第2期39-47,共9页
为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对某猪场疑似患有猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的猪组织样品进行鉴定,测序获得全基因,并对该毒株的NSP2基因缺失特征同源性和遗传进化及重组情况进行分析。结果... 为监测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的基因变异情况,采用RT-PCR方法对某猪场疑似患有猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的猪组织样品进行鉴定,测序获得全基因,并对该毒株的NSP2基因缺失特征同源性和遗传进化及重组情况进行分析。结果显示:该猪场感染猪体的病原体为PRRSV,该毒株被命名为180404-2fei;180404-2fei毒株的NSP2区存在131(111+1+19)个氨基酸的不连续缺失,与报道的类NADC30毒株缺失特征一致;180404-2fei的NSP2基因与NADC30毒株核苷酸和氨基酸同源性分别为92.2%和90.1%,180404-2fei毒株的ORF5基因与NADC30的核苷酸及氨基酸序列同源性分别为93.5%和92.0%;遗传进化和重组分析结果表明,180404-2fei毒株属于NADC30-Like亚群,可能是由NADC30与HP-PRRSV重组而来。本研究通过对一株类NADC30 PRRSV的全基因组序列进行分析,为研究PRRSV的遗传变异和PRRS的防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NADC30 nsp2 ORF5 进化分析
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A组人轮状病毒NSP2基因的克隆、表达及免疫学性质研究(英文) 被引量:5
12
作者 范耀春 文喻玲 +2 位作者 尹兴晓 李传印 陈元鼎 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期17-23,共7页
轮状病毒非结构蛋白NSP2在病毒基因组复制过程中起重要作用。在原核系统中重组表达了来自中国的第一株全基因组被克隆和研究了的轮状病毒NSP2,并进一步对其免疫学性质进行了研究。结果显示,在大肠杆菌中能够高效表达重组NSP2蛋白,而且... 轮状病毒非结构蛋白NSP2在病毒基因组复制过程中起重要作用。在原核系统中重组表达了来自中国的第一株全基因组被克隆和研究了的轮状病毒NSP2,并进一步对其免疫学性质进行了研究。结果显示,在大肠杆菌中能够高效表达重组NSP2蛋白,而且该蛋白能够诱发豚鼠产生特异性抗体。Western blot和免疫荧光检测表明所得抗体不仅能与该重组NSP2蛋白发生特异性反应,而且可以与轮状病毒SA11株或Wa株感染的MA104细胞中表达的NSP2发生反应。以上这些结果为进一步研究该重组NSP2蛋白的结构。 展开更多
关键词 轮状病毒 nsp2 重组表达 免疫学性质
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Sindbis病毒的繁殖与宿主细胞BHK—21的凋亡 被引量:8
13
作者 张小青 裘霁 +2 位作者 丁明孝 任显辉 邱殷庆 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期165-170,共6页
详细报道了Sindbis病毒诱导BHK-21细胞凋亡的过程,病毒感染6h后即可观测到核染色质的断裂,病毒感染12h后染色质可见明显的凝集,感染后24h DNA电泳出现明显的DNA“阶梯”(DNA ladder)。电镜观察更清楚地显示了凋亡小体形成的某些细节:在... 详细报道了Sindbis病毒诱导BHK-21细胞凋亡的过程,病毒感染6h后即可观测到核染色质的断裂,病毒感染12h后染色质可见明显的凝集,感染后24h DNA电泳出现明显的DNA“阶梯”(DNA ladder)。电镜观察更清楚地显示了凋亡小体形成的某些细节:在染色质凝集处核外膜突起,最后与细胞核分离形成凋亡小体。在此基础上将一段病毒非结构蛋白nsP2基因克隆到真核表达载体pMAMneo中,并得到瞬间表达,在其中一些细胞中出现DNA断裂这一细胞凋亡的基本特征,通过对nsP2氨基酸序列的分析,结合以前的实验结果推测nsP2可能与诱导细胞凋亡直接相关。 展开更多
关键词 病毒 细胞凋亡 Sindbis病毒 繁殖 宿主细胞
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PRRSV广东变异株分离及NSP2部分序列分析 被引量:6
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作者 黄元 禹思宇 +1 位作者 宣华 向华 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第3期26-31,共6页
2006年以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征在我国造成了巨大的经济损失。位于NSP2基因上的30个氨基酸的缺失已成为区分我国2006年以来的PRRSV高致病性毒株和2005年以前的经典流行毒株的特异性标记。本试验在广东省分离到一个新型的PRRSV毒... 2006年以来,高致病性猪繁殖与呼吸综合征在我国造成了巨大的经济损失。位于NSP2基因上的30个氨基酸的缺失已成为区分我国2006年以来的PRRSV高致病性毒株和2005年以前的经典流行毒株的特异性标记。本试验在广东省分离到一个新型的PRRSV毒株BL2,其NSP2基因540位-563位(相对于VR2332 ORF1a)发生24个氨基酸序列的缺失,该缺失位于高致病性株的缺失区域内,但缺失长度小于高致病性株。国内外文献未曾报道过类似的突变。以NSP2部分序列构建系统进化树表明,与该毒株同源性最高的是我国2005年分离的经典毒株SHB(91.5%),同时该毒株与我国2006年后流行的高致病性毒株也有较高的同源性(89.9%-91.3%)。动物回归试验表明,该毒株显示高致病性。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征 新型变异株 nsp2 序列分析
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株的分离鉴定及动物回归试验 被引量:5
15
作者 王福广 孙彦伟 +5 位作者 赵志权 王连想 余小利 苏丹萍 罗满林 贺东生 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第5期3-5,共3页
广东省某猪场暴发以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病。采集该猪场濒死猪的肺脏,接种Marc-145细胞,产生典型的细胞病变,收集病毒液并命名该病毒为PRRSV YA株。实时荧光RT-PCR试验显示YA株是基因缺失型变异株。扩增YA株的Nsp2基... 广东省某猪场暴发以高热、高发病率和高死亡率为特征的传染病。采集该猪场濒死猪的肺脏,接种Marc-145细胞,产生典型的细胞病变,收集病毒液并命名该病毒为PRRSV YA株。实时荧光RT-PCR试验显示YA株是基因缺失型变异株。扩增YA株的Nsp2基因的部分序列并进行核苷酸克隆、测序,结果显示Nsp2基因缺失第481位和第532-560位氨基酸。扩增Gp5基因序列并测序,绘制遗传进化树,结果显示YA株属于美洲型毒株,与其他7株已发表的高致病性PRRSV同源性达98.8%以上。用YA株病毒接种4头仔猪,其发病率和死亡率分别为100%(4/4)和75%(3/4)。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 测序 nsp2 GP5 攻毒
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广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征调查分析 被引量:4
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作者 张书祥 何奇松 +5 位作者 孔子荣 郭建刚 周庆安 黄胜斌 韩银华 熊毅 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2019年第1期208-213,共6页
【目的】了解广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的感染情况,为广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的监督及防控工作提供参考。【方法】通过对Nsp2基因的分析,合成新的特异性诊断引物,并利用RT-PCR的方法对广西贵港地区111个规模猪场... 【目的】了解广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的感染情况,为广西贵港地区猪繁殖与呼吸障碍综合征的监督及防控工作提供参考。【方法】通过对Nsp2基因的分析,合成新的特异性诊断引物,并利用RT-PCR的方法对广西贵港地区111个规模猪场采集的1865份扁桃体同时进行高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征和经典猪繁殖与呼吸障碍综合征的分子流行病学调查。【结果】25个猪场检出92份猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点总阳性率为22. 5%,样品总阳性率为4. 93%。其中9个猪场检测出24份高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点阳性率为8. 10%,样品阳性率为1. 29%; 18个猪场检测出68份经典猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒,场点阳性率为16. 2%,样品阳性率为3. 65%; 2个猪场同时检测出高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒和经典猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒。【结论】广西贵港地区规模猪场感染猪繁殖与呼吸障碍综合征的现象较为严重。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸障碍综合征 扁桃体 nsp2 感染 调查
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猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州株GZ-RNSP2基因的克隆与遗传变异分析 被引量:4
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作者 张喜懿 温贵兰 +3 位作者 管国丹 陈广 田浪 杨佰启 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第11期3659-3666,共8页
为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)贵州株GZ-R的遗传变异情况及其NSP2基因的特征,本试验基于NSP2基因设计了2对特异性引物对目的基因进行巢式RT-PCR、克隆和序列分析。结果显示,第二轮巢式PCR除扩增出约3000 bp的预期条带外,还扩增... 为了解猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)贵州株GZ-R的遗传变异情况及其NSP2基因的特征,本试验基于NSP2基因设计了2对特异性引物对目的基因进行巢式RT-PCR、克隆和序列分析。结果显示,第二轮巢式PCR除扩增出约3000 bp的预期条带外,还扩增出另一条约1200 bp的条带;将两DNA片段克隆至pMD19-T载体后经测序得到两条片段,大片段长2980 bp,命名为GZR-NSP2-L;小片段长1131 bp,命名为,GZR-NSP2-S;两片段同源性比对发现,GZR-NSP2-S具有GZR-NSP2-L N端第1-945位核苷酸与C端第2795-2980位核苷酸,缺失GZR-NSP2-L第946-2794位之间的核苷酸;GZR-NSP2-L与VR-2332株、Lelystad virus株的核苷酸同源性分别为81.2%、48.6%;编码氨基酸同源性比对结果与核苷酸同源性结果一致,揭示PRRSV GZ-R株属于美洲型毒株;氨基酸缺失位点比对发现,GZ-R NSP2在其第481位、第533-561位存在30个不连续氨基酸的缺失,缺失位点与PRRSV高致病性毒株一致。综上所述,可鉴定PRRSV GZ-R株为美洲型高致病性毒株。试验结果可为进一步探索PRRSV在贵州省的流行趋势以及NSP2在PRRSV复制过程中的作用机制提供一定的参考。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) nsp2 遗传变异分析
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2株高致病性蓝耳病病毒的分离鉴定及其非结构蛋白Nsp2基因特性分析 被引量:4
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作者 丁国杰 张智明 +3 位作者 王全杰 窦海艳 孟福强 梁宛楠 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第7期17-21,共5页
将黑龙江省2个地区的高致病性蓝耳病疑似病料接种Macr-145细胞,分离得到2株病毒,随后对其用RT-PCR方法、间接免疫荧光法进行鉴定,并对其非结构蛋白Nsp2基因的序列进行测定和遗传进化分析。结果表明,分离到的毒株均为PRRSV,分别命名为HLJ... 将黑龙江省2个地区的高致病性蓝耳病疑似病料接种Macr-145细胞,分离得到2株病毒,随后对其用RT-PCR方法、间接免疫荧光法进行鉴定,并对其非结构蛋白Nsp2基因的序列进行测定和遗传进化分析。结果表明,分离到的毒株均为PRRSV,分别命名为HLJZD13株和HLJMDJ13株;其Nsp2基因与国内近几年分离的HP-PRRSV毒株JXA1、HuN4的Nsp2基因的氨基酸同源性在95.4%以上,且在相同位置存在30个氨基酸的不连续缺失,提示目前市场上预防HP-PRRSV的疫苗适合在黑龙江省进行高致病性蓝耳病的防控。 展开更多
关键词 高致病性蓝耳病病毒 分离 鉴定 nsp2 特性分析
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2020—2023年甘肃猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因遗传变异分析
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作者 焦守德 张婧 +9 位作者 李平花 王健 韩庆彦 张雨星 魏达礼 王方洲 白兴文 卢曾军 马雪青 孙普 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期1482-1490,共9页
为了了解甘肃地区猪群中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行及遗传变异情况,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对2020-2023年收集的猪组织样品进行PRRSV ORF5、NSP2和ORF3基因扩增并测序,通过MEGA软件构建遗传进化树进行遗传变异分... 为了了解甘肃地区猪群中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的流行及遗传变异情况,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法对2020-2023年收集的猪组织样品进行PRRSV ORF5、NSP2和ORF3基因扩增并测序,通过MEGA软件构建遗传进化树进行遗传变异分析。结果显示,共检测了52份猪临床样品,PRRSV核酸阳性率为61.5%(32/52),成功获得了32条ORF5、15条NSP2和14条ORF3基因序列。ORF5基因遗传进化分析表明,2020—2023年甘肃地区猪群中PRRSV流行毒株中存在美洲型1.5谱系(4株)、1.8谱系(24株)、5.1谱系(2株)、8.7谱系(2株);NSP2基因遗传进化分析表明,获得的15条NSP2序列均为1.8谱系;ORF3基因遗传进化分析表明,获得的14条ORF3序列包括1.5谱系(2株)、1.8谱系(11株)、3.5谱系(1株)。基因核苷酸序列与参考毒株的同源性分别为ORF582.3%~99.7%、NSP285.9%~90.0%和ORF389.8%~95.7%;基因编码氨基酸序列与参考毒株的同源性分别为ORF579.6%~99.0%、NSP283.4%~87.7%和ORF385.1%~94.5%。ORF5基因编码的GP5蛋白的信号肽区、高变区、细胞表位区等区域均存在不同程度的变异,其中5株毒株的第33位氨基酸出现了缺失;15株NSP2蛋白氨基酸序列的缺失模式与NADC30株一致。上述结果表明,当前甘肃地区猪群中PRRSV呈现以1.8谱系毒株为优势的美洲型多谱系共循环流行,这对甘肃地区防控PRRSV提供了重要的流行病学数据。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5 nsp2 ORF3 遗传变异
原文传递
2014年~2016年某大型规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒的遗传演化分析 被引量:4
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作者 李真 张洪亮 +10 位作者 张晶 张文立 刘春晓 相丽润 冷超粮 彭金美 王倩 安同庆 童光志 蔡雪辉 田志军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期10-14,共5页
为研究近年来猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在规模化猪场的变异情况,本研究对华北某规模化猪场2014年~2016年采集的117份疑似PRRS的病料进行PCR检测,结果阳性病料57份,并对阳性病料中PRRSV的NSP2基因和ORF5基因测序分析。结果显示,43... 为研究近年来猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)在规模化猪场的变异情况,本研究对华北某规模化猪场2014年~2016年采集的117份疑似PRRS的病料进行PCR检测,结果阳性病料57份,并对阳性病料中PRRSV的NSP2基因和ORF5基因测序分析。结果显示,43份阳性病料中的PRRSV为NSP2缺失1+29个氨基酸,与HP-PRRSV的缺失相同,其NSP2基因区与HP-PRRSV Hu N4株的同源性为93.6%~99.6%;而其余的14份阳性样品中的病毒NSP2则为缺失111+1+19个氨基酸,与PRRSV NADC30株的缺失相同,NSP2基因区同源性为92.3%~92.9%,ORF5基因同源性为93.8%~94.8%。此外,在2016年检测到的4份阳性病料,基于NSP2基因构建的系统进化树显示其属于HP-PRRSV亚群,但基于ORF5基因构建的系统进化树结果显示,这些病毒则与国内近年来在香港、台湾以及华南地区流行的低致病力PRRSV GM2株(谱系3)同源性最高,核苷酸同源性为96.7%~97.0%。以上结果表明2014年以来同一猪场内的PRRSV变异呈多样性,并且出现了两类新的PRRSV变异株。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 nsp2 ORF5 分子流行病学
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