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禽流感病毒H9和N2亚型双重RT-PCR检测方法的建立 被引量：10
1
作者 徐倩 谢芝勋 +6 位作者 谢丽基 邓显文 谢志勤 罗思思 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 《动物医学进展》 北大核心 2015年第1期11-15,共5页
为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据AIV H9亚型和N2亚型基因序列,分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物,建立了H9亚型和N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT-PCR... 为建立简便快速检测H9及N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,根据AIV H9亚型和N2亚型基因序列,分别设计了2对针对H9亚型AIV的HA基因和N2亚型AIV的NA基因的引物,建立了H9亚型和N2亚型AIV双重RT-PCR检测方法。对H9N2亚型AIV的RNA模板进行RT-PCR扩增,可得到545bp H9基因特异性条带和341bp N2基因的特异性条带;对非H9亚型的N2亚型AIV进行扩增,则仅出现1个特异性扩增条带,即341bp N2基因条带;对非H9或N2亚型AIV和其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。结果表明该双重RT-PCR最低能检出100fg H9N2亚型AIV的cDNA模板。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9亚型 n2亚型 双重逆转录-聚合酶链反应
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猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立 被引量：7
2
作者 齐海涛 孔维立 张桂红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期187-191,共5页
根据GenBank中H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和M基因保守序列,分别设计合成了5对特异性引物,利用RT-PCR技术对SIV的型和亚型进行鉴定。结果表明,该方法的型RT-PCR可以检测出104... 根据GenBank中H1N1和H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)、神经氨酸酶(neuraminidase,NA)和M基因保守序列,分别设计合成了5对特异性引物,利用RT-PCR技术对SIV的型和亚型进行鉴定。结果表明,该方法的型RT-PCR可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA;H1、H3、N1和N2的亚型RT-PCR均可以检测出104 EID50病毒量所提取的RNA。除每对特异性引物所对应的亚型外,对其他亚型及猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CS-FV)的检测均为阴性,应用该方法对临床样品进行检测,其结果与病毒分离结果符合率为100%。结果表明,该方法特异性好、敏感性高,有望成为SIV的一种特异、敏感、快速的分型检测方法,为猪流感分子流行病学的调查奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 猪流感病毒 H1亚型 H3亚型 n1亚型 n2亚型 RT-PCR方法
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禽流感病毒H9N2亚型三重PCR检测方法的建立 被引量：4
3
作者 徐倩 谢芝勋 +6 位作者 谢丽基 罗思思 黄莉 黄娇玲 曾婷婷 谢志勤 邓显文 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第11期58-62,共5页
为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的... 为建立简便快速检测禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)并同时区分出H9、N2亚型的方法,本试验根据基因库中H9亚型AIV的HA基因、N2亚型AIV的NA基因及AIV的M基因序列,分别设计了3对针对这3种基因保守序列的引物,建立了AIV H9N2亚型的三重PCR检测方法。应用该方法对H9N2亚型AIV模板进行PCR扩增,可得到3条与试验设计相符的目的条带,分别为313bp(HA基因)、451bp(NA基因)和667bp(M基因);对非H9亚型的N2亚型AIV模板进行扩增,出现2条特异性扩增条带,即451bp(NA基因)和667bp(M基因);对非H9、N2亚型AIV模板进行扩增则只出现一条目的条带,即667bp(M基因);对其他禽呼吸道病原体进行PCR扩增,结果均为阴性。敏感性试验结果显示此三重PCR方法最低检出限为10-2 ng/μL。应用所建立的三重PCR方法对120份临床病料进行检测的结果与病毒分离鉴定结果一致。各项试验结果均表明,该方法对于禽流感病毒尤其是H9、N2亚型禽流感病毒的检测具有快捷、特异、灵敏的特点。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9亚型 n2亚型 M基因 三重PCR
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双重荧光定量RT-PCR快速检测N1、N2亚型流感病毒的研究 被引量：2
4
作者 黄亮 张红宇 +8 位作者 王婷 房师松 王昕 李健雄 程小雯 吕星 吴春利 张仁利 程锦泉 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期662-665,共4页
目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法。方法根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建... 目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测流感病毒N1、N2亚型的方法。方法根据N1、N2亚型流感病毒NA基因的相对保守序列,设计两对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性并建立相对定量标准曲线;利用多种流感病毒和具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 N1、N2亚型流感病毒的检测灵敏度为10拷贝/μl,扩增效率分别为102.21%和101.78%,标准曲线相关系数大于99%,重复性良好,特异度实验未发现有非特异性扩增。结论双重荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N1、N2亚型流感病毒。 展开更多
关键词 流感病毒 n1亚型 n2亚型 荧光定量RT—PCR
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荧光定量RT-PCR快速检测N_2亚型流感病毒的研究 被引量：3
5
作者 房师松 程小雯 +4 位作者 何建凡 吕星 逯建华 吴春利 刘涛 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期389-391,共3页
目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测甲型流感病毒N2亚型的方法。方法根据N2亚型流感病毒HA基因的相对保守序列,分别设计一对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释法检验建立体系的... 目的利用荧光定量RT-PCR技术建立快速检测甲型流感病毒N2亚型的方法。方法根据N2亚型流感病毒HA基因的相对保守序列,分别设计一对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒建立、优化反应体系后,采用十倍稀释法检验建立体系的灵敏度并建立相对定量标准曲线;采用N1亚型毒株核酸进行方法特异性检验并对临床疑似流感样病例样本进行检测。结果N2亚型流感病毒的检测灵敏度为2.56×10-6,扩增效率为99.9%,标准曲线r=0.997,特异性为100%。临床ILI样本检测结果与HAI鉴定结果相符。结论本研究建立的荧光定量RT-PCR技术可以快速、准确的检测N2亚型流感病毒。 展开更多
关键词 流感病毒 n2亚型 荧光定量RT-PCR
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禽流感病毒H7和N2亚型nano-dPCR检测方法的建立和应用 被引量：1
6
作者 李丹 谢芝勋 +7 位作者 李孟 罗思思 张民秀 谢丽基 华俊 粟永春 翟国胜 黄娇玲 《山西农业科学》 2023年第6期709-715,共7页
为建立一种同时检测H7亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重纳米PCR(nano-dPCR)方法,从GenBank中分别下载H7亚型AIV的HA基因序列和N2亚型AIV的NA基因序列,采用Primer 7.0和Oligo 6.0软件设计了2对特异性引物,通过对nano-dPCR反应条件进行... 为建立一种同时检测H7亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的双重纳米PCR(nano-dPCR)方法,从GenBank中分别下载H7亚型AIV的HA基因序列和N2亚型AIV的NA基因序列,采用Primer 7.0和Oligo 6.0软件设计了2对特异性引物,通过对nano-dPCR反应条件进行优化确定最佳反应体系;利用优化好的反应体系开展nano-dPCR方法的特异性和敏感性试验;采集活禽市场家禽咽喉及泄殖腔拭子样品进行临床样品检测并进行验证。结果表明,成功建立了一种同时检测H7亚型(723 bp)和N2亚型(314 bp)AIV的nano-dPCR方法,该方法特异性良好,其他亚型禽流感病毒及常见禽类呼吸道病毒均未出现特异性的条带,H7亚型AIV和N2亚型AIV的最低核酸检测量分别达到了5×103、5×103拷贝/μL,其敏感性是普通双重PCR检测方法的10倍,其对临床样品检测结果准确率达到100%,可以用于禽流感临床样品鉴别诊断和日常防控监测。 展开更多
关键词 禽流感病毒 双重纳米PCR H7亚型 n2亚型
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H4、N2和所有亚型禽流感三重RT-PCR检测方法的建立 被引量：2
7
作者 罗思思 谢芝勋 +10 位作者 李孟 黄娇玲 李丹 谢丽基 张民秀 曾婷婷 王盛 张艳芳 范晴 谢志勤 邓显文 《中国兽药杂志》 2020年第2期16-21,共6页
为建立一种同时检测H4、N2和所有亚型禽流感的方法,分别针对H4亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、N2亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因保守序列,设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,对三重反应体系进行特异性和敏感性验证,建立了H4... 为建立一种同时检测H4、N2和所有亚型禽流感的方法,分别针对H4亚型禽流感病毒(AIV)HA基因、N2亚型AIV NA基因和所有亚型AIV M基因保守序列,设计筛选出3对特异性引物,优化引物之间的浓度,对三重反应体系进行特异性和敏感性验证,建立了H4、N2和所有亚型AIV三重RT-PCR检测方法,并用该法对临床样品进行检测。建立的方法能特异性扩增H4、N2和所有亚型AIV,与其他禽病病原体不发生交叉反应;对H4、N2和所有亚型AIV至少能检测到6 pg/μL。在185份临床样品的检测中,检出4份H4、10份N2和19份AIV阳性。所建立的三重RT-PCR方法特异性强、灵敏度高,为快速检测H4、N2和所有亚型AIV提供了有效的方法。 展开更多
关键词 禽流感 H4亚型 n2亚型 三重RT-PCR
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H4亚型和N2亚型禽流感病毒二重RT-PCR检测方法的建立 被引量：1
8
作者 罗思思 谢芝勋 +10 位作者 李孟 黄娇玲 李丹 谢丽基 张民秀 曾婷婷 王盛 张艳芳 范晴 谢志勤 邓显文 《中国动物检疫》 CAS 2020年第1期69-73,共5页
为建立一种简单、快速鉴别H4亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,针对H4亚型AIV HA基因和N2亚型AIV NA基因的保守区域,分别设计筛选出1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H4亚型和N2亚型AIV二重RT-PCR检测方法。该法可特异性扩增H4... 为建立一种简单、快速鉴别H4亚型和N2亚型禽流感病毒(AIV)的方法,针对H4亚型AIV HA基因和N2亚型AIV NA基因的保守区域,分别设计筛选出1对特异性引物,通过优化反应条件,建立了H4亚型和N2亚型AIV二重RT-PCR检测方法。该法可特异性扩增H4亚型和N2亚型AIV,对其他亚型AIV和常见禽病病原体无交叉反应;对H4亚型和N2亚型AIV的检测下限均为104拷贝/μL;对152份临床样品的检测结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究建立的二重RT-PCR方法为H4亚型和N2亚型AIV的诊断提供了快速、特异、敏感和有效的检测方法。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H4亚型 n2亚型 二重RT-PCR 检测方法
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从我国人群中再次分离到H9N2亚型流感病毒 被引量：51
9
作者 郭元吉 谢健屏 +4 位作者 王敏 董婕 郭俊峰 张烨 吴昆昱 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2000年第3期209-212,共4页
目的　了解分离流感病毒毒株表面抗原亚型和特性及其来源。方法　病毒通过MDCK细胞分离 ,用红细胞凝集抑制 (HI)和神经氨酸酶抑制 (NI)测定对病毒株表面抗原进行鉴定和特性分析 ,人血清中抗体测定采用HI和中和实验。对患者进行个案调查... 目的　了解分离流感病毒毒株表面抗原亚型和特性及其来源。方法　病毒通过MDCK细胞分离 ,用红细胞凝集抑制 (HI)和神经氨酸酶抑制 (NI)测定对病毒株表面抗原进行鉴定和特性分析 ,人血清中抗体测定采用HI和中和实验。对患者进行个案调查。结果　分离物为甲型流感病毒H9N2亚型 ,属G9类似毒株 ,它的HA抗原特性与已经从人、鸡和鸽分离到的H9N2亚型毒株均有差异。患者恢复期血清对分离物的HI抗体滴度为 40 0 ,中和效价为≥ 6 40。其母血清的HI滴度为 1:2 5。结论　从患者所分离出的病毒为H9N2亚型流感病毒 ,属G9类毒株。它的HA抗原性与测定的H9N2毒株均存在差异。 展开更多
关键词 H9n2亚型流感病毒 再次分离 人流感
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H9N2亚型禽流感病毒流行病学及其疫苗的研究进展 被引量：39
10
作者 丛彦龙 钟颖 +1 位作者 孙艺学 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期386-392,共7页
禽流感(avian influenza AI)是由A型流感病毒引起的一种高度接触性传染病。H9N2是A型流感病毒的1个亚型,其谱系复杂,流行范围广,已经成为我国AI的主要亚型。尽管我国自1998年就开始进行H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的防疫,但目前其疫苗株与... 禽流感(avian influenza AI)是由A型流感病毒引起的一种高度接触性传染病。H9N2是A型流感病毒的1个亚型,其谱系复杂,流行范围广,已经成为我国AI的主要亚型。尽管我国自1998年就开始进行H9N2亚型禽流感病毒(AIV)的防疫,但目前其疫苗株与流行株的抗原性已经出现了较大的差异。带毒野禽的迁徙不仅使H9N2AIV防控难度加大,而且使AI的流行不断复杂化;活禽交易市场为AIV重排以及跨种传播提供了有利的条件。此外,H9N2AIV感染谱在不断扩大,不仅感染哺乳动物,甚至已经感染了人群;因此,有必要重新认识H9N2AIV的兽医学和公共卫生学意义。现就H9N2AIV近年在我国的流行情况及其疫苗的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9n2亚型 流行病学 疫苗
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1995～2005年中国H3N2亚型人流感病毒血凝素基因变异与流行相关性研究 被引量：35
11
作者 董丽波 张烨 +9 位作者 温乐英 赵翔 黄维娟 蓝雨 郭俊峰 李梓 王敏 董婕 郭元吉 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期339-344,共6页
为了探讨中国H3N2亚型人流感病毒血凝素基因变异与流行关系，对1995～2005年中国分离的550株H3N2流感病毒的HA1序列进行分析。HA1基因进化树显示出以很长的主干和很短的侧枝为特征。HA1的氨基酸位点变异主要位于5个已知的抗原位点及其... 为了探讨中国H3N2亚型人流感病毒血凝素基因变异与流行关系，对1995～2005年中国分离的550株H3N2流感病毒的HA1序列进行分析。HA1基因进化树显示出以很长的主干和很短的侧枝为特征。HA1的氨基酸位点变异主要位于5个已知的抗原位点及其附近，同时其它位点也有改变。通过对HA1序列资料分析发现这期间导致H3N2流行的序列改变的三种可能，第一种是同时出现多位点变化，第二种是位点变化逐渐发生累积到多个位点变化，第三种是单个抗原位点和受体结合位点同时改变，均可以引起H3N2流行。 展开更多
关键词 A型流感病毒 血凝素 变异
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禽流感病毒RT-PCR及多重RT-PCR检测技术的建立 被引量：34
12
作者 张应国 宋建领 +2 位作者 胡媛媛 王金萍 张富强 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2005年第8期600-604,共5页
研究建立了禽流感病毒(AIV)A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测和鉴别A型及H5N1、H9N2亚型AIV.所建立的RT-PCR和多重RT-PCR从核酸提取、基因扩增到产物分析在3～4h内即... 研究建立了禽流感病毒(AIV)A型、H5、N1、H9、N2亚型特异性RT-PCR及H5/N1、H9/N2、A/H5/N1多重RT-PCR检测技术,用于检测或同时检测和鉴别A型及H5N1、H9N2亚型AIV.所建立的RT-PCR和多重RT-PCR从核酸提取、基因扩增到产物分析在3～4h内即可完成,经对36株AIV及相关病毒分离物检测,与病毒分离鉴定的结果完全一致,且与相关病毒或其他亚型无交叉反应.采用多重RT-PCR检测80份棉拭子样品,并与病毒分离鉴定方法比较,二者H5N1、H9N2亚型的鉴定结果完全吻合.结果表明,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为临诊样品中AIV型及H5N1、H9N2亚型鉴定和诊断的有效方法. 展开更多
关键词 禽流感病毒 多重RT-PCR H5n1亚型 Hgn2亚型
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在疫苗免疫选择压力下H_9N_2亚型禽流行性感冒病毒HA基因的遗传变异 被引量：31
13
作者 刘红旗 黄勇 +4 位作者 程坚 彭大新 贾立军 张如宽 刘秀梵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期149-154,共6页
为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果... 为了解H9N2 亚型禽流行性感冒 (流感 )病毒在同亚型灭活疫苗的选择压力下的遗传变异情况 ,对某鸡场的感染鸡群进行连续 4年的跟踪监测 ,对使用疫苗前和持续使用疫苗后不同时段分离到的H9N2 亚型禽流感病毒的HA基因进行全序列分析。结果表明 ,在使用第一次分离的病毒株制备的疫苗后 8个月分离到的病毒株 ,其HA基因仅发生一个氨基酸的差异 ;但在继续使用该疫苗的第二个和第三个年头分离的病毒株 ,它们的HA基因则一直在发生较大的变化。这一发现对进一步研究禽流感病毒在不断使用疫苗的选择压力下发生变异的规律 。 展开更多
关键词 疫苗免疫选择压力 H9n2亚型禽流行性感冒病毒 HA基因 遗传变异
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禽流感病毒KMI/99(H9N2)HA和NA基因的序列分析 被引量：22
14
作者 郭霄峰 廖明 辛朝安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期486-491,共6页
研究分别以自行设计的一对简并引物和另一对普通引物 ,经RT PCR ,一次性成功地扩增禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )HA全长基因cDNA和NA全长基因cDNA ,并将它们克隆于 pGEM TEasy的T T窗口。首次报道了该毒株的HA全基因和NA... 研究分别以自行设计的一对简并引物和另一对普通引物 ,经RT PCR ,一次性成功地扩增禽流感病毒A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )HA全长基因cDNA和NA全长基因cDNA ,并将它们克隆于 pGEM TEasy的T T窗口。首次报道了该毒株的HA全基因和NA全基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列。测序结果显示 ,该毒株的HA基因全长为 16 83bp ,编码 5 6 0个氨基酸。NA全长为 1398bp ,编码 46 6个氨基酸残基。研究发现其HAI羧基端的分子特征是 :R S S R。从分子水平推论 :A/Chicken/Guangxi/KMI/99(H9N2 )属于非高致病力毒株。研究还发现NA蛋白于 6 3— 6 5位缺失了T、E、I三个氨基酸。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9n2亚型 HA基因 nA基因 序列分析
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H9N2亚型禽流感病毒基因组全长序列测定和各基因的遗传分析 被引量：21
15
作者 卢建红 刘秀梵 +2 位作者 邵卫星 张评浒 韦栋平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期434-441,共8页
用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,... 用RT PCR技术及cDNA末端快速扩增法获得禽流感病毒分离株A Chicken Shanghai F 98(H9N2 )代表基因组全长的 8个基因片段。基因组序列比较及遗传进化分析结果表明 ,Chicken Shanghai F 98的 8个基因均不属于Quail HongKong G1 97亚系 ,与香港禽流感事件没有直接关系。它与Chicken Beijing 1 94的HA、NA、M、NS基因同源率分别为 96 7%、96 4%、97 5 %和 98 0 % ,这 4个基因属于Chicken Beijing 1 94亚系 ,其中 ,NA基因与Duck HongKong Y2 80 97的同源率为 97 4% ,而且它们均在 2 0 5位后缺失 9个核苷酸。而PB2、PB1、PA和NP基因与已知的 3个亚系关系较远 ,分别在相应的进化树上另成分支。因此 ,Chicken Shanghai F 98是两个以上不同基因亚系间发生自然重排的产物。 展开更多
关键词 H9n2亚型禽流感病毒 基因组 序列测定 遗传分析
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H9N2亚型禽流感病毒抗原性变异的研究 被引量：28
16
作者 王泽霖 刘岩 +3 位作者 李建丽 陈少渠 杨大光 柴丽娜 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期351-354,共4页
对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性变异进行了研究。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验及攻毒保护试验证明，5株H9N2亚型间已经发生了抗原性漂移。98A5和99S毒株间的保护力接近100％，HI试验... 对1998—2002年间在河南省豫北地区分离到的5株H9N2亚型禽流感病毒的抗原性变异进行了研究。经HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验及攻毒保护试验证明，5株H9N2亚型间已经发生了抗原性漂移。98A5和99S毒株间的保护力接近100％，HI试验、鸡胚中和试验、细胞中和试验的相关性均在0．74以上。表明2毒株间的抗原性相近；用00Y毒株攻击其他4株免疫的鸡，其保护率仅为60％～80％；而02Y株对除00Y株外的4株的免疫保护率分别为60％、75％、80％、100％，与分离年代呈负相关性，HI、鸡胚中和试验、细胞中和试验也取得类似结果，说明2000年后的毒株间已发生抗原性变异。 展开更多
关键词 H9n2亚型 禽流感 抗原性变异
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H9N2亚型禽流感病毒的致病特性研究 被引量：23
17
作者 郭霄峰 廖明 辛朝安 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期70-72,共3页
将SS、KMI、KMIII3个禽流感病毒的感染性胚液分别接种 2周龄及 5周龄的SPF鸡 ,观察其临床症状及病理变化 .结果显示 :1.3个毒株均可引起攻毒鸡体温升高 ,部分出现水样淡黄色稀粪 ,但不能致死攻毒鸡 .表明 3个毒株均为非高致病力毒株 .2 ... 将SS、KMI、KMIII3个禽流感病毒的感染性胚液分别接种 2周龄及 5周龄的SPF鸡 ,观察其临床症状及病理变化 .结果显示 :1.3个毒株均可引起攻毒鸡体温升高 ,部分出现水样淡黄色稀粪 ,但不能致死攻毒鸡 .表明 3个毒株均为非高致病力毒株 .2 .攻毒鸡除胰腺充血出血外 ,其他器官不见明显的肉眼病理变化 ,但组织病理学的变化较为明显和一致 ,主要为 :脑及脊髓充血出血 ,神经元变性坏死 ,胶质细胞增生 ;心肌充血出血 ,组织变性坏死 ;胰腺充血出血 ,组织坏死 .3个毒株对 5周龄SPF鸡的病理变化无明显差异 ,但KMI毒株对 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9n2亚型 致病力 鸡病
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微载体规模化培养MDCK细胞增殖H9N2亚型禽流感病毒的研究 被引量：24
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作者 李春艳 肖晶 +1 位作者 李曦 刘娣 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1149-1153,共5页
目的探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓... 目的探索H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)在微载体大规模培养的MDCK细胞中的增殖规律,确定最佳增殖条件。方法将H9N2亚型禽流感病毒株接种到生长在24孔培养板上的MDCK细胞中进行增殖试验,检测接种不同感染剂量病毒、添加不同浓度TPCK-胰酶、在不同pH值的培养液中培养,接毒后不同时间的病毒血凝素滴度(HA)。根据最佳增殖条件将病毒接种至生长在微载体上的MDCK细胞中,利用250 mL和5L转瓶逐级进行大规模增殖。结果最佳病毒增殖条件为TPCK-胰酶终浓度为10μg/mL,接毒剂量为MOI=0.025,培养液pH值为7.4,在此条件下,H9N2亚型禽流感病毒株(A/Chiken/NX/9/99)适应在250 mL和5L转瓶中微载体培养的MDCK细胞内大量增殖,病毒的最高血凝价均可达到9log2(1∶512)。结论本研究为以哺乳动物细胞为基质规模化生产禽流感疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 关键词:微载体 H9n2亚型禽流感病毒 MDCK细胞 规模化培养
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33株H9N2亚型禽流感病毒分离株分子流行特点的研究 被引量：22
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作者 吴海燕 李明义 +3 位作者 范根成 王述柏 单虎 刘拂晓 《中国动物检疫》 CAS 2010年第6期31-33,共3页
在1998至2007年期间,采集了我国不同地区、不同宿主来源的H9N2亚型禽流感病毒株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HA基因,获得33株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列。结合GenBank中公开发表的其他国内H9亚型禽流感HA基因序列共65株,... 在1998至2007年期间,采集了我国不同地区、不同宿主来源的H9N2亚型禽流感病毒株,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HA基因,获得33株H9N2亚型禽流感病毒的核苷酸序列。结合GenBank中公开发表的其他国内H9亚型禽流感HA基因序列共65株,应用计算机软件绘制进化树,进行H9亚型禽流感病毒谱系全景分析,探索H9亚型禽流感的流行趋势。分析结果表明:这65株的基因进化树主要分为三个系列,每个系列毒株均呈现全国性流行分布;三个系列毒株可在同一时间段内、同一地区发生流行;不同时间的流行毒株虽有变异,但大部分归属于三个系列中。无论从时间的推移上还是地域的转变中,病毒均没有表现出明显的时间演变与地理分布特征,进一步显示了H9亚型禽流感的复杂性和多样性。 展开更多
关键词 禽流感病毒 H9n2亚型 血凝素基因HA 序列分析
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H9N2亚型禽流感流行现状 被引量：22
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作者 孙泉云 陈琦 夏炉明 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第10期107-111,共5页
低致病性禽流感主要是由H9N2亚型禽流感病毒所引起,近几年在世界上许多国家都暴发了H9N2亚型禽流感疫情。研究表明,H9N2亚型禽流感病毒在陆禽中至少可分为北美和欧亚两个种系,该病毒在自然环境中很容易发生变异,通过混合基因组分而形成... 低致病性禽流感主要是由H9N2亚型禽流感病毒所引起,近几年在世界上许多国家都暴发了H9N2亚型禽流感疫情。研究表明,H9N2亚型禽流感病毒在陆禽中至少可分为北美和欧亚两个种系,该病毒在自然环境中很容易发生变异,通过混合基因组分而形成不同的病毒亚型。H9N2亚型禽流感病毒已经能传播至哺乳动物,包括猪和人类,从而引发对其是否会成为潜在的大流行性病原体的关注。H9N2亚型禽流感病毒感染宿主谱很广,可在家禽、野鸟、哺乳动物和人类中造成不同程度的致病性和毒力。论文重点对H9N2亚型禽流感在家禽、野鸟、猪和人群中的流行现状进行了综述,对源自不同动物品种的H9N2亚型禽流感病毒分离株的基因及遗传进化分析进行了阐述。 展开更多
关键词 禽流感 H9n2亚型 流行状况
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