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MDR1和GST-π在骨软组织肉瘤中的表达及其与化疗耐药的关系 被引量:15
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作者 魏玲 宋现让 +2 位作者 王兴武 李敏 左文述 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期445-448,共4页
目的探讨多药耐药基因1(MDR1)和谷胱苷肽-S-转移酶-π(GST-π)在骨软组织肉瘤组织中的表达及其与化疗耐药的关系。方法应用荧光定量PCR(FQ-PCR)和流式细胞术(FCM),分别在mRNA水平和蛋白水平检测MDR1和GST-π的表达;以四甲基偶氮唑盐法(... 目的探讨多药耐药基因1(MDR1)和谷胱苷肽-S-转移酶-π(GST-π)在骨软组织肉瘤组织中的表达及其与化疗耐药的关系。方法应用荧光定量PCR(FQ-PCR)和流式细胞术(FCM),分别在mRNA水平和蛋白水平检测MDR1和GST-π的表达;以四甲基偶氮唑盐法(MTT)法检测瘤组织对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)、5-氟脲嘧啶(5-Fu)、丝裂霉素C(MMC)、氮烯咪胺(DTIC)、长春新碱(VCR)和氨甲喋呤(MTX)的敏感性。结果患者瘤组织对ADM、DDP、5-Fu、MMC、DTIC、VCR和MTX的不敏感率分别为41.18%、17.65%、47.06%、50.00%、76.47%、61.76%和52.94%。瘤组织中P-gp和GST-π相对荧光强度的表达分别为1.54和为2.58。x^2分析显示,P-gp的表达与ADM耐药、GST-π的表达与ADM、DDP、MMC耐药均呈正相关(P<0.05)。MDR1和GST-π的表达与患者年龄、性别、病理类型、肿瘤大小均无关(P>0.05)。GST-π在术前化疗患者的瘤组织中表达升高,且术前表达升高者,术后复发率高于术前GST-π表达水平较低者(P<0.05)。结论骨软组织肉瘤患者的MDR1、GST-π表达及化疗敏感性存在个体差异;化疗引起GST-π表达上调;原发GST-π高表达是骨软组织肉瘤耐药的主要机制,并与患者预后不良有关。 展开更多
关键词 多药耐药基因1 谷胱苷肽-S-转移酶-π 骨肉瘤 软组织肉瘤
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定痫丸对难治性癫痫大鼠抗癫痫作用及机制 被引量:15
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作者 程记伟 陶杰 +5 位作者 张淑芬 李国毅 陈黎佶 张晓菁 朱宇丹 白宇 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期108-115,共8页
目的:探讨定痫丸对难治性癫痫大鼠的抗痫作用及可能的分子生物学机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠90只随机分成2组,分为正常组10只,造模组80只,然后将造模成功的64只大鼠,随机分成模型组、定痫丸组、卡马西平组、中西药联用组,每组各16... 目的:探讨定痫丸对难治性癫痫大鼠的抗痫作用及可能的分子生物学机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠90只随机分成2组,分为正常组10只,造模组80只,然后将造模成功的64只大鼠,随机分成模型组、定痫丸组、卡马西平组、中西药联用组,每组各16只。定痫丸组灌服定痫丸混悬剂1. 5 g·kg-1·d-1,卡马西平组灌服卡马西平溶液30 mg·kg-1·d-1,中西药联用组同时给予定痫丸混悬剂和卡马西平溶液,正常组及模型组灌服蒸馏水15 m L·kg-1·d-1,连续给药1月。通过行为学及脑电图指标评价定痫丸的抗痫作用,通过高效液相色谱评价定痫丸对卡马西平脑内药物浓度的影响,通过免疫组化、蛋白质免疫印迹法(Western blot)及实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)方法观察大鼠脑内多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)蛋白及mRNA表达情况及定痫丸对其干预作用。结果:正常组大鼠无癫痫发作,脑内仅有少量MDR1,P-gp表达。与正常组比较,模型组大鼠癫痫发作级别升高(P <0. 05),持续时间延长(P <0. 05),脑皮质及海马MDR1,P-gp表达增加(P <0. 05);与模型组比较,各实验组大鼠癫痫发作级别及持续时间降低(P <0. 05),大鼠脑内MDR1,P-gp表达减少(P <0. 05);与定痫丸组比较,中西药联用组大鼠癫痫发作级别更低(P <0. 05),持续时间更短(P <0. 05),MDR1,P-gp表达减少更加明显(P <0. 05);与卡马西平组比较,定痫丸组及中西药联用组大鼠脑内MDR1,P-gp表达减少(P <0. 05),中西药联用组大鼠癫痫发作级别更低(P <0. 05),持续时间更短(P <0. 05),且大鼠脑内卡马西平药物浓度升高(P <0. 05)。结论:定痫丸对难治性癫痫具有一定的抗痫作用,且能逆转卡马西平的耐药,二者具有协同增效作用。其逆转耐药作用可能与阻断脑内MDR1,P-gp表达有关。 展开更多
关键词 难治性癫痫 定痫丸 行为学 脑电图 药物浓度 多药耐药基因1 P一糖蛋白
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转运蛋白基因多态性对儿童急性淋巴细胞白血病大剂量甲氨蝶呤治疗的影响 被引量:15
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作者 陆爱东 张乐萍 +6 位作者 王彬 贾月萍 左英熹 吴珺 黄山雅美 胡冠华 刘桂兰 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期733-736,共4页
目的研究多药耐药基因1(MDR1)和还原型叶酸载体基因(SLC19A1)多态性对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量甲氨喋呤(MTX)治疗疗效及不良反应的影响。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术,对108例ALL患者MDR1 exon... 目的研究多药耐药基因1(MDR1)和还原型叶酸载体基因(SLC19A1)多态性对儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)大剂量甲氨喋呤(MTX)治疗疗效及不良反应的影响。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)技术,对108例ALL患者MDR1 exon26C>T、MDR1 exon21G>T/A和SLC19A1 80G>A基因多态性进行分析;并分析基因型和生存率、不良反应等的关系。结果 MDR1 exon26C>T、MDR1 exon21G>T/A和SLC19A180G>A各基因型的36个月生存率差异无统计学意义;MDR1 exon26C>T和MDR1 exon21G>T/A突变型的24 h MTX血浆浓度高于野生型,且突变型具有更高的肝功能损伤发生率,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MDR1 exon26C>T和MDR1 exon21G>T/A基因突变对大剂量MTX治疗血浆浓度及肝功能损伤有明显影响。 展开更多
关键词 多药耐药基因1 还原性叶酸载体 基因多态性 急性淋巴细胞白血病 甲氨蝶呤
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赤芍总苷对非小细胞肺癌模型大鼠耐药基因表达影响 被引量:12
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作者 陈仪坤 樊荣 黄梅 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期1852-1854,1862,共4页
目的探讨赤芍总苷对非小细胞肺癌模型大鼠MDR1-mRNA、MRP-mRNA及LRP-mRNA基因表达影响效果。方法取50只雄性大鼠随机分为正常组5只,给予0.9%氯化钠;剩下45只大鼠分别构建鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌肺癌模型各15只,各模型构建成功后分... 目的探讨赤芍总苷对非小细胞肺癌模型大鼠MDR1-mRNA、MRP-mRNA及LRP-mRNA基因表达影响效果。方法取50只雄性大鼠随机分为正常组5只,给予0.9%氯化钠;剩下45只大鼠分别构建鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌肺癌模型各15只,各模型构建成功后分别分为模型组、赤芍总苷组和环磷酰胺组,每组各5只。模型组背静脉注射0.9%氯化钠1 m L;赤芍总苷组每天背静脉注射赤芍总苷240 mg·kg-1;环磷酰胺组每天背静脉注射环磷酰胺0.4 m L·kg-1,各组均连续治疗7 d。试验结束后,处死各组大鼠,并取尾静脉血及肺组织,进行肿瘤标记物、白细胞水平检测,制备肺组织切片,并通过聚合酶链反应法检测MDR1-mRNA、MRP-mRNA及LRP-mRNA基因表达水平。结果赤芍总苷组和环磷酰胺组大鼠与模型组相比,癌胚抗原、糖蛋白抗原50水平、白细胞水平和白细胞最低值均有不同程度降低,其中赤芍总苷组癌胚抗原、糖蛋白抗原50水平显著低于环磷酰胺组(P<0.05),而赤芍总苷组白细胞和白细胞最低值较环磷酰胺组明显增高(P<0.05)。赤芍总苷组MDR1基因、MRP基因和LRP基因较环磷酰胺组表达量均明显增加(P<0.05)。结论赤芍总苷能够明显抑制肿瘤细胞,并降低肺耐药蛋白及多药耐药基因的表达,从而提高机体对药物的耐受性和敏感性。 展开更多
关键词 赤芍总苷 非小细胞肺癌 多药耐药基因1 多药耐药相关蛋白 肺耐药蛋白
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榄香烯联合化疗治疗荷瘤小鼠 被引量:9
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作者 邹大伟 巴静 +1 位作者 吉阳涛 路平 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第27期2931-2933,共3页
目的:观察榄香烯结合化疗药对荷瘤小鼠的治疗作用,为临床肿瘤的治疗提供理论依据.方法:构建荷瘤小鼠动物模型。肿瘤内注射给药,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测其多药耐药基因(multidrugs resistance gene,mdr1)的表达,同时观察... 目的:观察榄香烯结合化疗药对荷瘤小鼠的治疗作用,为临床肿瘤的治疗提供理论依据.方法:构建荷瘤小鼠动物模型。肿瘤内注射给药,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法测其多药耐药基因(multidrugs resistance gene,mdr1)的表达,同时观察抑瘤率、肿瘤坏死情况和小鼠死亡率.结果:荷瘤组(LT)、化疗组(C)、榄香烯组(E)、化疗药+榄香烯组(CE)的mdrl的表达分别为(100%、100%、16.67%、8.33%),其中E、CE与LT组的mdr1比较有显著性差异(P<0.05);C、E、CE组抑瘤率(24.3%、29.7%、39.5%)和死亡率(20%、10%、10%)分别与LT组(0、40%)比较有显著性差异(P<0.05).病理显示,CE组肿瘤坏死明显,大体见肿瘤腐肉状,色晦暗,质软,小鼠生存活跃.结论:榄香烯可降低mdr1的表达并有良好的抗肿瘤的作用,与化疗药合用抗肿瘤作用更佳. 展开更多
关键词 肝癌 榄香烯 多药耐药基因 小鼠 联合治疗
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大蒜素对子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂耐药株增殖和凋亡及侵袭与迁移的影响 被引量:4
6
作者 汪晶 李新 +2 位作者 周筠 黄金玲 洪莉 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2023年第9期513-519,共7页
目的探讨大蒜素对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP生物学行为的影响。方法建立子宫内膜癌DDP耐药细胞株,设对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组,通过细胞计数实验(C... 目的探讨大蒜素对子宫内膜癌顺铂(DDP)耐药细胞株Ishikawa/DDP生物学行为的影响。方法建立子宫内膜癌DDP耐药细胞株,设对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组,通过细胞计数实验(CCK8)、Transwell实验、划痕实验、流式细胞术检测各组细胞的增殖、侵袭、迁移和凋亡,采用RT-qPCR实验、蛋白质印迹实验分别检测各组细胞中多药耐药基因1(MDR1)mRNA、P-gp蛋白表达水平。结果低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞增殖抑制率分别为(20.92±3.28)%、(31.71±2.82)%和(47.34±3.43)%,随着大蒜素浓度增加,细胞增殖抑制率上升,差异有统计学意义,F=346.231,P=0.007。Transwell实验表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组侵袭细胞数分别为(314.00±7.53)、(278.00±6.52)、(203.00±5.46)、(109.00±5.32)和(65.00±3.41)个,随着大蒜素浓度增加,细胞侵袭力下降,差异有统计学意义,F=437.807,P=0.009。对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组48 h划痕宽度相对比例分别为(31.48±9.28)%、(33.76±7.43)%、(42.76±5.34)%、(53.56±7.45)%和(64.431±8.32)%,随着大蒜素浓度增加,细胞迁移能力下降,差异有统计学意义,F=345.126,P=0.005。流式细胞术结果表明,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组细胞凋亡率分别为(11.32±1.13)%、(13.51±0.83)%、(21.30±1.56)%、(37.64±2.21)%和(51.31±2.42)%,随着大蒜素浓度增加,细胞凋亡率显著提高,组间均值差异有统计学意义,F=423.012,P=0.008。RT-qPCR结果显示,对照组、DDP处理组、低剂量大蒜素+DDP处理组、中剂量大蒜素+DDP处理组和高剂量大蒜素+DDP处理组MDR 展开更多
关键词 子宫内膜癌 大蒜素 DDP耐药 多药耐药基因1 P-糖蛋白
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大黄素通过下调多药耐药基因-1的表达改善胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药研究 被引量:8
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作者 王文龙 孔庆志 +4 位作者 卢宏达 雷章 余涛 吴洪斌 刘殿雷 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期2427-2430,共4页
目的探讨大黄素改善胰腺癌细胞株SW1990/Gemcitabine(GEM)耐药作用及其可能机制。方法用吉西他滨体外浓度递增法诱导培养人胰腺癌细胞株10个月,获得耐药细胞株SW1990/GEM。将细胞分为4组:对照组、大黄素组、吉西他滨组、联合组。对照组... 目的探讨大黄素改善胰腺癌细胞株SW1990/Gemcitabine(GEM)耐药作用及其可能机制。方法用吉西他滨体外浓度递增法诱导培养人胰腺癌细胞株10个月,获得耐药细胞株SW1990/GEM。将细胞分为4组:对照组、大黄素组、吉西他滨组、联合组。对照组,加入等量0. 1%DMSO溶液;其他3组分别给予10μmol·L^(-1)大黄素、20μmol·L^(-1)吉西他滨与联合两药(大黄素组+吉西他滨)来分别处理SW1990/GEM细胞。用MTT法检测细胞增殖,以流式细胞仪检测细胞凋亡,以逆转录-聚合酶链反应实验检测细胞中MDR^(-1)基因的表达水平,以流式细胞技术检测P-gp的功能。罗丹明外排实验检测SW 1990/GEM细胞内P-gp的功能。结果联合组与吉西他滨相比,可明显抑制胰腺癌SW1990/Gemcitabine细胞的增殖。吉西他滨单独处理SW 1990/GEM与SW1990细胞时,对2个细胞的抑制率分别为13. 34%与36. 52%,两者比较差异有统计学意义(P <0. 05),说明与细胞株SW 1990相比较,SW 1990/GEM细胞株对吉西他滨具备了明显的耐药性。当吉西他滨联合大黄素处理细胞时,对2种细胞的抑制率分别是40. 45%与43. 87%,差异不明显,由此可见大黄素能够增强吉西他滨对耐药细胞株SW 19901GEM增殖的抑制作用。联合组与吉西他滨组比较,可抑制细胞MDR^(-1)基因的表达,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论大黄素通过下调多药耐药基因^(-1)的表达,可以改善胰腺癌细胞对吉西他滨的耐药。 展开更多
关键词 大黄素 吉西他滨 胰腺癌 耐药 多药耐药基因-1
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多药耐药基因-1高表达可加剧类风湿关节炎患者对氨甲蝶呤的耐药 被引量:8
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作者 王佳 毛妮 +2 位作者 谢希 李姝 陈进伟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期595-600,共6页
目的观察多药耐药基因-1(MDR1)在类风湿关节炎(RA)患者氨甲蝶呤(MTX)耐药中的作用。方法体外利用重组腺病毒Ad-EGFP-MDR1感染RA患者成纤维样滑膜细胞(FLS),获得MDR1过表达RA FLS。采用Real-time PCR和Western blot法检测MDR1过表达RA FL... 目的观察多药耐药基因-1(MDR1)在类风湿关节炎(RA)患者氨甲蝶呤(MTX)耐药中的作用。方法体外利用重组腺病毒Ad-EGFP-MDR1感染RA患者成纤维样滑膜细胞(FLS),获得MDR1过表达RA FLS。采用Real-time PCR和Western blot法检测MDR1过表达RA FLS中 MDR1基因转录水平及其编码产物P-糖蛋白(P-gp)的表达水平,罗丹明123外排实验验证MDR1过表达RA FLS外排罗丹明123功能,MTT法检测MDR1过表达RA FLS对MTX的耐药性。结果重组腺病毒Ad-EGFP-MDR1感染RA FLS 72 h后,MDR1过表达RA FLS细胞内颗粒增加,细胞体积变大,生长速度变慢。MDR1过表达组RA FLS中MDR1 mRNA表达水平(1.4325±0.3924比0.0650±0.0070;t=6.035, P=0.004)、 P-gp 蛋白表达水平(1.8667±0.2857比 0.9367±0.0551;t=5.536, P=0.005)和细胞外排罗丹明123能力(979.43±196.81比1680.06±147.04;t=-4.940, P=0.008)均明显高于阴性病毒对照组。MTX各个浓度下MDR1过表达RA FLS的存活率均显著增高( P 均<0.05)。结论MDR1基因高表达可通过上调P-gp蛋白的表达影响RA FLS对MTX的外排能力,从而增强RA FLS对MTX的耐药性。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 药物耐药 多药耐药基因-1 P-糖蛋白
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mdr1基因在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系的表达 被引量:6
9
作者 高福莲 蔡新华 +2 位作者 马开颜 乐晓萍 张钦宪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1490-1494,共5页
目的探讨mdr1在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系中的转录、翻译、P-gp功能变动趋势。方法培养SGC7901/VCR(人胃癌多药耐药细胞亚系)、SGC7901和BGC823(人胃腺癌细胞系)于RPMI1640,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1mRNA的表达,用免疫印迹和免... 目的探讨mdr1在多药耐药相关的几种人胃癌细胞系中的转录、翻译、P-gp功能变动趋势。方法培养SGC7901/VCR(人胃癌多药耐药细胞亚系)、SGC7901和BGC823(人胃腺癌细胞系)于RPMI1640,用RT-PCR和原位杂交检测mdr1mRNA的表达,用免疫印迹和免疫组化检测P-gp的表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积。结果半定量RT-PCR显示,SGC7901/VCRmdr1和β-actin吸收峰面积之比为5.63,SGC7901为0.61,BGC823为0.85。杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。免疫印迹显示SGC7901/VCRP-gp的表达最强,SGC7901最弱。P-gp阳性呈棕黄色颗粒,位于细胞膜上。SGC7901中,少数细胞P-gp表达极强。SGC7901/VCR平均光密度为(1.8310±0.8401),SGC7901为(0.3590±0.2512),BGC823为(0.6260±0.4996)(P<0.05)。SGC7901/VCR阿霉素特异荧光强度为(6.59±50.30),SGC7901为(35.88±14.55),BGC823为(27.44±7.06)(P<0.001)。结论在多药耐药相关的人胃癌细胞系SGC7901/VCR、SGC7901和BGC823中,mdr1基因均表达,P-gp具有药物外排功能,SGC7901/VCR的mdr1表达最强,SGC7901最弱,BGC823居中。 展开更多
关键词 多药耐药基因1 P-糖蛋白 SGC7901/VCR细胞亚系 BGC823细胞系 SGC7901细胞系
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胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞多耐药基因1和P-糖蛋白的表达 被引量:6
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作者 高福莲 岳保红 +2 位作者 马开颜 乐晓萍 张钦宪 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第3期514-517,共4页
目的:探讨胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞中多耐药基因1(mdr1)和P糖蛋白(P gp)的表达。方法:常规培养胃上皮永生细胞系(GES-1)、胃腺癌细胞系(BGC823)和胃腺癌淋巴结转移细胞系(SGC7901)细胞,用RT PCR和原位杂交检测... 目的:探讨胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞中多耐药基因1(mdr1)和P糖蛋白(P gp)的表达。方法:常规培养胃上皮永生细胞系(GES-1)、胃腺癌细胞系(BGC823)和胃腺癌淋巴结转移细胞系(SGC7901)细胞,用RT PCR和原位杂交检测此3种细胞的mdr1mRNA表达,用免疫印迹和免疫组化检测它们的P gp表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积以判断它们的P gp功能状态。结果:在原位杂交的标本上,杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。GES1细胞颗粒数量少,BGC823颗粒数量多,细胞轮廓十分明显;SGC7901颗粒细小而少,少数细胞杂交信号丰富。免疫印迹显示GES1P gp的表达较BGC823和SGC7901弱;GES1P- gp积分光密度为46.36±19.24,BGC823为61.32±28.46,SGC7901为50.45±21.36,BGC823的P gp表达强于SGC7901和GES1(P<0.05),SGC7901和GES1的差异无统计学意义(P>0.05)。GES1阿霉素特异荧光强度为10.12±4.18,BGC823为27.44±7.06,SGC7901为35.88±14.55,3者相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论:在胃癌的发生发展中,细胞对抗肿瘤药的反应性不同,随着细胞恶性变,P gp介导的耐药性增加。 展开更多
关键词 多药耐药基因1 P-糖蛋白 GES-1细胞系 BGC823细胞系 SGC7901细胞系
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高迁移率族蛋白1对小鼠脑微血管内皮细胞P-糖蛋白表达的影响 被引量:6
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作者 陈艳 余年 +2 位作者 解渊 张亢 狄晴 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第2期141-145,共5页
目的癫痫脑内可大量释放高迁移率族蛋白1(high mobility group box protein 1,HMGB1),但针对HMGB1与癫痫脑内血管内皮细胞过表达的耐药蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)关系的研究甚少。文中探讨HMGB1对体外培养的小鼠脑微血管内皮细... 目的癫痫脑内可大量释放高迁移率族蛋白1(high mobility group box protein 1,HMGB1),但针对HMGB1与癫痫脑内血管内皮细胞过表达的耐药蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)关系的研究甚少。文中探讨HMGB1对体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞P-gp表达的影响。方法体外培养永生化小鼠脑微血管内皮细胞株b End.3,分为不同浓度HMGB1组(10、100、500、1000 ng/m L HMGB1处理b End.3细胞8 h);不同时间HMGB1处理组(以100 ng/m L HMGB1处理b End.3细胞4、8、16、24、32 h);对照组(给予等量正常培养基)。采用实时定量PCR检测b End.3细胞中P-gp编码基因多药耐药基因1a(mdr1a)mRNA表达水平,免疫印迹法、免疫细胞化学法检测P-gp蛋白表达水平。结果 q PCR结果显示:10、100、500、1000ng/m L HMGB1组mdr1a mRNA表达量分别为1.646±0.176、1.777±0.135、1.617±0.043和1.398±0.182,较对照组(1.030±0.284)明显升高(P<0.05)。HMGB1处理4、8、16、24、32 h组mdr1a mRNA表达量分别为2.655±0.112、2.168±0.212、1.823±0.232、1.418±0.376和1.445±0.123,较对照组(1.010±0.164)明显升高(P<0.05)。免疫印迹法结果显示:与对照组比较,各浓度组P-gp蛋白表达水平均增高(P<0.05),HMGB1处理8、16 h组P-gp蛋白表达增高(P<0.05)。免疫细胞化学染色结果显示:100 ng/m L HMGB1处理16 h后P-gp蛋白表达灰度值(110.843±4.036)较对照组(160.303±2.193)明显减少(P<0.01)。结论 HMGB1能够上调小鼠脑微血管内皮细胞耐药蛋白P-gp和其编码基因mdr1a表达,可能与中枢神经系统疾病尤其是癫痫的耐药相关。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 脑微血管内皮细胞 多药耐药基因1a P-糖蛋白 癫痫
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肝受体同源物-1通过转录激活多药耐药基因1调控肝癌细胞对奥沙利铂的敏感性
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作者 刘金连 潘楠楠 +1 位作者 陈雪 肖利佳 《中国热带医学》 CAS 北大核心 2024年第5期506-510,518,共6页
目的探索肝受体同源物-1(the liver receptor homolog-1,LRH-1)在调控肝癌细胞对奥沙利铂敏感性过程中的功能和分子机制,为肝癌治疗提供新思路。方法在肝癌细胞系中构建低表达及过表达LRH-1的细胞模型,通过检测半抑制浓度(half maximal ... 目的探索肝受体同源物-1(the liver receptor homolog-1,LRH-1)在调控肝癌细胞对奥沙利铂敏感性过程中的功能和分子机制,为肝癌治疗提供新思路。方法在肝癌细胞系中构建低表达及过表达LRH-1的细胞模型,通过检测半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))、细胞增殖和平板克隆形成实验等功能学实验探索LRH-1在肝癌细胞中对奥沙利铂敏感性的影响;通过定量PCR检测LRH-1对多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,MDR1)基因的转录调控作用;通过荧光素酶报告实验评估LRH-1对MDR1的转录激活能力。结果在HuH7细胞中过表达LRH-1后,细胞在奥沙利铂处理下,IC_(50)显著升高,达到18.012μmol/L,显著高于HuH-7对照组的2.042μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);同时其细胞增殖能力显著增强,MDR1 mRNA表达水平明显升高。在HepG2细胞中敲低LRH-1表达后,细胞在奥沙利铂处理下,IC_(50)显著降低,为1.012μmol/L,显著低于HepG2对照组的6.294μmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);同时其细胞增殖能力和平板克隆形成能力显著降低,MDR1 mRNA表达水平明显降低。荧光素酶报告实验证实,LRH-1可以剂量依赖性激活MDR1启动子的转录活性,其特异性小分子抑制物ML-180能显著降低LRH-1对MDR1启动子的转录激活能力。结论LRH-1通过转录激活MDR1降低肝癌细胞对奥沙利铂的敏感性,因其特异性小分子抑制剂已经合成成功,LRH-1可作为肝癌耐药治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 肝受体同源物-1 奥沙利铂 肝癌 多药耐药基因1
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多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联研究 被引量:6
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作者 王广新 杨作成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期933-937,共5页
目的探讨多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子(BDNF)基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联性。方法选取多药耐药基因-1的T-129C多态性、BDNF基因的C270T多态性作为研究的位点,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术,在耐... 目的探讨多药耐药基因-1、脑源性神经营养因子(BDNF)基因的两个多态性与小儿耐药性癫痫的关联性。方法选取多药耐药基因-1的T-129C多态性、BDNF基因的C270T多态性作为研究的位点,利用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析技术,在耐药性癫痫组41例患儿、药物有效癫痫组43例患儿、正常对照组30例儿童中进行这两个多态性检测,比较3组之间基因型分布及等位基因频率的差异。结果耐药性癫痫组MDR1基因T-129C多态性的TT基因型分布频率、T等位基因频率高于药物有效癫痫组及正常对照组,差异有显著性(P<0.05)。耐药性癫痫组BDNF基因C270T多态性的CC、CT、TT基因型分布频率和C、T等位基因频率与药物有效癫痫组及正常对照组差异无显著性(P>0.05)。结论MDR1基因T-129C多态性可能与小儿耐药性癫痫存在关联,在小儿耐药性癫痫的发生中可能起作用;而BDNF基因C270T多态性与小儿耐药性癫痫可能无关联。 展开更多
关键词 多药耐药基因-1 脑源性神经营养因子基因 小儿耐药性癫痫
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三氧化二砷联合热疗抑制大鼠肝癌的体内实验研究 被引量:6
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作者 张靖宇 刘宝刚 叶磊光 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第2期242-245,共4页
目的:研究热疗联合三氧化二砷(As2O3)对大鼠肝癌多药耐药性的影响,探讨其作为肝癌辅助治疗的可行性。方法:采用含有walker-256肿瘤细胞的大鼠腹水稀释后接种于大鼠腹股沟皮下,7天后取下瘤块并切成(1.0-2.0)mm3大小的小块,然后将小瘤块... 目的:研究热疗联合三氧化二砷(As2O3)对大鼠肝癌多药耐药性的影响,探讨其作为肝癌辅助治疗的可行性。方法:采用含有walker-256肿瘤细胞的大鼠腹水稀释后接种于大鼠腹股沟皮下,7天后取下瘤块并切成(1.0-2.0)mm3大小的小块,然后将小瘤块接种于50只大鼠的左肝叶上,10天后将大鼠分成4组,分别为对照组,热疗组,As2O3组及(热疗+As2O3)组,同时给予治疗,治疗结束后第2天处死大鼠。测量瘤重分析As2O3联合热疗的体内抑瘤作用;用H-E染色法观察肿瘤细胞病理象变化;免疫组化S-P法检测肿瘤组织内Pgp(P-glycoprotein,P-糖蛋白)的表达情况。结果:热疗组,As2O3组及(热疗+As2O3)组的平均瘤重均低于对照组(P<0.05);同时(热疗+As2O3)组与As2O3组及热疗组相比较,前者抑瘤率高于后两者(P<0.05)。在实验过程中,对照组荷瘤鼠活动减少,毛发稀疏,进食水少,而热疗组大鼠活动稍差,其余两组基本正常,饮食状况无明显改变,体重未见明显减轻。各组细胞均有坏死,大部分为凝固性坏死。对照组肿瘤细胞生长比较旺盛,坏死面积较小。其他三组坏死都比较彻底,并且呈现大片状坏死,尤以(热疗+As2O3)组明显,镜下呈一片荒凉景象,肿瘤细胞溶解,破碎,多见细胞核碎裂及核固缩表象。免疫组化法观察到多药耐药细胞呈片状分布,Pgp主要分布于耐药细胞的胞膜面,少数分布于胞浆当中;Pgp显色指数在对照组与各处理组之间差异显著(P<0.05),且(热疗+As2O3)组较其他处理组差异显著(P<0.05)。结论:As2O3和热疗在体内对大鼠肝癌均有明显的抑制作用,两者联合应用有协同作用,其作用机制可能与抑制多药耐药基因(MDR1)的表达有关。 展开更多
关键词 肝癌 三氧化二砷 热疗 MDR1
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结直肠癌中microRNA-451部分逆转MDR1/P-gp途径介导的多药耐药 被引量:6
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作者 赵岗 郑泰浩 +3 位作者 黄秀 吴春蓉 李萌 李明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期155-160,共6页
目的研究microRNA-451在结直肠癌组织与细胞中的表达及其在MDR1/P-gp途径介导的多药耐药中的作用。方法收集68例新鲜结直肠癌及癌旁组织,RT-q PCR检测其miR-451表达情况,Western blot检测P-gp蛋白是否表达,并分析其关系;RT-q PCR检测结... 目的研究microRNA-451在结直肠癌组织与细胞中的表达及其在MDR1/P-gp途径介导的多药耐药中的作用。方法收集68例新鲜结直肠癌及癌旁组织,RT-q PCR检测其miR-451表达情况,Western blot检测P-gp蛋白是否表达,并分析其关系;RT-q PCR检测结直肠癌耐奥沙利铂细胞HCT116/L、耐阿霉素细胞Lo Vo/adr及对应亲本细胞中miR-451的表达;利用脂质体将miR-451 mimics(模拟物)、NC RNAs转染2组耐药细胞,RT-q PCR和Western blot分别检测转染后其MDR1 mRNA和P-gp的表达;MTT检测转染细胞在不同浓度奥沙利铂、阿霉素下的增殖并计算其半数抑制浓度(IC50);流式细胞术进一步比较NC转染组和mimics转染组耐药细胞在同一浓度奥沙利铂、阿霉素下凋亡率。结果相对于癌旁组织,miR-451在结直肠癌组织中低表达,其表达下调与P-gp阳性表达存在相关性(r=-0.404,P=0.002);与亲本细胞相比,miR-451在2组耐药细胞中表达明显降低(P<0.01);mimics转染组细胞MDR1 mRNA、P-gp相对表达量明显下降,IC50及凋亡率与NC组均有显著差异(P<0.05)。结论 miR-451在结直肠癌中通过MDR1/P-gp途径参与多药耐药,耐药细胞转染miR-451mimics后,可部分逆转耐药。 展开更多
关键词 结直肠癌 MicroRNA-451 化疗 多药耐药基因 P-糖蛋白
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难治性癫痫患者脑内HIF-1α与多药耐药基因1表达的相关性及其意义 被引量:5
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作者 王广新 马衍辉 +3 位作者 周荣双 于磊 伊长英 任士锋 《中国医学创新》 CAS 2014年第6期3-5,共3页
目的:探讨难治性癫痫患者脑内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与多药耐药基因1(MDR1)的表达情况、相关性及其意义。方法:收集9例难治性癫痫组手术切除脑组织标本及7例对照组脑组织标本,采用免疫组织化学染色方法检测HIF-1α和MDR1的表达情况... 目的:探讨难治性癫痫患者脑内缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)与多药耐药基因1(MDR1)的表达情况、相关性及其意义。方法:收集9例难治性癫痫组手术切除脑组织标本及7例对照组脑组织标本,采用免疫组织化学染色方法检测HIF-1α和MDR1的表达情况,并分析HIF-1α与MDR1表达阳性率的相关性。结果:HIF-1α在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率77.8%(7/9)明显高于对照组的14.3%(1/7);MDR1在难治性癫痫组脑组织中的阳性表达率66.7%(6/9)明显高于对照组的14.3%(1/7),比较差异均有统计学意义(P<0.05);难治性癫痫组脑组织中HIF-1α与MDR1的表达呈正相关(r=0.76,P<0.05)。结论:难治性癫痫患者脑内HIF-1α和MDR1表达升高,且两者呈正相关。HIF-1α可能通过调控MDR1基因表达而参与难治性癫痫的形成。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子1Α 多药耐药基因1 难治性癫痫
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NF-κB抑制剂PDTC逆转K562/AO_2细胞耐药性及其机制的研究 被引量:5
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作者 杨婷婷 薛天阳 许伟 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期903-908,共6页
为研究NF-κB的异常活化在K562/AO2细胞耐药机制中的作用,采用非细胞毒剂量抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)抑制K562/AO2细胞NF-κB表达,用MTT法检测K562/AO2细胞对药物敏感性的变化,RT-PCR、流式细胞术分别检测K562、K562/AO2细... 为研究NF-κB的异常活化在K562/AO2细胞耐药机制中的作用,采用非细胞毒剂量抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)抑制K562/AO2细胞NF-κB表达,用MTT法检测K562/AO2细胞对药物敏感性的变化,RT-PCR、流式细胞术分别检测K562、K562/AO2细胞mdr-1 mRNA、P-gp表达水平以及不同浓度PDTC作用一定时间对其影响。结果显示:①阿霉素(ADM)诱导耐药的K562/AO2细胞对ADM的耐药性是K562细胞的59倍;非细胞毒剂量PDTC预作用后,ADM对K562/AO2细胞的IC50显著降低,相对逆转耐药效率为93.03%,强于经典耐药逆转剂维拉帕米(Ver);②K562/AO2细胞NF-κB表达水平高于K562细胞(p<0.01);3组非细胞毒剂量PDTC作用后K562/AO2细胞NF-κB表达均受抑制;0.2μmol/LPDTC作用24小时抑制效应最强,K562/AO2细胞NF-κB表达降至接近K562细胞水平(p>0.05);③K562/AO2细胞mdr-1 mRNA、P-gp表达均高于K562细胞(p<0.01);3组非细胞毒剂量PDTC作用K562/AO2细胞48小时后,其mdr-1 mRNA、P-gp表达明显减少。结论:抑制NF-κB异常活化可部分逆转K562/AO2细胞耐药性,其机制与mdr-1 mRNA及其编码的P-gp表达减少有关。 展开更多
关键词 PDTC NF—κB K562/A02细胞 MDR-1基因 P—gp
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粉防己碱对胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1及GST-π mRNA的影响 被引量:5
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作者 张旭 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2018年第3期467-470,共4页
目的:探讨粉防己碱(TET)对胃癌耐药细胞锌指蛋白139(ZNF139)、多耐药基因1(MDR1)及谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)mRNA的影响。方法:选取胃癌细胞SGC7901以及胃癌耐阿霉素细胞SGC7901/ADR,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测两种细... 目的:探讨粉防己碱(TET)对胃癌耐药细胞锌指蛋白139(ZNF139)、多耐药基因1(MDR1)及谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)mRNA的影响。方法:选取胃癌细胞SGC7901以及胃癌耐阿霉素细胞SGC7901/ADR,采用逆转录-聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测两种细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白表达,同时检测2.0!g·ml-1TET处理前后SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白表达。结果:SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-π蛋白相对表达量明显高于SGC7901细胞(P<0.05);TET处理后SGC7901/ADR细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA及蛋白相对表达量均较处理前明显降低(P<0.05)。结论:TET能下调胃癌耐药细胞ZNF139、MDR1、GST-πmRNA和蛋白表达水平,从而在逆转胃癌多药耐药特性方面有重要作用。 展开更多
关键词 胃癌 粉防己碱 锌指蛋白139 多耐药基因1 谷胱甘肽S转移酶-Π 耐药
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人多药耐药基因1(mdr1)的克隆及重组腺病毒制备 被引量:5
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作者 刘伟 罗庆 金先庆 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第2期113-116,120,共5页
目的:构建表达多药耐药基因1(MDR1)的重组腺病毒表达系统。方法:用基因工程技术将多药耐药基因1的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdEasy同源重组,经脂质体转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒。将重组腺病毒Ad5-mdr1... 目的:构建表达多药耐药基因1(MDR1)的重组腺病毒表达系统。方法:用基因工程技术将多药耐药基因1的cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,然后在细菌内与pAdEasy同源重组,经脂质体转染293细胞包装、扩增腺病毒颗粒。将重组腺病毒Ad5-mdr1感染小鼠单个核细胞,通过荧光显微镜及流式细胞仪进行检测。结果:酶切鉴定及PCR结果证明多药耐药基因重组腺病毒载体构建成功,构建的人多药耐药基因1(mdr1)重组腺病毒载体的效价达到8.3×1011pfu/ml。对小鼠单个核细胞的感染效率可达10%~15%,转染小鼠单个核细胞细胞48h后,可检测到mdr1基因的表达。结论:成功构建了表达多药耐药基因1的重组腺病毒载体,为后续对mdr1的相关研究创造了条件。 展开更多
关键词 多药耐药基因1 腺病毒 转染
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂对肺癌细胞株MDR1、MRP1表达的影响及其机制 被引量:4
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作者 石斌 王昊 +1 位作者 赵亮 冯晓俊 《山东医药》 CAS 2018年第39期13-16,共4页
目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂对肺癌细胞中多药耐药基因1(MDR1)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响,并探讨其机制。方法采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏瑞斯特(SAHA)、曲古抑菌素A(TSA)刺激肺癌细胞A549、SK-mes-1,实时定量PCR法检测... 目的观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂对肺癌细胞中多药耐药基因1(MDR1)和多药耐药相关蛋白1(MRP1)表达的影响,并探讨其机制。方法采用组蛋白去乙酰化酶抑制剂伏瑞斯特(SAHA)、曲古抑菌素A(TSA)刺激肺癌细胞A549、SK-mes-1,实时定量PCR法检测MDR1和MRP1基因,Western blotting法检测MDR1、MRP1蛋白及组蛋白去乙酰化酶1、2、3、4(HDAC1、2、3、4)和组蛋白H3甲基化(2MeH3K9)。结果 SAHA和TSA可以提高SK-mes-1、A549细胞中MDR1基因和蛋白的表达,抑制MRP1基因和蛋白表达(P均<0. 05); SAHA和TSA抑制了HDAC3、HDAC4表达,提高了2MeH3K9表达(P均<0. 05)。结论 SAHA和TSA促进了肺癌细胞中MDR1表达并抑制了MRP1表达,其中涉及的机制可能是SAHA和TSA同时促进了组蛋白的乙酰化和甲基化,从而调控了MDR1和MRP1的不同表达。 展开更多
关键词 伏瑞斯特 曲古抑菌素A 肺癌 多药耐药基因1 多药耐药相关蛋白1
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