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细胞自噬的研究方法 被引量：70
1
作者 马泰 孙国平 李家斌 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第3期204-209,共6页
细胞自噬的研究是目前生物医学领域热点之一,广泛参与各种生理和病理过程.目前普遍采用的自噬检测方法包括电镜、免疫荧光、蛋白质印迹等方法检测自噬体及其标志蛋白.研究的深入对自噬的检测方法也提出了更高的要求,自噬功能障碍包括自... 细胞自噬的研究是目前生物医学领域热点之一,广泛参与各种生理和病理过程.目前普遍采用的自噬检测方法包括电镜、免疫荧光、蛋白质印迹等方法检测自噬体及其标志蛋白.研究的深入对自噬的检测方法也提出了更高的要求,自噬功能障碍包括自噬体形成和降解障碍,因此,准确全面地评估自噬不仅包括自噬体的检测,还包括动态观察整个自噬性降解的过程是否顺畅(即自噬潮分析).另外,通过药物或基因干预技术来人为地调控自噬以观察其在体内体外模型中的作用也是自噬分析的重要内容.需要注意的是,任何一种方法单独应用均不能作为自噬的依据,对任何方法得到的结果进行解释时必须慎重,特别是不能将自噬体的增多减少或自噬相关蛋白表达的高低等同于自噬的增强或减弱. 展开更多
关键词 细胞自噬 自噬体 微管相关蛋白1轻链3 自噬潮 检测方法
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BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测对急性重症胰腺炎患者病情及预后的评估价值 被引量：21
2
作者 陈莹 李越 《山东医药》 CAS 2020年第1期21-24,共4页
目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,... 目的探讨严重程度床边指数(BISAP)评分联合血清甘油三酯(TG)、微管相关蛋白1轻链3(MAP1-LC3)检测对急性重症胰腺炎(SAP)患者病情及预后的评估价值。方法选择169例急性胰腺炎(AP)患者,根据病情将其分为轻症AP(MAP组,n=97)和重症AP(SAP组,n=72),并于同期选取60例体检健康者为对照组。采用BISAP评分评估各组病情,用酶联免疫吸附法检测血清TG、MAP1-LC3水平,用Pearson积矩相关分析BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3的关系。随访3个月,记录SAP患者预后,包括多器官功能障碍综合征(MODS)、胰腺坏死、死亡。绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者预后的预测价值。结果SAP组BISAP评分高于MAP组(P<0.05)。MAP、SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于对照组,且SAP组血清TG、MAP1-LC3水平高于MAP组,比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。MAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3水平呈正相关(r分别为0.529、0.617,P均<0.05);SAP患者BISAP评分与血清TG、MAP1-LC3呈正相关(r分别为0.683、0.725,P均<0.05)。不同预后SAP患者BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3水平比较差异有统计学意义(P均<0.05)。BISAP评分及血清TG、MAP1-LC3对SAP患者MODS、胰腺坏死、死亡均有一定的预测价值,三指标联合检测对SAP患者预后的预测价值优于单一指标检测(P均<0.05)。结论BISAP评分联合血清TG、MAP1-LC3检测可评估SAP患者病情严重程度,预测其预后。 展开更多
关键词 急性重症胰腺炎 急性胰腺炎严重程度床边指数 甘油三酯 微管相关蛋白1轻链3
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自噬及自噬相关蛋白在帕金森病模型大鼠黑质纹状体中的表达及意义 被引量：16
3
作者 刘斌 孙静 +5 位作者 张晋霞 毛文静 马原源 吕超男 成晓华 毕树立 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2014年第3期187-191,共5页
目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90... 目的观察自噬及自噬相关蛋白Beclin1及微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAPlLC3,简称LC3)在帕金森病(Parkinson disease,PD)模型大鼠黑质纹状体中的表达及变化,探讨自噬在PD发病中的作用。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、PD模型组(模型组),每组又分为模型制备后4d、8d两个亚组,每个亚组各15只。采用颈背部皮下注射鱼藤酮制作PD模型,透射电镜观察自噬体的形成,免疫组化法和Western blotting法检测黑质纹状体自噬相关蛋白Beclin1和LC3的表达水平。结果 (1)电子显微镜下PD模型组黑质纹状体中出现自噬体,呈圆形,大多位于细胞核旁,溶酶体数量增多。8d时,自噬体、溶酶体数量显著增多。(2)与正常组比较,假手术组黑质纹状体中Beclin1和LC3表达略增多,但差异无统计学意义(均P>0.05);与假手术组比较,模型组黑质纹状体Beclin1和LC3的表达明显增多(均P<0.01),8d高于4d,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论 PD模型大鼠黑质纹状体中自噬活性被激活,自噬可能参与了PD的发病过程。 展开更多
关键词 帕金森病 自噬 BECLIN 1 微管相关蛋白类 微管相关蛋白1轻链3
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自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白轻链3在胃癌组织中的表达及临床意义 被引量：13
4
作者 李良庆 潘敦 林振孟 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期508-510,共3页
目的 检测自噬相关基因Beelin 1和微管相关蛋白轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理参数及患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法分别检测96例胃癌石蜡组织和癌旁组织中Beclin 1... 目的 检测自噬相关基因Beelin 1和微管相关蛋白轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达,探讨其与胃癌临床病理参数及患者预后的关系.方法 应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶（SP）法分别检测96例胃癌石蜡组织和癌旁组织中Beclin 1和LC3的蛋白表达水平.应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot检测27例新鲜胃癌组织和相应癌旁组织中mRNA和蛋白的表达.结果 新鲜胃癌组织中Beclin l mRNA（ΔCt：5.90±1.52）及蛋白（1.060±0.112）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：7.50±1.22;0.964±0.130）高,两者之间差异有统计学意义（=4.87,t=4.643,P＜0.05）.新鲜胃癌组织中LC3 mRNA（ΔCt：5.00±1.34）及蛋白（1.115±0.111）的表达水平较癌旁组织（ΔCt：6.62±1.51;1.002±0.134）高,两者之间差异有统计学意义（t=5.90,t=5.653,P＜ 0.05）.在胃癌石蜡组织中,Beclin l蛋白和LC3表达阳性率（67.7％、64.6％）均高于癌旁组织（45.8％、40.6％）,差异有统计学意义（P＜0.01）.Beclin 1蛋白和LC3均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移以及临床分期有关（P＜0.05）.Beclin 1和LC3蛋白阳性表达患者的5年生存率明显低于阴性表达者（P＜0.01）.结论 Beclin 1和LC3蛋白表达增高与胃癌的发生、发展相关,提示其发挥着癌基因的作用. 展开更多
关键词 BECLIN 1 微管相关蛋白轻链3 胃癌
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急性胰腺炎患者血清IL-6、IL-10水平变化及其与淋巴细胞自噬凋亡的相关性 被引量：12
5
作者 潘静 覃月秋 +6 位作者 徐晨阳 梁云轩 宋嗣恩 季科 杨复锵 周喜汉 黄赞松 《山东医药》 CAS 2019年第27期21-24,共4页
目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同... 目的观察急性胰腺炎(AP)患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-10水平变化,探讨其与淋巴细胞自噬、凋亡的关系.方法73例AP患者中轻症急性胰腺炎(MAP,MAP组)25例、中度重症急性胰腺炎(MSAP,MSAP组)25例、重症急性胰腺炎(SAP,SAP组)23例,选择同期健康体检者25例为对照组.AP患者入院24 h内采集外周血,对照组体检时采集外周血,ELISA法检测各组血清IL-6、IL-10、细胞自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)及凋亡相关因子半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Caspase-3),流式细胞术测算各组淋巴细胞自噬率、凋亡率,Pearson相关分析法分析AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性.结果①血清IL-6、IL-10水平:与对照组比较,MAP、MSAP、SAP组血清IL-6、IL-10水平升高(P均<0.05);与MAP组比较,MSAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05);与MSAP、MAP组比较,SAP组血清IL-6水平升高、IL-10水平降低(P均<0.05).②淋巴细胞自噬情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05);与MAP组、对照组比较,MSAP组血清LC3水平、淋巴细胞自噬率升高(P均<0.05).③淋巴细胞凋亡情况:与MSAP、MAP及对照组比较,SAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05);与MAP组及对照组比较,MSAP组血清Caspase-3水平、淋巴细胞凋亡率升高(P均<0.05).④AP患者血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平的相关性:MSAP、SAP组患者血清IL-6水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9904,0.9813,P均<0.05;r分别为0.9785,0.9870,P均<0.05),血清IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关(r分别为0.9331,0.9732,P均<0.05;r=0.9878,0.8663,P均<0.05).结论AP患者血清IL-6、IL-10、LC3、Caspase-3水平均升高,MSAP、SAP患者淋巴细胞自噬、凋亡水平均升高.血清IL-6、IL-10水平与血清LC3、Caspase-3水平呈正相关.血清IL-6、IL-10可能通过促进AP患者淋巴细胞的自 展开更多
关键词 白细胞介素6 白细胞介素10 急性胰腺炎 微管相关蛋白1轻链3 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3
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自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤增强鼻咽癌细胞对放射和化学治疗的敏感性 被引量：11
6
作者 宋乐乐 马琳艳 +4 位作者 陈根德 黄莹莹 孙小锦 蒋琛琛 刘浩 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期9-18,共10页
目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)增强鼻咽癌细胞对放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗)敏感性的作用及其相关的分子机制。方法:采用MTT法检测3-MA对细胞的增殖抑制作用;集落克隆形成法检测3-MA对细胞集落克隆形成的... 目的:探讨自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)增强鼻咽癌细胞对放射治疗(放疗)和化学治疗(化疗)敏感性的作用及其相关的分子机制。方法:采用MTT法检测3-MA对细胞的增殖抑制作用;集落克隆形成法检测3-MA对细胞集落克隆形成的影响;Annexin V/PI双染法、线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)、DAPI染色检测细胞凋亡;Western印迹检测内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、自噬相关蛋白beclin1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)表达。结果:不同体积浓度或剂量的顺铂(cisplatin,DDP)、电离辐射(ionizing radiation,IR)、衣霉素(tunicamycin,TM)、3-MA对鼻咽癌细胞HONE-1均具有增殖抑制作用,且随着体积浓度或剂量的增加和作用时间的延长,对HONE-1细胞增殖抑制作用随之增加。经1.00 mmol/L 3-MA预处理细胞后,再次给予6.00 mol/L DDP,4.00 Gy IR,1.00 mol/L TM处理,细胞存活率明显降低,均低于单用组,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。3-MA增强DDP,IR,TM抑制细胞集落克隆形成作用。用6.00 mol/L DDP或4.00 Gy IR处理HONE-1细胞24 h后,细胞凋亡率分别为5.8%和6.7%,与阴性对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。JC-1和DAPI染色显示3-MA增强DDP,IR或TM诱导的细胞凋亡作用;Western印迹结果显示DDP,IR或TM处理组GRP78,beclin1表达呈时间依赖性上调,LC3 I向LC3 II转化,3-MA预处理组beclin1表达明显降低,LC3 I向LC3 II的转化。结论:自噬抑制剂3-MA可增强鼻咽癌细胞对放化疗的敏感性,其机制可能与3-MA抑制内质网应激诱导的自噬所产生的保护作用相关。 展开更多
关键词 鼻咽癌 顺铂 电离辐射 内质网应激 自噬 葡萄糖调节蛋白78 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3 衣霉素
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督脉电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬及凋亡的影响 被引量：9
7
作者 邹恩苗 高丽萍 +2 位作者 胡洁 林海燕 屠文展 《中国中医骨伤科杂志》 CAS 2019年第11期11-14,共4页
目的:探讨电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬、凋亡及运动功能的影响。方法:将36只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组、督脉电针组,每组12只。采用MASCIS Impacto1精确撞击制作脊髓损伤模型。假手术组只行椎板切除术,... 目的:探讨电针治疗对脊髓损伤大鼠神经细胞自噬、凋亡及运动功能的影响。方法:将36只SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组、脊髓损伤组、督脉电针组,每组12只。采用MASCIS Impacto1精确撞击制作脊髓损伤模型。假手术组只行椎板切除术,不造成脊髓损伤;脊髓损伤组采用MASCIS Impacto1法制作脊髓损伤模型,不进行干预治疗;督脉电针组在脊髓损伤后给予督脉电针治疗。于损伤后第1,3,7天分别对各组大鼠进行BBB运动功能评分。损伤后第7天取脊髓组织,用Western Blot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ的变化,用TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果:损伤后第3天和第7天,督脉电针组BBB评分为(5.8±0.9)和(9.5±0.9),与脊髓损伤组(4.1±0.8)和(6.4±0.7)分比较显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),而术后第1天两者评分为(2.8±0.7)和(2.4±0.5),差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组相比,脊髓损伤组LC3-Ⅱ表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与脊髓损伤组相比,督脉电针组LC3-Ⅱ显著升高,差异有统计学意义(P<0.05),细胞凋亡显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:督脉电针治疗能增强脊髓损伤大鼠神经细胞自噬,减少凋亡,改善大鼠运动功能。 展开更多
关键词 督脉电针 脊髓损伤 细胞凋亡 自噬 微管相关蛋白1轻链3-ⅱ
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自噬相关基因Beclin1和LC3与子宫内膜异位症的研究进展 被引量：9
8
作者 孔志伟 姚婷婷 《医学综述》 2019年第21期4166-4173,共8页
子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳... 子宫内膜异位症(EMs)是具有类似恶性肿瘤临床行为学特征的常见妇科良性病变,治疗较困难,复发率高。目前,EMs的发病机制尚不清楚,可能与机体自噬异常以及多种疾病的发生发展相关。自噬相关基因Beclin1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)可对哺乳动物细胞自噬的调节发挥重要作用,EMs中存在自噬异常,异位子宫内膜可能存在自噬活性改变或特定自噬基因的减少、缺失、变异以及蛋白质表达异常,但目前关于EMs中Beclin1和LC3表达的研究较少,且研究结果尚不统一。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 自噬 BECLIN1 微管相关蛋白1轻链3
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前置胎盘及合并胎盘植入组织中LC3、Beclin1、HMGB1表达及临床意义 被引量：4
9
作者 李琴琴 张玉苓 张庆 《中国计划生育学杂志》 2023年第2期407-411,共5页
目的:探究前置胎盘及胎盘植入组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin1及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及临床意义。方法:收集2019年1月-2020年12月本院收治的前置胎盘孕妇96例(前置组)和正常剖宫产孕妇75例(对照组),检测两组胎盘组织中LC... 目的:探究前置胎盘及胎盘植入组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin1及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达及临床意义。方法:收集2019年1月-2020年12月本院收治的前置胎盘孕妇96例(前置组)和正常剖宫产孕妇75例(对照组),检测两组胎盘组织中LC3、Beclin1及HMGB1表达,并根据前置组孕妇是否合并胎盘植入分为植入组与未植入组,探究发生植入的危险因素。结果:前置组和对照组年龄无差异,前置组孕周小于对照组,孕次、产次、既往剖宫产次数和距上次剖宫产时间均大于对照组(P<0.05);前置组合并胎盘植入42例(43.8%)为植入组,未植入组54例(56.3%),植入组与未植入组年龄、孕周、孕次间无差异,产次、既往剖宫产次数、距上次剖宫产时间、前置胎盘类型、胎盘位置、LC3、Beclin1及HMGB1表达等均差异(P<0.05)。前置组胎盘组织中LC3(1.67±0.29)、Beclin1(1.58±0.43)及HMGB1(1.03±0.13)表达均高于对照组(1.06±0.12、1.07±0.12、0.68±0.09),植入组(1.93±0.37、1.72±0.52、1.13±0.15)高于未植入组(1.46±0.34、1.39±0.40、1.13±0.15)(均P<0.05)。经多因素logistic分析,影响孕妇发生前置胎盘的因素包括孕周、孕次、产次、既往剖宫产次数、与上次剖宫产间隔时间、LC3、Beclin1及HMGB1高表达;影响前置胎盘孕妇发生胎盘植入的因素包括产次多、既往剖宫产次数多、距上次剖宫产时间长、前置胎盘类型、胎盘位置、LC3、Beclin1及HMGB1表达。结论:LC3、Beclin1及HMGB1蛋白在前置胎盘中表达升高,且合并胎盘植入胎盘中表达更高,LC3、Beclin1及HMGB1蛋白升高是发生前置胎盘和胎盘植入的危险因素。 展开更多
关键词 前置胎盘 胎盘植入 高迁移率族蛋白B1 微管相关蛋白轻链3 BECLIN1 影响因素
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免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1和LC3表达的影响 被引量：8
10
作者 王晓平 黄斌 +2 位作者 马帅 黄睿 李晓佳 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期450-454,共5页
目的分析免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1与微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)表达的影响。方法将雄性SD大鼠采用Aβ25-35侧脑室注射法制备阿尔茨海默病模型大鼠,将制备... 目的分析免疫抑制剂治疗对阿尔茨海默病大鼠海马自噬蛋白Beclin-1与微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)表达的影响。方法将雄性SD大鼠采用Aβ25-35侧脑室注射法制备阿尔茨海默病模型大鼠,将制备的阿尔茨海默病大鼠随机分为4组:模型组、吗替麦考酚酯高剂量组(0.8 g/kg)、吗替麦考酚酯低剂量组(0.4 g/kg)和阳性药多奈哌齐组(0.5 g/kg)。对照组与模型组给予生理盐水,吗替麦考酚酯高剂量组、吗替麦考酚酯低剂量组和阳性药多奈哌齐组均给予对应药物灌胃处理,所有大鼠连续给药4周,检测所有大鼠的识别指数、水迷宫实验、小脑Tunel染色及采用Western blot实验分析海马组织的Beclin-1与LC3蛋白表达。结果与对照组比较,模型组的识别指数和穿环次数明显降低(均P<0.05),潜伏期和游泳距离明显增加(均P<0.05);与模型组比,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组的识别指数和穿环次数明显增加(均P<0.05),潜伏期和游泳距离明显降低(均P<0.05)。镜下显示,凋亡的小脑神经细胞呈棕色,与对照组比较,模型组凋亡的小脑神经细胞明显增多;与模型组比较,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组凋亡的小脑神经细胞明显减少。与对照组比较,模型组大鼠海马的Beclin-1和LC3表达明显降低(均P<0.05);与模型组比较,吗替麦考酚酯低剂量组、高剂量组和阳性药组Beclin-1和LC3表达明显增加(均P<0.05),且吗替麦考酚酯组中,凋亡的小脑神经细胞减少及Beclin-1和LC3表达增高均呈剂量依赖性趋势。结论吗替麦考酚酯可以改善阿尔茨海默病大鼠的学习认知能力,其机制可能与增强自噬水平和提高自噬蛋白Beclin-1和LC3表达相关。 展开更多
关键词 免疫抑制剂 吗替麦考酚酯 阿尔茨海默病 海马 自噬 BECLIN-1 微管相关蛋白1轻链3
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发育期大鼠癫痫脑损伤中自噬相关基因的变化 被引量：7
11
作者 李沁芮 韩颖 +4 位作者 杜军保 金红芳 张静 牛曼曼 秦炯 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第12期909-912,共4页
目的探讨Beclin－1、P62/SQSTM1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）和unc－51样自噬活化激酶1（ULK－1）等自噬相关分子mRNA水平在发育期大鼠癫痫脑损伤前后的变化。方法21日龄雄性Sprague Dawley（SD）大鼠72只，按随机数字表法随机分为对照... 目的探讨Beclin－1、P62/SQSTM1、微管相关蛋白1轻链3（LC3）和unc－51样自噬活化激酶1（ULK－1）等自噬相关分子mRNA水平在发育期大鼠癫痫脑损伤前后的变化。方法21日龄雄性Sprague Dawley（SD）大鼠72只，按随机数字表法随机分为对照组和癫痫组。每组按时间点不同（3 h、6 h、12 h和48 h）随机分4个亚组，每个亚组9只大鼠。癫痫组采用腹腔注射卡因酸（12 mg/kg）诱导癫痫发作建立癫痫动物模型，对照组予等量9 g/L盐水腹腔注射。2组大鼠分别于注射卡因酸3 h、6 h、12 h和48 h后，予水合氯醛麻醉，处死并取出脑组织。Nissl染色法检测大鼠大脑皮层神经元损伤情况；脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测癫痫大鼠大脑神经元凋亡情况；实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测Beclin－1、P62/SQSTM1、LC3、ULK－1 mRNA水平。结果Nissl染色显示：随时间推移，癫痫组大鼠大脑皮层神经元尼氏体颜色变浅，结构紊乱；癫痫48 h组Nissl染色阳性细胞数[（82±8）个]明显少于对照组[（122±8）个]，差异有统计学意义（F＝3.768，P＝0.01）。TUNEL方法显示癫痫48 h组大鼠大脑皮层凋亡神经元[（13±7）个]明显高于对照组[（2±1）个]，差异有统计学意义（t＝－3.821，P＝0.003）。qPCR显示Beclin－1、P62/SQSTM1、LC3、ULK－1 mRNA水平在癫痫组12 h组（1.70±0.75、1.75±0.77、1.52±0.43、7.48±6.12）和癫痫48 h组（1.63±0.43、1.48±0.74、1.74±0.55、7.69±5.65）均明显高于对照组（1.00、1.00、1.00、1.00），差异均有统计学意义（F＝2.820、3.452、5.811、5.002，均P〈0.05）。结论自噬的活化先于凋亡发生，自噬相关分子可能参与发育期大鼠癫痫所致脑损伤的发病过程。 展开更多
关键词 癫痫 凋亡 自噬 BECLIN-1 P62/SQSTM1 微管相关蛋白1轻链3 unc-51样自噬活化激酶1
原文传递
艾灸对佐剂性关节炎大鼠滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ表达的影响
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作者 彭雄 周兰 +6 位作者 施雨燕 龚志贤 张亮 艾坤 李鑫 陈青 刘梨 《湖南中医药大学学报》 CAS 2024年第1期122-127,共6页
目的观察艾灸对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠炎症因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及滑膜细胞中自噬相关因子Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)表达的影响... 目的观察艾灸对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)大鼠炎症因子白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)及滑膜细胞中自噬相关因子Beclin-1、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(microtubule-associated protein1 light chain 3-Ⅱ,LC3-Ⅱ)表达的影响,探索艾灸治疗RA的作用机制。方法将36只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、甲氨蝶呤组、艾灸组,每组9只。采用弗氏完全佐剂造模法制备RA大鼠模型。造模成功后艾灸组予艾灸足三里、关元,每次20 min,每天1次;甲氨蝶呤组予甲氨蝶呤0.35 mg/kg灌胃,每周2次。空白组、模型组、甲氨蝶呤组每天给予艾灸组大鼠同样时长及强度的捆绑。每组均干预3周。观察大鼠一般情况,采用足趾容积测量仪检测大鼠左后肢足趾容积,ELISA法检测血清中IL-2含量,Western blot检测大鼠踝关节滑膜组织中Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白相对表达量。结果与模型组比较,甲氨蝶呤组及艾灸组精神一般,反应尚可,体质量恢复,较活跃,摄食、饮水尚可,足部肿胀、红肿缓解,其局部炎症及全身多发性关节炎情况均轻于模型组。与空白组比较,模型组大鼠于造模后第3、10、17、24天足趾容积明显增大(P<0.01),结合一般情况,提示模型制备成功;甲氨蝶呤组、艾灸组足趾容积于第24天增大(P<0.05)。与模型组比较,甲氨蝶呤组造模后第17、24天足趾容积降低(P<0.05,P<0.01),艾灸组第10、17、24天足趾容积明显降低(P<0.01)。干预3周后,与空白组比较,模型组血清中IL-2含量明显升高(P<0.01),滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量明显上升(P<0.01);与模型组比较,甲氨蝶呤组、艾灸组血清中IL-2含量降低(P<0.05),艾灸组滑膜组织Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量下降(P<0.05)。结论艾灸能改善RA大鼠关节肿胀,降低IL-2含量,其作用机制可能是通过调节自噬因子Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达量有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 佐剂性关节炎 滑膜组织 艾灸 白细胞介素-2 BECLIN-1 微管相关蛋白1轻链3-ⅱ
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Beclin 1和MAP1-LC3在家兔激素性股骨头缺血坏死中表达的实验研究 被引量：6
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作者 王文选 赵振群 +1 位作者 刘万林 白锐 《实用骨科杂志》 2017年第9期811-815,共5页
目的观察家兔激素性股骨头缺血坏死模型中自噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAP1-LC3)的表达情况,探讨自噬在激素性股骨头缺血坏死中的作用。方法成年日本大耳白兔40只,随机分... 目的观察家兔激素性股骨头缺血坏死模型中自噬相关基因Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1light chain 3,MAP1-LC3)的表达情况,探讨自噬在激素性股骨头缺血坏死中的作用。方法成年日本大耳白兔40只,随机分为实验组(n=28)与对照组(n=12)。实验组肌肉注射甲基强的松龙7.5mg/kg,2次/周,共8周;对照组肌肉注射生理盐水2mL/只,2次/周,共8周。8周后处死家兔,取双侧股骨头。左侧股骨头制成普通病理切片后进行HE染色,用免疫组化法检测Beclin 1和MAP1-LC3的表达;右侧股骨头迅速置于液氮中保存,蛋白提取后,采用Western blot方法检测股骨头中Beclin 1及MAP1-LC3蛋白的表达。结果 HE染色显示家兔激素性股骨头坏死模型制造成功。免疫组化:实验组Beclin 1和MAP1-LC3的阳性率分别为96.43%、92.86%,明显高于对照组16.67%、8.33%,差异具有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测:实验组与对照组比较Beclin 1及MAP1-LC3蛋白表达增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肾上腺皮质激素造成的家兔早期股骨头缺血坏死模型中,自噬基因Beclin 1和MAP1-LC3的表达增高,表明自噬参与了激素性股骨头缺血坏死的发病。 展开更多
关键词 糖皮质激素 骨坏死 自噬 BECLIN 1 微管相关蛋白1轻链3
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自噬相关基因LC3和Beclin1在大鼠急性坏死性胰腺炎中的表达和意义 被引量：6
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作者 杨淑丽 陈卫昌 +1 位作者 孙楹 陈冯梅 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2011年第12期1231-1236,共6页
目的:研究大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺组织LC3、Beclin1的表达,并探讨其在ANP中的作用及意义.方法:36只SD大鼠随机分为假手术(SO)组和ANP组,ANP组采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导制作大鼠ANP模型,SO组开腹后翻动胰腺后关腹,各组... 目的:研究大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺组织LC3、Beclin1的表达,并探讨其在ANP中的作用及意义.方法:36只SD大鼠随机分为假手术(SO)组和ANP组,ANP组采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导制作大鼠ANP模型,SO组开腹后翻动胰腺后关腹,各组再分3、6和12h3个不同时间点.观察各组大鼠血清炎症因子及胰腺的病理改变,运用免疫组织化学法检测各组大鼠在不同时间点胰腺组织LC3和Beclin1的变化.结果:ANP组血浆淀粉酶(U/L)、TNF-α(μg/L)较SO组明显增加(血浆淀粉酶:3h:4936±1207vs1447±355;6h:5464±768vs1513±333;12h:6139±710vs1539±231;TNF-α:3h:111.24±21.86vs56.14±7.69;6h:107.55±33.05vs57.13±11.30;12h:108.24±24.83vs58.60±9.54,均P<0.05),且ANP组大鼠胰腺病理改变随着时间延长加重.正常大鼠胰腺腺泡细胞LC3、Beclin1低表达,大鼠ANP3h后胰腺细胞LC3、Beclin1表达开始增多,在6和12h呈强表达.结论:大鼠ANP后胰腺组织Beclin1和LC3增多,表明ANP后胰腺自噬活性增强,其表达与炎症变化程度相关,细胞自噬增强是可能对损伤的反应. 展开更多
关键词 自噬 急性坏死性胰腺炎 微管相关蛋白1轻链3 BECLIN1
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LC-3、Beclin-1和P62表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性
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作者 万琼 薛春丽 +1 位作者 李秀明 侯智亮 《实用癌症杂志》 2024年第3期378-381,共4页
目的 探讨微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、自噬调控因子Beclin-1和P62表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的相关性。方法 回顾性分析93例NSCLC患者资料,比较癌组织和癌旁组织LC-3、Beclin-1和P62表达情况;比较LC-3、Beclin-1和P62不同... 目的 探讨微管相关蛋白1轻链3(LC-3)、自噬调控因子Beclin-1和P62表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的相关性。方法 回顾性分析93例NSCLC患者资料,比较癌组织和癌旁组织LC-3、Beclin-1和P62表达情况;比较LC-3、Beclin-1和P62不同表达情况患者临床病理特征差异。结果 癌组织LC-3、Beclin-1阳性率低于癌旁组织,P62表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05)。LC-3、Beclin-1和P62不同表达情况患者肺癌病理类型、TNM分期以及分化程度差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LC-3、Beclin-1和P62表达情况与NSCLC患者病理类型、TNM分期以及分化程度有密切联系。LC-3、Beclin-1表达降低及P62表达升高与肺癌的发生发展相关,可作为NSCLC患者早期评估的辅助指标。 展开更多
关键词 微管相关蛋白1轻链3 自噬调控因子Beclin-1 自噬调控因子P62 非小细胞肺癌 病理特征
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自噬及其在胃癌中的研究进展 被引量：6
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作者 余招焱 王润华 张忠民 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2015年第1期121-125,共5页
目的总结自噬及其在胃癌中的研究进展。方法检索并筛选近年来国内外发表的有关自噬与胃癌关系的文献并分别对自噬的特点、分子标志、调控因素及其在胃癌中的意义和作用进行综述。结果自噬既可促进细胞的死亡,也可延长肿瘤形成中癌细胞... 目的总结自噬及其在胃癌中的研究进展。方法检索并筛选近年来国内外发表的有关自噬与胃癌关系的文献并分别对自噬的特点、分子标志、调控因素及其在胃癌中的意义和作用进行综述。结果自噬既可促进细胞的死亡,也可延长肿瘤形成中癌细胞的存活。调控自噬的药物(包括中药)在肿瘤治疗中具有广阔的应用前景,但基于自噬调控的抗肿瘤治疗效果仍取决于细胞内自噬的实际水平。结论目前对胃癌自噬现象的了解仍然知之甚少,阐明自噬现象的分子机理并通过合理调控自噬来杀伤癌细胞仍然需要更为深入的实验研究。 展开更多
关键词 胃癌 自噬 自噬相关基因 微管相关蛋白轻链3 BECLIN 1基因
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Klotho及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3在胃癌中的表达及意义 被引量：6
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作者 王晨宇 刘超 郑蔚 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期321-323,共3页
目的探讨Klotho蛋白及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达及意义。方法免疫组织化学超敏二步法分别检测68例胃癌组织及40例配对癌旁组织中Klotho及LC3蛋白的表达，分析两者表达与各临床病理因素的关系以及两者表... 目的探讨Klotho蛋白及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）在胃癌组织中的表达及意义。方法免疫组织化学超敏二步法分别检测68例胃癌组织及40例配对癌旁组织中Klotho及LC3蛋白的表达，分析两者表达与各临床病理因素的关系以及两者表达的相关性。结果Klotho在胃癌组织中的阳性表达率为41．2％（28／68）低于癌旁组织的67．5％（26／40，P〈0．05），且与肿瘤大小、分化程度及TNM分期相关（P〈0．05）。LC3在胃癌组织中的阳性表达率为45．6％（31／68）低于癌旁组织的70．0％（28／40，P〈0．05），且与肿瘤大小、分化程度及TNM分期相关（P〈0．05）。Klotho和LC3在胃癌组织中的表达呈正相关（P〈0．05）。结论胃癌组织自噬活性降低，Klotho及LC3表达下调可能参与了胃癌的发生发展过程。 展开更多
关键词 KLOTHO 微管相关蛋白1轻链3 胃癌 自噬
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LC3和beclinl在口腔黏膜癌变过程中不同时期的变化及其意义 被引量：6
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作者 韩冰 李娜 +3 位作者 祁红延 周海静 张金婷 冯正虎 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期42-47,共6页
目的检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-assaiated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬基因beclin1在口腔黏膜癌变过程不同时期的特点及表达趋势,探讨其在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)发生进展中的意义。方法... 目的检测微管相关蛋白1轻链3(microtubule-assaiated protein 1 light chain 3,LC3)和自噬基因beclin1在口腔黏膜癌变过程不同时期的特点及表达趋势,探讨其在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)发生进展中的意义。方法采用免疫组织化学方法对19例口腔正常黏膜、9例单纯增生颊黏膜、14例异常增生颊黏膜、15例原位癌阶段颊黏膜及38例OSCC标本进行LC3及beclin1检测。结果 OSCC组LC3和beclin1阳性率显著低于正常口腔黏膜组、单纯增生组、异常增生组及原位癌组;原位癌组LC3和beclin1阳性率较上皮异常增生组虽有升高但无明显差异;LC3和beclin1在OSCC中的表达无相关性。结论 LC3和beclin1在口腔黏膜癌变的过程中表达下调,在原位癌阶段自噬活性有所增加,癌变完成后自噬能力显著降低;自噬活性的改变可能与口腔鳞癌的发生、发展相关。 展开更多
关键词 口腔鳞癌 癌前病变 自噬 LC3 BECLIN1
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冠心病患者不同支架置入术后对支架内内膜增生及外周血Beclin-1,LC3-Ⅱ水平的影响 被引量：1
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作者 马军武 司丽萍 《中国循证心血管医学杂志》 2023年第6期730-733,共4页
目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CHD)患者不同支架置入术后对支架内内膜增生及外周血血清自噬相关蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)水平的影响。方法选取2018年1月至2021年1月于新乡市第二人民医院介入放射科... 目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病,CHD)患者不同支架置入术后对支架内内膜增生及外周血血清自噬相关蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)水平的影响。方法选取2018年1月至2021年1月于新乡市第二人民医院介入放射科收治的符合纳入标准的114例CHD患者作为研究对象,按照植入支架类型不同分为聚合物可降解药物涂层支架(BP-DES)组(n=51)和永久性聚合物药物涂层支架(PP-DES)组(n=63)。记录两组患者手术过程中靶血管病变相关情况及置入支架长度等,术后12个月采用血管内超声技术比较两组内膜增生情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中Beclin-1,LC3-Ⅱ水平,术后随访1年,记录期间两组发生的主要不良心血管事件(MACE)以及支架内血栓等终点事件发生情况。结果BP-DES组靶血管病变总数大于PP-DES组,置入支架长度、病变长度小于PP-DES组(P<0.05);经超声造影检测,BP-DES组内膜中度增生率为56.86%,高于PP-DES组的38.10%,BP-DES组内膜重度增生率为19.61%,低于PP-DES组的39.68%(P<0.05);BP-DES组外周血Beclin-1,LC3-Ⅱ水平均低于PP-DES组(P<0.05);BP-DES组支架内血栓发生率为1.96%,低于PP-DES组的12.70%(P<0.05)。两组靶血管病变位置、程度、长度、内膜轻度增生率以及总MACE发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论与PP-DES相比,冠心病患者置入BP-DES可有效改善支架内内膜增生情况,抑制其过度增生,降低Beclin-1,LC3-Ⅱ水平以抑制心肌细胞自噬,同时还可减少支架内血栓的发生。 展开更多
关键词 冠心病 聚合物可降解药物涂层支架 永久性聚合物药物涂层支架 自噬相关蛋白 微管相关蛋白1轻链3-ⅱ
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胃癌组织中miR-184、Beclin1、LC3B的表达及临床意义 被引量：5
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作者 刘丽霞 张路 杨丽 《山东医药》 CAS 2021年第13期29-32,共4页
目的探讨胃癌组织中miR-184、自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达及临床意义。方法收集103例胃癌患者的临床及病理资料,通过荧光实时定量PCR技术测量miR-184、Beclin1及LC3B的表达情况,并分析其临床特征。采用Pearso... 目的探讨胃癌组织中miR-184、自噬相关基因Beclin1、微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的表达及临床意义。方法收集103例胃癌患者的临床及病理资料,通过荧光实时定量PCR技术测量miR-184、Beclin1及LC3B的表达情况,并分析其临床特征。采用Pearson相关分析法检验miR-184、Beclin1及LC3B的相关性。结果胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达量较癌旁组织下降(P均<0.05)。存在淋巴结转移及TNM分期Ⅲ-Ⅳ期患者胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达降低(P均<0.05)。miR-184和Beclin1、miR-184和LC3B、Beclin1和LC3B的表达量均呈显著正相关(r分别为0.845、0.787、0.793,P均<0.05)。结论胃癌组织中miR-184、Beclin1及LC3B的表达均降低,且与淋巴结转移和TNM分期密切相关,能够在一定程度上评估患者病情。 展开更多
关键词 胃肿瘤 miR-184 自噬相关基因Beclin1 微管相关蛋白1轻链3B
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