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槲皮素对人骨肉瘤MG-63细胞周期及自噬流的影响 被引量:15
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作者 符芳姿 许振胜 《广州中医药大学学报》 CAS 2019年第6期885-888,共4页
【目的】观察槲皮素对人骨肉瘤MG-63细胞体外生长周期及自噬的影响。【方法】以不同质量浓度的槲皮素作用于体外培养的MG-63细胞,流式细胞术检测MG-63细胞生长周期,荧光显微镜观察单体红色荧光蛋白(mRFP)—绿色荧光蛋白(GFP)—微管相关... 【目的】观察槲皮素对人骨肉瘤MG-63细胞体外生长周期及自噬的影响。【方法】以不同质量浓度的槲皮素作用于体外培养的MG-63细胞,流式细胞术检测MG-63细胞生长周期,荧光显微镜观察单体红色荧光蛋白(mRFP)—绿色荧光蛋白(GFP)—微管相关蛋白轻链3(LC3)双标腺病毒转染MG-63细胞后自噬小体的形成和自噬流的变化。【结果】槲皮素显著增加处于G1期的骨肉瘤MG-63细胞数量,上调MG-63细胞自噬水平。【结论】槲皮素可抑制人骨肉瘤MG-63细胞的增殖,使其停滞在细胞周期G1期,并诱导细胞自噬。 展开更多
关键词 槲皮素 骨肉瘤 自噬 转染 细胞周期 mg-63细胞
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野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用 被引量:13
2
作者 施剑明 殷嫦嫦 +3 位作者 殷明 邬亚华 陈伟才 林思文 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2013-2017,共5页
目的探讨野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用及可能的机制。方法采用不同质量浓度野菊花总黄酮与顺铂单独及联合作用MG-63细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞生长抑制率,并计算金氏公式Q值进行协同性分... 目的探讨野菊花总黄酮联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞抑制作用及可能的机制。方法采用不同质量浓度野菊花总黄酮与顺铂单独及联合作用MG-63细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞生长抑制率,并计算金氏公式Q值进行协同性分析;流式细胞仪和RT-PCR检测凋亡率及凋亡相关基因bcl-2、caspase-3和p21的表达情况。结果野菊花总黄酮与顺铂单独及联合作用均能够抑制MG-63细胞增殖,诱导其凋亡,并下调bcl-2及上调caspase-3、p21基因的表达;Q值提示两者低质量浓度联合作用具有协同效应,而较高质量浓度联合作用则表现为叠加效应,未显示出拮抗效应。结论野菊花总黄酮在诱导MG-63细胞凋亡起重要作用,但野菊花总黄酮中的单体发挥抗肿瘤作用和协同抗肿瘤的效果有待进一步深入研究。 展开更多
关键词 野菊花总黄酮 顺铂 mg-63细胞 增殖抑制 凋亡
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槲皮素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响 被引量:12
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作者 施剑明 殷嫦嫦 +6 位作者 孙维君 杜桂花 林思文 谢荣辉 耿书国 汪建样 殷明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期1361-1366,共6页
目的研究槲皮素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度槲皮素与顺铂单独及联合作用MG-63细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并通过Chou-Talaly联合指数法... 目的研究槲皮素联合顺铂对人骨肉瘤MG-63细胞增殖及凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用不同浓度槲皮素与顺铂单独及联合作用MG-63细胞;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并通过Chou-Talaly联合指数法分析两药之间相互作用;流式细胞仪检测细胞凋亡率;RT-PCR及Western blot检测Bcl-2、caspase-3等凋亡相关分子在基因及蛋白水平的表达变化。结果槲皮素及顺铂均能抑制MG-63细胞增殖并诱导其凋亡,两药联合具有协同效应,并可下调Bcl-2及上调caspase-3基因及蛋白的表达。结论槲皮素联合顺铂能协同抑制MG-63细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调Bcl-2及上调caspase-3等凋亡相关分子的表达有关。 展开更多
关键词 槲皮素 顺铂 mg-63细胞 增殖 凋亡 机制
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冬凌草甲素对骨肉瘤细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的机制研究 被引量:8
4
作者 唐新桥 朱宝玉 王万春 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期43-47,共5页
目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞... 目的研究冬凌草甲素对人骨肉瘤细胞株MG-63细胞增殖抑制和凋亡诱导效应的分子机制。方法以流式细胞仪检测细胞周期变化;Western印迹检测CyclinD1、P21以及凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2和Bax表达的变化;TRAP-PCR-ELISA方法检测MG-63细胞端粒酶活性的变化;Z-IETD-fmk阻断试验检测Caspase-8阻断前后,冬凌草甲素对MG-63细胞凋亡影响的变化。结果冬凌草甲素增加G0/G1期MG-63细胞百分率,降低S期MG-63细胞百分率;浓度依赖性抑制MG-63细胞的CyclinD1、Survivin和Bcl-2蛋白表达,上调P21和Bax蛋白表达;浓度依赖性抑制MG-63细胞端粒酶的活性;Z-IETD-fmk阻断Caspase-8活性后,能部分逆转和减弱冬凌草甲素对MG-63细胞的凋亡诱导作用。结论冬凌草甲素通过影响细胞周期调节蛋白、阻断细胞周期G1/S期"稽查点";抑制Survivin、Bcl-2,上调Bax;抑制端粒酶活性以及活化Caspase-8等途径抑制MG-63细胞增殖及诱导MG-63细胞凋亡。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 mg-63细胞 增殖 凋亡 分子机制
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骨灵片通过p38 MAPK信号通路影响成骨细胞功能的机制 被引量:8
5
作者 黄少慧 张娟 +1 位作者 李娟 蔡红兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期1148-1150,1153,共4页
目的探讨骨灵片促进成骨细胞增殖、矿化以及基因表达的细胞信号通路。方法用含有骨灵片的大鼠血清、p38 MAPK抑制剂SB203580作用人成骨细胞MG-63,测定各组成骨细胞增殖率、矿化结节数量。采用Western-blotting及RealtimeRT-PCR方法观察... 目的探讨骨灵片促进成骨细胞增殖、矿化以及基因表达的细胞信号通路。方法用含有骨灵片的大鼠血清、p38 MAPK抑制剂SB203580作用人成骨细胞MG-63,测定各组成骨细胞增殖率、矿化结节数量。采用Western-blotting及RealtimeRT-PCR方法观察各组成骨细胞护骨素(OPG)、护骨素配体(RANKL)以及巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)基因表达和磷酸化p38含量。结果经含骨灵片药液的大鼠血清作用后,MG-63细胞的增殖和矿化结节形成数明显增加,OPG基因表达增加,RANKL基因表达减少,OPG/RANKL比值显著增加,M-CSF有下降趋势,但没有显著性差异,同时刺激p38磷酸化。结论骨灵片可能通过p38 MAPK通路促进成骨细胞增殖以及矿化结节形成,调控OPG、RANKL以及M-CSF的表达,达到治疗骨质疏松症的作用。 展开更多
关键词 人成骨细胞 p38 MAPK 护骨素 护骨素配体 噬细胞集落刺激因子
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桔梗皂苷D对MG-63细胞的凋亡作用 被引量:6
6
作者 张程 邢德刚 《广东药科大学学报》 CAS 2017年第1期123-126,共4页
目的研究桔梗皂苷D对MG-63细胞的促凋亡作用。方法 MTT法测定桔梗皂苷D对MG-63细胞增殖抑制情况及其IC_(50)值,利用流式细胞仪检测加入桔梗皂苷D作用24 h后的MG-63细胞的凋亡情况、凋亡类型。使用二氯荧光黄二乙酸酯(DCFH-DA)检测加入... 目的研究桔梗皂苷D对MG-63细胞的促凋亡作用。方法 MTT法测定桔梗皂苷D对MG-63细胞增殖抑制情况及其IC_(50)值,利用流式细胞仪检测加入桔梗皂苷D作用24 h后的MG-63细胞的凋亡情况、凋亡类型。使用二氯荧光黄二乙酸酯(DCFH-DA)检测加入桔梗皂苷D后肿瘤细胞内活性氧水平,加入JC-1线粒体染料试剂盒检测被桔梗皂苷D孵育24 h后肿瘤细胞线粒体膜电位的变化。结果 MTT数据表明桔梗皂苷D对细胞的生长半数抑制浓度IC_(50)为11.80μmol/L。MG-63细胞被桔梗皂苷D作用24 h后,通过JC-1和DCFH-DA染色的实验结果表明桔梗皂苷D作用后的MG-63细胞内的活性氧水平上升,细胞线粒体膜电位下降。结论桔梗皂苷D可能通过增加细胞内活性氧水平破坏线粒体从而导致细胞发生凋亡。 展开更多
关键词 桔梗皂苷D mg-63细胞 细胞凋亡
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PEEK-HA生物复合材料对MG-63细胞的作用 被引量:5
7
作者 倪卓 王应 +4 位作者 王双 刘士德 张建华 刘学 任英华 《深圳大学学报(理工版)》 EI CAS 北大核心 2014年第3期258-265,共8页
体外培养成骨MG-63细胞,通过倒置荧光显微镜和四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法,研究聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石(polyetheretherketone-sulfnated polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEKSPEEK-HA)复合材料对细胞形态和增殖的... 体外培养成骨MG-63细胞,通过倒置荧光显微镜和四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法,研究聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石(polyetheretherketone-sulfnated polyetheretherketone-hydroxyapatite,PEEKSPEEK-HA)复合材料对细胞形态和增殖的影响.在PEEK-SPEEK-HA复合材料质量浓度为4 mg/mL时,复合材料对MG-63细胞增殖作用最强,随浸提液质量浓度增大,材料对细胞增殖作用下降.材料质量浓度为4 mg/mL时,HA质量分数为20%的PEEK-SPEEK-HA复合材料对细胞的增殖作用较强.PEEK-HA和PEEK-SPEEK-HA复合材料的毒性评级为1级,无细胞毒性.SPEEK和HA能够改善复合材料对成骨MG-63细胞的黏附作用,HA含量对细胞黏附作用的影响更显著.扫描电镜结果表明MG-63细胞在PEEK-SPEEKHA材料上生长形态为三角形或长梭形,有伪足,伸展状态良好,细胞可以在材料缝隙处生长,表明成骨细胞能够在该材料表面黏附、伸展和生长.将SPEEK引入PEEK-HA复合材料能抑制细胞凋亡. 展开更多
关键词 生物材料学 复合材料 骨替代材料 聚醚醚酮-磺化聚醚醚酮-羟基磷灰石复合材料 成骨mg-63细胞 黏附率 细胞增殖 细胞凋亡
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不同浓度白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡迁移、基质金属蛋白酶及Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达的影响 被引量:5
8
作者 高伟 钟仕洋 +2 位作者 马云 李梦轩 杨诚 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第2期201-204,247,共5页
目的:研究不同浓度白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡迁移、基质金属蛋白酶(MMP)及Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达的影响。方法:取对数生长期的骨肉瘤MG-63细胞,传代培养成细胞株后以随机法分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。其中对... 目的:研究不同浓度白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡迁移、基质金属蛋白酶(MMP)及Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达的影响。方法:取对数生长期的骨肉瘤MG-63细胞,传代培养成细胞株后以随机法分成对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。其中对照组加入到0.1%浓度的DMSO完全培养基中培养,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别加入到浓度为5、10、20μmol/L的白花丹素的有关培养基中培养。培养24 h后,采用Transwell法检测MG-63细胞迁移率、Hoechst33342染色法检测MG-63细胞凋亡率、Western blot法检测四组MG-63细胞的MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax、Ezrin蛋白表达水平。结果:培养24 h后,低剂量组、中剂量组、高剂量组的骨肉瘤细胞MG-63凋亡率及Bax蛋白表达水平均较对照组升高(P<0.05),且随白花丹素浓度的增加而升高(P<0.05);骨肉瘤细胞MG-63的细胞迁移率、MMP-2、MMP-9、Bcl-2及Ezrin蛋白表达水平较对照组降低(P<0.05),且随白花丹素浓度的增加而降低(P<0.05)。结论:白花丹素对骨肉瘤细胞MG-63凋亡的促进作用以及迁移的抑制作用明显,其作用机制可能与抑制骨肉瘤细胞MG-63中的MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Ezrin蛋白表达及促进Bax蛋白表达有关,且浓度越高,抑制或促进作用越明显。 展开更多
关键词 骨肉瘤 白花丹素 mg-63细胞 基质金属蛋白酶 凋亡 迁移
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miRNA-95在骨肉瘤组织中的表达及其对MG-63细胞增殖和侵袭的影响 被引量:5
9
作者 董志伟 柳丽娟 +1 位作者 耿的玉 刘秋霞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期920-926,共7页
目的:研究miRNA-95在骨肉瘤组织和细胞株中的表达情况及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、细胞周期和侵袭能力的影响。方法:以实时荧光定量PCR检测15例骨肉瘤组织及其癌旁组织(标本收集自2015年1月至2018年1月青岛市海慈医疗集团外科手... 目的:研究miRNA-95在骨肉瘤组织和细胞株中的表达情况及其对骨肉瘤MG-63细胞增殖、凋亡、细胞周期和侵袭能力的影响。方法:以实时荧光定量PCR检测15例骨肉瘤组织及其癌旁组织(标本收集自2015年1月至2018年1月青岛市海慈医疗集团外科手术的病例)和骨肉瘤细胞株(MG-63、U2OS、143B和HOS)与正常人成骨细胞株hFOB1.19中的miRNA-95表达。利用Lipofectamine 2000将miRNA-95 mimics和miRNA-95 inhibitors分别转染至人骨肉瘤MG-63细胞株中,并设置miRNANC对照组,CCK-8法检测各组细胞增殖活力变化,流式细胞术检测各组细胞周期和凋亡变化,Transwell方法检测各组细胞侵袭能力变化,双荧光素酶活性实验检测并验证miRNA-95在MG-63细胞中的靶向基因。结果:miRNA-95在人骨肉瘤组织中的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),在MG-63、U2OS、143B和HOS细胞中的表达水平显著高于hFOB1.19,且在MG-63细胞中表达水平最高(P<0.01)。与miRNA-NC对照组相比,miRNA-95 mimics组中MG-63细胞的增殖活力显著上升、细胞凋亡率显著下降而侵袭率显著上升(均P<0.01)、而miRNA-95 inhibitors组中MG-63细胞增殖活力显著下降、细胞周期被阻滞、细胞凋亡率显著上升而侵袭率显著下降(均P<0.01);miRNA-95在骨肉瘤MG-63细胞中靶向上皮膜蛋白-1(epithelial membrane protein-1,EMP-1)基因发挥作用。结论:miRNA-95在人骨肉瘤组织和细胞中均呈高表达,抑制骨肉瘤MG-63细胞中miRNA-95表达能够促进细胞凋亡进而抑制细胞增殖、细胞周期及侵袭能力,该作用可能通过靶向EMP-1基因而发挥。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mg-63细胞 miRNA-95 上皮膜蛋白-1 细胞增殖 细胞周期 凋亡 侵袭
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miR-124靶向调节STAT3基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响 被引量:5
10
作者 李毅 赵维彪 王岩峰 《解剖科学进展》 2018年第3期318-321,共4页
目的探讨miR-124及STAT3在骨肉瘤组织中的表达,以及miR-124对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测67例患者骨肉瘤组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,免疫组织化学方法检测STAT3蛋白的表达。使用脂质体将miR-... 目的探讨miR-124及STAT3在骨肉瘤组织中的表达,以及miR-124对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测67例患者骨肉瘤组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,免疫组织化学方法检测STAT3蛋白的表达。使用脂质体将miR-124抑制剂及miR-124模拟物转染至骨肉瘤MG-63细胞株,以无关序列作为阴性对照。Western blot方法检测转染后STAT3蛋白的表达变化,采用MTT方法与Transwell实验检测转染后MG-63细胞的增殖侵袭能力变化。结果 miR-124在骨肉瘤组织中的表达明显低于癌旁组织(P<0.01);STAT3蛋白在骨肉瘤组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.01);转染miR-124抑制剂的MG-63细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著升高,细胞内STAT3蛋白表达亦明显升高;转染miR-124模拟物后则得到相反的结果(P<0.01)。结论 miR-124抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和侵袭可能与下调STAT3的表达相关。 展开更多
关键词 miR-124 骨肉瘤 mg-63细胞 STAT3 增殖 侵袭
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槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63中凋亡相关因子caspase-3的表达影响 被引量:5
11
作者 黄祚瑶 刘晓宁 +1 位作者 李建 何春水 《华西医学》 CAS 2008年第5期1089-1090,共2页
目的:探讨黄酮类化合物槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63的凋亡相关因子caspase-3的作用。方法:应用RT-PCR方法和Western-blot分别检测caspase-3的mRNA和蛋白水平的表达。结果:槲皮素能明显促进MG-63细胞caspase-3的表达,存在剂量依赖与时... 目的:探讨黄酮类化合物槲皮素对人骨肉瘤细胞系MG-63的凋亡相关因子caspase-3的作用。方法:应用RT-PCR方法和Western-blot分别检测caspase-3的mRNA和蛋白水平的表达。结果:槲皮素能明显促进MG-63细胞caspase-3的表达,存在剂量依赖与时间依赖性。结论:槲皮素能通过caspase-3途径诱导MG-63细胞的凋亡。 展开更多
关键词 槲皮素 骨肿瘤 mg-63细胞 凋亡 CASPASE-3
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PIN1反义基因转染抑制人骨肉瘤细胞的增殖 被引量:2
12
作者 熊文化 陈安民 +2 位作者 郭风劲 张衣北 黄涛 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期32-36,共5页
目的观察以pIRES2-EGFP质粒为载体的PIN1反义基因转染对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用。方法不同量(0、20、50、100、200、250μL)的PIN1反义基因以pIRES2-EGFP质粒为载体包装后转染人骨肉瘤MG-63细胞,收集转染前后的培养细胞和上清液,MT... 目的观察以pIRES2-EGFP质粒为载体的PIN1反义基因转染对人骨肉瘤细胞增殖的抑制作用。方法不同量(0、20、50、100、200、250μL)的PIN1反义基因以pIRES2-EGFP质粒为载体包装后转染人骨肉瘤MG-63细胞,收集转染前后的培养细胞和上清液,MTT法观测转染前后细胞生长曲线;流式细胞仪观测细胞生长周期变化和细胞凋亡情况;Western blot法检测PIN1蛋白的表达变化;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PIN1mRNA表达变化。结果MTT法和流式细胞仪检测显示反义PIN1基因转染后,MG-63细胞生长受到抑制,且其凋亡被促进;Western blot结果表明转染反义PIN1基因的量越多,其PIN1蛋白表达量越低,测得空白对照组及不同量转染组的光密度比值分别为0.854±0.136、0.866±0.138、0.732±0.154、0.611±0.121、0.547±0.109、0.398±0.113、0.320±0.151,差异有显著性(P<0.05);RT-PCR检测其光密度比值分别为0.983±0.125、0.988±0.127、0.915±0.157、0.786±0.125、0.608±0.124、0.433±0.130、0.410±0.158,差异有显著性(P<0.05)。结论反义PIN1基因可封闭PIN1mRNA,使MG-63细胞表达的PIN1蛋白减少,从而抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。 展开更多
关键词 骨肉瘤 异构酶类 基因 PIN1 转染 寡核苷酸类 反义 mg-63细胞
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LncRNA MEG3在骨肉瘤组织中的表达及对MG-63细胞增殖、凋亡与侵袭的影响 被引量:4
13
作者 姚金池 杨春露 +2 位作者 车敏 韩忠孝 索骥 《解剖科学进展》 2020年第2期150-153,共4页
目的探讨长链非编码RNA母系印记基因3(lncRNA MEG3)在骨肉瘤组织中的表达及对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡与侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测5例骨肉瘤组织及癌旁对应正常组织中lncRNA MEG3的表达水平。构建pcDNA3.1-MEG... 目的探讨长链非编码RNA母系印记基因3(lncRNA MEG3)在骨肉瘤组织中的表达及对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、凋亡与侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测5例骨肉瘤组织及癌旁对应正常组织中lncRNA MEG3的表达水平。构建pcDNA3.1-MEG3重组质粒,MEG3过表达后,MTT方法检测MG63细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测MG63细胞的凋亡率;Transwell实验检测MG63细胞侵袭能力的变化;Western blot方法检测MG63细胞增殖细胞核抗原(PCNA)与Racl蛋白的表达变化。结果lncRNA MEG3在骨肉瘤组织中的表达显著低于癌旁正常组织(P<0.01)。lncRNA MEG3过表达后,MG63细胞的增殖与侵袭能力显著降低,凋亡率显著上升,PCNA与Racl蛋白的表达显著降低(P<0.01)。结论lncRNA MEG3在骨肉瘤组织中低表达,过表达lncRNA MEG3能够抑制人骨肉瘤细胞MG-63的增殖与侵袭,并促进凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA母系印记基因3 骨肉瘤 mg-63细胞 增殖 凋亡 侵袭
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姜黄素的抗骨肉瘤活性及其相关作用机理 被引量:4
14
作者 钱定军 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期136-138,共3页
目的探讨姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞的抗肿瘤活性及其相关作用机制。方法 MTT实验检测姜黄素对人成骨肉瘤细胞MG-63的细胞毒作用;Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;提取细胞总蛋白Western blot实验检测细胞PARP蛋白的... 目的探讨姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞的抗肿瘤活性及其相关作用机制。方法 MTT实验检测姜黄素对人成骨肉瘤细胞MG-63的细胞毒作用;Annexin V/PI双染,流式细胞仪检测细胞凋亡的发生;提取细胞总蛋白Western blot实验检测细胞PARP蛋白的裂解带和survivin蛋白的表达变化。结果姜黄素对人成骨肉瘤MG-63细胞具有高效的细胞毒作用,其IC50值为(11.55±0.63)μmol/L;10,20和40μmol/L姜黄素处理MG-63细胞48 h后,细胞的凋亡率从(2.73±0.56)%依次升高到(18.1±1.22)%,(36.41±4.52)%和(57.23±5.86)%;Westernblot结果显示姜黄素诱发了MG-63细胞内PARP蛋白的裂解,同时姜黄素也可剂量依赖性的降低细胞内survivin蛋白的表达。结论姜黄素显示了高效的致骨肉瘤细胞凋亡活性,下调survivin蛋白可能是其诱导MG-63细胞凋亡的主要机制。 展开更多
关键词 姜黄素 骨肉瘤mg-63细胞 细胞凋亡 SURVIVIN蛋白
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂联合吉西他滨对骨肉瘤MG-63细胞抑制作用的研究 被引量:4
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作者 胡旭昌 王栓科 +7 位作者 康学文 汪静 安丽萍 夏亚一 狄天宁 马靖琳 王翠芳 胡杰亮 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期520-525,共6页
目的:研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂MGCD0103和吉西他滨(gemcitabine)单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外传代培养人骨肉瘤MG-63细胞,将不同浓度的MG... 目的:研究组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylase,HDAC)抑制剂MGCD0103和吉西他滨(gemcitabine)单药或联合作用对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63生长的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:体外传代培养人骨肉瘤MG-63细胞,将不同浓度的MGCD0103(1、10和100μmol/L)和吉西他滨(0.1、0.2和0.4mg/L)分别单独或联合作用于MG-63细胞;采用MTT法检测2种药物单药或联合作用对MG-63细胞的生长抑制作用,并观察其有效的作用浓度;在荧光显微镜下观察细胞的凋亡情况;实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)检测MG-63细胞中转移相关基因1(metastasis-associated gene1,MTA1)mRNA表达的变化,蛋白质印迹法检测p21、Bax及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达水平的变化。结果:MGCD0103和吉西他滨单药或联合作用都能明显抑制MG-63细胞的生长(P<0.05),并呈剂量依赖性,MGCD0103和吉西他滨具有协同作用。荧光显微镜下观察结果显示,MGCD0103和吉西他滨单药或联合作用于MG-63细胞后,大量具有凋亡形态特征的细胞出现,凋亡细胞数明显增多;RFQ-PCR和蛋白质印迹法检测结果分别显示,MTA1 mRNA及VEGF蛋白的表达量明显下调,而p21和Bax蛋白的表达量明显上调。结论:MGCD0103和吉西他滨通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体外抗骨肉瘤作用,其作用机制涉及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103和吉西他滨具有协同作用,有望成为治疗骨肉瘤治疗的一种新手段。 展开更多
关键词 骨肉瘤 组蛋白脱乙酰化酶类 吉西他滨 抗肿瘤联合化疗方案 mg-63细胞
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成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体的表达 被引量:2
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作者 梁敏 廖二元 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2004年第4期412-414,408,共4页
目的 观察成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体(progesterone receptor,PR)亚型表达的情况。方法用改良胶原酶消化法从正常成人松质骨中分离成骨细胞,观察细胞形态,钙钴法行碱性磷酸酶染色,Van Gieson法行Ⅰ型胶原染色,茜素红行矿化结... 目的 观察成人成骨细胞和MG-63细胞株孕激素受体(progesterone receptor,PR)亚型表达的情况。方法用改良胶原酶消化法从正常成人松质骨中分离成骨细胞,观察细胞形态,钙钴法行碱性磷酸酶染色,Van Gieson法行Ⅰ型胶原染色,茜素红行矿化结节染色;半定量RT-PCR检测骨钙素和PR亚型mRNA表达;Western blot测定PR蛋白质表达。结果所分离培养的细胞具有成骨细胞的形态特征,保持了其在体内的功能;人成骨细胞和MG-63细胞株均表达PRA、PRB mRNA和蛋白质。结论人成骨细胞和MG-63细胞株可能受孕激素的影响。 展开更多
关键词 人成骨细胞 mg-63细胞 孕激素受体 亚型表达 PR 细胞株 观察 正常成人 白质 mRNA表达
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苦参碱对骨肉瘤细胞凋亡的影响
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作者 王利宁 赵新芝 +4 位作者 宋军帅 王淑燕 孙广玉 李克明 杨真真 《中国药业》 CAS 2024年第7期42-47,共6页
目的探讨苦参碱在MG-63细胞中促凋亡的作用及机制。方法实验分为0浓度组和10%苦参碱组,分别灌胃生理盐水和10%苦参碱制备大鼠含药血清,干预人成骨肉瘤细胞株MG-63。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,荧光定量聚合酶链式... 目的探讨苦参碱在MG-63细胞中促凋亡的作用及机制。方法实验分为0浓度组和10%苦参碱组,分别灌胃生理盐水和10%苦参碱制备大鼠含药血清,干预人成骨肉瘤细胞株MG-63。采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测c-myc、胱天蛋白酶9(caspase-9)基因的表达,采用免疫印迹(Western blot)法检测细胞外信号调节激酶5(ERK5)信号通路中相关蛋白Nur77、丝裂原激活蛋白激酶5(MEK5)及凋亡相关蛋白c-myc,caspase-9的表达水平。结果与0浓度组相比,10%苦参碱组能显著抑制MG-63细胞增殖,并促进其凋亡;荧光定量PCR实验结果表明,10%苦参碱组能抑制c-myc转录,并促进caspase-9转录;Western blot实验结果表明,在ERK5信号通路中,10%苦参碱组Nur77、MEK5及c-myc蛋白表达下调,而caspase-9蛋白表达上调。结论苦参碱可能通过干扰ERK5信号通路,调控c-myc,caspase-9等蛋白的表达,从而抑制MG-63细胞增殖,并促进其凋亡。 展开更多
关键词 苦参碱 骨肉瘤 mg-63细胞 细胞外信号调节激酶5信号通路 凋亡
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阻断Notch信号通路抑制骨肉瘤MG-63细胞增殖的实验研究 被引量:4
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作者 游浩 张觅 +3 位作者 刘洋 李明辉 陈方舟 郑先念 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期541-545,共5页
目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度... 目的探讨γ-分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch信号通路对骨肉瘤MG-63细胞系增殖和凋亡的影响及其机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞株;MTT法检测不同浓度DAPT(1.0、5.0、10.0μmol/L)对骨肉瘤MG-63细胞增殖的抑制作用;透射电镜下观察不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞形态的影响;流式细胞术结合AnnexinⅤ-FITC/PI双染分析不同浓度DAPT对骨肉瘤MG-63细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测骨肉瘤MG-63细胞Notch1、HES1基因表达。结果不同浓度的DAPT作用于骨肉瘤MG-63细胞后,细胞增殖水平明显下降(P<0.05),1.0μmol/L DAPT即抑制细胞生长,随着DAPT浓度增加抑制效果明显增强,呈显著的浓度依赖关系,且随着DAPT作用时间延长,抑制效果也明显增强。细胞凋亡结果分析表明,DAPT能浓度依赖性地诱导骨肉瘤MG-63细胞发生凋亡。RT-PCR显示随着DAPT量的增加,Notch l、HES l mRNA的表达逐渐下降(均P<0.05)。结论 DAPT对骨肉瘤MG-63细胞抑制增殖和诱导凋亡的作用可能与下调MG-63细胞中Notch l、HES 1mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 NOTCH信号通路 骨肉瘤 mg-63细胞系 增殖抑制
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凤尾草总黄酮抑制骨肉瘤MG-63细胞迁移及其机制的初步研究 被引量:4
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作者 孔维鑫 杨永明 +2 位作者 邹君 曲杰 田跃 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2013年第1期42-44,共3页
目的:观察凤尾草总黄酮对人骨肉瘤MG-63细胞体外迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法:利用乙醇萃取法制备凤尾草总黄酮,通过划痕实验、Transwell实验观察不同浓度凤尾草总黄酮对同样条件培养下骨肉瘤MG-63细胞迁移能力的影响,并采用W... 目的:观察凤尾草总黄酮对人骨肉瘤MG-63细胞体外迁移能力的影响,并探讨其作用机制。方法:利用乙醇萃取法制备凤尾草总黄酮,通过划痕实验、Transwell实验观察不同浓度凤尾草总黄酮对同样条件培养下骨肉瘤MG-63细胞迁移能力的影响,并采用Western blot方法检测不同浓度凤尾草总黄酮对MG-63细胞内白介素6(IL-6)蛋白表达水平的影响。结果:同未加药物对照组相比,经高浓度凤尾草总黄酮(5与10 g.L-1)处理后,MG-63细胞的划痕愈合能力明显减弱,穿膜细胞的数量显著减少;同时,细胞内IL-6蛋白的表达水平明显降低,并与凤尾草总黄酮的浓度呈负相关性。结论:凤尾草总黄酮抑制了骨肉瘤MG-63细胞的迁移能力,其作用与抑制MG-63细胞内的IL-6蛋白表达水平有关。 展开更多
关键词 凤尾草总黄酮 mg-63细胞 IL-6 迁移
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miR-124靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控 被引量:4
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作者 戴颖 王强 《解剖科学进展》 2017年第2期167-170,共4页
目的探讨miR-124是否能够通过靶向抑制Sp1基因调控人骨肉瘤MG-63细胞的增殖。方法利用荧光素酶报告基因实验验证Sp1基因是否为miR-124的靶基因,应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-124 mimics或inhibitor转染至MG-63细胞,利用rea... 目的探讨miR-124是否能够通过靶向抑制Sp1基因调控人骨肉瘤MG-63细胞的增殖。方法利用荧光素酶报告基因实验验证Sp1基因是否为miR-124的靶基因,应用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-124 mimics或inhibitor转染至MG-63细胞,利用real-time PCR和Western blotting分析转染后MG-63细胞Sp1 mRNA和蛋白表达的变化,通过MTT法分析转染后MG-63细胞增殖水平变化。结果荧光素酶报告基因实验证实Sp1基因为miR-124的靶基因。与对照组相比,转染miR-124 mimics后,MG-63细胞Sp1 mRNA与蛋白的表达均显著降低,增殖能力明显下降(P<0.01);与对照组相比,转染miR-124 inhibitor后,MG-63细胞Sp1mRNA与蛋白的表达均显著升高,增殖能力明显升高(P<0.01)。结论 miR-124抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖可能与靶向Sp1基因相关。 展开更多
关键词 miR-124 骨肉瘤 SP1 增殖 mg-63细胞
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