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纳米荧光探针用于核酸分子的检测及成像研究 被引量:19
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作者 杨立敏 刘波 +1 位作者 李娜 唐波 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1047-1060,共14页
核酸,包括脱氧核糖核酸和核糖核酸,在生物的生长、发育、突变、炎症、癌症等正常或异常的生命活动中发挥着重要的作用,它们的异常表达与多种疾病的发生、发展也密切相关.因此,发展准确、有效的方法实现核酸分子的检测,对深入探究核酸的... 核酸,包括脱氧核糖核酸和核糖核酸,在生物的生长、发育、突变、炎症、癌症等正常或异常的生命活动中发挥着重要的作用,它们的异常表达与多种疾病的发生、发展也密切相关.因此,发展准确、有效的方法实现核酸分子的检测,对深入探究核酸的功能调控以及相关疾病的早期检测与治疗都具有重要的意义.荧光检测法与荧光成像技术具有灵敏度高、时空分辨率高等优点,为实时、准确的检测核酸分子提供了有力的工具.本文着重综述了近年来发展的纳米荧光探针用于疾病相关核酸分子的检测与细胞和活体成像工作的研究进展,最后提出了进一步构建新型纳米荧光探针用于核酸检测面临的挑战、未来发展方向与展望. 展开更多
关键词 纳米荧光探针 核酸分子 检测 活细胞 活体 荧光成像
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SD-PMA-ddPCR检测食品中沙门氏菌的研究 被引量:15
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作者 王静 张慧敏 +3 位作者 魏玮 贾俊涛 李春喜 秦燕 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期67-71,共5页
研究将叠氮溴化丙锭(PMA)与微滴数字PCR(dd PCR)技术相结合,建立一种沙门氏菌活菌的检测方法。结果表明,PMA不能完全有效抑制108CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增,0.1%脱氧胆酸钠(SD)和40.0μg/m L PMA协同作用,可以有效抑制108CFU/m ... 研究将叠氮溴化丙锭(PMA)与微滴数字PCR(dd PCR)技术相结合,建立一种沙门氏菌活菌的检测方法。结果表明,PMA不能完全有效抑制108CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增,0.1%脱氧胆酸钠(SD)和40.0μg/m L PMA协同作用,可以有效抑制108CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增,不抑制沙门氏菌活菌DNA扩增的PMA最高浓度是40.0μg/m L。经过SD和PMA对样品预处理,在不同死、活菌比例下,PMA-dd PCR可以定量检测活菌,避免了死菌DNA的干扰。本方法的检出限为8.0 copy/20μL。利用PMA-dd PCR检测人工污染鸡肉样品,最低可检出102CFU/m L的沙门氏菌。实验结果证明PMA-dd PCR方法的特异性、精确度、稳定性良好。 展开更多
关键词 叠氮溴化丙锭 脱氧胆酸钠 数字PCR 活菌
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黄秋葵提取物对2型糖尿病小鼠的降糖作用及与基因TNF-α和IDE的相关性研究 被引量:9
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作者 李莹 李婧毓 +6 位作者 高铭彤 曾露露 徐蕾 孟令全 刘文丛 丁传波 郑毅男 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2017年第15期3131-3137,共7页
目的研究黄秋葵提取物对高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠的降糖作用及与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和胰岛素降解酶(IDE)的相关性。方法采用高脂饲料喂养,并ip STZ制备小鼠2型糖尿病模型,随机分为对照组,模型组,二甲双胍组,... 目的研究黄秋葵提取物对高脂饮食和链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠的降糖作用及与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和胰岛素降解酶(IDE)的相关性。方法采用高脂饲料喂养,并ip STZ制备小鼠2型糖尿病模型,随机分为对照组,模型组,二甲双胍组,黄秋葵醇提物(HQK)高、中、低剂量组,黄秋葵水提物(WQK)高、中、低剂量组,均ig给药。给药40 d后进行空腹血糖、口服葡萄糖糖耐量(OGTT)测定、血清和肝组织中相关生化指标检测,并对肝组织进行HE染色。通过荧光定量PCR探讨黄秋葵提取物降糖活性与TNF-α、IDE基因表达的相关性。结果 HQK高剂量组和WQK中剂量组显著降低小鼠空腹血糖,并改善口服葡萄糖耐受量,有效抑制2型糖尿病小鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)和肝组织中AST、ALT,并抑制肝脏中TNF-α、IDE的m RNA表达量,明显提升血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。肝组织HE病理观察显示HQK高剂量组和WQK中剂量组对肝细胞有一定的保护作用。结论 HQK和WQK通过降低2型糖尿病模型小鼠的TC、TG、LDL-C,同时升高HDL-C来改善小鼠的肥胖、高血脂症状,对2型糖尿病引起的肝损伤有一定的保护作用,并且降血糖与肝脏保护作用与TNF-α和IDE的基因表达量有一定的相关性。 展开更多
关键词 黄秋葵 2型糖尿病 肝细胞 口服葡萄糖糖耐量 肿瘤坏死因子-Α IDE 血脂
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几种鸡胚原代细胞的制备方法 被引量:4
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作者 缪从容 吴贤福 《中国兽药杂志》 北大核心 1997年第1期14-16,共3页
在病毒分离、繁殖,中和试验及药物毒理试验中,细胞培养是经常被选用的技术。本文描述通过选择不同日龄的鸡胚,分别对皮肤上皮细胞、肝细胞和肾细胞进行了组织培养,确定了生长所需的培养液要求。认为12日龄鸡胚适于皮肤上皮细胞的... 在病毒分离、繁殖,中和试验及药物毒理试验中,细胞培养是经常被选用的技术。本文描述通过选择不同日龄的鸡胚,分别对皮肤上皮细胞、肝细胞和肾细胞进行了组织培养,确定了生长所需的培养液要求。认为12日龄鸡胚适于皮肤上皮细胞的制备,17~20日龄鸡胚适合于肝细胞、肾细胞的制备,并确定了细胞生长的pH条件。 展开更多
关键词 鸡胚原代细胞 上皮细胞 肝细胞 组织培养 培养基
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有机分子荧光探针成像检测线粒体内ROS的研究进展 被引量:6
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作者 肖海滨 李平 +2 位作者 张雯 张卫 唐波 《中国科学:化学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期955-972,共18页
线粒体是细胞的"能量工厂",它利用氧气进行氧化磷酸化产生三磷酸腺苷(ATP),为细胞及生命体提供能量.同时,伴随着呼吸链中电子的泄漏,多种活性氧物种(ROS)在线粒体内快速产生.线粒体ROS在维持氧化还原平衡、参与调控细胞的增... 线粒体是细胞的"能量工厂",它利用氧气进行氧化磷酸化产生三磷酸腺苷(ATP),为细胞及生命体提供能量.同时,伴随着呼吸链中电子的泄漏,多种活性氧物种(ROS)在线粒体内快速产生.线粒体ROS在维持氧化还原平衡、参与调控细胞的增殖、分化、凋亡等行为方面发挥重要作用.当ROS水平超过机体抗氧化防御能力时,会导致疾病的发生.因此,发展准确检测线粒体ROS的方法,对深入探究ROS的细胞功能调控及相关疾病的发生发展意义重大.由于ROS存在浓度低、寿命短、反应活性高等特点,对其进行精准检测是化学、生物学及医学领域的一大挑战.荧光成像技术具有时空分辨率高、生物相容性好、灵敏度高等显著优势,成为实时检测细胞及活体内ROS的有力工具.近年来,相继发展了诸多荧光探针,实现了线粒体ROS的成像分析.本文着重总结与评述了近年来发展靶向线粒体、荧光可视化多种ROS有机分子探针工作的研究进展,并在构建新型线粒体荧光探针、进一步利用荧光成像方法深入剖析线粒体ROS的细胞学功能等方面进行了探讨与展望. 展开更多
关键词 线粒体 有机分子荧光探针 活性氧物种 活细胞 荧光成像
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克雷伯氏菌活细胞和死细胞对水中Pb(Ⅱ)的去除性能 被引量:4
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作者 刘树丽 段正洋 +3 位作者 徐龙乾 徐晓军 宋淑敏 张梦娇 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期2278-2288,共11页
为了探究克雷伯氏菌的活细胞(LC)和经过高温处理后的死细胞(DC)作为吸附剂对水中Pb(Ⅱ)的去除性能以及两种吸附剂吸附能力的差异,系统研究了溶液pH值、吸附剂用量、反应时间和Pb(Ⅱ)初始浓度对两种吸附剂吸附能力的影响。利用扫描电镜(S... 为了探究克雷伯氏菌的活细胞(LC)和经过高温处理后的死细胞(DC)作为吸附剂对水中Pb(Ⅱ)的去除性能以及两种吸附剂吸附能力的差异,系统研究了溶液pH值、吸附剂用量、反应时间和Pb(Ⅱ)初始浓度对两种吸附剂吸附能力的影响。利用扫描电镜(SEM)、比表面积测定、Zeta电位分析、傅里叶变换红外光谱(FTIR)和X射线光电子能谱(XPS)等技术表征分析了LC和DC对Pb(Ⅱ)的吸附差异。结果显示,DC和LC对Pb(Ⅱ)的吸附动力学和吸附等温线分别能够较好地使用准二级动力学模型和Langmuir模型拟合。在温度为30℃的条件下,Langmuir模型预测DC和LC对Pb(Ⅱ)的最大吸附量分别为134.92 mg·g^(-1)和116.18mg·g^(-1)。热力学参数研究表明DC对Pb(Ⅱ)的吸附为自发的放热过程,然而LC对Pb(Ⅱ)的吸附为自发的吸热过程。研究表明:DC比LC具有更大的比表面积和带有更多的负电荷,可能是由于高温处理破坏了细胞壁的完整性,使细胞壁的渗透性增强且DC表面暴露出更多氨基基团,从而使得在各条件下DC对Pb(Ⅱ)的吸附量明显高于LC。 展开更多
关键词 克雷伯氏菌 活细胞 死细胞 吸附 Pb(Ⅱ)
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PMA结合ddPCR检测食品中沙门氏菌 被引量:4
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作者 王静 秦燕 +3 位作者 张慧敏 刘玉敏 魏玮 贾俊涛 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1059-1063,共5页
建立一种快速、灵敏的微滴式数字PCR方法,用于检测食品中沙门氏菌活菌。利用叠氮溴化丙锭(PMA)对死菌预处理,PMA可以选择性穿过死菌细胞膜,在光照条件下与死菌DNA发生共价交联反应,进而阻止其DNA进行PCR扩增,提取细菌基因组DNA进行微滴... 建立一种快速、灵敏的微滴式数字PCR方法,用于检测食品中沙门氏菌活菌。利用叠氮溴化丙锭(PMA)对死菌预处理,PMA可以选择性穿过死菌细胞膜,在光照条件下与死菌DNA发生共价交联反应,进而阻止其DNA进行PCR扩增,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。结果表明,强烈光照15.0 min,可以使PMA与死菌DNA共价交联,同时钝化游离的PMA;PMA终质量浓度为40.0μg/m L可以有效抑制105CFU/m L的沙门氏菌死菌DNA的PCR扩增;不抑制活菌DNA扩增的PMA最高浓度是50.0μg/m L。利用PMA处理死活菌混合液时,PMA-dd PCR可以在死菌存在的条件下,定量检测活菌,降低了"假阳性"结果的出现。灵敏度检测结果显示:PMA-dd PCR灵敏度是0.4 copy/μL。利用PMA-dd PCR检测人工污染的鳕鱼样品,最低可检出102CFU/m L的沙门氏菌,精密度和稳定性良好。 展开更多
关键词 叠氮溴化丙锭 微滴式数字PCR 沙门氏菌 活菌
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半导体量子点对原代培养大鼠牙乳头细胞生物相容性的研究 被引量:3
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作者 孙德平 杨凯 陈睿 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第12期1237-1241,共5页
目的:研究半导体量子点(QDs)对原代培养的大鼠牙乳头细胞(Rat dental papillae cells,RDPCs)的生物相容性。方法:①选择刚出生3天的新生SD大鼠,取出磨牙牙胚,分离牙乳头,用酶消化法培养SD大鼠牙乳头细胞,用波形丝蛋白和细胞角蛋白免疫... 目的:研究半导体量子点(QDs)对原代培养的大鼠牙乳头细胞(Rat dental papillae cells,RDPCs)的生物相容性。方法:①选择刚出生3天的新生SD大鼠,取出磨牙牙胚,分离牙乳头,用酶消化法培养SD大鼠牙乳头细胞,用波形丝蛋白和细胞角蛋白免疫化学染色鉴定细胞来源,观察细胞的生长规律;②把605QDs、525QDs及两种量子点等浓度的混合物按3种不同浓度与RDPCs共同培养,观察QDs对RDPCs生长和形态的影响;③用MTT法检测不同浓度的605QDs、525QDs及两种量子点等浓度的混合物对RDPCs的毒性作用结果:①:体外培养的RDPCs生长良好,波形丝蛋白染色阳性而细胞角蛋白染色阴性。②不同浓度的605QDs、525QDs及两种量子点的等浓度混合物对体外培养的RDPCs没有毒性作用,对其生长和形态也没有影响。结论:605QDs、525QDs及两种量子点等浓度的混合物在一定的浓度范围内时RPDCs具有良好的生物相容性,为605QDs、525QDs在活体生理条件下用于活细胞内的多通道信号研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 半导体量子点(半导体纳米微晶体) 大鼠牙乳头细胞 生物相容性 口腔 活细胞
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PMA与ddPCR结合检测单核细胞增生李斯特氏菌 被引量:3
9
作者 王静 崔凤杰 +3 位作者 秦燕 贾俊涛 魏玮 张慧敏 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2016年第21期114-118,共5页
将叠氮溴化丙锭(PMA)与微滴数字PCR(dd PCR)技术相结合,检测热灭活背景下单核细胞增生李斯特氏菌活菌。结果表明,PMA终浓度为5.0μg/m L、曝光时间为15 min时,可以有效抑制10^5 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增,... 将叠氮溴化丙锭(PMA)与微滴数字PCR(dd PCR)技术相结合,检测热灭活背景下单核细胞增生李斯特氏菌活菌。结果表明,PMA终浓度为5.0μg/m L、曝光时间为15 min时,可以有效抑制10^5 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增,不抑制单核细胞增生李斯特氏菌活菌DNA扩增的PMA最高浓度是10.0μg/m L。利用PMA处理死活菌混合液时,PMA-dd PCR可以在死菌存在的条件下,定量检测活菌,降低了"假阳性"结果的出现。检测结果显示:PMA-dd PCR灵敏度是2.0 copy/20μL。利用PMA-dd PCR检测人工污染的鳕鱼样品,最低可检出10~2 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌。结果证明PMA-dd PCR方法的精确度、稳定性良好。 展开更多
关键词 叠氮溴化丙锭 微滴式数字PCR 单核细胞增生李斯特氏菌 活菌
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高钙乳酸菌饮料的研制
10
作者 沈天慧 《乳业科学与技术》 2000年第4期23-25,共3页
本文主要研究探讨了以酸奶为基料的高钙乳酸菌饮料的配方设计、生产工艺。
关键词 高钙乳酸菌饮料 活菌饮料 配方设计 生产工艺
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基于产住元胞的乡村碳图谱建构与优化策略解析——以浙江地区发达乡村为例 被引量:8
11
作者 邬轶群 朱晓青 +1 位作者 王竹 陈继锟 《西部人居环境学刊》 2018年第6期116-120,共5页
随着乡村的社会经济增长与就地城镇化转型,低碳建设已成为城乡人居环境可持续发展的重要保障。本文以乡村的产住元胞为小微单元因子,建构碳排放量化评估模型,并借助GIS模拟与解析乡村碳空间图谱的范式特征。以浙江地区的发达乡村为实证... 随着乡村的社会经济增长与就地城镇化转型,低碳建设已成为城乡人居环境可持续发展的重要保障。本文以乡村的产住元胞为小微单元因子,建构碳排放量化评估模型,并借助GIS模拟与解析乡村碳空间图谱的范式特征。以浙江地区的发达乡村为实证样本,结果表明:不同产住类型主导的乡村碳空间图谱差异明显,具有分散式点状、梯度式层推和核域式集聚分布等特征。进而,探讨现阶段乡村增汇减排面临的困境,并提出乡村碳排放的优化路径与策略机制,以期为低碳乡村的营建规划提供参考与经验。 展开更多
关键词 乡村 产住元胞 碳图谱 优化策略
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血链菌生物膜形成中死菌/活菌的粘附观察研究 被引量:6
12
作者 马瑞 朱敏 刘正 《现代口腔医学杂志》 CAS CSCD 2002年第1期1-3,共3页
目的 观察血链菌生物膜形成初期的死菌、活菌粘附情况 ,并对其粘附能力进行比较。方法 血链菌混悬于人工唾液 ,其中活菌百分比为 70 %,在模仿体内环境的人工口腔内 ,血链菌悬液以 0 .8ml/min均速滴至唾液覆盖的玻片以形成生物膜 ,应... 目的 观察血链菌生物膜形成初期的死菌、活菌粘附情况 ,并对其粘附能力进行比较。方法 血链菌混悬于人工唾液 ,其中活菌百分比为 70 %,在模仿体内环境的人工口腔内 ,血链菌悬液以 0 .8ml/min均速滴至唾液覆盖的玻片以形成生物膜 ,应用荧光染色技术观察血链菌生物膜形成中死 /活细菌的初期粘附 ,计算活菌百分比 ;并通过疏水实验、红细胞凝集实验对死 /活菌的粘附特性进行比较。结果 血链菌生物膜形成的 30min ,6 0min ,12 0min ,2 40min ,其中活菌百分比分别为 30 %,5 0 %,6 0 %,70 %;在同一时间血链菌悬液的活菌百分比几乎是恒定的 ,两者相比 :在 30min ,6 0min具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;在 12 0min ,2 40min无显著性差异 (P>0 .0 5 )。疏水实验、红细胞凝集实验中 ,死菌的疏水性能、红血球凝集能力均强于活菌。结论 血链菌生物膜形成的初期 ,死菌可能比活菌更易粘附于固体表面。 展开更多
关键词 死菌 活菌 生物膜 疏水性 红血球凝集
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市售面包酵母冷冻过程发酵性能研究 被引量:4
13
作者 黄晶晶 吉孟彩 梁建芬 《食品科技》 CAS 北大核心 2011年第6期175-179,184,共6页
为了研究市售的面包生产用酵母产品的品质,收集了6种活性干酵母和1种压榨酵母共7种市售酵母产品,在评价其初始活力后进行了预发酵、冷冻、冻藏等处理,并对比研究了处理前后的发酵力、起酵时间、酵母存活率及酵母形态等特征。结果表明不... 为了研究市售的面包生产用酵母产品的品质,收集了6种活性干酵母和1种压榨酵母共7种市售酵母产品,在评价其初始活力后进行了预发酵、冷冻、冻藏等处理,并对比研究了处理前后的发酵力、起酵时间、酵母存活率及酵母形态等特征。结果表明不同品牌、状态的产品在发酵力、起酵时间、酵母形态学特征和低温敏感性等方面均有较大差异,不同酵母产品在冷冻和冻藏过程中的酵母活力受产品本身及加工过程影响较大。研究为相关面包及面制品等发酵食品生产企业应根据自身需要选择和正确使用合适的酵母产品提供了依据。 展开更多
关键词 酵母 发酵力 起酵时间 活菌率 形态 冷冻 冻藏
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HBV X基因在HL-7702肝细胞中的表达促进细胞凋亡并上调HSP70基因的表达
14
作者 陈红英 陈治新 王小众 《福建医科大学学报》 2013年第5期265-270,共6页
目的研究乙型肝炎病毒X(HBV X)基因在肝细胞HL-7702中的稳定表达对其细胞凋亡和表达HSP70的影响,并探讨二者之间的关联。方法将已构建好的HBV X基因真核表达载体pcDNA3-X转染人肝细胞HL-7702,48h后经G418筛选出稳定表达HBV X基因的肝细... 目的研究乙型肝炎病毒X(HBV X)基因在肝细胞HL-7702中的稳定表达对其细胞凋亡和表达HSP70的影响,并探讨二者之间的关联。方法将已构建好的HBV X基因真核表达载体pcDNA3-X转染人肝细胞HL-7702,48h后经G418筛选出稳定表达HBV X基因的肝细胞株(L02/HBx)。RT-PCR、蛋白印迹实验鉴定L02/HBx细胞HBV X基因的稳定表达。以转染空质粒肝细胞(L02/pcDNA3)为对照,运用流式细胞分析、TUNEL分析和DNA ladder观察检测L02/HBx细胞凋亡情况。基因芯片技术筛查L02/HBx和L02/pcDNA3两组肝细胞差异表达的凋亡相关基因,并运用蛋白印迹实验技术对差异表达的HSP70基因进行蛋白水平验证。结果 RT-PCR和蛋白印迹实验显示,L02/HBx细胞中有HBV X基因mRNA和蛋白的表达。流式细胞和TUNEL分析显示,L02/HBx细胞组的凋亡率显著高于对照组L02/pcDNA3,DNA ladder可观测到L02/HBx的凋亡现象,而对照组未观测到。两次基因芯片结果筛查出L02/HBx细胞组与对照组差异表达基因HSP70,蛋白印迹实验进一步证实HSP70在L02/HBx细胞中的蛋白表达显著高于未表达X基因的肝细胞组。结论 HBV X基因在肝细胞HL-7702中的表达促进了肝细胞的凋亡,上调了肝细胞中HSP70基因的表达,从而在乙型肝炎病毒致肝细胞癌变的过程中起重要作用。 展开更多
关键词 肝细胞 肝炎病毒 乙型 基因 病毒 基因表达 细胞凋亡 细胞 培养的 肝细胞 HSC70热 休克蛋白质类
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活细胞单分子实时视见研究 被引量:5
15
作者 陈宜张 《生命科学》 CSCD 2003年第2期79-83,共5页
我们对细胞生物学与分子生物学中有关分子事件和相互作用的认识,大部分都是集团平均水平研究的结果,并且基于所有的分子在给定时间内以完全相同的方式运动这样一种不真实的假设。现在,激光技术和全内反射显微镜的应用,以及绿色荧光蛋白(... 我们对细胞生物学与分子生物学中有关分子事件和相互作用的认识,大部分都是集团平均水平研究的结果,并且基于所有的分子在给定时间内以完全相同的方式运动这样一种不真实的假设。现在,激光技术和全内反射显微镜的应用,以及绿色荧光蛋白(green fluorescent proteins,GFPs)等新的分子荧光探针的出现,使得显示活细胞单个生物分子的运动行为和轨迹成为可能。单分子水平的研究将会加深人们对分子和细胞生物学的基本概念的认识。 展开更多
关键词 活细胞 单分子 实时 视见
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大黄酸对TNF-α和TG诱导L-02肝细胞凋亡的影响 被引量:4
16
作者 万晓强 李孝生 +1 位作者 曾庆贵 刘梁英 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2006年第4期383-386,共4页
目的观察大黄酸对TNF-α和TG诱导的肝细胞凋亡的影响,并探讨其抑制肝细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人L-02肝细胞,用TNF-α(500U/ml)+TG(20ug/ml)诱导肝细胞凋亡模型;采用MTT法测定RH、TNF-α和TG对肝细胞的增殖的影响;流式细胞仪技... 目的观察大黄酸对TNF-α和TG诱导的肝细胞凋亡的影响,并探讨其抑制肝细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人L-02肝细胞,用TNF-α(500U/ml)+TG(20ug/ml)诱导肝细胞凋亡模型;采用MTT法测定RH、TNF-α和TG对肝细胞的增殖的影响;流式细胞仪技术法测定肝细胞凋亡率;免疫组织化学法测定肝细胞Bcl_2、Bax基因表达水平。结果一定浓度的大黄酸对于TNF-α和TG引起的L-02肝细胞的增殖抑制有部分阻断作用。大黄酸还可通过上调Bcl_2,下调Bax表达,从而抑制细胞凋亡的发生。结论大黄酸具有抑制肝细胞凋亡作用,机理可能与增强Bcl_2表达及抑制Bax表达有关。 展开更多
关键词 大黄酸 肝细胞 TNF-Α TG 凋亡
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优势菌种活细胞对天然水体中Pb^(2+)和Cd^(2+)的吸附 被引量:4
17
作者 郭平 李军 +3 位作者 曾阿妍 马小凡 郭鹏 李静 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 2004年第3期354-357,共4页
通过对天然水环境———伊通河中优势菌种活细胞吸附Pb2 + 、Cd2 + 的研究发现 :pH对Pb2 + 、Cd2 + 吸附的影响是不同的 ,对Pb2 + 的吸附量在 pH =5 .0~ 7.0时变化不大 ,对Cd2 + 的吸附量在 pH =6 .0~ 8.0时变化不大 ;温度对活细胞吸... 通过对天然水环境———伊通河中优势菌种活细胞吸附Pb2 + 、Cd2 + 的研究发现 :pH对Pb2 + 、Cd2 + 吸附的影响是不同的 ,对Pb2 + 的吸附量在 pH =5 .0~ 7.0时变化不大 ,对Cd2 + 的吸附量在 pH =6 .0~ 8.0时变化不大 ;温度对活细胞吸附Pb2 + 、Cd2 + 影响明显不同 ;活细胞对Pb2 + 、Cd2 + 的吸附量随着细菌密度的增加而增大 ,随着渗透压的增大而降低 .图 5表 1参 展开更多
关键词 天然水 优势菌种 活细胞 PB^2+ Cd^2+’
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CRISPR-Cas9基因编辑技术对细胞内源蛋白进行荧光标记的实验操作 被引量:3
18
作者 吴仲胜 高誉 +2 位作者 杜勇涛 党颂 何康敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期165-175,共11页
CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式... CRISPR-Cas9是目前广泛应用的基因编辑技术,可对目的基因进行高效精准编辑,快速实现目的基因的敲除或敲入。Cas9蛋白在sgRNA引导下对靶序列进行剪切并造成DNA双链断裂,在与剪切位点两端同源的DNA模板序列存在时,可通过同源重组修复方式引入外源序列,实现荧光蛋白或其他标签在基因组上的精准敲入,进而实现对内源蛋白进行荧光标签的融合标记。通过基因编辑技术对内源目的蛋白进行标记,可避免由于过表达造成蛋白质定位、动力学或功能等的潜在影响,可显著提升细胞成像实验的稳定性和可重复性。本文重点介绍了利用CRISPR-Cas9基因编辑系统对目的蛋白进行荧光蛋白或自标记蛋白标签标记的方法与操作流程,为构建内源蛋白荧光标记的哺乳动物细胞系提供参考。 展开更多
关键词 CRISPR-Cas9基因编辑 活细胞 内源蛋白 荧光蛋白 自标记蛋白标签
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激光扫描共聚焦显微镜术中活细胞标本的制备 被引量:1
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作者 林珏龙 陈耀文 霍霞 《激光生物学报》 CAS CSCD 2000年第4期307-309,共3页
激光扫描共聚焦显微镜是以单个的、活性的、贴壁的细胞标本为主要的研究对象。为了获得适合共聚焦显微镜分析的组织细胞标本 ,本文讨论了标本制备存在的一些问题并提出了改进的方法。结果显示 :组织细胞外环境中盐溶液、p H值、温度、... 激光扫描共聚焦显微镜是以单个的、活性的、贴壁的细胞标本为主要的研究对象。为了获得适合共聚焦显微镜分析的组织细胞标本 ,本文讨论了标本制备存在的一些问题并提出了改进的方法。结果显示 :组织细胞外环境中盐溶液、p H值、温度、氧气等均为影响细胞活性的重要因素 ;而且细胞的贴壁效果也是观测分析的关键条件之一。本文对激光扫描共聚焦显微镜术中的组织细胞学方法进行了探讨 。 展开更多
关键词 共聚焦显微镜 活细胞
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荧光相关光谱(FCS)在生物活细胞中的应用 被引量:2
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作者 游俊 《湖北大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2005年第1期53-56,共4页
除了传统的分子浓度和扩散时间的测量荧光相关光谱(FCS),还可测量分子动力学或化学反应的动力参数.但是由于分子相互作用网络的复杂性,FCS在生物活细胞中的应用还有许多问题和困难需要解决.探讨了FCS在生物活体中分子相互作用网络、细... 除了传统的分子浓度和扩散时间的测量荧光相关光谱(FCS),还可测量分子动力学或化学反应的动力参数.但是由于分子相互作用网络的复杂性,FCS在生物活细胞中的应用还有许多问题和困难需要解决.探讨了FCS在生物活体中分子相互作用网络、细胞膜、膜表面受体、细胞内结构分析以及胞内动力学研究等方面的应用. 展开更多
关键词 荧光相关光谱(FCS) 活细胞 问题 应用
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