大蒜茎尖玻璃化法超低温保存技术研究 被引量：15

1

作者 王艳军 李锡香 +2 位作者 向长萍 沈镝 宋江萍 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期507-509,共3页

用山东‘苍山大蒜’进行了茎尖玻璃化法超低温保存技术的研究。5～8mm大蒜茎尖在MS+0.7mol/L蔗糖的固体培养基上预培养7d,切取3.0～3.5mm的茎尖,在20℃下经60%PVS2处理60min,再于0℃下用PVS2处理5～60min后,换适量新鲜PVS2,浸入液氮。保... 用山东‘苍山大蒜’进行了茎尖玻璃化法超低温保存技术的研究。5～8mm大蒜茎尖在MS+0.7mol/L蔗糖的固体培养基上预培养7d,切取3.0～3.5mm的茎尖,在20℃下经60%PVS2处理60min,再于0℃下用PVS2处理5～60min后,换适量新鲜PVS2,浸入液氮。保存2d或1个月后取出,在37℃水浴中解冻2min,用MS+1.2mol/L蔗糖液体培养基洗涤2次,每次10min,经过恢复培养,茎尖成活率最高可达到100%。 展开更多

关键词 大蒜 茎尖培养 液氮 玻璃化法 超低温保存

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一种简单快速植物组织冰冻切片方法 被引量：20

2

作者 宁代锋 尹增芳 +1 位作者 张菁 孙海燕 《热带亚热带植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期386-389,共4页

比较不同冷冻方法对植物细胞超微结构的影响,结果表明:直接包埋法处理的植物细胞超微结构保存较好,而液氮冷冻处理的植物细胞内膜系统损伤严重。建立了一种直接包埋冷冻和适当回温相结合的方法,不仅可以制作出植物细胞基本结构保存完整... 比较不同冷冻方法对植物细胞超微结构的影响,结果表明:直接包埋法处理的植物细胞超微结构保存较好,而液氮冷冻处理的植物细胞内膜系统损伤严重。建立了一种直接包埋冷冻和适当回温相结合的方法,不仅可以制作出植物细胞基本结构保存完整的组织切片,而且避免了使用冰冻保护剂的弊端。其操作程序是:样品固定→冰冻与包埋→适当回温→快速切片→展片→染色。此法制作的切片可进行不同的染色和组织细胞化学测定,具有操作简便,易于推广的特点。 展开更多

关键词 冰冻切片 直接包埋法 液氮冷冻 回温 超微结构

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超低温保存对某些作物种子生活力和活力的影响 被引量：10

3

作者 胡晋 徐 +2 位作者 陈叶平 吴殿星 陆建荣 《浙江农业大学学报》 CSCD 1994年第4期411-416,共6页

对水稻、油菜和白菜共五个品种的高、低水分种子，用铝箔复合袋和牛皮纸袋包装，分别以速冻速解和速冻缓解的方式，在液氮内（－１９６℃）保存５天或７天后，测定其发芽势、发芽率、发芽指数、电导率和活力指数，结果表明，速冻速解和... 对水稻、油菜和白菜共五个品种的高、低水分种子，用铝箔复合袋和牛皮纸袋包装，分别以速冻速解和速冻缓解的方式，在液氮内（－１９６℃）保存５天或７天后，测定其发芽势、发芽率、发芽指数、电导率和活力指数，结果表明，速冻速解和速冻缓解对水稻、油菜种子的生活力及活力无显著影响；高、低水分贮存对３种种子的贮藏效果也无显著影响，但以缓解、低水分的效果更佳，两种包装材料对油菜种子的贮存效果无显著影响，而水稻和高水分含量的白菜种子以纸袋包装的贮存效果较好． 展开更多

关键词 种子 液氮 超低温保存 活力 生活力

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微生物液氮超低温保存研究进展 被引量：13

4

作者 王华 杜立业 李华 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期1-5,共5页

菌种保存是微生物研究中的一项基础工作。在-196℃下活细胞物质代谢和生长几乎完全停止,液氮超低温保存使微生物的长期稳定保存成为可能。作者就影响乳酸菌、酵母菌、微藻、原生动物液氮超低温保存存活率的因素进行了讨论。此外,作者还... 菌种保存是微生物研究中的一项基础工作。在-196℃下活细胞物质代谢和生长几乎完全停止,液氮超低温保存使微生物的长期稳定保存成为可能。作者就影响乳酸菌、酵母菌、微藻、原生动物液氮超低温保存存活率的因素进行了讨论。此外,作者还讨论了液氮超低温保存中还存在的一些问题。 展开更多

关键词 液氮超低温保存 乳酸菌 酵母菌 微藻类 原生动物

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液氮冷冻联合中药泡洗治疗跖疣热瘀互结证多发性不适合激光及手术治疗的临床效果研究 被引量：11

5

作者 谢怡堂 《中医临床研究》 2017年第16期12-14,共3页

目的:分析液氮冷冻联合中药泡洗治疗跖疣热瘀互结证多发性不适合激光及手术治疗的临床效果。方法:将不适合激光治疗的50例多发性跖疣热瘀互结证患者按护理方法不同随机分为观察组(液氮冷冻联合祛疣汤)和对照组(单纯液氮冷冻),对比两组... 目的:分析液氮冷冻联合中药泡洗治疗跖疣热瘀互结证多发性不适合激光及手术治疗的临床效果。方法:将不适合激光治疗的50例多发性跖疣热瘀互结证患者按护理方法不同随机分为观察组(液氮冷冻联合祛疣汤)和对照组(单纯液氮冷冻),对比两组治疗总有效率、不同时间皮损评分、皮肤病患者生活质量(DLQI)。结果:观察组治疗总有效率(96%)较对照组(80%)高,第1个月、第2个月皮损评分、DLQI评分均较对照组低,P均<0.05。结论:液氮冷冻联合祛疣汤能有效缓解临床症状,提高疗效,改善患者生活质量,值得应用。 展开更多

关键词 多发性跖疣 热瘀互结证 祛疣汤 液氮冷冻

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九里香种子超低温保存研究 被引量：8

6

作者 顾雅坤 吴怡 +3 位作者 符丽 郑希龙 曾琳 魏建和 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期760-766,共7页

研究旨在探索适于九里香(Murraya exotica L.)种子的液氮超低温保存条件,为采用液氮超低温保存方法长期保存九里香种子提供依据。以九里香成熟种子为材料,采用快速干燥法获得不同含水量的种子,分别用玻璃化法、分步冷冻法和直接冷冻法... 研究旨在探索适于九里香(Murraya exotica L.)种子的液氮超低温保存条件,为采用液氮超低温保存方法长期保存九里香种子提供依据。以九里香成熟种子为材料,采用快速干燥法获得不同含水量的种子,分别用玻璃化法、分步冷冻法和直接冷冻法对其进行液氮超低温保存,结合石蜡切片法观察种子显微性状,并测定种子生理生化活性指标。结果发现,种子含水量由30%降至7%,其对照组生活力由98%缓慢降至82%;经不同冷冻方法处理后其生活力随含水量的降低呈先降后升的趋势,在含水量7%时各冷冻组生活力均升至最高,且此时冻存前后生活力最接近;分步冷冻处理后的种子生活力普遍高于玻璃化冷冻和直接冷冻处理;含水量18%~30%时种子分步冷冻处理后切面颜色较其他组偏深,含水量30%的种子分步冷冻处理后部分细胞出现空腔或较严重的质壁分离,含水量7%的种子经不同冷冻处理后其活力和结构与对照组相比基本无变化;分步冷冻处理后种子丙二醛含量、蛋白质含量、过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性下降,脱氢酶活性升高。九里香种子可用液氮超低温保存,采用含水量为7%的种子分步冷冻处理为佳。 展开更多

关键词 九里香种子 液氮超低温保存 含水量 冷冻方法 解冻方法

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液氮超低温保存对小麦种子发芽力与活力的影响 被引量：7

7

作者 王冠球 王庆 +4 位作者 张文明 姚大年 樊宏 王慧 汪帆 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第6期3196-3199,共4页

[目的]研究液氮超低温保存对小麦种子发芽力与活力的影响,为小麦种质资源超低温贮藏提供理论依据。[方法]选用收获后自然干燥的郑麦9023、皖麦48、扬麦158和安农1032（糯小麦）4个小麦品种种子,分别密封于塑料冷冻管中,放入液氮罐中保存... [目的]研究液氮超低温保存对小麦种子发芽力与活力的影响,为小麦种质资源超低温贮藏提供理论依据。[方法]选用收获后自然干燥的郑麦9023、皖麦48、扬麦158和安农1032（糯小麦）4个小麦品种种子,分别密封于塑料冷冻管中,放入液氮罐中保存7 d,取出后常温解冻24 h,采用幼苗生长测定、冷浸试验、电导率测定和模拟田间出苗率测定等方法,测定种子的各项活力指标。[结果]起始发芽率为87.7%~97.3%的小麦种子,液氮保存7 d后,其幼苗生长测定发芽率为82.0%~94.0%,冷浸试验发芽率为79.3%~98.0%,模拟田间出苗率为43.7%~58.0%。[结论]初步认为小麦种子可以进行液氮超低温保存。 展开更多

关键词 小麦种子 液氮 超低温保存 种子活力

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液氮保存对南瓜种子生理生化特性的影响 被引量：6

8

作者 蒋燕 郝文利 田野 《北方园艺》 CAS 北大核心 2009年第2期77-79,共3页

以南瓜种子Pu5004为试材,将含水量从10.39%分别降至9.16%、6.75%和3.24%,液氮(LN2)保存24 h后,运用快速和常温2种方法解冻,测定种子发芽率、活力指数、发芽指数及电导率、过氧化物酶含量等活力指标,探讨液氮保存对南瓜种子活力及生理生... 以南瓜种子Pu5004为试材,将含水量从10.39%分别降至9.16%、6.75%和3.24%,液氮(LN2)保存24 h后,运用快速和常温2种方法解冻,测定种子发芽率、活力指数、发芽指数及电导率、过氧化物酶含量等活力指标,探讨液氮保存对南瓜种子活力及生理生化特性的影响。结果表明:影响南瓜种子液氮保存的主要因素是种子含水量;随含水量降低,发芽率、发芽指数、活力指数降低;种子选择透性受到影响,细胞膜修复能力减弱,酶活性降低;解冻方式也是影响液氮保存的一个因素,快速解冻种子活力高。 展开更多

关键词 南瓜种子 液氮 含水量 快速解冻 超低温贮藏

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液氮保存同种异体血管（动脉）移植的实验研究 被引量：4

9

作者 萧明第 李晓露 +5 位作者 金树红 孙立忠 宋云虎 罗国华 孟兆茹 赵红 《中国循环杂志》 CSCD 1996年第4期239-242,共4页

目的：通过对经液氮保存的犬同种异体血管体内移植后活性、内皮细胞覆盖及通畅情况的研究，探讨该种血管作为血管材料替代物的优越性。方法：取犬新鲜动脉，经抗生素灭菌后，保存于液氮中８～２９周后，用于同种异体移植２２例，同时分... 目的：通过对经液氮保存的犬同种异体血管体内移植后活性、内皮细胞覆盖及通畅情况的研究，探讨该种血管作为血管材料替代物的优越性。方法：取犬新鲜动脉，经抗生素灭菌后，保存于液氮中８～２９周后，用于同种异体移植２２例，同时分别对冷冻前的血管、复苏血管、移植后的同种异体血管进行组织培养和病理分析，观察低温对血管壁结构、功能和血管活性的影响及经低温保存后供体血管在受体内１～５３周的情况。结果：低温保存的血管，其管壁基本完整。体内移植后累积通畅率为７７．３％，其中６８．２％的移植血管有内皮细胞覆盖。血管栓塞率为１３．６％。体外培养发现移植后有８６．４％的血管有活性。结论：经液氮保存的同种异体血管，保存了血管的活性，移植后内皮细胞重新覆盖，减少了血栓形成，该方法保存的血管为一种较为理想的血管材料替代物。 展开更多

关键词 液氮 冷冻 同种异体 血管移植

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液氮保存对人同种瓣组织代谢及活性的影响 被引量：2

10

作者 徐磊 赵晏 +2 位作者 张鹏 黄庆恒 任沪平 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期40-43,共4页

目的　主要观察液氮 (- 1 96℃ )保存 1～ 2 4个月不同时间瓣膜组织葡萄糖代谢率和同位素标记的胸腺嘧啶核苷掺入量的变化 ,为临床适用的冷冻保存人同种主动脉瓣的适宜保存期限提供实验依据。方法　选取健康成年男性的主动脉瓣膜 2 0个... 目的　主要观察液氮 (- 1 96℃ )保存 1～ 2 4个月不同时间瓣膜组织葡萄糖代谢率和同位素标记的胸腺嘧啶核苷掺入量的变化 ,为临床适用的冷冻保存人同种主动脉瓣的适宜保存期限提供实验依据。方法　选取健康成年男性的主动脉瓣膜 2 0个。实验依据保存时间分为 1 0组 ,Ⅰ组为新鲜对照组 ,Ⅱ～Ⅹ组分别为冷冻保存 1～ 2 4个月瓣膜。新鲜瓣膜取材后直接供实验用 ,冷冻组各瓣膜缓慢降温 (1℃·min- 1 ) ,液氮中保存 ,快速复温。瓣膜置入培养液 2 4h ,置入前后分别测定培养液中的葡萄糖含量并计算其差值。同位素测定标本加入氚标记的胸腺嘧啶核苷 ,做CBPM计数 ,计算每mg组织3H TdR掺入量。结果　新鲜瓣膜组葡萄糖消耗量和3H TdR掺入量均最高 ,冷冻保存组随液氮保存时间延长 ,组织的葡萄糖消耗量和3H TdR掺入量逐渐减低 ;冷冻保存 1～ 1 5个月瓣膜葡萄糖代谢率与新鲜瓣膜组比较无统计学意义 ,冷冻保存 1 8～ 2 4个月瓣膜葡萄糖消耗量明显减低 (P <0 .0 5 ) ,冷冻保存 1 2～ 2 4个月瓣膜3H TdR掺入量较对照组明显减低 (P <0 .0 5 )。结论　液氮保存对人同种瓣膜组织葡萄糖代谢率和胸腺嘧啶核苷掺入量有一定影响 ,其程度随保存时间增长而加重 ,液氮保存 1 5～ 2 4个月瓣膜组织代谢率明显减低 ,因此瓣膜耐久性可? 展开更多

关键词 液氮 冷冻保存 同种瓣膜 葡萄糖消耗量 ^3H-TdR掺入量

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酒酒球菌液氮超低温保存 被引量：2

11

作者 杜立业 王华 +2 位作者 金刚 李翠霞 李华 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1263-1269,共7页

【目地】为安全、长期的保藏酒酒球菌,本文研究了菌体生长时间、冷冻方法、解冻温度、菌密度以及保护剂等对酒酒球菌细胞冷冻存活率的影响,找到最优液氮超低温保存方法。【方法】采用平板计数法测定冷冻存活率。【结果】实验结果表明酒... 【目地】为安全、长期的保藏酒酒球菌,本文研究了菌体生长时间、冷冻方法、解冻温度、菌密度以及保护剂等对酒酒球菌细胞冷冻存活率的影响,找到最优液氮超低温保存方法。【方法】采用平板计数法测定冷冻存活率。【结果】实验结果表明酒酒球菌的最佳保存方法为:首先在稳定期前期离心收集菌体;其次加入保护剂(20 g/L酵母浸提物,40V/V甘油,20 g/L蔗糖,30 g/L谷氨酸钠)稀释菌体,使菌密度为109CFU/mL;然后直接投入液氮冷冻;最后在37℃温水浴中迅速解冻。保存6个月后,其中21株酒酒球菌的冷冻存活率达到99%以上。【结论】初步研究表明酵母浸提物,甘油,蔗糖,谷氨酸钠复合保护剂对酒酒球菌的保护效果较好,液氮超低温保存可用于酒酒球菌的长期保存。 展开更多

关键词 酒酒球菌 液氮超低温保存 冷冻存活率

原文传递

去甲基万古霉素菌种低温冷冻、冷干保藏条件优化及10年菌种保藏效果 被引量：2

12

作者 王耀耀 朱研研 +3 位作者 郝惠云 付美红 王亚莉 张雪霞 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1627-1634,共8页

【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础... 【目的】针对去甲基万古霉素产生菌不耐保藏的问题,改进菌种保藏方法,对超低温液氮保藏、-80°C低温冷冻保藏、冷干保藏方法跟踪考察10年保藏稳定性,评价不同保藏方法对去甲基万古霉素产生菌的保藏适用性。【方法】采用甘油作基础保护剂进行超低温液氮保藏和-80°C低温冷冻保藏,采用脱脂牛奶作基础保护剂进行冷干保藏,针对超低温液氮保藏进行降温速率考察,研究非渗透性冷冻保护剂海藻糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)等对3种保藏方法的冻存影响,对优选出的保藏方法进行10年跟踪考察。【结果】3种保藏方法冻后菌种存活率依次为:-80°C低温冷冻保藏>超低温液氮保藏>冷干保藏。液氮保藏最适降温速率为快速冷冻。优选出最佳保护剂配方:超低温液氮保藏为甘油8.0%,海藻糖3.5%;-80°C低温冷冻保藏为甘油6.0%,PVP 5.0%;冷干保藏为脱脂牛奶,6.0%海藻糖。采用优化保藏条件,液氮保藏10年存活率稳定在70.6%,菌种发酵水平为入藏水平的92.9%。【结论】在优化条件下,尤以超低温液氮保藏适合于去甲基万古霉素产生菌长期保藏。 展开更多

关键词 去甲基万古霉素产生菌 超低温液氮保藏 -80°C低温冷冻保藏 冷干保藏 海藻糖 聚乙烯吡咯烷酮

原文传递

二氧化碳激光结合液氮冷冻治疗寻常疣临床效果观察 被引量：3

13

作者 郝明明 《中外医学研究》 2020年第4期42-43,共2页

目的:探讨二氧化碳激光结合液氮冷冻治疗寻常疣的临床效果。方法:选取2018年1月-2019年6月于北京水利医院就诊的寻常疣患者80例,观察组40例采用二氧化碳治疗结合液氮治疗疣体,对照组40例采用液氮冷冻治疗疣体,对两组患者的皮损恢复情况... 目的:探讨二氧化碳激光结合液氮冷冻治疗寻常疣的临床效果。方法:选取2018年1月-2019年6月于北京水利医院就诊的寻常疣患者80例,观察组40例采用二氧化碳治疗结合液氮治疗疣体,对照组40例采用液氮冷冻治疗疣体,对两组患者的皮损恢复情况及痊愈情况进行比较。结果:观察组患者治愈后原疣体治疗部位区域变化情况优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者治愈后治疗部位处色素沉着率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者痊愈情况优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二氧化碳激光结合液氮冷冻治疗寻常疣的皮损恢复更佳,疗程更短,预后更佳。 展开更多

关键词 二氧化碳激光 液氮冷冻 寻常疣

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液氮超低温保存血清标本对生化检测结果的影响 被引量：2

14

作者 田淑彩 李思晨 +3 位作者 于冰 李静 刘庆斌 英殿双 《国外医学（医学地理分册）》 CAS 2014年第4期334-336,共3页

目的探索血清标本保存方法,研究血清样本液氮超低温保存对生化检测结果的影响。方法对液氮保存前及保存7 d、15 d的血清标本进行ALT、AST、TBIL、DBIL、IDBIL、ALP、GGT、TP、CK、TP、ALB、GLB、GLO、LDH、HBDH、BUN、GLU、CREA、UA、C... 目的探索血清标本保存方法,研究血清样本液氮超低温保存对生化检测结果的影响。方法对液氮保存前及保存7 d、15 d的血清标本进行ALT、AST、TBIL、DBIL、IDBIL、ALP、GGT、TP、CK、TP、ALB、GLB、GLO、LDH、HBDH、BUN、GLU、CREA、UA、CHOL、TG、HDL、LDL、CO_2、K、NA、CL、CA等检测并观察检测结果是否有变化。结果 CO_2结合率液氮冷冻检测结果降低且有统计学意义(t=3.81、t=4.01,P<0.01),其余各项目差异均无统计学意义。结论血清标本可在液氮超低温保存,在生化检测时应考虑对CO_2结合率结果的影响。 展开更多

关键词 血清 标本保存 液氮 超低温

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液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响

15

作者 蔡玉春 陈家旭 +3 位作者 卢艳 艾琳 吴芬 陈韶红 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期583-587,共5页

目的探索液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响。方法液氮保种1、3、6、9个月的田鼠巴贝虫标准株小鼠血室温复苏后感染正常BALB/c小鼠各3只(复苏1代,实验组),100μL/只;同时取3只新感染田鼠巴贝虫活体保藏小鼠为对照组。实验组染虫... 目的探索液氮保种对田鼠巴贝虫标准株存活力的影响。方法液氮保种1、3、6、9个月的田鼠巴贝虫标准株小鼠血室温复苏后感染正常BALB/c小鼠各3只(复苏1代,实验组),100μL/只;同时取3只新感染田鼠巴贝虫活体保藏小鼠为对照组。实验组染虫率达高峰时再接种正常BALB/c小鼠(复苏2代),观察田鼠巴贝虫的形态变化及增殖情况,并观察不同保存时间复苏1代及复苏2代的染虫率情况。结果液氮保种田鼠巴贝虫与活体保种的田鼠巴贝虫相比,形态变化不大,都会出现小滋养体、环状滋养体、裂殖体及未成熟和成熟裂殖子等多种形态。液氮复苏1代首次查见虫体及达到染虫率高峰的时间比动物保种延迟1~2d,但复苏2代即恢复一致。田鼠巴贝虫染虫全血经液氮保存1、3、6、9个月,仅达到高峰期时间延迟,其存活力未见明显下降。结论液氮保种对田鼠巴贝虫形态及存活力影响小,可成为一种较好的保存方式。 展开更多

关键词 田鼠巴贝虫 液氮保种 动物保种 存活力

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淋巴细胞免疫表型质控品的初步研究 被引量：4

16

作者 吴瑜 张春涛 +2 位作者 赵晨燕 刘春雨 王佑春 《临床输血与检验》 CAS 2008年第3期201-206,共6页

目的研究液氮冻存对外周血单个核细胞(PBMCs)CD4+T和CD8+T百分比的影响,探索冻存PBMCs作为淋巴细胞免疫表型质控品的可行性。方法收集健康成人抗凝全血,用淋巴细胞分离液分离PBMCs后液氮冻存。定期复苏PBMCs检测CD4+T和CD8+T百分比,计... 目的研究液氮冻存对外周血单个核细胞(PBMCs)CD4+T和CD8+T百分比的影响,探索冻存PBMCs作为淋巴细胞免疫表型质控品的可行性。方法收集健康成人抗凝全血,用淋巴细胞分离液分离PBMCs后液氮冻存。定期复苏PBMCs检测CD4+T和CD8+T百分比,计算细胞存活率、回收率。并分析不同厂家试剂、复苏方法、固定时间等因素对CD4+T和CD8+T百分比的影响。结果液氮冻存0～12个月、12～24个月的PBMCsCD4+T和CD8+T百分比均保持在稳定水平。冻存12个月PBMCsCD4+T和CD8+T百分比的平均变异系数(CV)分别为14.5%和9.8%,细胞存活率为85.4%～94.3%,回收率33.3%～97.8%;冻存12～24个月PBMCs的CD4+T和CD8+T百分比的平均CV值分别为7.1%和6.5%,细胞存活率为88.3%～98.5%,回收率52.3%～101%。不同复苏方法和检测试剂的结果相对稳定,CD4+T和CD8+T百分比的平均CV值分别为8.1%和6.4%。复苏后的PBMCs经多聚甲醛固定可在48h内检测。结论液氮冻存的PBMCs有望作为淋巴细胞免疫表型测定的质控品。 展开更多

关键词 液氮冻存 外周血单个核细胞 淋巴细胞免疫表型

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家蚕微孢子虫经不同冻存条件处理后对家蚕胚胎细胞的侵染性变化 被引量：2

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作者 马强 党晓群 +7 位作者 王营 陈洁 刘方燕 赵丽芳 曹琛福 吕建强 潘国庆 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1055-1061,共7页

为了解家蚕微孢子虫保存方法对其侵染性的影响及大量获得细胞感染实验材料,将采用不同冻存液及冻存法处理的家蚕微孢子虫分别接种于家蚕胚胎细胞(Bm E),调查家蚕微孢子虫对细胞的感染率及感染细胞的传代能力。与液氮直接冻存法处理和高... 为了解家蚕微孢子虫保存方法对其侵染性的影响及大量获得细胞感染实验材料,将采用不同冻存液及冻存法处理的家蚕微孢子虫分别接种于家蚕胚胎细胞(Bm E),调查家蚕微孢子虫对细胞的感染率及感染细胞的传代能力。与液氮直接冻存法处理和高温高压灭菌法处理的微孢子虫相比较,用液氮梯度冻存法处理的微孢子虫的粘附率和感染率均显著或极显著提高。采用液氮梯度冻存法以水作冻存液处理的微孢子虫对宿主细胞的感染率为64%,感染细胞能进行连续传代培养;而以含10%二甲基亚砜(DMSO)的胎牛血清作冻存液处理的微孢子虫虽然对宿主细胞的感染率达到80%,但感染细胞在培养7 d后大量破裂死亡。因此,选用以水作冻存液经液氮梯度冻存法处理的家蚕微孢子虫有利于感染Bm E细胞并在细胞内增殖,从而获得大量的细胞感染实验材料。 展开更多

关键词 家蚕微孢子虫 侵染性 液氮梯度冻存法 冻存液 家蚕胚胎细胞 增殖

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不同抗冻剂预处理对直接快速液氮冻存人羊膜活性的影响 被引量：1

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作者 齐映亮 朱富军 +7 位作者 杨文贤 詹球 吕礼芳 王磊 刘亮 辛海明 林源 童亚林 《广西医科大学学报》 CAS 2013年第1期65-68,共4页

目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据。方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/DMSO/海藻糖组)。... 目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据。方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/DMSO/海藻糖组)。冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较。结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%。A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清。细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05)。B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续。细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05)。C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整。细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05)。D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05)。保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%。结论:DMEM/甘油/DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜。 展开更多

关键词 人羊膜活性 抗冻剂 液氮 直接快速保存法

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快速蒸汽法冷冻精子行常规IVF-ET临床效果分析

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作者 张文权 黄开淑 许微 《中国优生与遗传杂志》 2013年第9期101-102,共2页

目的探讨液氮蒸汽法冷冻精子在体外受精-胚胎移植中的临床应用价值及可行性。方法以液氮蒸汽法冷冻丈夫精子行常规IVF-ET的53周期为观察组,与同期70例鲜精常规IVF-ET周期为对照组。比较两组间的正常受精率、多精率、卵裂率、优质胚胎率... 目的探讨液氮蒸汽法冷冻精子在体外受精-胚胎移植中的临床应用价值及可行性。方法以液氮蒸汽法冷冻丈夫精子行常规IVF-ET的53周期为观察组,与同期70例鲜精常规IVF-ET周期为对照组。比较两组间的正常受精率、多精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率、种植率。结果与鲜精常规IVF-ET组相比较,冻精常规IVF-E组的正常受精率、多精率、卵裂率、优质胚胎率、妊娠率、种植率等方面差异无统计学意义P>0.05。结论液氮蒸气法冷冻精子可用于IVF-ET术前精液冷冻保存。 展开更多

关键词 精子冷冻 液氮蒸汽法 体外受精-胚胎移植

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