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基底样乳腺癌中microRNA-205靶向调控KLF12及对细胞侵袭能力的影响 被引量：9
1
作者 官兵 李青 +1 位作者 李晓红 周晓军 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期739-744,共6页
目的探讨基底样乳腺癌(basal-like breast carcinoma,BLBC)特异性miRNAs和靶基因及生物学功能。方法提取细胞总RNA和蛋白,荧光素酶实验验证靶基因;采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化En Vision法分析miRNA和靶基因表达;CCK8和Transwel... 目的探讨基底样乳腺癌(basal-like breast carcinoma,BLBC)特异性miRNAs和靶基因及生物学功能。方法提取细胞总RNA和蛋白,荧光素酶实验验证靶基因;采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化En Vision法分析miRNA和靶基因表达;CCK8和Transwell实验检测细胞增殖和侵袭能力。结果荧光素酶实验示miR-205靶向调控KLF12(P=0.001 6)。qRT-PCR检测结果示MAD-MB-468细胞中miR-205表达下调(P=0.007),KLF12表达升高(P=0.039);转染miR-205 mimics过表达miR-205,miR-205表达显著升高(P=0.000),KLF12表达减少(P=0.038)。Western blot检测结果示miR-205过表达,MDAMB-468细胞KLF12表达显著升高(P=0.007 9)。CCK8实验示miR-205未参与细胞增殖。Transwell实验示过表达miR-205显著抑制细胞侵袭能力(P=0.001)。结论 miR-205是BLBC特异性的miRNA,通过负性靶向调控原癌基因KLF12和抑制侵袭具有抑癌基因的功能。miR-205和KLF12为BLBC的诊断和治疗提供潜在的分子标志物和新思路。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 microRNA-205 klf12 MDA-MB-468细胞 侵袭 增殖
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基底样乳腺癌中微小RNA-205靶向调控KLF12以及对MDA—MB-468细胞凋亡的影响 被引量：8
2
作者 官兵 李青 +1 位作者 李晓红 周晓军 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第26期2070-2075,共6页
目的 观察基底样乳腺癌（BLBC）特异性微小RNA（miRs）及其靶基因和生物学功能。方法通过荧光素酶实验验证靶基因，逆转录定量-聚合酶链反应（QRT-PCR）、Western印迹和免疫组织化学（IHC）分析miR及其靶基因表达，流式细胞检测细胞凋... 目的 观察基底样乳腺癌（BLBC）特异性微小RNA（miRs）及其靶基因和生物学功能。方法通过荧光素酶实验验证靶基因，逆转录定量-聚合酶链反应（QRT-PCR）、Western印迹和免疫组织化学（IHC）分析miR及其靶基因表达，流式细胞检测细胞凋亡。结果荧光素酶实验示miR-205靶向调控KLF12（P＝0.001 6）。QRT-PCR示，miR-205在MDA-MB-468细胞（P＝0.007）和BLBC肿瘤组织中（P＝0.007 4；n＝3）呈低表达；KLF12在MDA-MB-468细胞中为高表达（P＝0.003 9）；过表达miR-205，miR-205在MDA-MB-468表达显著升高（P＝0.000），KLF12在MDA-MB-468表达显著减少（P＝0.038）。Western印迹示BLBC肿瘤组织中KLF12蛋白表达显著升高（P＝0.008 3；n＝9）。凋亡实验示过表达miR-205，显著促进MDA-MB-468细胞凋亡（P＝0.0061）。结论MiR-205是BLBC特异性miR，通过负性靶向调控原癌基因KLF12和促进细胞凋亡具有抑癌基因的功能。MiR-205和KLF12为BLBC提供潜在的诊断分子标志物和新的治疗思路。 展开更多
关键词 基底样乳腺癌 microRNA-205 klf12 MDA-MB-468细胞 凋亡
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Krüppel样转录因子12在子宫颈腺癌中的表达及意义 被引量：4
3
作者 胡志华 廖秀娟 杨莹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第19期3237-3240,共4页
目的:探讨Krüppel样转录因子12(Krüppel-like factor12,KLF12)在子宫颈腺癌中的表达及与临床特征的关系,为寻找新的子宫颈腺癌预后标志物及治疗靶点提供依据。方法:收集增城市妇幼保健院2005-2007年92例子宫颈腺癌患者的肿瘤... 目的:探讨Krüppel样转录因子12(Krüppel-like factor12,KLF12)在子宫颈腺癌中的表达及与临床特征的关系,为寻找新的子宫颈腺癌预后标志物及治疗靶点提供依据。方法:收集增城市妇幼保健院2005-2007年92例子宫颈腺癌患者的肿瘤组织标本,采用免疫组织化学染色法分析KLF12在子宫颈腺癌中的表达。Kaplan-Meier及Log-rank法分析KLF12表达水平与患者5年生存率的关系。Mann-Whitney U检验分析KLF12表达水平高低与患者临床特征之间的关系。Cox比例风险回归模型分析KLF12表达水平及其他临床特征与患者预后的关系。结果:KLF12在大部分子宫颈腺癌患者中高表达(69/92),高表达KLF12的子宫颈腺癌患者5年生存率明显低于KLF12低表达患者(P<0.001)。KLF12高表达与子宫颈腺癌患者的临床分期(P=0.01)、淋巴结转移(P<0.001)和宫旁浸润(P<0.001)存在明显的相关性。KLF12高表达是子宫颈腺癌患者预后不良的独立预测指标(HR=4.117,P=0.001)。结论:KLF12在子宫颈腺癌中可能是一个癌基因,并有可能作为子宫颈腺癌患者预后分子标志物和新的治疗靶点。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 klf12 预后标志物 治疗靶点
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干扰山羊KLF12促进皮下脂肪细胞分化 被引量：1
4
作者 杜宇 王永 +2 位作者 孟庆勇 朱江江 林亚秋 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期184-196,共13页
【背景】脂肪组织分为皮肤下的皮下脂肪组织(subcutaneous adipose tissue,SAT)和腹部内器官周围的内脏脂肪组织(visceral adipose tissue,VAT),皮下脂肪作为影响肉类美味与否的重要因素,探究皮下脂肪沉积分子调控机制对于育种改良和畜... 【背景】脂肪组织分为皮肤下的皮下脂肪组织(subcutaneous adipose tissue,SAT)和腹部内器官周围的内脏脂肪组织(visceral adipose tissue,VAT),皮下脂肪作为影响肉类美味与否的重要因素,探究皮下脂肪沉积分子调控机制对于育种改良和畜牧业的发展至关重要。Krüppel-like factors 12 (KLF12)是一个进化保守的转录因子,可以在多种细胞类型中表达并控制着广泛的细胞过程。【目的】研究获得山羊KLF12的分子特征并进行生物信息学分析,同时明确KLF12在山羊组织和细胞中的表达模式以及干扰KLF12对山羊皮下脂肪细胞分化的调控作用,为进一步研究KLF12在脂肪沉积过程中的潜在作用提供理论依据。【方法】利用逆转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法克隆山羊KLF12完整编码序列(coding sequence,CDS)区,使用在线生物信息学分析软件对山羊KLF12核苷酸序列和氨基酸序列进行分析。利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)技术检测KLF12在山羊心脏、肝脏、腹部脂肪、皮下脂肪、臂三头肌、背最长肌等14个组织中的表达水平,以及诱导分化不同时间段KLF12在皮下前体脂肪细胞中的表达水平。随后,试验通过化学合成山羊KLF12小干扰RNA(si-KLF12),使用Lipofectamine RNAiMAX转染试剂将山羊si-KLF12序列转染到体外培养的山羊皮下前体脂肪细胞中。使用100μmol·L-1油酸导液诱导脂肪细胞分化。利用油红O以及Bodipy染色方法和qRT-PCR技术分别从形态学以及分子生物学的角度阐明干扰KLF12对皮下前体脂肪细胞脂滴积聚和脂肪分化标志基因mRNA表达水平的影响。【结果】试验成功获得包含开放阅读框(open reading frame,ORF)(1 209 bp)的山羊KLF12(1 315 bp,编码402个氨基酸)。亚细胞定位结果显示KLF12主要位于细胞核,此外,KLF12无跨膜结构域和信号肽,且在317—341、347—371及377—399氨基酸处存在3个典型的锌指结构域(ZnF;2H2) 展开更多
关键词 山羊 klf12 分子特征 干扰 皮下脂肪细胞
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锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中胰岛素样生长因子结合蛋白-1表达 被引量：2
5
作者 金晓艳 蒋玥 +3 位作者 山惠枝 张慧 颜桂军 孙海翔 《生殖医学杂志》 CAS 2014年第5期393-400,共8页
目的人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内... 目的人子宫内膜间质细胞蜕膜化标志蛋白胰岛素样生长因子结合蛋白-1(insulin-like growth factor binding protein-1,IGFBP-1)参与调控月经周期、排卵、蜕膜化、胚胎种植以及胎儿生长等生理过程,本研究旨在探索锌指蛋白KLF12对人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1表达的影响。方法制备Ad-Flag-KLF12重组腺病毒,通过荧光定量聚合酶链式反应(PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)结合重组腺病毒介导的KLF12过表达实验,阐述人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中KLF12对IGFBP-1表达调控作用。结果成功获得滴度为2×1011ifu/ml的重组KLF12腺病毒,该腺病毒可在人子宫内膜间质细胞中高表达Flag-KLF12融合蛋白;体外分离培养的人子宫内膜间质细胞经8-Br-cAMP和醋酸甲羟孕酮(medroxy progesterone acetate,MPA)联合诱导蜕膜化后,KLF12的mRNA表达随着诱导时间延长逐渐降低,72h降低最明显,较未刺激降低约70%;过表达KLF12显著抑制8-Br-cAMP和MPA诱导的人子宫内膜间质细胞中IGFBP-1mRNA的表达,并以时间依赖的方式明显抑制IGFBP-1的分泌(P<0.01);过表达KLF12明显抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1启动子转录活性。结论锌指蛋白KLF12抑制人子宫内膜间质细胞体外蜕膜化过程中IGFBP-1的表达与分泌。 展开更多
关键词 klf12 胰岛素样生长因子结合蛋白-1 子宫内膜间质细胞 蜕膜化
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结肠癌中miR-144、KLF12 mRNA的表达及临床意义 被引量：1
6
作者 孙公平 段鹤 +1 位作者 李晓霞 张德巍 《解剖科学进展》 2020年第2期132-135,139,共5页
目的研究结肠癌中miR-144与Krüppel样因子12(KLF12)的表达,并探讨二者表达的相关性及其临床意义。方法通过Oncomine公共数据库分析结直肠癌中KLF12基因mRNA的表达,通过UALCAN、GEPIA公共数据库分析结肠癌中KLF12基因mRNA的表达、通... 目的研究结肠癌中miR-144与Krüppel样因子12(KLF12)的表达,并探讨二者表达的相关性及其临床意义。方法通过Oncomine公共数据库分析结直肠癌中KLF12基因mRNA的表达,通过UALCAN、GEPIA公共数据库分析结肠癌中KLF12基因mRNA的表达、通过GEPIA公共数据库分析KLF12表达与肿瘤病理分期的关系以及KLF12表达与患者生存期的关系。通过OncomiR公共数据库分析miR-144在结肠癌中的表达以及miR-144表达与患者生存期的关系。通过在线预测工具(TargetscanHuman 7.2,miRDB)预测KLF12是否为miR-144的靶基因。结果结肠癌中KLF12 mRNA表达水平下降,与结直肠癌的分期显著正相关,与无病生存率(Disease Free Survival,DFS)显著负相关。miR-144在结肠癌中表达水平升高,在生存组患者表达水平升高。在KLF12基因的3’UTR区域,有3处miR-144的结合位点。结论miR-144可能通过影响KLF12的表达参与直肠癌的发生、发展。 展开更多
关键词 miR-144 klf12 结肠癌
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miR-144在胃癌细胞系AGS中的表达及与KLF12表达相关性
7
作者 郭广洋 矫健 +1 位作者 高明伟 王宏 《解剖科学进展》 2020年第1期90-93,共4页
目的研究miR-144在胃癌细胞系AGS中的表达及与KLF12表达的相关性。方法应用RPMI1640培养液培养人胃癌细胞系AGS和正常胃上皮细胞系GES-1,应用qRT-PCR法检测两种细胞系中miR-144的表达,qRT-PCR和Western blot法检测KLF12的表达;在AGS细... 目的研究miR-144在胃癌细胞系AGS中的表达及与KLF12表达的相关性。方法应用RPMI1640培养液培养人胃癌细胞系AGS和正常胃上皮细胞系GES-1,应用qRT-PCR法检测两种细胞系中miR-144的表达,qRT-PCR和Western blot法检测KLF12的表达;在AGS细胞系中分别转染miR-144模拟物和miR-144抑制物,qRT-PCR法检测miR-144的表达,qRT-PCR和Westernblot法检测KLF12的表达。通过在线预测工具(TargetscanHuman 7.2,micro RNA.org,miRDB)预测KLF12是否为miR-144的靶基因。结果miR-144在AGS细胞系表达水平低于GES-1细胞系,而KLF12在AGS细胞系表达水平高于GES-1细胞系。AGS细胞miR-144模拟物组,miR-144的表达水平明显升高,KLF12则下降;miR-144抑制剂组中,miR-144的表达水平明显降低,而KLF12则升高。在线预测网站预测结果显示,在KLF12基因的3’UTR区域,有三处miR-144的结合位点。结论miR-144在胃癌AGS细胞系的表达与KLF12的表达呈负相关,miR-144可能通过作用于KLF12的3’UTR区域影响其表达。 展开更多
关键词 miR-144 klf12 胃癌细胞系AGS
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KLF12在宫颈癌中的表达及其调控IL-6/STAT3通路影响宫颈癌细胞增殖和凋亡的机制研究 被引量：8
8
作者 包克勇 陶晓玉 +2 位作者 张雪 张莉 王东 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第16期1979-1983,共5页
目的:探讨Krüpple样转录因子12(KLF12)在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞增殖、凋亡及IL-6/STAT3信号通路的影响。方法:Western blot检测宫颈癌组织及宫颈癌C33A、HeLa和SiHa细胞KLF12表达。将KLF12特异性siRNA(siKLF12)转染至C33A细... 目的:探讨Krüpple样转录因子12(KLF12)在宫颈癌中的表达及对宫颈癌细胞增殖、凋亡及IL-6/STAT3信号通路的影响。方法:Western blot检测宫颈癌组织及宫颈癌C33A、HeLa和SiHa细胞KLF12表达。将KLF12特异性siRNA(siKLF12)转染至C33A细胞,同时转染阴性对照(si-NC),Western blot检测转染后细胞KLF12表达,CCK-8法检测si-KLF12转染C33A细胞24~72 h细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测5 mg/ml重组人IL-6(RhIL-6)处理的转染si-KLF12的C33A细胞中STAT3、p-STAT3、CyclinD1、Bcl-2和Bax表达。结果:宫颈癌组织及细胞中KLF12表达明显升高(P<0.05)。与对照组相比,转染KLF12 siRNA的C33A细胞KLF12表达、细胞增殖能力明显降低,细胞凋亡率明显升高(P<0.05)。与si-NC组相比,si-KLF12组p-STAT3、CyclinD1和Bcl-2表达均明显降低,Bax表达明显升高(P<0.05),si-KLF12和RhIL-6处理C33A细胞可明显减弱si-KLF12对p-STAT3、CyclinD1和Bcl-2表达的影响。结论:KLF12在宫颈癌中表达升高,抑制其表达可降低细胞增殖能力,促进细胞凋亡,机制可能与调控IL-6/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 klf12基因 IL-6/STAT3通路 凋亡
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宫颈癌组织中KLF12、STAT3的表达及其与临床病理特征和预后的相关性
9
作者 何永亮 章培 +4 位作者 吴宁 蒋炳林 成永莲 欧阳海英 涂媛 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第7期1305-1310,共6页
目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化... 目的:分析宫颈癌中Krüpple样转录因子12(KLF12),信号转导和转录激活因子3(STAT3)的表达,并探讨其与临床病理特征和预后的相关性。方法:收集2017年07月至2020年07月收治于本院的82例宫颈癌患者活检及手术宫颈癌标本。采用免疫组化法检测患者宫颈癌组织及宫颈癌KLF12、STAT3表达情况。通过χ^(2)检验分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系。采用多因素Cox回归分析宫颈癌患者预后的相关因素。绘制Kaplan-Meier曲线分析KLF12、STAT3表达与宫颈癌患者3年生存率的关系。结果:宫颈癌组织KLF12阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05),STAT3阳性表达率高于癌旁组织(P<0.05)。不同年龄、产次、月经状态、肿瘤直径、组织学分类、浸润深度患者宫颈癌组织中KLF12、STAT3表达差异无统计学意义(P>0.05)。FIGO分期Ⅱ期、低分化、有淋巴结转移的宫颈癌患者组织中KLF12、STAT3阳性表达率较高(P<0.05)。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期Ⅱ期、KLF12、STAT3阳性表达均是宫颈癌患者3年内死亡的独立危险因素(P<0.05)。Kaplan-Meier曲线结果显示,KLF12阳性表达患者3年生存率66.66%(28/42)低于KLF12阴性表达患者90.00%(36/40)(P<0.05),STAT3阳性表达患者3年生存率70.49%(43/61)低于STAT3阴性表达患者100%(21/21)(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中KLF12、STAT3阳性表达升高,两者异常表达与FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关,可作为用于评估预后的生物标志物。 展开更多
关键词 宫颈癌 klf12基因 信号转导和转录激活因子3 临床病理特征 预后
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KLF12蛋白在NSCLC患者表达及对PD-1与配体的影响 被引量：1
10
作者 卡哈尔江·阿不都外力 展翼翼 刘春玲 《标记免疫分析与临床》 CAS 2020年第6期983-988,共6页
目的研究Krüppel样转录因子12(KLF12蛋白)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中表达情况与程序性死亡受体1(PD-1)及程序性死亡受体配体1(PD-L1)的关系。方法 114例NSCLC患者的病灶标本作为实验组(n=114),另于手术时取患者癌旁的正常组织作... 目的研究Krüppel样转录因子12(KLF12蛋白)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者中表达情况与程序性死亡受体1(PD-1)及程序性死亡受体配体1(PD-L1)的关系。方法 114例NSCLC患者的病灶标本作为实验组(n=114),另于手术时取患者癌旁的正常组织作为对照组(n=114)。通过免疫组化染色,观察两组KLF12蛋白、PD-1及PD-L1表达情况。采用Spearman分析法分析KLF12蛋白与PD-1及PD-L1关系。采用Logistic回归分析分析NSCLC患者中KLF12蛋白表达阳性的危险因素。结果实验组免疫组化染色后PD-1阳性率与PD-L1阳性率明显分别高于对照组(P<0.05)。实验组KLF12蛋白阳性率明显高于对照组(P<0.05)。NSCLC患者PD-1、PD-L1与KLF12蛋白相关性较高,均呈正相关(P<0.05)。有淋巴结转移患者KLF12蛋白阳性率高于无淋巴结转移患者(P<0.05);PD-1表达阳性患者KLF12蛋白阳性率与PD-L1表达阳性患者KLF12蛋白阳性率分别高于PD-1阴性患者、PD-L1阴性患者(P<0.05)。Logistic回归分析显示,NSCLC患者KLF12蛋白表达阳性与伴淋巴结转移、PD-1及PD-L1表达阳性有关(P<0.05)。结论 NSCLC患者病灶组织中KLF12蛋白、PD-1及PD-L1均处于高表达状态。且KLF12蛋白的高表达与PD-1及PD-L1阳性密切相关。 展开更多
关键词 klf12蛋白 NSCLC PD-1 配体
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